專利名稱：經(jīng)粘膜用組合物及提高經(jīng)粘膜吸收的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種經(jīng)粘膜用組合物。更具體而言，本發(fā)明涉及一種能夠改善藥理活性肽或蛋白質(zhì)的經(jīng)粘膜吸收性的經(jīng)粘膜用組合物。并且，本發(fā)明涉及一種提高藥理活性肽或蛋白質(zhì)的經(jīng)粘膜吸收的方法。
背景技術(shù)：
目前，藥理活性肽或蛋白質(zhì)等藥物主要是通過對靜脈內(nèi)或皮下注射進(jìn)行給藥。但是，通過注射給與藥物，給患者造成較多的精神負(fù)擔(dān)或肉體痛苦，另外也存在患者難以自己進(jìn)行給藥的便利性問題。因此，近年，作為注射以外的給藥方法，通過肺粘膜、鼻粘膜、口腔粘膜、陰道粘膜、胃粘膜、消化道粘膜等粘膜給與藥物的方法正受到重視。
但是，一般情況下，由于肽或蛋白質(zhì)的粘膜吸收性低，所以，有時(shí)難以透過粘膜吸收足以發(fā)揮所期望藥效的藥量。因此，迄今為止，已開發(fā)了多種用于使肽或蛋白質(zhì)被高效地經(jīng)粘膜吸收的吸收促進(jìn)劑。例如，已公開了使用胞嘧啶核苷酸(cytidine nucleotide)衍生物(專利文獻(xiàn)1)或分子量在5千以上的脫乙酰殼多糖(專利文獻(xiàn)2)作為吸收促進(jìn)劑的方法。
雖然已經(jīng)公開了上述多種方法，但目前，作為改善肽或蛋白質(zhì)的粘膜難吸收性的手段，仍然期待著開發(fā)出通過更加實(shí)用有效的方法實(shí)現(xiàn)粘膜吸收的技術(shù)。
專利文獻(xiàn)1特開平6-9424號公報(bào)專利文獻(xiàn)2特開平11-116499號公報(bào)發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物被設(shè)計(jì)成為能夠使藥理活性肽及蛋白質(zhì)通過肺粘膜、鼻粘膜、口腔粘膜、陰道粘膜、胃粘膜、消化道粘膜等粘膜高效地被吸收。并且，本發(fā)明的目的還在于提供一種能夠有效地提高藥理活性肽及蛋白質(zhì)的經(jīng)粘膜吸收的方法。
本發(fā)明人等為了解決上述問題進(jìn)行了潛心研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過在適用于粘膜的組合物中使聚合度為2～20的殼寡糖(chitosanoligosaccharide)、其衍生物、或葡糖胺與藥理活性肽或蛋白質(zhì)共存，可以提高藥理活性肽或蛋白質(zhì)的經(jīng)粘膜吸收性，能夠得到通過用于粘膜發(fā)揮優(yōu)異藥效的組合物?；谏鲜霭l(fā)現(xiàn)，進(jìn)一步通過反復(fù)改良，從而完成本發(fā)明。
即，本發(fā)明提供如下所示的經(jīng)粘膜用組合物項(xiàng)1、一種經(jīng)粘膜用組合物，其特征為含有下述成分(i)及成分(ii)(i)選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種，及(ii)選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種。
項(xiàng)2、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，成分(i)為選自抗生素、造血劑、傳染病治療劑、抗癡呆劑、抗病毒劑、抗腫瘤劑、解熱劑、鎮(zhèn)痛劑、消炎劑、抗?jié)儎?、抗過敏劑、抗抑郁劑、精神治療藥物、強(qiáng)心劑、心律失常治療劑、血管擴(kuò)張劑、降壓劑、糖尿病治療劑、抗凝血劑、降膽固醇劑、骨質(zhì)疏松癥治療劑、激素制劑及疫苗中的至少一種。
項(xiàng)3、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，成分(i)為選自細(xì)胞因子、肽激素、生長因子、作用于心血管系統(tǒng)的因子、細(xì)胞粘附因子、作用于中樞及末梢神經(jīng)系統(tǒng)的因子、作用于體液電解質(zhì)及血液有機(jī)物質(zhì)的因子、作用于骨及骨骼的因子、作用于消化系統(tǒng)的因子、作用于腎及泌尿系統(tǒng)的因子、作用于結(jié)締組織及皮膚的因子、作用于感覺器官的因子、作用于免疫系統(tǒng)的因子、作用于呼吸系統(tǒng)的因子、作用于生殖系統(tǒng)的因子及酶中的至少一種。
項(xiàng)4、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，成分(i)為選自干擾素、白細(xì)胞介素、胰島素、生長激素(growth hormones)、降鈣素、黃體生成素釋放激素、腎上腺皮質(zhì)激素、黃體生成素、甲狀旁腺激素、及甲狀旁腺激素的活性片段中的至少一種。
項(xiàng)5、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，成分(ii)為選自聚合度為2～15的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種。
