專利名稱：抗菌酰胺大環(huán)類iv的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗菌酰胺大環(huán)類和它們的制備方法，它們?cè)谥委熀?或預(yù)防疾病中的應(yīng)用，和它們?cè)谥苽溆糜谥委熀?或預(yù)防疾病、特別是細(xì)菌感染的藥物中的應(yīng)用。
WO 03/106480和WO 04/012816描述了雙苯霉素B型大環(huán)類，其具有抗菌活性并且分別具有酰胺和酯取代基。
US 3,452,136，德國斯圖加特大學(xué)R.U.Meyer的論文(1991)，德國斯圖加特大學(xué)V.Leitenberger的論文(1991)，Synthesis(1992)，(10)，1025-30，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1(1992)，(1)，123-30，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.(1991)，(10)，744，Synthesis(1991)，(5)，409-13，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.(1991)，(5)，275-7，J.Antibiot.(1985)，38(11)，1462-8，J.Antibiot.(1985)，38(11)，1453-61描述了天然產(chǎn)物雙苯霉素B具有抗菌活性。合成雙苯霉素B的一些步驟在Synlett(2003)，4，522-526中描述。
Chirality(1995)，7(4)，181-92，J.Antibiot.(1991)，44(6)，674-7，J.Am.Chem.Soc.(1989)，111(19)，7323-7，J.Am.Chem.Soc.(1989)，111(19)，7328-33，J.Org.Chem.(1987)，52(24)，5435-7，Anal.Biochem.(1987)，165(1)，108-13，J.Org.Chem.(1985)，50(8)，1341-2，J.Antibiot.(1993)，46(3)，C-2，J.Antibiot.(1993)，46(1)，135-40，Synthesis(1992)，(12)，1248-54，Appl.Environ.Microbiol.(1992)，58(12)，3879-8，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.(1992)，(13)，951-3描述了結(jié)構(gòu)相關(guān)的天然產(chǎn)物，雙苯霉素A，其在大環(huán)上進(jìn)一步被羥基基團(tuán)取代。
這些天然產(chǎn)物在它們性質(zhì)方面不符合對(duì)抗菌藥物的要求。盡管在市場上可獲得具有抗菌活性的結(jié)構(gòu)不同的藥劑，抗性的發(fā)展是經(jīng)?？赡艿?。因此，需要用于好的和更有效治療的新型藥劑。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供新的和備選的化合物，其對(duì)于治療人和動(dòng)物中的細(xì)菌性疾病具有相同或改善的抗菌效果。
已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)這些天然產(chǎn)物的某些衍生物對(duì)雙苯霉素-抗性的金黃色葡萄球菌(S.aureus)菌株(RN4220BiR和T17)具有抗菌活性，在所述衍生物中天然產(chǎn)物的羧基被包含堿性基團(tuán)的酰胺基團(tuán)替代。
另外，所述衍生物顯示對(duì)金黃色葡萄球菌野生型菌株和雙苯霉素-抗性的金黃色葡萄球菌菌株的改善的自發(fā)抗性率。
本發(fā)明涉及式(I)的化合物， 其中R7表示下式的基團(tuán) 其中R1表示氫或羥基，*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R2表示氫，甲基或乙基，R3表示下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，A表示一個(gè)鍵或苯基，R4表示氫，氨基或羥基，R5表示下式的基團(tuán) 其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R23表示氫或下式的基團(tuán)*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，n和o彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，m是0或1的數(shù)字，R8和R12彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán)*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R14和R15彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4a表示氫，氨基或羥基，R5a表示氫，甲基或氨基乙基，R6a表示氫或氨基乙基，或R5a和R6a與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8a和R12a彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1a和Z2a彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R13a表示氫或甲基，并且R14a和R15a彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4c表示氫，氨基或羥基，R5c表示氫，甲基或氨基乙基，R6c表示氫或氨基乙基，
kc是0或1的數(shù)字，并且lc是1，2，3或4的數(shù)字，R9a和R11a彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10a表示氨基或羥基，R16a表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4d表示氫，氨基或羥基，R5d表示氫，甲基或氨基乙基，R6d表示氫或氨基乙基，kd是0或1的數(shù)字，并且ld是1，2，3或4的數(shù)字，ka是0或1的數(shù)字，并且la，wa，xa和ya彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，R9和R11彼此獨(dú)立地表示氫，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R20表示氫或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氫或甲基，并且
i是1，2或3的數(shù)字，R21表示氫或甲基，f是數(shù)字0，1，2或3，g是1，2或3的數(shù)字，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1是1，2或3的數(shù)字，并且R9表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，R10表示氨基或羥基，R16和R17彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，
R4b表示氫，氨基或羥基，R5b表示氫，甲基或氨基乙基，R6b表示氫或氨基乙基，或R5b和R6b與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8b和R12b彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1b-OH，*-(CH2)Z2b-NHR13b，*-CONHR14b或*-CH2CONHR15b，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13b表示氫或甲基，并且Z1b和Z2b彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，并且R14b和R15b彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4g表示氫，氨基或羥基，R5g表示氫，甲基或氨基乙基，R6g表示氫或氨基乙基，kg是0或1的數(shù)字，并且lg是1，2，3或4的數(shù)字，R9b和R11b彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10b表示氨基或羥基，kb是0或1的數(shù)字，lb，wb，xb和yb彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，R18和R19彼此獨(dú)立地表示氫或下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4e表示氫，氨基或羥基，R5e表示氫，甲基或氨基乙基，R6e表示氫或氨基乙基，或R5e和R6e與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8e和R12e彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13e表示氫或甲基，并且Z1e和Z2e彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9e和R11e彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10e表示氨基或羥基，ke是0或1的數(shù)字，并且le，we，xe和ye彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，其中R18和R19不同時(shí)為氫，R24表示下式的基團(tuán)*-CONHR25，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R25表示下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合點(diǎn)，R4f表示氫，氨基或羥基，R5f表示氫，甲基或氨基乙基，R6f表示氫或氨基乙基，或R5f和R6f與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8f和R12f彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13f表示氫或甲基，并且Z1f和Z2f彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9f和R11f彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10f表示氨基或羥基，kf是0或1的數(shù)字，并且lf，wf，xf和yf彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，d和e彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，k是0或1的數(shù)字，l，w，x和y彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，當(dāng)w，x或y等于3時(shí)， 彼此獨(dú)立地可以攜帶羥基基團(tuán)，和它們的鹽、它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
本發(fā)明的化合物是式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物，由式(I)包括的并且以下作為例舉性實(shí)施方案提及的化合物、和鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物，如果由式(I)所涵蓋并且在下文提及的化合物還不是鹽、溶劑合物、所述鹽的溶劑合物。
取決于它們的結(jié)構(gòu)，本發(fā)明的化合物以立體異構(gòu)型(對(duì)映異構(gòu)體，非對(duì)映異構(gòu)體)存在。因此，本發(fā)明涉及對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體及其各自的混合物。從對(duì)映異構(gòu)體和/或非對(duì)映異構(gòu)體的這些混合物中，立體異構(gòu)純的組分可以以已知方法分離出來是可能的，所述方法如在手性相上的色譜分離或使用手性胺或手性酸的結(jié)晶。
取決于化合物的結(jié)構(gòu)，本發(fā)明還涉及化合物的互變異構(gòu)體。
優(yōu)選用于本發(fā)明的目的鹽是本發(fā)明的化合物的生理可接受的鹽。
化合物(I)的生理可接受的鹽包括無機(jī)酸、羧酸和磺酸的酸加成鹽，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、富馬酸、馬來酸、三氟乙酸和苯甲酸的鹽。
化合物(I)的生理可接受的鹽還包括常用的堿的鹽，諸如，作為實(shí)例，并且優(yōu)選地堿金屬鹽(例如，鈉和鉀鹽)，堿土金屬鹽(例如鈣和鎂鹽)和衍生自氨或具有1-16個(gè)碳原子的有機(jī)胺的銨鹽，所述有機(jī)胺諸如作為實(shí)例，并且優(yōu)選地，乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二異丙胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二環(huán)己胺、二甲基氨基乙醇、普魯卡因、二芐基胺、N-甲基嗎啉、二氫樅胺(Dihydroabietylamine)、精氨酸、賴氨酸、乙二胺和甲基哌啶。
對(duì)于本發(fā)明的目的而言，溶劑合物指通過與溶劑分子的配位作用形成固體或液體狀態(tài)的復(fù)合物的化合物的那些形式。水合物是溶劑合物的特殊形式，其中與水發(fā)生配位作用。
碳原子上的符號(hào)#是指化合物相對(duì)于該碳原子上的構(gòu)型是對(duì)映異構(gòu)純的形式，在本發(fā)明上下文是指對(duì)映異構(gòu)體超過多于90％(＞90％ee)。
在R3可以表示的各式基團(tuán)中，旁邊存在*的線的端點(diǎn)不表示碳原子或CH2基團(tuán)，而是與R3鍵合的氮原子的鍵的一部分。
在R7可以表示的各式基團(tuán)中，旁邊存在*的線的端點(diǎn)不表示碳原子或CH2基團(tuán)，而是與R7鍵合的氮原子的鍵的一部分。
在本發(fā)明上下文中優(yōu)選式(I)的化合物，其中R7表示下式的基團(tuán) 其中R1表示氫或羥基，*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R2表示氫，甲基或乙基，R3表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，A表示一個(gè)鍵或苯基，R4表示氫，氨基或羥基，R5表示下式的基團(tuán)
其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R23表示氫或下式的基團(tuán)*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，n和o彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，m是0或1的數(shù)字，R8和R12彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán)*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R14和R15彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4a表示氫，氨基或羥基，R5a表示氫，甲基或氨基乙基，R6a表示氫或氨基乙基，或R5a和R6a與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8a和R12a彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，
其中*是與碳原子鍵合的點(diǎn)，Z1a和Z2a彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R13a表示氫或甲基，并且R14a和R15a彼此獨(dú)立地是下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4c表示氫，氨基或羥基，R5c表示氫，甲基或氨基乙基，R6c表示氫或氨基乙基，kc是0或1的數(shù)字，并且lc是1，2，3或4的數(shù)字，R9a和R11a彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10a表示氨基或羥基，R16a表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4d表示氫，氨基或羥基，R5d表示氫，甲基或氨基乙基，R6d表示氫或氨基乙基，kd是0或1的數(shù)字，并且ld是1，2，3或4的數(shù)字，
ka是0或1的數(shù)字，并且la，wa，xa和ya彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，R9和R11彼此獨(dú)立地表示氫，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R20表示氫或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氫或甲基，并且i是1，2或3的數(shù)字，R21表示氫或甲基，f是0，1，2或3的數(shù)字，g是1，2或3的數(shù)字，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1是1，2或3的數(shù)字，并且R9表示下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，R10表示氨基或羥基，R16和R17彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4b表示氫，氨基或羥基，R5b表示氫，甲基或氨基乙基，R6b表示氫或氨基乙基，或R5b和R6b與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8b和R12b彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1b-OH或*-(CH2)Z2b-NHR13b，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13b表示氫或甲基，并且Z1b和Z2b彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9b和R11b彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10b表示氨基或羥基，kb是0或1的數(shù)字，lb，wb，xb和yb彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，R18和R19彼此獨(dú)立地表示氫或下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4e表示氫，氨基或羥基，R5e表示氫，甲基或氨基乙基，R6e表示氫或氨基乙基，或R5e和R6e與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8e和R12e彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13e表示氫或甲基，并且Z1e和Z2e彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9e和R11e彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10e表示氨基或羥基，ke是0或1的數(shù)字，并且le，we，xe和ye彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，其中R18和R19不同時(shí)為氫，R24表示下式的基團(tuán)*-CONHR25，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R25表示下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4f表示氫，氨基或羥基，R5f表示氫，甲基或氨基乙基，R6f表示氫或氨基乙基，或R5f和R6f與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8f和R12f彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13f表示氫或甲基，并且Z1f和Z2f彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9f和R11f彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10f表示氨基或羥基，kf是0或1的數(shù)字，并且lf，wf，xf和yf彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，d和e彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，k是0或1的數(shù)字，l，w，x和y彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，當(dāng)w，x或y等于3時(shí)， 彼此獨(dú)立地可以攜帶羥基基團(tuán)，和它們的鹽，它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明中還優(yōu)選式(Ia)的化合物， 其中R1表示氫或羥基，R2表示氫，甲基或乙基，R3如上定義，和它們的鹽，它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明中還優(yōu)選式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4表示氫，氨基或羥基，R5表示下式的基團(tuán) 其中
*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R23表示氫或下式的基團(tuán)*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，n和o彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，m是0或1的數(shù)字，R8表示下式的基團(tuán)*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R14和R15彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4a表示氫，氨基或羥基，R5a表示氫，甲基或氨基乙基，R6a表示氫或氨基乙基，或R5a和R6a與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8a和R12a彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1a和Z2a彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R13a表示氫或甲基，
并且R14a和R15a彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4c表示氫，氨基或羥基，R5c表示氫，甲基或氨基乙基，R6c表示氫或氨基乙基，kc是0或1的數(shù)字，并且lc是1，2，3或4的數(shù)字，R9a和R11a彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10a表示氨基或羥基，R16a表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4d表示氫，氨基或羥基，R5d表示氫，甲基或氨基乙基，R6d表示氫或氨基乙基，kd是0或1的數(shù)字，并且ld是1，2，3或4的數(shù)字，ka是0或1的數(shù)字，并且la，wa，xa和ya彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，
R9和R11彼此獨(dú)立地表示氫，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R20表示氫或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氫或甲基，并且i是1，2或3的數(shù)字，R21表示氫或甲基，f是數(shù)字0，1，2或3，g是1，2或3的數(shù)字，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1是1，2或3的數(shù)字，并且R9表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，并且
h是1，2，3或4的數(shù)字，R10表示氨基或羥基，R24表示下式的基團(tuán)*-CONHR25，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R25表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4f表示氫，氨基或羥基，R5f表示氫，甲基或氨基乙基，R6f表示氫或氨基乙基，或R5f和R6f與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8f和R12f彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13f表示氫或甲基，并且Z1f和Z2f彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9f和R11f彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10f表示氨基或羥基，kf是0或1的數(shù)字，并且
lf，wf，xf和yf彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，k是0或1的數(shù)字，l，w和x 彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，當(dāng)w或x等于3時(shí)， 彼此獨(dú)立地可以攜帶羥基基團(tuán)，和它們的鹽，它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明中特別優(yōu)選式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4表示氫，氨基或羥基，R5表示下式的基團(tuán) 其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R23表示氫或下式的基團(tuán)*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，n和o彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，m是0或1的數(shù)字，k是0或1的數(shù)字，l是1，2，3或4的數(shù)字，和它們的鹽，它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明中還特別優(yōu)選式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R8表示下式的基團(tuán)*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R14和R15彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4a表示氫，氨基或羥基，R5a表示氫，甲基或氨基乙基，R6a表示氫或氨基乙基，或R5a和R6a與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8a和R12a彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1a和Z2a彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R13a表示氫或甲基，并且
R14a和R15a彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4c表示氫，氨基或羥基，R5c表示氫，甲基或氨基乙基，R6c表示氫或氨基乙基，kc是0或1的數(shù)字，并且lc是1，2，3或4的數(shù)字，R9a和R11a彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10a表示氨基或羥基，R16a表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4d表示氫，氨基或羥基，R5d表示氫，甲基或氨基乙基，R6d表示氫或氨基乙基，kd是0或1的數(shù)字，并且ld是1，2，3或4的數(shù)字，ka是0或1的數(shù)字，并且la，wa，xa和ya彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，R9和R11彼此獨(dú)立地表示氫，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R20表示氫或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氫或甲基，并且i是1，2或3的數(shù)字，R21表示氫或甲基，f是數(shù)字0，1，2或3，g是1，2或3的數(shù)字，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1是1，2或3的數(shù)字，并且R9表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，
R10表示氨基或羥基，R24表示下式的基團(tuán)*-CONHR25，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R25表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4f表示氫，氨基或羥基，R5f表示氫，甲基或氨基乙基，R6f表示氫或氨基乙基，或R5f和R6f與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8f和R12f彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13f表示氫或甲基，并且Z1f和Z2f彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9f和R11f彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10f表示氨基或羥基，kf是0或1的數(shù)字，并且lf，wf，xf和yf彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，
w和x彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，當(dāng)w或x等于3時(shí) 彼此獨(dú)立地可以攜帶羥基基團(tuán)，和它們的鹽，它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明中還優(yōu)選式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R12表示下式的基團(tuán)*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R14和R15彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4a表示氫，氨基或羥基，R5a表示氫，甲基或氨基乙基，R6a表示氫或氨基乙基，或R5a和R6a與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，
R8a和R12a彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1a和Z2a彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R13a表示氫或甲基，并且R14a和R15a彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4c表示氫，氨基或羥基，R5c表示氫，甲基或氨基乙基，R6c表示氫或氨基乙基，kc是0或1的數(shù)字，并且lc是1，2，3或4的數(shù)字，R9a和R11a彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10a表示氨基或羥基，R16a表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4d表示氫，氨基或羥基，R5d表示氫，甲基或氨基乙基，R6d表示氫或氨基乙基，kd是0或1的數(shù)字，
并且ld是1，2，3或4的數(shù)字，ka是0或1的數(shù)字，并且la，wa，xa和ya彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，y是1，2，3或4的數(shù)字，當(dāng)y等于3時(shí) 可以攜帶羥基基團(tuán)，和它們的鹽，它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
在本發(fā)明中還優(yōu)選式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，A表示一個(gè)鍵或苯基，R16和R17彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4b表示氫，氨基或羥基，R5b表示氫，甲基或氨基乙基，R6b表示氫或氨基乙基，或
R5b和R6b與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8b和R12b彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1b-OH或*-(CH2)Z2b-NHR13b，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13b表示氫或甲基，并且Z1b和Z2b彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9b和R11b彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10b表示氨基或羥基，kb是0或1的數(shù)字，lb，wb，xb和yb彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，d是1，2或3的數(shù)字，和它們的鹽，它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
這些之中，特別優(yōu)選的化合物是那些化合物，其中R3表示下式的基團(tuán) 特別是下式的基團(tuán) 在本發(fā)明中還優(yōu)選式(I)或(Ia)的化合物，其中R3表示下式的基團(tuán)
其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R18和R19彼此獨(dú)立地表示氫或下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4e表示氫，氨基或羥基，R5e表示氫，甲基或氨基乙基，R6e表示氫或氨基乙基，或R5e和R6e與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8e和R12e彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13e表示氫或甲基，并且Z1e和Z2e彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9e和R11e彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10e表示氨基或羥基，ke是0或1的數(shù)字，并且le，we，xe和ye彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，其中R18和R19不同時(shí)為氫，e是1，2或3的數(shù)字，和它們的鹽，它們的溶劑合物和它們的鹽的溶劑合物。
本發(fā)明還涉及制備式(I)化合物或它們的鹽、它們的溶劑合物或它們的鹽的溶劑合物的方法，其中按照該方法[A]式(II)的化合物， 其中R2和R7具有以上所述含義，和boc是叔丁氧羰基，在兩步方法中首先在一種或多種脫水劑的存在下與式(III)的化合物反應(yīng)，H2NR3(III)，其中R3具有以上所述含義，并隨后與酸反應(yīng)和/或通過氫解反應(yīng)，或[B]式(IV)的化合物， 其中R2和R7具有以上所述含義，和Z是芐氧羰基，在兩步方法中首先在一種或多種脫水劑的存在下與式(III)的化合物反應(yīng)，H2NR3(III)，其中R3具有以上所述含義，并隨后與酸反應(yīng)和/或通過氫解反應(yīng)。
所述鹽的游離堿例如可以通過在反相柱上的色譜法而獲得，所述色譜法使用乙腈-水梯度并加入堿，特別是通過使用RP18 Phenomenex LunaC18(2)柱和作為堿的二乙胺。
本發(fā)明還涉及制備如權(quán)利要求1中要求保護(hù)的式(I)化合物或它們的溶劑合物的方法，其中將所述化合物的鹽或所述化合物的鹽的溶劑合物在加入堿的情況下通過色譜法轉(zhuǎn)化為所述化合物。
當(dāng)適當(dāng)時(shí)，在與式(III)化合物的反應(yīng)過程中將R1上的羥基基團(tuán)用叔丁基二甲基甲硅烷基基團(tuán)保護(hù)，該叔丁基二甲基甲硅烷基在第二個(gè)反應(yīng)步驟中去除。
將式(III)化合物的基團(tuán)R3中的反應(yīng)性官能度引入已經(jīng)保護(hù)的合成，優(yōu)選酸不穩(wěn)定的保護(hù)基(例如boc)。在已經(jīng)反應(yīng)獲得式(I)化合物后，可以通過脫保護(hù)反應(yīng)去除保護(hù)基。這可以通過保護(hù)基化學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行。優(yōu)選在酸性條件下的脫保護(hù)反應(yīng)或通過氫解。
在方法[A]和[B]的第一步中的反應(yīng)通常在惰性溶劑中、當(dāng)適當(dāng)時(shí)在堿的存在下、優(yōu)選在0℃至40℃的溫度范圍內(nèi)并且在大氣壓力下進(jìn)行。
