專利名稱：：一種仙茅提取物、制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種提取物及其制備方法和應(yīng)用，具體地涉及一種仙茅提取物、制備方法及其在制備治療或預(yù)防心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：仙茅是仙茅科仙茅屬植物仙茅(CurculigoorchioidesGaertn)的干燥根莖，具有補(bǔ)腎陽(yáng)、強(qiáng)筋骨、祛寒濕等功效。現(xiàn)代植物化學(xué)研究揭示仙茅中含有仙茅苷(curculigoside)、仙茅苷B-C(curculigosideB-C)、仙茅皂苷A-M(curculigosaponinsA-M)、苔黑酚葡萄糖苷(orcinolglusocide)等成分。目前還沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道仙茅苷單體的制備方法，仙茅苷對(duì)心腦血管疾病的作用也未見(jiàn)報(bào)道，基于此，本發(fā)明人通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)研究，提供了一種仙茅提取物及其制備方法和在預(yù)防或治療心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種仙茅提取物，其中100%>仙茅苷》90%，優(yōu)選100%>仙茅本發(fā)明提供了一種仙茅提取物的制備方法。本發(fā)明提供了以仙茅提取物為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明提供了以仙茅提取物為活性成分的藥物組合物在制備治療或預(yù)防心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了以仙茅提取物為活性成分的藥物組合物在制備治療或預(yù)防冠心病、心絞痛的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了以仙茅提取物為活性成分的藥物組合物在制備治療或預(yù)防缺血性腦中風(fēng)的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了以仙茅提取物為活性成分的藥物組合物在制備治療或預(yù)防腦缺血/再灌注損傷的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了以仙茅提取物為活性成分的藥物組合物在制備治療或預(yù)防腦外傷的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的仙茅提取物中的仙茅苷，其結(jié)構(gòu)如下<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage4</formula>仙茅苷本發(fā)明提供的仙茅提取物由下述方法制備(l)仙茅藥材水提醇沉后，濾液濃縮至無(wú)乙醇；(2)濾液依次上非極性中極性的大孔樹(shù)脂和聚酰胺樹(shù)脂柱，洗脫，洗脫液濃縮至無(wú)乙醇；(3)洗脫液用乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮至干；(4)萃取干燥品溶解于無(wú)水乙醇中，濃縮，冷卻，靜置，析出針狀白色晶體仙茅苷，過(guò)濾，低溫減壓干燥，重結(jié)晶，即得。本發(fā)明提供的仙茅提取物具體由以下方法制備仙茅藥材粉碎，加612倍水，浸泡2小時(shí)，煎煮34次，每次煎煮12小時(shí)，過(guò)濾，合并提取過(guò)濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.051.2，加入乙醇，攪拌，至乙醇濃度為60%90%，靜置，過(guò)濾乙醇溶液，少量乙醇洗滌濾渣，棄掉濾渣，濾液濃縮至無(wú)乙醇，選用一種非極性中極性的大孔樹(shù)脂和聚酰胺樹(shù)脂的組合，上樣，可先用水洗脫36倍柱體積或/和10%20%的乙醇溶液洗脫26倍柱體積，棄掉洗脫液，再用30%70%的乙醇溶液洗脫26倍柱體積，收集洗脫液濃縮至無(wú)乙醇，上聚酰胺樹(shù)脂柱，水洗26倍柱體積，棄掉洗脫液，再用5%20%乙醇洗脫26倍柱體積，接收洗脫液濃縮至無(wú)乙醇，再用乙酸乙酯萃取，1:1(V/V)萃取35次，合并萃取液，濃縮至干，萃取干燥品溶解于無(wú)水乙醇中，濃縮，冷卻，靜置，析出針狀白色晶體仙茅苷，過(guò)濾，低溫減壓干燥，重結(jié)晶，即得。本發(fā)明提供的藥物組合物可以是注射劑、粉針劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、微粒劑，優(yōu)選凍干粉針劑，所用輔料為各種制劑的常規(guī)輔料。本發(fā)明提供的藥物組合物在用于心腦血管疾病時(shí)，其注射使用劑量范圍是75mg3000mg，優(yōu)選為75mg1500mg。其口服使用劑量范圍是200mg4000mg，優(yōu)選為200mg2000mg。本發(fā)明人進(jìn)行了下列試驗(yàn)來(lái)證實(shí)仙茅提取物在制備治療或預(yù)防心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用，但不僅限于此。