專利名稱：：用于制備預(yù)防和治療抑郁癥藥物的丹參素及其鈉鹽的制作方法用于制備預(yù)防和治療抑郁癥藥物的丹參素及其鈉鹽
背景技術(shù)：
：丹參素(danshensu)，化學(xué)名D-(+)P-(3，4-二羥苯基)乳酸，D-(+)卩-(3，4-dihydoxyphenyl)lacticacid，是從傳統(tǒng)中藥丹參(SalviamiltiorrhizaBge)中提取的活性成分。由于丹參素是一種不穩(wěn)定的游離酸，故常用其鈉鹽丹參素鈉(Sodiundanshensu，sodiump-3，4~dihydroxyphenyllactate)。丹參素及其鈉鹽的結(jié)構(gòu)式如圖1。丹參素苯環(huán)上的羥基是功能基，可清除自由基，抑制氧化反應(yīng)和自由基反應(yīng)。抑郁癥(depression)的特征性癥狀是悲觀心境，自身感覺很壞；睡眠障礙，失眠或早醒；食欲很差，動力不足；缺乏活力，興趣和愉快感消失；自責(zé)自罪，消極想死；體重下降；性欲降低。抑郁癥常有便秘和各種疼痛申訴，焦慮、恐怖、疑惑或強(qiáng)迫癥狀很普遍，抑郁性的先占觀念尤為常見。抑郁癥可分為原發(fā)性抑郁癥(雙相或單相抑郁癥)和繼發(fā)性抑郁癥(繼發(fā)于其他精神疾病或軀體疾病)。目前三類經(jīng)典抗抑郁劑，包括三環(huán)抗抑郁劑地昔帕明、5-羥色胺重?cái)z取抑制劑氟西汀(Prozac)和單胺氧化酶A抑制劑馬氯貝胺，對皮質(zhì)酮損傷的大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞具有顯著的保護(hù)作用，而抗精神病藥氯丙嗪和抗焦慮藥地西泮則無此作用。地昔帕明或氟西汀顯著減弱皮質(zhì)酮處理PC12細(xì)胞誘導(dǎo)的胞內(nèi)(^2+超載，顯著提高神經(jīng)生長因子(NGF)信息RNA的表達(dá)水平。因此，盡管各類抗抑郁劑結(jié)構(gòu)迥異，但細(xì)胞保護(hù)作用可能是其作用共同通路，而減弱胞內(nèi)Ca^超載和提高NGF等神經(jīng)營養(yǎng)因子的表達(dá)則可能是抗抑郁藥的細(xì)胞保護(hù)作用機(jī)制之一。抑郁癥正成為全球第五大疾病，預(yù)計(jì)到2020年，將躍升為第二大疾病，并將成為致命疾病。世界衛(wèi)生組織已將抑郁癥、癌癥及艾滋病并列為21世紀(jì)的三大疾病及衛(wèi)生教育預(yù)防重點(diǎn)工作。鎮(zhèn)靜劑或安眠藥，副作用大，容易造成藥物依賴，治療效果也不好，不適用于抑郁癥。目前流行的抗抑郁癥藥物，包括有名的氟西汀、西普蘭(Cdexa)和怡諾思(Effexor)，都在服用幾周后才開始見效，而且有降低性功能等副作用。此外，這些藥對大約三分之一的病人還無效。血清素調(diào)節(jié)劑屬新一代抗抑郁藥，效果較好且副作用小，但國內(nèi)尚未生產(chǎn)。從祖國醫(yī)藥中獨(dú)辟蹊徑，或許能找到防治抑郁癥的新藥。發(fā)明概要本發(fā)明涉及丹參素及其鈉鹽作為用于制備預(yù)防和治療抑郁癥的藥物組合物，該藥物組合物包括丹參素及其鈉鹽和可藥用的載體。本發(fā)明涉及如權(quán)利1要求所定義的藥物組合物的制備方法，該方法是指丹參素及其鈉鹽與可藥用的載體混合或溶解。丹參素及其鈉鹽可與任何可藥用的載體混合或溶解，如經(jīng)皮膚、粘膜、胃腸內(nèi)和胃腸外給藥的可藥用載體。該藥物以常規(guī)藥用制劑的形式使用，如固體形式的片劑、顆粒劑、粉劑、膠囊劑及扁囊劑等，或結(jié)晶性粉末狀針劑和液體形式的針劑、懸浮劑、糖漿劑及乳劑等。該藥物中使用可藥用的賦形劑和添加劑，這些可藥用的賦形劑和添加劑包括無毒的可相容的填料、粘合劑、崩解劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、潤滑劑、矯味劑、增稠劑、著色劑、乳化劑、穩(wěn)定劑等，如乳糖、檸檬酸、硬脂酸、硬脂酸鎂石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、瓊脂、果膠、花生油、可可脂、乙二醇、葡萄糖、鹽酸普魯卡因、鹽酸利多卡因及抗壞血酸等。該藥物可按各種制劑的常規(guī)工藝制備。本發(fā)明涉及丹參素及其鈉鹽作為預(yù)防抑郁癥的藥物，可作為食品添加劑加入到食品中。本發(fā)明涉及丹參素及其鈉鹽作為治療抑郁癥的藥物。