專利名稱：用于靜脈施用的替比法尼制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及替比法尼(tipifarnib)的新型制劑，其適合于靜脈(IV) 施用。本發(fā)明還涉及該制劑的用途、制備該制劑的方法以及通過向所述 患者施用所述制劑治療患者的方法。
背景技術(shù)：
替比法尼被描迷于WO 97/21701 。替比法尼的化學(xué)名稱是 (RH+)-6-[氨基-(4-氟苯基)(1 -曱基-1 H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1 -曱 基-2(lH)唾啉酮。替比法尼的商品名是ZARNESTRA 。該化合物的絕對(duì) 立體化學(xué)構(gòu)型未在上述專利說明書描迷的實(shí)施例中確證，但是該化合物
由詞頭"(B)，，標(biāo)識(shí)以說明它是從柱色語法分離的第二化合物。發(fā)現(xiàn)由此獲 得的該化合物具有(R)-(+)-構(gòu)型。還由其發(fā)表的代碼編號(hào)Rl 15777提及的 此化合物具有以下結(jié)構(gòu)
替比法尼是一種在酸性pH下具有非常好的水溶性的堿。其水解為 R110127,其中胺官能度被羥基官能度取代。水解降解的速率在酸性條 件下最低，但仍然非常快。R110127具有以下結(jié)構(gòu)
替比法尼是一種在體外和體內(nèi)對(duì)人法呢基轉(zhuǎn)移酶(FTase)有效的和 選擇性的非肽模擬竟?fàn)幮砸种苿４嘶衔镌隗w外納摩爾濃度下具有抗 增殖作用，并且在數(shù)個(gè)體外和體內(nèi)模型中以及在臨床中作為單一療法具 有抗腫瘤作用。替比法尼的主要的抗腫瘤作用包括抑制血管發(fā)生、抑制 細(xì)胞凋亡、以及直接抗增殖。
法尼基化靶標(biāo)，例如(但不限于)Ras、 RhoB和磷脂?；〈?3激酶 (PIsK)/絲氨酸-蘇氨酸激酶AKT(它們與細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)和增殖有關(guān))通常在 AML中突變或失調(diào)。法尼基化的抑制阻止了體外骨髓白血病細(xì)胞生長和 祖先集落形成。與正常骨髓細(xì)胞相比，從癌癥患者獲得的白血病細(xì)胞對(duì) 替比法尼的生長抑制作用明顯更敏感。特異性下游效應(yīng)器(通過該效應(yīng) 器，法尼基化的抑制作用產(chǎn)生抗白血病活性)的鑒別是正在進(jìn)行的研究的 主題。替比法尼在血液惡性腫瘤患者和實(shí)體瘤患者中顯示出臨床活性的 征兆；所述血液惡性腫瘤包括但不限于急性骨髓內(nèi)源性白血病、髓增生 異常綜合征和多發(fā)性骨髓瘤；所述實(shí)體瘤包括但不限于惡性膠質(zhì)瘤和乳 腺癌。
迄今為止， 一些研究者已測定了替比法尼口服施用之后的藥代動(dòng)力 學(xué)。替比法尼的劑量遞增試驗(yàn)是在28名晚期癌癥患者中進(jìn)行的。在50-至500-mg b.i.d.劑量范圍內(nèi)，在口服施用之后2至5小時(shí)達(dá)到68 -1458ng/mL的峰濃度范圍。觀察到替比法尼的血漿濃度呈線性增加。在
內(nèi)。 、 ；又 '、
口服施用之后替比法尼被廣泛地代謝。由人肝細(xì)胞的體外研究的數(shù) 椐顯示，替比法尼經(jīng)歷了直接的葡萄糖醛酸化。診斷抑制劑和異源性表 達(dá)系統(tǒng)的試驗(yàn)也表明，與其它CYP450酶如CYP2C19 、 CYP2A6 、 CYP2D6 和CYP2C8/9/10相比，CYP3A4是替比法尼的主要代謝通路。在若干臨 床前試驗(yàn)中，如同法尼基轉(zhuǎn)移酶和抗增殖劑，替比法尼的代謝產(chǎn)物是無
活性的。然而，其個(gè)別代謝物的藥代動(dòng)力學(xué)未在人體中研究。在["C]替 比法尼口服施用于健康男性受試者的血漿樣品中發(fā)現(xiàn)替比法尼的若干
代謝物。這些代謝物包括替比法尼葡萄糖醛酸(glucuronide )結(jié)合物以 及通過氧化脫甲基、脫氨基和失甲基-咪唑部分而形成的代謝產(chǎn)物。母體 化合物的葡萄糖醛酸化(glucuronidatum )是生物轉(zhuǎn)化的主要途徑。然 而，未研究將替比法尼施用于癌癥受試者之后替比法尼的代謝。此外， 替比法尼代謝產(chǎn)物配置情況(其可發(fā)生在不同途徑施用之后)潛在的差 異未作系統(tǒng)性的試驗(yàn)。
此外，由于腫瘤性阻塞、手術(shù)處理、并發(fā)的口腔感染、明顯的味覺 反?；蚴秤麥p退、或者惡心和嘔吐，癌癥患者經(jīng)常口服攝入受損。因此， 仍然希望有用于另 一種施用途徑例如靜脈施用的制劑。
發(fā)明概述
本發(fā)明的目的是提供給口服施用成問題的患者施用替比法尼的另 選施用(即胃腸外)途徑。本發(fā)明的目的是提供施用替比法尼的靜脈途徑， 作為連續(xù)輸注或短期輸注(短于小時(shí)至數(shù)小時(shí)；每天一次或多次)，其 可提供對(duì)替比法尼的充分暴露，使得產(chǎn)生與目前每天兩次口服施用替比 法尼相似的臨床結(jié)果。特別地，本發(fā)明的目的是提供施用替比法尼的靜 脈途作為連續(xù)輸注或每天兩次2小時(shí)輸注，其可提供與目前每天兩 次口服施用替比法尼相似的暴露。本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供治療全身 和血液惡性腫瘤以及特別是實(shí)體癌的方法。
附圖簡述


圖1:"表l，，參與本項(xiàng)研究的患者的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)。
圖2:"表2，， 2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d.施用之后平均(士SD)替比法尼血
漿Cmax和AUCo-10h虧直。
圖3:"表3，，連續(xù)靜脈輸注施用之后平均(士SD)替比法尼血漿Cmax 和AUCo-ioh值。
圖4:"表4":替比法尼全身暴露量2小時(shí)靜脈輸注對(duì)口服給藥。 圖5:"表5":替比法尼全身暴露量連續(xù)靜脈輸注對(duì)口服給藥。 圖6:"表6": 口服施用、2-小時(shí)靜脈輸注和連續(xù)靜脈輸注之后，替 比法尼-葡萄糖醛酸的平均(土SD)血漿藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)