就此而論，適合的脫水劑的實(shí)例包括碳二亞胺諸如N，N′-二乙基-，N，N，′-二丙基-，N，N′-二異丙基-，N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺，N-(3-二甲基氨基異丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)，N-環(huán)己基碳二亞胺-N‘-丙基氧基甲基聚苯乙烯(PS-碳二亞胺)或羰基化合物諸如羰二咪唑，或1，2-噁唑鎓(oxazolium)化合物諸如2-乙基-5-苯基-1，2-噁唑鎓-3-硫酸鹽或2-叔-丁基-5-甲基異噁唑鎓高氯酸鹽，或?；被衔镏T如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氫喹啉，或丙烷膦酸酐，或氯甲酸異丁酯，或二(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯，或苯并三唑基氧基-三-(二甲基氨基)六氟膦酸鏻，或O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HBTU)，2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TPTU)或O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)，或1-羥基苯并三唑(HOBt)，或苯并三唑-1-基氧基三-(二甲基氨基)六氟膦酸鏻(BOP)，或其混合物，或其與堿的混合物。
堿的實(shí)例包括堿金屬碳酸鹽，諸如，例如，碳酸鈉或碳酸鉀，或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀，或有機(jī)堿諸如三烷基胺，例如，三乙胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶或二異丙基乙胺。
與HATU的縮合優(yōu)選在堿(特別是二異丙基乙胺)的存在下、或與EDC和HOBt在堿(特別是三乙胺)的存在下進(jìn)行。
惰性溶劑的實(shí)例包括鹵代烴如二氯甲烷或三氯甲烷，烴如苯，或硝基甲烷，二噁烷，二甲基甲酰胺或乙腈。同樣可以使用溶劑的混合物。特別優(yōu)選二甲基甲酰胺。
在方法[A]和[B]的第二步與酸的反應(yīng)優(yōu)選在0℃至40℃的溫度范圍內(nèi)、在大氣壓力下進(jìn)行。
就此而論，適當(dāng)?shù)乃岚ǘf烷中的氯化氫，乙酸中的溴化氫或二氯甲烷中的三氟乙酸。
在方法[B]的第二步中的氫解通常在溶劑中在氫和活性炭上的鈀的存在下、優(yōu)選在0℃至40℃的溫度范圍內(nèi)在大氣壓力下進(jìn)行。
溶劑的實(shí)例包括醇如甲醇、乙醇、正丙醇或異丙醇，與水和冰醋酸混合，優(yōu)選與乙醇、水和冰醋酸的混合物。
式(III)的化合物是已知的或者可以類似于已知方法制備。
式(II)的化合物是已知的或者可以通過將式(V)的化合物與二(叔丁基)二碳酸酯在堿的存在下反應(yīng)來制備， 其中R2和R7具有以上所述含義。
反應(yīng)通常在溶劑中、優(yōu)選在0℃至40℃的溫度范圍內(nèi)在大氣壓下進(jìn)行。
堿的實(shí)例包括堿金屬氫氧化物如氫氧化鈉或氫氧化鉀，或堿金屬碳酸鹽如碳酸銫、碳酸鈉或碳酸鉀，或其它堿如DBU、三乙胺或二異丙基乙胺，優(yōu)選氫氧化鈉或碳酸鈉。
溶劑的實(shí)例包括鹵代烴如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷，醇如甲醇、乙醇或異丙醇，或水。
反應(yīng)優(yōu)選與水中的氫氧化鈉或甲醇中的碳酸鈉進(jìn)行。
式(V)的化合物是已知的或者可以如下制備將式(VI)的化合物 其中R2和R7具有以上所述含義，并且R26表示芐基，甲基或乙基，與酸或通過氫解反應(yīng)，如關(guān)于方法[B]的第二步所述，當(dāng)適當(dāng)時(shí)隨后與堿反應(yīng)以水解甲酯或乙酯。
該水解可以例如如關(guān)于將式(VI)化合物反應(yīng)以獲得式(IV)化合物所述來進(jìn)行。
式(IV)的化合物是已知的或者可以通過水解式(VI)化合物中的芐酯、甲酯或乙酯來制備。
該反應(yīng)通常在溶劑中在堿的存在下、優(yōu)選在0℃至40℃的溫度范圍內(nèi)在大氣壓下進(jìn)行。
堿的實(shí)例包括堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰、鈉或鉀，優(yōu)選氫氧化鋰。
溶劑的實(shí)例包括鹵代烴如二氯甲烷或三氯甲烷，醚類，如四氫呋喃或二噁烷，或醇類，如甲醇、乙醇或異丙醇，或二甲基甲酰胺。同樣可以使用溶劑的混合物或溶劑與水的混合物。四氫呋喃或甲醇和水的混合物是特別優(yōu)選的。
式(VI)的化合物是已知的或者可以如下制備將式(VII)的化合物
其中R2，R7和R26具有以上所述含義，在第一步中與酸反應(yīng)，如關(guān)于方法[A]和[B]的第二步所述，和在第二步中與堿反應(yīng)。
在第二步中與堿的反應(yīng)通常在溶劑中、優(yōu)選在0℃至40℃的溫度范圍內(nèi)在大氣壓下進(jìn)行。
堿的實(shí)例包括堿金屬氫氧化物如氫氧化鈉或氫氧化鉀，或堿金屬碳酸鹽如碳酸銫、碳酸鈉或碳酸鉀，或其它堿如DBU、三乙胺或二異丙基乙胺，優(yōu)選三乙胺。
溶劑的實(shí)例包括鹵代烴如氯仿、二氯甲烷或1，2-二氯乙烷，或四氫呋喃，或溶劑的混合物，優(yōu)選二氯甲烷或四氫呋喃。
式(VII)的化合物是已知的或者可以如下制備式(VIII)的化合物 其中R2，R7和R26具有以上所述含義，與五氟苯酚在脫水劑的存在下反應(yīng)，如關(guān)于方法[A]和[B]的第一步所述。
該反應(yīng)優(yōu)選與DMAP和EDC在二氯甲烷中、在-40℃至40℃的溫度范圍內(nèi)在大氣壓下進(jìn)行。
式(VIII)化合物是已知的或者可以如下制備式(IX)的化合物 其中R2，R7和R26具有以上所述含義，與氟化物、特別是與氟化四丁銨反應(yīng)。
該反應(yīng)通常在溶劑中、優(yōu)選在-10℃至30℃的溫度范圍內(nèi)在大氣壓下進(jìn)行。
惰性溶劑的實(shí)例包括鹵代烴如二氯甲烷，或烴如苯或甲苯，或醚類如四氫呋喃或二噁烷，或二甲基甲酰胺。同樣可以使用溶劑的混合物。四氫呋喃和二甲基甲酰胺是優(yōu)選的溶劑。
式(IX)的化合物是已知的或者可以如下制備式(X)的化合物 其中R2和R26具有以上所述含義，與式(XI)的化合物在脫水劑的存在下反應(yīng)，如關(guān)于方法[A]和[B]的第一步所述，
其中R7具有上述含義。
式(X)化合物是已知的或者可以類似于實(shí)施例部分所述方法制備。
式(XI)化合物是已知的或者可以類似于已知方法制備。
本發(fā)明的化合物顯示不能被預(yù)測的有價(jià)值的藥理學(xué)和藥物動(dòng)力學(xué)作用范圍。
它們因此適用于用作治療和/或預(yù)防人和動(dòng)物中疾病的藥物。
由于它們的藥理學(xué)性質(zhì)，本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)或者與其它活性成分組合用于治療和/或預(yù)防感染性疾病，特別是細(xì)菌感染。
例如，可以治療和/或預(yù)防由下列病原體或下列病原體的混合物導(dǎo)致的局部和/或系統(tǒng)疾病革蘭氏陽性球菌例如葡萄球菌(Staphylococci)(金黃色葡萄球菌(S.aureus)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis))和鏈球菌屬(streptococci)(無乳鏈球菌(S.agalactiae)、糞鏈球菌(Strept.faecalis)、肺炎鏈球菌(S.pneumoniae)、化膿鏈球菌(S.pyogenes))；革蘭氏陰性球菌(淋病奈瑟氏菌(neisseriagonorrhoeae))和革蘭氏陰性桿菌諸如腸桿菌科(enterobacteriaceae)，例如大腸桿菌(Escherichia coli)、流感嗜血桿菌(Haemophilus influenzae)、檸檬酸桿菌屬(Citrobacter)(弗氏檸檬酸桿菌(Citrob.freundii)、Citrob.divernis)、沙門氏菌屬(Salmonella)和志賀氏桿菌屬(Shigella)；還有克雷伯氏菌(klebsiellas)(肺炎克雷伯氏菌(Klebs.pneumoniae)、產(chǎn)酸克雷伯氏菌(Klebs.oxytocy))、腸桿菌屬(Enterobacter)(產(chǎn)氣腸桿菌(E.aerogenes)、成團(tuán)腸桿菌(E.agglomerans)、哈夫尼菌屬(Hafnia)、沙雷氏菌屬(Serratia)(粘質(zhì)沙雷氏菌(Serr.marcescens))、變形菌屬(Proteus)(奇異變形菌(Pr.mirabilis)、Pr.rettgeri，普通變形菌(Pr.vulgaris))、普羅威登斯菌屬(Providencia)、耶爾森氏菌屬(Yersinia)，和不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter)?？咕秶硗獍賳伟鷮?Pseudomonas)(銅綠假單胞菌(Ps.Aeruginosa)，(Ps.Maltophilia))和嚴(yán)格厭氧菌如脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)，消化球菌屬(Peptococcus)的代表，消化鏈球菌屬(Peptostreptococcus)，和梭狀芽胞桿菌屬(Clostridium)；還有枝原菌屬(mycoplasmas)(肺炎枝原體(M.pneumoniae)，人型枝原體(M.hominis)，M.urealyticum)和分枝桿菌屬(Mycobacteria)，例如結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)。
上述病原體列表僅應(yīng)被解釋為是例舉性的而絕非限制性的?？梢蕴岬降挠伤霾≡w或混合感染所引起并且可以通過本發(fā)明的制劑(可以局部使用)預(yù)防、改善或治愈的疾病例如有在人中的感染性疾病，如例如，膿毒性感染，骨和關(guān)節(jié)感染，皮膚感染，手術(shù)后傷口感染，膿腫，蜂窩織炎，傷口感染，感染的燒傷，燒傷創(chuàng)傷，口部區(qū)域的感染，牙科手術(shù)后的感染，膿毒性關(guān)節(jié)炎，乳腺炎，扁桃體炎，生殖器感染和眼部感染。
除人之外，還可以在其它物種中治療細(xì)菌感染?？梢蕴岬降膶?shí)例是豬大腸桿菌性腹瀉、腸原性毒血癥、敗血癥、痢疾、沙門氏菌病、子宮炎-乳腺炎-乳泌缺乏綜合征(agalactiae syndrome)、乳腺炎；反芻動(dòng)物(牛、綿羊、山羊)腹瀉、敗血癥、支氣管性肺炎、沙門氏菌病、巴斯德菌病、支原體病、生殖器感染；馬支氣管性肺炎、關(guān)節(jié)病、分娩的和分娩后感染、沙門氏菌??；狗和貓支氣管肺炎、腹瀉、皮炎、耳炎、尿路感染、前列腺炎；家禽(小雞、火雞、鵪鶉、鴿子、觀賞鳥類及其它)支原體病、大腸桿菌感染、慢性呼吸道疾病、沙門氏菌病、巴斯德菌病、鸚鵡熱。
它同樣可以在飼養(yǎng)和管理生產(chǎn)性和觀賞用魚類中治療細(xì)菌病，在該情形中所述抗菌譜從而在上述病原體上還延伸到病原體諸如，例如，巴斯德菌屬(Pasteurella)、布魯氏菌屬(Brucella)、彎曲桿菌屬(Campylobacter)、李斯特菌屬(Listeria)、丹毒絲菌屬(Erysipelothris)、棒狀桿菌(Corynebacteria)、疏螺旋體屬(Borellia)、密螺旋體(Treponema)、諾卡氏菌屬(Nocardia)、立克次氏體(Rickettsia)、耶爾森氏菌屬(Yersinia)。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物在治療和/或預(yù)防疾病、優(yōu)選細(xì)菌感染性疾病、特別是細(xì)菌感染中的應(yīng)用。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物用于治療和/或預(yù)防疾病，特別是上述疾病的應(yīng)用。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物用于生產(chǎn)治療和/或預(yù)防疾病、特別是上述疾病的藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明還涉及利用抗菌有效量的本發(fā)明化合物治療和/或預(yù)防疾病的方法，所述疾病特別是上述疾病。
本發(fā)明的化合物可以全身和/或局部起作用。為此目的，它們可以以適合的方式進(jìn)行施用，所述方式諸如，例如通過口服的、腸胃外的、經(jīng)肺的、經(jīng)鼻的、舌下的、舌的、頰的、直腸的、皮膚的、透皮的、結(jié)膜的或耳的途徑，或作為植入物或支架。
本發(fā)明的化合物可以以適合于這些給藥途徑的給藥形式進(jìn)行施用。
適合于口服給藥的是這樣的給藥形式，其按照現(xiàn)有技術(shù)發(fā)揮功能并且快速地和/或以改進(jìn)的方式遞送本發(fā)明的化合物，并且其包括晶體形式和/或非晶形形式和/或溶解形式的本發(fā)明的化合物，諸如，例如片劑(未包衣的或包衣片劑，例如具有這樣的包衣，所述包衣對(duì)胃液具有抗性或是不溶的或延緩溶解并且控制本發(fā)明的化合物的釋放)，快速在口腔中崩解的片劑或薄膜/糯米紙囊劑，薄膜/凍干物(lyophilisates)，膠囊(例如硬或軟明膠膠囊)，糖衣片劑，顆粒劑，丸劑，粉末，乳劑，混懸劑，氣溶膠或溶液。
腸胃外給藥的發(fā)生可以避免吸收步驟(例如，靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、心臟內(nèi)、脊髓內(nèi)或腰椎內(nèi))，或包含吸收(例如，肌內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、經(jīng)皮或腹膜內(nèi))。適合于腸胃外給藥的給藥形式特別是，用于注射和輸注的，以溶液、混懸液、乳劑、凍干物或無菌粉末存在的制劑。
適合于其它給藥途徑的實(shí)例是用于吸入的藥物形式(特別是粉末吸氣器，噴霧器)，滴鼻劑，溶液，噴霧劑；可以通過舌、舌下或頰施用的片劑、薄膜/糯米紙囊劑或膠囊；栓劑，用于眼和耳的制劑，陰道膠囊，水性混懸液(洗劑，振搖混合物)，親脂性混懸液，軟膏劑，乳膏劑，透皮治療系統(tǒng)(如，例如貼片)，乳，糊劑，泡沫，撲粉，植入物或支架。
可以將本發(fā)明的化合物轉(zhuǎn)化成為列出的給藥形式。其可以以本身已知的方式通過混合以惰性、非毒性的藥用的賦形劑來進(jìn)行。這些賦形劑包括，特別是，載體(例如微晶纖維素，乳糖，甘露醇)，溶劑(例如液體聚乙二醇)，乳化劑和分散劑或濕潤劑(例如十二烷基硫酸鈉，聚氧基失水山梨糖醇油酸酯)，粘合劑(例如聚乙烯吡咯烷酮)，合成的和天然的聚合物(例如白蛋白)，穩(wěn)定劑(例如抗氧化劑諸如抗壞血酸)，顏料(例如無機(jī)顏料諸如氧化鐵)或味道和/或氣味矯正劑本發(fā)明還涉及這樣的藥物和將其用于前述目的應(yīng)用，所述藥物包括至少一種本發(fā)明的化合物，以及通常地一種或多種惰性、非毒性藥用的賦形劑。
對(duì)于腸胃外給藥，每24小時(shí)施用約5至250mg/kg體重的量從而獲得有效結(jié)果通常證明是有利的。口服給藥的量約為每24小時(shí)5至100mg/kg體重。
然而，可能需要的是，當(dāng)需要時(shí)偏離提及的量，其具體地作為體重、給藥途徑、對(duì)活性成分的個(gè)體反應(yīng)、制劑性質(zhì)和給藥發(fā)生過程中的時(shí)間或間隔的函數(shù)。因此，在某些情形中以少于前述最少量進(jìn)行的施用可以是充分的，而在其它情形中，必須超過提及的上限。在更大量的施用的情形中，可以推薦將這些分成一天內(nèi)的多個(gè)單獨(dú)劑量。
在下述測試和實(shí)施例中的百分比數(shù)據(jù)是重量百分比，除非另外指出；份是重量份。液體/液體溶液的溶劑比率、稀釋比率和濃度數(shù)據(jù)在每種情形中是基于體積。
A.實(shí)施例所用縮略語abs.絕對(duì)的aq. 含水的Bn 芐基boc 叔丁氧羰基CDCl3氯仿CH 環(huán)己烷d 雙峰(在1H NMR中)dd 多個(gè)雙峰中的雙峰(在1H NMR中)DCC 二環(huán)己基碳二亞胺DIC 二異丙基碳二亞胺DIEA二異丙基乙胺(Hünig’s堿)DMSO二甲亞砜
DMAP 4-N，N-二甲基氨基吡啶DMF二甲基甲酰胺EA 乙酸乙酯(乙酸乙酯)EDCN’-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳二亞胺×HClESI電噴霧電離(在MS中)Fmoc 9-芴基甲氧羰基HATU 鄰-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N‘，N‘-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽HBTU O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽HOBt 1-羥基-1H-苯并三唑×H2Oh 小時(shí)HPLC 高壓，高效液相色譜法LC-MS 偶聯(lián)液相色譜-質(zhì)譜法m 多重峰(在1H NMR中)min分鐘MS 質(zhì)譜法NMR核磁共振光譜法MTBE 甲基叔丁基醚Pd/C 鈀/碳q 四重峰(在1H NMR中)Rf保留指數(shù)(在TLC中)RP 反相(在HPLC中)RT 室溫Rt保留時(shí)間(在HPLC中)s 單峰(在1H NMR中)sat飽和的t 三重峰(在1H NMR中)TBS叔丁基二甲基甲硅烷基TFA三氟乙酸THF四氫呋喃TLC薄層色譜法
TMSE2-(三甲基甲硅烷基)乙基TPTU2-(2-氧代-1(2H)-吡啶基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽Z 芐氧羰基LC-MS和HPLC方法方法1(HPLC)儀器HP1100，具有DAD檢測；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；洗脫劑A5ml的高氯酸/l水，洗脫劑B乙腈；梯度0min 2％B，0.5min 2％B，4.5min 90％B，6.5min 90％B；流速0.75ml/min；爐30℃；UV檢測210nm.
方法2(LC-MS)儀器Micromass Platform LCZ；柱Symmetry C18，50mm×2.1mm，3.5μm；溫度40℃；流速0.5ml/min；洗脫劑A乙腈+0.1％甲酸，洗脫劑B水+0.1％甲酸，梯度0.0min 10％A→4min90％A→6min 90％A.
方法3(LC-MS)儀器Waters Alliance 2790 LC；柱Symmetry C18，50mm×2.1mm，3.5μm；洗脫劑A水+0.1％甲酸，洗脫劑B乙腈+0.1％甲酸；梯度0.0min 5％B→5.0min 10％B→6.0min 10％B；溫度50℃；流速1.0ml/min；UV檢測210nm.
方法4(LC-MS)ZMD Waters；柱Inertsil ODS3 50mm×2.1mm，3μm；溫度40℃；流速0.5ml/min；洗脫劑A水+0.05％甲酸，洗脫劑B乙腈+0.05％甲酸，梯度0.0min 5％B→12min→100％B→15min100％B.
方法5(LC-MS)MAT 900，F(xiàn)innigan MAT，Bremen；柱X-terra 50mm×2.1mm，2.5μm；溫度25℃；流速0.5ml/min；洗脫劑A水+0.01％甲酸，洗脫劑B乙腈+0.01％甲酸，梯度0.0min 10％B→15min→90％B→30min 90％B.
方法6(LC-MS)TSQ 7000，F(xiàn)innigan MAT，Bremen；柱Inertsil ODS350mm×2.1mm，3μm；溫度25℃；流速0.5ml/min；洗脫劑A水+0.05％甲酸，洗脫劑B乙腈+0.05％甲酸，梯度0.0min 15％B→15min→100％B→30min 100％B.
方法7(LC-MS)7 Tesla Apex II，具有外部電噴霧離子源，BrukerDaltronics；柱X-terra C18 50mm×2.1mm，2.5μm；溫度25℃；流速0.5ml/min；洗脫劑A水+0.1％甲酸，洗脫劑B乙腈+0.1％甲酸，梯度0.0min 5％B→13min→100％B→15min 100％B.
方法8(LC-MS)MS儀器型號(hào)Micromass ZQ；HPLC儀器型號(hào)WatersAlliance 2795；柱Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50×4.6mm；洗脫劑A水+500μl的50％ 甲酸/l；洗脫劑B乙腈+500μl的50％ 甲酸/l；梯度0.0min 10％B→2.0min 95％B→4.0min 95％B；爐35℃；流速0.0min 1.0ml/min→2.0min 3.0ml/min→4.0min 3.0ml/min；UV檢測210nm.
方法9(LC-MS)儀器Micromass Platform LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱Grom-SIL120 ODS-4 HE，50mm×2.0mm，3μm；洗脫劑A1l水+1ml的50％甲酸，洗脫劑B1l的乙腈+1ml的50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；爐55℃；流速0.8ml/min；UV檢測210nm.
方法10(LC-MS)MS儀器型號(hào)Micromass ZQ；HPLC儀器型號(hào)WatersAlliance 2795；柱Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50×4.6mm；洗脫劑A水+500μl的50％ 甲酸/l；洗脫劑B乙腈+500μl的50％ 甲酸/l；梯度0.0min 10％B→3.0min 95％B→4.0min 95％B；爐35℃；流速0.0min 1.0ml/min→3.0min 3.0ml/min→4.0min 3.0ml/min；UV檢測210nm.
方法11(LC-MS)MS儀器型號(hào)Micromass ZQ；HPLC儀器型號(hào)WatersAlliance 2790；柱Uptisphere C 18，50mm×2.0mm，3.0μm；洗脫劑B乙腈+0.05％甲酸，洗脫劑A水+0.05％甲酸；梯度0.0min 5％B→2.0min 40％B→4.5min 90％B→5.5min 90％B；爐45℃；流速0.0min0.75ml/min→4.5min 0.75ml/min→5.5min 1.25ml/min；UV檢測210nm.
方法12(LC-MS)MS儀器型號(hào)Micromass ZQ；HPLC儀器型號(hào)WatersAlliance 2795；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20×4mm；洗脫劑A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脫劑B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 90％A(流速1ml/min)→2.5min 30％A(流速2ml/min)→3.0min 5％A(流速2ml/min)→4.5min 5％A(流速2ml/min)；爐50℃；UV檢測210nm.
方法13(LC-MS)MS儀器型號(hào)Micromass ZQ；HPLC儀器型號(hào)HP1100系列；UV DAD；柱Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50×2mm，3.0μm；洗脫劑A水+500μl的50％甲酸/l，洗脫劑B乙腈+500μl的50％甲酸/l；梯度0.0min 70％B→4.5min 90％B；爐50℃，流速0.8ml/min，UV檢測210nm.
方法14(LC-MS)儀器Micromass Quattro LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱Grom-SIL120 ODS-4 HE，50mm×2.0mm，3μm；洗脫劑A1l水+1ml的50％甲酸，洗脫劑B1l的乙腈+1ml的50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；爐55℃；流速0.8ml/min；UV檢測208-400nm.
方法15(LC-MS)MS儀器型號(hào)Micromass ZQ；HPLC儀器型號(hào)WatersAlliance 2790；柱Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50×2mm，3.0μm；洗脫劑A水+500μl的50％甲酸；洗脫劑B乙腈+500μl的50％甲酸/l；梯度0.0min 5％B→2.0min 40％B→4.5min 90％B→5.5min 90％B；爐45℃；流速0.0min 0.75ml/min→4.5min 0.75ml 5.5min→5.5min 1.25ml；UV檢測210nm.
方法16(HPLC)儀器HP1100，具有DAD檢測；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；洗脫劑A5ml的高氯酸/l水，洗脫劑B乙腈；梯度0min 2％B，0.5min 2％B，4.5min 90％B，15min 90％B；流速0.75ml/min；爐30℃；UV檢測210nm.
方法17(LC-MS)MS儀器型號(hào)Micromass ZQ；HPLC儀器型號(hào)HP1100系列；UV DAD；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury20mm×4mm；洗脫劑A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脫劑B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 90％A→2.5min 30％A→3.0min5％A→4.5min 5％A；流速0.0min 1ml/min，2.5min/3.0min/4.5min2ml/min；爐50℃；UV檢測210nm.
方法18(LC-MS)儀器Micromass Platform LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm×4mm；洗脫劑A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脫劑B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 90％A→2.5min 30％A→3.0min 5％A→4.5min5％A；流速0.0min 1ml/min，2.5min/3.0min/4.5min 2ml/min；爐50℃；UV檢測210nm.
方法19(LC-MS)儀器Micromass Quattro LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm×4mm；洗脫劑A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脫劑B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 90％A→2.5min 30％A→3.0min 5％A→4.5min 5％A；流速0.0min 1ml/min，2.5min/3.0min/4.5min 2ml/min；爐50℃；UV檢測208-400nm.
方法20(LC-MS)儀器Micromass Platform LCZ，具有HPLC Agilent系列1100；柱ThermoHypersil-Keystone HyPurity Aquastar，50mm×2.1mm，3μm；洗脫劑A1l水+1ml的50％甲酸，洗脫劑B1l的乙腈+1ml的50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→4.5min 10％A；爐55℃；流速0.8ml/min；UV檢測210nm.
方法21(制備HPLC/RP-HPLC)柱RP18 Phenomenex Luna C18(2)(New柱)，250mm×21.2mm，5μm(Phenomenex，Aschaffenburg，Germany)，洗脫劑乙腈-水梯度with addition的0.2％di乙基amine.
方法22(HPLC)儀器HP1100，具有DAD檢測；柱Kromasil RP-18，60mm×2mm，3.5μm；洗脫劑A5ml的高氯酸/l水，洗脫劑B乙腈；梯度0min 2％B，0.5min 2％B，4.5min 90％B，9min 90％B；流速0.75ml/min；爐30℃；UV檢測210nm.
方法23(LC-MS)儀器Micromass Platform LCZ，具有HPLC agilent系列1100；柱Thermo Hypersil GOLD-3μ 20×4mm；洗脫劑A1l水+0.5ml的50％甲酸，洗脫劑B1l的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0min 100％A→0.2min 100％A→2.9min 30％A→3.1min 10％A→5.5min10％A；爐50℃；流速0.8ml/min；UV檢測210nm.
實(shí)施例的化學(xué)合成起始化合物的合成使用(-)-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸[(-)-6A]作為實(shí)例，合成取代的苯丙氨酸衍生物 使用5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊酸(14A)作為實(shí)例，合成保護(hù)的羥基鳥氨酸衍生物 使用2-(芐氧基)-N-[(芐氧基)羰基]-5-溴-L-苯基丙氨酸甲酯](56A)作為實(shí)例，合成取代的苯丙氨酸衍生物
使用2(S)-三甲基硅烷基乙基2(S)-芐氧羰基氨基-3-[4，4′-雙-芐氧基-3′-(2(S)-芐氧羰基-2(S)-叔丁氧羰基氨基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸酯(12A)作為實(shí)例，合成保護(hù)的聯(lián)苯基二氨基酸 聯(lián)苯基二氨基酸的環(huán)化
起始化合物實(shí)施例1A
2-羥基-5-碘苯甲醛 在熱干燥燒瓶中在氬氣下將250g(1.54mol)的氯化碘在600ml的無水二氯甲烷中的溶液在2小時(shí)的期間內(nèi)滴加到188g(1.54mol)的水楊醛在1l的無水二氯甲烷中的溶液中。在RT下攪拌3天后，在劇烈攪拌下加入飽和亞硫酸鈉水溶液。分離有機(jī)相，用水和飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，通過硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑，從乙酸乙酯中再結(jié)晶殘余物。獲得216g(理論值的57％)的產(chǎn)物。
LC-MS(ESI，方法4)m/z＝246(M-H)-.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝6.7(d，1H)，7.77(dd，1H)，7.85(d，1H)，9.83(s，1H)，10.95(s，1H).
實(shí)施例2A2-芐氧基-5-碘苯甲醛 將67.2g(0.48mol)的碳酸鉀加至100g(0.40mol)的2-羥基-5-碘苯甲醛(實(shí)施例1A)在1.5l的二甲基甲酰胺中的溶液，幾分鐘后，加入51ml(0.44mol)的芐基氯。在120℃下回流攪拌反應(yīng)混合物24小時(shí)。在RT下攪拌另外24小時(shí)和加入1.5l水后，有固體結(jié)晶出來。通過抽吸過濾收集沉淀，用水洗滌兩次并真空干燥。從230ml的乙醇中再結(jié)晶所述固體。獲得122.9g(理論值的90％)的產(chǎn)物。
LC-MS(ESI，方法4)m/z＝338(M+H)+.
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝5.18(s，2H)，6.84(d，1H)，7.33-7.45(m，5H)，7.78(dd，1H)，8.12(d，1H)，10.4(s，1H).
實(shí)施例3A(2-芐氧基-5-碘苯基)甲醇 將100ml的二異丁基銨氫化物在二氯甲烷中的1M溶液加入冷卻至0℃的33.98g(100.5mmol)的2-芐氧基-5-碘苯甲醛(實(shí)施例2A)在200ml的二氯甲烷中的溶液。在0℃下攪拌2小時(shí)后，在冷卻下加入飽和酒石酸鈉鉀溶液(高放熱反應(yīng))，將反應(yīng)混合物攪拌另外2小時(shí)。在分離各相后，用水洗滌有機(jī)相兩次并用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，通過硫酸鈉干燥。真空蒸發(fā)溶劑。獲得31.8g(理論值的93％)的產(chǎn)物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝2.17(t，1H)，4.68(d，2H)，5.1(s，2H)，6.72(d，1H)，7.32-7.42(m，5H)，7.54(dd，1H)，7.63(d，1H).
實(shí)施例4A1-芐氧基-2-溴甲基-4-碘苯 在40℃下將3.3ml(35mmol)的三溴化磷滴加到35g(103mmol)的(2-芐氧基-5-碘苯基)甲醇(實(shí)施例3A)在350ml的甲苯中的溶液。在15分鐘期間內(nèi)將反應(yīng)混合物的溫度升至100℃，在該溫度下攪拌反應(yīng)混合物另外10分鐘。在冷卻后，分離兩相。用蒸餾水洗滌有機(jī)相兩次并用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。通過硫酸鈉干燥有機(jī)相并蒸發(fā)。產(chǎn)率達(dá)到41g(理論值的99％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝4.45(s，2H)，5.06(s，2H)，7.30(m，8H).
實(shí)施例5A2-(2-芐氧基-5-碘芐基)-2-叔丁氧羰基氨基丙二酸二乙酯 將41g(101.7mmol)的1-芐氧基-2-溴甲基-4-碘苯(實(shí)施例4A)加至28g(101.7mmol)的2-[N-(叔丁氧羰基)氨基]丙二酸二乙酯和7.9ml(101.7mmol)的乙氧鈉在300ml的乙醇中的溶液。在RT下攪拌3小時(shí)后，通過抽吸過濾收集沉淀的產(chǎn)物。在真空干燥后，分離55g(理論值的90％)的產(chǎn)物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝1.12(t，6H)，1.46(s，9H)，3.68(s，2H)，3.8-3.9(m，2H)，4.15-4.25(m，2H)，5.0(s，2H)，5.7(s，1H)，6.58(d，1H)，7.28-7.4(m，6H)，7.4(dd，1H).
實(shí)施例6A(+/-)-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-2-叔丁氧羰基氨基丙酸 將400ml的1N氫氧化鈉溶液加至58g(97mmol)的2-(2-芐氧基-5-碘芐基)-2-叔丁氧羰基氨基丙二酸二乙酯(實(shí)施例5A)在800ml的乙醇和水(7∶3)的混合物中的懸浮液。在回流下攪拌3小時(shí)后和冷卻至室溫后，用濃鹽酸將反應(yīng)混合物的pH調(diào)節(jié)至約pH2。蒸發(fā)反應(yīng)混合物。將殘余物置入MTBE和水中。用MTBE萃取水相三次。通過硫酸鈉干燥合并的有機(jī)相，過濾并濃縮。在真空干燥后，獲得47g(理論值的97％)的產(chǎn)物。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.32(s，9H)，2.68(dd，1H)，3.18(dd，1H)，4.25(m，1H)，5.15(s，2H)，6.88(d，1H)，7.08(d，1H)，7.30-7.40(m，3H)，7.45-7.55(m，3H).
實(shí)施例(-)-6A3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸 將來自實(shí)施例6A[(+/-)-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸]的外消旋物在手性固定硅膠相上分離，其基于來自聚(N-異丁烯?；?L-亮氨酸二環(huán)丙基甲酰胺)的選擇物(selector)，使用異己烷/乙酸乙酯混合物作為洗脫劑。首先洗脫的對(duì)映體(98.9％ee)是在二氯甲烷中右旋的([α]D21+3.0°，c＝0.54，二氯甲烷)和對(duì)應(yīng)于(R)對(duì)映體實(shí)施例(+)-6A，如通過單晶X-射線結(jié)構(gòu)分析所測定。第二種左旋對(duì)映體實(shí)施例(-)-6A，即(S)對(duì)映體的純度＞99％ee。
實(shí)施例7A3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸芐基酯 在氬氣下，將10g(20.11mmol)的(-)-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸(實(shí)施例(-)-6A)溶解在200ml的乙腈中。向其中加入246mg(2.01mmol)的4-二甲基氨基吡啶和4.16ml(40.22mmol)的芐基醇。將混合物冷卻至-10℃，加入4.63g(24.13mmol)的EDC。使得混合物緩慢達(dá)到RT并攪拌過夜。在約16小時(shí)后，混合物在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮，通過硅膠柱色譜法(流動(dòng)相二氯甲烷)純化殘余物。產(chǎn)率10.65g(理論值的88％)。
HPLC(方法1)Rt＝6.03min；LC-MS(方法3)Rt＝4.70minMS(DCI)m/z＝605(M+NH4)+.
1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝1.38(s，9H)，2.97(dd，1H)，3.12(dd，1H)，4.50-4.70(m，1H)，5.00-5.10(m，4H)，5.22(d，1H)，6.64(d，1H)，7.28-7.36(m，7H)，7.37-7.52(m，5H).
實(shí)施例8A3-[2-芐氧基-5-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二噁戊硼烷(dioxaborolan)-2-基)苯基]-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸芐基酯 將5.15g(52.60mmol)的乙酸鉀加至10.30g(17.53mol)的3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸芐基酯(實(shí)施例7A)在70ml的DMSO中的溶液。通過將氬氣通過劇烈攪拌的溶液15分鐘，將混合物去氧。然后加入5.17g(20.16mmol)的雙(頻哪根合)乙硼烷和515mg(0.70mmol)的雙(二苯基膦)二茂鐵鈀(II)氯化物。然后將混合物在和緩的氬氣流下加熱至80℃，在6小時(shí)后再次冷卻。將混合物過濾通過硅膠(流動(dòng)相二氯甲烷)。通過硅膠柱色譜法純化殘余物(流動(dòng)相環(huán)己烷∶乙酸乙酯4∶1)。
產(chǎn)率8.15g(理論值的79％)HPLC(方法1)Rt＝6.26minLC-MS(方法2)Rt＝5.93和6.09minMS(EI)m/z＝588(M+H)+
1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝1.26(s，6H)，1.33(s，9H)，1.36(s，6H)，2.91-3.10(m，1H)，3.12-3.28(m，1H)，4.49-4.68(m，1H)，5.05(dd，2H)，5.11(dd，2H)，5.30(d，1H)，6.90(d，1H)，7.27-7.37(m，7H)，7.38-7.42(m，3H)，7.55-7.62(m，1H)，7.67(dd，1H).
