專利名稱：穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，屬于對(duì)藥品進(jìn)行質(zhì)量控制的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，口舌生瘡是我們?nèi)粘Ｉ钪械囊环N常見病，嚴(yán)重威脅著人民的身體健康。穿心蓮制劑由穿心蓮與輔料制備而成，具有清熱解毒，涼血消腫的作用。其中“穿心蓮膠囊”和“穿心蓮片”分別刊登在部頒標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑二十冊(cè)和中國(guó)藥典2000年版一部上。該藥物在臨床上應(yīng)用多年，在治療感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，口舌生瘡，頓咳勞嗽，泄瀉痢疾，熱淋澀痛，癰腫瘡瘍，毒蛇咬傷方面取得比較滿意的治療效果，但是經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有穿心蓮制劑均存在著質(zhì)量控制方法不合理的缺點(diǎn)。現(xiàn)有穿心蓮制劑中，脫水穿心蓮內(nèi)酯均采用薄層掃描法進(jìn)行含量測(cè)定，所測(cè)數(shù)據(jù)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差大，測(cè)定數(shù)據(jù)結(jié)果不穩(wěn)定。故現(xiàn)有質(zhì)量控制方法不能有效控制這種穿心蓮口服制劑的質(zhì)量，從而將影響該制劑的臨床療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，該口服制劑包括顆粒劑、膠囊劑和片劑，本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有質(zhì)量控制方法不合理的缺點(diǎn)，對(duì)脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法和穿心蓮的薄層鑒別方法進(jìn)行了研究和篩選，提高了穿心蓮制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，從而確保了該制劑的臨床療效。
本發(fā)明所述穿心蓮口服制劑由穿心蓮與輔料制備而成，其制備方法為取穿心蓮粗粉，用50-95％乙醇熱浸提取1-5次，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏狀，干燥至干浸膏，粉碎成細(xì)粉，加入輔料按照常規(guī)方法制成膠囊劑、片劑或顆粒劑。
所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括與亞硝酸鈉和硝酸鋁的顯色反應(yīng)，以穿心蓮對(duì)照藥材和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品為對(duì)照鑒別穿心蓮藥材的薄層鑒別；含量測(cè)定為對(duì)制劑中穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定。
本制劑中穿心蓮的鑒別方法是以穿心蓮對(duì)照藥材及脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品為對(duì)照，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑的薄層鑒別方法。
鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇，加熱回流提取，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)尤胨?，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5-2，在水浴上加熱，濾過，取濾液，加入5-20％亞硝酸鈉溶液和5-20％硝酸鋁溶液，搖勻，再加氫氧化鈉試液，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇超聲處理，濾過，濾液濃縮，作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材，加乙醇超聲處理，濾過，濃縮，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1-5％3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5-5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)。
更具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)分別取膠囊劑2-10粒、片劑1-10片或顆粒劑0.5-2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇20-200ml，加熱回流0.5-5小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?-20ml，用0.5-10％鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5-2，在水浴上加熱10-100分鐘，濾過，取濾液，加5-20％亞硝酸鈉溶液和5-20％硝酸鋁溶液各1-20滴，搖勻，再加氫氧化鈉試液0.1ml～5ml，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑2-10粒、片劑2-10片或顆粒劑0.5-2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇10-100ml超聲處理10-100分鐘，濾過，濾液濃縮至1-10ml作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材0.1-1g，加乙醇10-100ml超聲處理10-100分鐘，濾過，濃縮至1-5ml，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇制成1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3-20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1-5％3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5-5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本制劑中穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法是以脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
含量測(cè)定方法為
穿心蓮內(nèi)酯 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相，流速0.8-1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200-500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇或乙醇溶解，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，加入乙醇，冷浸，再超聲提取，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用小于0.65μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每?；蛎科┬纳徃山?.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
更具體的含量測(cè)定方法為穿心蓮內(nèi)酯 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相，流速0.8-1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200-500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)，應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇或乙醇溶解，制成每1ml含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.05-0.3mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑20-50粒、片劑20-60片或顆粒劑5-10包，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取膠囊劑0.3g、片劑0.3g或顆粒劑1g，精密稱定，精密加入25ml乙醇，稱定重量，冷浸0.5-3小時(shí)，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用小于0.65μm的微孔濾膜濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各3-20μl，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每?