所制成的各種口服藥物中丹參素鈉的劑量為每日每kg體重大約0.1—100mg，優(yōu)選約0.05—50mg，更優(yōu)約0.1—20mg，最佳約1—5mg。每日分2—4次服用，10—30天為一療程，一般用藥3—IO個療程，每個療程間隔5—30天。所制成的注射用藥物，可供肌肉、靜脈注射及靜脈點(diǎn)滴，其中丹參素鈉的劑量為每日每kg體重0.01—50mg，優(yōu)選約0.05—25mg/kg，更優(yōu)約O.l—10mg，最佳約0.5—5mg。每日分l一3次使用，10—30天為一療程，一般用藥3—30個療程，每個療程間隔5_30天。然而，精確的劑量及持續(xù)時間應(yīng)由醫(yī)生確定，取決于病人的年齡、體重、病情及反應(yīng)等。下面列舉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及其結(jié)果，作為丹參素及其鈉鹽可用于制備預(yù)防和治療抑郁癥藥物的證據(jù)。材料動物NIH小鼠，8周齡，SPF級；SD大鼠，200-230g，SPF級。丹參素鈉，純度>98%;谷氨酸單鈉，購自Sigma公司。一、大鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)方法:大鼠隨機(jī)分組，每纟i'10只，雌雄各半，分別為對照、陽性對照和丹參素鈉組。實(shí)驗(yàn)前一天每只大鼠游泳訓(xùn)練15min。實(shí)驗(yàn)前陽性對照組鹽酸氟西汀(20mg/kg)灌胃兩次(實(shí)驗(yàn)前17、7h)，丹參素鈉組腹腔注射丹參素鈉(5、10、20mg/kg)2次(實(shí)驗(yàn)前17h、7min)，對照組同步給生理鹽水。末次給藥7min后，置大鼠于水溫25°C、水深23cm的塑料桶(高40cm，直徑30cm)中，觀察并同時測定5min內(nèi)給藥組和對照組大鼠累計(jì)不動時間(即四肢完全不動或僅有足部輕拍劃水動作)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理采用Student'st檢驗(yàn)，結(jié)果用(3fis)表示。結(jié)果大鼠強(qiáng)迫游泳模型中出現(xiàn)的不動狀態(tài)反映動物的絕望行為。丹參素鈉(10、20mg/kgx2)非常顯著縮短大鼠游泳不動時間(表l)(p〈0.01)，且作用稍優(yōu)于鹽酸氟西汀(表l)。表l丹參素鈉對大鼠強(qiáng)迫游泳模型不動時間的影響(3f士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>與對照組相比，*p<0.05;**p<0.01。二、小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)方法小鼠隨機(jī)分組，每組10只，雌雄各半，分別為對照組、陽性對照組和丹參素鈉組。實(shí)驗(yàn)前一天每只小鼠游泳訓(xùn)練15min。實(shí)驗(yàn)前陽性組鹽酸氟西汀(20mg/kg)灌胃兩次(實(shí)驗(yàn)前17、7h)，丹參素鈉組腹腔注射丹參素鈉(IO、20、40mg/kg)2次(實(shí)驗(yàn)前17h、7min)，對照與實(shí)驗(yàn)組同步給生理鹽水。小鼠末次給藥7min后，置于水溫25°C、水深10cm的量筒(高20cm，直徑14cm)中，量筒之間放一不透明隔板，.以防小鼠彼此看到。觀察6min，同時測定給藥組和對照組小鼠在后4min內(nèi)的累計(jì)不動時間。判斷不動的標(biāo)準(zhǔn)停止掙扎，垂直體位，不動漂浮，僅做一些必要的活動使其頭露出水面。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理采用Student'st檢驗(yàn)，結(jié)果用(3f士s)表示。結(jié)果:小鼠在強(qiáng)迫游泳模型中出現(xiàn)的不動狀態(tài)反映動物的絕望行為。丹參素鈉組顯著縮短小鼠游泳不動時間(表2)。表2丹參素鈉對小鼠強(qiáng)迫游泳模型不動時間的影響(±s)組別_動物數(shù)(只)劑量(mg'kg—4不動時間(s)對照組io——151.2±19.2鹽酸氟西汀1020x2121.4±34.4*丹參素鈉1010x2134.8±33.6丹參素鈉1020x2118.2±28.5*丹參素鈉1040x2112.7±17.1*與對照組相比，*p<0.05。