專利名稱：豬胎素的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于保健品生產(chǎn)方法領(lǐng)域，涉及一種豬胎素的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
胎素是來(lái)源于動(dòng)物胚胎、胎盤的一類復(fù)合活性成分。胎素含有豐富的核酸、多肽、蛋白成分，具有健腦、提高免疫、養(yǎng)顏美容的功效。
目前國(guó)內(nèi)外保健食品市場(chǎng)上常見的是羊胎素保健食品。由于羊與人類的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，羊胎提取物有效成分不易被人體充分利用。同時(shí)國(guó)內(nèi)羊群農(nóng)牧區(qū)主要集中在寧夏、青海、甘肅、內(nèi)蒙等西北地區(qū)，每年的屠宰季節(jié)集中在秋冬，導(dǎo)致原料供應(yīng)受到季節(jié)、交通等因素的嚴(yán)重干擾，胚胎質(zhì)量難以保障。和國(guó)內(nèi)已經(jīng)規(guī)?；?、規(guī)范化的養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)比較起來(lái)，國(guó)內(nèi)羊群放牧區(qū)大多數(shù)仍然保持著自然放養(yǎng)的狀態(tài)，缺乏嚴(yán)格的檢驗(yàn)檢疫和繁殖控制，讓人無(wú)法放心羊胎的質(zhì)量。
在動(dòng)物胚胎中，豬胚胎功效成分與人類高度同源，不易發(fā)生排斥反應(yīng)。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)豬胚胎中刺激上皮細(xì)胞增殖和激活淋巴細(xì)胞的活性成分較羊胚胎更豐富。一頭母豬一次懷孕可獲10～12頭豬胚胎，一年可懷孕兩次。普遍而言，母豬的孕后流產(chǎn)率高達(dá)20％～40％。因此結(jié)合目前遍布國(guó)內(nèi)的高度發(fā)達(dá)的養(yǎng)豬業(yè)，以及配套的嚴(yán)格檢驗(yàn)檢疫措施，一年四季都可穩(wěn)定獲得品質(zhì)高度專一而成本低廉的胚胎原料來(lái)源。目前國(guó)內(nèi)保健食品市場(chǎng)上尚未見以豬胚胎為主要原料開發(fā)的保健食品，豬胎素的生產(chǎn)方法也未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種高效率的豬胎素生產(chǎn)工藝。發(fā)明人采用現(xiàn)代生化技術(shù)，在充分保護(hù)活性成分的前提下，從豬胎中提取并濃縮了其有效成分，制成了原料粉，完成了本發(fā)明。
本發(fā)明公開的豬胎素是選用豬胚胎、豬胎盤為原料，經(jīng)破碎、勻漿、冷凍干燥、超細(xì)粉碎步驟獲得的活性組分提取物，含有蛋白質(zhì)、卵磷脂、激素、核酸等成分。
本發(fā)明提供了一種豬胎素的生產(chǎn)方法，它包括如下步驟(1)將豬胚胎和/或胎盤清洗、破碎；(2)加入保護(hù)劑，勻漿；(3)真空冷凍干燥；(4)超細(xì)粉碎。
所述方法詳述如下(1)收集新鮮豬胚胎及胎盤，用純凈水洗滌干凈，用打漿機(jī)攪拌破碎，使呈粥樣流動(dòng)狀，過(guò)60目篩網(wǎng)。
(2)在上述物料中添加保護(hù)劑后，用高壓勻漿機(jī)充分勻漿，溫度控制在0℃～4℃。
(3)將上述物料進(jìn)行冷凍干燥，凍干后樣品水分含量不高于3％。
(4)將上述物料送入低溫研磨機(jī)內(nèi)研磨，溫度控制在0℃～4℃，細(xì)度達(dá)到100目～400目。
本發(fā)明中保護(hù)劑選自抗氧化劑食品添加劑、食品乳化劑添加劑、凍干保護(hù)劑中的一種或多種。
本發(fā)明中抗氧化劑食品添加劑的加入按重量計(jì)用量為0.001％～0.04％?？寡趸瘎┦称诽砑觿┻x自丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、沒食子酸丙酯(PG)、茶多酚(維多粉)、植酸(肌醇六磷酸)植酸鈉、4-己基間苯二酚、甘草抗氧物、抗壞血酸鈣、硫代二丙酸二月桂酯、腦磷脂、D-異抗壞血酸鈉、抗壞血酸棕櫚酸酯、特丁基對(duì)苯二酚TBHQ、竹葉提取物中的一種或多種。
本發(fā)明中凍干保護(hù)劑的加入按重量計(jì)用量為0.001％～10％。凍干保護(hù)劑選自脂酸甘油酯、海藻酸鈉、吐溫-80、蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麥芽糖、甘油、L-絲氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸、肌氨酸、磷酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽中的一種或多種。