項(xiàng)6、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物相對于100重量份的成分(i)，以0.001～1×106重量份的比例含有所述成分(ii)。
項(xiàng)7、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物是以1×10-6～30w/v％的比例含有成分(i)的液體狀組合物。
項(xiàng)8、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物是以0.01～30w/v％的比例含有成分(ii)的液體狀組合物。
項(xiàng)9、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物是以1×10-5～99重量％的比例含有成分(i)的固態(tài)組合物。
項(xiàng)10、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物是以0.1～50重量％的比例含有成分(ii)的固態(tài)組合物。
項(xiàng)11、如項(xiàng)1所述的經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物為適用于鼻腔粘膜、消化器官粘膜、肺粘膜、口腔粘膜、眼或陰道粘膜的組合物。
另外，本發(fā)明提供了如下所述的提高粘膜吸收的方法項(xiàng)12、一種提高經(jīng)粘膜吸收的方法，所述方法能夠提高哺乳動物對選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種的經(jīng)粘膜吸收，其特征為，對哺乳動物的粘膜給與(i)選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種，和(ii)選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種。
項(xiàng)13、如項(xiàng)12所述的方法，其中，成分(i)為選自抗生素、造血劑、傳染病治療劑、抗癡呆劑、抗病毒劑、抗腫瘤劑、解熱劑、鎮(zhèn)痛劑、消炎劑、抗?jié)儎⒖惯^敏劑、抗抑郁劑、精神治療藥物、強(qiáng)心劑、心律失常治療劑、血管擴(kuò)張劑、降壓劑、糖尿病治療劑、抗凝血劑、降膽固醇劑、骨質(zhì)疏松癥治療劑、激素制劑及疫苗中的至少一種。
項(xiàng)14、如項(xiàng)12所述的方法，其中，成分(i)為選自細(xì)胞因子、肽激素、生長因子、作用于心血管系統(tǒng)的因子、細(xì)胞粘附因子、作用于中樞及末梢神經(jīng)系統(tǒng)的因子、作用于體液電解質(zhì)及血液有機(jī)物質(zhì)的因子、作用于骨及骨骼的因子、作用于消化系統(tǒng)的因子、作用于腎及泌尿系統(tǒng)的因子、作用于結(jié)締組織及皮膚的因子、作用于感覺器官的因子、作用于免疫系統(tǒng)的因子、作用于呼吸系統(tǒng)的因子、作用于生殖系統(tǒng)的因子及酶中的至少一種。
項(xiàng)15、如項(xiàng)12所述的方法，其中，成分(i)為選自干擾素、白細(xì)胞介素、胰島素、生長激素、降鈣素、黃體生成素釋放激素、腎上腺皮質(zhì)激素、黃體生成素、甲狀旁腺激素、及甲狀旁腺激素的活性片段中的至少一種。
項(xiàng)16、如項(xiàng)12所述的方法，其中，成分(ii)為選自聚合度為2～15的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及其鹽中的至少一種。
項(xiàng)17、如項(xiàng)12所述的方法，所述方法為在給與成分(i)的同時(shí)，給與相對于100重量份的成分(i)比例為0.001～1×106重量份的成分(ii)。
項(xiàng)18、如項(xiàng)12所述的方法，所述方法為給與哺乳動物粘膜一種液體狀組合物，該液體狀組合物含有成分(i)及成分(ii)，其中成分(i)的比例為1×10-6～30w/v％。
項(xiàng)19、如項(xiàng)12所述的方法，所述方法為給與哺乳動物粘膜一種液體狀組合物，該液體狀組合物含有成分(i)及成分(ii)，其中成分(ii)的比例為0.01～30w/v％。
項(xiàng)20、如項(xiàng)12所述的方法，所述方法為給與哺乳動物粘膜一種固體狀組合物，該固體狀組合物含有成分(i)及成分(ii)，其中成分(i)的比例為1×10-5～99重量％。
項(xiàng)21、如項(xiàng)12所述的方法，所述方法為給與哺乳動物粘膜一種固體狀組合物，該固體狀組合物含有成分(i)及成分(ii)，其中成分(ii)的比例為0.1～50重量％。
項(xiàng)22、如項(xiàng)12所述的方法，其中給藥的粘膜為鼻腔粘膜、消化器官粘膜、肺粘膜、口腔粘膜、眼或陰道粘膜。
項(xiàng)23、如項(xiàng)12所述的方法，所述方法為對哺乳動物粘膜給與權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的經(jīng)粘膜用組合物。
并且，本發(fā)明提供如下所述的用途。
