專利名稱：超臨界二氧化碳萃取北冬蟲夏草黃酮類化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種北冬蟲夏草黃酮類化合物的萃取方法，屬于黃酮類化合物的制取技術(shù)領(lǐng)域。特別是涉及一種通過(guò)超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實(shí)體黃酮類化合物的方法。
背景技術(shù)：
北冬蟲夏草(Cordyceps militaris(L.ex Fr.)Link)又名蛹蟲草，簡(jiǎn)稱北蟲草，屬子囊菌亞門、核菌綱、球殼菌目、麥角菌科、蟲草屬真菌，是與冬蟲夏草極為相似的一個(gè)種。北冬蟲夏草是重要的中藥材，其性平味甘，有滋肺補(bǔ)腎、止血化痰的功效。北冬蟲夏草還具有抗疲勞、耐缺氧、抗衰老，特別是具有明顯的增強(qiáng)非特異性免疫系統(tǒng)的作用，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，促進(jìn)抗體形成。近年來(lái)通過(guò)大量藥理試驗(yàn)表明，北冬蟲夏草還具有降血壓降血脂作用，臨床用于治療心率失常，有抗癌、抑菌作用。由于嚴(yán)格的寄生性和特殊的生態(tài)地理環(huán)境，蟲草野生資源十分稀少。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明人工培養(yǎng)的北冬蟲夏草含有諸多活性成分如蟲草素、蟲草多糖、蟲草酸、黃酮類化合物、超氧化物歧化酶(SOD)等，其藥理藥效均能與野生蟲草媲美，因此其開發(fā)利用工作得到了相當(dāng)?shù)闹匾?。黃酮類化合物廣泛存在于自然界各類植物和大型真菌中，文獻(xiàn)記載約有20％的中草藥中含有黃酮類化合物，可見資源之豐富，同時(shí)大量研究表明黃酮類化合物具有多種生物活性，除利用其抗菌、抗突變、降壓、清熱解毒、鎮(zhèn)靜、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、抑制脂肪氧化酶、防治心腦血管疾病等方面也有顯著效果。
目前，有關(guān)制取蟲草黃酮類化合物的方法報(bào)道甚少，而且主要采用常規(guī)的化學(xué)溶劑提取。這些方法工藝繁雜，溶劑消耗量大，萃取收率低，產(chǎn)品質(zhì)量也不穩(wěn)定，并且造成資源浪費(fèi)。因此，探索采用新的提取方法，以提高蟲草黃酮類化合物的提取率及品質(zhì)，在實(shí)際生產(chǎn)中是一個(gè)非?，F(xiàn)實(shí)的問(wèn)題。
超臨界二氧化碳萃取技術(shù)是一項(xiàng)新興的“綠色”化工分離技術(shù)，處于臨界狀態(tài)的二氧化碳流體對(duì)溶質(zhì)具有獨(dú)特的溶劑優(yōu)點(diǎn)它不僅對(duì)溶質(zhì)具有極高的溶解能力，而且通過(guò)改變溫度或壓力就可容易地改變對(duì)溶質(zhì)的溶解度。因此，從人工培養(yǎng)的北冬蟲夏草子實(shí)體中通過(guò)超臨界二氧化碳萃取蟲草黃酮類化合物作為醫(yī)療原料或功能性保健食品是一種經(jīng)濟(jì)可行的方法。目前有關(guān)采用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)從人工北冬蟲夏草子實(shí)體中提取黃酮類化合物的工藝研究較少，專利未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問(wèn)題本發(fā)明的目的在于提供一種從人工培養(yǎng)的北冬蟲夏草子實(shí)體中提取黃酮類化合物的方法，盡可能提高北冬蟲夏草黃酮類化合物的提取率，較好地保持其生物活性。
技術(shù)方案為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是先將人工北冬蟲夏草子實(shí)體烘干，粉碎至一定粒度，置于密閉容器中浸泡數(shù)小時(shí)后，在一定條件下，進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，通過(guò)逐級(jí)減壓分離獲得北冬蟲夏草黃酮提取液。
本發(fā)明方法的具體步驟如下1.將人工北冬蟲夏草子實(shí)體烘干，烘干溫度為40-60℃，烘干時(shí)間為1-3小時(shí)。