實(shí)施例9A2(S)-氨基-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)丙酸鹽酸鹽 將12g(24.13mmol)的3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸(實(shí)施例(-)-6A)在氬氣下加入60ml的氯化氫在二噁烷中的4M溶液并在RT下攪拌2小時(shí)。濃縮反應(yīng)溶液并在高真空下干燥。
產(chǎn)率10.47g(理論值的100％)HPLC(方法1)Rt＝4.10minMS(EI)m/z＝398(M+H-HCl)+1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝3.17-3.31(m，1H)，3.33-3.47(m，1H)，4.22(t，1H)，5.13(s，2H)，6.69(d，1H)，7.24-7.40(m，2H)，7.41-7.45(m，2H)，7.48(d，1H)，7.52(d，1H)，7.60(d，1H)，8.66(br.s，2H).
實(shí)施例10A2(S)-芐氧羰基氨基-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)丙酸 將9.25ml(53.09 mol)的N，N-二異丙基乙胺加入10.46g(24.13mmol)的2(S)-氨基-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)丙酸鹽酸鹽(實(shí)施例9A)在DMF中的溶液。向其中加入6.615g(26.54mmol)的N-(芐氧羰基)琥珀酰亞胺(Z-OSuc)。將獲得的溶液攪拌過夜，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上真空濃縮。將殘余物置入二氯甲烷中并分別用0.1N鹽酸溶液和飽和氯化鈉水溶液萃取兩次。干燥有機(jī)相，過濾和濃縮。通過硅膠柱色譜法純化混合物(流動(dòng)相環(huán)己烷/二乙基醚9∶1至8∶2)。
產(chǎn)率8.30g(理論值的65％)HPLC (方法1)Rt＝5.01minMS(EI)m/z＝532(M+H)+1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝3.14-3.3(m，2H)，4.25-4.45(m，1H)，4.97(s，2H)，5.14(s，2H)，6.88(d，1H)，7.20-7.56(m，12H)，7.62(d，1H)，12.73(br.s，1H).
實(shí)施例11A2(S)-芐氧羰基氨基-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)-丙酸(2-三甲基甲硅烷基)乙基酯 將8.35g(15.7mmol)的2(S)-芐氧羰基氨基-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)丙酸(實(shí)施例10A)提供在150ml的THF中，并加入2.14g(18.07mmol)的2-三甲基甲硅烷基乙醇和250mg(2.04mmol)的4-二甲基氨基吡啶。將混合物冷卻至0℃，加入溶解在40ml的THF中的2.38g(2.95ml，18.86mmol)的N，N’-二異丙基碳二亞胺。將混合物在RT下攪拌過夜并在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮以便后加工(work-up)。將殘余物置入二氯甲烷中并分別用0.1N鹽酸溶液和飽和氯化鈉水溶液萃取兩次。干燥有機(jī)相，過濾并蒸發(fā)。通過柱色譜法純化混合物(硅膠，流動(dòng)相環(huán)己烷/二乙基醚9∶1至8∶2)。
產(chǎn)率8.2g(理論值的83％)
HPLC(方法1)Rt＝6.42minMS(EI)m/z＝532(M+H)+1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝0.01(s，9H)，0.88(t，2H)，2.96(dd，1H)，3.13(dd，1H)，4.04-4.17(m，2H)，4.51-4.62(m，1H)，4.95-5.05(m，4H)，5.44(d，1H)，6.64(d，1H)，7.25-7.33(m，7H)，7.37(dd，4H)，7.45(dd，1H).
實(shí)施例12A2(S)-芐氧羰基氨基-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基-2-叔丁氧羰基氨基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯 在氬氣下在RT下將45.8mg(0.05mmol)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物(PdCl2(dppf))和0.325g(1.0mmol)的碳酸銫加至0.316g(0.5mmol)的2(S)-芐氧羰基氨基-3-(2-芐氧基-5-碘苯基)丙酸(2-三甲基甲硅烷基)乙基酯(實(shí)施例11A)在2.5ml的脫氣的DMF中的溶液。將反應(yīng)混合物加熱至40℃。在30分鐘期間內(nèi)，滴加0.294g(0.5mmol)的3-[2-芐氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二噁戊硼烷-2-基)苯基]-2(S)-叔丁氧羰基氨基丙酸芐基酯(實(shí)施例8A)在2.5ml的脫氣的DMF中的溶液。將反應(yīng)混合物在40℃下攪拌4小時(shí)和在50℃下攪拌另外2小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，將殘余物置入乙酸乙酯中。用水萃取有機(jī)相兩次，通過硫酸鈉干燥并濃縮。通過硅膠色譜法純化粗產(chǎn)物，使用二氯甲烷/乙酸乙酯(30/1)。獲得0.320g(66％理論值)的產(chǎn)物。
HPLC(方法1)Rt＝7.65minMS(EI)m/z＝987(M+Na)，965(M+H)+1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝0.00(s，9H)，0.90(t，2H)，1.37(s，9H)，3.02-3.35(m，4H)4.06-4.25(m，2H)，4.55-4.73(m，2H)，4.98-5.18(m，8H)，5.40(d，1H)，5.63(d，1H)，6.88-7.00(m，2H)，7.19-7.39(m，20H)，7.42-7.53(m，4H).
實(shí)施例13A({(2R，4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-氧代四氫呋喃-2-基}甲基)氨基甲酸芐酯 將7.60g(17.3mmol)的5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基戊酸叔丁酯(Org.Lett.，2001，3，20，3153-3155)在516ml的二氯甲烷中的溶液和516ml的三氟乙酸在RT下攪拌2h。蒸發(fā)溶劑。將剩余的粗產(chǎn)物溶解在2.6l的無水甲醇中，在0℃下攪拌同時(shí)，加入6.3g(28.8mmol)的二碳酸二叔丁酯和7.3ml(52.43mmol)的三乙胺。在15小時(shí)后，蒸發(fā)反應(yīng)溶液并將殘余物置入1l的乙酸乙酯中。在分離各相后，用5％檸檬酸溶液萃取有機(jī)相兩次，用水萃取兩次和用飽和氯化鈉水溶液萃取一次，通過硫酸鈉干燥并濃縮。通過硅膠色譜法使用甲苯/丙酮(5/1)純化粗產(chǎn)物。獲得4.92g(78％理論值)的產(chǎn)物。
LC-HR-FT-ICR-MS(方法7)理論值C18H28N3O6(M+NH4)+382.19726實(shí)驗(yàn)值382.197031H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝1.45(s，9H)，2.3-2.4(m，1H)，2.45-2.55(m，1H)，3.3-3.4(m，1H)，3.5-3.6(m，1H)，4.17-4.28(m，1H)，4.7-4.8(m，1H)，5.0-5.15(m，4H)，7.3-7.4(m，5H).
實(shí)施例14A5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酸
方法A在0℃下將2ml的1M氫氧化鈉溶液加入0.73g(2mmol)的來自實(shí)施例13A的化合物在50ml的1，4-二噁烷中的溶液。將反應(yīng)溶液攪拌2小時(shí)，然后蒸發(fā)。將殘余物置入50ml的二氯甲烷中。將1.12ml(8mmol)的三乙胺加入該溶液中，在短時(shí)間后，滴加1.38ml(6mmol)的叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯。在RT下攪拌3小時(shí)后，用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物。用1N碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物溶解在7.4ml的1，4-二噁烷中，加入36.2ml的0.1N氫氧化鈉溶液。在RT下攪拌3小時(shí)后，蒸發(fā)反應(yīng)溶液，和將殘余物置入水和乙酸乙酯中。用乙酸乙酯萃取有機(jī)相三次。將合并的有機(jī)相通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。獲得0.90g(90％理論值)的產(chǎn)物。
方法B將14.0g(38mmol)的2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基-5-硝基戊酸芐酯(實(shí)施例22A)在840ml的乙醇/水9/1中的溶液與1.96g的披鈀碳(10％)混合并在大氣壓下在RT下氫化24小時(shí)。將混合物過濾通過硅藻土，將濾液與14.7g(114mmol)的二異丙基乙胺混合。然后加入11.4g(45.6mmol)的N-(芐氧羰基氧基)琥珀酰亞胺，將混合物在RT下攪拌4小時(shí)。濃縮溶液，將殘余物置入二氯甲烷中并用0.1N鹽酸萃取兩次。分離有機(jī)相并用14.7g(114mmol)的二異丙基胺變?yōu)閴A性。將溶液冷卻至0℃，加入30.1g(114mmol)的二甲基-叔丁基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，將混合物在RT下攪拌2.5小時(shí)。用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。將殘余物溶解在50ml的二噁烷中，與200ml的0.1N氫氧化鈉溶液混合并在RT下攪拌3小時(shí)。將混合物用乙酸乙酯萃取數(shù)次，收集的有機(jī)相通過硫酸鈉干燥并真空濃縮。將殘余物在硅膠(流動(dòng)相二氯甲烷/乙醇20/1，9/1)上色譜分離。獲得8.11g(43％理論值)的產(chǎn)物。
MS(ESI)m/z＝497(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝0.00(s，6H)，0.99(s，9H)，1.33(s，9H)，1.59(m，1H)，1.80(m，1H)，2.75-3.15(m，2H)，3.81(m，1H)，3.98(m，1H)，4.96(m，2H)，7.04(d，1H)，7.19(m，1H)，7.30(m，5H)，12.37(br.s，1H).
實(shí)施例15A3-[3’-2(S)-氨基-2-芐氧羰基乙基]-4，4’-二芐氧基聯(lián)苯基-3-基]-2(S)-芐氧羰基氨基丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯鹽酸鹽 將50ml的氯化氫在二噁烷中的4M溶液在約20分鐘的期間內(nèi)加入冷卻至0℃的2.65g(2.75mmol)的2(S)-芐氧羰基氨基-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基-2-叔丁氧羰基氨基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯(實(shí)施例 12A)在50ml的無水二噁烷中的溶液。在攪拌3小時(shí)后，蒸發(fā)反應(yīng)溶液并在高真空下干燥。
產(chǎn)率100％理論值HPLC(方法1)Rt＝5.96minMS(EI)m/z＝865(M+H)+實(shí)施例16A2(S)-[5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊?；被鵠-3-{4，4’-二芐氧基-3’-[2(S)-芐氧羰基氨基-2-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基)乙基]聯(lián)苯基-3-基}丙酸芐酯
將0.219g(0.58mmol)的HATU和0.082g(0.63mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至冷卻至0℃的3-[3’-(2(S)-氨基-2-芐氧羰基乙基)-4，4’-二芐氧基聯(lián)苯基-3-基]-2(S)-芐氧羰基氨基丙酸(2-三甲基甲硅烷基)乙酯鹽酸鹽(實(shí)施例15A)和0.287g(0.58mmol)的5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊酸(實(shí)施例14A)在7.3ml的無水DMF中的溶液。在0℃攪拌30分鐘后，加入另外0.164g(1.26mmol)的N，N-二異丙基乙胺。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑，將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相用水洗滌三次和用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，通過硫酸鈉干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化，所述色譜法使用二氯甲烷/乙酸乙酯(梯度30/1→20/1→10/1)。獲得533mg(66％理論值)的產(chǎn)物。
LC-MS(ESI，方法6)m/z＝1342(M+H)+，1365(M+Na)+實(shí)施例17A2(S)-芐氧羰基氨基-3-{4，4’-二芐氧基-3’-[2(S)-芐氧羰基-2-(5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基戊?；被?乙基]聯(lián)苯基-3-基}丙酸 在RT下將1.8ml的在THF中的1N氟化四丁銨滴加到800mg(0.6mmol)的2(S)-[5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊?；被鵠-3-{4，4’-二芐氧基-3’-[2(S)-芐氧羰基氨基-2-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基)乙基]聯(lián)苯基-3-基}丙酸芐酯(實(shí)施例16A)在26ml的無水DMF中的溶液中。在RT下25分鐘后，將混合物冷卻至0℃并加入大量冰-水。立即加入乙酸乙酯和少量1N鹽酸溶液；有機(jī)相用硫酸鎂干燥，濃縮和在高真空下干燥1小時(shí)。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
LC-MS(ESI，方法4)m/z＝1129(M+H)+LC-HR-FT-ICR-MS(方法7)理論值C65H69N4O14(M+H)+1129.48048實(shí)驗(yàn)值1129.48123.
實(shí)施例18A2(S)-(5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基戊?；被?-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸芐酯 將691mg(粗制混合物，約0.6mmol)的2(S)-芐氧羰基氨基-3-{4，4’-二芐氧基-3’-[2(S)-芐氧羰基-2-(5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基戊?；被?乙基]聯(lián)苯基-3-基}丙酸(實(shí)施例17A)提供到25ml的二氯甲烷中，加入溶解在6ml的二氯甲烷中的547.6mg(2.98mmol)的五氟苯酚。加入7.3mg(0.06mmol)的DMAP，將混合物冷卻至-25℃(乙醇/二氧化碳浴)。在-25℃，加入148mg(0.774mmol)的EDC。將混合物緩慢升溫至RT過夜。將反應(yīng)混合物真空濃縮并在高真空下短暫干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
LC-MS(ESI，方法5)m/z＝1317(M+Na)+，1295(M+H)+LC-HR-FT-ICR-MS(方法7)理論值C71H68F5N4O14(M+H)+1295.46467實(shí)驗(yàn)值1295.46430.
實(shí)施例19A5，17-二芐氧基-14(S)-芐氧羰基氨基-11(S)-(3-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]-henicosa-1(19)，2，4，6(21)，16(20)，17-六烯(hexaene)-8(S)-羧酸芐基酯 方法A將4ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加入119.3mg的2(S)-(5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基戊酰基氨基)-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸芐酯(實(shí)施例18A)在2.7ml的1，4-二噁烷中的溶液。直至反應(yīng)完成，加入另外1.5ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液。蒸發(fā)反應(yīng)溶液并與氯仿共蒸餾兩次。將粗產(chǎn)物(LC-HR-FT-ICR-MS，方法7理論值C66H60F5N4O12(M+H)+1195.41224，實(shí)驗(yàn)值1195.41419)溶解在100ml的氯仿中并在3小時(shí)的期間內(nèi)滴加到極其劇烈攪拌的200ml的氯仿懸浮液和100ml的飽和碳酸氫鈉水溶液中。將反應(yīng)混合物劇烈攪拌2小時(shí)。在分離兩相后，用氯仿萃取水相。用5％檸檬酸水溶液洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鎂干燥并蒸發(fā)至干。將粗產(chǎn)物用乙腈洗滌并在高真空下干燥。
產(chǎn)率60.5mg(65％理論值)LC-MS(ESI，方法5)m/z＝1011(M+H)+方法B將771mg(0.595mmol)的2(S)-(5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基戊?；被?-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2S)-芐氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸芐酯(實(shí)施例18A)溶解在8ml的二噁烷中，然后在0℃下滴加在二噁烷中的16ml的4N氯化氫溶液。在45min后，再次加入6ml的氯化氫在二噁烷中的4N溶液，在15min后加入另外8ml。將混合物在0℃下攪拌30分鐘，之后將反應(yīng)溶液在溫和條件下濃縮，與氯仿共蒸餾(兩次)和在高真空下簡短干燥。將粗產(chǎn)物(732mg，0.59mmol)溶解在1000ml的氯仿中，滴加6ml三乙胺在50ml的氯仿中的溶液。將混合物在RT下攪拌過夜。為了后處理，將混合物在溫和條件下在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上真空濃縮，將殘余物在乙腈中攪拌。獲得的晶體通過抽吸過濾收集，用乙腈洗滌并在高真空下干燥。
產(chǎn)率360mg(60％理論值)MS(EI)m/z＝1011(M+H)+HPLC(方法1)Rt＝5.59min1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.52-1.65(m，1H)，1.73-1.84(m，1H)，2.82-3.01(m，3H)，3.02-3.11(m，1H)，3.46(s，1H)，3.57-3.68(m，1H)，4.47-4.56(m，1H)，4.64-4.71(m，1H)，4.73-4.85(m，2H)，4.88-5.00(m，4H)，5.09(s，2H)，5.14-5.20(m，4H)，6.29(d，1H)，7.00-7.11(m，4H)，7.21-7.40(m，20H)，7.41-7.48(m，9H)，8.77(d，1H)，8.87(d，1H).
實(shí)施例20A14(S)-氨基-11(S)-(3-氨基-2(R)-羥基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(19)，2，4，6(21)，16(20)，17-六烯-8(S)-羧酸二鹽酸鹽(雙苯霉素B)
將200mg(0.20mmol)的5，17-二芐氧基-14(S)-芐氧羰基氨基-11(S)-(3-芐氧羰基氨基-2(R)-羥基丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(19)，2，4，6(21)，16(20)，17-六烯-8(S)-羧酸芐酯(實(shí)施例19A)加至220ml的乙酸/水/乙醇4∶1∶1混合物(乙醇可以被THF替代)。加入73mg的10％鈀/碳(10％Pd/C)，將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。將殘余物與4.95ml的0.1N鹽酸水溶液混合并濃縮。將殘余物與10ml的二乙基醚攪拌并潷析。將剩余的固體在高真空下干燥。
產(chǎn)率103mg(95％理論值).
HPLC(方法1)Rt＝3.04minLC-MS(方法2)Rt＝0.38minMS(EI)m/z＝473(M+H)+1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝2.06-2.20(m，1H)，2.74-2.89(m，1H)，2.94-3.05(m，1H)，3.12-3.25(m，2H)，3.53(d，1H)，3.61-3.72(m，1H)，3.97-4.07(m，1H)，4.53(s，1H)，4.61(d，1H)，4.76-4.91(m，12H)，7.01-7.05(m，2H)，7.07(s，1H)，7.40-7.45(m，2H)，7.51(d，1H).
實(shí)施例21A2(S)-叔丁氧羰基氨基-5-硝基-4-氧代戊酸芐酯
將10g(30.9mmol)的2(S)-叔丁氧羰基氨基琥珀酸1-芐酯和5.27g(32.5mmol)的1，1’-羰二咪唑在100ml的四氫呋喃中的溶液A在RT下攪拌5小時(shí)。在0℃下將18.8g(30.9mmol)的硝基甲烷滴加到3.2g(34.2mmol)的叔丁醇鉀在100ml的四氫呋喃中的溶液B中。將溶液B攪拌，同時(shí)升溫至RT，然后在RT下將溶液A滴加。將獲得的混合物在RT下攪拌16小時(shí)并使用20％鹽酸調(diào)節(jié)至pH2。蒸發(fā)溶劑。將剩余的粗產(chǎn)物置入乙酸乙酯/水中。在分離各相后，用水萃取有機(jī)相兩次，通過硫酸鈉干燥并濃縮。獲得13g(99％理論值)的產(chǎn)物。
MS(ESI)m/z＝334(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.37(s，9H)，2.91(m，1H)，3.13(m，1H)，4.44(m，1H)，5.12(s，2H)，5.8 1(m，2H)，7.2-7.5(m，5H).
實(shí)施例22A2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基-5-硝基戊酸芐酯 將11.3g(30.8mmol)的2(S)-叔丁氧羰基氨基-5-硝基-4-氧代戊酸芐酯在300ml的四氫呋喃中的溶液冷卻至-78℃，滴加30.8ml的L-Selectride在四氫呋喃中的1M溶液，將混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)。在升溫至RT后，將飽和氯化銨溶液小心加入該溶液。將反應(yīng)溶液濃縮，將殘余物置入水和乙酸乙酯中。將水相用乙酸乙酯萃取三次。將合并的有機(jī)相通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物在硅膠60(流動(dòng)相環(huán)己烷/乙酸乙酯10/1)上純化，將收集的級(jí)分濃縮并與環(huán)己烷/乙酸乙酯5/1攪拌。將剩余的晶體通過抽吸過濾收集并干燥。獲得2.34g(21％理論值)的所需非對(duì)映異構(gòu)體。在Lichrospher Diol 10μm(流動(dòng)相乙醇/異己烷5/95)上色譜分離母液獲得另外0.8g(6.7％理論值)產(chǎn)物。
MS(ESI)m/z＝369(M+H)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.38(s，9H)，1.77(m，1H)，1.97(m，1H)，4.10-4.44(m，3H)，4.67(m，1H)，5.12(m，2H)，5.49(d，1H)，7.25-7.45(m，5H).