；蛎科┬纳徃山?.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇，加熱回流提取，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)尤胨?，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5-2，在水浴上加熱，濾過，取濾液，加入5-20％亞硝酸鈉溶液和5-20％硝酸鋁溶液，搖勻，再加氫氧化鈉試液，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇超聲處理，濾過，濾液濃縮，作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材，加乙醇超聲處理，濾過，濃縮，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1-5％3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5-5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查本發(fā)明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應(yīng)符合中國(guó)藥典關(guān)于膠囊劑、片劑或顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；含量測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相，流速0.8-1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200-500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇或乙醇溶解，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，加入乙醇，冷浸，再超聲提取，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用小于0.65μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每?；蛎科┬纳徃山?.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，采用以下質(zhì)量控制方法將更容易控制本發(fā)明制劑的質(zhì)量，更利于保證本制劑的臨床療效。故所述質(zhì)量控制方法還可包括性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑2-10粒、片劑1-10片或顆粒劑0.5-2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇20-200ml，加熱回流0.5-5小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?-20ml，用0.5-10％鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5-2，在水浴上加熱10-100分鐘，濾過，取濾液，加5-20％亞硝酸鈉溶液和5-20％硝酸鋁溶液各1-20滴，搖勻，再加氫氧化鈉試液0.1ml～5ml，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑2-10粒、片劑2-10片或顆粒劑0.5-2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇10-100ml超聲處理10-100分鐘，濾過，濾液濃縮至1-10ml作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材0.1-1g，加乙醇10-100ml超聲處理10-100分鐘，濾過，濃縮至1-5ml，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇制成1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3-20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1-5％3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5-5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查本發(fā)明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應(yīng)符合中國(guó)藥典關(guān)于膠囊劑、片劑或顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；含量測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相，流速0.8-1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200-500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)，應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇或乙醇溶解，制成每1ml含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.05-0.3mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑20-50粒、片劑20-60片或顆粒劑5-10包，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取膠囊劑0.3g、片劑0.3g或顆粒劑1g，精密稱定，精密加入25ml乙醇，稱定重量，冷浸0.5-3小時(shí)，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用小于0.65μm的微孔濾膜濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各3-20μl，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每粒或每片含穿心蓮干浸膏0.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
穿心蓮藥材中主要含大量苦味素、穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯以及黃酮類化合物等。在產(chǎn)品研究中我們發(fā)現(xiàn)，穿心蓮藥材經(jīng)醇提后，回收醇提液至浸膏時(shí)，穿心蓮內(nèi)酯含量減少，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量增加，總內(nèi)酯含量變化減少，濃縮干燥成干膏，穿心蓮內(nèi)酯含量損失幾近為零，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量相應(yīng)減少，總內(nèi)酯含量變化減少，可見，不能以穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯的總內(nèi)酯含量作為制劑含量測(cè)定的考查指標(biāo)，故本發(fā)明中以脫水穿心蓮內(nèi)酯考查制劑指標(biāo)。另外，穿心蓮的含量測(cè)定方法有薄層掃描法、高效液相色譜法等。本發(fā)明人分別按照部頒中藥成方制劑二十冊(cè)“穿心蓮膠囊”中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法，中國(guó)藥典2000年版一部“穿心蓮片”中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法測(cè)定脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，上述兩種方法對(duì)同一批藥材、同一條件下測(cè)得的含量數(shù)據(jù)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差大，測(cè)定數(shù)據(jù)結(jié)果不穩(wěn)定，故本發(fā)明人采用高效液相色譜法對(duì)穿心蓮藥材中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量進(jìn)行測(cè)定。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用此方法測(cè)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較小，重現(xiàn)性好。
本發(fā)明的質(zhì)量控制方法是經(jīng)過大量的篩選得到的最佳方案，以下實(shí)驗(yàn)研究為本發(fā)明的優(yōu)選過程。