圖7:"表7": 口服施用、2-小時(shí)靜脈輸注和連續(xù)^爭脈輸注之后， R130525的平均(士SD)血漿藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
圖8: 3個(gè)4-天治療方案的連續(xù)施用之后替比法尼的平均(士SD)血漿 濃度-時(shí)間圖。
圖9:替比法尼的游離分?jǐn)?shù)和總血漿濃度間的關(guān)系。
圖10: 3個(gè)4-天治療方案的連續(xù)施用之后替比法尼和衍生的代謝產(chǎn) 物的平均(士SD)血漿濃度-時(shí)間圖。
發(fā)明說明
本發(fā)明提供了給口服施用成問題的患者施用替比法尼的另選施用 (即胃腸外)途徑。本發(fā)明的目的是提供施用替比法尼的靜脈途徑，作為 連續(xù)輸注或短期輸注(短于1小時(shí)至數(shù)小時(shí)；每天一次或多次)，其可提 供對(duì)替比法尼的充分暴露，使得產(chǎn)生與目前每天兩次口服施用替比法尼 相似的臨床結(jié)果。特別地，本發(fā)明的目的是提供施用替比法尼的靜脈途 徑，作為連續(xù)輸注或每天兩次2小時(shí)輸注，其可提供與目前每天兩次口 服施用替比法尼相似的暴露。
本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供替比法尼的干燥制劑，其可用溶液增溶 而得到可以靜脈施用的替比法尼的制劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道適合靜脈 施用制劑的限制條件。下文將討論多種限制條件。靜脈施用的所述制劑 應(yīng)當(dāng)具有一定的pH。進(jìn)入靜脈的溶液不得太呈堿性也不得太呈酸性。 該制劑不應(yīng)含有進(jìn)入血液中時(shí)會(huì)產(chǎn)生副反應(yīng)的賦形劑。此外，該制劑一 旦進(jìn)入血液中時(shí)應(yīng)當(dāng)使所述活性成分保持可溶。列舉的這些限制條件不 是窮盡的。
本發(fā)明的制劑包含適宜量的替比法尼。這些量將取決于所得IV制 劑將是否用于單劑量施用或者其將是否用于連續(xù)IV施用。
該制劑優(yōu)選包含其它的一些環(huán)糊精或其衍生物。也可使用其它增溶 劑。優(yōu)選的環(huán)糊精是羥丙基(3-環(huán)糊精。也可使用其它環(huán)糊精類。
任選的，也可使用甘露醇或另一糖，例如特里阿糖(trealose)或蔗 糖。甘露醇或其它糖確保凍干物質(zhì)的快速溶解。當(dāng)不存在甘露醇時(shí)，會(huì) 觀察到一些僅緩慢溶解的膠狀聚集物。在甘露醇存在下，這些聚集物不 會(huì)出現(xiàn)或者出現(xiàn)較小的量。此外，甘露醇確保改善凍干物質(zhì)的外觀形狀。 沒有甘露醇時(shí)，凍干物質(zhì)可出現(xiàn)破裂，使得凍干物質(zhì)從外觀上看少有吸 引人的外觀。本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供治療全身性(in general)和血 液惡性腫瘤以及特別是實(shí)體癌的方法。
本發(fā)明提供了抑制細(xì)胞(包括轉(zhuǎn)化細(xì)胞)異常生長的方法，其通過施 用本發(fā)明的藥物制劑。細(xì)胞異常生長是指細(xì)胞生長不依賴于正常調(diào)節(jié)機(jī) 制(例如接觸抑制的喪失)。其包括以下的異常生長(l)腫瘤細(xì)胞(腫瘤) 表達(dá)活化的raj癌基因；(2)腫瘤細(xì)胞，其中ras蛋白由于另一基因的致 癌突變而被活化；(3)其它增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞，其中發(fā)生ray 活化。此外，文獻(xiàn)中認(rèn)為，ras癌基因不但通過直接影響腫瘤細(xì)胞生長， 而且間接地即促進(jìn)腫瘤誘發(fā)血管生成，而有助于體內(nèi)胂瘤的生長。因此， 藥理學(xué)把向突變體rw癌基因可認(rèn)為是抑制了體內(nèi)實(shí)體瘤生長，其部分 地通過抑制腫瘤誘發(fā)血管生成實(shí)現(xiàn)。
本發(fā)明還提供了抑制腫瘤生長的方法，其通過將本發(fā)明的本藥物制 劑施用于需要該治療的受試者，例如哺乳動(dòng)物(更特別地是人)。特別是， 本發(fā)明提供了抑制表達(dá)活化my癌基因的腫瘤生長的方法，其通過施用 本發(fā)明的藥物制劑?？梢员灰种频哪[瘤的不限制的實(shí)例是，肺癌(例如腺 癌)、胰腺癌(例如胰腺癌如外分泌腺的胰腺癌)、結(jié)腸癌(例如結(jié)腸直腸癌 如結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)、淋巴系的造血肺瘤(例如急性淋巴細(xì)胞性白血 病、B-細(xì)胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤)、髓細(xì)胞性白血病(例如急性骨髓性 白血病(AML))、曱狀腺(例如小嚢)癌、骨髓增生異常綜合征(MDS)、間 質(zhì)源腫瘤(例如纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤)、黑素瘤、畸胎癌、成神經(jīng)細(xì)胞 瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、皮膚良性腫瘤(例如角化棘皮瘤)、乳腺癌、腎癌、卵 巢癌、膀胱癌、表皮癌。
本發(fā)明還提供了抑制良性和惡性增殖性疾病的方法，其中ras蛋白 由于基因中的致癌突變而被異常地活化，即ras基因自身未通過突變至 致癌突變而活化成致癌型，所述的抑制是通過將本文所述的藥物制劑施 用于需要該治療的受試者而完成的。例如，良性增殖障礙神經(jīng)纖維瘤病， 或者其中ayw因酪氨酸激酶癌基因的突變或過表達(dá)而被活化的腫瘤，它 們可通過本發(fā)明的藥物制劑而被抑制。
因此，本發(fā)明公開了用作藥物的本發(fā)明的藥物制劑，以及式(I)的這 些化合物在制備用于治療 一 種或多種上述病況的藥物中的用途。 術(shù)語和定義
為提供更簡要的說明，本文給出的一些數(shù)量表述未用術(shù)語"約"限
定。應(yīng)理解為，不論此術(shù)語"約"是否明確使用，本文給出的每一個(gè)數(shù)量 表示實(shí)際給出的值，并且它還表示接近此給出值，這是根椐本領(lǐng)域技術(shù) 人員可合理推知的，包括由于此給出值的試驗(yàn)和/或測定條件的近似值。 本文使用的術(shù)語"受試者"是指動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人，其
