專利名稱：一種抗癌藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種抗癌藥物組合物，屬于藥物技術領域。
背景技術：
實體腫瘤的治療主要包括手術、放療及化療等方法。在所用的各種化療藥物中，亞硝脲類抗癌藥物的作用效果較為明顯，已廣泛應用于多種惡性腫瘤。然而，進一步研究發(fā)現(xiàn)，許多腫瘤細胞內的DNA修復功能在治療之后明顯增加。后者常導致腫瘤細胞對亞硝脲類抗癌藥物的耐受性的增強，其結果是治療失敗。
最近發(fā)現(xiàn)，滅活或抑制細胞內的DNA修復蛋白能夠增強部分腫瘤細胞對化療的敏感性，參見多蘭等“O6-芐基鳥嘌呤類似物對人腫瘤細胞對烷化劑的細胞毒敏感性的作用”《癌癥研究》51期3367-3372頁(1991年)(Dolan et al.，Cancer Res.，51，3367-3372，1991)。然而，腫瘤間質中的血管、結締組織、基質蛋白、纖微蛋白及膠原蛋白等不僅為腫瘤細胞的生長提供了支架及必不可少的營養(yǎng)物質，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內的滲透和擴散，參見尼提等“細胞外間質的狀況對實體腫瘤內藥物運轉的影響”《癌癥研究》60期2497-503頁(2000年)(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。由于實體腫瘤過度膨脹性增生，其間質壓力、組織彈性壓力、流體壓力及間質的粘稠度均較其周圍正常組織為高，因此，常規(guī)化療，難于腫瘤局部形成有效藥物濃度，單純提高給藥劑量又受到全身反應的限制，參見孔慶忠等“瘤內放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁(1998年)(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)。
除此之外，低劑量的抗癌藥物治療不僅能夠增加癌細胞的藥物耐受性，而且還可促進其侵潤性生長”。參見梁等“抗癌藥物脈沖篩選后增加了人肺癌細胞的藥物耐受性及體外侵潤能力并伴有基因表達的改變”《國際癌癥雜志》111期484-93頁(2004年)(Liang Y，etal.，Int J Cancer.2004；111(4)484-93)。
由于決定治療效果的主要因素是腫瘤局部的藥物濃度以及腫瘤細胞對藥物的敏感程度。而腫瘤間質中的血管、結締組織、基質蛋白、纖微蛋白及膠原蛋白等不僅為腫瘤細胞的生長提供了支架及必不可少的營養(yǎng)物質，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內的滲透和擴散。

發(fā)明內容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種抗癌藥物組合物。
本發(fā)明抗癌藥物組合物，包括抗癌有效成分和藥用輔料，抗癌有效成分為(A)谷胱甘肽合成酶抑制劑 0.00-50％(B)氧化氮合成酶抑制劑 0.00-50％(C)亞硝脲類抗癌藥物及其類似物 0.00-50％。
均為重量百分比，其中有效成分(A)和(B)不同時為零。
谷胱甘肽合成酶抑制劑選自偏釩酸銨、馬來酸乙二脂、鎘離子、三價有機砷、谷胱甘肽二硫化物、二硫化四甲基秋蘭姆、氨基三唑(Aminotriazole，AT)、丁基硫堇硫肟[DL-Buthionine-(S，R)-sulfoximine，簡稱BSO]、利尿酸(EA)、姜黃素、馬勃菌酸(cavaticacid)、S-己基谷胱甘肽、新鬼臼霉素(GL331)、N-[2-(二甲基氨基)乙基]吖啶-4-羧酰胺(N-[2-(dimethylamino)ethyl]acridine-4-carboxamide，DACA，XR5000)、6-[2-(二甲基氨基)乙胺基]-3-羥基-7H-茚酚[2，1-c]醌醇-7-二鹽酸鹽(6-[2-(dimethylamino)ethylamino]-3-hydroxy-7H-indeno[2，1-c]quinolin-7-one dihydrochloride，TAS-103)、雙-二氧代哌嗪丙烷(bis-dioxopiperazine propane，ICRF 159)、六環(huán)核喜樹堿(DX-8951f，exatecan mesylate)、四并苯羧酰胺(TAN-1518)等。以上谷胱甘肽合成酶抑制劑可單選或多選。
氧化氮合成酶抑制劑選自血紅蛋白及其相關產(chǎn)物、7-氨基-吲唑、刀豆氨酸，氨基胍、S-甲基異硫脲、S-甲基異硫脲硫酸鹽、S-2-氨基-5-(2-氨基咪唑-1-基)戊酸、L-N5-(1-亞氨基乙基)鳥氨酸、N-單甲基-L-精氨酸乙酸、N-氨基-精氨酸甲酯、N-ω-氨基-精氨酸、氨基-精氨酸、NG-氨基-L-精氨酸、L-氨基-精氨酸-p-氨基酰苯胺、NG-單甲基-L-精氨酸和NG-甲基-L-精氨酸。以上氧化氮合成酶抑制劑可單選或多選。