2.將烘干后的人工北冬蟲夏草子實(shí)體，粉粹至粒度為40目-80目之間。
3.將粉粹后的人工北冬蟲夏草子實(shí)體干粉置密閉容器中于暗處用60-95％乙醇浸泡4-12小時(shí)后，投入到超臨界萃取裝置的萃取釜中，用超臨界二氧化碳作為溶劑，60-95％的乙醇做夾帶劑，在壓力為20-35Mpa，溫度為40-60℃的條件下萃取，其中液態(tài)二氧化碳流量為20-60L/h，在流程中循環(huán)使用，超臨界二氧化碳萃取時(shí)間為2-7小時(shí)。
4.萃取混合物料通入減壓分離釜中，在分離釜中進(jìn)行一級(jí)減壓分離壓力為5-10Mpa，溫度為40-60℃；二級(jí)減壓分離壓力為4-7Mpa，溫度為35-50℃。最終獲得所需要的北冬蟲夏草黃酮提取液。
提取液中北冬蟲夏草黃酮類化合物的鑒別采用薄層色譜法，含量測(cè)定按分光光度法(中國(guó)藥典2005版一部附錄V A)，在510nm處測(cè)定吸光度。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)中化學(xué)溶劑提取法相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)1.本發(fā)明采用先進(jìn)的超臨界二氧化碳萃取技術(shù)，使得北冬蟲夏草黃酮類化合物的提取率提高，可提高15％，減少了名貴蟲草資源的浪費(fèi)。
2.在提取過(guò)程中有機(jī)溶劑的使用量大大減少，可減少50％甚至更低，降低了成本，使得濃縮過(guò)程大大縮短，并且減少了污染。
3.采用傳統(tǒng)的溶劑提取法提取時(shí)間為24小時(shí)，甚至更長(zhǎng)，本法超臨界萃取時(shí)間縮短為10小時(shí)，甚至更短，提取速率加快。
4.本發(fā)明萃取分離過(guò)程溫度低，條件溫和，能夠有效保留蟲草中類黃酮活性成分不受破壞。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
實(shí)施例一取北冬蟲夏草子實(shí)體干粉230g，粉碎至粒度為40目-80目之間，加入95％乙醇700mL攪拌均勻，在密閉容器中置于避光暗處浸泡6小時(shí)后，投入到1L的超臨界流體萃取釜內(nèi)，萃取條件為萃取壓力為25Mpa，溫度為45℃；分離條件為一級(jí)分離釜壓力為5Mpa，溫度為45℃，二級(jí)分離釜壓力為5Mpa，溫度為35℃，液態(tài)二氧化碳流量為30L/h，在流程中循環(huán)使用。動(dòng)態(tài)運(yùn)行2小時(shí)后，從一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜里得到北冬蟲夏草黃酮提取液800mL，子實(shí)體中黃酮類化合物的提取率為0.331％。
實(shí)施例二取北冬蟲夏草子實(shí)體干粉250g，粉碎至粒度為40目-80目之間，加入85％乙醇750mL攪拌均勻，在密閉容器中置于避光暗處浸泡6小時(shí)后，投入1L的超臨界流體萃取釜內(nèi)，萃取條件為萃取壓力為30Mpa，溫度為50℃；分離條件為一級(jí)分離釜壓力為6Mpa，溫度為45℃，二級(jí)分離釜壓力為5Mpa，溫度為40℃，液態(tài)二氧化碳流量為30L/h，在流程中循環(huán)使用。動(dòng)態(tài)運(yùn)行2.5小時(shí)后，從一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜里得到北冬蟲夏草黃酮提取液874mL。北冬蟲夏草子實(shí)體中黃酮類化合物的提取率為0.345％。
實(shí)施例三取北冬蟲夏草子實(shí)體干粉280g，粉碎至粒度為40目-80目之間，加入80％乙醇900mL攪拌均勻，在密閉容器中置于避光暗處浸泡6小時(shí)后，投入1L的超臨界流體萃取釜內(nèi)，萃取條件為萃取壓力為35Mpa，溫度為55℃；分離條件為一級(jí)分離釜壓力為7Mpa，溫度為50℃，二級(jí)分離釜壓力為6Mpa，溫度為45℃，液態(tài)二氧化碳流量為30L/h，在流程中循環(huán)使用。動(dòng)態(tài)運(yùn)行3小時(shí)后，從一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜里得到北冬蟲夏草黃酮提取液1170mL。北冬蟲夏草子實(shí)體中黃酮類化合物的提取率為0.311％。