一、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量測(cè)定方法研究1、經(jīng)過試驗(yàn)證明，采用薄層掃描法對(duì)穿心蓮制劑中脫水穿心蓮內(nèi)酯進(jìn)行含量測(cè)定，其專屬性不強(qiáng)，誤差大，測(cè)定結(jié)果不穩(wěn)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較高效液相色譜法大，故本發(fā)明采用高效液相色譜法測(cè)定穿心蓮制劑的含量，以下是本發(fā)明制劑采用高效液相色譜法、薄層掃描法測(cè)定結(jié)果的比較

上述方法中，薄層掃描法1按照部頒中藥成方制劑二十冊(cè)“穿心蓮膠囊”中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法測(cè)定；薄層掃描法2按照中國(guó)藥典2000年版一部“穿心蓮片”中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法測(cè)定。
2、供試品溶液制備方法研究2.1提取方法研究方法1取藥物，精密稱定，加入乙醇，稱定重量，加熱回流提取，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，即得；方法2取藥物，精密稱定，加入乙醇，稱定重量，冷浸，然后超聲處理，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，即得；

加熱回流方法與超聲提取比較，穿心蓮片粉末加熱回流測(cè)定的結(jié)果較超聲處理的方法測(cè)定的結(jié)果與脫水穿心蓮內(nèi)酯接近，但由于加熱回流測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏差較大且超聲處理較為省事等因素，因此，采用超聲處理的方法較好。
2.2提取溶劑的選擇 脫水穿心蓮內(nèi)酯易溶甲醇、無水乙醇、乙醇等溶劑，分別用甲醇、無水乙醇、乙醇溶劑，浸泡1小時(shí)，進(jìn)行超聲處理30分鐘，補(bǔ)足超聲后重量，0.45μm濾過，取樣測(cè)定脫水穿心蓮內(nèi)酯為總內(nèi)酯含量，經(jīng)多次試驗(yàn)，測(cè)定脫水穿心蓮內(nèi)酯含量結(jié)果見下表。
不同溶劑超聲處理測(cè)定穿心蓮總內(nèi)酯的含量結(jié)果(n＝2)

從表中可見提取溶劑選乙醇較好。
3、流動(dòng)相的選擇流動(dòng)相1以甲醇、水不同比例的混合溶液為流動(dòng)相。
流動(dòng)相2以乙腈、水不同比例的混合溶液為流動(dòng)相。
流動(dòng)相3以甲醇、水不同比例的混合溶液，并用鹽酸調(diào)pH至4.5的溶液為流動(dòng)相。
流動(dòng)相4以甲醇、0.1％磷酸溶液不同比例的混合溶液為流動(dòng)相。
結(jié)果以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相；陰性樣品色譜圖在脫水穿心蓮內(nèi)酯位置處無假陽(yáng)性峰，脫水穿心蓮內(nèi)酯和相近的雜質(zhì)峰分離完全(分離度＞1.5)，即在該條件下脫水穿心蓮內(nèi)酯與其他組分分離完全。最佳流動(dòng)相為甲醇∶水＝55∶45。
4、重復(fù)性試驗(yàn)取藥物粉末，精密稱定，按本發(fā)明質(zhì)量控制方法中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備5份供試液，分別進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，計(jì)算結(jié)果列入下表，平均含量為21.66mg/g粉末，RSD為0.52％。
穿心蓮片供試品中脫水穿心蓮內(nèi)酯的重現(xiàn)性試驗(yàn)

結(jié)果表明，該方法重現(xiàn)性良好。
5、回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，取5份除去包衣，研細(xì)，已測(cè)定含量的樣品粉末(平均含量為21.89mg/g)各0.15g，精密稱定，精密加入25ml脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品(0.1312mg/ml)乙醇溶液，稱定重量，浸泡1小時(shí)，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜0.45μm濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻即得，制成供試液。分別精密吸取上述5份樣品各5μl注入液相色譜儀，記錄色譜，測(cè)定含量，計(jì)算回收率。平均回收率為99.22％，RSD為2.16％。
制劑供試品中脫水穿心蓮內(nèi)酯的回收率試驗(yàn)

二、穿心蓮薄層鑒別研究供試品溶液制備方法一取藥物，研細(xì)，加乙醇超聲處理，濾過，濾液濃縮，即得；同法制備缺穿心蓮陰性對(duì)照液。
供試品溶液制備方法二取藥物，研細(xì)，加入醋酸乙酯20ml，超聲處理，濾過，蒸干醋酸乙酯提取液，殘?jiān)蛹状既芙?，即得；同法制備缺穿心蓮陰性?duì)照液。
供試品溶液制備方法三取藥物，研細(xì)，加乙醚，加熱回流提取，濾過，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，即得；同法制備缺穿心蓮陰性?duì)照液。
供試品溶液制備方法四取藥物，研細(xì)，加水使溶解，用醋酸乙酯提取2次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，即得；同法制備缺穿心蓮陰性?duì)照液。
供試品溶液制備方法五取藥物，研細(xì)，精密稱定，加入甲醇，稱定重量，冷浸1小時(shí)，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，即得；同法制備缺穿心蓮陰性對(duì)照液。
展開劑選擇分別以甲苯、醋酸乙酯、甲醇、冰醋酸不同比例的混合溶液；氯仿、甲醇、丙酮、甲酸不同比例的混合溶液；石油醚(60～90℃)、醋酸乙酯、丙酮、冰醋酸不同比例的混合溶液；氯仿、醋酸乙酯、乙腈不同比例的混合溶液；氯仿、醋酸乙酯、甲醇不同比例的混合溶液為展開劑。
結(jié)果選用方法一，采用方法一制備供試品溶液，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，分離度好，且方法重現(xiàn)性好。另取市售不同廠家生產(chǎn)的穿心蓮片或穿心蓮膠囊與本申請(qǐng)人提供的中試樣品，分別按方法一進(jìn)行鑒別比較研究，經(jīng)多次試驗(yàn)及結(jié)果表明選用方法一，方法專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好。最佳展開劑為氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝20∶15∶2。采用其他方法制備供試品溶液，鑒別結(jié)果均存在著分離度不好，斑點(diǎn)顯色不清晰的缺點(diǎn)。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，對(duì)脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法和穿心蓮的薄層鑒別方法進(jìn)行了研究和篩選，所選用的方法專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，回收率高，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小，提高了穿心蓮制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有效控制穿心蓮口服制劑的質(zhì)量，從而確保了該制劑的臨床療效。
具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
本發(fā)明的實(shí)施例1性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑5粒、片劑3片或顆粒劑1包，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇25ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?ml，用2％鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至1.0，在水浴上加熱30分鐘，濾過，取濾液，加10％亞硝酸鈉溶液和10％硝酸鋁溶液各3滴，搖勻，再加氫氧化鈉試液0.5ml～1ml，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑5粒、片劑5片或顆粒劑1包，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇30ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材0.2g，加乙醇30ml超聲處理30分鐘，濾過，濃縮至2ml，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇制成1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝20∶15∶2為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈254nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