為治療、觀察或試^r的對(duì)象。
本文使用的術(shù)語"治療有效量"表示活性化合物或藥物的量，其在組 織系統(tǒng)、動(dòng)物或人中誘發(fā)由研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師探求的 生物學(xué)或醫(yī)學(xué)應(yīng)答，此應(yīng)答包括所治疾病或障礙的至少一種癥狀減輕， 和/或所治疾病或障礙的至少一種癥狀的發(fā)生率和/或嚴(yán)重度減少。
術(shù)語"立體異構(gòu)體"是指具有相同分子式和相同共價(jià)鍵合原子順序 但空間取向不同的異構(gòu)體。
術(shù)語"光學(xué)異構(gòu)體"表示相同結(jié)構(gòu)的異構(gòu)體，其僅在其基團(tuán)的空間排 布上不同。光學(xué)異構(gòu)體在不同方向上旋轉(zhuǎn)偏振光的平面。術(shù)語"旋光度" 表示光學(xué)異構(gòu)體旋轉(zhuǎn)偏振光平面的程度。
術(shù)語"外消旋物"或"外消旋混合物"表示兩個(gè)對(duì)映體物種的等摩爾混 合物，其中每一分離的種類以相反方向旋轉(zhuǎn)偏振光平面以致該混合物沒 有旋光度。
術(shù)語"對(duì)映體"表示一種立體異構(gòu)體，它與其鏡像不是不可疊合的。 術(shù)語"非對(duì)映體"表示不是對(duì)映體的立體異構(gòu)體。
術(shù)語"手性分子"表示具有至少一個(gè)對(duì)映體對(duì)的分子。這是與非手性 分子相反的，該非手性分子可以與其鏡像疊合。
手性分子的兩個(gè)不同鏡像體也稱為左旋的(左手的，縮寫L)或右旋 的(右手的，縮寫D)，這取決于它們以何種方式旋轉(zhuǎn)偏振光。符號(hào)"R" 和"S"表示在立體源(stereogenic )碳原子周圍的基團(tuán)的構(gòu)像。
由外消旋混合物分離到的對(duì)映體富集形式的實(shí)例包括右旋對(duì)映體， 其中該混合物基本上沒有左旋異構(gòu)體。在本上下文中，基本上沒有表示 左旋異構(gòu)體根據(jù)以下公式，可以(在一個(gè)范圍內(nèi))占少于該混合物的 25% 、少于10°/。、少于5%、少于2%或少于1%:
類似地，由外消旋混合物分離到的對(duì)映體富集形式的實(shí)例包括左旋 對(duì)映體，其中該混合物基本上沒有右旋異構(gòu)體。在本上下文中，基本上 沒有表示右旋異構(gòu)體根據(jù)以下公式，可以(在一個(gè)范圍內(nèi))占少于該混
合物的25% 、少于10%、少于5%、少于2%或少于1%:
工、A " 右旋體量
%右旋體=~"丄、A丄曰-丄"曰~~ xl00
(右旋體量)+ (左旋體量)
術(shù)語"幾何異構(gòu)體"表示取代基原子因碳-碳雙鍵、環(huán)烷基環(huán)或橋接雙 環(huán)系統(tǒng)關(guān)系而取向不同的異構(gòu)體。在碳-碳雙鍵兩側(cè)的取代基原子(氫除 外)可以是E或Z構(gòu)型。在"E"構(gòu)型中，所述的取代基在碳-碳雙鍵關(guān)系中 的對(duì)側(cè)。在"Z"構(gòu)型中，所述的取代基定位在碳-碳雙鍵關(guān)系中的同側(cè)。
與環(huán)系統(tǒng)連接的取代基原子(氫除外)可以是順式或反式構(gòu)型。在"順 式"構(gòu)型中，所述取代基在環(huán)平面關(guān)系的同側(cè)；在"反式"構(gòu)型中，所述取 代基在環(huán)平面關(guān)系的對(duì)側(cè)。具有"順式"和"反式"種類的混合體的化合物 命名為"順/反"。
異構(gòu)表示符號(hào)("R"、 "S"、 "E，，和"Z")表示原子構(gòu)型，并且將如文獻(xiàn) 中所定義的使用。
制備成單一異構(gòu)體?？诔Ｒ?guī)的拆分^t術(shù)包括將異^勾體對(duì)的每二異構(gòu)體的 游離堿(或游離酸)使用旋光酸(或堿)結(jié)合形成旋光鹽(接著分步結(jié)晶和游 離堿再生)，通過與適宜的手性助劑反應(yīng)形成異構(gòu)體對(duì)的每一異構(gòu)體的酯 或酰胺(接著分步結(jié)晶或色譜分離并除去手性助劑)，或者使用各種公知 的色譜法分離中間體或終產(chǎn)物的異構(gòu)體混合物。
此外，本發(fā)明化合物可具有一種或多種多晶形或者無定形結(jié)晶形 式，并且它們也將包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。此外， 一些化合物可以與水 形成溶劑合物(即水合物)或與普通有機(jī)溶劑(例如有機(jī)酯如乙醇化物等) 形成溶劑合物，并且它們也將包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
描述以下實(shí)施例以有助于理解本發(fā)明，并且不希望也不解釋為以任 何方式限制本發(fā)明所附權(quán)利要求中所述的內(nèi)容。 實(shí)驗(yàn)部分制劑
用于凍干的替比法尼 10mg/ml可注射溶液(制劑1) 替比法尼 10 mg
甘露醇 50 mg
濃鹽酸 3.75 |ul
羥丙基-(3-環(huán)糊精 200 mg
注射用水qsad 1000 pi
使pH".0士0.2
用于重構(gòu)(reconsititute)替比法尼可注射凍干粉的溶液(制劑2)
枸櫞酸一水合物 無水磷酸氬二鈉 注射用水qs ad 4吏pH-6.0士0.5
1.97 4.44 1000
mg mg
制劑的制備 制劑1
將10ml的制劑l填充到20ml管形瓶中，再冷凍干燥(每瓶100mg替 比法尼)。使用之前，將凍干粉溶解于8.6ml的制劑2中，獲得10ml的 替比法尼10mg/ml可注射溶液(pH 4 - 5)。然后將這一替比法尼 10mg/ml溶液用0.9% NaCl溶液稀釋成需要濃度(0.5至2mg/ml)。
制劑1的pH值是非常酸的，以便(l)為了增溶替比法尼，(2)制備期 間具有最小量的R110127形成(優(yōu)選地冷溫度 IO'C下進(jìn)行制備)。
當(dāng)用制劑2重構(gòu)時(shí)，將羥丙基-p-環(huán)糊精加至制劑1中以增溶替比法 尼。重構(gòu)溶液的pH值為~ 4.5。如果不存在羥丙基-p-環(huán)糊精，在此pH 值下，替比法尼會(huì)沉淀。在此pH值下，向外周靜脈(手臂)輸注期間局部 刺激的風(fēng)險(xiǎn)是可接受的水平。