實(shí)施例四取北冬蟲夏草子實(shí)體干粉1000g，粉碎至粒度為40目-80目之間，加入95％乙醇2L攪拌均勻，在密閉容器中置于避光暗處浸泡10小時(shí)后，投入10L的超臨界流體萃取釜內(nèi)，萃取條件為萃取壓力為35Mpa，溫度為55℃；分離條件為一級(jí)分離釜壓力為6Mpa，溫度為45℃，二級(jí)分離釜壓力為5Mpa，溫度為45℃，液態(tài)二氧化碳流量為60L/h，在流程中循環(huán)使用。動(dòng)態(tài)運(yùn)行6小時(shí)后，從一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜里得到北冬蟲夏草黃酮提取液6.89L。北冬蟲夏草子實(shí)體中黃酮類化合物的提取率為0.316％。
權(quán)利要求
1.一種超臨界二氧化碳萃取人工培養(yǎng)北冬蟲夏草子實(shí)體中黃酮類化合物的方法，具體步驟如下1)將人工北冬蟲夏草子實(shí)體烘干；2)將烘干后的人工北冬蟲夏草子實(shí)體粉粹；3)將粉粹后的人工北冬蟲夏草子實(shí)體干粉置密閉容器中于暗處浸泡4-12小時(shí)后，投入到超臨界萃取裝置的萃取釜中，用超臨界二氧化碳作為溶劑，60-95％的乙醇做夾帶劑，在壓力為20-35Mpa，溫度為40-60℃的條件下萃取，其中液態(tài)二氧化碳流量為20-60L/h，在流程中循環(huán)使用，超臨界二氧化碳萃取時(shí)間為2-7小時(shí)；4)萃取混合物料通入減壓分離釜中，在分離釜中進(jìn)行一級(jí)減壓分離壓力為5-10Mpa，溫度為40-60℃；二級(jí)減壓分離壓力為4-7Mpa，溫度為35-50℃，最終獲得所需要的北冬蟲夏草黃酮提取液。
2.按照權(quán)利要求1所述的超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實(shí)體中黃酮類化合物的方法，其特征在于北冬蟲夏草子實(shí)體烘干溫度為40-60℃，烘干時(shí)間為1-3小時(shí)。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實(shí)體中黃酮類化合物的方法，其特征在于北冬蟲夏草子實(shí)體烘干粉碎粒度為40-80目。
4.按照權(quán)利要求1或2所述的超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實(shí)體中黃酮類化合物的方法，其特征在于北冬蟲夏草子實(shí)體烘干粉用60-95％乙醇置于密閉容器中浸泡4-12小時(shí)。
5.按照權(quán)利要求3所述的超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實(shí)體中黃酮類化合物的方法，其特征在于北冬蟲夏草子實(shí)體烘干粉用60-95％乙醇置于密閉容器中浸泡4-12小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種北冬蟲夏草黃酮類化合物的萃取方法，屬于黃酮類化合物的制取技術(shù)領(lǐng)域。將人工北冬蟲夏草子實(shí)體烘干粉粹后浸泡，用60－95％的乙醇做夾帶劑，在壓力為20－35Mpa，溫度為40－60℃的條件下萃取2－7小時(shí)；在分離釜中進(jìn)行一級(jí)減壓分離壓力為5－10Mpa，溫度為40－60℃；二級(jí)減壓分離壓力為4－7Mpa，溫度為35－50℃，從超臨界二氧化碳萃取裝置的分離釜中獲得產(chǎn)品。本發(fā)明具有萃取溫度低、速度快、萃取率高、所得產(chǎn)品能夠有效保留蟲草中類黃酮活性成分等特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/06GK1951931SQ20061009784
公開日2007年4月25日 申請(qǐng)日期2006年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月15日
發(fā)明者李大婧, 劉春泉, 宋江峰, 韓晨 申請(qǐng)人:江蘇瑞迪生科技有限公司