項(xiàng)24、(i)選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種，及(ii)選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及其鹽中的至少一種，在制備經(jīng)粘膜用組合物中的用途。


表示在試驗(yàn)例1中，將各組合物(實(shí)施例1-4及比較例1-2)給與大鼠氣管內(nèi)時(shí)血清中IFNα的平均濃度的經(jīng)時(shí)變化。
具體實(shí)施例方式
下面，更加詳細(xì)地說明本發(fā)明。
I經(jīng)粘膜用組合物成分(i)本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物含有選自具有生理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種作為成分(i)。
本發(fā)明中，可以使用由2個(gè)以上的氨基酸構(gòu)成的肽及其衍生物作為具有生理活性的肽及蛋白質(zhì)。具體而言，作為該肽及蛋白質(zhì)，除了僅由氨基酸構(gòu)成的物質(zhì)之外，還可以使用例如被半乳糖、甘露糖等糖、或糖鏈修飾的物質(zhì)；用聚乙二醇等合成聚合物、或硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸等天然聚合物修飾的物質(zhì)；被其他非肽性化合物修飾的物質(zhì)等。也可以使用在用于呈現(xiàn)生理活性所必須的氨基酸序列中加入具有其他功能的肽得到的雜合肽。另外，也可以為已知藥理活性的肽及蛋白質(zhì)的片段，只要該片段保持了藥理活性即可。
對于該肽及蛋白質(zhì)的分子量，沒有特殊的限制，例如可以舉出200～200000，優(yōu)選200～100000，更優(yōu)選約200～50000。
對本發(fā)明使用的肽及蛋白質(zhì)的粘膜吸收特性沒有特殊的限制，可以為粘膜易吸收性物質(zhì)，也可以為粘膜難吸收性物質(zhì)。此處，所謂“粘膜易吸收性”是指即使沒有其他的粘膜吸收促進(jìn)劑，在通常的給藥量下，肽及蛋白質(zhì)也能通過粘膜吸收可發(fā)揮藥效作用的量，所謂“粘膜難吸收性”是指如果沒有與其他的粘膜吸收促進(jìn)劑共存，則在通常的給藥量下，肽及蛋白質(zhì)不能通過粘膜吸收可發(fā)揮藥效作用的量。鑒于本發(fā)明的效果，即能夠提高肽及蛋白質(zhì)的粘膜吸收性，作為優(yōu)選的肽及蛋白質(zhì)，可以舉出粘膜難吸收性物質(zhì)。
該肽及蛋白質(zhì)可以為來自天然的物質(zhì)、通過基因重組技術(shù)制備的物質(zhì)、通過化學(xué)合成制備的物質(zhì)中的任意一種。
作為具有生理活性的肽及蛋白質(zhì)，例如可以舉出作為抗生素、造血劑、傳染病治療劑、抗癡呆劑、抗病毒劑、抗腫瘤劑、解熱劑、鎮(zhèn)痛劑、消炎劑、抗?jié)儎?、抗過敏劑、抗抑郁劑、精神治療藥物、強(qiáng)心劑、心律失常治療劑、血管擴(kuò)張劑、降壓劑、糖尿病治療劑、抗凝血劑、降膽固醇劑、骨質(zhì)疏松癥治療劑、激素制劑及疫苗等使用的成分。
作為該肽及蛋白質(zhì)的具體例，例如可以舉出細(xì)胞因子、肽激素、生長因子、作用于心血管系統(tǒng)的因子、細(xì)胞粘附因子、作用于中樞及末梢神經(jīng)系統(tǒng)的因子、作用于體液電解質(zhì)及血液有機(jī)物質(zhì)的因子、作用于骨及骨骼的因子、作用于消化系統(tǒng)的因子、作用于腎及泌尿系統(tǒng)的因子、作用于結(jié)締組織及皮膚的因子、作用于感覺器官的因子、作用于免疫系統(tǒng)的因子、作用于呼吸系統(tǒng)的因子、作用于生殖系統(tǒng)的因子及酶。其中，作為優(yōu)選例可以舉出細(xì)胞因子、肽激素、生長因子、作用于心血管系統(tǒng)的因子、作用于中樞及末梢神經(jīng)系統(tǒng)的因子、作用于體液電解質(zhì)及血液有機(jī)物質(zhì)的因子、作用于骨及骨骼的因子、作用于消化系統(tǒng)的因子、作用于免疫系統(tǒng)的因子、作用于呼吸系統(tǒng)的因子、作用于生殖系統(tǒng)的因子及酶。
下面，舉出該肽及蛋白質(zhì)的具體例。但本發(fā)明并不限定于這些肽及蛋白質(zhì)。
細(xì)胞因子例如干擾素(干擾素-α、β、γ)、白細(xì)胞介素(白細(xì)胞介素-1～11)、腫瘤壞死因子(TNF-α、β)、惡性白細(xì)胞抑制因子(LIF)、紅細(xì)胞生成素、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、血小板生成素、血小板生長刺激因子(platelet growth stimulatingfactor)、巨核細(xì)胞生長刺激因子(megakaryocyte growth stimulatingfactor)等。
肽激素例如胰島素、生長激素、黃體生成素釋放激素(LH-RH)、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、淀粉不溶素(amylins)、催產(chǎn)素、黃體生成素等。