本發(fā)明在步驟(1)破碎和/或步驟(2)勻漿過(guò)程中添加碎冰效果更好。其中碎冰選自由純凈水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、醋酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液制成的碎冰中的一種或多種。優(yōu)選純凈水制成的碎冰。
生產(chǎn)出的豬胎素產(chǎn)品，按規(guī)格包裝后，進(jìn)行射線滅菌。
本發(fā)明采用低溫高壓勻漿法破碎細(xì)胞，高壓可將粥狀胚胎組織樣品充分破碎，使其流動(dòng)性大為改善。勻漿設(shè)備局部低溫(0℃～4℃)并且在高壓勻漿前添加保護(hù)劑，實(shí)現(xiàn)最大限度釋放和保護(hù)豬胚胎組織中的有效成分。勻漿前向樣品添加保護(hù)劑，則活性保留達(dá)到85％～92％，比不添加保護(hù)劑活性平均提高40％以上。該方法擯棄了周期長(zhǎng)、成本高的反復(fù)凍融法和液氮冷凍設(shè)備的使用。
本發(fā)明提供的工藝能顯著提高豬胚胎有效成分的提取效率，同時(shí)有效保障各種營(yíng)養(yǎng)因子活性。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說(shuō)明實(shí)施例1取新鮮豬胚胎(包括胎盤)，純凈水洗滌干凈后，用電動(dòng)攪拌機(jī)將胚胎及胎盤攪碎成糊(粥)狀。將樣品過(guò)60目篩網(wǎng)，收集濾過(guò)樣品。添加抗氧化劑(茶多酚(維多粉)0.02％、特丁基對(duì)苯二酚TBHQ0.01％)和凍干保護(hù)劑(海藻酸鈉0.5％、吐溫-80 0.5％、甘露醇4％、丙氨酸1％、甘氨酸1.5％)后進(jìn)行低溫高壓勻漿。勻漿條件為壓力40Kg/cm2，處理速度40L/hr，勻漿體積控制在每次1L，勻漿時(shí)間為5分鐘(視勻漿流速、樣品體積而定)，溫度控制在0℃。將勻漿后樣品分裝冷凍盤，樣品高度不超過(guò)5cm，置真空冷凍干燥器內(nèi)凍干。凍干條件為預(yù)冷-50℃，時(shí)間1小時(shí)；抽真空，真空度小于0.5mbar，維持30分鐘。保持冷凝器-50℃，將隔板溫度在30分鐘內(nèi)梯度上升至-20℃，連續(xù)凍干10小時(shí)，此后將隔板溫度在30分鐘內(nèi)梯度上升至0℃，繼續(xù)凍干10小時(shí)，最后將隔板溫度在30分鐘內(nèi)梯度上升至5℃，繼續(xù)凍干10小時(shí)。本技術(shù)措施可取保凍干后樣品水分小于3％。將樣品從凍干機(jī)中取出，送入低溫研磨機(jī)內(nèi)研磨，溫度控制0℃，細(xì)度達(dá)到100目～400目。
此方案獲得豬胎素得率為15％。
實(shí)施例2取新鮮豬胚胎(包括胎盤)，純凈水洗滌干凈后，添加純凈水制成的碎冰，用電動(dòng)攪拌機(jī)將胚胎及胎盤攪碎成糊(粥)狀。將樣品過(guò)60目篩網(wǎng)，收集濾過(guò)樣品。添加抗氧化劑(茶多酚(維多粉)0.02％、特丁基對(duì)苯二酚TBHQ 0.005％)和凍干保護(hù)劑(海藻酸鈉0.1％、吐溫-80 0.01％、甘露醇2％、丙氨酸2％、甘氨酸1％)，添加檸檬酸鹽緩沖液制成的碎冰，進(jìn)行低溫高壓勻漿。勻漿條件為壓力60Kg/cm2，處理速度60L/hr，勻漿體積控制在每次5L，勻漿時(shí)間為10分鐘(視勻漿流速、樣品體積而定)，溫度控制在4℃。將勻漿后樣品分裝冷凍盤，樣品高度不超過(guò)5cm，置真空冷凍干燥器內(nèi)凍干。凍干條件為預(yù)冷-80℃，時(shí)間3小時(shí)；抽真空，真空度小于0.5mbar，維持60分鐘。保持冷凝器-50℃，將隔板溫度在60分鐘內(nèi)梯度上升至-10℃，連續(xù)凍干36小時(shí)，此后將隔板溫度在60分鐘內(nèi)梯度上升至4℃，繼續(xù)凍干6小時(shí)。本技術(shù)措施可取保凍干后樣品水分小于3％。將樣品從凍干機(jī)中取出，送入低溫研磨機(jī)內(nèi)研磨，溫度控制在4℃，細(xì)度達(dá)到100目～400目。
此方案獲得豬胎素得率為20％。
實(shí)施例3將常規(guī)動(dòng)物胚胎凍融工藝與本發(fā)明工藝進(jìn)行1kg豬胚胎生產(chǎn)，進(jìn)行有效成分回收率和活性比較。豬胎素活性按淋巴細(xì)胞玫瑰花結(jié)活性進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)方法如下按常規(guī)方法用淋巴分離液分離健康人外周血單核細(xì)胞，用1％臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞活性(應(yīng)＞95％)并計(jì)數(shù)細(xì)胞。用小牛血清調(diào)整細(xì)胞數(shù)至2×106/mL。各取細(xì)胞液200μL入試管，分為凍融對(duì)照組及勻漿組，分別加入樣品至終濃度為(1×10-2mg/L)(樣品用細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋，并過(guò)濾除菌)。37℃水浴90分鐘；用生理鹽水洗滌綿羊紅細(xì)胞，將細(xì)胞數(shù)調(diào)整至2×108/Ml；在每支試管中加入綿羊紅細(xì)胞200μL，在4℃放置2h～3h；涂片、染色、于高倍鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞中形成玫瑰花結(jié)的細(xì)胞數(shù)(結(jié)合3個(gè)及3個(gè)以上綿羊紅細(xì)胞)，計(jì)算玫瑰花形成細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。