具體實(shí)施例方式制備例l:仙茅提取物的制備仙茅藥材50Kg，加水600L，浸泡2小時(shí)，加熱煎煮3次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，合并提取過(guò)濾液，減壓濃縮，至相對(duì)密度1.20(4(TC測(cè)定)，加入95%乙醇，攪拌，至乙醇濃度為70%，靜置1小時(shí)，過(guò)濾乙醇溶液，少量乙醇洗滌濾渣，棄掉濾渣，濾液濃縮至無(wú)乙醇。濃縮液上樣到AB-8大孔樹(shù)脂柱，吸附，10%乙醇溶液洗脫3倍柱體積，棄掉洗脫液，30%乙醇溶液洗脫3倍柱體積，接收洗脫液，濃縮至無(wú)乙醇。此濃縮液上樣到聚酰胺樹(shù)脂柱，吸附，水洗5倍柱體積，棄掉洗脫液，15%乙醇溶液洗3倍柱體積，接收洗脫液，濃縮至無(wú)乙醇。此濃縮液用乙酸乙酯按l:1(V/V)萃取4次，合并萃取液，濃縮至干。萃取干燥品溶解于無(wú)水乙醇中，濃縮，冷卻，靜置，析出針狀白色晶體仙茅苷，過(guò)濾，低溫減壓干燥。稱重，制得仙茅苷160g，檢測(cè)，含量94%。重結(jié)晶，制得仙茅苷140g，檢測(cè)，含量97%。制備例2:仙茅提取物的制備仙茅藥材50Kg，加水500L，浸泡2小時(shí)，加熱煎煮3次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，合并提取過(guò)濾液，減壓濃縮，至相對(duì)密度l.15(40。C測(cè)定)，加入95%乙醇，攪拌，至醇濃度為60%，靜置6小時(shí)，過(guò)濾乙醇溶液，少量乙醇洗滌濾渣，棄掉濾渣，濾液濃縮至無(wú)乙醇。濃縮液上樣到HZ—818大孔樹(shù)脂柱，吸附，分別用水和20%乙醇各洗脫3倍柱體積，棄掉洗脫液，用40%乙醇洗脫3倍柱體積，接收洗脫液，濃縮至無(wú)乙醇。此濃縮液上樣到聚酰胺樹(shù)脂柱，吸附，水洗4倍柱體積，棄掉洗脫液，10%乙醇洗3倍柱體積，接收洗脫液，濃縮至無(wú)乙醇。此濃縮液用乙酸乙酯按l:1(V/V)萃取5次，合并萃取液，濃縮至干。萃取干燥品溶解于無(wú)水乙醇中，濃縮，冷卻，靜置，析出針狀白色晶體仙茅苷，過(guò)濾，低溫減壓干燥。稱重，制得仙茅苷180g，檢測(cè)，含量95%。重結(jié)晶，制得仙茅苷160g，檢領(lǐng)!J，含量98%。制備例3:仙茅苷注射液的制備處方仙茅苷25g氯化鈉89g注射用水10000ml制成10000ml制法按處方量取仙茅苷25g，氯化鈉89g，用注射用水10000ml溶解，攪拌；加入活性炭50g，攪拌20分鐘，溶液經(jīng)過(guò)微孔濾膜過(guò)濾澄明，分裝于125ml輸液瓶中，每瓶100mL，滅菌，檢査合格后包裝即可。其它檢查項(xiàng)應(yīng)該符合中華人民共和國(guó)藥典2005年版注射液項(xiàng)目要求。制備例4:仙茅苷凍干粉針的制備處方-仙茅苷25g甘露醇50g注射用水500(kl制成2500支制法:取仙茅苷25g，溶解于5000ml含l^甘露醇的注射用水溶液中，加入活性炭50g，攪拌30分鐘，溶液經(jīng)過(guò)微孔濾膜過(guò)濾，得到無(wú)熱原的澄清溶液，分裝于10ml西林瓶中，2ml/只，按凍干粉針工藝凍干，制成每支含10mg的凍干粉針。制備例5:仙茅苷固體片劑制備處方仙茅苷200g淀粉150g羧甲基淀粉鈉50g微晶纖維素100g硬脂酸鎂5g50%乙醇制成1000粒制法:按處方量取仙茅苷200g，淀粉150g，羧甲基淀粉鈉50g，微晶纖維素100g，硬脂酸鎂5g，混和，加入50%乙醇適量制粒，千燥，整粒，壓片，檢查合格后，包裝。試驗(yàn)例l:仙茅提取物對(duì)大鼠心肌缺血損傷的影響(l)材料仙茅提取物，按制備例1方法制備。氯化硝基四氮唑藍(lán)(N-BT)，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥材供應(yīng)站提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物普通級(jí)SD大鼠，雄性，體重280g—350g，雌雄各半，山東綠葉制藥股份有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SYXK(魯)20030020。(2)方法與結(jié)果動(dòng)物隨機(jī)分為模型對(duì)照組(生理鹽水)、硝苯地平組(6mg/kg)、仙茅苷靜脈注射小劑量組(2.5mg/kg)、仙茅苷靜脈注射中劑量組(7.5mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組l(20mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組2(50mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組3(150mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組4(300mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組1(20mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組2(50mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組3(200mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組4(400mg/kg)。