亞硝脲類藥物選自，但不限于，阿雌莫司汀(Alestramustine)、阿莫司汀(Atrimustine)、氨莫司汀(Ambamustine)、尼莫司汀(ACNU，Nimustine)、苯達莫司汀(Bendamustine)、二硫莫司汀(Ditiomustine)、波呋莫司汀(Bofumustine)、卡莫司汀(卡氮芥、BCNU、carmustine)、依莫司汀(Elmustine)、依考莫司汀(Ecomustine)、加莫司汀(Galamustine，GCNU)、福莫司汀(Fotemustine)、雌莫司汀(Estramustine)、合莫司汀(hemustine，heCNU)、奈莫司汀(Pentamustine，Neptamustine)、甘露莫司汀(Mannomustine，MCNU)、洛莫司汀(lomustine，CCNU，環(huán)己亞硝脲，羅氮芥)、甲基洛莫司汀(methyl-CCNU)、司莫司汀(Semustine、甲環(huán)亞硝脲、Me-CCNU)、雷莫司汀(Ranimustine)、潑尼莫司汀(Prednimustine)、烏拉莫司汀(Uramustine，Uracil Mustard)、薩莫司汀(Sarmustine)、?；悄就?Tauromustine)、他莫司汀(Tallimustine)、螺莫司汀(Spiromustine)、鏈佐星(streptozotocin，STZ)、米妥唑胺(mitozolomide，MTZ)、伊力替康、替莫唑胺(temozolomide，TMZ)、5-二甲基三氮烯基咪唑-4-草酰胺(5-(dimethyltriazeno)imidazole-4-caroxamide，DITC)、3-氨基苯酰胺(3-aminobenzimide，3-AB)及6-氨基煙酰胺(6-aminonicotinamide，6-AN)等。以上亞硝脲類藥物還包括它們的鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽及馬來酸鹽等。
以上亞硝脲類藥物及其鹽可單選或多選。但鏈佐星、尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、伊力替康、米妥唑胺、替莫唑胺、5-二甲基三氮烯基咪唑-4-草酰胺、3-氨基苯酰胺或6-氨基煙酰胺為優(yōu)選。
以上亞硝脲類藥物還包括它們的鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽及馬來酸鹽等，亞硝脲類藥物及其鹽可單選或多選。
亞硝脲類抗癌藥物在組合物中的含量可從0.01％-99.99％，以1％-50％為佳，以2％-30％為最佳，而氧化氮合成酶抑制劑及谷胱甘肽合成酶抑制劑在組合物中所占的比例也因具體情況而定，均可從0.01％-99.99％，以1％-50％為佳，以5％-30％為最佳。以上均為重量百分比。
藥用輔料包括下列之一或其組合(1)生物相容性多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物及其混合物或共聚物，(2)水溶性低分子化合物，或/和(3)用于實現(xiàn)針劑和緩釋劑等藥物劑型的合適的添加劑及賦型劑。
上述生物可降解的多聚物包括天然的和/或合成的多聚物。合成的多聚物如，但不限于，聚酐類、聚羥基酸、聚酯(polyesters)、聚酰胺(polyamides)、聚原酸酯(polyorthoesters)、聚磷腈(polyphosphazenes)、對羧苯基丙烷(p-CPP)、葵二酸(sebacic acid)、聚苯丙生(對羧苯基丙烷與葵二酸的共聚物)等；天然的多聚物如，但不限于，蛋白質及多糖，包括透明質酸、膠原蛋白、明膠、白蛋白等。
上述聚酐類可選用，但不限于，芳香聚酐、脂肪族聚酐；其中芳香聚酐將解較慢，熔點高，有機溶劑中溶解度低，然而，芳香聚酐與脂肪族聚酐的共聚物卻較為理想(美國專利4757128)。其中的代表物是聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的共聚物)，而對羧苯基丙烷為芳香聚酐，葵二酸則是一個芳香二酸與一個脂肪二酸的共聚物?？蛇x用的其它芳香或脂肪族聚酐的共聚物在其它美國專利中已有詳細描述(US 4857311；4888176；4789724)。
上述聚羥基酸可選用，但不限于，聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的混合物、乙醇酸和羥基羧酸的共聚物(PLGA)；當PLA和PLGA混合時，其含量重量百分比分別為0.1-99.9％和99.9-0.1％。聚乳酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選，以10,000-20000為最優(yōu)選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選，以10,000-20000為最優(yōu)選；以上聚羥基酸可單選或多選。當單選時，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優(yōu)選，共聚物的分子量可為，但不限于，1000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選；以10,000-20000為最優(yōu)選；當多選時，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復合多聚物或共聚物為優(yōu)選，以含不同分子量聚乳酸或葵二酸的復合多聚物或共聚物為最優(yōu)選，如，但不限于，分子量為5000到10000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到20000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為5000到10000的聚乳酸與葵二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與葵二酸混合。所指分子量均為由GPC測得的分子量峰值范圍。