生長因子例如神經(jīng)生長因子(NGF、NGF-2/NT-3)、表皮細(xì)胞生長因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、胰島素樣生長因子(IGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)、血小板衍生生長因子(PDGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)等。
作用于心血管系統(tǒng)的因子例如內(nèi)皮素、內(nèi)皮素抑制劑、內(nèi)皮素拮抗劑、內(nèi)皮素生成酶抑制劑、加壓素、腎素、血管緊張素I、血管緊張素II、血管緊張素III、血管緊張素I抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、心房利尿鈉肽(ANP)、抗心律失常肽等。
細(xì)胞粘附因子例如層粘連蛋白、細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)等。
作用于中樞及末梢神經(jīng)系統(tǒng)的因子例如腦啡肽、內(nèi)啡肽、京都啡肽(kyotorphin)、神經(jīng)營養(yǎng)因子(NTF)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)、腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)、促甲狀腺激素釋放激素(TRH)、神經(jīng)降壓素等。
作用于體液電解質(zhì)及血液有機(jī)物質(zhì)的因子例如降鈣素、脫輔基蛋白質(zhì)E、水蛭素等。
作用于骨及骨骼的因子例如甲狀腺激素、甲狀腺激素的活性片段、組蛋白H4-相關(guān)的成骨生長肽(Histone H4-related osteogenicgrowth peptide)等。
作用于消化系統(tǒng)的因子例如分泌素、胃泌素等。
作用于腎及泌尿系統(tǒng)的因子例如腦鈉利尿肽、硬骨魚緊張肽(urotensin)等。
作用于感覺器官的因子例如P物質(zhì)等。
作用于免疫系統(tǒng)的因子例如趨化肽、緩激肽等。
作用于呼吸系統(tǒng)的因子例如控制哮喘反應(yīng)的因子等。
在上述成分(i)中，作為優(yōu)選使用的物質(zhì)，可以舉出干擾素、白細(xì)胞介素、胰島素、生長激素、黃體生成素釋放激素、促腎上腺皮質(zhì)激素、黃體生成素、降鈣素、甲狀腺激素、甲狀腺激素的活性片段。作為特別優(yōu)選的成分(i)，例如可舉出干擾素。
上述成分(i)的每日給藥量，根據(jù)該成分(i)的種類、患者的年齡或性別等的不同而有所差異，但可以設(shè)定成人每日通常為0.001～100mg、優(yōu)選0.01～10mg作為標(biāo)準(zhǔn)。
成分(ii)本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物，含有選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種作為成分(ii)。
本發(fā)明中，所謂聚合度為2～20的殼寡糖是指2～20個(gè)葡糖胺殘基通過β1-4鍵結(jié)合形成的寡糖。
本發(fā)明中，作為聚合度為2～20的殼寡糖的衍生物，只要是藥學(xué)上允許的衍生物即可，沒有特殊的限制。作為上述衍生物，具體而言可以舉出上述殼寡糖的羧甲基化物、羧乙基化物、羥乙基化物、二羥丙基化物、甲基化物、乙基化物、甘醇化物、?；铩⒓妆交酋；?、硫酸化物等。
另外，對于作為成分(ii)使用的聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物及葡糖胺的鹽，只要為藥學(xué)上允許的物質(zhì)即可，無特殊的限制。作為上述鹽，具體而言，可以舉出由無機(jī)酸(例如鹽酸、硫酸、磷酸等)形成的鹽；及有機(jī)酸(例如乙酸、酒石酸、乳酸、谷氨酸、馬來酸、藻酸、檸檬酸等)形成的鹽。
作為該成分(ii)，可以優(yōu)選舉出聚合度為2～15的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽，更優(yōu)選聚合度為2～10的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽。
用作成分(ii)的上述殼寡糖，可以通過使用酶(chitonase等)或酸等水解脫乙酰殼多糖進(jìn)行制備。另外，上述殼寡糖也可以通過在使用酶(殼多糖酶等)或酸等水解甲殼質(zhì)后，在強(qiáng)堿溶液中使其脫乙酰化的方法進(jìn)行制備。
經(jīng)粘膜用組合物本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物中，作為上述成分(i)及(ii)的配合比例沒有特殊的限定，通常相對于100重量份上述成分(i)，上述成分(ii)的比例為0.001～1×106重量份，優(yōu)選為0.01～1×105重量份，更優(yōu)選為0.1～1×104重量份。通過滿足上述比例，能夠顯著地提高成分(i)的經(jīng)粘膜吸收。