每組10只。禁食12小時(shí)后，ip.烏拉坦(1.2g/kg)麻醉，測(cè)肢體II導(dǎo)聯(lián)心電圖。剪去左胸前皮毛，碘酒及酒精消毒，沿胸骨左緣lcm處，剪開(kāi)胸壁肌肉及二條肋骨，迅速打開(kāi)胸腔，暴露心臟，在動(dòng)脈圓錐與左心耳之間結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈，立即將心臟放回，排擠出胸腔空氣，用止血鉗閉合胸腔，造成大鼠急性心肌缺血模型。硝苯地平組在麻醉前灌胃給藥，灌胃給藥組連續(xù)給藥3天，于第2天給藥后禁食16小時(shí)后，第3天給藥30分鐘后手術(shù)，其余各組術(shù)后隨既靜脈注射相應(yīng)藥物。記錄給藥前及給藥后1.5h、3h心電圖，測(cè)量心電圖J點(diǎn)的升高值，6h后取出心臟，以冷生理鹽水洗凈后，-20°。冰箱冷凍過(guò)夜。次日，將冷凍的心臟由結(jié)扎處至心尖部等厚切成5片，浸入新鮮配制的0.25%N-BT磷酸緩沖液(pH7.4)中。37'C水浴振搖1015min。用濾紙吸干切片表面的染色液，分離染色部分和未染色部分，稱重，記算梗死面積。梗死面積(％)=梗死部分重量/(非梗死部分重量+梗死部分重量>100%。數(shù)據(jù)用Iis表示，以組間r檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果如表l所示，心肌缺血6小時(shí)后，模型組大鼠心肌出現(xiàn)明顯的灶狀缺血區(qū)，達(dá)到26%左右。仙茅苷靜脈注射中劑量組(7.5mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組l(20mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組2(50mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組3(150mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組4G00mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組1(20mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組2(50mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組3(200mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組4(400mg/kg)降低肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖J點(diǎn)的升高、減少缺血面積(與模型組比較，p〈0.01);仙茅苷靜脈注射高劑量組3(150mg/kg)與仙茅苷靜脈注射高劑量組4(300mg/kg)比較，對(duì)肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖J點(diǎn)的升高及缺血面積無(wú)明顯差異(p〉0.05);仙茅苷靜脈灌胃組3(200mg/kg)與仙茅苷灌胃組4(400mg/kg)比較，對(duì)肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖J點(diǎn)的升高及缺血面積無(wú)明顯差異(p>0.05)。表l仙茅苷對(duì)大鼠心肌缺血損傷的影響(『10)<table>complextableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>試驗(yàn)例2:仙茅提取物對(duì)大鼠局部腦缺血損傷的影響(1)材料仙茅提取物，按制備例l方法制備。紅四氮唑美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品，臨用前用生理鹽水配成4%溶液。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物普通級(jí)SD大鼠，雄性，體重280g—350g，雌雄各半，山東綠葉制藥股份有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SYXK(魯)20030020。