上述生物不可降解的多聚物包括，但不限于有機硅聚合物、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(Ethelene-vinyl acetate copolymer，EVAc)、聚丙烯腈(polyacrylonitriles)，聚氨基甲酸酯(polyurethanes)及聚磷腈(polyphosphazenes)等。組合物可通過直接擴散的方式將有效成分釋放出來。
為調節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明抗癌藥物組合物的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖和鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖及甲殼素等，其中鹽可為但不限于，鉀鹽和鈉鹽等。
本發(fā)明抗癌藥物組合物所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
藥用輔料在《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學技術出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細描述。另外，中國專利(申請?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發(fā)明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料。包括充填劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻止劑。以上藥用輔料有的具有多重作用，因此有的同種物質被列為不同的類別。本發(fā)明抗實體腫瘤組合物可選用的支持物可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質，并不完全根據(jù)其分類或定義來限制組合物的技術特征。
抗癌藥物組合物的有效成分可均勻地包裝于整個藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴散或經(jīng)多聚物降解的方式或如此兩種方式將有效成分釋放。除此之外，抗癌藥物組合物的有效成分也可均勻地包裝于脂質體中，或以現(xiàn)有技術方法制成微球。
本發(fā)明的特點在于所用的藥用輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它藥用輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻止劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑等。
藥用輔料還可為流質，如，但不限于芝麻油、混懸液、蒸餾水、生理沖液、以及半固態(tài)物質，如(但不限于)果凍、糊劑、軟膏等，上述藥用輔料適用于含或不含添加劑的組合物。
本發(fā)明抗癌藥物組合物可制成多種劑型。如，但不限于，針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、緩釋劑、植入劑和植入緩釋劑等；呈各種形狀，如，但不限于，顆粒樣、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀及膜狀。在各種劑型中，以體內緩慢釋放劑為主。上述劑型和形狀適用于含或不含添加劑的組合物。
由于本發(fā)明抗癌藥物組合物可使常規(guī)化療、免疫治療、高熱治療、光化學治療、電療、生物治療、激素治療、磁療、超聲治療、放療及基因治療等方法的作用效果加強。因此在局部緩慢釋放的同時可與上述非手術療法合用，從而使其抗癌效果進一步加強。
當與上述非手術療法合用時，本發(fā)明抗癌藥物組合物可與非手術療法同時應用，也可在非手術療法實施前幾天內應用，其目的在于盡可能增強腫瘤的敏感性。氧化氮合成酶抑制劑谷胱甘肽合成酶抑制劑對亞硝脲類抗癌藥物有增效明顯的作用，從而為根治各種人體及動物原發(fā)和轉移實體腫瘤提供一種更有效的新的方法，具有非常高的臨床應用價值及顯著的經(jīng)濟和社會效益。
給藥途徑本發(fā)明抗癌藥物組合物可經(jīng)各種途徑應用，如經(jīng)脈、動脈、皮下、肌肉、皮內、腔內、瘤內、瘤周等。給藥途徑取決于多種因素，為于腫瘤所在部位獲有效濃度，藥物可經(jīng)其它多種途徑給予，如選擇性地動脈灌注，腔內灌注(intracavitary)，腹腔(intraperitoneal)或胸腔(intrapleural)及椎管內給藥。在多種途徑中，以局部給藥，如以選擇性動脈、瘤內、瘤周注射為主，以瘤內、瘤周或瘤腔緩慢釋放的形式為優(yōu)選，如可選用可種緩釋泵及緩釋膠囊或體內緩釋植入劑。
當抗癌藥物組合物的有效成分為亞硝脲類抗癌藥物增效劑(氧化氮合成酶抑制劑或谷胱甘肽合成酶抑制劑)時，該抗實體腫瘤組合物以局部給藥為主，如以選擇性動脈、瘤內、瘤周注射為主，以瘤內、瘤周或瘤腔緩慢釋放的形式為優(yōu)選。