以2％3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與2mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查本發(fā)明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應(yīng)符合中國(guó)藥典關(guān)于膠囊劑、片劑或顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；含量測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇∶水＝55∶45為流動(dòng)相，流速1.0ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)251nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)，應(yīng)不低于3000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品10mg，置100ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每1ml含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.1mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑30粒、片劑40片或顆粒劑8包，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取膠囊劑0.3g、片劑0.3g或顆粒劑1g，精密稱定，精密加入25ml乙醇，稱定重量，冷浸1小時(shí)，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每?；蛎科┬纳徃山?.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
本發(fā)明的實(shí)施例2性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；鑒別分別取膠囊劑2粒、片劑1片或顆粒劑0.5包，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇20ml，加熱回流0.5小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?ml，用0.5％鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5，在水浴上加熱10分鐘，濾過，取濾液，加5％亞硝酸鈉溶液和5％硝酸鋁溶液各20滴，搖勻，再加氫氧化鈉試液0.1ml～3ml，溶液顯橙紅色；
檢查本發(fā)明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應(yīng)符合中國(guó)藥典關(guān)于膠囊劑、片劑或顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；含量測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱為C4柱，以乙腈∶水＝1∶9為流動(dòng)相，流速0.8ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)，應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇溶解，制成每1ml含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.05mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑20粒、片劑20片或顆粒劑5包，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取膠囊劑0.3g、片劑0.3g或顆粒劑1g，精密稱定，精密加入25ml乙醇，稱定重量，冷浸0.5小時(shí)，超聲處理10分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.35μm的微孔濾膜濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各3μl，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每粒或每片含穿心蓮干浸膏0.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
本發(fā)明的實(shí)施例3性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；鑒別分別取膠囊劑2粒、片劑2片或顆粒劑0.5包，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇10ml超聲處理10分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材0.1g，加乙醇10ml超聲處理10分鐘，濾過，濃縮至1ml，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇制成1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶乙腈＝30∶10∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1％3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)；含量測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱C8柱，以甲醇∶水＝9∶1為流動(dòng)相，流速1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)，應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用乙醇溶解，制成每1ml含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.3mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑50粒、片劑60片或顆粒劑10包，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取膠囊劑0.3g、片劑0.3g或顆粒劑1g，精密稱定，精密加入25ml乙醇，稱定重量，冷浸3小時(shí)，超聲處理100分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.25μm的微孔濾膜濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每?；蛎科┬纳徃山?.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
本發(fā)明的實(shí)施例4性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑10粒、片劑10片或顆粒劑2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇200ml，加熱回流5小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，用10％鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至2，在水浴上加熱100分鐘，濾過，取濾液，加20％亞硝酸鈉溶液和20％硝酸鋁溶液各1滴，搖勻，再加氫氧化鈉試液3ml～5ml，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑10粒、片劑10片或顆粒劑2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇100ml超聲處理100分鐘，濾過，濾液濃縮至10ml作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材1g，加乙醇100ml超聲處理100分鐘，濾過，濃縮至5ml，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇制成1ml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶30∶5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以5％3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查
本發(fā)明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應(yīng)符合中國(guó)藥典關(guān)于膠囊劑、片劑或顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。