在人體試驗(yàn)中，當(dāng)施用較長時(shí)間(例如24小時(shí))時(shí)，在輸注位置發(fā)現(xiàn) 有一些血栓性靜脈炎。這可能是由于羥丙基-p-環(huán)糊精本身而非載體引起 的。因此決定不通過外周靜脈而通過中央靜脈施用。中央靜脈具有更高 的血5!i量(debit)，,人而輸液的混合和稀釋更快、更高。由于當(dāng)通過中央 靜脈輸注時(shí)，輸液的pH值較不關(guān)鍵，確定用WFI(注射用水)重構(gòu)而不用 制劑2重構(gòu)。通過將制劑1的冷凍干燥粉末用WFI重構(gòu)獲得的溶液的 pH值為 3。該重構(gòu)溶液可通過中央,爭脈施用。
制備方法
(a) 制劑1的制備(10L批量)
(1 )向適宜的容器中加入2kg的羥丙基-(3-環(huán)糊精。
(2) 向(1)中加入500g甘露醇。
(3) 向(2)中加入8kg注射用水，攪拌直至溶解。
(4) 向(3)中加入164.0gHCl 10%,攪拌至均勻。
(5) 向(4)中加入100gRl 15777,混合成溶液。
(6) 經(jīng)無菌0.22|iim濾膜過濾。
(7) 將10ml的(6)填充到20ml管形瓶中。
(b) 制劑1的冷凍干燥
(8) 塞住管形瓶，轉(zhuǎn)移到凍千盤(lyotrays)。
(9) 將(8)轉(zhuǎn)移到冷凍干燥機(jī)。
(10) 冷凍干燥-冷凍-4(TC,環(huán)境壓力 -首次千燥10°C, 0.1 mbar -第二次干燥3CTC， 0.01 mbar
(11) 壓瓶。
臨床試-瞼 方法和才才泮牛
此隨機(jī)、標(biāo)簽公開(open-label)、對(duì)照試驗(yàn)是根據(jù)良好臨床操作規(guī)范 (good clinical practice)進(jìn)行的。在該試驗(yàn)之前獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并 且患者在參與的知情同意書上簽字。
替比法尼是以100-mg口服片劑或含有l(wèi)OOmg替比法尼和2.0g羥丙 基-p—環(huán)糊精(HP(3CD)的瓶裝凍干粉劑提供的。靜脈輸注前立即用制劑2 重構(gòu)該凍干粉。將此等分部分稀釋于0.9。/。 NaCl，再通過注射器以適宜 的輸注管線施用藥物。 研究受試者
病理學(xué)確認(rèn)為癌癥的18歲或更大的男性和女性，對(duì)治愈性治療不 順從，他們是本項(xiàng)研究的入選者。要求患者具有ECOG(東方協(xié)作腫瘤集 團(tuán)，Eastern Cooperative Oncology Group)體質(zhì)狀態(tài)S2。其它要求包括在 入組研究之前至少4周內(nèi)無放射治療和/或化學(xué)治療(對(duì)于亞硝基脲和絲 裂霉素C為6周)，充分的口服攝食以維持合理的營養(yǎng)狀態(tài)。
如果有明顯異常的血液狀態(tài)，即由以下判斷的中性白細(xì)胞計(jì)數(shù) <l，500/mm3、血小板計(jì)數(shù)〈100,000/mm3、血清膽紅素〉2.0mg/dL、轉(zhuǎn)氨 酶〉5倍的規(guī)定正常值上限、或者肌酸酐〉1.5mg/dL,則排除這樣的患者。 在口服施用替比法尼期間，不允許同時(shí)施用質(zhì)子泵抑制劑(例如奧美拉 唑、蘭索拉唑、泮托拉唑)(僅在循環(huán)1中，當(dāng)進(jìn)行PK評(píng)價(jià)時(shí)，以避免 任何可能的干擾)。進(jìn)行過胃腸(GI)道手術(shù)而容易因受損胃酸或脫離上部 GI道而干擾藥物吸收的患者未入選。根據(jù)研究者的意見，任何并發(fā)癥的 存在均將成為參與本項(xiàng)研究的風(fēng)險(xiǎn)，并且特定級(jí)別^2的外周神經(jīng)病當(dāng)作 不合格患者。 研究計(jì)劃
本研究第一(劑量確定)期的目標(biāo)是檢驗(yàn)充分耐受的靜脈劑量方案。 期望此方案相當(dāng)于50。/。-60y。的臨床相關(guān)口服劑量(200mg)，其基于在健 康男性志愿者中預(yù)先試驗(yàn)確定的絕對(duì)生物利用度。第一組3名受試者接 受接下來不間斷的4天連續(xù)的替比法尼治療30mg作2-小時(shí)靜脈輸注 b.i.d.，于第l-4天;接著200mg作口服施用b丄d.，于第5-8天；接著每 天60mg作連續(xù)輸注，于第9-12天。類似地，第二組3名受試者接受類 似的4天替比法尼治療60mg作2-小時(shí)靜脈輸注b丄d.,接著200mg作 口服施用b丄d.,接著每天120mg作連續(xù)靜脈輸注。在每一個(gè)所述的4-天口服或i.v.治療之間沒有清洗(washout)期。
在所述組中第二和第三名受試者僅在第一受試者完成第一靜脈和 口服治療(即8-天期間)而無劑量限制毒性(DLT)時(shí)才開始。如果在第一或 第二組中DLT發(fā)生于3名受試者中的1名，則將3名追加的受試者加到 那組中。如果超過1名以上受試者經(jīng)歷DLT(在首先的3名受試者中或在 延長組的6名受試者中)，將劑量遞增終止，在那組中的其它受試者以同 一劑量完成他們的治療。
本研究第一(i.v,口服跨接)期是在不同的患者組中完成的。將全身暴 露于替比法尼，接著所選的2-小時(shí)和連續(xù)靜脈方案(從前面的劑量確定 期)與200-mgb丄d.口服方案之后暴露比較。當(dāng)劑量確定期的第二組的至 少2名受試者直至第2]天尚未觀察到DLT,則開始所述跨接期。為了， 補(bǔ)償潛在的順序作用，在所選靜脈方案中，將總計(jì)24名受試者隨機(jī)以 1:1比率分配到兩個(gè)治療程序中的一個(gè)中。
順序1: 100mgb丄d.作2-小時(shí)靜脈輸注施用，于第l-4天；接著200mg
口月l片劑b丄d.,于第5-8天；然后200mg/天作連續(xù)4-天靜脈輸注施用， 于第9-12天。
順序2:200mg/天作連續(xù)4-天靜脈輸注施用，于第1-4天；接著200mg 口月良片劑b.i.d.，于第5-8天；然后100mg b丄d.作2-小時(shí)靜脈輸注施用， 于第9-12天。
口服劑量的替比法尼是在攝食后立即給予。替比法尼的輸注是通過 前臂外周靜脈或較高劑量時(shí)通過中央脈管線施用的。 血漿取樣和分析
