專利名稱：治療呼吸道相關疾病的藥物及其應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物及其制備方法和其應用。
背景技術：
糖膠樹(Alstonia scholaris(L.)R.Br.)屬于夾竹桃科(Apocynaceae)雞骨常山屬植物，別名燈臺樹。糖膠樹為高約10米的喬木，生于海拔650米以下的丘陵山地疏林中或水溝邊。用于治療頭痛、肺炎、百日咳、慢性支氣管炎，藥用部位根、樹皮和葉。曾收載于地方藥志如《陸川本草》、《云南中草藥選》中，并為《云南省藥品標準》(1974)和《中華人民共和國藥典》(1977年版一部)所收載。糖膠葉“可清熱化痰止咳，用于痰熱阻肺所致的咳嗽，咯痰，及慢性支氣管炎，百日咳見上述證候者”。目前對糖膠樹的化學成分已有報道，從A.scholaris中共分離鑒定了43個單體生物堿，除1個為吡啶骨架外，其它42個均為吲哚-單萜骨架。根及莖中主要含艾奇胺(echitamine)型生物堿、花中主要是鴨腳樹葉堿(picrinine)、皮中主要是艾奇胺(echitamine)和狄他樹皮咪叮(echitamidine)、葉中為鴨腳樹葉堿(picrinine)及匹克熱哩醛(picralinal)、果實及樹干中則為阿枯咪叮(akuammidine)。目前，從民間應用歷史、藥理研究表明糖膠樹療效確切，然而，現有技術中臨床和藥理研究報道僅停留在植物的提取物，未見糖膠樹有效活性成分的報道。更未見分離出的化合物作為藥物活性成分的報道。

發(fā)明內容
針對現有技術中未有鴨腳樹葉堿的活性報道及其進一步制成藥物的報道，本發(fā)明的目的在于提供一種含有治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道病有效量的鴨腳樹葉堿(Picrinine)化合物及可藥物載體和/或賦形劑的治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物。
本發(fā)明的另一目的是提供一種從糖膠樹植物中提取具有藥用價值和藥用質量指標控制的化合物鴨腳樹葉堿的制備方法。
本發(fā)明進一步的目的是提供鴨腳樹葉堿在制備治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道病的藥物的質量標準中的用途，用鴨腳樹葉堿(Picrinine)化合物作為治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物的質量控制標準，還提供鴨腳樹葉堿在制備感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道病的藥物中的用途。
為了實現本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術方案治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物，含有治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道病有效量的鴨腳樹葉堿(Picrinine)化合物及可藥物載體和/或賦形劑。
本發(fā)明的藥物活性成分鴨腳樹葉堿是由糖膠樹植物中提取而得到的，該方法包括如下步驟取糖膠樹Alstonia scholaris，用工業(yè)乙醇回流提取4-5次，減壓濃縮得浸膏，浸膏用0.2-2％鹽酸浸泡，所得酸液用氨水/NaOH/Na2CO3水溶液調節(jié)pH9～10之間，以有機溶劑氯仿/正丁醇/乙酸乙脂萃取，減壓濃縮回收溶劑后，萃取物經硅膠柱層析分離，用氯仿-甲醇20∶1或氯仿-丙酮5∶1洗脫，氯仿-甲醇反復重結晶即可。
發(fā)明人首次發(fā)現鴨腳樹葉堿(Picrinine)化合物具有顯著的止咳、平喘、化痰、抗炎和鎮(zhèn)痛活性，為糖膠樹中的活性成分，而且含量較高，占藥材的0.1％左右。可用于在制備治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物的質量指標控制。
鴨腳樹葉堿(Picrinine)對感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病具有治療作用。藥理實驗和藥效學試驗證明鴨腳樹葉堿具有顯著的止咳、平喘、化痰、抗炎和鎮(zhèn)痛活性。此外，本發(fā)明還做了大量的制備方法實驗研究，得到了新的制備鴨腳樹葉堿的方法。
基于上，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，含有鴨腳樹葉堿為藥用活性成分，加上藥學上可接受的載體或輔料制備而成的制劑。
所述藥學上可接受的載體是指藥學領域常規(guī)的藥物載體，例如稀釋劑、賦形劑如水等，填充劑如淀粉、蔗糖等；黏合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；濕潤劑如甘油；崩解劑如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；吸收促進劑如季銨化合物；表面活性劑如十六烷醇；吸附載體如高嶺土和皂黏土；潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣和鎂、以及和聚乙二醇等。另外還可以在組合物中加入其他輔劑如香味劑、甜味劑等。
本發(fā)明化合物可以組合物的形式通過口服、鼻吸入、直腸或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服時，可將其制成常規(guī)的固體制劑如片劑、粉劑、粒劑、膠囊等，制成液體制劑如水或油懸浮劑或其他液體制劑如糖漿、酏劑等；用于腸胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液、水或油性懸浮劑等。優(yōu)選的形式是片劑、膠囊和注射劑。
本發(fā)明藥物組合物的各種劑型可以按照藥學領域的常規(guī)生產方法制備。例如使活性成分與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。
本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選含有重量比為0.1％～99.5％的活性成分，最優(yōu)選含有重量比為0.5％～95％的活性成分。
本發(fā)明化合物的施用量可根據用藥途徑、患者的年齡、體重、所治療的疾病的類型和嚴重程度等變化，其日劑量可以是0.01～10mg/kg體重，優(yōu)選0.1～5mg/kg體重?？梢砸淮位蚨啻问┯?。
具體實施例方式下面的試驗例和實施例可以使本專業(yè)技術人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
試驗例1.鴨腳樹葉堿的藥理活性研究表1鴨腳樹葉堿對SO2致小鼠咳嗽的影響