實(shí)施例23A2(S)-[S-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基戊?；被鵠-3-{4，4’-二芐氧基-3’-[2(S)-芐氧羰基氨基-2-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基)乙基]聯(lián)苯基-3-基}丙酸芐酯 類似于實(shí)施例16A，由0.47g(0.51mmol)的來自實(shí)施例15A的化合物和0.19g(0.51mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸與0.19g(0.51mmol)的HATU和0.35ml(1.65mmol)的N，N-二異丙基乙胺，在5.55ml的無水DMF中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率0.58g(92％理論值)LC-MS(方法10)Rt＝3.46minMS(ESI)m/z＝1212(M+H)+實(shí)施例24A2(S)-芐氧羰基氨基-3-{4，4’-二芐氧基-3’-[2(S)-芐氧羰基-2-(5-芐氧羰基氨基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基戊?；被鵠乙基}聯(lián)苯基-3-基}-丙酸
類似于實(shí)施例17A，由0.82g(0.68mmol)的來自實(shí)施例23A的化合物和2當(dāng)量(1.3ml)的氟化四丁銨(1M在THF中)，在30ml的無水DMF進(jìn)行制備。
產(chǎn)率772mg(94％理論值)LC-MS(方法11)Rt＝1.62minMS(ESI)m/z＝1112(M+H)+實(shí)施例25A2(S)-(5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基戊?；被?-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸芐酯 類似于實(shí)施例18A，由422mg(0.38mmol)的來自實(shí)施例24A的化合物和349mg(1.9mmol)的五氟苯酚和80mg(0.42mmol)的EDC和4.63mg(0.04mmol)的DMAP，在4ml的二氯甲烷中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率502mg(95％理論值)LC-MS(方法11)Rt＝3.13min
MS(ESI)m/z＝1278(M+H)+實(shí)施例26A2(S)-(5-芐氧羰基氨基-2(S)-氨基戊酰基氨基)-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸芐酯鹽酸鹽 將5ml的氯化氫在二噁烷中的4N溶液加入215mg(0.17mmol)的來自實(shí)施例25A的化合物，同時(shí)在冰浴中攪拌。將混合物攪拌1小時(shí)并在真空中蒸發(fā)至恒重。
產(chǎn)率200mg(92％理論值)LC-MS(方法11)Rt＝4.25minMS(ESI)m/z＝1178(M-HCl+H)+實(shí)施例27A5，17-二芐氧基-14(S)-芐氧羰基氨基-11(S)-(3-芐氧羰基氨基丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(19)，2，4，6(21)，16(20)，17-六烯-8(S)-羧酸芐酯
將1.35g(0.91mmol)的來自實(shí)施例26A的化合物提供在3l的氯仿中，在劇烈攪拌同時(shí)，在20分鐘期間在RT下加入在50ml的氯仿中的2.54ml(18.2mmol)的三乙胺。攪拌混合物過夜并真空蒸發(fā)干燥。將殘余物與5ml的乙腈攪拌并過濾，干燥殘余物至恒重。
產(chǎn)率890mg(93％理論值)LC-MS(方法11)Rt＝5.10minMS(ESI)m/z＝994(M+H)+實(shí)施例28A(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，6，18-六烯-8-羧酸二鹽酸鹽 將50mg(0.05mmol)的來自實(shí)施例27A的化合物懸浮在50ml的冰醋酸/水/乙醇(4/1/1)中，加入30mg的Pd/C(10％)晶體，將混合物在RT下氫化20小時(shí)。在通過過濾通過硅藻土去除晶體后，將濾液真空蒸發(fā)至干，在攪拌同時(shí)，加入2.5ml的0.1N鹽酸。將混合物在真空中蒸發(fā)至干并干燥至恒重。
產(chǎn)率17mg(63％理論值)TLC(甲醇/二氯甲烷/25％氨水＝5/3/2)Rf＝0.6LC-MS(方法3)Rt＝0.28minMS(ESI)m/z＝457(M-2HCl+H)+實(shí)施例29A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基-11-[3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 將600mg(1.13mmol)的來自實(shí)施例28A的化合物溶解在6ml(5.66mmol)的1N氫氧化鈉溶液中，在攪拌同時(shí)在室溫下加入溶解在5ml甲醇中的740.8mg(3.39mmol)的二碳酸二叔丁酯。在1小時(shí)后反應(yīng)完成(TLC檢查，流動(dòng)相二氯甲烷/甲醇/氨＝80/20/2)。通過滴加0.1N鹽酸將pH調(diào)節(jié)至3。將混合物每次用20ml的乙酸乙酯萃取三次，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至恒重。
產(chǎn)率622mg(84％理論值)LC-MS(方法10)Rt＝1.96minMS(ESI)m/z＝656(M+H)+實(shí)施例30A2-(芐氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-碘-N-甲基-L-苯丙氨酸
在氬氣氣氛下，將500mg(1mmol)的來自實(shí)施例(-)-6A的化合物溶解在20ml的THF中，加入90.5mg(3.02mmol)的氫化鈉和0.51ml(1141.6mg；8.04mmol)的甲基碘(80％純)，將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用25ml的乙酸乙酯和25ml水稀釋并用0.1N鹽酸調(diào)節(jié)至pH＝9。將混合物真空濃縮至小體積。加入10ml的乙酸乙酯和10ml水，劇烈振蕩混合物，分離有機(jī)相。用硫酸鈉干燥并真空濃縮，獲得140mg的產(chǎn)物(19％理論值)。將水相酸化(pH＝3)并用20ml的乙酸乙酯萃取三次。真空濃縮和真空干燥，獲得351mg的產(chǎn)物(68％理論值)。
LC-MS(方法9)Rt＝3.9minMS(EI)m/z＝511(M+H)+實(shí)施例31A2-(芐氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-碘-N-甲基-L-苯基丙氨酸芐酯 類似于實(shí)施例7A，由350mg(0.68mmol)的來自實(shí)施例30A的化合物，8.29mg(0.07mmol)的DMAP，148mg(1.37mmol)的芐基醇和157.46mg(0.82mmol)的EDC，在3ml的乙腈中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率382mg(93％理論值)LC-MS(方法9)Rt＝4.8minMS(EI)m/z＝601(M+H)+
實(shí)施例32A2-(芐氧基)-N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁戊硼烷-2-基)-L-苯基丙氨酸芐酯 類似于實(shí)施例8A，將380mg(0.63mmol)的來自實(shí)施例31A的化合物提供在熱干燥的燒瓶中的4ml的DMF中，在攪拌同時(shí)在室溫下，加入184.5mg(0.73mmol)的4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-二-1，3，2-二噁戊硼烷，186mg(1.9mmol)的乙酸鉀和23.15mg(0.03mmol)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物。使得反應(yīng)在80℃下進(jìn)行4小時(shí)。在后加工和色譜分離(硅膠60，流動(dòng)相環(huán)己烷/乙酸乙酯＝4/1)后獲得產(chǎn)物。
產(chǎn)率196mgLC-MS(方法9)Rt＝4.9minMS(EI)m/z＝601(M+H)+實(shí)施例33A2(S)-芐氧羰基氨基-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基-(2-叔丁氧羰基-2-甲基)氨基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯 類似于實(shí)施例12A，由190mg(0.32mmol)的來自實(shí)施例32A的化合物，199.5mg(0.32mmol)的來自實(shí)施例11A的化合物，195.5mg(0.63mmol)的碳酸銫和23.15mg(0.03mmol)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物，在1.5ml的DMF中在氬氣氣氛下進(jìn)行制備。
產(chǎn)率212mg(66％理論值)LC-MS(方法13)Rt＝4.86minMS(EI)m/z＝978(M+H)+實(shí)施例34A2(S)-芐氧羰基氨基-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基-2-甲基氨基乙基聯(lián)苯基-3-基)丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯鹽酸鹽 類似于實(shí)施例15A，由930mg(0.95mmol)的來自實(shí)施例33A的化合物和22.14ml的氯化氫在二噁烷中的4M溶液，在15ml的二噁烷中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率915mg(78％理論值)LC-MS(方法13)Rt＝2.53minMS(EI)m/z＝878(M-HCl+H)+實(shí)施例35A2(S)-{甲基-[5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)戊?；鵠氨基}-3-{4，4’-二芐氧基-3’-[2(S)-芐氧羰基氨基-2-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基)乙基]聯(lián)苯基-3-基}丙酸芐酯
類似于實(shí)施例16A，由922mg(1.01mmol)的來自實(shí)施例34A的化合物，0.5g(1.01mmol)的來自實(shí)施例14A的化合物，421mg(1.11mmol)的HATU和0.7ml(518mg；3.27mmol)的DIEA，在4.2ml的DMF中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率703mg(51％理論值)LC-MS(方法8)Rt＝3.17minMS(EI)m/z＝1356(M+H)+實(shí)施例36A2(S)-芐氧羰基氨基-3-{4，4’-二芐氧基-3’-[2(S)-芐氧羰基-2-{甲基-(5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基戊酰基)氨基}乙基]聯(lián)苯基-3-基}丙酸 類似于實(shí)施例17A，由360mg(0.27mmol)的來自實(shí)施例35A的化合物和0.8ml(3當(dāng)量)的1M氟化四丁銨溶液(THF)，在20ml的DMF中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率159mg(53％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝3.19minMS(EI)m/z＝1142(M+H)+實(shí)施例37A2(S)-[甲基-(5-芐氧羰基氨基)-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-羥基戊?；鵠氨基-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸芐酯 類似于實(shí)施例18A，由330mg(0.29mmol)的來自實(shí)施例36A的化合物，265.6mg(1.44mmol)的五氟苯酚，3.53mg(0.03mmol)的DMAP和60.87mg(0.32mmol)的EDC，在10ml的二氯甲烷中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率271mg(69％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝3.38minMS(EI)m/z＝1308(M+H)+實(shí)施例38A2(S)-[甲基-(5-芐氧羰基氨基)-2(S)-氨基-4(R)-羥基-戊?；鵠氨基-3-[4，4’-二芐氧基-3’-(2(S)-芐氧羰基氨基-2-五氟苯氧基羰基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸芐酯鹽酸鹽
將130mg(0.1mmol)的來自實(shí)施例37A的化合物溶解在0.5ml的二噁烷中，并小心加入5ml的氯化氫在二噁烷中的4N溶液(冰浴)。在30分鐘后，使得反應(yīng)在室溫下繼續(xù)另外2小時(shí)。將混合物在真空中蒸發(fā)至干并在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率130mg(70％理論值)LC-MS(方法15)Rt＝2.68minMS(EI)m/z＝1208(M-HCl+H)+實(shí)施例39A(8S，11S，14S)-5，17-二(芐氧基)-14-{[(芐氧基)羰基]氨基}-11-((2R)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-羥基丙基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12.6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸芐酯 將130mg(0.1mmol)的來自實(shí)施例38A的化合物提供在220ml的無水氯仿中。在攪拌同時(shí)在室溫下，在20分鐘期間內(nèi)加入在5ml的二氯甲烷中的23ml(20eq.)的三乙胺。將混合物攪拌過夜。然后將混合物真空蒸發(fā)至干。將殘余物與乙腈攪拌。在干燥殘余物后獲得44mg產(chǎn)物。通過RP-HPLC從母液中獲得另外的產(chǎn)物(30mg)。
產(chǎn)率74mg(69％理論值)LC-MS(方法15)Rt＝3.13minMS(EI)m/z＝1024(M+H)+實(shí)施例40A(8S，11S，14S)-14-氨基-11-[(2R)-3-氨基-2-羥基丙基]-5，17-二羥基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12.6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-羧酸二(三氟乙酸氫鹽) 將33mg(0.032mmol)的來自實(shí)施例39A的化合物小心用稀三氟乙酸處理。將獲得的澄清溶液隨后凍干。
產(chǎn)率23mg(定量)LC-MS(方法15)Rt＝0.92minMS(EI)m/z＝486(M-2CF3CO2H+H)+實(shí)施例41A(8S，11S，14S)-5，17-二(芐氧基)-14-{[芐氧羰基]氨基}-11-(2R)-3-{[芐氧羰基]氨基}-2-羥基丙基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12.6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸
將37mg(0.04mmol)的來自實(shí)施例39A的化合物溶解在2ml的THF中，加入0.14ml的1N氫氧化鋰溶液，將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。然后將混合物用1N鹽酸酸化并在高真空下蒸發(fā)至干。
產(chǎn)率33mg(71％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.90minMS(EI)m/z＝934(M+H)+類似于上述詳述方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湎卤碇辛谐龅膶?shí)施例42A至48A
實(shí)施例49A(2Z)-3-[2-(芐氧基)-5-溴苯基]-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}丙烯酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯
將7.5g(25.8mmol)的2-(芐氧基)-5-溴苯甲醛(Synthesis，1992，10，1025-30)和11.8g(28.3mmol)的{[(芐氧基)羰基]氨基}(二甲氧基磷?；?乙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯(Tetrahedron，1999，55，10527-36)提供在150ml的THF中，在丙酮/干冰中-78℃下冷卻同時(shí)，加入3.26g(28.3mmol)的1，1，3，3-四甲基胍。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌另外12小時(shí)。將溶劑在真空中蒸餾掉，將粗產(chǎn)物置入乙酸乙酯中并用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和氯化鈉溶液各自洗滌一次。將有機(jī)相通過硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮至干燥。從乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶20)中再結(jié)晶粗產(chǎn)物。
產(chǎn)率13g(88％理論值)HPLC(方法16)Rt＝6.06minMS(DCI(NH3))m/z＝599(M+NH4)+實(shí)施例50A(8S，11S，14S)-5，17-二(芐氧基)-14-{[(芐氧基)羰基]氨基}-11-(3-{[(芐氧基)羰基]氨基}丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 將200mg(0.2mmol)的來自實(shí)施例27A的化合物提供在8ml的THF和4ml的DMF中，在攪拌同時(shí)，加入0.8ml的1M氫氧化鋰水溶液(4當(dāng)量)。在室溫下攪拌2小時(shí)后形成凝膠。加入0.8ml的1N鹽酸和少量水。然后將混合物真空蒸發(fā)至干，與水?dāng)嚢?，將沉淀過濾并干燥。
產(chǎn)率140mg(77％理論值)LC-MS(方法10)Rt＝2.83minMS(EI)m/z＝904(M+H)+實(shí)施例51A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸
將11mg(0.02mmol)的來自實(shí)施例47A的化合物溶解在0.5ml水中，加入12.27mg(0.08mmol)的碳酸鈉，將混合物在冰浴中冷卻，在攪拌同時(shí)，加入在0.2ml的甲醇中的13.25mg(0.06mmol)的二碳酸二叔丁酯。將混合物在RT下攪拌過夜，真空蒸發(fā)至干，溶解在0.5ml水中，用1N鹽酸酸化至pH＝2，用乙酸乙酯萃取獲得的懸浮液。用硫酸鈉干燥，接著真空蒸發(fā)至干。
產(chǎn)率10mg(51％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.92minMS(EI)m/z＝670(M+H)+實(shí)施例52A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{(2R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}-5，17-二羥基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 將90mg(0.16mmol)的來自實(shí)施例40A的化合物溶解在2.5ml水中，加入85.3mg(0.8mmol)的碳酸鈉，將混合物在冰浴中冷卻，加入在1.2ml的甲醇中的105.3mg(0.48mmol)的二-(叔丁基)二碳酸酯。將混合物在室溫下攪拌過夜，真空濃縮至小體積，并用1N鹽酸酸化至pH＝2。獲得的沉淀通過過濾收集并干燥。
產(chǎn)率89mg(73％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.8minMS(EI)m/z＝686(M+H)+實(shí)施例53A2-(芐氧基)-N-[(芐氧基)羰基]-5-溴-L-苯基丙氨酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯 將930mg(1.6mmol)的來自實(shí)施例49A的化合物溶解在100ml的乙醇和10ml的二噁烷中。在氬氣氣氛下，加入20mg的(+)-1，2-二((2S，5S)-2，5-二乙基phospholano)苯(環(huán)辛二烯)銠(I)三氟甲磺酸鹽，將溶液放入超聲波浴中15分鐘。然后將混合物在3巴的氫氣壓力下氫化5天。將混合物過濾通過硅膠并小心用乙醇洗滌。將濾液真空濃縮，將粗產(chǎn)物在高真空下干燥。
產(chǎn)率900mg(96％理論值)ee＝98.8％(Chiralcel OD(Daicel)；洗脫劑異己烷和乙醇(5/1 vol/vol)加入0.2體積％的二乙胺)HPLC(方法16)Rt＝6.08minMS(DCI(NH3))m/z＝601(M+NH4)+
實(shí)施例54A(2Z)-3-[2-(芐氧基)-5-溴苯基]-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}丙烯酸甲酯 類似于實(shí)施例49A，由7.5g(25.8mmol)的2-(芐氧基)-5-溴苯甲醛和8.4g(28.3mmol)的2-(三甲基甲硅烷基)乙基{[芐氧基]羰基}氨基}(二甲氧基磷?；?乙酸酯(J.Prakt.Chem.，2000，342，736-44)和3.3g(28.3mmol)的1，1，3，3-四甲基胍，在150ml的THF中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率10g(87％理論值)HPLC(方法16)Rt＝5.42minMS(DCI(NH3))m/z＝479(M+NH4)+實(shí)施例55A2-(芐氧基)-N-[(芐氧基)羰基]-5-溴-L-苯基丙氨酸甲酯 類似于實(shí)施例53A，由1.96g(4.2mmol)的來自實(shí)施例54A的化合物和15mg的(+)-1，2-二((2S，5S)-2，5-二乙基phospholano)苯(環(huán)辛二烯)銠(I)三氟甲磺酸鹽，在100ml的乙醇和20ml的二噁烷中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率1.96g(99％理論值)ee＝97.6％(Chiralcel OD(Daicel)；洗脫劑異己烷和乙醇(5/1 vol/vol)加入0.2體積％二乙胺)LC-MS(方法17)Rt＝3.05min
MS(DCI(NH3))m/z＝481(M+NH4)+1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.32(s，9H)，2.72(mc，1H)，3.17(mc，1H)，3.60(s，3H)，4.32(mc，1H)，5.13(s，2H)，7.01(mc，1H)，7.22(mc，1H)，7.28-7.58(mc，6H).
實(shí)施例56A2-(芐氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁戊硼烷-2-基)-L-苯基丙氨酸甲酯 將0.23g(2.31mmol)的乙酸鉀和4mg(0.08mmol)的氫氧化鉀加至0.36g(0.77mmol)的來自實(shí)施例55A的化合物在5ml的DMF中的溶液。將混合物通過將氬氣通過劇烈攪拌的溶液15分鐘去氧。然后加入0.25g(1.0mmol)的4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-二-1，3，2-二噁戊硼烷和0.023g(0.03mmol，0.04當(dāng)量)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物。將混合物在輕柔氬氣流下加熱至60℃并在該溫度下攪拌1.5小時(shí)。隨后將混合物在80℃下攪拌30分鐘，然后冷卻至RT。將溶劑在真空下蒸餾掉，將粗產(chǎn)物置入乙酸乙酯中并用飽和氯化鈉溶液洗滌兩次。將有機(jī)相通過硫酸鎂干燥，過濾和真空蒸發(fā)至干。殘余物通過色譜法(RP-HPLC，乙腈，水)純化。
產(chǎn)率0.219g(56％理論值)MS(EI)m/z＝512(M+H)+1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.27(mc，12H)，1.29(s，9H)，2.75(mc，1H)，3.19(mc，1H)，3.57(s，3H)，4.30(mc，1H)，5.19(mc，2H)，7.04(mc，1H)，7.24(mc，1H)，7.28-7.58(m，6H).
實(shí)施例57A
2-(芐氧基)-N-[(芐氧基)羰基]-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁戊硼烷-2-基)-L-苯基丙氨酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯 類似于實(shí)施例8A，由2.0g(3.17mmol)的來自實(shí)施例11A的化合物，0.924g(3.64mmol)的4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-二-1，3，2-二噁戊硼烷，0.932g(9.50mmol)的乙酸鉀和0.116g(0.160mmol，0.05當(dāng)量)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物，在30ml的二甲亞砜中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率1.12g(56％理論值)LC-MS(方法13)Rt＝4.50minMS(EI)m/z＝632(M+H)+1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝0.92(dd，2H)，1.31(s，12H)，2.95-3.95(m，2H)，4.11(mc，2H)，4.55(11(mc，1H)，4.99(s，2H)，5.08(s，2H)，5.53(d，1H)，6.90(d，1H)，7.15-7.47(m，10H)，7.58(d，1H)，7.67(dd，1H).
實(shí)施例58A(2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-3-(4，4’-二(芐氧基)-3’-{(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-甲氧基-3-氧代丙基}聯(lián)苯基-3-基)丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯 方法A類似于實(shí)施例12A，由0.46g(0.79mmol)的來自實(shí)施例53A的化合物，0.41g(0.79mmol)的來自實(shí)施例56A的化合物，0.52g(1.58mmol)的碳酸銫和0.023g(0.032mmol，0.04當(dāng)量)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物，在12ml的DMF中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率0.34g(48％理論值)方法B類似于實(shí)施例53A，由0.59g(0.67mmol)的來自實(shí)施例69A的化合物和10mg的(+)-1，2-二((2S，5S)-2，5-二乙基phospholano)苯(環(huán)辛二烯)銠(I)三氟甲磺酸鹽，在100ml的乙醇和30ml的二噁烷中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率0.60g(99％理論值)ee＝99.5％(手性固定硅膠相，基于選擇物聚(N-甲基丙烯?；?L-亮氨酸L-薄荷基(menthyl)酰胺)；洗脫劑異己烷和乙酸乙酯(2/1 vol/vol))HPLC(方法16)Rt＝6.54minMS(EI)m/z＝890(M+H)+1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝0.00(s，9H)，0.83(mc，2H)，1.31(s，9H)，2.86(m，2H)，3.25(m，2H)，3.62(s，3H)，4.09(m，2H)，4.41(mc，1H)，4.98(mc，2H)，5.22(m，4H)，7.12(m，2H)，7.29(m，2H)，7.33-7.59(m，20H)，7.78(d，1H).
類似于以上詳述的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湓谙卤碇辛谐龅膶?shí)施例59A至64A
實(shí)施例65A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{(2R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 將50mg(0.09mmol)的來自實(shí)施例20A的化合物提供在8ml的甲醇/水(9∶1)混合物中。加入1ml的1N碳酸氫鈉溶液和然后在2ml的甲醇/水(9∶1)中的80mg(0.37mmol)的二碳酸二叔丁酯。將混合物在RT下攪拌過夜。對(duì)于后加工，將60ml的乙酸乙酯和30ml水加至該溶液。將有機(jī)相用0.1N鹽酸洗滌一次，干燥和在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上真空濃縮。
產(chǎn)率49mg(79％理論值)LC-MS(方法3)Rt＝2.56minMS(EI)m/z＝673(M+H)+LC-HR-FT-ICR-MS理論值C33H44N4O11(M+H)+673.3079實(shí)驗(yàn)值673.3082.
實(shí)施例66A(8S，11S，14S)-5，17-二(芐氧基)-14-{[(芐氧基)羰基]氨基}-11-((2R)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸芐酯
將200mg(0.20mmol)的來自實(shí)施例19A的化合物溶解在50ml的無水DMF中，在0℃下，加入210mg(0.79mmol)的叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，0.11ml(0.79mmol)的三乙胺和20mg(0.20mmol)的DMAP。將混合物在RT下攪拌2天。在加入20ml的二氯甲烷后，將溶液小心用10ml的飽和碳酸氫鈉溶液和10ml水洗滌。將有機(jī)相濃縮至干燥，將殘余物在高真空下干燥。
產(chǎn)率215mg(96％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝3.43minMS(EI)m/z＝1125(M+H)+實(shí)施例67A(8S，11S，14S)-5，17-二(芐氧基)-14-{[(芐氧基)羰基]氨基}-11-((2R)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基-2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基丙基)-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 將210mg(0.19mmol)的來自實(shí)施例66A的化合物溶解在2ml的THF中，和分別加入1ml水和甲醇。在加入13mg(0.56mmol)的氫氧化鋰后，將混合物在RT下攪拌12小時(shí)。然后將反應(yīng)溶液用30ml水稀釋并通過加入1N鹽酸調(diào)節(jié)至pH＝3。沉淀通過過濾收集并在高真空下干燥。
產(chǎn)率192mg(99％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝3.24minMS(EI)m/z＝1135(M+H)+實(shí)施例68A(2Z)-3-[2-(芐氧基)-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁戊硼烷-2-基)苯基]-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丙烯酸甲酯 類似于實(shí)施例8A，由1.0g(2.16mmol)的來自實(shí)施例54A的化合物，0.63g(2.5mmol)的4，4，4‘，4‘，5，5，5‘，5‘-八甲基-2，2‘-二-1，3，2-二噁戊硼烷，0.64g(6.50mmol)的乙酸鉀和0.063g(0.087mmol，0.04當(dāng)量)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物，在14ml的二甲亞砜中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率0.832g(76％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.96min.
MS(EI)m/z＝510(M+H)+實(shí)施例69A(2Z)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-3-(4，4′-二(芐氧基)-3′-{(1Z)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基}聯(lián)苯基-3-基)丙烯酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基-酯
類似于實(shí)施例12A，由0.42g(0.82mmol)的來自實(shí)施例68A的化合物，0.48g(0.82mmol)的來自實(shí)施例49A的化合物，0.54g(1.65mmol)的碳酸銫和0.024g(0.033mmol，0.04當(dāng)量)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物，在12ml的DMF中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率0.47g(64％理論值)HPLC(方法16)Rt＝6.57minMS(EI)m/z＝886(M+H)+實(shí)施例70A2-(芐氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-碘-N-乙基-L-苯丙氨酸 在氬氣氣氛下，將1.0g(2.01mmol)的來自實(shí)施例(-)-6A的化合物溶解在40ml的THF中，和加入241mg(6.03mmol)的氫化鈉(60％分散體，在礦物油中)，1.0g(6.03mmol)的碘化鉀和1.29ml(2509mg；16.1mmol)的乙基碘，將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物真空濃縮，將粗產(chǎn)物置入乙酸乙酯中，有機(jī)相用水洗滌數(shù)次，通過硫酸鈉干燥并真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過RP-HPLC色譜法(流動(dòng)相乙腈/水梯度)純化。
產(chǎn)率470mg(44％理論值).
LC-MS(方法12)Rt＝2.79min.
MS(EI)m/z＝526(M+H)+
實(shí)施例71A2-(芐氧基)-N-(叔丁氧羰基)-5-碘-N-乙基-L-苯基丙氨酸芐酯 類似于實(shí)施例7A，由420mg(0.68mmol)的來自實(shí)施例70A的化合物，9.77mg(0.08mmol)的DMAP，173mg(1.6mmol)的芐基醇和184mg(0.96mmol)的EDC，在8ml的乙腈中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率375mg(76％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝3.26min.
MS(EI)m/z＝616(M+H)+1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝0.80(mc，3H)，1.4(mc，9H)2.75(mc，1H)，3.07(mc，1H)，3.22(mc，1H)，3.47(mc，1H)，4.23(mc，1H)，5.06(s，2H)，5.15(mc，2H)，6.65(d，1H)，7.25-7.5(m，12H).
實(shí)施例72A2(S)-芐氧羰基氨基-3-[4，4‘-雙-芐氧基-3‘-(2(S)-芐氧羰基-(2-叔丁氧羰基-2-乙基)氨基乙基)聯(lián)苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯 類似于實(shí)施例12A，由343mg(0.54mmol)的來自實(shí)施例57A的化合物，334mg(0.54mmol)的來自實(shí)施例71A的化合物，35 mg(1.09mmol)的碳酸銫和40mg(0.05mmol)的雙(二苯膦)二茂鐵鈀(II)氯化物，在8ml的DMF中在氬氣氣氛下進(jìn)行制備。
產(chǎn)率216mg(40％理論值)
LC-MS(方法12)Rt＝3.54min.
MS(EI)m/z＝893(M-boc+H)+實(shí)施例73A2(S)-芐氧羰基氨基-3-[4，4‘-雙-芐氧基-3‘-(2(S)-芐氧羰基-2-乙基氨基乙基聯(lián)苯基-3-基]丙酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯鹽酸鹽 類似于實(shí)施例15A，由210mg(0.211mmol)的來自實(shí)施例72A的化合物和15ml的氯化氫在二噁烷中的4N溶液，在4ml的二噁烷中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率定量LC-MS(方法12)Rt＝3.01min.
MS(EI)m/z＝893(M-HCl+H)+類似于以上詳述的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湎卤硭袑?shí)施例74A至78A
實(shí)施例79A
{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將300mg(0.82mmol)的N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和171mg(1.06mmol)的叔丁基-(2-氨基乙基)氨基甲酸酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入204mg(1.06mmol)的EDC和33mg(0.25mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12小時(shí)。將溶液真空濃縮并將殘余物置入乙酸乙酯中。有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鎂干燥并真空干燥。剩余的固體在高真空下干燥。
產(chǎn)率392mg(94％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.36min.
MS(EI)m/z＝509(M+H)+實(shí)施例80A{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例79A，由300mg(0.82mmol)的N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和202mg(1.06mmol)的叔丁基(3-氨基-2-羥基丙基)氨基甲酸酯，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入204mg(1.06mmol)的EDC和33mg(0.25mmol)的HOBt進(jìn)行制備。
產(chǎn)率412mg(93％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.23min.
MS(EI)m/z＝539(M+H)+實(shí)施例81AN5-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺 將390mg(0.77mmol)的{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例79A)在50ml的乙醇中的溶液在加入活性炭上的40mg的鈀(10％)后在RT下在大氣壓下氫化4小時(shí)。將混合物過濾通過硅藻土，殘余物用乙醇洗滌。將濾液真空蒸發(fā)至干。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率263mg(91％理論值)MS(ESI)m/z＝375(M+H)+；397(M+Na)+.
實(shí)施例82AN5-(叔丁氧羰基)-N-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}-L-鳥氨酰胺 類似于實(shí)施例81A，由412mg(0.76mmol)的{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例80A)在50ml的乙醇中，加入41mg的披鈀活性炭(10％)進(jìn)行制備。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率306mg(99％理論值)MS(ESI)m/z＝405(M+H)+.
實(shí)施例83A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)丁基]氨基甲酸叔-丁酯 在-10℃下將91mg(0.90mmol)的4-甲基嗎啉和98mg(0.90mmol)的氯甲酸乙酯加至300mg(0.90mmol)的N2，N5-二(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸在10ml的四氫呋喃中的溶液；攪拌混合物30分鐘。在該溫度下，緩慢滴加1.81ml(1.81mmol)的在四氫呋喃中的1M氫化鋁鋰溶液。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12小時(shí)。在冰中冷卻同時(shí)，小心加入0.1ml水和0.15ml的4.5％氫氧化鈉溶液，將混合物在RT下攪拌另外3小時(shí)。將混合物過濾并將濾液真空濃縮。將殘余物溶解在乙酸乙酯中，用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并再次真空蒸發(fā)至干。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率239mg(83％理論值)MS(ESI)m/z＝319(M+H)+；341(M+Na)+.
實(shí)施例84A甲磺酸(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊酯 將103mg(0.90mmol)的甲磺酰氯和0.21ml(1.5mmol)的三乙胺加至240mg(0.75mmol)的[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例83A)在20ml的二氯甲烷中的溶液，將混合物在RT下攪拌16小時(shí)。將混合物用二氯甲烷稀釋并用0.1N鹽酸洗滌兩次。有機(jī)相通過硫酸鎂干燥并真空蒸發(fā)至干。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率218mg(73％理論值)MS(ESI)m/z＝419(M+Na)+.
實(shí)施例85A叔丁基-{(4S)-5-疊氮基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸酯 將218mg(0.55mmol)的甲磺酸(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊酯(實(shí)施例84A)在15ml的二甲基甲酰胺中的溶液與36mg(0.55mmol)的疊氮化鈉混合物并在70℃下攪拌12小時(shí)。大多數(shù)溶劑通過真空蒸餾去除，將殘余物用乙酸乙酯稀釋。混合物用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌數(shù)次，通過硫酸鎂干燥并真空蒸發(fā)至干。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率188mg(99％理論值)MS(ESI)m/z＝344(M+H)+.
實(shí)施例86A{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯 將188mg(0.55mmol)的{(4S)-5-疊氮基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例85A)在乙醇中的溶液在加入20mg的披鈀活性炭(10％)后在RT下在大氣壓下氫化12小時(shí)。將混合物過濾通過硅藻土，將殘余物用乙醇洗滌。將濾液真空蒸發(fā)至干。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率102mg(59％理論值)MS(ESI)m/z＝318(M+H)+；340(M+Na)+.
實(shí)施例87A-1-(羥基甲基)丙基]氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例83A，由300mg(0.85mmol)的(2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸，在10ml的四氫呋喃中，使用86mg(0.85mmol)的4-甲基嗎啉，92mg(0.85mmol)的氯甲酸乙酯和1.7ml(1.70mmol)的在四氫呋喃中的1M氫化鋁鋰溶液進(jìn)行制備。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率229mg(80％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.83min.
MS(EI)m/z＝339(M+H)+；239(M-C5H8O2+H)+.
實(shí)施例88A[(3S)-3-氨基-4-羥基丁基]氨基甲酸叔丁酯鹽酸鹽 類似于實(shí)施例81A，由229mg(0.68mmol)的[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)丙基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例87A)，在50ml的乙醇中，加入23mg的披鈀活性炭(10％)進(jìn)行制備。粗產(chǎn)物在1ml的1N鹽酸中攪拌和真空蒸發(fā)并在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率183mg(90％理論值)MS(ESI)m/z＝205(M-HCl+H)+.
實(shí)施例89A{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羥基丁基}氨基甲酸叔丁酯
類似于實(shí)施例83A，由300mg(0.60mmol)的(2S)-2，4-二[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸-N-環(huán)己基環(huán)己胺(1∶1)，在10ml的四氫呋喃中，和61mg(0.60mmol)的4-甲基嗎啉，65mg(0.60mmol)的氯甲酸乙酯和1.2ml(1.20mmol)的在四氫呋喃中的1M氫化鋁鋰溶液進(jìn)行制備。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率174mg(95％理論值)MS(ESI)m/z＝305(M+H)+.
實(shí)施例90A甲磺酸(2S)-2，4-二[(叔丁氧羰基)氨基]丁酯 類似于實(shí)施例84A，從250mg(0.81mmol)的{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羥基丁基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例89A)，在20ml的二氯甲烷中，以及110mg(0.97mmol)的甲磺酰氯和0.23ml(1.6mmol)的三乙胺進(jìn)行制備。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率200mg(64％理論值)MS(ESI)m/z＝383(M+H)+；400(M+Na)+.
實(shí)施例91A{(3S)-4-疊氮基-3-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸叔丁酯 類似于實(shí)施例85A，從200mg(0.52mmol)的甲磺酸(2S)-2，4-二[(叔丁氧羰基)氨基]丁酯(實(shí)施例90A)，在15ml的二甲基甲酰胺中，以及34mg(0.52mmol)的疊氮化鈉進(jìn)行制備。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率171mg(99％理論值)
實(shí)施例92A{(3S)-4-氨基-3-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸叔丁酯 制備的進(jìn)行類似于實(shí)施例86A，171mg(0.52mmol)的{(3S)-4-疊氮基-3-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例91A)，在10ml的乙醇中，加入20mg的披鈀活性炭(10％)。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率117mg(75％理論值)MS(ESI)m/z＝304(M+H)+；326(M+Na)+.
實(shí)施例93A((4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-{[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)丙基]氨基}-5-氧代戊基)氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例79A，由140mg(0.38mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和120mg(0.50mmol)的[(3S)-3-氨基-4-羥基丁基]氨基甲酸叔丁酯鹽酸鹽(實(shí)施例88A)，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入96mg(0.50mmol)的EDC，16mg(0.12mmol)的HOBt和0.17ml(1.00mmol)的二異丙基乙胺進(jìn)行制備。產(chǎn)物通過制備RP-HPLC純化(流動(dòng)相水/乙腈梯度90∶10→10∶90)。
產(chǎn)率50mg(23％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.24min.