表1凍融工藝與本發(fā)明工藝有效成分回收率和活性比較結(jié)果豬胚胎原料(單位g)凍干成品(單位g) 得率 E-玫瑰結(jié)形成率凍融工藝1000 107 10.7％ 48％本發(fā)明工藝 1000 185 18.5％ 52％實(shí)施例4對(duì)不同勻漿條件及不同溫度下制備的豬胎素成品進(jìn)行活性比較。
活性檢測(cè)方法如實(shí)施例2。
表2不同勻漿條件、不同溫度下制備的豬胎素活性比較結(jié)果工藝條件 常溫勻漿常溫勻漿+保護(hù)劑低溫勻漿低溫勻漿+保護(hù)劑E-玫瑰節(jié)形成率18％31％ 45％55％
權(quán)利要求
1.一種豬胎素的生產(chǎn)方法，它包括如下步驟(1)將豬胚胎和/或胎盤清洗、破碎；(2)加入保護(hù)劑，勻漿；(3)真空冷凍干燥；(4)超細(xì)粉碎。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中步驟(1)，使物料破碎至呈粥樣流動(dòng)狀，過(guò)60目篩網(wǎng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中保護(hù)劑選自抗氧化劑食品添加劑、食品乳化劑添加劑、凍干保護(hù)劑中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其中抗氧化劑食品添加劑選自丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯、沒食子酸丙酯、茶多酚、植酸、植酸鈉、4-己基間苯二酚、甘草抗氧物、抗壞血酸鈣、硫代二丙酸二月桂酯、腦磷脂、D-異抗壞血酸鈉、抗壞血酸棕櫚酸酯、特丁基對(duì)苯二酚、竹葉提取物中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其中凍干保護(hù)劑選自脂酸甘油酯、海藻酸鈉、吐溫-80、蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麥芽糖、甘油、L-絲氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸、肌氨酸、磷酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽中的一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中步驟(2)，采用高壓勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿，溫度控制在0℃～4℃。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，在步驟(1)破碎和/或步驟(2)勻漿過(guò)程中添加碎冰。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述方法，其中碎冰選自由純凈水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、醋酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液制成的碎冰中的一種或多種。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中步驟(3)，真空冷凍干燥后樣品含水量不高于3％。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中步驟(4)，在低溫研磨機(jī)內(nèi)研磨，溫度控制在0℃～4℃，細(xì)度達(dá)到100目～400目。
全文摘要
本發(fā)明涉及豬胎素的生產(chǎn)及其保健食品的制備方法。本發(fā)明工藝過(guò)程包括將經(jīng)過(guò)精選的豬胚胎清洗、破碎，隨后加入保護(hù)劑進(jìn)行低溫高壓勻漿處理，經(jīng)離心處理后進(jìn)行真空冷凍干燥。然后進(jìn)行超細(xì)粉碎，獲得成品豬胎素。經(jīng)本工藝低溫高壓勻漿和低溫冷凍干燥技術(shù)加工的豬胚胎能保持其全部營(yíng)養(yǎng)成分。
文檔編號(hào)A61K35/50GK1686177SQ20051001154
公開日2005年10月26日 申請(qǐng)日期2005年4月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月8日
發(fā)明者黃明 申請(qǐng)人:廣州拜迪生物醫(yī)藥有限公司