與空白對照組相比*P＜0.05實驗結果表明磷酸可待因、鴨腳樹葉堿注射給藥組能明顯減少SO2致咳小鼠的咳嗽次數；磷酸可待因組對咳嗽潛伏期有一定的延長趨勢。
動物來源ICR小鼠，20.0~26.5g，雌雄各半，來源于昆明醫(yī)學院實驗動物中心，許可證號SCXK(滇)2005-008。
給藥途徑腹腔注射組給藥1次，20ml/kg，30min后開始致咳實驗；經口灌胃各組給藥1次，20ml/kg，45min后開始致咳實驗。
試驗例2鴨腳樹葉堿對氨水致小鼠咳嗽的影響試驗表2鴨腳樹葉堿對氨水致小鼠咳嗽的影響

與空白對照組相比*P＜0.05實驗結果表明磷酸可待因能明顯延長氨水致咳小鼠的咳嗽潛伏期，減少咳嗽次數；鴨腳樹葉堿兩種給藥途徑能明顯減少小鼠的咳嗽次數，對咳嗽潛伏期有延長趨勢。
動物來源ICR小鼠，19.3～27.0g，雌雄各半，來源于昆明醫(yī)學院實驗動物中心，許可證號SCXK(滇)2005-008。
給藥途徑腹腔注射組給藥1次，20ml/kg，30min后開始致咳實驗；經口灌胃組給藥1次，20ml/kg，45min后開始致咳實驗。
樣品配制所有樣品均直接用蒸餾水配制試驗例3、鴨腳樹葉堿對組織胺致豚鼠哮喘的影響表3鴨腳樹葉堿對組織胺致豚鼠哮喘的影響

與空白對照組相比*P＜0.05，**P＜0.01實驗結果表明豚鼠以20mg/kg的劑量一次經口灌胃給予鴨腳樹葉堿能明顯延長磷酸組織胺致豚鼠哮喘的時間。
動物來源普通級豚鼠，280～350g，雌雄各半，由昆明醫(yī)學院實驗動物中心供給，許可證號SCXK(滇)2005-008。
給藥途徑經口灌胃給藥1次，10ml/kg，60min后開始致喘實驗。
樣品配制樣品直接用水配制。
試驗例4、鴨腳樹葉堿對小鼠祛痰作用的影響(酚紅法)表4 鴨腳樹葉堿對小鼠祛痰作用的影響(酚紅法)