對于本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物中上述成分(i)的配合量，只要為用于粘膜可發(fā)揮藥理效果的有效量即可，可以根據(jù)患者的性別或年齡、給藥方式、制劑的形狀或劑型、所使用的成分(i)的種類或每日給藥量、成分(ii)的種類、期待的藥效效果等適當(dāng)?shù)卦O(shè)定。作為經(jīng)粘膜用組合物中上述成分(i)的配合比例之一例，可以舉出成分(i)相對于該組合物的總重量為1×10-7～99重量％的比例。具體而言，配制液體狀組合物時(shí)，例如成分(i)的比例通?？梢詾?×10-6～30w/v％，優(yōu)選為1×10-5～10w/v％，更優(yōu)選為1×10-4～1w/v％。此處，單位“w/v％”與“g/100ml”意思相同。另外，例如配制固體狀組合物時(shí)，相對于該組合物的總重量，成分(i)的比例通?？梢詾?×10-5～99重量％，優(yōu)選為1×10-4～50重量％，更優(yōu)選為1×10-3～10重量％。
對于本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物中上述成分(ii)的配合量，只要為能夠提高上述成分(i)的粘膜吸收的有效量即可，可以根據(jù)上述成分(i)及(ii)的配合比例和上述成分(i)的配合量適當(dāng)?shù)卦O(shè)定。作為經(jīng)粘膜用組合物中上述成分(ii)的配合比例之一例，可以舉出相對于該組合物的總重量，成分(ii)的比例為0.001～50重量％。具體而言，配制液體狀組合物時(shí)，成分(ii)的比例通?？梢詾?.01～30w/v％，優(yōu)選0.1～10w/v％，更優(yōu)選0.5～5w/v％。另外，例如配制固體狀組合物時(shí)，相對于該組合物的總重量，成分(ii)的比例通常為0.1～50重量％，優(yōu)選0.5～30重量％，更優(yōu)選1～10重量％。
本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物，除上述成分(i)及(ii)之外，還可以含有在經(jīng)粘膜用組合物中通常使用的各種藥效成分。
另外，本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物中，除上述成分之外，根據(jù)該組合物的用途或形狀等，也可以適當(dāng)?shù)嘏浜显诮?jīng)粘膜用組合物中通常使用的載體或添加劑。對于該載體或添加劑的配合比例，可以根據(jù)本領(lǐng)域通常采用的范圍適當(dāng)?shù)卦O(shè)定。作為能夠配合的載體或添加劑沒有特殊的限制，例如可以舉出水、生理鹽水、及其他水性溶劑、水性或油性基劑等各種載體；賦形劑、粘合劑、pH調(diào)節(jié)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、潤滑劑、著色劑、矯味劑、香料等各種添加劑。
作為上述添加劑，具體而言可以舉出乳糖、白糖、甘露醇、氯化鈉、葡萄糖、碳酸鈣、高嶺土、結(jié)晶纖維素、硅酸鹽等賦形劑；水、乙醇、單糖漿、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明膠液、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、羥丙甲纖維素、羥丙基纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、明膠、糊精、支鏈淀粉等粘合劑；檸檬酸、檸檬酸酐、檸檬酸鈉、二水合檸檬酸鈉、無水磷酸一氫鈉、無水磷酸二氫鈉、磷酸氫鈉、磷酸二氫鈉等pH調(diào)節(jié)劑；羧甲基纖維素鈣、低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、聚乙烯聚吡咯烷酮、聚山梨脂80等崩解劑；季銨鹽、月桂基硫酸鈉等其他吸收促進(jìn)劑；精制滑石粉、硬脂酸鹽、聚乙二醇、膠態(tài)硅酸、蔗糖脂肪酸酯類等潤滑劑；黃色氧化鐵、黃色三氧化二鐵、三氧化二鐵、β胡蘿卜素、氧化鈦、食用色素(例如，食用藍(lán)色1號等)、銅葉綠素(copper chlorophyllin)、核黃素等著色劑；以及抗壞血酸、天冬甜素、甘茶(Hydrangeae Dulcis Folium)、氯化鈉、果糖、糖精、粉糖等矯味劑等。
并且，除上述成分之外，在本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物中，可以使用生物降解性合成高分子作為基劑。作為上述生物降解性合成高分子的代表例，例如可以舉出聚乳酸、聚(乳酸-乙醇酸)共聚物、聚羥基丁酸、聚(羥基丁酸-乙醇酸)共聚物、及上述物質(zhì)的混合物等，但并不僅限定于上述物質(zhì)。
本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物的形態(tài)只要適用于粘膜即可，沒有特殊的限制，可以為固體狀、液體狀、半固體狀、懸濁狀、粉末狀、微粒狀中的任一種形態(tài)。另外，本發(fā)明的經(jīng)粘膜用制劑，可以根據(jù)公知的方法成型為微膠囊(微球)等粒子。