在劑量確定期和跨接期，藥物動(dòng)力學(xué)取樣是在每一治療的第4天從 早晨給藥開始的10-小時(shí)期間進(jìn)行的。全血樣品是在口服施用之前即刻 以及口服施用之后0.5、 1、 2、 3、 4、 6、 8和10小時(shí)取樣。對(duì)于2-小時(shí) 靜脈輸注，血液樣品是在給藥之前即刻以及給藥之后1、 2(即正好在輸 液結(jié)束之前)、2.25、 3、 4、 6、 8和10小時(shí)取樣。血液樣品是在連續(xù)l爭 脈輸注開始之前即刻以及連續(xù)靜脈輸注開始之后2、 4、 6、 8和10小時(shí) 取樣。
每一PK樣品收集的血液最少7mL。將全血樣品立即置于冰中，并 在采集之后2小時(shí)內(nèi)離心(10min， 1000 xg)。將分離的血漿立即于S-18 。C下冷凍直至分析。
將血漿樣品在室溫下解凍，再使用以前公開的方法對(duì)各個(gè)樣品分析 替比法尼。向l-ml份的人血漿中加入200ng的內(nèi)標(biāo)(R121550, —種結(jié)構(gòu) 類似物)。加入lml的NaOH (O.IM)之后，將樣品用4ml的含有10%異戊 醇的庚烷萃取兩次。將合并的有機(jī)相用2ml的HC1(2M)反萃取。用濃氨 堿化之后，水相用5ml的含有5%異戊醇的庚烷萃取一次。在氮?dú)夂?5°C 下將此萃取物蒸發(fā)，再將殘余物溶解于100微升的注入溶劑(乙酸銨 0.01M/乙腈/曱醇；50/25/25)。將15^1萃取物注入配有240nm波長UV 才企測器的HPLC (Agilent)中。在填充3)iim C18 BDS-Hypersil (Alltech)的 10cmx4.6mm色譜柱中進(jìn)行分離。在0.8 ml/min的流速下，以0.01M 乙酸銨/乙腈(52/48)的等度開始洗脫，直到感興趣的化合物洗脫，接著梯 度至90%乙腈。總的運(yùn)行時(shí)間為14 min。此分析在2.00至5000ng/ml 的范圍內(nèi)有效。
替比法尼的代謝物，尤其是R130525、 R107252和R104209,是使 用LC-MS/MS測定的。這些代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)表示于圖11。為了測
定葡萄糖醛酸化代謝物的存在，還在用大腸桿菌(3-葡萄糖醛酸酶 (Boehringer Ingelhdm GmbH, Ingelheim, 德國)脫結(jié)合(deconjugation) 之后分析血漿樣品。以如下說明制備樣品每份0.2mL人血漿或每份 l.OmL的稀釋的、脫結(jié)合的血漿樣品中加入3種內(nèi)標(biāo)以每種5ng的混合 物穩(wěn)定的同位素標(biāo)記的化合物R198838用于替比法尼和R130525;兩 種結(jié)構(gòu)類似物R107252和R121704分別用于R101763和R104209。加入 lmL的O.lMNaOH之后，將樣品用3mL的含有10%異戊醇的庚烷萃取 兩次。將合并的有機(jī)級(jí)分在氮?dú)庀抡舭l(fā)，再將該殘余物重構(gòu)于lOOpL的 甲醇和lOOpL的0.002M乙酸銨的混合物中。在C18 BDS-Hypersil 3pm (3.2mml.D. x50mm)柱上進(jìn)行色譜分離。注射體積為25(liL。等度流動(dòng) 相是由0.002M曱酸銨(曱酸調(diào)至pH4)/乙腈(44/56)組成，泵速為0.5mL/ 分鐘。通過串聯(lián)質(zhì)譜法用Turboionspray電離(正離子模式)檢測。以下質(zhì) 量if夭遷用于監(jiān)測不同的4b合物和內(nèi)標(biāo)物替比法尼489.1 — 407.1; R198838: 492.1 —407.1; R130525: 475.1 — 393.1; R101763: 394.0 — 139.0; R104209+R107252: 408.0 ~> 139.0;以及R121704: 422.1 — 139.0。 脫結(jié)合之后對(duì)于每一代謝物在0.50-1250ng/ml的范圍內(nèi)以及對(duì)于替比法 尼在10.0-25000ng/ml的范圍內(nèi)，該分析是有效的。 替比法尼蛋白結(jié)合分析
將替比法尼用["C]在不對(duì)稱碳原子上特異性地標(biāo)記。在第4天連續(xù) 靜脈輸注替比法尼開始之后4小時(shí)，從24名患者取7-mL血樣。血漿用 ["C]-替比法尼以500ng/ml加強(qiáng)。在配備相同的大-1 (macro-l)特富龍 (Teflon)池和Diachema 10.17透析膜(MW截止值為IO,OOO)的Dianorm系 統(tǒng)中，將該加強(qiáng)的血漿樣品經(jīng)用pH 7.17的0.067M磷酸鹽緩沖液在下 37'C經(jīng)平衡透析4小時(shí)。以一式兩份的100屮1份的加強(qiáng)的血漿在平衡透 析之前和之后測定放射性水平；并在透析之后、在Packard Tri-Carb 1900 TR液體閃爍語儀上，以與甲醇混合的透析池的緩沖液隔室中的內(nèi)容物 1000-^1的一式兩份測定放射性水平。用比色雙縮脲(biureet)法(試劑盒為 Roche Diagnostics 1929917)測定總蛋白濃度。用比色溴甲酚綠法試劑盒 Roche Diagnostics 1970909測定白蛋白濃度。用免疫-比濁法(試劑盒為 Roche Diagnostics 1557602)測定ar酸糖蛋白濃度。所有這些測定是在 Roche Hitachi Modular分沖斤4義上進(jìn)行的。
如通過放射性測定透析池的緩沖液(Cu)隔室和血漿(C)隔室所測定
的，非結(jié)合替比法尼的分?jǐn)?shù)(fu)是以非結(jié)合濃度(Cu)與總濃度(C)的比值計(jì)
算的fu = Cu/C。結(jié)合分?jǐn)?shù)fb-l — fu。 非隔室藥代動(dòng)力學(xué)分析
通過非隔室方法使用WinNonlin第3.1版程序(Pharsight Corporation, Cary， NC)，分析了從每一施用期的第4天早晨給藥開始的10-小時(shí)替比 法尼的各個(gè)血漿濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)。從O至10小時(shí)時(shí)間的濃度對(duì)時(shí)間曲線 下面積(AUC(Moh)是使用線性梯形法計(jì)算的。最大血漿濃度(Cmax)、穩(wěn)態(tài)
血漿濃度(Cw僅對(duì)于連續(xù)靜脈輸注)、以及達(dá)到血漿濃度峰值時(shí)間(tmax)
為觀測值。替比法尼口服施用后的生物利用度是基于AUCo,h值根據(jù)x 100%計(jì)算的。
統(tǒng)計(jì)分析