與空白對照組相比*P＜0.05，**P＜0.01實驗結果表明陽性對照氯化銨、神奇枇把露、鴨腳樹葉堿三劑量組均能明顯增加小鼠氣管的酚紅排出量，表明祛痰作用明顯；克咳膠囊有作用趨勢。
動物來源SPF級ICR小鼠，18～24g，雌雄各半，來源于昆明醫(yī)學院實驗動物中心，許可證號SCXK(滇)2005-008。
給藥途徑灌胃給藥2次，20ml/kg，末次給藥30min后腹腔注射5％酚紅，間隔30min后處死動物取氣管，用酶標儀測定吸光度。
陽性對照氯化銨，0.3g/粒，天津市力生制藥廠出品，批號9908004-23；克咳膠囊，0.3g/粒，貴州益佰制藥股份有限公司出品，批號060108；神奇強力枇杷露，120ml/瓶，貴州神奇制藥有限公司出品，批號20051006。
樣品配制所有樣品均用純水配制。
試驗例5、鴨腳樹葉堿對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響表5鴨腳樹葉堿對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

與空白對照組相比*P＜0.05實驗結果表明以10mg/kg的劑量一次灌胃給予鴨腳樹葉堿能明顯抑制二甲苯致小鼠的耳廓腫脹度，具有顯著的抗炎活性。
動物來源SPF級ICR小鼠，22～32g，雌雄兼用，由昆明醫(yī)學院實驗動物中心供給，許可證號SCXK(滇)2005-008。
給藥途徑灌胃給藥1次，30min致炎，1h處死動物。
樣品配制直接用水配制。
試驗例6、鴨腳樹葉堿的鎮(zhèn)痛作用研究(醋酸扭體法)表6 鴨腳樹葉堿的鎮(zhèn)痛作用研究(醋酸扭體法)

與空白對照組相比**P＜0.01實驗結果表明鴨腳樹葉堿能明顯抑制醋酸所致小鼠的扭體性疼痛。
動物來源SPF級ICR小鼠，18～22g，雌雄各半，來源于昆明醫(yī)學院實驗動物中心，許可證號SCXK(滇)2005-008。
給藥途徑鴨腳樹葉堿腹腔注射給藥后30min致痛，觀察并記錄各組動物15min內的扭體次數。
樣品配制所有樣品均用純水配制。
試驗例7、鴨腳樹葉堿的鎮(zhèn)痛作用研究表7 鴨腳樹葉堿的鎮(zhèn)痛作用研究(熱板法)

與空白對照組相比*P＜0.01實驗結果表明鹽酸嗎啡能明顯延長熱板所致小鼠疼痛的潛伏期，比空白對照組延長142.2％；其余各樣品與空白對照組相比無明顯鎮(zhèn)痛作用，結果表明鴨腳樹葉堿對于銳痛沒有明顯的鎮(zhèn)痛作用。
動物來源SPF級ICR小鼠，18～22g，雌雄各半，來源于昆明醫(yī)學院實驗動物中心，許可證號SCXK(滇)2005-008。
給藥途徑除ASP組灌胃給藥45min外、其余各組腹腔注射給藥30min開始實驗，觀察并記錄各只動物疼痛反應的潛伏期，組間比較差異的顯著性。
樣品配制所有樣品均用生理鹽水配制。
試驗例7、鴨腳樹葉堿對甲醛致小鼠雙相疼痛反應的影響表7鴨腳樹葉堿對甲醛致小鼠雙相疼痛反應的影響