另外，對作為本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物的適用對象的粘膜沒有特殊的限制。作為本發(fā)明經(jīng)粘膜用制劑的適用對象粘膜，具體而言，可以舉出鼻粘膜、消化器官粘膜(胃腸粘膜)、肺粘膜、陰道粘膜、口腔粘膜、眼粘膜、氣管粘膜等。其中，出于患者的順應(yīng)性(compliance)等方面的原因，可以優(yōu)選舉出鼻粘膜、消化器官粘膜、肺粘膜及陰道粘膜。
本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物，根據(jù)其形狀或適用對象粘膜，可以配制成各種劑型。另外，本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物可以用作藥物組合物，按照與其適用對象粘膜或劑型相應(yīng)的給藥方式，施用于患者的粘膜。
II提高經(jīng)粘膜吸收的方法如上所述，上述成分(ii)能夠提高具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)的經(jīng)粘膜吸收。所以，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種提高哺乳動物對選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種的經(jīng)粘膜吸收的方法。該方法的特征為，在對人等哺乳動物的粘膜給與(i)選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種的同時(shí)，給與(ii)選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種。
該方法中，對于成分(i)的種類或給藥量、成分(ii)的種類或給藥量、成分(i)與成分(ii)的比例、給藥對象粘膜等，與上述“I經(jīng)粘膜用組合物”的情況相同。
該方法優(yōu)選通過對哺乳動物粘膜給與上述經(jīng)粘膜用組合物而實(shí)施。
實(shí)施例下面，給出實(shí)施例及試驗(yàn)例詳細(xì)地說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于此。需要說明的是，實(shí)施例4及比較例1中使用的殼寡糖或脫乙酰殼多糖的平均分子量，按照“甲殼質(zhì)、脫乙酰殼多糖手冊”(甲殼質(zhì)、脫乙酰殼多糖研究會編，技報(bào)堂出版)第8章甲殼質(zhì)、脫乙酰殼多糖分析法中記載的使用高效液相色譜(HPLC)的GPC(凝膠滲透色譜)模型的方法進(jìn)行計(jì)算。
實(shí)施例1用注射用水(制備序號2D71N，經(jīng)銷商大塚制藥株式會社)溶解脫乙酰殼多糖六聚物(6個(gè)葡糖胺殘基通過β1-4鍵結(jié)合形成的寡糖；制品名脫乙酰殼多糖六聚物，分子量1204，編號No.400436，購入地生化學(xué)工業(yè)株式會社)，配制5mg/mL的脫乙酰殼多糖六聚物溶液。向含有1000萬IU干擾素α(IFNα)的小瓶(天然型干擾素α制劑，商品名OIF，制造序號3G86F10，制備經(jīng)銷商大塚制藥株式會社)中加入0.5mL上述溶液，輕輕振搖混合使小瓶內(nèi)的冷凍干燥物溶解，配制IFNα濃度為2000萬IU/mL(約0.01w/v％)的組合物。
實(shí)施例2除使用等量的脫乙酰殼多糖二聚體(6個(gè)葡糖胺殘基通過β1-4鍵結(jié)合形成的寡糖；制品名脫乙酰殼多糖二聚體，分子量413、編號No.400432、購入地生化學(xué)工業(yè)株式會社)代替脫乙酰殼多糖六聚物之外，按照與上述實(shí)施例1相同的方法，配制IFNα濃度為2000萬IU/mL(約0.01w/v％)的組合物。
實(shí)施例3除使用等量的D-(+)-葡糖胺(分子量216，編號No.101782、購入地和光純藥工業(yè)株式會社)代替脫乙酰殼多糖六聚物之外，按照與上述實(shí)施例1相同的方法，配制IFNα濃度為2000萬IU/mL(約0.01w/v％)的組合物。
實(shí)施例4除使用等量的脫乙酰殼多糖(制品名水溶性脫乙酰殼多糖，平均分子量1800、制品No.037-14303，購入地和光純藥工業(yè)株式會社)代替脫乙酰殼多糖六聚物之外，按照與上述實(shí)施例1相同的方法，配制IFNα濃度為2000萬IU/mL(約0.01w/v％)的組合物。
實(shí)施例5用等滲磷酸緩沖液溶解脫乙酰殼多糖六聚物(6個(gè)葡糖胺殘基通過β1-4鍵結(jié)合形成的寡糖；制品名脫乙酰殼多糖六聚物，分子量1204，編號No.400436，購入地生化學(xué)工業(yè)株式會社)，配制10mg/mL的脫乙酰殼多糖六聚物溶液。另外，用等滲磷酸緩沖液溶解鮭魚降鈣素(編號No.T3660，購入地Sigma-Aldrich Japan株式會社)，配制2μg/mL的鮭魚降鈣素溶液。將0.5mL此鮭魚降鈣素溶液與0.5mL脫乙酰殼多糖六聚物溶液混合，配制鮭魚降鈣素濃度為1μg/mL的組合物。
比較例1除使用等量的脫乙酰殼多糖(制品名CHITOSAN EF，平均分子量48000、LOT0302190，購入地日本油脂株式會社)代替脫乙酰殼多糖六聚物之外，按照與上述實(shí)施例1相同的方法，配制IFNα濃度為2000萬IU/mL(約0.01w/v％)的組合物。