給藥劑量抗癌藥物的用量取決于很多因素，如，但不限于，腫瘤體積、病人體重、給藥方式、病情進展情況及治療反應。但其原則是能夠降低腫瘤細胞對DNA的修復能力，增加化療等療法的作用效果。氧化氮合成酶抑制劑或谷胱甘肽合成酶抑制劑的有效劑量為0.01-80毫克/公斤體重，以1-50毫克/公斤體重為理想，以2-10毫克/公斤體重為最理想。當局部應用時，其血中濃度維持在較低水平，而瘤內濃度維持在較高水平。
當氧化氮合成酶抑制劑或谷胱甘肽合成酶抑制劑與亞硝脲類抗癌藥物聯(lián)合應用時，二者的重量比為1∶9到9∶1，而亞硝脲類抗癌藥物的有效劑量為0.01-200毫克/公斤體重，以1-30毫克/公斤體重為理想，以2-20毫克/公斤體重為最理想。
本發(fā)明抗癌藥物組合物可以用于制備治療人的各種實體腫瘤，包括起源于大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結腸、直腸的原發(fā)或轉移的癌或肉瘤或癌肉瘤的藥物。
本發(fā)明抗癌藥物組合物也可以用于治療寵物及動物的各種實體腫瘤，當用于治療寵物及動物的各種實體腫瘤時，本發(fā)明抗癌藥物組合物的有效成份最好選用種屬特異性的物質。
本發(fā)明抗癌藥物組合物中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。以上藥用成分可單選或多選，可加入到含或不含添加劑的組合物，其含量因具體需要而定。
本發(fā)明抗癌藥物組合物可通過以下方式應用。
將上述有效成分包裝于藥用輔料中，然后局部應用。該組合物可經(jīng)各種途徑給藥，以局部給藥，如選擇性動脈注射和直接瘤體內注射為佳，其中又以局部緩慢釋放為最佳。當局部應用時，本發(fā)明抗癌藥物組合物可直接置于原發(fā)或轉移的實體腫瘤周圍或瘤體內，也可直接置于原發(fā)或轉移的實體腫瘤全部或部分切除后所形成的腔內。
本發(fā)明抗癌藥物組合物主要成份以生物可容性物質為支持物，故不引起異物反應。支持物體內放置后可降解吸收，故不再手術取出。因在腫瘤局部釋放所含藥物，從而選擇性地提高并延長局部藥物濃度，同時可降低由常規(guī)途徑給藥所造成的全身毒性反應。
抗癌藥物組合物可制成各種形狀，其中有效成份的含量因不同需要而定，可制成各種劑型，呈各種形狀，如，但不限于，顆粒樣、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀及膜狀；可經(jīng)各種途徑給藥，以動脈途徑為佳，腫瘤體內直接放置為最佳。本發(fā)明的最佳劑型為生物可容性、可降解吸收的植入緩釋劑，可因不同臨床需要而制成各種形狀。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，乾燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍粉碎法。其中溶解法可用于微球的制造，抗實體腫瘤組合物也可包裝于脂質體中。
本發(fā)明抗癌藥物組合物制備技術的特點在于將氧化氮合成酶抑制劑或谷胱甘肽合成酶抑制劑與亞硝脲類抗癌藥物單獨或聯(lián)合包裝于藥用輔料中，按照比例將有效成份和藥用輔料溶解，待充份混勻之后干燥。待干燥后立即成形并消毒分裝。
以上氧化氮合成酶抑制劑或谷胱甘肽合成酶抑制劑能夠不同程度的抑制或降低腫瘤細胞DNA修復酶的活性，本發(fā)明的體內外實驗發(fā)現(xiàn)其對亞硝脲類抗癌藥物的明顯增效作用。當二者聯(lián)合局部應用，尤其是局部放置，不僅能夠克服全身給藥帶來的毒性反應，而且解決了腫瘤局部藥物濃度過低以及細胞對藥物的敏感性問題。
試驗一、亞硝脲類抗癌藥物增效劑和亞硝脲類抗癌藥物對腫瘤細胞生長的抑制作用本實驗以肺癌(LH)腫瘤細胞為試驗對象，向體外培養(yǎng)24小時的腫瘤細胞中加入濃度為5mM/ml亞硝脲類抗癌藥物增效劑和5mM/ml的亞硝脲類抗癌藥物(BCNU)，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后檢測對腫瘤細胞生長的抑制作用。抑制效果(％)見表1所示。
表1
注BCNU單獨應用時對肺癌(LH)細胞生長的抑制率為59％。
由上表可以看出，所試亞硝脲類抗癌藥物增效劑對BCNU均有明顯增效作用，其中谷胱甘肽二硫化物、二硫化四甲基秋蘭姆、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、利尿酸、姜黃素、馬勃菌酸、S-己基谷胱甘肽、新鬼臼霉素、N-[2-(二甲基氨基)乙基]吖啶-4-羧酰胺、6-[2-(二甲基氨基)乙胺基]-3-羥基-7H-茚酚[2，1-c]醌醇-7-二鹽酸鹽、雙-二氧代哌嗪丙烷、六環(huán)核喜樹堿、四并苯羧酰胺、7-氨基-吲唑、刀豆氨酸，氨基胍、S-甲基異硫脲、S-甲基異硫脲硫酸鹽、S-2-氨基-5-(2-氨基咪唑-1-基)戊酸、L-N5-(1-亞氨基乙基)鳥氨酸、N-單甲基-L-精氨酸乙酸、N-氨基-精氨酸甲酯、N-ω-氨基-精氨酸、氨基-精氨酸、NG-氨基-L-精氨酸、L-氨基-精氨酸-p-氨基酰苯胺、NG-單甲基-L-精氨酸和NG-甲基-L-精氨酸的作用尤為明顯，在80％以上。
按照同樣方法檢測，用包括CNS-1、C6、9L、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌等)不同腫瘤細胞，對不同亞硝脲類抗癌藥物增效劑和其它亞硝脲類抗癌藥物及其類似物的作用進行了比較后。