與空白對照組相比**P＜0.001實驗結果表明鹽酸嗎啡對甲醛致小鼠的雙相疼痛反應有明顯抑制作用；鴨腳樹葉堿對II相疼痛反應亦有非常顯著的抑制作用，但對I相疼痛沒有明顯作用。說明鴨腳樹葉堿為外周鎮(zhèn)痛作用，而對中樞系統(tǒng)沒有明顯作用。
動物來源ICR小鼠，20～22g，全雄，來源于昆明醫(yī)學院實驗動物中心，許可證號SCXK(滇)2005-0008。
給藥途徑腹腔注射給藥1次，20ml/kg，20min后開始致痛實驗(5％福爾馬林，20ul/只)。
樣品配制所有樣品均用N.S配制。鴨腳樹葉堿用超聲處理后微渾濁，觀察見分散均勻，PH約為7。
實施例1鴨腳樹葉堿的制備和結構確定以糖膠樹Alstonia scholaris的葉1000g為原料，用工業(yè)乙醇回流提取4次，減壓濃縮得浸膏，浸膏用0.2-2％鹽酸浸泡多次。所得酸液用堿水(包括氨水、NaOH或Na2CO3水溶液等)調節(jié)pH 9～10之間，以有機溶劑(氯仿、正丁醇或乙酸乙脂)萃取，減壓濃縮回收溶劑后，萃取物經硅膠柱層析分離(氯仿-甲醇20∶1或氯仿-丙酮5∶1洗脫)，氯仿-甲醇反復重結晶制備得到結晶820mg。經與文獻值仔細對照其紅外、紫外和氫譜，并對碳譜的解析，其結構確定為鴨腳樹葉堿。鴨腳樹葉堿(Picrinine)為白色結晶性粉末，分子式C20H22N2O3，結構如下 實施例2片劑活性成分鴨腳樹葉堿(Picrinine)10mg、乳糖180mg、淀粉55mg、硬脂酸鎂5mg。
制備方法將活性成分、乳糖和淀粉混合，用水均勻濕潤，把濕潤后的混合物過篩并干燥，再過篩，加入硬脂酸鎂，然后將混合物壓片，每片重250mg，活性成分含量為10mg。
實施例3安瓿劑活性成分鴨腳樹葉堿(Picrinine)2mg、氯化鈉10mg。
制備方法將活性成分和氯化鈉溶解于適量的注射用水中，過濾所得溶液，在無菌條件下裝入安瓿瓶中。
實施例4膠囊劑活性成分鴨腳樹葉堿(Picrinine)10mg、乳糖1 87mg、硬脂酸鎂3mg。
制備方法將活性成分與助劑混合，過篩，均勻混合，把得到的混合物裝入硬明膠膠囊，每個膠囊重200mg，活性成分含量為10mg。
實施例5鴨腳樹葉堿在藥物質量標準中的含量控制含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005版附錄VID)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠(Xterra)為填充劑，磷酸水溶液(磷酸1→200)-乙腈(80∶20)為流動相，檢測波長為230nm，理論塔板數按鴨腳樹葉堿計算應不低于5000。
對照品溶液的制備取鴨腳樹葉堿對照品適量，精密稱定，加乙腈溶解并制成每1ml含100μg的溶液。
供試品溶液的制備取藥材或成藥，過60目篩，取粉末10g，精密稱定，甲醇回流提取3次，每次2-3小時，減壓濃縮濃，提取物用0.5％鹽酸浸泡，所得酸液用氨水溶液調節(jié)至PH9～10之間，以氯仿萃取，減壓蒸干溶劑，用乙腈將沉淀轉移至100ml容量瓶，加乙腈至刻度，搖勻，過濾，濾液作為供試品溶液。
測定法照薄層色譜法(中國藥典2005版附錄VIB)試驗，分別取10μl對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。
權利要求
1.治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物，含有治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道病有效量的鴨腳樹葉堿(Picrinine)化合物及可藥物載體和/或賦形劑。
2.制備權利要求1所述藥物的制備方法，取糖膠樹Alstonia scholarisg，用工業(yè)乙醇回流提取4-5次，減壓濃縮得浸膏，浸膏用0.2-2％鹽酸浸泡，所得酸液用氨水/NaOH/Na2CO3水溶液調節(jié)pH9～10之間，以有機溶劑氯仿/正丁醇/乙酸乙脂萃取，減壓濃縮回收溶劑后，萃取物經硅膠柱層析分離，用氯仿-甲醇20∶1或氯仿-丙酮5∶1洗脫，氯仿-甲醇反復重結晶即可。
3.鴨腳樹葉堿(Picrinine)化合物在制備治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物的質量標準控制中的應用。
4.用鴨腳樹葉堿(Picrinine)化合物作為治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物的質量控制標準。
5.鴨腳樹葉堿(Picrinine)化合物在制備治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開由糖膠樹(Alstonia scholaris(L.)R.Br.)中分離的吲哚類生物堿化合物鴨腳樹葉堿(Picrinine)，具有顯著的止咳、平喘、化痰、抗炎和鎮(zhèn)痛活性，含鴨腳樹葉堿為活性成分的藥物組合物，可將其制成多種劑型，用于治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的治療，療效顯著，使用安全方便。鴨腳樹葉堿(Picrinine)可用于在制備治療感冒、發(fā)熱及其所導致的呼吸道疾病的藥物的質量指標控制。
文檔編號A61K36/24GK101084894SQ20061001094
公開日2007年12月12日 申請日期2006年6月7日 優(yōu)先權日2006年6月7日
發(fā)明者羅曉東, 尚建華, 郝小江, 朱兆云 申請人:中國科學院昆明植物研究所, 云南省藥物研究所