MS(EI)m/z＝553(M+H)+實(shí)施例94A
N2-(叔丁氧羰基)-N-[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)丙基]-L-鳥氨酰胺 類似于實(shí)施例81A，由50mg(0.09mmol)的((4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-{[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)丙基]氨基}-5-氧代戊基)氨基甲酸芐酯(實(shí)施例93A)，在50ml的乙醇中，加入5mg的披鈀活性炭(10％)。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率37mg(98％理論值)MS(ESI)m/z＝419(M+H)+實(shí)施例95A{2-[((2S，4R)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}戊?；?氨基]乙基}氨基甲酸芐酯 85mg(0.17mmol)的5-芐氧羰基氨基-2(S)-叔丁氧羰基氨基-4(R)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)戊酸(實(shí)施例14A)，67.1mg(0.29mmol)的芐基-(2-氨基乙基)氨基甲酸酯鹽酸鹽和0.05ml(0.29mmol)的二異丙基乙胺，溶解在3ml的DMF中并冷卻至0℃。加入55.8mg(0.29mmol)的EDC和7.6mg(0.06mmol)的HOBT，并且將混合物升溫至室溫并攪拌過夜。然后將混合物真空濃縮并通過硅膠色譜法純化(二氯甲烷/甲醇20∶1)產(chǎn)率73mg(59％理論值).
LC-MS(方法12)Rt＝3.04min.
MS(EI)m/z＝673(M+H)+.
實(shí)施例96A{2-[((2S，4R)-2-氨基-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}戊?；?氨基]乙基}氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 將53mg(0.08mmol)的來自實(shí)施例95A的化合物冷卻至0℃，加入1ml的在二噁烷中的4N氯化氫。在1小時(shí)后，真空濃縮，獲得標(biāo)題化合物。產(chǎn)率41mg(90％理論值).
LC-MS(方法17)Rt＝1.60min.
MS(EI)m/z＝459(M-HCl+H)+.
實(shí)施例97A(2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸 將500mg(1.98mmol)的(2S)-4-氨基-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}丁酸溶解在5ml水和5ml的1N氫氧化鈉溶液中。加入在2ml的甲醇中的649mg(2.97mmol)的二碳酸二叔丁酯。將混合物在水浴中簡短加熱至30℃，并在室溫下攪拌過夜。在真空濃縮后，通過硅膠色譜法純化(二氯甲烷/甲醇/濃氨水溶液85∶15∶3)獲得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)率740mg(99％理論值).
LC-MS(方法17)Rt＝2.08min.
MS(EI)m/z＝353(M+H)+.
實(shí)施例98A{(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)羰基]丙基}氨基甲酸芐酯 將44mg(0.12mmol)的來自實(shí)施例97A的化合物和40mg(0.21mmol)的(3-氨基-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在1ml的DMF中并冷卻至0℃，連續(xù)加入和40.3mg(0.21mmol)的EDC和5.51mg(0.04mmol)的HOBt。使得混合物升溫至室溫并攪拌過夜。在真空濃縮后，通過硅膠色譜法純化(二氯甲烷/甲醇20∶1 )獲得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)率38mg(59％理論值).
LC-MS(方法17)Rt＝2.25min.
MS(EI)m/z＝525(M+H)+.
實(shí)施例99A[3-({(2S)-2-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)-2-羥基丙基]氨基甲酸叔丁酯 將38mg(0.12mmol)的來自實(shí)施例98A的化合物溶解在10ml的甲醇中，和加入10mg的披鈀活性炭(10％)。將混合物在大氣壓下氫化2小時(shí)并過濾通過硅藻土，將母液真空濃縮。
產(chǎn)率26mg(75％理論值).
LC-MS(方法12)Rt＝1.10min.
MS(EI)m/z＝391(M+H)+.
實(shí)施例100A[(1S)-2-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)-1-(羥基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯 將362.8mg(0.954mmol)的HATU和123.3mg(0.954mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至207.5mg(0.867mmol)的N-[(芐氧基)羰基]-L-絲氨酸在10ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘，加入165mg(0.867mmol)的(3-氨基-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)并將殘余物置入二氯甲烷中。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率175mg(49％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.56min.
MS(EI)m/z＝412(M+H)+.
實(shí)施例101AN-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}-L-絲氨酰胺 將131mg(0.318mmol)的[(1S)-2-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)-1-(羥基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例100A)溶解在20ml的乙醇中。向其中加入20mg的披鈀活性炭(10％)，將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土，將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上真空濃縮。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率63mg(71％理論值).
LC-MS(方法19)Rt＝0.53minMS(EI)m/z＝278(M+H)+.
實(shí)施例102A(2-{[N5-[{[(芐氧基)羰基]氨基}(亞氨基)甲基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；鵠氨基}乙基)氨基甲酸芐酯 將419.3mg(1.1mmol)的HATU和258.5mg(2mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至408.4mg(1mmol)的N5-[{[(芐氧基)羰基]氨基}(亞氨基)甲基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸在15ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入253.76mg(1.1mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑并將殘余物置入二氯甲烷中。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率334mg(41％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝1.94MS(EI)m/z＝585(M+H)+.
實(shí)施例103A[(6S)-6-氨基-7，12-二氧代-14-苯基-13-氧雜-2，8，11-三氮雜十四碳烷-1-亞氨基]氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 將334mg(0.417mmol)的(2-{[N5-[{[(芐氧基)羰基]氨基}(亞氨基)甲基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；鵠氨基}乙基)氨基甲酸芐酯(實(shí)施例102A)和17ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液的混合物在RT下攪拌4小時(shí)。
將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次，并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.05min.
MS(EI)m/z＝485(M-HCl+H)+.
實(shí)施例104A[2-({(3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酰基}氨基)乙基]氨基甲酸芐酯 將549.7mg(1.446mmol)的HATU和339.7mg(2.629mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至在25ml的無水DMF中的500mg(1.31mmol)的(3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酸。在RT下攪拌15分鐘后，加入333.5mg(1.446mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)，將殘余物置入二氯甲烷。將有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率556.6mg(44％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.41min.
MS(EI)m/z＝557(M+H)+.
實(shí)施例105A((1S)-4-氨基-1-{2-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽
在0℃下將8ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加至320mg(0.287mmol)的[2-({(3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己?；鶀氨基)乙基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例104A)在2ml的二噁烷中的溶液。在RT下1小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次，和在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法20)Rt＝2.84min.
MS(EI)m/z＝457(M-HCl+H)+.
實(shí)施例106A{2-[((3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-{[N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；鵠氨基}己?；?氨基]乙基}氨基甲酸芐酯 將89.5mg(0.235mmol)的HATU和55.3mg(0.428mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至78.4mg(0.214mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸在5ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入116mg(0.235mmol)的((1S)-4-氨基-1-{2-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽(實(shí)施例105A)在5ml的無水DMF中的溶液。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑并將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率48mg(28％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.33min.
MS(EI)m/z＝805(M+H)+.
實(shí)施例107A
((4S，10S)-4-氨基-10-{[(芐氧基)羰基]氨基}-5，12，17-三氧代-19-苯基-18-氧雜-6，13，16-三氮雜十九烷-1-基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 在RT下將2.5ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加至48mg(0.060mmol)的{2-[((3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-{[N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；鵠氨基}己酰基)氨基]乙基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例106A)在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下4小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次和在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.69min.
MS(EI)m/z＝70 5(M-HCl+H)+.
實(shí)施例108A{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-[(2，3-二羥基丙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸芐酯 將658.5mg(1.8mmol)的HATU和129.2mg(1mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至366mg(1mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸在15ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入182.2mg(1mmol)的3-氨基丙-1，2-二醇。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑和將殘余物置入二氯甲烷中。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率135mg(30％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.79min.
MS(EI)m/z＝440(M+H)+.
實(shí)施例109A{(4S)-4-氨基-5-[(2，3-二羥基丙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 在0℃下將4ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加至135mg(0.31mmol)的{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-[(2，3-二羥基丙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例108A)在0.5ml的二噁烷中的溶液。在RT下1小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次和在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.01min.
MS(EI)m/z＝340(M-HCl+H)+.
實(shí)施例110A[2-({(2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁?；鶀氨基)乙基]氨基甲酸芐酯
將321.9mg(0.847mmol)的HATU和199.3mg(1.534mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至410.8mg(0.770mmol)的(2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸-N-環(huán)己基環(huán)己胺(1∶1)在25ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入195.3mg(0.847mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑，將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率270mg(66％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.19min.
MS(EI)m/z＝529(M+H)+.
實(shí)施例111A{2-[((2S)-2-氨基-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}丁?；?氨基]乙基}氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 將270mg(0.511mmol)的[2-({(2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}氨基)乙基]氨基甲酸芐基-酯(實(shí)施例110A)和9ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液的混合物在RT下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次和在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.58min.
MS(EI)m/z＝429(M-HCl+H)+.
實(shí)施例112A{2-[((2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-{[N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；鵠氨基}丁酰基)氨基]乙基}氨基甲酸芐酯 將217.0mg(0.467mmol)的HATU和109.7mg(1.534mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至155.4mg(0.770mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸在5ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入195.3mg(0.849mmol)的{2-[((2S)-2-氨基-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}丁?；?氨基]乙基}氨基甲酸芐酯鹽酸鹽(實(shí)施例111A)在5ml的無水DMF中的溶液。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑和將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率71mg(21％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.42min.
MS(EI)m/z＝777(M+H)+實(shí)施例113A[(4S，7S)-4-氨基-7-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-5，8，13-三氧代-15-苯基-14-氧雜-6，9，12-三氮雜十五烷基-1-基]氨基甲酸芐酯鹽酸鹽
在RT下將3.7ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加至71mg(0.091mmol)的{2-[((2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-{[N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；鵠氨基}丁酰基)氨基]乙基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例112A)在1.5ml的二噁烷中的溶液。在RT下4小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次和在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.70min.
MS(EI)m/z＝677(M-HCl+H)+實(shí)施例114A{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[2-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-2-氧代乙基]丁基}氨基甲酸芐酯 將836.5mg(2.2mmol)的HATU和517.0mg(4mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至760.9mg(2mmol)的(3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酸在25ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入352.5mg(2.2mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯鹽酸鹽。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑和將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率400mg(38％理論值)
LC-MS(方法19)Rt＝2.33min.
MS(EI)m/z＝523(M+H)+.
實(shí)施例115A[(4S)-4-氨基-6-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸叔丁酯
將400mg(0.765mmol)的{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[2-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-2-氧代乙基]丁基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例114A)溶解在50ml的乙醇中。向其中加入80mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.42minMS(EI)m/z＝389(M+H)+.
類似于以上詳述的實(shí)施例83A的方法，由適當(dāng)?shù)钠鹗蓟衔镏苽湓谙卤碇性斒龅膶?shí)施例116A和117A
實(shí)施例118A[(1S)-2-氨基-1-(羥基甲基)乙基]氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 將269mg(0.83mmol)的芐基叔丁基[(2S)-3-羥基丙-1，2-二基]雙氨基甲酸酯(實(shí)施例117A)和5ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液的混合物在RT下攪拌2h。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次和在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率212mg(98％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝0.55min.
MS(EI)m/z＝225(M-HCl+H)+.
實(shí)施例119A{(1S)-1-[({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)羰基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例79A，由120mg(0.33mmol)的N5-(叔丁氧羰基)-N2-[(芐氧基)羰基]-L-鳥氨酸和136mg(0.43mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入82mg(0.43mmol)的EDC和13mg(0.1mmol)的HOBt進(jìn)行制備。將產(chǎn)物通過制備RP-HPLC純化(流動(dòng)相水/乙腈梯度90∶10→5∶95)。
產(chǎn)率132mg(61％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.68min.
MS(EI)m/z＝666(M+H)+實(shí)施例120A[(4S)-4-氨基-5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯 類似于實(shí)施例81A，由132mg(0.20mmol)的{(1S)-1-[({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)羰基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例119A)，在50ml的乙醇中，加入13mg的披鈀活性炭(10％)進(jìn)行制備。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
MS(ESI)m/z＝532(M+H)+實(shí)施例121A[2-({(2S)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]戊?；鶀氨基)乙基]氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例79A，由300mg(0.82mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和246mg(1.06mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入204mg(1.06mmol)的EDC，33mg(0.25mmol)的HOBt和148mg(1.15mmol)的N，N-二異丙基乙胺進(jìn)行制備。
產(chǎn)率397mg(89％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.20min.
MS(EI)m/z＝543(M+H)+實(shí)施例122A{(4S)-4-氨基-5-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸芐酯鹽酸鹽
將400mg(0.73mmol)的[2-({(2S)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]戊酰基}氨基)乙基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例121A)和1ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液的混合物在RT下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次和在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quantLC-MS(方法19)Rt＝1.61min.
MS(EI)m/z＝443(M-HCl+H)+.
實(shí)施例123AN5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；?N5-[(芐氧基)羰基]-N-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鳥氨酰胺 在0℃下將350mg(0.92mmol)的HATU和330mg(2.56mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至320mg(0.88mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和350mg(0.73mmol)的{(4S)-4-氨基-5-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-5-氧代戊基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例122A)在5ml的無水DMF中的溶液。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑，將殘余物與水?dāng)嚢瑁ㄟ^過濾收集并在高真空下干燥。
產(chǎn)率480mg(68％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.61min.
MS(EI)m/z＝791(M+H)+.
實(shí)施例124AN5-[(芐氧基)羰基]-L-鳥氨?；?N5-[(芐氧基)羰基]-N-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鳥氨酰胺鹽酸鹽 類似于實(shí)施例122A，由70mg(0.09mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；?N5-[(芐氧基)羰基]-N-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鳥氨酰胺(實(shí)施例123A)，在0.68ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液中進(jìn)行制備。
產(chǎn)率65mg(98％理論值)MS(ESI)m/z＝691(M-HCl+H)+實(shí)施例125A[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例79A，由92mg(0.44mmol)的N-[(芐氧基)羰基]甘氨酸和181mg(0.57mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)，在6ml的二甲基甲酰胺，加入110mg(0.57mmol)的EDC和18mg(0.13mmol)的HOBt進(jìn)行制備。產(chǎn)物通過制備RP-HPLC(流動(dòng)相水/乙腈梯度90∶10→5∶95)純化。
產(chǎn)率105mg(47％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.12min.
MS(EI)m/z＝509(M+H)+
實(shí)施例126A{(4S)-5-[(氨基乙酰基)氨基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯 類似于實(shí)施例81A，由105mg(0.21mmol)的[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例125A)，在50ml的乙醇中，加入11mg的披鈀活性炭(10％)進(jìn)行制備。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率64mg(83％理論值)MS(ESI)m/z＝375(M+H)+實(shí)施例127A[(1S)-1-[(芐氧基)甲基]-2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例79A，由150mg(0.46mmol)的O-芐基-N-[(芐氧基)羰基]-L-絲氨酸和188mg(0.59mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)，在6ml的二甲基甲酰胺中，加入114 mg(0.57mmol)的EDC和18mg(0.13mmol)的HOBt進(jìn)行制備。產(chǎn)物通過制備RP HPLC(流動(dòng)相水/乙腈梯度90∶10→5∶95)純化。
產(chǎn)率129mg(45％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.81min.
MS(EI)m/z＝629(M+H)+
實(shí)施例128A{(4S)-5-{[(2S)-2-氨基-3-羥基丙?；鵠氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯 將128mg(0.77mmol)的[(1S)-1-[(芐氧基)甲基]-2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例127A)在50ml的乙醇中的溶液在加入13mg的披鈀活性炭(10％)后在RT下在大氣壓下氫化48小時(shí)。將混合物過濾通過硅藻土并將殘余物用乙醇洗滌。將濾液真空蒸發(fā)至干。產(chǎn)物通過制備RP-HPLC(流動(dòng)相水/乙腈 梯度90∶10→5∶95)純化。
產(chǎn)率22mg(27％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝1.43min.
MS(EI)m/z＝405(M+H)+實(shí)施例129A{(1S)-4-氨基-1-[({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)羰基]-4-氧代丁基}氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯 在0℃下將129mg(0.34mmol)的HATU和133mg(0.95mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至100mg(0.27mmol)的N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-谷氨酸和112mg(0.35mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)在5ml的無水DMF中的溶液。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)并將殘余物用水?dāng)嚢?，通過過濾收集并在高真空下干燥。
產(chǎn)率45mg(25％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.27min.
MS(EI)m/z＝668(M+H)+.
實(shí)施例130A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[(2S)-2，5-二氨基-5-氧代戊?；鵠氨基}甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯
將33mg(0.05mmol)的{(1S)-4-氨基-1-[({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)羰基]-4-氧代丁基}氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(實(shí)施例129A)在1ml的二甲基甲酰胺中的溶液在加入4mg(0.05mmol)的哌啶后在室溫下攪拌45分鐘。將溶劑蒸發(fā)并將粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
MS(ESI)m/z＝446(M+H)+類似于以上詳述的實(shí)施例79A的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湓谙卤碇辛谐龅膶?shí)施例131A至135
類似于以上詳述的實(shí)施例129A的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湓谙卤碇辛谐龅膶?shí)施例136A至141A
類似于以上詳述的實(shí)施例81A的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湓谙卤碇辛谐龅膶?shí)施例142A至148A
類似于以上詳述的實(shí)施例130A的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湓谙卤碇辛谐龅膶?shí)施例149A至153A
實(shí)施例154A[(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)-4-氧代丁基]氨基甲酸芐酯
將104.5mg(0.275mmol)的HATU和64.6mg(0.500mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至133.4mg(0.25mmol)的(2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸-N-環(huán)己基環(huán)己胺(1∶1)在10ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入52.3mg(0.275mmol)的(3-氨基-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)和將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率25mg(19％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.23min.
MS(EI)m/z＝525(M+H)+實(shí)施例155A[3-({(2S)-4-氨基-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁?；鶀氨基)-2-羥基丙基]氨基甲酸叔丁酯 將25mg(0.048mmol)的[(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)-4-氧代丁基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例154A)溶解在10ml的乙醇中。向其中加入10mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.10minMS(EI)m/z＝391(M+H)+實(shí)施例156A[2-({(2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁?；鶀氨基)丙-1，3-二基]雙氨基甲酸二-叔丁酯
將11.9mg(0.294mmol)的HATU和64.1mg(0.535mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至142.7mg(0.267mmol)的(2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基氨基)丁酸-N-環(huán)己基環(huán)己胺(1∶1)在10ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入100mg(0.294mmol)的(2-氨基丙-1，3-二基)雙氨基甲酸二-叔丁酯鹽酸鹽。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)和將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率116mg(70％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.71min.
MS(EI)m/z＝624(M+H)+實(shí)施例157A[2-({(2S)-4-氨基-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁?；鶀氨基)丙-1，3-二基]雙氨基甲酸二-叔丁酯 將116mg(0.186mmol)的[2-({(2S)-4-{{(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁?；鶀氨基)丙-1，3-二基]雙氨基甲酸二-叔丁酯(實(shí)施例156A)溶解在20ml的乙醇中。向其中加入30mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率72mg(80％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝1.75minMS(EI)m/z＝490(M+H)+實(shí)施例158A(2-{[N-(叔丁氧羰基)-L-絲氨酰基(seryl)]氨基}乙基)氨基甲酸芐酯 將627.4mg(1.650mmol)的HATU和387.7mg(3.0mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至307.8mg(1.50mmol)的N-(叔丁氧羰基)-L-絲氨酸在25ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入380.6mg(1.650mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)和將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率49mg(7％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝1.83min.
MS(EI)m/z＝382(M+H)+實(shí)施例159A[2-(L-絲氨?；被?乙基]氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 將1.5ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加至49mg(0.128mmol)的(2-{[N-(叔丁氧羰基)-L-絲氨酰基]氨基}乙基)氨基甲酸芐酯(實(shí)施例158A)在1ml的二噁烷中的溶液。將混合物在RT下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率33mg(91％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝0.89min.
MS(EI)m/z＝282(M-HCl+H)+實(shí)施例160A{(1S)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-1-[2-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)-2-氧代乙基]戊基}氨基甲酸芐酯 將418.2mg(1.1mmol)的HATU和258.7mg(2mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至428.5mg(1mmol)的(3S)-3，7-雙{[(芐氧基)羰基]氨基}庚酸在30ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入209.2mg(1.1mmol)的(3-氨基-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)和將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率310mg(47％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.38min.
MS(EI)m/z＝601(M+H)+實(shí)施例161A((5S)-7-[(3-氨基-2-羥基丙基)氨基]-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-7-氧代庚基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 在0℃下將11ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加至160mg(0.267mmol)的{(1S)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-1-[2-({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)-2-氧代乙基]戊基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例160A)在5.5ml的二噁烷中的溶液。將混合物在RT下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.77min.
MS(EI)m/z＝501(M-HCl+H)+.
實(shí)施例162A[(1S)-2-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-1-(羥基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯 將1.05g(2.759mmol)的HATU和648.3mg(5.016mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至600mg(2.5mmol)的N-[(芐氧基)羰基]-L-絲氨酸在25ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入442.0mg(2.76mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)和將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率295mg(31％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.63min.
MS(EI)m/z＝382(M+H)+實(shí)施例163A[(1S)-2-[(2-氨基乙基)氨基]-1-(羥基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯鹽酸鹽
將在25ml的二噁烷中的58mg(0.152mmol)的[(1S)-2-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-1-(羥基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例162A)在二噁烷中的4M氯化氫溶液的混合物在RT下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率42mg(65％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝0.59min.
MS(EI)m/z＝282(M-HCl+H)+.
實(shí)施例164AN5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；?N-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-L-絲氨酰胺 在0℃下將2.76g(7.27mmol)的HATU和1.71g(13.22mmol)的N，N-二異丙基乙胺加至2.42g(6.61mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸在10ml的無水DMF中的溶液。在RT下攪拌15分鐘后，加入2.1g(6.61mmol)的[2-(L-絲氨?；被?乙基]氨基甲酸芐酯鹽酸鹽(實(shí)施例159A)。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌15小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)和將殘余物置入二氯甲烷。有機(jī)相用水洗滌，通過硫酸鎂干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率122mg(3％理論值)
LC-MS(方法17)Rt＝2.25min.
MS(EI)m/z＝630(M+H)+實(shí)施例165AN5-[(芐氧基)羰基]-L-鳥氨?；?N-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-L-絲氨酰胺鹽酸鹽 在RT下將10ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加至120mg(0.191mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；?N-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-L-絲氨酰胺(實(shí)施例164A)在5ml的二噁烷中的溶液。將混合物在RT下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法19)Rt＝1.63min.
MS(EI)m/z＝530(M-HCl+H)+.
實(shí)施例166A(3-{[(2S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯
在氬氣下，將50mg(0.076mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和40mg(0.10mmol)的N5-(叔丁氧羰基)-N-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}-L-鳥氨酰胺(實(shí)施例82A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入19mg(0.10mmol)的EDC和3.1mg(0.023mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12小時(shí)。將溶液真空濃縮，并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余固體通過抽吸過濾收集并通過硅膠色譜法純化(流動(dòng)相二氯甲烷/異丙醇30∶1至10∶1)。
產(chǎn)率47mg(48％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.40min.
MS(EI)m/z＝1043(M+H)+實(shí)施例167A(2-{[(2S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊?；鵠氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯
在氬氣下，將50mg(0.076mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和37mg(0.10mmol)的N5-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺(實(shí)施例81A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入19mg(0.10mmol)的EDC和3.1mg(0.023mmol)的HOBT。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12小時(shí)。將溶液真空濃縮，并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余固體通過抽吸過濾收集并通過硅膠色譜法純化(流動(dòng)相二氯甲烷/異丙醇30∶1至10∶1)。
產(chǎn)率43mg(55％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.29min.
MS(EI)m/z＝1013(M+H)+實(shí)施例168A((3S)-3-{[(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-1 1-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊?；鵠氨基}-4-羥基丁基)氨基甲酸叔丁酯
在氬氣下，將50mg(0.076mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和42mg(0.10mmol)的N2-(叔丁氧羰基)-N-[(1S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)丙基]-L-鳥氨酰胺(實(shí)施例94A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入19mg(0.10mmol)的EDC和3.1mg(0.023mmol)的HOBT。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12小時(shí)。將溶液真空濃縮，并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余固體通過抽吸過濾收集并通過硅膠色譜法純化(流動(dòng)相二氯甲烷/異丙醇30∶1至10∶1)。
產(chǎn)率25mg(31％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.18min.
MS(EI)m/z＝1057(M+H)+實(shí)施例169A(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-9-乙基-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸二鹽酸鹽
將930mg(0.91mmol)的來自實(shí)施例78A的化合物懸浮在260ml的冰醋酸/水/乙醇(4/1/1)中，與270mg的披鈀活性炭(10％)混合并其大氣壓下在室溫下氫化24小時(shí)。通過過濾通過硅藻土去除晶體，接著真空蒸發(fā)濾液至干燥并在攪拌同時(shí)加入36.5ml的0.1N鹽酸。將混合物在真空中蒸發(fā)至干并干燥至恒重。
產(chǎn)率500mg(98％理論值)LC-MS(方法20)Rt＝2.45min.
MS(ESI)m/z＝485(M-2HCl+H)+實(shí)施例170A(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-9-乙基-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸 將710mg(1.27mmol)的來自實(shí)施例169A的化合物溶解在15ml水和6.5ml(6.5mmol)的1N氫氧化鈉溶液中，在攪拌同時(shí)在室溫下，加入溶解在5.5ml的甲醇中的834mg(3.82mmol)的二碳酸二叔丁酯。在1小時(shí)后反應(yīng)完成(通過分析RP-HPLC檢查，流動(dòng)相乙腈/水)。通過滴加0.1N鹽酸將pH調(diào)節(jié)至3。每次用20ml的乙酸乙酯萃取三次，接著用硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至恒重。
產(chǎn)率770mg(88％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.16min.
MS(ESI)m/z＝685(M+H)+
實(shí)施例171A(2-{[(2S，4R)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{(2R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-4-羥基戊?；鵠氨基}乙基)氨基甲酸芐酯 將44mg(0.07mmol)的(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{(2R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸(實(shí)施例65A)溶解在3ml的DMF中，并加入38.9mg(0.08mmol)的來自實(shí)施例96A的化合物。將混合物冷卻至0℃和連續(xù)加入29.8mg(0.08mmol)的HATU和13mg(0.1mmol)的二異丙基乙胺。在0℃下30分鐘后，使得混合物升溫至室溫，并且在加入另外26mg(0.2mmol)的二異丙基乙胺后，攪拌過夜。真空濃縮，接著通過硅膠色譜法(二氯甲烷/甲醇9∶1)，然后通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率14mg(20％理論值).
LC-MS(方法19)Rt＝2.42min.
MS(EI)m/z＝1114(M+H)+.
實(shí)施例172A{(2R)-3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S，3R)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-3-羥基丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]-2-羥基丙基}氨基甲酸叔丁酯二鹽酸鹽 將23mg(0.02mmol)的來自實(shí)施例171A的化合物溶解在20ml的冰醋酸/甲醇/水混合物(4/1/1)中，和加入12mg的披鈀活性炭(10％)。將混合物在大氣壓下氫化4小時(shí)，然后通過過濾去除晶體。將如此獲得的母液真空蒸發(fā)至干，與2ml的0.1N鹽酸攪拌并再次蒸發(fā)至干。如此獲得的粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率16mg(83％理論值).
LC-MS(方法12)Rt＝1.23min.
MS(EI)m/z＝845(M-2HCl+H)+.
實(shí)施例173A(3-{[(2S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)丁酰基]氨基}-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯
將36mg(0.06mmol)的(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基-11-[3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)-[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸(實(shí)施例29A)和26mg(0.07mmol)的[3-({(2S)-2-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁?；鶀氨基)-2-羥基丙基]氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例99A)溶解在1ml的DMF中并冷卻至0℃，和連續(xù)加入18mg(0.09mmol)的EDC和2mg(0.02mmol)的HOBt。使得混合物升溫至室溫并攪拌過夜。將殘余物與水?dāng)嚢?，由此獲得的沉淀通過過濾收集，干燥并通過硅膠色譜法純化(二氯甲烷/甲醇100∶7).
產(chǎn)率9mg(14％理論值).
LC-MS(方法12)Rt＝2.22min.