人口統(tǒng)計(jì)信息概括為中值、最小值和最大值。替比法尼及其代謝物 的藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)也使用描述統(tǒng)計(jì)學(xué)進(jìn)行概括。替比法尼口服和靜脈施 用之后，來自可得到全部3個(gè)治療的藥代動(dòng)力學(xué)樣品的受試者的全身暴 露量(血漿C隨和AUC。-跳)是使用ANOVA來評(píng)價(jià)的。對(duì)于替比法尼的 Cmax和AUCcM()h，計(jì)算了在靜脈輸注(試驗(yàn))對(duì)口服施用(參照)的最小二乘 法平均比值附近的估計(jì)點(diǎn)和對(duì)應(yīng)90%置信區(qū)間。使用SAS第6.12版統(tǒng) 計(jì)軟件程序(SAS Institute, Cary, NC),用對(duì)數(shù)-變換的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn) 行該分析。 臨床評(píng)價(jià)
取得完整的病歷，在基線和治療期間進(jìn)行體格檢查(包括生命體征)、 血液學(xué)檢測和臨床化學(xué)檢測。為評(píng)價(jià)心血管安全性，在篩查、第一周期 和治療結(jié)束時(shí)記錄12-極線(lead) E.C.G.。雖然目標(biāo)的腫瘤應(yīng)答不是 本研究的主要目標(biāo)，仍嘗試獲得適合的測量結(jié)果以評(píng)價(jià)應(yīng)答。根據(jù)一般 毒性標(biāo)準(zhǔn)(Common Toxicity Criteria, CTC,第2.0版)，對(duì)所有不良事件 和臨床相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室異常進(jìn)行分級(jí)。 結(jié)果
受試者配置情況
總計(jì)入組32名受試者(10名男性和22名女性)；6名受試者參與劑 量確定期，26名受試者參與跨接期。在此項(xiàng)研究中31名受試者被診斷 為晚期實(shí)體瘤。1名受試者有高危骨髓增生異常綜合征。在跨接期，12 名受試者隨機(jī)分配為接受治療順序1(2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d./口服施用b丄d./連續(xù)靜脈輸注)，14名受試者接受治療順序2(連續(xù)靜脈輸注/口服施 用b丄d./2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d.)。隨機(jī)分配到治療順序1的1名受試者在 第4天從本項(xiàng)研究中退出，原因是違反協(xié)議規(guī)定；治療順序2的1名受 試者在第8天退出，原因是由于疾病進(jìn)展的肝衰竭。
招募到本研究的32名受試者的人口數(shù)據(jù)概述于表I(圖1)。患者年 齡范圍為35至70歲，體重范圍為48至92 kg,身高范圍為149至176cm。 第3組(跨接期)的兩個(gè)隨機(jī)分組之間沒有明顯差異。 替比法尼靜脈劑量的測定
第一組由3名受試者組成，他們接受4-天替比法尼方案30mg每 天兩次作2-小時(shí)靜脈輸注，接著200mg每天兩次作口服施用，再每天 60mg作連續(xù)輸注。平均地，與在這些個(gè)體接受200mg 口服劑量之后的 暴露量相比較，基于AUCo-跳用30mg b丄d.作2-小時(shí)靜脈輸注和每天 60mg作連續(xù)靜脈輸注的替比法尼全身暴露量分別低約64%和59%(表II 至IV)(圖2至4)。靜脈施用之后未觀察到劑量限制毒性。因此，靜脈施 用劑量被升高到下 一劑量水平。
在第二組中，3名另外的受試者接受4-天方案60mg替比法尼每 天兩次作2-小時(shí)靜脈輸注，接著每天120mg作連續(xù)輸注。與200mg 口 服劑量之后的暴露量相比較，在這些靜脈方案之后替比法尼全身暴露量 分別低約47%和46%(表II至IV)(圖2至4)。此外，在這組中未觀察到 DLT。根據(jù)這些結(jié)果，每天兩次100mg作2-小時(shí)輸注施用的方案和 200-mg/天連續(xù)輸注被選定為靜脈至口服跨接研究。 替比法尼的血漿藥代動(dòng)力學(xué)
正如所期望的，替比法尼血漿濃度-時(shí)間圖的形狀依賴于施用途徑和 給藥方案(圖1)。 口服施用和2-小時(shí)靜脈輸注之后替比法尼的血漿峰濃 度明顯。相比之下，藥物施用期間連續(xù)靜脈輸注產(chǎn)生相對(duì)恒定的血漿濃 度而無明顯峰。
最大血漿濃度是在口服施用200mg b丄d.的替比法尼達(dá)4個(gè)連續(xù)曰 之后約2小時(shí)觀察到的(表IV)(圖4)。在29名受試者中tmax的范圍為0.5 至3小時(shí)；1名受試者最大濃度在8小時(shí)。4天b丄d.口服給藥之后，Cmax 和AUC0-10h算術(shù)平均值(±SD ， n=24)分別為994±487ng/mL和 39卯土1671ng.h7mL。
當(dāng)100mg劑量作2-小時(shí)靜脈輸注給予時(shí)，與200mg 口服劑量相比， 觀察到更高的替比法尼血漿濃度(表IV)(圖4)。平均地，當(dāng)替比法尼作 2-小時(shí)靜脈輸注施用時(shí)(100mg b丄d.)，比當(dāng)口服施用時(shí)(200mg b丄d.), Cmax和AUQMOh值分別高出48.0%和19.3。/()(表IV)(圖4)。 90%置信區(qū)間 落的上限在80%至125%的生物等效性范圍之外。與口服施用之后相比， 2-小時(shí)靜脈輸注之后觀察到的更高暴露量不被認(rèn)為是臨床顯著的。
口服施用(200mg b丄d.)和連續(xù)靜脈輸注(每天200mg)之后第4天的 平均AUC(MOh值相似(表V)(圖5)。90%置信區(qū)間的下限落在80%至125% 的范圍內(nèi)；然而，擴(kuò)大的上限稍微超出了這一范圍(表V)(圖5)。根據(jù)由 AUQ).纖測定的總?cè)肀┞读?，連續(xù)輸注給藥的效果與口服途徑給藥相 似。然而，圖形的形狀是不同的，連續(xù)輸注之后未出現(xiàn)替比法尼峰濃度。
劑量標(biāo)準(zhǔn)化之后，口服片劑制劑的平均絕對(duì)生物利用度(口服對(duì)2 小時(shí)i.v.)為46.3%。類似地，口服片劑制劑的平均絕對(duì)生物利用度(口服 對(duì)連續(xù)靜脈輸注)為40.9 %