本發(fā)明發(fā)實(shí)施例5性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；檢查本發(fā)明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應(yīng)符合中國(guó)藥典關(guān)于膠囊劑、片劑或顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；含量測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以乙腈∶水＝7∶3為流動(dòng)相，流速1.0ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)365nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)，應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇溶解，制成每1ml含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.2mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑40粒、片劑50片或顆粒劑6包，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取膠囊劑0.3g、片劑0.3g或顆粒劑1g，精密稱定，精密加入25ml乙醇，稱定重量，冷浸2小時(shí)，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用0.50μm的微孔濾膜濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每?；蛎科┬纳徃山?.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
權(quán)利要求
1.一種穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，該口服制劑包括顆粒劑、膠囊劑和片劑，其特征在于所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括與亞硝酸鈉和硝酸鋁的顯色反應(yīng)，以穿心蓮對(duì)照藥材和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品為對(duì)照鑒別穿心蓮藥材的薄層鑒別；含量測(cè)定為對(duì)制劑中穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定。
2.按照權(quán)利要求1所述穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于本制劑中穿心蓮的鑒別方法是以穿心蓮對(duì)照藥材及脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品為對(duì)照，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑的薄層鑒別方法。
3.按照權(quán)利要求1或2所述穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇，加熱回流提取，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)尤胨?，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5-2，在水浴上加熱，濾過，取濾液，加入5-20％亞硝酸鈉溶液和5-20％硝酸鋁溶液，搖勻，再加氫氧化鈉試液，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇超聲處理，濾過，濾液濃縮，作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材，加乙醇超聲處理，濾過，濃縮，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1-5％ 3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5-5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)。
4.按照權(quán)利要求3所述穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)分別取膠囊劑2-10粒、片劑1-10片或顆粒劑0.5-2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇20-200ml，加熱回流0.5-5小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?-20ml，用0.5-10％鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5-2，在水浴上加熱10-100分鐘，濾過，取濾液，加5-20％亞硝酸鈉溶液和5-20％硝酸鋁溶液各1-20滴，搖勻，再加氫氧化鈉試液0.1ml～5ml，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑2-10粒、片劑2-10片或顆粒劑0.5-2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇10-100ml超聲處理10-100分鐘，濾過，濾液濃縮至1-10ml作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材0.1-1g，加乙醇10-100ml超聲處理10-100分鐘，濾過，濃縮至1-5ml，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇制成1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3-20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1-5％ 3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5-5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)。
5.按照權(quán)利要求1所述穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于本制劑中穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定方法是以脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
6.按照權(quán)利要求1或5所述穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于含量測(cè)定方法為穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相，流速0.8-1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200-500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇或乙醇溶解，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，加入乙醇，冷浸，再超聲提取，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用小于0.65μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每粒或每片含穿心蓮干浸膏0.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
7.按照權(quán)利要求6所述穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的含量測(cè)定方法為穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相，流速0.8-1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200-500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)，應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇或乙醇溶解，制成每1ml含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.05-0.3mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑20-50粒、片劑20-60片或顆粒劑5-10包，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取膠囊劑0.3g、片劑0.3g或顆粒劑1g，精密稱定，精密加入25ml乙醇，稱定重量，冷浸0.5-3小時(shí)，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用小于0.65μm的微孔濾膜濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各3-20μl，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每粒或每片含穿心蓮干浸膏0.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