三、小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)方法分組及給藥方法同游泳實(shí)驗(yàn)，小鼠末次給藥7min后，將其尾端2cm的部位貼在一根水平木棍上，使動物成倒掛狀態(tài)，頭部離臺面約5cm。用板隔開相臨動物的視線，觀察6min，同時測定給藥組和對照組小鼠在后4min內(nèi)的累計(jì)不動時間。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理采用Student'st檢驗(yàn)，結(jié)果用(3F士s)表示。結(jié)果:在懸尾模型中小鼠出現(xiàn)的不動狀態(tài)反映動物的絕望行為。丹參素鈉三個劑量組均能減少小鼠懸尾不動時間，20、40mg/kg組作用非常顯著。表3丹參素鈉對小鼠懸尾不動時間的影響(3f±s)組別動物數(shù)(只)劑量(rng'kg—1)不動時間(s)對照組10—170.2±20.4鹽酸氟西汀1020x2113.6±31.6**丹參素鈉1010x2137.4±28.2*丹參素鈉1020x2118.9±21.7**丹參素鈉1040x2106.3±24.5**與對照組相比*<0.05,**p<0.01。四、利血平致體溫下降實(shí)驗(yàn)方法:小鼠隨機(jī)分組，每組10只，分別為模型、陽性對照和丹參素鈉組。實(shí)驗(yàn)前先測定每只小鼠肛溫，共測3次，求其平均值作為基礎(chǔ)體溫。陽性對照組鹽酸氟西汀(40mg/kg)灌胃2次(給利血平前17、7h)，丹參素鈉組腹腔注射丹參素鈉(IO、20、40mg/kg)2次(給利血平前后30min)。各組小鼠在腹腔注射利血平(5mg/kg)2h后，測量小鼠肛溫。結(jié)果:與基礎(chǔ)體溫比較，利血平可顯著降低小鼠體溫(p〈0.01)，鹽酸氟西汀可逆轉(zhuǎn)利血平所致小鼠體溫下降OxO.Ol)，而丹參素鈉對利血平所致動物體溫下降無明顯作用，即丹參素鈉不能逆轉(zhuǎn)利血平所致小鼠體溫下降。五、增強(qiáng)5-羥色胺作用實(shí)驗(yàn)按常規(guī)方法實(shí)驗(yàn)，分組及給藥方法同前。結(jié)果表明，丹參素鈉不抑制5-羥色胺的重?cái)z取。六、增強(qiáng)去甲腎上腺素毒性實(shí)驗(yàn)按常規(guī)方法實(shí)驗(yàn)，分組及給藥方法同前。結(jié)果表明，丹參素鈉不增強(qiáng)去甲腎上腺素的毒性。七、丹參素鈉對小鼠自主活動的影響方法雄性NIH小鼠，隨機(jī)分成4組，每組10只。對照組給予生理鹽水，實(shí)驗(yàn)組給予谷氨酸單鈉(2.0g/kg/d，灌胃)或鄰丹參素鈉(20mg/kg/d，腹腔注射)，每天一次，連續(xù)5天。末次給藥后30min，將小鼠置于自主活動儀中，適應(yīng)3min后記錄小鼠5min內(nèi)活動次數(shù)。結(jié)果丹參素鈉對正常小鼠自主活動次數(shù)無明顯影響，但逆轉(zhuǎn)谷氨酸單鈉誘導(dǎo)的小鼠自主活動次數(shù)增加(表4)。_表4丹參素鈉對小鼠自主活動的影響_組別動物數(shù)(只)劑量(mg'kg—1)活動次數(shù)(次)對照組丹參素鈉谷氨酸單鈉谷氨酸單鈉+丹參素鈉1010101020x52000x52000x5+20x132.8±7.4128.6±9.4167.2±10.0*112.4±6.2與對照組相比，*p<0.05。八、丹參素鈉對閼劑量戊巴比妥鈉誘導(dǎo)下小鼠睡眠的影響方法:NIH小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，雌雄各半。對照組給予生理鹽水，給藥組分別腹腔注射丹參素鈉IO、20、40mg/kg/d，每天一次，連續(xù)10天。末次給藥后30min小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉(40mg/kg/d)，以小鼠翻正反射消失為入睡時間，從翻正反射消失至恢復(fù)時間為睡眠持續(xù)時間。記錄小鼠的入睡時間和睡眠持續(xù)時間。結(jié)果丹參素鈉對戊巴比妥鈉誘導(dǎo)下小鼠入睡時間無明顯影響，但延長小鼠睡眠的持續(xù)時間。