試驗二、亞硝脲類抗癌藥物增效劑和亞硝脲類抗癌藥物對腫瘤細胞生長的抑制作用按照試驗一的方法檢測不同亞硝脲類抗癌藥物增效劑對ACNU的增效作用，胰腺癌細胞生長抑制率(％)見表2所示。
表2
試驗三、亞硝脲類抗癌藥物增效劑和亞硝脲類抗癌藥物對腫瘤細胞生長的抑制作用按照試驗一的方法檢測不同亞硝脲類抗癌藥物增效劑對雌莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀和薩莫司汀的增效作用(P＜0.05)，結果表明亞硝脲類抗癌藥物增效劑對亞硝脲類抗癌藥物的增效作用具普遍意義。
試驗四、亞硝脲類抗癌藥物增效劑及亞硝脲類抗癌藥物的體內抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表3)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為丁基硫堇硫肟(BSO)，第3到6組分別為BCNU(卡莫司汀)、ACNU、CCNU及雌莫司汀。第7到10組分別為BSO與BCNU、ACNU、CCNU及雌莫司的聯(lián)合。所有藥物均經(jīng)瘤內注射，劑量為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表3)。
表3
注BSO丁基硫堇硫肟為亞硝脲類抗癌藥物增效劑；而BCNU、ACNU、CCNU及雌莫司汀均為亞硝脲類抗癌藥物。
試驗五、亞硝脲類抗癌藥物增效劑及亞硝脲類抗癌藥物的體內抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表4)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為氨基三唑(AT)，第3到6組分別為STZ(鏈佐星)，甲基洛莫司汀(meCCNU)，TMZ(替莫唑胺)，MTZ(米托唑胺)。第7到10組分別為AT與STZ、CPT-11、TMZ及MTZ的聯(lián)合。所有藥物均經(jīng)瘤內注射，劑量為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表4)。
表4
注氨基三唑(AT)，為亞硝脲類抗癌藥物增效劑；而STZ、meCCNU、TMZ、MTZ均為亞硝脲類抗癌藥物類似物。
試驗六、亞硝脲類抗癌藥物增效劑及亞硝脲類抗癌藥物的體內抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表5)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為氨基-精氨酸(a-AG)，第3到6組分別為STZ(鏈佐星)，甲基洛莫司汀(meCCNU)，TMZ(替莫唑胺)，DITC(5-二甲基三氮烯基咪唑-4-草酰胺)。第7到10組分別為a-AG與STZ、meCCNU、TMZ及DITC的聯(lián)合。所有藥物均經(jīng)瘤內放置，劑量為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表5)。
表5
注氨基-精氨酸(a-AG)為氧化氮合成酶抑制劑，屬亞硝脲類抗癌藥物增效劑；而STZ、meCCNU、TMZ、DITC均為亞硝脲類抗癌藥物類似物。
試驗四到六的結果表明，所用亞硝脲類抗癌藥物增效劑(氧化氮合成酶抑制劑和谷胱甘肽合成酶抑制劑)及各種亞硝脲類抗癌藥物在該濃度時對腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，但二者合用時具有明顯的增效作用。
總之，上述實驗結果也表明，本發(fā)明中的亞硝脲類抗癌藥物增效劑對所列亞硝脲類抗癌藥物的增效作用，且具有普遍意義。因此，本發(fā)明所述的抗癌復合物的有效成分為任意一種(或多種)亞硝脲類抗癌藥物增效劑或是任意一種(或多種)亞硝脲類抗癌藥物增效劑和任意一種(或多種)亞硝脲類抗癌藥物的聯(lián)合。其中亞硝脲類抗癌藥物增效劑包括各種氧化氮合成酶抑制劑和谷胱甘肽合成酶抑制劑。
本發(fā)明加工成抗癌藥物組合物的的制備方法如下1.將稱重的藥用輔料放入容器中，加一定量的有機溶劑溶解均勻，有機溶劑的量不嚴格限定，以充分溶解為宜。
2.加入稱重之抗癌有效成份重新?lián)u勻。抗癌有效成份與藥用輔料的用量比例因具體要求而定。
3.去除有機溶劑。真空干燥或低溫干燥法均可。
4.將干燥后的固體組合物根據(jù)需要制成各種形狀。
5.分裝后射線滅菌(射線劑量因體積而異)備用。也可用其它方法滅菌。
含有以上有效成分的抗癌藥物組合物可制成任意劑型或形狀，但以緩慢釋放劑為優(yōu)選。
具體實施方式
下面通過實施例對本發(fā)明做進一步說明，但不限于此。
實施例1.
將90mg分子量為10000的PLGA(乳酸和乙醇酸的共聚物)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg丁基硫堇硫肟(BSO)，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得含重量百分比10％丁基硫堇硫肟(BSO)的抗癌藥物組合物。該抗癌藥物組合物在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-20天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-40天。均為重量百分比。
實施例2.