MS(EI)m/z＝1029(M+H)+.
實(shí)施例174A(2-{[(2S，4R)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧-羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基丙基]}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-4-羥基戊?；鵠氨基}乙基)氨基甲酸芐酯
將30mg(0.05mmol)的(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基丙基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸(實(shí)施例29A)溶解在1ml的DMF中，加入27mg(0.05mmol)的來自實(shí)施例96A的化合物。將混合物冷卻至0℃，連續(xù)加入21mg(0.05mmol)的HATU和10mg(0.07mmol)的二異丙基乙胺。在0℃下30min后，使得混合物升溫至室溫，在加入另外0.20mg(0.14mmol)的二異丙基乙胺后，攪拌過夜。真空濃縮，接著通過硅膠色譜法純化(二氯甲烷/甲醇/濃氨水溶液90∶10∶1)。在濃縮級(jí)分后，在乙腈中攪拌殘余物并將沉淀通過過濾收集并真空干燥。
產(chǎn)率16mg(30％理論值).
LC-MS(方法17)Rt＝2.52min.
MS(EI)m/z＝1197(M+H)+.
實(shí)施例175A{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S，3R)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-3-羥基丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯
將16mg(0.01mmol)的來自實(shí)施例174A的化合物溶解在10ml的甲醇中，并加入8mg的披鈀活性炭(10％)。將混合物在大氣壓下氫化4小時(shí)，然后通過過濾去除晶體。將如此獲得的母液真空蒸發(fā)至干。如此獲得的粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率10mg(74％理論值).
LC-MS(方法12)Rt＝1.18min.
MS(EI)m/z＝829(M+H)+.
實(shí)施例176A(2-{[(3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-9-乙基-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)己?；鵠-氨基}乙基)氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將30mg(0.044mmol)的(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-9-乙基-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-羧酸(實(shí)施例170A)和80mg(0.162mmol)的芐基-((1S)-4-氨基-1-{2-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)氨基甲酸酯鹽酸鹽(實(shí)施例105A)溶解在2ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入31.16mg(0.162mmol)的EDC和1.95mg(0.014mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在50℃下攪拌3天。將溶液真空濃縮并將殘余物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)率14.5mg(30％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.55min.
MS(EI)m/z＝1123(M+H)+.
實(shí)施例177A[(4S)-5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-4-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯 在氬氣下，將50mg(0.076mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和53mg(0.10mmol)的[(4S)-4-氨基-5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例120A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入19mg(0.10mmol)的EDC和3.1mg(0.023mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12小時(shí)。真空濃縮溶液并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余的固體通過抽吸過濾收集并通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率40mg(45％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.46min.
MS(EI)m/z＝1170(M+H)+實(shí)施例178A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)乙酰基]氨基}甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯 在氬氣下，將43mg(0.066mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和32mg(0.085mmol)的{(4S)-5-[(氨基乙?；?氨基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例126A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入16mg(0.085mmol)的EDC和2.7mg(0.02mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余的固體通過抽吸過濾收集并通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率11.5mg(17％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.47min.
MS(EI)m/z＝1013(M+H)+
實(shí)施例179A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[(2S)-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，1 8-六烯-8-基]羰基}氨基)-3-羥基丙?；鵠氨基}甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯 在氬氣下，將28mg(0.042mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和22mg(0.055mmol)的{(4S)-5-{[(2S)-2-氨基-3-羥基丙?；鵠氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例128A)溶解在1.7ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入11mg(0.055mmol)的EDC和1.7mg(0.013mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余的固體通過抽吸過濾收集并通過色譜法純化(Sephadex LH20，流動(dòng)相甲醇/乙酸(0.25％))。
產(chǎn)率18.4mg(42％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.43min.
MS(EI)m/z＝1043(M+H)+實(shí)施例180A{(1S)-1-({[(2S)-5-氨基-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-5-氧代戊?；鵠氨基}甲基)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸叔丁酯
在氬氣下，將27mg(0.042mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和21mg(0.047mmol)的[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[(2S)-2，5-二氨基-5-氧代戊?；鵠氨基}甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例130A)溶解在2ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入10mg(0.053mmol)的EDC和1.7mg (0.013mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余的固體通過抽吸過濾收集并通過色譜法純化(Sephadex LH20，流動(dòng)相甲醇/乙酸(0.25％))。
產(chǎn)率16mg(36％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.38min.
MS(EI)m/z＝1084(M+H)+實(shí)施例181AN5-[(芐氧基)羰基]-N2-{[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}-L-鳥氨?；?N5-[(芐氧基)羰基]-N-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鳥氨酰胺
在氬氣下，將40mg(0.061mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和66mg(0.091mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-L-鳥氨?；?N5-[(芐氧基)羰基]-N-(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)-L-鳥氨酰胺(實(shí)施例124A)溶解在2ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入15mg(0.079mmol)的EDC和2.5mg(0.018mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余的固體通過抽吸過濾收集并通過制備HPLC純化(流動(dòng)相乙腈/水梯度)。
產(chǎn)率25mg(26％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.73min.
MS(EI)m/z＝1330(M+H)+實(shí)施例182A(2-{[2-({[(8S，11S)，14-[-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)乙基]氨基}-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯
在氬氣下，將34mg(0.052mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和17mg(0.078mmol)的{2-[(2-氨基乙基)氨基]-2-氧代乙基}氨基甲酸叔丁酯(Russ.J.Bioorg.Chem.1994，20，397-405)溶解在2ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入13mg(0.068mmol)的EDC和2.1mg(0.016mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物用水?dāng)嚢琛ＪＳ嗟墓腆w通過抽吸過濾收集并通過色譜法純化(Sephadex LH20，流動(dòng)相甲醇/乙酸(0.25％))。
產(chǎn)率23mg(50％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.16min.
MS(EI)m/z＝856(M+H)+類似于實(shí)施例166A的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湓谙卤碇辛谐龅膶?shí)施例183A至203A
實(shí)施例204A{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}-氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-9-乙基-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯 將14.5mg(0.013mmol)的(2-{[(3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-9-乙基-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[1 4.3.1.12，6]he-nicosa-1(20)，2(2 1)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)己?；鵠氨基}乙基)-氨基甲酸芐酯(實(shí)施例176A)溶解在3ml的乙醇中。向其中加入15mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率8mg(73％理論值).
LC-MS(方法19)Rt＝1.59min.
MS(EI)m/z＝855(M+H)+.
實(shí)施例205A{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(1S)-4-氨基-1-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]丁基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三(乙酸氫鹽)
將9mg(0.007mmol)的((1S)-4-{[(2S)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-1-{2-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)氨基甲酸芐酯(實(shí)施例189A)加入8ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物中。向其中加入1mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在RT下在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土并用乙醇洗滌，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.33min.
MS(EI)m/z＝941(M-3HOAc+H)+實(shí)施例206A{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(乙酸氫鹽)
將12mg(0.011mmol)的(2-{[(3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)己?；鵠氨基}乙基)氨基甲酸芐酯(實(shí)施例190A)加入3ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物中。向其中加入1.5mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在RT下在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土并用乙醇洗滌，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.48min.
MS(EI)m/z＝827(M-2HOAc+H)+實(shí)施例207A{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(乙酸氫鹽)
將29mg(0.027mmol)的(2-{[(2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)丁酰基]氨基}乙基)氨基甲酸芐酯(實(shí)施例191A)加入8ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物。向其中加入2.5mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在RT下在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土并用乙醇洗滌，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。
產(chǎn)率16mg(74％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝1.48min.
MS(EI)m/z＝799(M-2HOAc+H)+實(shí)施例208A{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-4-氨基-1-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}丁基)氨基]羰基}-1 4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三(乙酸氫鹽)
將12mg(0.009mmol)的{(3S)-3-{[(2S)-5-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊?；鵠氨基}-4-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-4-氧代丁基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例192A)加入8ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物。向其中加入1mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在RT下在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土并用乙醇洗滌，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。
產(chǎn)率7mg(84％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝1.31min.
MS(EI)m/z＝913(M-3HOAc+H)+實(shí)施例209A{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-4-{[氨基(亞氨基)甲基]氨基}丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(三氟乙酸氫鹽)
將13.4mg(0.012mmol)的[(6S)-6-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-7，12-二氧代-14-苯基-13-氧雜-2，8，11-三氮雜十四碳烷-1-亞氨基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例194A)加入5ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物。向其中加入1mg的披鈀活性炭(10％)，將混合物然后在RT下在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土并用乙醇洗滌，將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。純化目標(biāo)產(chǎn)物并通過制備HPLC轉(zhuǎn)化為二(三氟乙酸氫鹽)(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率5.3mg(41％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.19min.
MS(EI)m/z＝855(M-2TFA+H)+實(shí)施例210AN2-{[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}-L-鳥氨酰基-N-(2-氨基乙基)-L-鳥氨酰胺三(乙酸氫鹽)
將25mg(0.02mmol)的來自實(shí)施例181A的化合物加入8ml的4∶1∶1乙酸/水/乙醇混合物。向其中加入3mg的披鈀活性炭(10％)，并將混合物然后在RT下在大氣壓下氫化48h。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土并用乙醇洗滌，并將濾液真空蒸發(fā)至干。
產(chǎn)率8.5mg(41％理論值)LC-MS (方法20)Rt＝2.63min.
MS(EI)m/z＝927(M-3HOAc+H)+類似于實(shí)施例166A的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湓谙卤碇辛谐龅膶?shí)施例211A至215A。
類似于實(shí)施例205A的方法，由適當(dāng)?shù)脑牧现苽湓谙卤碇辛谐龅膶?shí)施例216A至220A。
實(shí)施例221A{3-[(8S，11S，14S)-8-[({2-[(2-氨基乙基)氨基]-2-氧代乙基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三氟乙酸氫鹽
將45mg(0.057mmol)的來自實(shí)施例183A的化合物溶解在1ml的乙-1，2-二胺中，在加入0.75mg的氰化鉀后，在RT下攪拌12h。然后將混合物用15ml水稀釋，用乙酸乙酯萃取一次。有機(jī)相用水洗滌，將合并的水相真空蒸發(fā)至干。將殘余物通過RP-HPLC(Kromasil 100C18，流動(dòng)相乙腈/三氟乙酸(0.2％)5∶95至95∶5)純化。
產(chǎn)率6.4mg(15％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝1.69min.
MS(EI)m/z＝756(M-TFA+H)+實(shí)施例222A芐基叔丁基-[(2S)-3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙-1，2-二基]雙氨基甲酸酯 在氬氣下，將0.208g(0.40mmol)的3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-N-(叔丁氧羰基)-L-丙氨酸-N-環(huán)己基環(huán)己胺(1∶1)，126mg(0.40mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)和0.21ml的三乙胺(1.48mmol)溶解在5ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入130mg(0.68mmol)的EDC和18mg(0.13mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鎂干燥并真空蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過制備HPLC(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)純化。
產(chǎn)率88mg(35％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.65min.
MS(EI)m/z＝638(M+H)+實(shí)施例223A{(4S)-5-({(2S)-3-氨基-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丙酰基}氨基)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯乙酸氫鹽 將110mg(0.172mmol)的芐基叔丁基[(2S)-3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙-1，2-二基]雙氨基甲酸酯(實(shí)施例222A)溶解在25ml的冰醋酸/水混合物(4∶1)中。向其中加入20mg的披鈀活性炭(10％)，和然后將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率85mg(93％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝1.67min.
MS(EI)m/z＝503(M-HOAc+H)+實(shí)施例224A[(5S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-7-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-7-氧代庚基]氨基甲酸芐酯
在氬氣下，將1g(2.54mmol)的(3S)-7-{[(芐氧基)羰基]氨基}-3-[(叔丁氧羰基)氨基]庚酸，406mg(2.54mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯和0.96ml的三乙胺(6.85mmol)溶解在20ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入826mg(4.3mmol)的EDC和113mg(0.84mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝2.21min.
MS(EI)m/z＝537(M+H)+實(shí)施例225A((1S)-5-氨基-1-{2-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}戊基)氨基甲酸叔丁酯乙酸氫鹽 將1.3g(2.42mmol)的[(5S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-7-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-7-氧代庚基]氨基甲酸芐酯(實(shí)施例224A)溶解在100ml的冰醋酸/水混合物(4∶1)中。向其中加入70mg的披鈀活性炭(10％)，和然后將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過預(yù)洗滌的硅藻土將濾液在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)儀上真空濃縮。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法19)Rt＝1.35min.
MS(EI)m/z＝403(M-HOAc+H)+實(shí)施例226A((1S，8S)-8-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-17，17-二甲基-2，10，15-三氧代-16-氧雜-3，11，14-三氮雜octadec-1-基)氨基甲酸芐酯
在氬氣下，將0.397g(1.08mmol)的N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸，0.500g(1.08 mmol)的((1S)-5-氨基-1-{2-[(2-{[(芐氧基)羰基]氨基}乙基)氨基]-2-氧代乙基}戊基)氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例225A)和0.56ml的三乙胺(4.0mmol)溶解在10ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入352mg(1.84mmol)的EDC和48.2mg(0.36mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率290mg(36％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.30min.
MS(EI)m/z＝751(M+H)+實(shí)施例227A{(4S，11S)-4-氨基-11-[(叔丁氧羰基)氨基]-20，20-二甲基-5，13，18-三氧代-19-氧雜-6，14，17-三氮雜henicos-1-基}氨基甲酸叔丁酯乙酸氫鹽 將290mg(0.390mmol)的((1S，8S)-8-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-17，17-二甲基-2，10，15-三氧代-16-氧雜-3，11，14-三氮雜-十八烷-1-基)氨基甲酸芐酯(實(shí)施例226A)溶解在10ml的4/1冰醋酸/水混合物中。向其中加入75mg的披鈀活性炭(10％)，然后將混合物在大氣壓下氫化15小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過Millipore濾器并將濾液濃縮，在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法17)Rt＝1.72min.
MS(EI)m/z＝617(M-HOAc+H)+實(shí)施例228AN5-[N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-D-鳥氨?；鵠-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺 在氬氣下，將286mg(0.78mmol)的N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-D-鳥氨酸和439mg(1.17mmol)的來自實(shí)施例143A的化合物溶解在16ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入255mg(1.33mmol)的EDC和106mg(0.78mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌48h。真空濃縮溶液和將殘余物置入二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉水溶液，0.1N鹽酸和水洗滌。將合并的有機(jī)相真空濃縮，如此獲得的固體在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.58g(quant.)LC-MS(方法17)Rt＝2.59min.
MS(EI)m/z＝723(M+H)+實(shí)施例229AN5-[N5-(叔丁氧羰基)-D-鳥氨酰基]-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺 將0.58g(0.80mmol)的來自實(shí)施例228A的化合物溶解在27ml的乙醇中，加入0.06g(0.06mmol)的Pd/C。將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)，在過濾通過硅藻土后，真空濃縮濾液。如此獲得的固體在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.47g(97％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝1.61min.
MS(EI)m/z＝589(M+H)+實(shí)施例230A{(4S)-6-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將0.1g(0.263mmol)的(3S)-6-{[(芐氧基)羰基]氨基}-3-[(叔丁氧羰基)氨基]己酸(Bioorg.Med.Chem.Lett.1998，8，1477-1482)和0.108g(0.342mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.066g(0.342mmol)的EDC和0.011g(0.079mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.127g(71％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.36min.
MS(EI)m/z＝680(M+H)+實(shí)施例231A{(1S)-4-氨基-1-[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]丁基}氨基甲酸叔丁酯 將20mg的披鈀活性炭(10％)加至0.127g(0.19mmol)的來自實(shí)施例230A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
MS(EI)m/z＝546(M+H)+實(shí)施例232A芐基叔丁基[(2S)-3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙-1，2-二基]雙氨基甲酸酯 在氬氣下，將0.127g(0.37mmol)的N-[(芐氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)-氨基]-L-丙氨酸和0.193g(0.49mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.093g(0.49mmol)的EDC和0.015g(0.11mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率0.126g(53％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.65min.
MS(EI)m/z＝638(M+H)+實(shí)施例233A[(2S)-2-氨基-3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯 將20mg的披鈀活性炭(10％)加至0.122g(0.19mmol)的來自實(shí)施例232A的化合物在50ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化4小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
MS(EI)m/z＝504(M+H)+實(shí)施例234A{(1S)-1-[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代乙基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁基}氨基甲酸芐酯
在氬氣下，將0.1g(0.26mmol)的(3S)-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-6-[(叔丁氧羰基)氨基]己酸(J.Med.Chem.2002，45，4246-4253)和0.11g(0.34mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.065g(0.34mmol)的EDC和0.011g(0.079mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.146g(82％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.5min.
MS(EI)m/z＝680(M+H)+實(shí)施例235A[(4S)-4-氨基-6-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸叔丁酯 將22mg的披鈀活性炭(10％)加至0.146g(0.22mmol)的來自實(shí)施例234A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
MS(EI)m/z＝546(M+H)+實(shí)施例236A{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羥基丁基}氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例83A，由300mg(0.85mmol)的(2S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-2-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸，在10ml的四氫呋喃中，以及86mg(0.85mmol)的4-甲基嗎啉，92mg(0.85mmol)的氯甲酸乙酯和1.7ml(1.70mmol)的在四氫呋喃中的1M氫化鋁鋰溶液進(jìn)行制備。在不進(jìn)一步純化下使得產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)率238mg(82％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.83min.
MS(EI)m/z＝339(M+H)+實(shí)施例237A[(1S)-3-氨基-1-(羥基甲基)丙基]氨基甲酸叔丁酯 類似于實(shí)施例81A，由237mg(0.7mmol)的{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羥基丁基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例236A)，在50ml的乙醇中，加入23mg的披鈀活性炭(10％)進(jìn)行制備。
產(chǎn)率177mg(quant.)MS(ESI)m/z＝205(M+H)+.
實(shí)施例238A
{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羥基丁基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將0.082g(0.22mmol)的N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和0.059g(0.29mmol)的{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羥基丁基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例237A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.056g(0.29mmol)的EDC和0.009g(0.067mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.088g，(72％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.04min.
MS(EI)m/z＝553(M+H)+實(shí)施例239AN5-(叔丁氧羰基)-N-{(3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-羥基丁基}-L-鳥氨酰胺 將17mg的披鈀活性炭(10％)加至0.088g(0.16mmol)的來自實(shí)施例238A的化合物在10ml的乙醇中的混合物中，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.064g(96％理論值)MS(EI)m/z＝419(M+H)+實(shí)施例240A芐基叔丁基-[5-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-5-氧代戊-1，3-二基]雙氨基甲酸酯 在氬氣下，將0.20g(0.55mmol)的3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-5-[(叔丁氧-羰基)氨基]戊酸(Bioorg.Chem.Med.Lett.2003，13，241-246)和0.114g(0.71mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.136g(0.71mmol)的EDC和0.022g(0.164mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率0.074g(27％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.37min.
MS(EI)m/z＝509(M+H)+實(shí)施例241A[3-氨基-5-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯
將15mg的披鈀活性炭(10％)加至0.074g(0.15mmol)的來自實(shí)施例240A的化合物在10ml的乙醇中的混合物中，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.050g(92％理論值)MS(EI)m/z＝375(M+H)+實(shí)施例242A[3-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-3-氧代丙基]氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將0.10g(0.45mmol)的N-[(芐氧基)羰基]β-丙氨酸和0.185g(0.58mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.112g(0.58mmol)的EDC和0.018g(0.134mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.215g(92％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.19min.
MS(EI)m/z＝523(M+H)+
實(shí)施例243A{(4S)-5-[(3-氨基丙?；?氨基]-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯 將40mg的披鈀活性炭(10％)加至0.215g(0.41mmol)的來自實(shí)施例242A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.160g(quant.)MS(EI)m/z＝389(M+H)+實(shí)施例244A芐基叔丁基-[5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-5-氧代戊-1，3-二基]雙氨基甲酸酯 在氬氣下，將0.146g(0.40mmol)的3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-5-[(叔丁氧羰基)氨基]戊酸和0.164g(0.52mmol)的{(4S)-5-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例86A)溶解在8ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.10g(0.52mmol)的EDC和0.009g(0.12mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.232g，(87％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.73min.
MS(EI)m/z＝666(M+H)+實(shí)施例245A[3-氨基-5-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯 將35 mg的披鈀活性炭(10％)加至0.232g(0.35mmol)的來自實(shí)施例244A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.175g(94％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝1.8min.
MS(EI)m/z＝532(M+H)+實(shí)施例246A{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-羥基戊基}氨基甲酸芐酯 類似于實(shí)施例83A，由1.0g(2.73mmol)的N5-[(芐氧基)羰基]-N2-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸，在35ml的四氫呋喃中，以及0.276g(2.73mmol)的4-甲基嗎啉，0.296g(2.73mmol)的氯甲酸乙酯和5.5ml(5.5mmol)的在四氫呋喃中的1M氫化鋁鋰溶液進(jìn)行制備。將產(chǎn)物通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率0.398g(41％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.84min.
MS(EI)m/z＝354(M+H)+實(shí)施例247A[(1S)-4-氨基-1-(羥基甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯 類似于實(shí)施例81A，由0.232g(0.66mmol)的{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-羥基戊基}氨基甲酸芐酯(實(shí)施例246A)，在50ml的乙醇中，加入23mg的披鈀活性炭(10％)。
產(chǎn)率135mg(94％理論值)MS(ESI)m/z＝219(M+H)+.
實(shí)施例248A{(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-[({(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-羥基戊基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將0.155g(0.42mmol)的N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和0.12g(0.55mmol)的[(1S)-4-氨基-1-(羥基甲基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例247A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.105g(0.55mmol)的EDC和0.017g(0.13mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率0.164g(69％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.05min.
MS(EI)m/z＝567(M+H)+實(shí)施例249AN5-(叔丁氧羰基)-N-{(4S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-羥基戊基}-L-鳥氨酰胺 將30mg的披鈀活性炭(10％)加至0.164g(0.29mmol)的來自實(shí)施例248A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.125g(quant.)MS(EI)m/z＝433(M+H)+實(shí)施例250A芐基叔丁基-[(2S)-3-羥基丙-1，2-二基]雙氨基甲酸酯 類似于實(shí)施例83A，由0.40g(1.18mmol)的N-[(芐氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-丙氨酸，在20ml的四氫呋喃中，以及0.12g(1.18mmol)的4-甲基嗎啉，0.13g(1.18mmol)的氯甲酸乙酯和2.4ml(2.4mmol)的在四氫呋喃中的1M氫化鋁鋰溶液進(jìn)行制備。將產(chǎn)物通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率0.193g(50％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.79min.
MS(EI)m/z＝325(M+H)+實(shí)施例251A[(2S)-2-氨基-3-羥基丙基]氨基甲酸叔丁酯 類似于實(shí)施例81A，由0.193g(0.59mmol)的芐基叔丁基-[(2S)-3-羥基丙-1，2-二基]雙氨基甲酸酯(實(shí)施例250A)在10ml的乙醇加入23mg的披鈀活性炭(10％)進(jìn)行制備。
產(chǎn)率112mg(99％理論值)MS(ESI)m/z＝191(M+H)+.
實(shí)施例252A[(1S)-4-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-({[(1S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)乙基]氨基}羰基)丁基]氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將0.18g(0.49mmol)的N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和0.122g(0.64mmol)的[(2S)-2-氨基-3-羥基丙基]氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例251A)溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.123g(0.64mmol)的EDC和0.02g(0.15mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率0.216g(81％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.07min.
MS(EI)m/z＝539(M+H)+實(shí)施例253AN5-(叔丁氧羰基)-N-[(1S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-(羥基甲基)乙基]-L-鳥氨酰胺 將40mg的披鈀活性炭(10％)加至0.216g(0.40mmol)的來自實(shí)施例252A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
MS(EI)m/z＝405(M+H)+實(shí)施例254A[3-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-3-氧代丙基]氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將0.20g(0.90mmol)的N-[(芐氧基)羰基]-β-丙氨酸和0.187g(1.17mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.223g(1.17mmol)的EDC和0.036g(0.27mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.30g(82％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝1.93min.
MS(EI)m/z＝366(M+H)+實(shí)施例255AN-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-β-丙氨酰胺 將80mg的披鈀活性炭(10％)加至0.30g(0.82mmol)的來自實(shí)施例254A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.190g(quant.)MS(EI)m/z＝232(M+H)+實(shí)施例256A((6S)-6-{[(芐氧基)羰基]氨基}-10-羥基-15，15-二甲基-7，13-二氧代-14-氧雜-2，8，12-三氮雜十六烷-1-亞氨基)亞氨基二碳酸二-叔丁酯
在氬氣下，將0.30g(0.49mmol)的N2-[(芐氧基)羰基]-N5-[[二(叔丁氧羰基)氨基](亞氨基)甲基]-L-鳥氨酸-環(huán)己胺(1∶1)和0.12g(0.64mmol)的(3-氨基-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.123g(0.64mmol)的EDC和0.02g(0.15mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體通過制備HPLC純化(Kromasil，流動(dòng)相乙腈/0.25％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)。
產(chǎn)率0.183g(54％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.58min.
MS(EI)m/z＝681(M+H)+實(shí)施例257AN5-[[二(叔丁氧羰基)氨基](亞氨基)甲基]-N-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}-L-鳥氨酰胺 將28mg的披鈀活性炭(10％)加至0.182g(0.27mmol)的來自實(shí)施例256A的化合物在10ml的乙醇中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率0.138g(94％理論值)MS(EI)m/z＝547(M+H)+實(shí)施例258A
{(1S)-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-1-[({3-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-羥基丙基}氨基)羰基]丁基}氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將0.20g(0.50mmol)的N2，N5-二[(芐氧基)羰基]-L-鳥氨酸和0.124g(0.65mmol)的(3-氨基-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在6ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.124g(0.65mmol)的EDC和0.02g(0.15mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.245g(86％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.15min.
MS(EI)m/z＝573(M+H)+實(shí)施例259A((4S)-5-[(3-氨基-2-羥基丙基)氨基]-4-{[(芐氧基)羰基]氨基}-5-氧代戊基)氨基甲酸芐酯鹽酸鹽 在0℃下將6.8ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至0.263g(0.46mmol)的來自實(shí)施例258A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.205g(88％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.47min.
MS(EI)m/z＝473(M-HCl+H)+實(shí)施例260A[(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-({2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}氨基)-3-氧代丙基]氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將0.50g(0.96mmol)的3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-N-(叔丁氧-羰基)-L-丙氨酸-N-環(huán)己基環(huán)己胺(1∶1)和0.154g(0.96mmol)的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在10ml的二甲基甲酰胺和0.5ml的三乙胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入0.314g(1.64mmol)的EDC和0.043g(0.32mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物置入乙酸乙酯中。將有機(jī)相連續(xù)用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率0.41g(88％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝2.17min.
MS(EI)m/z＝481(M+H)+實(shí)施例261A3-氨基-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-丙氨酰胺乙酸氫鹽 將50mg的披鈀活性炭(10％)加至0.41g(0.847mmol)的來自實(shí)施例260A的化合物在80ml的乙酸/乙醇/水(4∶1∶1)中的混合物，并然后將混合物在大氣壓下氫化12小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，將濾液在真空中濃縮并在高真空下干燥。粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.09min.
MS(EI)m/z＝347(M-HOAc+H)+實(shí)施例262A{3-[(8S，11S，14S)-8-{(6S，11S)-6，11-二[(叔丁氧羰基)氨基]-18，18-二甲基-8，16-二氧代-17-氧雜-2，9，15-三氮雜十九碳烷-1-酰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[1 4.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯 在氬氣下，將20mg(0.03mmol)的來自實(shí)施例29A的化合物和22mg(0.04mmol)的{(1S)-4-氨基-1-[2-({(2S)-2，5-二[(叔丁氧羰基)氨基]戊基}氨基)-2-氧代-乙基]丁基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例231A)溶解在1ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入7.6mg(0.04mmol)的EDC和1.24mg (0.009mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌12h。真空濃縮溶液并將殘余物用水?dāng)嚢?。剩余的固體通過抽吸過濾收集并通過色譜法純化(Sephadex LH20，流動(dòng)相甲醇/乙酸(0.25％))。
產(chǎn)率25.4mg(70％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝2.81min.