作連續(xù)靜脈輸注(200mg/天)或者作2-小時(shí)靜脈輸注(100mg b丄d.)施 用之后，替比法尼全身暴露是可比的。此外，盡管血漿濃度-時(shí)間圖的形 狀不同，平均AUCc)-u)h值是相似的。90%置信區(qū)間的上限和下限(81.1% 至100.3°/0)落在80%至125°/。的范圍內(nèi)。
總之，當(dāng)該化合物作口服片劑(200mg b丄d.)、經(jīng)2-小時(shí)靜脈輸注 (lOOmgb.i.d.)、或經(jīng)連續(xù)靜脈輸注(200mg/天)施用時(shí)，由給藥之后在10-小時(shí)間隔期間血漿AUCo-跳所測定的替比法尼全身暴露量是可比的。 通過3次治療觀察到平均AUC(MOh值的狹窄范圍(3990至4487ng'h/mL)。 當(dāng)考慮圖形的形狀時(shí)，2-小時(shí)靜脈輸注更加相似于口服施用。
血漿中替比法尼的蛋白結(jié)合
在全部分析的樣品中，替比法尼廣泛地與血漿蛋白結(jié)合(圖2)。在 連續(xù)靜脈輸注開始之后4小時(shí)抽取的血漿樣品中，平均游離(未結(jié)合)分 數(shù)為0.62%(范圍為0.45至0.88%)。替比法尼的未結(jié)合分?jǐn)?shù)不依賴于 211ng/mL至812ng/mL范圍內(nèi)的總藥物血漿濃度。從某些受試者在口服 施用之后或2-小時(shí)靜脈輸注之后取得的樣品，其蛋白結(jié)合沒有可用的數(shù) 據(jù)。然而，在200mgb丄d.口服施用達(dá)4天之后在IO小時(shí)給藥間隔期間， 中值血漿濃度在159ng/mL至788ng/mL的范圍內(nèi)。
血清白蛋白、(X,-酸糖蛋白和總蛋白的平均濃度(范圍)分別為 4.1g/100mL(3.1至4.7g/mL)、 131mg/100mL (90至218mg/100mL)和
6.8g/100mL (4.7至7.9g/mL)。 血漿中替比法尼的代謝產(chǎn)物
替比法尼代謝產(chǎn)物的血漿藥代動(dòng)力學(xué)是在口服片劑(200mg b丄d.)、 2-小時(shí)靜脈輸注(60和lOOmg b丄d.)、或連續(xù)靜脈輸注(120和200mg/天) 施用4天之后于第4、 8和12天進(jìn)行分析的。分析的代謝產(chǎn)物包括 R130525、詣1763、 R104209、替比法尼-葡萄糖醛酸、R130525-葡萄糖 醛酸、R104209-葡萄糖醛酸。這些代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)已由Garner RC " a/確證。在全身循環(huán)中觀察到的主要代謝產(chǎn)物為R130525和替比法尼-葡萄糖醛酸(圖3)。靜脈途徑測定的替比法尼的主要和次要代謝產(chǎn)物與 口服施用的那些相同。
一般地，替比法尼-葡萄糖醛酸代謝產(chǎn)物的全身暴露量(Cmax和
AUQ)-肌)隨靜脈施用的替比法尼劑量的增加而增力口(表VI)(圖6)。平行比 較在第12天替比法尼-葡萄糖醛酸代謝產(chǎn)物暴露量沒有從前面ll天施用 累積(數(shù)據(jù)未顯示)。替比法尼-葡萄糖醛酸相對(duì)于替比法尼的AUC(M0h值 的平均比值為口服施用為18.6， 100mg2-小時(shí)靜脈輸注為7.5, 200mg 連續(xù)靜脈輸注為8.6。總體上，與靜脈施用相比，口服給予替比法尼之 后在血漿中葡萄糖醛酸對(duì)母體化合物的濃度比更高。這可能是由于通過 肝臟的首過效應(yīng)(即，母體化合物在全身吸收之前即損失)，此首過效應(yīng) 與經(jīng)口服途徑給藥有關(guān)。
Rl30525代謝產(chǎn)物的全身暴露量(Cmax和AUCo-跳)隨靜脈施用的替 比法尼劑量的增加而增加(表VII)(圖7)。 R130525相對(duì)于替比法尼的 AUC(M0h值的平均比值為口服施用為五分之一，2-小時(shí)靜脈輸注和連 續(xù)靜脈輸注約為十分之一 。
口服施用200mg替比法尼之后，替比法尼的其它代謝產(chǎn)物也在血 漿中測定，包括R101763(Cmax: 14.8ng/mL, AUC0—10h: 101ng'h/mL)、 R104209(Cmax: 69.7ng/mL， AUC0-10h: 447ng.h/mL)、 R130525-葡萄糖醛 酸(Cmax: 53.0ng/mL, AUC0-10h: 320ng.h/mL)、 R1076-葡萄糖醛酸(C脂x: 12.0ng/mL, AUC。-10h: 63.9ng.h/mL) 、 R104209-葡萄糖醛酸(Cmax : 64.0ng/mL, AUC0—l0h: 434ng'h/mL)。這些代謝物的濃度比R130525和替 比法尼-葡萄糖醛酸的濃度更低。靜脈施用之后這些代謝物的暴露量低于 口服施用之后的暴露量。 臨床評(píng)價(jià)
對(duì)全部受試者進(jìn)行了毒性評(píng)價(jià)。 一名受試者在3天之后發(fā)現(xiàn)她不符 合本項(xiàng)研究資格而退出；沒有不良事件的報(bào)道。 一名受試者有骨髓增生 異常綜合征。此受試者有3-4級(jí)嗜中性白血球減少癥的時(shí)期，通過劑量 減少和推遲處理。血小板計(jì)數(shù)保持正常。未觀察到明顯的非血液學(xué)毒性。
在9/30名患者(30%)中觀察到3或4級(jí)藥物相關(guān)性血液學(xué)毒性嗜中 性白血球減少癥。在1名患者(3%)中觀察到發(fā)熱性嗜中性白血球減少癥。 主要的藥物相關(guān)性非血液學(xué)毒性(主要是1級(jí))為疲勞(60%)、惡心(40%)、 食欲減退(20%)、嘔吐(17%)和腹瀉(13 %)。在3名患者中觀察到靜脈炎， 全部是通過外周小靜脈途徑IV推注給藥；當(dāng)使用中央靜脈IV推注給藥 時(shí)未觀察到靜脈炎。
對(duì)31名受試者進(jìn)行了有效性評(píng)價(jià)MDS的受試者有8個(gè)月的血液 學(xué)改善(血紅蛋白持續(xù)增加，其根據(jù)International Working Group標(biāo)準(zhǔn)對(duì) MDS的應(yīng)答)。未觀察到客觀的腫瘤應(yīng)答，并且14名受試者疾病穩(wěn)定達(dá) 至少6個(gè)月。 討論
"劑量確定"期的目的是確定替比法尼的靜脈劑量方案，此方案將產(chǎn) 生與200mg 口服施用一天兩次相比相似的暴露量。更一般地說，此目的 是確定靜脈劑量和時(shí)間表，此靜脈劑量和時(shí)間表將提供如目前口服施用 所產(chǎn)生的相似作用的充分暴露量。在低劑量靜脈方案的第一組和第二組 中，替比法尼的全身暴露量比200mg 口服施用的全身暴露量低得多。在 本項(xiàng)研究的"跨接"期，考慮到在這些低劑量方案之后沒有劑量限制毒 性，最后的靜脈施用劑量被升高到100mg b丄d.作2-小時(shí)輸注和200mg/ 天作連續(xù)輸注。