如實施例1所述，所不同的是抗癌有效成分為a)重量百分比1-50％的偏釩酸銨、馬來酸乙二脂、鎘離子、三價有機砷、谷胱甘肽二硫化物、二硫化四甲基秋蘭姆、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、利尿酸、姜黃素、馬勃菌酸、S-己基谷胱甘肽、新鬼臼霉素、N-[2-(二甲基氨基)乙基]吖啶-4-羧酰胺、6-[2-(二甲基氨基)乙胺基]-3-羥基-7H-茚酚[2，1-c]醌醇-7-二鹽酸鹽、雙-二氧代哌嗪丙烷、六環(huán)核喜樹堿或四并苯羧酰胺；或者b)重量百分比1-50％的7-氨基-吲唑、刀豆氨酸，氨基胍、S-甲基異硫脲、S-甲基異硫脲硫酸鹽、S-2-氨基-5-(2-氨基咪唑-1-基)戊酸、L-N5-(1-亞氨基乙基)鳥氨酸、N-單甲基-L-精氨酸乙酸、N-氨基-精氨酸甲酯、N-ω-氨基-精氨酸、氨基-精氨酸、NG-氨基-L-精氨酸、L-氨基-精氨酸-p-氨基酰苯胺、NG-單甲基-L-精氨酸或NG-甲基-L-精氨酸。
實施例3.
將8mg藥用輔料(EVAc)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入20mg氨基三唑，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得含重量百分比20％氨基三唑的抗癌藥物組合物。該抗癌藥物組合物在體外生理鹽水中的釋藥時間為14-24天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-35天。
實施例4.
如實施例3所述，所不同的是抗癌有效成分為a)重量百分比1-40％的渥曼青霉素、苯并吡喃、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-吡喃-4-基、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-4H-噻喃-4-基、1-(2-羥基-4-嗎啡酚-4-基-苯基)-橋亞乙基)、激酶抑制劑、香草醛、2-氨基嘌呤、7-乙基-10-羥基喜樹堿、3-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶-[1H]-2-1、苯基丁酸鹽；或者b)重量百分比1-40％的3-氨基苯甲酰胺、苯甲酰胺、3，4-二氫甲氧異喹啉-1(2H)-苯甲酰胺、聚合酶抑制劑、多聚聚合酶抑制劑、氨基取代的2-芳香基苯并咪唑-4-羧酰胺、苯并咪唑-4-羧酰胺、三環(huán)內酰胺硫化氫、三環(huán)苯并咪唑羧酰胺；或者c)重量百分比1-40％的苯并咪唑、1H-三環(huán)苯并咪唑羧酰胺、2-芳香基-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺、2-苯基-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺、2-(4-羥甲基苯基)-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺、2-(3-甲氧苯基)-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺、8-羥基-2-甲基喹唑啉酮或2-(4-羥苯基)苯并咪唑-4-羧酰胺。
實施例5.
將80mg藥用輔料(EVAc)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入10mg渥曼青霉素(WM)和10毫克卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得含重量百分比10％渥曼青霉素和重量百分比10％卡莫司汀的抗癌藥物組合物。該抗癌藥物組合物在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為25-40天。
實施例6.
如實施例5所述，所不同的是抗癌有效成分分別為a)重量百分比10％的卡莫司汀與重量百分比10％的苯并吡喃、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-吡喃-4-基、2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮、6-芳香基-2-嗎啡酚-4-基-4H-噻喃-4-基、1-(2-羥基-4-嗎啡酚-4-基-苯基)-橋亞乙基)、激酶抑制劑、香草醛、2-氨基嘌呤、7-乙基-10-羥基喜樹堿、3-氰基-6-亞肼基甲基-5-(4-吡啶基)吡啶-[1H]-2-1或苯基丁酸鹽的組合；或者b)重量百分比10％的BCNU與重量百分比10％的3-氨基苯甲酰胺、苯甲酰胺、3，4-二氫甲氧異喹啉-1(2H)-苯甲酰胺、聚合酶抑制劑、多聚聚合酶抑制劑、氨基取代的2-芳香基苯并咪唑-4-羧酰胺、苯并咪唑-4-羧酰胺、三環(huán)內酰胺硫化氫或三環(huán)苯并咪唑羧酰胺的組合；或者c)重量百分比10％的卡莫司汀與重量百分比10％的苯并咪唑、1H-三環(huán)苯并咪唑羧酰胺、2-芳香基-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺、2-苯基-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺、2-(4-羥甲基苯基)-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺、2-(3-甲氧苯基)-1H-苯并咪唑-4-羧酰胺、8-羥基-2-甲基喹唑啉酮或2-(4-羥苯基)苯并咪唑-4-羧酰胺的組合。
實施例7.