MS(EI)m/z＝1184(M+H)+
實(shí)施例263AN5-{N-[(芐氧基)羰基]甘氨酰基}-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺 在氬氣下，將300mg(1.43mmol)的N-[(芐氧基)羰基]甘氨酸和830mg(2.15mmol)的來自實(shí)施例143A的化合物溶解在28ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入467mg(2.44mmol)的EDC和194mg(1.43mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌48小時(shí)。真空濃縮溶液并將殘余物置入二氯甲烷中并用飽和碳酸氫鈉溶液，0.1N鹽酸和水洗滌。將合并的有機(jī)相真空濃縮，將如此獲得的固體在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝1.98min.
MS(EI)m/z＝566(M+H)+實(shí)施例264AN5-甘氨?；?N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺 將1030mg(1.82mmol)的來自實(shí)施例263A的化合物溶解在60ml的乙醇中，加入100mg(0.09mmol)的Pd/C(10％)。將混合物在大氣壓下氫化過夜，在通過硅藻土過濾后，將濾液真空濃縮。如此獲得的固體在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率693mg(84％理論值)
LC-MS(方法17)Rt＝1.41min.
MS(EI)m/z＝432(M+H)+實(shí)施例265AN5-[N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；鵠-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺 在氬氣下，將1.95g(5.31mmol)N2-[(芐氧基)羰基]-N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨酸和3.12g(7.97mmol)的來自實(shí)施例143A的化合物溶解在100ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入1.73g(9.03mmol)的EDC和0.72g(5.31mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌48小時(shí)。真空濃縮溶液并將殘余物置入二氯甲烷中并用飽和碳酸氫鈉水溶液，0.1N鹽酸和水洗滌。將合并的有機(jī)相真空濃縮，將如此獲得的固體在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率4.23g(96％理論值)LC-MS(方法19)Rt＝2.19min.
MS(EI)m/z＝723(M+H)+實(shí)施例266AN5-[N5-(叔丁氧羰基)-L-鳥氨?；鵠-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺
將4.23g(5.09mmol)的來自實(shí)施例265A的化合物溶解在250ml的乙醇中，加入0.42g(0.39mmol)的Pd/C(10％)。將混合物在大氣壓下氫化6小時(shí)，在過濾通過硅藻土后，將濾液真空濃縮。如此獲得的固體在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率2.4g(72％理論值)LC-MS(方法12)Rt＝1.31min.
MS(EI)m/z＝589(M+H)+實(shí)施例267A((1S，7S)-7-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-15，15-二甲基-2，8，13-三氧代-14-氧雜-3，9，12-三氮雜十六碳烷-1-基)氨基甲酸芐酯 在氬氣下，將250mg(0.71mmol)的(2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酸和410mg(1.06mmol)的來自實(shí)施例143A的化合物溶解在14ml的二甲基甲酰胺中。然后，在0℃(冰浴)下，加入231mg(1.21mmol)的EDC和96mg(0.71mmol)的HOBt。將混合物緩慢升溫至RT并在RT下攪拌48小時(shí)。真空濃縮溶液并將殘余物置入二氯甲烷中，用飽和碳酸氫鈉溶液，0.1N鹽酸和水洗滌。將合并的有機(jī)相真空濃縮，將如此獲得的固體在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率355mg(66％理論值)
LC-MS(方法12)Rt＝2.32min.
MS(EI)m/z＝709(M+H)+實(shí)施例268AN5-{(2S)-2-氨基-4-[(叔丁氧羰基)氨基]丁酰基}-N2-(叔丁氧羰基)-N-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}-L-鳥氨酰胺 將355mg(0.5mmol)的來自實(shí)施例267A的化合物溶解在17ml的乙醇中，加入36mg(0.03mmol)的Pd/C(10％)。將混合物在大氣壓下氫化過夜，并且在過濾通過硅藻土后，將濾液真空濃縮。如此獲得的固體在不進(jìn)一步純化下反應(yīng)。
產(chǎn)率304mg(82％理論值)LC-MS(方法17)Rt＝1.64min.
MS(EI)m/z＝575(M+H)+類似于實(shí)施例262A的方法，制備下表中列出的實(shí)施例269A至286A。
類似于實(shí)施例171A的方法，制備下表列出的實(shí)施例294A至297A。
類似于實(shí)施例205A的方法，制備下表詳細(xì)列出的實(shí)施例298A。
例舉性實(shí)施方案從部分保護(hù)的雙苯霉素衍生物(如，例如，29A)起始，可以合成例舉性的實(shí)施方案。

實(shí)施例1(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{[(3-氨基-2-羥基丙基)氨基]羰基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺(carboxamide)四鹽酸鹽 將36mg(0.035mmol)的(3-{[(2S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[1 4.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例166A)溶解在3.0ml的在二噁烷中的4N氯化氫中并在室溫下攪拌2h。將溶劑真空蒸發(fā)和將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率25mg(92％理論值).
MS(ESI)m/z＝643(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.55-2.05(m，8H)，2.75-3.15(m，8H)，3.17-3.45(m，3H)，3.54(mc，1H)，3.73(mc，1H)，3.87-4.0(m，2H)，4.23(mc，1H)，4.41(mc，1H)，4.82(mc，1H)，6.83-6.92(m，2H)，6.96(s，1H)，7.25(s，1H)，7.36(d，1H)，7.42(d，1H).
將四鹽酸鹽通過制備HPLC(Reprosil ODS-A，流動(dòng)相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)轉(zhuǎn)化為四(三氟乙酸氫鹽)。
實(shí)施例2(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四(三氟乙酸氫鹽) 將29.7mg(0.029mmol)的(2-{[(2S)-5-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊酰基]氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例167A)溶解在3.0ml的在二噁烷中的4N氯化氫中并在室溫下攪拌2小時(shí)。將溶劑真空蒸發(fā)和將剩余的固體通過制備HPLC(ReprosilODS-A，流動(dòng)相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)轉(zhuǎn)化為四(三氟乙酸氫鹽)。
產(chǎn)率20mg(64％理論值).
MS(ESI)m/z＝613(M-4TFA+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.53-1.93(m，8H)，2.32(mc，1H)，2.93(mc，4H)，3.02(mc，1H)，3.08(mc，2H)，3.23(mc，1H)，3.35-3.60(m，3H)，4.23(mc，2H)，4.40(mc，1H)，4.82(mc，1H)，6.82-6.93(m，2H)，6.97(s，1H)，7.25(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
實(shí)施例3(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((4S)-4-氨基-5-{[(1S)-3-氨基-1-(羥基甲基)丙基]氨基}-5-氧代戊基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]-henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
將24.9mg(0.024mmol)的((3S)-3-{[(2S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)戊?；鵠氨基}-4-羥基丁基)氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例168A)溶解在3.0ml的在二噁烷中的4N氯化氫中并在室溫下攪拌2小時(shí)。將溶劑真空蒸發(fā)和將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率17mg(90％理論值).
MS(ESI)m/z＝657(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.95(m，10H)，2.75-3.05(m，7H)，3.08-3.18(m，2H)，3.3(mc，1H)，3.43-3.61(m，3H)，3.87-3.97(m，2H)，4.41(mc，1H)，4.82(mc，1H)，6.83-6.92(m，2H)，6.96(s，1H)，7.25(s，1H)，7.34(d，1H)，7.42(d，1H).
將四鹽酸鹽通過制備HPLC(Reprosil ODS-A，流動(dòng)相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)轉(zhuǎn)化為四(三氟乙酸氫鹽)。
實(shí)施例4(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S，3R)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-3-羥基丁基)-11-[(2R)-3-氨基-2-羥基丙基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
將16mg(0.02mmol)的來自實(shí)施例172A的化合物提供在0.5ml的二噁烷中并冷卻至0℃，加入1ml的在二噁烷中的4N氯化氫。使得混合物升溫至室溫并攪拌1小時(shí)。將混合物然后真空濃縮，將殘余物在高真空下干燥。與乙腈攪拌并收集沉淀，其通過過濾分離出來，獲得標(biāo)題化合物，為固體。
產(chǎn)率8mg(42％理論值).
LC-MS(方法20)Rt＝1.03min.
MS(EI)m/z＝645(M-4HCl+H)+.
實(shí)施例5(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-3-氨基-1-{[(3-氨基-2-羥基丙基)氨基]羰基}丙基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 將9mg(0.01mmol)的來自實(shí)施例173A的化合物冷卻至0℃并加入1ml的在二噁烷中的4N氯化氫。在1小時(shí)后，真空濃縮混合物。將殘余物置入乙腈并再次濃縮。
產(chǎn)率7mg(98％理論值).
LC-MS(方法20)Rt＝0.95min.
MS(EI)m/z＝629(M-4HCl+H)+.
實(shí)施例6(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S，3R)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-3-羥基丁基)-11-[3-氨基丙基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 將8mg(0.01mmol)的來自實(shí)施例175A的化合物在0℃下與0.5ml的在二噁烷中的4N氯化氫混合。使得混合物升溫至室溫并攪拌1小時(shí)。然后將混合物真空濃縮，將殘余物在高真空下干燥。與乙腈攪拌，收集沉淀，其通過過濾分離出來，獲得標(biāo)題化合物，為固體。
產(chǎn)率7mg(59％理論值).
LC-MS(方法20)Rt＝0.90min.
MS(EI)m/z＝630(M-4HCl+H)+.
實(shí)施例7(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}-11-(3-氨基丙基)-9-乙基-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
在0℃下將0.1ml的在二噁烷中的4M氯化氫溶液加入7.5mg(0.009mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-9-乙基-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例204A)在0.1ml的二噁烷中的溶液。在RT下2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。將殘余物與二乙基醚混合并濃縮。
產(chǎn)率4.9mg(70％理論值)1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝0.87(m，3H)，1.10-1.27(m，2H)，1.5-1.9(m，8H)，2.53-3.80(m，14H)，4.47(m，1H)，4.96(m，1H)，5.65(m，1H)，6.90(d，2H)，7.06(s，1H)，7.21(s，1H)，7.45(d，1H)，7.53(d，1H).
實(shí)施例8(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-2-[(3-氨基-2-羥基丙基)氨基]-1-(羥基甲基)-2-氧代乙基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺三鹽酸鹽
將12.7mg(0.014mmol)的(3-{[(2S)-2-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)-3-羥基丙酰基]氨基}-2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例188A)在1ml的二噁烷中的4M氯化氫溶液中的混合物在RT下攪拌20分鐘。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。
產(chǎn)率9.1mg(90％理論值)LC-MS(方法20)Rt＝1.83min.
MS(EI)m/z＝616(M-3HCl+H)+1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.56-1.90(m，4H)，2.78-3.82(m，14H)，3.96(m，1H)，4.42(m，1H)，4.88(m，1H)，6.91(d，2H)，6.97(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
實(shí)施例9(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{2-[(2-氨基乙基)氨基]-2-氧代乙基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
將30mg(0.029mmol)的(2-{[(3S)-6-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-({[(8S，11S，14S)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-11-{3-[(叔丁氧羰基)氨基]丙基}-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}氨基)己?；鵠氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(實(shí)施例193A)在2ml的二噁烷中的4M氯化氫溶液中的混合物在RT下攪拌20分鐘。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。
產(chǎn)率quant.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-2.0(m，8H)，2.18-3.53(m，20H)，4.25(m，1H)，4.45(m，1H)，6.69(d，2H)，6.76(s，1H)，7.07(s，1H)，7.15(s，1H)，7.22(d，1H)，7.63(s，1H).
實(shí)施例10(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(1S)-4-氨基-1-[({(4R)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]丁基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五鹽酸鹽
將6mg(0.006mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-({[(1S)-4-氨基-1-({[(4S)-4，8-二氨基-6-氧代辛基]氨基}羰基)丁基]氨基}羰基)-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)-[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三(乙酸氫鹽)(實(shí)施例205A)加入0.3ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液，并在RT下攪拌30min。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。
產(chǎn)率5mg(85％理論值)1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.7(m，13H)，2.52-3.75(m，17H)，4.22(m，1H)，4.45(m，1H)，4.50(m，1H)，4.83(m，1H)，6.91(d，2H)，6.97(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
實(shí)施例11(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
將8mg(0.010mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-[({(4S)-4-氨基-6-[(2-氨基乙基)氨基]-6-氧代己基}氨基)羰基]-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(乙酸氫鹽)(實(shí)施例206A)加入0.4ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液，并在RT下攪拌30min。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法12)Rt＝0.20min.
MS(EI)m/z＝627(M+-4HCl+H)+1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.19(m，1H)，1.25(m，2H)，1.5-1-9(m，8H)，2.53-2.71(m，1H)，2.79-3.64(m，15H)，4.44(m，1H)，6.90(d，2H)，6.97(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
實(shí)施例12(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
將15mg(0.019mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基-乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(乙酸氫鹽)(實(shí)施例207A)加入1ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液，并在RT下攪拌20min。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。
產(chǎn)率12mg(86％理論值)1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.6-2.0(m，5H)，2.07-2.30(m，2H)，2.84-3.23(m，10H)，3.33(m，1H)，3.51-3.83(m，4H)，4.50(m，1H)，4.90(m，1H)，6.98(d，2H)，7.06(s，1H)，7.35(s，1H)，7.45(d，1H)，7.52(d，1H).
實(shí)施例13(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五鹽酸鹽
將7mg(0.008mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-4-氨基-1-{[((1S)-3-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丙基)氨基]羰基}丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[1 4.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯三(乙酸氫鹽)(實(shí)施例208A)加入0.6ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液，并在RT下攪拌30min。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。
產(chǎn)率6.1mg(89％理論值)1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-2.3(m，11H)，2.80-3.70(m，14H)，4.29-4.48(m，3H)，4.85(m，1H)，6.91(d，2H)，6.97(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.44(d，1H).
實(shí)施例14(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-4-{[氨基(亞氨基)甲基]氨基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五鹽酸鹽
將5.3mg(0.005mmol)的{3-[(8S，11S，14S)-8-{[((1S)-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}-4-{[氨基(亞氨基)甲基]氨基}丁基)氨基]羰基}-14-[(叔丁氧羰基)氨基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-11-基]丙基}氨基甲酸叔丁酯二(三氟乙酸氫鹽)(實(shí)施例209A)加入0.4ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液，并在RT下攪拌30分鐘。將反應(yīng)溶液濃縮，與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次并在高真空下干燥。
產(chǎn)率quant.
LC-MS(方法20)Rt＝1.75min.
MS(EI)m/z＝655(M-5HCl+H)+1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.8 1-3.75(m，13H)，4.25(m，1H)，4.44(m，1H)，4.84(m，1H)，6.86(d，1H)，6.90(d，2H)，6.97(s，1H)，7.28(s，1H)，7.36(d，1H)，7.45(m，2H).
實(shí)施例15N2-{[(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}-N1-[(2S)-2，5-二氨基戊基]-L-谷氨酰胺四鹽酸鹽
將7mg(0.01mmol)的來自實(shí)施例180A的化合物與0.1ml的在二噁烷中的4N氯化氫混合。將混合物在RT下攪拌4小時(shí)。然后將混合物真空濃縮，將殘余物在高真空下干燥。
產(chǎn)率4.2mg(78％理論值).
MS(ESI)m/z＝684(M-4HCl+H)+.
實(shí)施例16(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}羰基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將40mg(0.034mmol)的來自實(shí)施例177A的化合物溶解在1ml的二噁烷中。然后加入0.5ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液，將混合物在RT下攪拌2小時(shí)。將混合物在真空中蒸發(fā)至干將殘余物在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率26mg(88％理論值).
MS(ESI)m/z＝670(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.45-1.95(m，12H)，2.8-3.05(m，6H)，3.1-3.4(m，4H)，3.42(mc，2H)，3.54(mc，1H)，3.97(mc，1H)，4.41(mc，1H)，4.6-4.8(m，2H，under D2O)，6.83-6.9(m，2H)，6.95(s，1H)，7.24(s，1H)，7.32(d，1H)，7.4(d，1H).
實(shí)施例17(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-N-(2-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-2-氧代乙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將11.5mg(0.011mmol)的來自實(shí)施例178A的化合物溶解在1ml的二噁烷中。然后加入0.2ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液，將混合物在RT下攪拌2小時(shí)。將混合物在真空中蒸發(fā)至干，將殘余物在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率8.5mg(99％理論值).
MS(ESI)m/z＝613(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.75-3.05(m，6H)，3.24(mc，1H)，3.3-3.43(m，2H)，3.45-3.55(m，2H)，3.87-3.97(m，2H)，4.41(mc，1H)，4.7(m，1H，under D2O)，4.83(mc，1H)，6.83-6.9(m，2H)，6.95(s，1H)，7.23(s，1H)，7.3(d，1H)，7.4(d，1H).
實(shí)施例18(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-N-[(1S)-2-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-1-(羥基甲基)-2-氧代乙基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[1 4.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將18.4mg(0.018mmol)的來自實(shí)施例179A的化合物溶解在1ml的二噁烷中。然后加入0.26ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液，將混合物在RT下攪拌4小時(shí)。將混合物在真空中蒸發(fā)至干，將殘余物在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率13mg(93％理論值).
MS(ESI)m/z＝643(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.4-1.85(m，8H)，2.75-3.05(m，6H)，3.26(mc，1H)，3.35-3.85(m，7H)，4.41(mc，1H)，4.7(m，1H，under D2O)，4.87(mc，1H)，6.85-6.92(m，2H)，6.96(s，1H)，7.22(s，1H)，7.32(d，1H)，7.4(d，1H).
實(shí)施例19N2-{[(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-基]羰基}-L-鳥氨?；?N-(2-氨基乙基)-L-鳥氨酰胺五鹽酸鹽
將8.5mg(0.008mmol)的來自實(shí)施例210A的化合物與0.2ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液混合，并在RT下攪拌3h。將混合物在真空中蒸發(fā)至干，將殘余物在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率quant.
MS(ESI)m/z＝727(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.55-1.95(m，12H)，2.75-3.15(m，10H)，3.25(mc，1H)，3.35-3.75(m，3H)，4.25-4.35(m，2H)，4.41(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.28(s，1H)，7.38(d，1H)，7.45(d，1H).
類似于實(shí)施例1的方法，按照各自的分離方法制備下表所列實(shí)施例20至39，為鹽酸鹽或三氟乙酸氫鹽。
實(shí)施例40(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((4S)-4-氨基-6-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-6-氧代己基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五鹽酸鹽 在0℃下將0.32ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至25mg(0.021mmol)的來自實(shí)施例262A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率17.8mg(96％理論值)MS(ESI)m/z＝684(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.4-1.9(m，12H)，2.5-3.2(m，10H)，3.3-3.7(m，6H)，4.4 1(mc，1H)，4.7-4-9(m，2H，under D2O)，6.85-6.92(m，2H)，6.96(s，1H)，7.28(s，1H)，7.38(d，1H)，7.44(d，1H).
實(shí)施例41(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-1-(氨基甲基)-2-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-2-氧代乙基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五鹽酸鹽
在0℃下將0.62ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至47mg(0.021mmol)的來自實(shí)施例269A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率33mg(98％理論值)MS(ESI)m/z＝642(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.8-3.1(m，6H)，3.2-3.7(m，8H)，4.41(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，7.0(s，1H)，7.27(s，1H)，7.38(d，1H)，7.45(d，1H).
實(shí)施例42(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-(2-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-2-氧代乙基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五鹽酸鹽
在0℃下將0.22ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至17mg(0.014mmol)的來自實(shí)施例270A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率12mg(99％理論值)MS(ESI)m/z＝684(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.4-1.9(m，12H)，2.37(mc，1H)，2.55(mc，1H)，2.7-3.2(m，7H)，3.2-3.7(m，6H)，4.22(mc，1H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.89(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.42(d，1H).
實(shí)施例43(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-4-氨基-1-{[(2-氨基乙基)氨基]羰基}丁基)-11-[(2R)-3-氨基-2-羥基丙基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將0.83ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至57mg(0.014mmol)的來自實(shí)施例271A的化合物中。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率44mg(99％理論值)MS(ESI)m/z＝629(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-2.1(m，6H)，2.7-3.2(m，8H)，3.28(mc，1H)，3.37-3.62(m，3H)，3.86(mc，1H)，4.27(mc，1H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.99(s，1H)，7.29(s，1H)，7.38(d，1H)，7.44(d，1H).
實(shí)施例44(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(3S)-3-氨基-4-羥基丁基]氨基}羰基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將0.27ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至19mg(0.018mmol)的來自實(shí)施例272A的化合物。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率14mg(97％理論值)MS(ESI)m/z＝657(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.55-1.95(m，10H)，2.75-3.1(m，4H)，3.2-3.4(m，4H)，3.5-3.6(m，2H)，3.7-3.8(m，2H)，3.93(mc，1H)，4.21(mc，1H)，4.45(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.28(s，1H)，7.38(d，1H)，7.44(d，1H).
實(shí)施例45(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{1-(2-氨基乙基)-3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
在0℃下將0.41ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至28mg(0.028mmol)的來自實(shí)施例273A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率12mg(58％理論值)MS(ESI)m/z＝627(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-2.0(m，6H)，2.3-2.65(m，2H)，2.7-3.2(m，8H)，3.3-3.8(m，4H)，4.28(mc，1H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，underD2O)，6.90(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
實(shí)施例46(8S，11S，14S)-14-氨基-11-(3-氨基丙基)-N-(3-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-3-氧代丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將0.30ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至20.7mg(0.020mmol)的來自實(shí)施例274A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率15mg(98％理論值)MS(ESI)m/z＝627(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.35-2.55(m，2H)，2.7-3.2(m，7H)，3.3-3.7(m，6H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.90(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.25(s，1H)，7.35(d，1H)，7.42(d，1H).
實(shí)施例47(8S，11S，14S)-1 4-氨基-N-(1-(2-氨基乙基)-3-{[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}-3-氧代丙基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五鹽酸鹽 在0℃下將0.355ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至27.7mg(0.024mmol)的來自實(shí)施例275A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率20mg(99％理論值)MS(ESI)m/z＝670(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，10H)，2.3-2.7(m，2H)，2.7-3.7(m，13H)，4.24(mc，1H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.90(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.26(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
實(shí)施例48(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(4S)-4-氨基-5-羥基戊基]氨基}羰基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將0.11ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至7.8mg(0.007mmol)的來自實(shí)施例276A的化合物。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率5.8mg(99％理論值)MS(ESI)m/z＝671(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.4-1.95(m，12H)，2.75-3.4(m，10H)，3.5-3.8(m，3H)，4.20(mc，1H)，4.44(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.28(s，1H)，7.38(d，1H)，7.45(d，1H).
實(shí)施例49(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(1S)-2-氨基-1-(羥基甲基)乙基]氨基}羰基)丁基]-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
在0℃下將0.56ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至39mg(0.037mmol)的來自實(shí)施例277A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率25mg(85％理論值)MS(ESI)m/z＝643(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.83(mc，1H)，2.9-3.1(m，6H)，3.15-3.3(m，2H)，4.19(mc，1H)，4.29(mc，1H)，4.43(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.89(mc，2H)，6.96(s，1H)，7.26(s，1H)，7.36(d，1H)，7.43(d，1H).
實(shí)施例50(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(2S)-2，5-二氨基戊基]氨基}羰基)丁基]-11-[(2R)-3-氨基-2-羥基丙基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺五鹽酸鹽
在0℃下將0.30ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至24mg(0.02mmol)的來自實(shí)施例278A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率17mg(97％理論值)MS(ESI)m/z＝686(M-5HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.3-1.9(m，10H)，2.5-2.95(m，7H)，2.95-3.25(m，3H)，3.3-3.5(m，2H)，3.62(mc，1H)，4.06(mc，1H)，4.18(mc，1 H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.67(mc，2H)，6.75(s，1H)，7.05(s，1H)，7.14(d，1H)，7.21(d，1H).
實(shí)施例51(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺三鹽酸鹽
在0℃下將0.36ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至21mg(0.024mmol)的來自實(shí)施例279A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率16mg(98％理論值)LC-MS(方法23)Rt＝1.84min.
MS(ESI)m/z＝570(M-3HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，4H)，2.3-2.6(m，2H)，2.7-3.2(m，7H)，3.3-3.7(m，5H)，4.42(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.89(mc，2H)，6.95(s，1H)，7.25(s，1H)，7.34(d，1H)，7.42(d，1H).
實(shí)施例52rel-(8S，11S，14S)-14-氨基-N-((1S)-1-{[(3-氨基-2-羥基丙基)氨基]羰基}-4-{[氨基(亞氨基)甲基]氨基}丁基)-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將0.52ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至41mg(0.035mmol)的來自實(shí)施例280A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率28.5mg(99％理論值)
MS(ESI)m/z＝685(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，8H)，2.7-3.4(m，11H)，3.5-3.7(m，1H)，3.97(mc，1H)，4.28(mc，1H)，4.47(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，underD2O)，6.94(mc，2H)，7.01(s，1H)，7.31(s，1H)，7.40(d，1H)，7.48(d，1H).
實(shí)施例53rel-(8S，11S，14S)-14-氨基-1 1-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-N-[2-羥基-3-(L-鳥氨酰基氨基)丙基]-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四三氟乙酸氫鹽 在0℃下將1.52ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至98mg(0.101mmol)的來自實(shí)施例281A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體通過制備HPLC(Reprosil ODS-A，流動(dòng)相乙腈/0.2％三氟乙酸水溶液5∶95→95∶5)轉(zhuǎn)化為四(三氟乙酸氫鹽)。
產(chǎn)率24.6mg(22％理論值)MS(ESI)m/z＝643(M-4TFA+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.55-2.0(m，8H)，2.8-3.5(m，11H)，3.56(mc，1H)，3.86(mc，1H)，3.97(mc，1H)，4.43(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，underD2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.27(s，1H)，7.36(d，1H)，7.44(d，1H).
實(shí)施例54(8S，11S，14S)-14-氨基-N-[(1S)-4-氨基-1-({[(1S)-2-氨基-1-(羥基甲基)-乙基]氨基}羰基)丁基]-11-[(2R)-3-氨基-2-羥基丙基]-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽 在0℃下將0.31ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至22mg(0.021mmol)的來自實(shí)施例282A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率16mg(98％理論值)MS(ESI)m/z＝659(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.6-2.05(m，6H)，2.8-3.15(m，6H)，3.2-3.35(m，2H)，3.5-3.7(m，3H)，3.87(mc，1H)，4.21(mc，1H)，4.31(mc，1H)，4.43(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.92(mc，2H)，6.99(s，1H)，7.29(s，1H)，7.38(d，1H)，7.45(d，1H).
實(shí)施例55(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(2S)-2-氨基-3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙基}-11-[(2R)-3-氨基-2-羥基丙基]-5，17-二羥基-9-甲基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
在0℃下將2ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至19.4mg(0.019mmol)的來自實(shí)施例292A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率12mg(81％理論值)LC-MS(方法23)Rt＝0.47min.
MS(ESI)m/z＝615(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.92-2.12(m，2H)，2.9-3.3(m，8H)，3.4-3.9(m，7H)，4.0(mc，1H)，4.17(mc，1H)，4.51(mc，1H)，5.15(mc，1H)，5.70(mc，1H)，6.97(mc，2H)，7.03(s，1H)，7.10(s，1H)，7.49(d，1H)，7.56(d，1H).
實(shí)施例56(8S，11S，14S)-14-氨基-N-{(2S)-2-氨基-3-[(2-氨基乙基)氨基]-3-氧代丙基}-11-(3-氨基丙基)-5，17-二羥基-10，13-二氧代-9，12-二氮雜三環(huán)[14.3.1.12，6]henicosa-1(20)，2(21)，3，5，16，18-六烯-8-甲酰胺四鹽酸鹽
在0℃下將2ml的在二噁烷中的4N氯化氫溶液加至18.2mg(0.018mmol)的來自實(shí)施例293A的化合物在1ml的二噁烷中的溶液。在RT下3小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮和與二氯甲烷共蒸發(fā)數(shù)次。將剩余的固體在高真空下干燥至恒重。
產(chǎn)率13mg(98％理論值)LC-MS(方法23)Rt＝0.43min.
MS(ESI)m/z＝585(M-4HCl+H)+.
1H-NMR(400MHz，D2O)δ＝1.5-1.9(m，4H)，2.8-3.3(m，7H)，3.4-3.9(m，5H)，4.12(mc，1H)，4.45(mc，1H)，4.7-4.9(m，2H，under D2O)，6.91(mc，2H)，6.98(s，1H)，7.25(s，1H)，7.37(d，1H)，7.44(d，1H).