(2)方法與結(jié)果動(dòng)物隨機(jī)分為模型對(duì)照組(生理鹽水)、尼莫地平組(1.0mg/kg)、仙茅苷靜脈注射小劑量組(2.5mg^g)、仙茅苷靜脈注射中劑量組(7.5mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組l(20mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組2(50mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組3(150mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組4(300mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組l(20mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組2(50mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組3(200mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組4(400mg/kg)。每組10只。每組10只。禁食12小時(shí)后，水合氯醛(350mg/kg，i.p.)麻醉，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，夾閉頸內(nèi)、頸總動(dòng)脈，頸外動(dòng)脈近心端及遠(yuǎn)心端結(jié)扎，中間剪斷。將頸外動(dòng)脈游離端拉至與頸內(nèi)動(dòng)脈成一條直線，將栓線(選用直徑0.24111111尼龍線，長(zhǎng)度5.0cm)由頸外動(dòng)脈插入至顱內(nèi)，遇輕微阻力時(shí)停止，插入深度約為2cm。結(jié)扎頸外動(dòng)脈開(kāi)口，并打開(kāi)頸總動(dòng)脈動(dòng)脈夾，消毒縫合傷口，造成右側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血模型；假手術(shù)組僅進(jìn)行右側(cè)頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈的分離(以上實(shí)驗(yàn)均在23'C25t:進(jìn)行)。灌胃給藥組連續(xù)給藥3天，于第2天給藥后禁食16小時(shí)后，第3天給藥30分鐘后手術(shù)，其余各組術(shù)后靜脈注射相應(yīng)藥物。24小時(shí)后按文獻(xiàn)劉小光，徐理納，一種能評(píng)價(jià)溶栓和抗溶栓的大鼠腦中動(dòng)脈模型，藥學(xué)學(xué)報(bào)，1995，30:662所述方法及標(biāo)準(zhǔn)觀察并記錄大鼠的行為障礙(A)提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對(duì)稱伸向地面，計(jì)為0分，如手術(shù)對(duì)側(cè)前肢出現(xiàn)腕屈曲計(jì)為1分，肘屈曲計(jì)為2分，肩內(nèi)旋計(jì)為3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩內(nèi)旋者，計(jì)為4分。(B)將動(dòng)物置于平地面上，分別推雙肩向?qū)?cè)移動(dòng)，檢査阻力。如雙側(cè)阻力對(duì)等且有力，計(jì)為O分，如向手術(shù)對(duì)側(cè)推動(dòng)時(shí)阻力下降者，根據(jù)下降程度不同分為輕、中、重三度，分別計(jì)為1,2禾n3分。(C)將動(dòng)物雙前肢置一金屬網(wǎng)上，觀察雙前肢的肌張力。雙前肢肌張力對(duì)等且有力者計(jì)為O分。同樣根據(jù)手術(shù)對(duì)側(cè)肌張力下降程度不同計(jì)為1，2和3分。(D)動(dòng)物有不停地向一側(cè)轉(zhuǎn)圈者，計(jì)為1分。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分，滿分為11分，分?jǐn)?shù)越高，表示動(dòng)物行為障礙越嚴(yán)重。行為評(píng)分后處死大鼠，取腦，去掉嗅球、小腦和低位腦干，冠狀切成5片，腦片用紅四氮唑(TTC)染色，正常組織經(jīng)染色后呈紅色，梗塞組織呈白色，染色后照相，用中國(guó)航空航天大學(xué)病理圖像分析軟件求梗塞面積比。數(shù)據(jù)用I土s表示，以組間/檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果如表2所示，缺血24小時(shí)后，模型組大鼠表現(xiàn)出明顯的行為障礙，大鼠腦組織也出現(xiàn)明顯的灶狀缺血區(qū)，達(dá)到全腦24%左右。仙茅苷靜脈注射中劑量組(7.5mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組l(20mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組2(50mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組3(150mg/kg)、仙茅苷靜脈注射高劑量組4(300mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組l(20mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組2(50mg^g)、仙茅苷灌胃劑量組3(200mg/kg)、仙茅苷灌胃劑量組4(400mg/kg)顯著改善大鼠行為障礙、減少缺血面積(與模型組比較，p〈0.05或p〈0.01)，仙茅苷靜脈注射高劑量組3(150mg/kg)與仙茅苷靜脈注射高劑量組4(300mg/kg)比較，對(duì)改善大鼠行為障礙、減少缺血面積無(wú)明顯差異(p〉0.05);仙茅苷灌胃組3(200mg/kg)與仙茅苷灌胃組4(400mg/kg)比較，對(duì)改善大鼠行為障礙、減少缺血面積無(wú)明顯差異(p>0.05)。