8.按照權(quán)利要求1所述穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇，加熱回流提取，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)尤胨?，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5-2，在水浴上加熱，濾過，取濾液，加入5-20％亞硝酸鈉溶液和5-20％硝酸鋁溶液，搖勻，再加氫氧化鈉試液，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇超聲處理，濾過，濾液濃縮，作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材，加乙醇超聲處理，濾過，濃縮，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇溶解，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1-5％ 3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5-5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查本發(fā)明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應(yīng)符合中國(guó)藥典關(guān)于膠囊劑、片劑或顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；含量測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相，流速0.8-1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200-500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇或乙醇溶解，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑中的內(nèi)容物、片劑或顆粒劑，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，加入乙醇，冷浸，再超聲提取，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用小于0.65μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每粒或每片含穿心蓮干浸膏0.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
9.按照權(quán)利要求8所述穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰褐色至棕褐色的粉末，味苦；對(duì)于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣片后顯灰褐色至棕褐色；味苦；對(duì)于顆粒劑產(chǎn)品為灰褐色至棕褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑2-10粒、片劑1-10片或顆粒劑0.5-2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加無水乙醇20-200ml，加熱回流0.5-5小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?-20ml，用0.5-10％鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至0.5-2，在水浴上加熱10-100分鐘，濾過，取濾液，加5-20％亞硝酸鈉溶液和5-20％硝酸鋁溶液各1-20滴，搖勻，再加氫氧化鈉試液0.1ml～5ml，溶液顯橙紅色；(2)分別取膠囊劑2-10粒、片劑2-10片或顆粒劑0.5-2包，片劑除去包衣，研細(xì)，加乙醇10-100ml超聲處理10-100分鐘，濾過，濾液濃縮至1-10ml作為供試品溶液；另取穿心蓮對(duì)照藥材0.1-1g，加乙醇10-100ml超聲處理10-100分鐘，濾過，濃縮至1-5ml，作為對(duì)照藥材溶液；再取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，加乙醇制成1ml含0.5-5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3-20μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈＝10-30∶10-30∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1-5％ 3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與0.5-5mol/L氫氧化鉀溶液的等量混合液，臨用時(shí)配置；立即在日光燈下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查本發(fā)明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應(yīng)符合中國(guó)藥典關(guān)于膠囊劑、片劑或顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定；含量測(cè)定穿心蓮內(nèi)酯采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝1-9∶9-1為流動(dòng)相，流速0.8-1.2ml/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)200-500nm，理論塔板數(shù)以脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)，應(yīng)不低于2000；精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品，用甲醇或乙醇溶解，制成每1ml含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.05-0.3mg的溶液，即得對(duì)照品溶液；分別取膠囊劑20-50粒、片劑20-60片或顆粒劑5-10包，片劑除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取膠囊劑0.3g、片劑0.3g或顆粒劑1g，精密稱定，精密加入25ml乙醇，稱定重量，冷浸0.5-3小時(shí)，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用小于0.65μm的微孔濾膜濾過，精密取濾液5ml置10ml容量瓶中，加乙醇并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各3-20μl，注入液相色譜儀測(cè)定含量，即得；該口服制劑中，膠囊劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于4mg/粒、片劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于3.5mg/片、顆粒劑中含脫水穿心蓮內(nèi)酯不得少于8mg/袋；其中膠囊劑或片劑每?；蛎科┬纳徃山?.105g；顆粒劑每袋含穿心蓮干浸膏0.210g。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種穿心蓮口服制劑的質(zhì)量控制方法，所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括與亞硝酸鈉和硝酸鋁的顯色反應(yīng)，以穿心蓮對(duì)照藥材和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品為對(duì)照的薄層鑒別；含量測(cè)定為對(duì)制劑中穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明對(duì)脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測(cè)定和穿心蓮的薄層鑒別進(jìn)行了研究和篩選，所選用的方法專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，回收率高，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小，能有效控制穿心蓮口服制劑的質(zhì)量，從而確保了該制劑的臨床療效。
文檔編號(hào)A61K9/20GK1823858SQ20051020087
公開日2006年8月30日 申請(qǐng)日期2005年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月28日
發(fā)明者葉湘武, 張梅 申請(qǐng)人:貴州益佰制藥股份有限公司