類似于實(shí)施例56的方法，制備下表中列出的實(shí)施例57至69。

B.評(píng)估生理學(xué)活性所用縮略語AMP腺苷一磷酸ATP腺苷三磷酸BHI培養(yǎng)基 腦心浸液培養(yǎng)基CoA輔酶ADMSO 二甲亞砜DTT二硫蘇糖醇EDTA 乙二胺四乙酸KCl氯化鉀KH2PO4磷酸二氫鉀MgSO4硫酸鎂MIC最低抑制濃度MTP微量滴定板NaCl 氯化鈉Na2HPO4磷酸氫二鈉NH4Cl 氯化銨NTP核苷酸三磷酸鹽PBS磷酸鹽緩沖鹽水PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PEG聚乙二醇PEP磷酸烯醇丙酮酸Tris 三[羥基甲基]氨基甲烷本發(fā)明化合物的體外效果可以在下列測定中顯示使用大腸桿菌提取物的體外轉(zhuǎn)錄-翻譯為了制備S30提取物，收獲對(duì)數(shù)期生長的大腸桿菌MRE600(M.Müller；Freiburg University)，洗滌并如關(guān)于體外轉(zhuǎn)錄-翻譯測定(Müller，M.和Blobel，G.Proc Natl Acad Sci USA(1984)81，pp.7421-7425)所述使用。
每50μl的反應(yīng)混合物，另外將1μl的cAMP(11.25mg/ml)加入反應(yīng)混合物以進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄-翻譯測定。測定混合物總計(jì)105μl，含有5μl在5％DMSO中提供的待檢測的物質(zhì)。將1μg質(zhì)粒pBESTluc(Promega，Germany)/100μl混合物用作轉(zhuǎn)錄模板。在30℃下溫育60分鐘后，加入50μl的熒光素溶液(20mM tricine，2.67mM MgSO4，0.1mM EDTA，33.3mM DTT pH7.8，270μM CoA，470μM熒光素，530μM ATP)，將產(chǎn)生的生物發(fā)光在光度計(jì)上測量1分鐘。導(dǎo)致熒火蟲熒光素酶的翻譯50％抑制的抑制劑的濃度被稱為IC50。
使用金黃色葡萄球菌提取物的體外轉(zhuǎn)錄-翻譯構(gòu)建金黃色葡萄球菌熒光素酶報(bào)道質(zhì)粒為了構(gòu)建可以用于金黃色葡萄球菌的體外轉(zhuǎn)錄-翻譯測定的報(bào)道質(zhì)粒，使用質(zhì)粒pBESTluc(Promega Corporation，USA)。在熒火蟲熒光素酶之前的存在于該質(zhì)粒中的大腸桿菌tac啟動(dòng)子被具有適當(dāng)?shù)膩碜越瘘S色葡萄球菌的Shine-Dalgarno序列的capA1啟動(dòng)子替換。為此使用引物CAPFor5’-CGGCCAAGCTTACTCGGATCCAGAGTTTGCAAAATATACAGGGGATTATATATAATGGAAAACAAGAAAGGAAAATAGGAGGTTTATATGGAAGACGCCA-3’和CAPRev 5’-GTCATCGTCGGGAAGACCTG-3’。引物CAPFor含有capA1啟動(dòng)子，核糖體結(jié)合位點(diǎn)和熒光素酶的5’區(qū)域。在使用pBESTluc作為模板的PCR后，可以分離PCR產(chǎn)物，其含有具有融合capA1啟動(dòng)子的熒火蟲熒光素酶。在用ClaI和HindIII限制酶切后，將這連接到同樣用ClaI和HindIII消化的載體pBESTluc中。獲得的質(zhì)粒p1a能夠在大腸桿菌中復(fù)制并且可以用作金黃色葡萄球菌的體外轉(zhuǎn)錄-翻譯測定中的模板。
制備金黃色葡萄球菌的S30提取物將6升的BHI培養(yǎng)基與250ml的金黃色葡萄球菌菌株的過夜培養(yǎng)物溫育，并使得在37℃下生長直至OD600nm為2-4。通過離心收集細(xì)胞并在500ml的冷緩沖液A(10mM Tris乙酸鹽，pH8.0，14mM乙酸鎂，1mMDTT，1M KCl)中洗滌。在再次離心后，將細(xì)胞在250ml的含有50mM KCl的冷緩沖液A中洗滌，將獲得的沉淀在-20℃下冷凍60分鐘。將沉淀在冰上解凍30至60min并置入緩沖液B(10mM Tris乙酸鹽，pH8.0，20mM乙酸酯，1mM DTT，50mM KCl)中直至總體積為99ml。將在緩沖液B中的1.5ml份的溶葡萄球菌素(0.8mg/ml)引入3個(gè)預(yù)冷卻的離心杯中并各自與33ml的細(xì)胞懸浮液混合。樣品在37℃下溫育，偶爾振蕩，45至60min，之后加入150μl的0.5M DTT溶液。將裂解的細(xì)胞在30000×g和4℃下離心30分鐘。將細(xì)胞沉淀置入緩沖液B中，然后在相同條件下再次離心，合并收集的上清液。將上清液在相同條件下再次離心，將0.25體積的緩沖液C(670mM Tris乙酸鹽，pH8.0，20mM乙酸鎂，7mM Na3磷酸烯醇丙酮酸，7mM DTT，5.5mM ATP，70μM氨基酸(完全來自Promega)，75μg的丙酮酸激酶(Sigma，德國))/ml加至上清液的上部2/3。將樣品在37℃下溫育30分鐘。將上清液在具有3500 Da截止值的滲析管中對(duì)2l的滲析緩沖液(10mM Tris乙酸鹽，pH8.0，14mM乙酸鎂，1mM DTT，60mM乙酸鉀)4℃滲析過夜，更換緩沖液1次。通過在4℃下用冷PEG 8000粉末(Sigma，Germany)覆蓋滲析管，將滲析液濃縮至蛋白濃度約為10mg/ml。S30提取物可以以等分試樣保存在-70℃。
在金黃色葡萄球菌的體外轉(zhuǎn)錄-翻譯測定中測定IC50化合物對(duì)蛋白質(zhì)的生物合成的抑制可以在體外轉(zhuǎn)錄-翻譯測定中顯示。該測定是基于熒火蟲熒光素酶的無細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和翻譯，使用報(bào)道質(zhì)粒p1a作為模板和來自金黃色葡萄球菌的無細(xì)胞的S30提取物。獲得的熒光素酶的活性可以通過測量發(fā)光來檢測。
待使用的S30提取物或質(zhì)粒p1a的量分別必須重新對(duì)于每個(gè)制備進(jìn)行測試，以便確保測定中的最適濃度。3μl的待檢測的物質(zhì)，溶解在5％DMSO中，引入MTP。然后加入10μl適當(dāng)濃縮的質(zhì)粒溶液p1a。然后加入46μl的23μl的預(yù)混物(500mM乙酸鉀，87.5mM Tris乙酸鹽，pH8.0，67.5mM乙酸銨，5mM DTT，50μg的葉酸/ml，87.5mg的PEG 8000/ml，5mM ATP，1.25mM每種NTP，20μM每種氨基酸，50mM PEP(Na3鹽)，2.5mM cAMP，250μg每種E.coli tRNA/ml)和23μl的適量的S.aureus S30提取物的混合物，并混合。在30℃下溫育60分鐘后，加入50μl的熒光素溶液(20mM tricine，2.67mM MgSO4，0.1mM EDTA，33.3mM DTTpH7.8，270μM CoA，470μM熒光素，530μM ATP)，將獲得的生物發(fā)光在光度計(jì)上測量1分鐘。導(dǎo)致熒火蟲熒光素酶的翻譯50％抑制的抑制劑的濃度被稱為IC50。
最低抑制濃度(MIC)的測定最低抑制濃度(MIC)是測試微生物的生長被抑制18-24h以上的抗生素的最低濃度。在這些情形中抑制劑濃度可以通過標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)方法測定(參見，例如，The National Committee for Clinical Laboratory Standards。對(duì)于需氧生長的細(xì)菌的稀釋抗微生物敏感性測試的方法；批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)第五版。NCCLS文獻(xiàn)M7-A5[ISBN 1-56238-394-9].NCCLS，940 West Valley Road，Suite 1400，Wayne，賓夕法尼亞19087-1898 USA，2000)。本發(fā)明化合物的MIC在液體稀釋試驗(yàn)中在96-孔微量滴定板規(guī)模上測定。將細(xì)菌微生物在基本培養(yǎng)基(18.5mM Na2HPO4，5.7mM KH2PO4，9.3mM NH4Cl，2.8mMMgSO4，17.1mM NaCl，0.033μg/ml硫胺素鹽酸鹽，1.2μg/ml煙酸，0.003μg/ml生物素，1％葡萄糖，25μg/ml的各種來自蛋白的(proteinogenic)氨基酸，除了苯丙氨酸；[H.-P.Kroll；未出版])中培養(yǎng)，加入0.4％BH肉湯(測試培養(yǎng)基)。在屎腸球菌L4001的情形中，將熱滅活的胎牛血清(FCS；GibcoBRL，Germany)加入測試培養(yǎng)基至終濃度為10％。測試微生物的過夜培養(yǎng)物在新鮮測試培養(yǎng)基終稀釋至OD578為0.001(在腸球菌的情形中為0.01)，并與在測試培養(yǎng)基(200μl終體積)中的測試物質(zhì)的稀釋液(1∶2稀釋梯級(jí))1∶1溫育。培養(yǎng)物在37℃下溫育18-24小時(shí)；腸球菌在5％CO2的存在下。
在每種情形中再?zèng)]有可見細(xì)菌生長出現(xiàn)的最低物質(zhì)濃度被定義為MIC。
測定最低抑制濃度(MIC)的備選方法最低抑制濃度(MIC)是測試微生物的生長被抑制18-24小時(shí)以上的抗生素的最低濃度。在這些情形中抑制劑濃度可以通過標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)方法測定，在瓊脂稀釋測定中使用改進(jìn)的培養(yǎng)基(參見，例如，The NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards。對(duì)于需氧生長的細(xì)菌的稀釋抗微生物敏感性測試的方法；批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)第五版。NCCLS文獻(xiàn)M7-A5[ISBN1-56238-394-9].NCCLS，940 West Valley Road，Suite 1400，Wayne，賓夕法尼亞19087-1898 USA，2000)。將細(xì)菌微生物培養(yǎng)在含有20％的去纖維蛋白馬血的1.5％瓊脂平板上。測試微生物，其在哥倫比亞血瓊脂平板(Becton-Dickinson)上溫育過夜，在PBS中稀釋，調(diào)節(jié)至微生物數(shù)目為約5×105微生物/ml并逐滴放置(1-3μl)在測試平板上。測試物質(zhì)包含不同稀釋度的測試物質(zhì)(1∶2稀釋梯級(jí))培養(yǎng)物在37℃下在5％CO2的存在下溫育18-24小時(shí)。
在每種情形中再?zèng)]有可見細(xì)菌生長出現(xiàn)的最低物質(zhì)濃度被定義為MIC并且以μg/ml報(bào)道。
表A(具有比較例20A(雙苯霉素B))
濃度數(shù)據(jù)MICμg/ml；IC50μM.
金黃色葡萄球菌133的全身感染本發(fā)明化合物對(duì)于治療細(xì)菌感染的適用性可以在各種動(dòng)物模型中顯示。為此，動(dòng)物通常用適當(dāng)?shù)挠卸玖Φ奈⑸锔腥竞腿缓笥么龣z測的化合物處理，所述化合物在適合于具體治療模型的制劑中。本發(fā)明化合物的適用性可以在治療用金黃色葡萄球菌感染后的小鼠膿毒病模型中的細(xì)菌感染中特別顯示。
為此，將金黃色葡萄球菌(S.aureus)133的細(xì)胞在BH肉湯(Oxoid，Germany)中過夜培養(yǎng)。將過夜的培養(yǎng)物在新鮮BH肉湯中1∶100稀釋并擴(kuò)大3小時(shí)。將在對(duì)數(shù)生長期中的細(xì)菌離心出并用緩沖的生理鹽水溶液洗滌兩次。然后將鹽水溶液中的細(xì)胞懸浮液在光度計(jì)(Dr Lange LP 2W)中調(diào)節(jié)到50個(gè)消光單位。在稀釋步驟(1∶15)后，將所述懸浮液與10％粘蛋白溶液1∶1混合。腹膜內(nèi)給藥0.25ml/20g小鼠的該感染溶液。這相當(dāng)于約1-2×106微生物/小鼠的細(xì)胞數(shù)量。在感染后30分鐘進(jìn)行靜脈內(nèi)治療。將雌性CFW1小鼠用于感染試驗(yàn)。在6天的時(shí)期內(nèi)記錄所述動(dòng)物的存活率。調(diào)整動(dòng)物模型以便未處理的動(dòng)物在感染后24小時(shí)內(nèi)死亡?？梢燥@示在該模型中，對(duì)于實(shí)施例2的化合物的ED100＝1.25mg/kg的治療效果。
測定對(duì)金黃色葡萄球菌自發(fā)抗性率如下測定本發(fā)明化合物的自發(fā)抗性率(spontaneous resistance rate)將細(xì)菌微生物在37℃下培養(yǎng)在30ml的基本培養(yǎng)基(18.5mM Na2HPO4，5.7mM KH2PO4，9.3mM NH4Cl，2.8mM MgSO4，17.1mM NaCl，0.033μg/ml硫胺素鹽酸鹽，1.2μg/ml煙酸，0.003μg/ml生物素，1％葡萄糖，25μg/ml的每種來自蛋白質(zhì)的氨基酸，加入0.4％BH肉湯)中過夜，在6000×g下離心10min并再懸浮在2ml的磷酸鹽-緩沖生理NaCl溶液(約2×109微生物/ml)中。將100μl的該細(xì)胞懸浮液，和1∶10和1∶100稀釋液鋪平板在預(yù)干燥的瓊脂平板(1.5％瓊脂，20％去纖維蛋白馬血，或1.5％瓊脂，20％牛血清，在用PBS稀釋的1/10 Müller-Hinton培養(yǎng)基中)上，所述瓊脂平板含有濃度分別等于5×MIC或10×MIC的待檢測的本發(fā)明化合物，并在37℃下溫育48小時(shí)。對(duì)獲得的菌落(cfu)計(jì)數(shù)。
分離雙苯霉素-抗性金黃色葡萄球菌菌株RN4220BiR和T17體外分離金黃色葡萄球菌菌株RN4220BiR。為此，將100μl份的金黃色葡萄球菌RN4220細(xì)胞懸浮液(約1.2×108cfu/ml)鋪平板在不含抗生素的瓊脂平板(18.5mM Na2HPO4，5.7mM KH2PO4，9.3mM NH4Cl，2.8mMMgSO4，17.1mM NaCl，0.033μg/ml硫胺素鹽酸鹽，1.2μg/ml煙酸，0.003μg/ml生物素，1％葡萄糖，25μg/ml的每種來自蛋白質(zhì)的氨基酸，加入0.4％BH肉湯和1％瓊脂)和含有2μg/ml雙苯霉素B(10×MIC)的瓊脂平板上，并在37℃下溫育過夜。約1×107細(xì)胞生長在不含抗生素的平板上，而約100個(gè)菌落生長在含有抗生素的平板上，相當(dāng)于1×10-5的抗性率。檢測一些生長在含有抗生素平板上的菌落的雙苯霉素B MIC。選擇一個(gè)MIC的＞50μM的菌落用于進(jìn)一步使用，該菌株稱為RN4220BiR。
體內(nèi)分離金黃色葡萄球菌菌株T17。將CFW1小鼠每只小鼠用4×107金黃色葡萄球菌133細(xì)胞腹膜內(nèi)感染。在感染后0.5小時(shí)，動(dòng)物用50mg/kg雙苯霉素B靜脈內(nèi)處理。在感染后第3天從存活的動(dòng)物中摘除腎臟。在均化器官后，將勻漿如關(guān)于RN4220BiR所述鋪平板在不含抗生素和含有抗生素的瓊脂平板上，并在37℃下溫育過夜。從腎臟分離的菌落中約一半顯示在含有抗生素的平板上生長(2.2×106菌落)，顯示在處理的動(dòng)物的腎臟中雙苯霉素B-抗性金黃色葡萄球菌細(xì)胞的積累。檢測這些菌落中的約20個(gè)的雙苯霉素B MIC，MIC的＞50μM的菌落被選擇用于進(jìn)一步培養(yǎng)，該菌株稱為T17。
C.藥物組合物的例舉性實(shí)施方案本發(fā)明的化合物可以以下列方式轉(zhuǎn)化為藥用制劑可以靜脈內(nèi)施用的溶液組成1mg的實(shí)施例1的化合物，15g的聚乙二醇400和250g注射用水。
制備在攪拌下將本發(fā)明的化合物與聚乙二醇400一起溶解在水中。通過過濾(孔徑0.22μm)將所述溶液消毒并在無菌條件之下分配到熱滅菌的輸液瓶中。將這些用輸注塞和卷曲帽封閉。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物， 其中R7表示下式的基團(tuán) 或 其中R1是氫或羥基，*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R2表示氫，甲基或乙基，R3表示下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，A表示一個(gè)鍵或苯基，R4表示氫，氨基或羥基，R5表示下式的基團(tuán) 其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R23表示氫或式*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2的基團(tuán)，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，n和o彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，m是0或1的數(shù)字，R8和R12彼此獨(dú)立地表示式*-CONHR14或*-CH2CONHR15的基團(tuán)，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R14和R15彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4a表示氫，氨基或羥基，R5a表示氫，甲基或氨基乙基，R6a表示氫或氨基乙基，或R5a和R6a與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8a和R12a彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1a和Z2a彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R13a表示氫或甲基，且R14a和R15a彼此獨(dú)立地表示下式基團(tuán)， 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4c表示氫，氨基或羥基，R5c表示氫，甲基或氨基乙基，R6c表示氫或氨基乙基，kc是0或1的數(shù)字，且lc是1，2，3或4的數(shù)字，R9a和R11a彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10a表示氨基或羥基，R16a表示下式的基團(tuán)， 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4d表示氫，氨基或羥基，R5d表示氫，甲基或氨基乙基，R6d表示氫或氨基乙基，kd是0或1的數(shù)字，且ld是1，2，3或4的數(shù)字，ka是0或1的數(shù)字，并且la，wa，xa和ya彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，R9和R11彼此獨(dú)立地表示氫，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基團(tuán)， 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R20表示氫或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氫或甲基，并且i是1，2或3的數(shù)字，R21表示氫或甲基，f是數(shù)字0，1，2或3，g是1，2或3的數(shù)字，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1是1，2或3的數(shù)字，并且R9表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，和h是1，2，3或4的數(shù)字，R10表示氨基或羥基，R16和R17彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán)， 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4b表示氫，氨基或羥基，R5b表示氫，甲基或氨基乙基，R6b表示氫或氨基乙基，或R5b和R6b與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8b和R12b彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1b-OH，*-(CH2)Z2b-NHR13b，*-CONHR14b或*-CH2CONHR15b，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13b表示氫或甲基，且Z1b和Z2b彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，并且R14b和R15b彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán)， 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4g表示氫，氨基或羥基，R5g表示氫，甲基或氨基乙基，R6g表示氫或氨基乙基，kg是0或1的數(shù)字，和lg是1，2，3或4的數(shù)字，R9b和R11b彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10b表示氨基或羥基，kb是0或1的數(shù)字，lb，wb，xb和yb彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，R18和R19彼此獨(dú)立地表示氫或下式的基團(tuán)， 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4e表示氫，氨基或羥基，R5e表示氫，甲基或氨基乙基，R6e表示氫或氨基乙基，或R5e和R6e與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8e和R12e彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13e表示氫或甲基，并且Z1e和Z2e彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9e和R11e彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10e表示氨基或羥基，ke 是0或1的數(shù)字，且le，we，xe和ye彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，其中R18和R19不同時(shí)為氫，R24表示下式的基團(tuán)*-CONHR25，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R25表示下式的基團(tuán)， 或 其中*是與氮原子的鍵合點(diǎn)，R4f表示氫，氨基或羥基，R5f表示氫，甲基或氨基乙基，R6f表示氫或氨基乙基，或R5f和R6f與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8f和R12f彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13f表示氫或甲基，且Z1f和Z2f彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9f和R11f彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10f表示氨基或羥基，kf 是0或1的數(shù)字，且lf，wf，xf和yf彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，d和e彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，k 是0或1的數(shù)字，l，w，x和y彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，當(dāng)w，x或y等于3時(shí)， 彼此獨(dú)立地可以攜帶羥基，或它的鹽、它的溶劑合物或它的鹽的溶劑合物中的一種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其特征在于它對(duì)應(yīng)于下式 其中R1表示氫或羥基，R2表示氫，甲基或乙基，R3如權(quán)利要求1中所定義，或它的鹽、它的溶劑合物或它的鹽的溶劑合物中的一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其特征在于R3表示下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4表示氫，氨基或羥基，R5表示下式的基團(tuán) 其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R23表示氫或式*-(CH2)n-OH或*-(CH2)o-NH2的基團(tuán)，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，n和o彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，m是0或1的數(shù)字，R8表示下式的基團(tuán)*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R14和R15彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4a表示氫，氨基或羥基，R5a表示氫，甲基或氨基乙基，R6a表示氫或氨基乙基，或R5a和R6a與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8a和R12a彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1a和Z2a彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R13a表示氫或甲基，并且R14a和R15a彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4c表示氫，氨基或羥基，R5c表示氫，甲基或氨基乙基，R6c表示氫或氨基乙基，kc是0或1的數(shù)字，并且lc是1，2，3或4的數(shù)字，R9a和R11a彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10a表示氨基或羥基，R16a表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4d表示氫，氨基或羥基，R5d表示氫，甲基或氨基乙基，R6d表示氫或氨基乙基，kd是0或1的數(shù)字，并且ld是1，2，3或4的數(shù)字，ka是0或1的數(shù)字，并且la，wa，xa和ya彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，R9和R11彼此獨(dú)立地表示氫，甲基，*-C(NH2)＝NH或下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R20表示氫或*-(CH2)i-NHR22，其中R22表示氫或甲基，并且i是1，2或3的數(shù)字，R21表示氫或甲基，f是數(shù)字0，1，2或3，g是1，2或3的數(shù)字，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，或R8表示*-(CH2)Z1-OH其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1 是1，2或3的數(shù)字，并且R9表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，并且h是1，2，3或4的數(shù)字，R10表示氨基或羥基，R24表示下式的基團(tuán)*-CONHR25，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R25是下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4f表示氫，氨基或羥基，R5f表示氫，甲基或氨基乙基，R6f表示氫或氨基乙基，或R5f和R6f與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8f和R12f彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1f-OH或*-(CH2)Z2f-NHR13f，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13f表示氫或甲基，并且Z1f和Z2f彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9f和R11f彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10f表示氨基或羥基，kf是0或1的數(shù)字，并且lf，wf，xf和yf彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，k 是0或1的數(shù)字，l，w和x彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，當(dāng)w或x等于3時(shí)， 彼此獨(dú)立地可以攜帶羥基基團(tuán)，或它的鹽、它的溶劑合物或它的鹽的溶劑合物中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其特征在于R3表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R12表示下式的基團(tuán)*-CONHR14或*-CH2CONHR15，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R14和R15彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 或 其中* 是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4a表示氫，氨基或羥基，R5a表示氫，甲基或氨基乙基，R6a表示氫或氨基乙基，或R5a和R6a與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8a和R12a彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1a-OH，*-(CH2)Z2a-NHR13a，*-CONHR14a或*-CH2CONHR15a，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，Z1a和Z2a彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R13a表示氫或甲基，并且R14a和R15a彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4c表示氫，氨基或羥基，R5c表示氫，甲基或氨基乙基，R6c表示氫或氨基乙基，kc是0或1的數(shù)字，并且lc是1，2，3或4的數(shù)字，R9a和R11a彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10a表示氨基或羥基，R16a表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4d表示氫，氨基或羥基，R5d表示氫，甲基或氨基乙基，R6d表示氫或氨基乙基，kd是0或1的數(shù)字，并且ld是1，2，3或4的數(shù)字，ka 是0或1的數(shù)字，并且la，wa，xa和ya彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，y 是1，2，3或4的數(shù)字，當(dāng)y等于3時(shí) 可以攜帶羥基基團(tuán)，或它的鹽、它的溶劑合物或它的鹽的溶劑合物中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其特征在于R3表示下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，A表示一個(gè)鍵或苯基，R16和R17彼此獨(dú)立地表示下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4b表示氫，氨基或羥基，R5b表示氫，甲基或氨基乙基，R6b表示氫或氨基乙基，或R5b和R6b與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8b和R12b彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1b-OH或*-(CH2)Z2b-NHR13b，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13b表示氫或甲基，并且Z1b和Z2b彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9b和R11b彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10b表示氨基或羥基，kb是0或1的數(shù)字，lb，wb，xb和yb彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，d是1，2或3的數(shù)字，或它的鹽、它的溶劑合物或它的鹽的溶劑合物中的一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其特征在于R3表示下式的基團(tuán) 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R18和R19彼此獨(dú)立地表示氫或下式的基團(tuán) 或 其中*是與氮原子的鍵合位點(diǎn)，R4e表示氫，氨基或羥基，R5e表示氫，甲基或氨基乙基，R6e表示氫或氨基乙基，或R5e和R6e與它們鍵合的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，R8e和R12e彼此獨(dú)立地表示*-(CH2)Z1e-OH或*-(CH2)Z2e-NHR13e，其中*是與碳原子的鍵合位點(diǎn)，R13e表示氫或甲基，并且Z1e和Z2e彼此獨(dú)立地是1，2或3的數(shù)字，R9e和R11e彼此獨(dú)立地表示氫或甲基，R10e表示氨基或羥基，ke 是0或1的數(shù)字，并且le，we，xe和ye彼此獨(dú)立地是1，2，3或4的數(shù)字，其中R18和R19不同時(shí)為氫，e 是1，2或3的數(shù)字，或它的鹽、它的溶劑合物或它的鹽的溶劑合物中的一種。
7.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物或者它的鹽、它的溶劑合物或它的鹽的溶劑合物中的一種的方法，其特征在于[A]式(II)的化合物， 其中R2和R7具有權(quán)利要求1所示含義，并且boc表示叔丁氧羰基，在兩步方法中首先在一種或多種脫水劑的存在下與式(III)的化合物反應(yīng)，H2NR3(III)，其中R3具有權(quán)利要求1中所示含義，并隨后與酸反應(yīng)和/或通過氫解反應(yīng)，或[B]式(IV)的化合物， 其中R2和R7具有權(quán)利要求1中所示含義，并且Z表示芐氧羰基，在兩步方法中首先在一種或多種脫水劑的存在下與式(III)的化合物反應(yīng)，H2NR3(III)，其中R3具有權(quán)利要求1中所示含義，并隨后與酸反應(yīng)和/或通過氫解反應(yīng)。
8.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物或者它的溶劑合物之一的方法，其特征在于將所述化合物的鹽或所述化合物的鹽的溶劑合物在加入堿的情況下通過色譜法轉(zhuǎn)化為所述化合物。
9.用于治療和/或預(yù)防疾病的根據(jù)權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)的化合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)的化合物在制備用于治療和/或預(yù)防疾病的藥物中的應(yīng)用。
11.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)的化合物在制備用于治療和/或預(yù)防細(xì)菌性疾病的藥物中的應(yīng)用。
12.藥物，其包含與惰性的、非毒性的藥用賦形劑組合的至少一種根據(jù)權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)的化合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的藥物，其用于治療和/或預(yù)防細(xì)菌感染。
14.用于在人和動(dòng)物中控制細(xì)菌感染的方法，該方法施用抗菌有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的至少一種化合物或根據(jù)權(quán)利要求12或13的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及抗菌的酰胺大環(huán)類和它們的制備方法，它們?cè)谥委熀?或預(yù)防疾病中的應(yīng)用和它們?cè)谥苽溆糜谥委熀?或預(yù)防疾病、特別是細(xì)菌感染的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K38/06GK101090909SQ200580040096
公開日2007年12月19日 申請(qǐng)日期2005年9月15日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月24日
發(fā)明者賴納·恩德曼, 克斯廷·埃勒特, 克里斯托夫·弗賴貝格, 西格弗里德·拉達(dá)茨, 馬丁·米克爾斯, 約蘭多·坎喬-格朗德, 約阿希姆·舒馬赫爾, 斯泰芬·韋甘德 申請(qǐng)人:艾庫里斯有限及兩合公司