如實施例5或6所述，所不同的是抗癌有效成分亞硝脲類抗癌藥物(BCNU)分別為阿雌莫司汀、洛莫司汀、卡莫司汀、尼莫司汀、雌莫司汀、薩莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、薩莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、?；悄就　⑺就?、螺莫司汀、鏈佐星、米妥唑胺、替莫唑胺、伊力替康、5-二甲基三氮烯基咪唑-4-草酰胺、3-氨基苯酰胺或6-氨基煙酰胺。
實施例8.
如實施例5所述，所不同的是抗癌有效成分為a)2-30％渥曼青霉素和2-20％尼莫司汀或b)2-30％渥曼青霉素和2-20％洛莫司汀或c)2-30％渥曼青霉素和2-20％司莫司汀或d)2-30％渥曼青霉素和2-20％甲基洛莫司汀或e)2-30％2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮和2-20％卡莫司汀或f)2-30％2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮和2-20％尼莫司汀或g)2-30％2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮和2-20％洛莫司汀或h)2-30％2-(4-嗎琳基)-8-苯基色酮和2-20％司莫司汀或i)2-30％苯并吡喃和2-20％卡莫司汀或j)2-30％苯并吡喃和2-20％尼莫司汀或k)2-30％苯并吡喃和2-20％洛莫司汀或l)2-30％苯并吡喃和2-20％司莫司汀或m)2-30％苯并吡喃和2-20％甲基洛莫司汀或n)2-30％苯并咪唑和2-20％卡莫司汀或o)2-30％苯并咪唑和2-20％尼莫司汀或p)2-30％苯并咪唑和2-20％洛莫司汀或q)2-30％苯并咪唑和2-20％司莫司汀以上均為重量百分比。
實施例9.
如實施例1或5所述，所不同的是所用藥用輔料為下列a)-d)之一a)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)；b)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)；d)10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40的對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)共聚物(聚苯丙生)，均為重量比。
如上所述，本發(fā)明抗癌藥物組合物的制備方法可根據(jù)具體情況加以選擇?？拱┧幬锝M合物可用現(xiàn)有的方法制成各種劑型，因此，以上實施例僅用于說明，而并非局限本發(fā)明的應用。
上述抗癌藥物組合物一方面可放置在腫瘤局部用于人及動物各種實體腫瘤的治療，另一方面可放置在腫瘤局部用作為其它治療如系統(tǒng)化療的增效劑。手術后局部放置該組合物對根治實體腫瘤具有獨特的效果。某些腫瘤生長在人體的關鍵部位(如腦干等處)不能手術去除，局部藥物緩慢釋放該組合物可以取代手術切除。有些惡性腫瘤，手術操作可能促進腫瘤擴散，局部藥物緩慢釋放可能是更科學的選擇。該組合物除單獨應用外，還可與許多治療措施聯(lián)合應用如與放射治療、高熱治療、免疫治療、光療、電療等聯(lián)合應用。局部放置應用該組合物作為增效劑具有獨特的優(yōu)點及很高的臨床應用價值。當該組合物與其它治療措施聯(lián)合應用時，該組合物可同時或先于其它治療措施。
權利要求
1.一種抗癌藥物組合物，包括抗癌有效量的抗癌有效成分和藥用輔料，其特征在于抗癌有效成分為(A)谷胱甘肽合成酶抑制劑 0.00-50％(B)氧化氮合成酶抑制劑0.00-50％(C)亞硝脲類抗癌藥物及其類似物0.00-50％其中有效成分(A)和(B)不同時為零，以上均為重量百分比。
2.根據(jù)權利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于所述(A)組份谷胱甘肽合成酶抑制劑主要選自偏釩酸銨、馬來酸乙二脂、鎘離子、三價有機砷、谷胱甘肽二硫化物、二硫化四甲基秋蘭姆、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、利尿酸、姜黃素、馬勃菌酸、S-己基谷胱甘肽、新鬼臼霉素、N-[2-(二甲基氨基)乙基]吖啶-4-羧酰胺、6-[2-(二甲基氨基)乙胺基]-3-羥基-7H-茚酚[2，1-c]醌醇-7-二鹽酸鹽、雙-二氧代哌嗪丙烷、六環(huán)核喜樹堿或四并苯羧酰胺中的一種或多種。
3.根據(jù)權利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于所述(B)組份氧化氮合成酶抑制劑選自血紅蛋白及其相關產(chǎn)物、7-氨基-吲唑、刀豆氨酸，氨基胍、S-甲基異硫脲、S-甲基異硫脲硫酸鹽、S-2-氨基-5-(2-氨基咪唑-1-基)戊酸、L-N5-(1-亞氨基乙基)鳥氨酸、N-單甲基-L-精氨酸乙酸、N-氨基-精氨酸甲酯、N-ω-氨基-精氨酸、氨基-精氨酸、NG-氨基-L-精氨酸、L-氨基-精氨酸-p-氨基酰苯胺、NG-單甲基-L-精氨酸或NG-甲基-L-精氨酸中的一種或多種。