表2仙茅苷對(duì)大鼠腦缺血損傷的影響(11=10)<table>complextableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>權(quán)利要求1、一種仙茅提取物，其特征為100％＞仙茅苷≥90％。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其中100﹪＞仙茅苷≥97﹪。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取物，其制備方法為(l)仙茅藥材水提醇沉后，濾液濃縮至無(wú)乙醇；(2)濾液依次上樣非極性中極性的大孔樹(shù)脂和聚酰胺樹(shù)脂柱，洗脫，洗脫液濃縮至無(wú)乙醇；(3)洗脫液用乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮至干；(4)萃取干燥品溶解于無(wú)水乙醇中，濃縮，冷卻，靜置，析出針狀白色晶體仙茅苷，過(guò)濾，低溫減壓干燥，重結(jié)晶即得。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的提取物，其制備方法為(1)仙茅藥材粉碎，加612倍水，浸泡2小時(shí)，煎煮34次，每次煎煮12小時(shí)，過(guò)濾，合并提取過(guò)濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.051.2，加入乙醇，攪拌，至乙醇濃度為60﹪90％，靜置112小時(shí)，過(guò)濾乙醇溶液，少量乙醇洗滌濾渣，棄掉濾渣，濾液濃縮至無(wú)乙醇，備用；(2)選用樹(shù)脂為非極性中極性的大孔樹(shù)脂的一種或和聚酰胺樹(shù)脂的組合，上樣，水洗脫36倍柱體積，10﹪70﹪的乙醇溶液洗脫，分段接收，洗脫體積為315倍柱體積，富含仙茅苷者濃縮至無(wú)乙醇，備用；(3)樹(shù)脂分離濃縮液加乙酸乙酯萃取，1:1(V/V)萃取35次，合并萃取液，濃縮至干；(4)萃取干燥品溶解于無(wú)水乙醇中，濃縮，冷卻，靜置，析出針狀白色晶體仙茅苷，過(guò)濾，低溫減壓干燥，重結(jié)晶，即得。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的提取物，其制備方法為(l)仙茅藥材粉碎，加10倍水，浸泡2小時(shí)，加熱煎煮3次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，合并提取過(guò)濾液，減壓濃縮，至相對(duì)密度1.15(40℃測(cè)定)，加入95﹪乙醇，攪拌，至醇濃度為60﹪，靜置6小時(shí)，過(guò)濾乙醇溶液，少量乙醇洗滌濾渣，棄掉濾渣，濾液濃縮至無(wú)乙醇；(2)濃縮液上樣到HZ—818大孔樹(shù)脂柱，吸附，分別用水和20﹪乙醇各洗脫3倍柱體積，棄掉洗脫液，用40﹪乙醇洗脫3倍柱體積，接收洗脫液，濃縮至無(wú)乙醇；此濃縮液上樣到聚酰胺樹(shù)脂柱，吸附，水洗4倍柱體積，棄掉洗脫液，10﹪乙醇洗3倍柱體積，接收洗脫液，濃縮至無(wú)乙醇；(3)此濃縮液用乙酸乙酯按1:1(V/V)萃取5次，合并萃取液，濃縮至干；(4)萃取干燥品溶解于無(wú)水乙醇中，濃縮，冷卻，靜置，析出針狀白色晶體仙茅苷，過(guò)濾，低溫減壓干燥，重結(jié)晶，即得。6、含有權(quán)利要求1或2所述的提取物的藥物組合物。7、權(quán)利要求6所述的藥物組合物在制備治療或預(yù)防心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。8、權(quán)利要求7所述的藥物組合物在制備治療或預(yù)防冠心病、心絞痛的藥物中的應(yīng)用。9、權(quán)利要求7所述的藥物組合物在制備治療或預(yù)防缺血性腦中風(fēng)、腦缺血/再灌注損傷的藥物中的應(yīng)用。10、權(quán)利要求7所述的藥物組合物在制備治療或預(yù)防腦外傷的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明提供了一種仙茅提取物、制備方法及其應(yīng)用，具體提供了一種仙茅提取物，其中100％＞仙茅苷≥90％，以及該提取物的制備方法和以該提取物為活性成分的藥物組合物，及其該藥物組合物在制備治療或預(yù)防心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用。文檔編號(hào)A61P9/10GK101342274SQ20071001538公開(kāi)日2009年1月14日申請(qǐng)日期2007年7月13日優(yōu)先權(quán)日2007年7月13日發(fā)明者建侯,廣劉,王春明,耿桂華,蔣王林,馬成俊申請(qǐng)人:山東綠葉天然藥物研究開(kāi)發(fā)有限公司