比較例2除不使用脫乙酰殼多糖六聚物之外，按照與上述實(shí)施例1相同的方法，配制IFNα濃度為2000萬IU/mL(約0.01w/v％)的組合物。
比較例3除不使用脫乙酰殼多糖六聚物之外，按照與上述實(shí)施例5相同的方法，配制鮭魚降鈣素濃度為1μg/mL的組合物。
試驗(yàn)例1為了研究上述實(shí)施例1-4及比較例1-2的組合物的粘膜吸收特性，特別是在肺粘膜的吸收特性，進(jìn)行以下試驗(yàn)。
使用禁食約18小時(shí)的Wistar系雄性大鼠(體重約200g)作為實(shí)驗(yàn)動物。在異氟烷麻醉的狀態(tài)下固定大鼠，將聚四氟乙烯管(內(nèi)徑0.8mm，外徑1.6mm)從口腔插入氣管內(nèi)約5cm。通過此聚四氟乙烯管以0.5mL/kg的劑量向氣管內(nèi)給與上述實(shí)施例1-4及比較例1-2的組合物。氣管內(nèi)給藥后，于第30分鐘、1、2、3、4、5、6、8、10小時(shí)從鎖骨下靜脈采血0.2mL，通過以1800g離心10分鐘，得到血清。使用采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)的人IFNα測定試劑盒(制造經(jīng)銷商株式會社日本抗體研究所)測定所得血清中的IFNα濃度。
所得結(jié)果如圖1及表1所示。圖1表示血清中IFNα的平均濃度的經(jīng)時(shí)變化(n＝4)。表1表示藥代動力學(xué)參數(shù)的平均值(n＝4)。需要說明的是，表1中的各參數(shù)表示如下含義。
AUC10hr至給藥后10小時(shí)的血清中濃度-時(shí)間曲線下面積(IU·hr/mL)AUCinf至給藥后無限長時(shí)間的血清中濃度-時(shí)間曲線下面積(IU·hr/mL)Cmax最高血中濃度(IU/mL)Tmax達(dá)到最高血中濃度的時(shí)間(hr)通過此結(jié)果可以確認(rèn)，將脫乙酰殼多糖六聚物、脫乙酰殼多糖二聚體、分子量為1800的殼寡糖、或葡糖胺與IFNα共同配合形成的組合物(實(shí)施例1-4)，與配合脫乙酰殼多糖(分子量48000)的組合物(比較例1)或只含有IFNα的組合物(比較例2)相比，最高血中濃度(Cmax)及至給藥后10小時(shí)的血清中濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC10hr)都增加。


從以上結(jié)果可知，通過同時(shí)配合生理活性肽或蛋白質(zhì)和聚合度為2～20的殼寡糖或葡糖胺，能夠提高組合物中的生理活性肽或蛋白質(zhì)的經(jīng)粘膜吸收性，顯著地改善生物利用度(生物學(xué)的利用能力)。
試驗(yàn)例2為了研究上述實(shí)施例5及比較例3的組合物的粘膜吸收特性，特別是在肺粘膜的吸收特性，進(jìn)行以下試驗(yàn)。
使用禁食約18小時(shí)的Wistar系雄性大鼠(體重約200g)作為實(shí)驗(yàn)動物。在異氟烷麻醉的狀態(tài)下固定大鼠，分別向氣管內(nèi)給與0.1mL上述實(shí)施例5及比較例3的組合物。于給藥后第10分鐘、30分鐘、1、2、3、4、5、6小時(shí)從鎖骨下靜脈采血0.2mL，通過以1800g離心10分鐘，得到血清。使用采用甲基二甲苯酚藍(lán)(MXB)法的鈣測定試劑盒(制造經(jīng)銷商和光純藥株式會社)測定所得血清中的鈣濃度。
通過此結(jié)果可以確認(rèn)，同時(shí)配合鮭魚降鈣素與脫乙酰殼多糖六聚物形成的組合物(實(shí)施例5)，與只含有鮭魚降鈣素的組合物(比較例3)相比，血清中鈣降低作用高3.8倍，給與實(shí)施例5的組合物產(chǎn)生的該作用在給藥后至少可持續(xù)6小時(shí)。
產(chǎn)業(yè)上的可利用性本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物，通過使分子量在3000以下的聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽與具有生理活性的肽或蛋白質(zhì)共存，能夠改善具有生理活性的肽或蛋白質(zhì)的經(jīng)粘膜吸收特性。所以，本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物能夠有效地發(fā)揮以具有生理活性的肽或蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的藥效作用。
另外，本發(fā)明的經(jīng)粘膜用組合物，與給患者帶來痛苦的注射不同，由于能夠自己對鼻粘膜、肺粘膜、陰道粘膜、消化道粘膜等粘膜給藥，因此作為必須長時(shí)間反復(fù)給藥的生理活性肽或蛋白質(zhì)的經(jīng)粘膜用制劑極其有用。
權(quán)利要求
1.一種經(jīng)粘膜用組合物，其特征為含有下述成分(i)及(ii)(i)選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種，及(ii)選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及這些物質(zhì)的鹽中的至少一種。