4.根據(jù)權利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于所述(C)組份亞硝脲類抗癌藥物選自阿雌莫司汀、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、薩莫司汀、?；悄就?、他莫司汀、螺莫司汀、鏈佐星、米妥唑胺、伊力替康、替莫唑胺、5-二甲基三氮烯基咪唑-4-草酰胺、3-氨基苯酰胺或6-氨基煙酰胺中的一種或多種。
5.根據(jù)權利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于該組合物的抗癌有效成分為下列之一a)5-30％谷胱甘肽二硫化物、二硫化四甲基秋蘭姆、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、利尿酸、姜黃素、馬勃菌酸、S-己基谷胱甘肽、新鬼臼霉素、N-[2-(二甲基氨基)乙基]吖啶-4-羧酰胺、6-[2-(二甲基氨基)乙胺基]-3-羥基-7H-茚酚[2，1-c]醌醇-7-二鹽酸鹽、雙-二氧代哌嗪丙烷、六環(huán)核喜樹堿或四并苯羧酰胺；或b)5-30％ 7-氨基-吲唑、刀豆氨酸，氨基胍、S-甲基異硫脲、S-甲基異硫脲硫酸鹽、S-2-氨基-5-(2-氨基咪唑-1-基)戊酸、L-N5-(1-亞氨基乙基)鳥氨酸、N-單甲基-L-精氨酸乙酸、N-氨基-精氨酸甲酯、N-ω-氨基-精氨酸、氨基-精氨酸、NG-氨基-L-精氨酸、L-氨基-精氨酸-p-氨基酰苯胺、NG-單甲基-L-精氨酸或NG-甲基-L-精氨酸；或c)5-30％尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀或薩莫司汀和5-30％谷胱甘肽二硫化物、二硫化四甲基秋蘭姆、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、利尿酸、姜黃素、馬勃菌酸、S-己基谷胱甘肽、新鬼臼霉素、N-[2-(二甲基氨基)乙基]吖啶-4-羧酰胺、6-[2-(二甲基氨基)乙胺基]-3-羥基-7H-茚酚[2，1-c]醌醇-7-二鹽酸鹽、雙-二氧代哌嗪丙烷、六環(huán)核喜樹堿或四并苯羧酰胺的組合，或d)5-30％尼莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、司莫司汀或薩莫司汀和5-30％7-氨基-吲唑、刀豆氨酸，氨基胍、S-甲基異硫脲、S-甲基異硫脲硫酸鹽、S-2-氨基-5-(2-氨基咪唑-1-基)戊酸、L-N5-(1-亞氨基乙基)鳥氨酸、N-單甲基-L-精氨酸乙酸、N-氨基-精氨酸甲酯、N-ω-氨基-精氨酸、氨基-精氨酸、NG-氨基-L-精氨酸、L-氨基-精氨酸-p-氨基酰苯胺、NG-單甲基-L-精氨酸或NG-甲基-L-精氨酸的組合，以上均為重量百分比。
6.根據(jù)權利要求1所述抗癌之藥物組合物，其特征在于藥用輔料選自高分子多聚物、高分子多聚物的混合物或共聚物、水溶性低分子化合物。
7.據(jù)權利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于所用藥用輔料選自下列之一或其組合a)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乳酸；b)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物；d)對羧苯基丙烷與葵二酸的共聚物，對羧苯基丙烷與葵二酸的重量比為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質酸、膠原蛋白、明膠或白蛋白。
8.根據(jù)權利要求1所述之抗癌藥物組合物，其特征在于為混懸劑、緩釋劑、植入劑或植入緩釋劑。
9.權利要求1所述之抗癌藥物組合物用于制備治療起源于大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結腸或直腸的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。
全文摘要
一種抗癌藥物組合物，屬于藥物技術領域。包括藥用輔料和抗癌有效成分，抗癌有效成分為亞硝脲類抗癌藥物及其類似物和/或谷胱甘肽合成酶抑制劑和/或氧化氮合成酶抑制劑。抑制劑可有效地破壞腫瘤細胞內的DNA修復功能，從而降低腫瘤細胞對亞硝脲類抗癌藥物及其類似物的耐受性，而藥用輔料主要為生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，在其降解吸收的過程中能將DNA修復酶抑制劑緩慢釋放于腫瘤局部，因此在明顯降低其全身毒性反應的同時還可于腫瘤局部維持有效藥物濃度。腫瘤局部放置該組合物不僅能夠降低亞硝脲類抗癌藥物和或DNA修復酶抑制劑的全身毒性反應，同時還能選擇性地提高腫瘤局部的藥物濃度，增強化療藥物及放射治療等非手術療法的治療效果。
文檔編號A61K45/00GK1679952SQ20051004243
公開日2005年10月12日 申請日期2005年2月3日 優(yōu)先權日2005年2月3日
發(fā)明者孔慶忠, 孫娟, 劉恩祥, 張婕 申請人:山東藍金生物工程有限公司, 孔慶忠