平均地，當(dāng)替比法尼作口服片劑(200mg b丄d.)、 2-小時(shí)靜脈輸注 (100mg b丄d.)或連續(xù)靜脈輸注(200mg/天)施用時(shí)，替比法尼的暴露量 (AUC(M0h)是可比的并且在一狹窄的范圍內(nèi)(3990至4487ng'h/mL)。當(dāng)考 慮2個(gè)靜脈方案的圖形形狀時(shí)，2小時(shí)輸注更加接近于模仿的口服施用。
口服施用200mg替比法尼b丄d.劑量之后，平均Cmax和AUC0-10h 值分別為994ng/mL和3990ng'h/mL。這與前面口服施用150-和300-mg 的替比法尼每天兩次的研究非常符合(平均Cmax分別為443和974;平均 AUC(M2h值分別為2495和4674ng'h/mL)。
在進(jìn)食條件下施用替比法尼片劑的平均口服生物利用度為46.3%
(就2-小時(shí)靜脈輸注b丄d.而言)和40.9%(就連續(xù)靜脈輸注而言)。這些結(jié) 果代表了近似絕對(duì)口服生物利用度，因?yàn)樵谧詈笏幬锸┯弥笱獫{樣品 僅采集了 10小時(shí)。然而，清楚的是，當(dāng)與食物施用時(shí)替比法尼具有相 對(duì)良好的生物利用度。
以前人體研究表明，替比法尼經(jīng)過廣泛代謝，并且未變化的母體化 合物在血漿中占相對(duì)較小的組成?？诜┯弥?，未變化的替比法尼的 濃度比未沉淀樣品中的總放射性濃度低，平均為四十二分之一，并且比 脫蛋白樣品低，約為八分之一。在尿中沒有未變化的藥物排泄，并且在 糞便(faces)中替比法尼回收低于7%的口服施用劑量。在本項(xiàng)研究中獲得 一致的結(jié)果。替比法尼-葡萄糖酪酸的血漿AUC(MOh值比替比法尼高，是 3-至30-倍。由于替比法尼在其結(jié)構(gòu)中具有氨基和酮基，直接結(jié)合是可 期待的。重要的是，用NIH 3T3 H-ms細(xì)胞系和法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶作體 外研究表明，替比法尼的葡萄糖醛酸-代謝產(chǎn)物不是法呢基轉(zhuǎn)移酶的抑制 劑。在本項(xiàng)研究和以前的研究中，在患者血漿中測定了通過氧化生物轉(zhuǎn) 化形成的替比法尼的其它代謝產(chǎn)物，包括R130525和R104209及其各自 的葡萄糖醛酸化結(jié)合物，以及R101763。
替比法尼的兩種優(yōu)勢代謝產(chǎn)物即葡萄糖醛酸結(jié)合物和N -脫烷基化 物R130525的暴露量隨所施用的替比法尼靜脈劑量的增加而增加。在所 研究的劑量范圍內(nèi)這些途徑顯然未飽和。每一途徑施用之后R130525的 相對(duì)暴露量是可以比較的。相反，葡萄糖醛酸化代謝產(chǎn)物的血漿濃度在 口服給藥之后比靜脈施用之后高，大約是2倍?？诜┯弥笤诟闻K中 的首過代謝期間更廣泛的葡萄糖醛酸化最有可能解釋替比法尼-葡萄糖 醛酸相對(duì)濃度的這種途徑-依賴性差異。此外，本項(xiàng)研究確證的代謝產(chǎn)物 與施用途徑無關(guān)。該結(jié)果還說明了首過代謝對(duì)每一代謝產(chǎn)物暴露量的代 謝產(chǎn)物-特異性影響。
在此試驗(yàn)中，癌癥患者離體測量的替比法尼的血漿蛋白結(jié)合值非常 接近于用5名健康男子血漿樣品體外試驗(yàn)獲得的值(99.22%結(jié)合)。在此 體外研究中，將來自這些健康受試者的空白血漿樣品1000ng/mL的14C-替比法尼加強(qiáng)，并且測定方法與當(dāng)前的試驗(yàn)中所使用的相同。替比法尼 的體外血漿蛋白結(jié)合還與100至5000ng/mL范圍內(nèi)的總替比法尼濃度無 關(guān)。
總之，2-小時(shí)靜脈方案的血漿濃度-時(shí)間圖形與口服施用之后的圖形
非常相似。替比法尼的全身暴露量當(dāng)每天兩次給予100mg作2-小時(shí)靜脈 輸注或者經(jīng)口服途徑給予200mg時(shí)的給藥之后最初10小時(shí)是可比的。 沒有與靜脈替比法尼相關(guān)的罕見的不良事件。
權(quán)利要求
1. 適合靜脈施用的替比法尼的藥物制劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的替比法尼的藥物制劑，進(jìn)一步包含環(huán)糊精。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的替比法尼的藥物制劑，其中所述的環(huán)糊 精是羥丙基-p-環(huán)糊精。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的替比法尼的藥物制劑，其中所述 的替比法尼的濃度約為10mg/ml。
5. 包含環(huán)糊精的替比法尼的冷凍干燥組合物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5的冷凍干燥組合物，其中所述的環(huán)糊精是羥丙 基-p-環(huán)糊精。
7. 制備如權(quán)利要求1所述的藥物制劑的方法，包括將替比法尼的 冷凍干燥組合物與含有水和酸的溶劑混合的步驟。
8. 制備如權(quán)利要求7所述的藥物制劑的方法，其中所述的酸選自 酒石酸、馬來酸、琥珀酸和枸櫞酸。
9. 替比法尼用于治療急性髓細(xì)胞樣白血病的用途，其特征在于所 述的治療包括施用權(quán)利要求1的藥物組合物。
10. 替比法尼用于治療乳腺癌的用途，其特征在于所述的治療包括 施用權(quán)利要求1的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及替比法尼的新制劑，其適合于靜脈(IV)施用。本發(fā)明進(jìn)一步涉及此制劑的用途、制備此制劑的方法以及通過施用所述制劑治療的方法。
文檔編號(hào)A61K9/08GK101389312SQ200680038263
公開日2009年3月18日 申請(qǐng)日期2006年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月14日
發(fā)明者M·K·J·弗朗索瓦, P·A·帕爾默, P·M·-Z·R·德波爾, W·A·M·C·德里斯 申請(qǐng)人:詹森藥業(yè)有限公司