2.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，成分(i)為選自抗生素、造血劑、傳染病治療劑、抗癡呆劑、抗病毒劑、抗腫瘤劑、解熱劑、鎮(zhèn)痛劑、消炎劑、抗?jié)儎?、抗過敏劑、抗抑郁劑、精神治療藥物、強(qiáng)心劑、心律失常治療劑、血管擴(kuò)張劑、降壓劑、糖尿病治療劑、抗凝血劑、降膽固醇劑、骨質(zhì)疏松癥治療劑、激素制劑及疫苗中的至少一種。
3.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，成分(i)為選自細(xì)胞因子、肽激素、生長因子、作用于心血管系統(tǒng)的因子、細(xì)胞粘附因子、作用于中樞及末梢神經(jīng)系統(tǒng)的因子、作用于體液電解質(zhì)及血液有機(jī)物質(zhì)的因子、作用于骨及骨骼的因子、作用于消化系統(tǒng)的因子、作用于腎及泌尿系統(tǒng)的因子、作用于結(jié)締組織及皮膚的因子、作用于感覺器官的因子、作用于免疫系統(tǒng)的因子、作用于呼吸系統(tǒng)的因子、作用于生殖系統(tǒng)的因子及酶中的至少一種。
4.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，成分(i)為選自干擾素、白細(xì)胞介素、胰島素、生長激素、降鈣素、黃體生成素釋放激素、腎上腺皮質(zhì)激素、黃體生成素、甲狀旁腺激素及甲狀旁腺激素的活性片段中的至少一種。
5.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，成分(ii)為選自聚合度為2～15的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種。
6.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，其中，相對于100重量份的成分(i)，以0.001～1×106重量份的比例含有所述成分(ii)。
7.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，是以1×10-6～30w/v％的比例含有成分(i)的液體狀組合物。
8.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，是以0.01～30w/v％的比例含有成分(ii)的液體狀組合物。
9.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，是以1×10-5～99重量％的比例含有成分(i)的固體狀組合物。
10.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，是以0.1～50重量％的比例含有成分(ii)的固體狀組合物。
11.如權(quán)利要求1所述的經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物是經(jīng)鼻用組合物、經(jīng)消化器官用組合物、經(jīng)肺用組合物、經(jīng)口腔粘膜用組合物、經(jīng)眼粘膜用組合物或經(jīng)陰道粘膜用組合物。
12.一種提高經(jīng)粘膜吸收的方法，所述方法能夠提高哺乳動物對選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種的經(jīng)粘膜吸收，其特征為，對哺乳動物的粘膜給與(i)選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種，及(ii)選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，所述方法對哺乳動物粘膜給與權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的經(jīng)粘膜用組合物。
14.含有下述成分(i)和(ii)的組合物在制備經(jīng)粘膜用組合物中的用途，成分(i)為選自具有藥理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種，成分(ii)為選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于提供一種經(jīng)粘膜用組合物，所述組合物被設(shè)計(jì)成為能夠使藥理活性肽及蛋白質(zhì)透過肺粘膜、鼻粘膜、口腔粘膜、陰道粘膜、眼粘膜、胃粘膜、消化道粘膜等粘膜有效地被吸收。通過配合下述成分(i)及(ii)配制經(jīng)粘膜用組合物(i)選自具有生理活性的肽及蛋白質(zhì)中的至少一種，及(ii)選自聚合度為2～20的殼寡糖、其衍生物、葡糖胺及上述物質(zhì)的鹽中的至少一種。
文檔編號A61K47/36GK101018560SQ20058003086
公開日2007年8月15日 申請日期2005年9月12日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月15日
發(fā)明者山本昌, 山田圭吾 申請人:大塚制藥株式會社