丹參素鈉(20、40mg/kg/dxl0)組顯著延長小鼠睡眠持續(xù)時間(P〈0.05)(表5)。表5丹參素鈉對戊巴比妥鈉誘導(dǎo)下小鼠睡眠的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與對照組相比，*P<0.05。九、丹參素鈉對糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用方法1、大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤株P(guān)C12細(xì)胞的培養(yǎng)PC12細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)液為含7.5%小牛血清、7.5%胎牛血清、lxl()Su/L青霉素、100mg/L鏈霉素、pH7.4的DMEM培養(yǎng)基，置于37°C、5%C02、濕度98X的C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，34天傳代一次。2、地塞米松對PC12細(xì)胞生長的抑制作用細(xì)胞長滿瓶底后，用吸管輕輕吹打數(shù)次，使細(xì)胞完全分散。調(diào)節(jié)細(xì)胞密度為2xl()S細(xì)胞/mL,接種于0.01%多聚賴氨酸包被過的96孔板，每孔100nL。待細(xì)胞長滿至70%80%，吸去培養(yǎng)液，D-hanks洗1次。對照組加無血清DMEM培養(yǎng)液100nL，損傷組加含不同濃度地塞米松(10、1、0.1、l(T2、l(T3、1(rVmol/L)的無血清DMEM培養(yǎng)液10(HiL，每組各設(shè)6復(fù)孔。繼續(xù)培養(yǎng)24、48、72h，吸去培養(yǎng)液，用D-hanks洗2遍。每孔加入20nL5g/mL的MTT液，培養(yǎng)4h。每孔加入100pL三聯(lián)液，待藍(lán)色顆粒完全溶解(1216h)，用酶聯(lián)免疫檢測儀在波長570nm處讀取吸光度(OD)值，采用Bliss方法計(jì)算半數(shù)致死濃度LD50。細(xì)胞存活率=實(shí)驗(yàn)組OD值/對照組OD值xlOOX3、丹參素鈉對地塞米松誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的影響將PC12細(xì)胞懸液接種在0.01%多聚賴氨酸包被過的96孔板內(nèi)，每孔10(HiL。待細(xì)胞長滿至70%80%后，吸去培養(yǎng)液，D-hanks洗1次。對照組加無血清DMEM培養(yǎng)液10(HiL，損傷組加含地塞米松lOpmol/L的無血清DMEM培養(yǎng)液100piL，保護(hù)組(丹參素鈉+地塞米松)加含不同劑量的丹參素鈉(25、50、100、200、400、800|amol/L)無血清DMEM培養(yǎng)液50pL預(yù)處理lh，再加含20pmol/L的地塞米松無血清DMEM培養(yǎng)液50pL，繼續(xù)培養(yǎng)24h。吸去細(xì)胞培養(yǎng)液，用D-hanks洗2遍，每孔加入20iiL5g/mL的MTT液，培養(yǎng)4h。每孔加入100pL三聯(lián)液，待藍(lán)色顆粒完全溶解(1216h)，用酶聯(lián)免疫檢測儀在波長570nm處讀取吸光度(OD)值，每組各設(shè)8復(fù)孔。4、丹參素鈉對地塞米松誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞乳酸脫氫酶漏出率的影響將PC12細(xì)胞接種在0.01%多聚賴氨酸包被過的96孔板內(nèi)，每孔10(HiL。待細(xì)胞長滿至70%80%,吸去原培養(yǎng)液，D-hanks洗1次。對照組加無血清DMEM培養(yǎng)液lOOpL，損傷組加含地塞米松lOpmol/L的無血清DMEM培養(yǎng)液10(HiL,保護(hù)組(丹參素鈉+地塞米松)加含不同劑量的丹參素鈉'(25、50、100、200、400、800nmol/L)無血清DMEM培養(yǎng)液50pL預(yù)處理lh,再加含20pmo1/L的地塞米松無血清DMEM培養(yǎng)液5(HiL，繼續(xù)培養(yǎng)24h。吸取細(xì)胞培養(yǎng)液，按照乳酸脫氫酶試劑盒說明測定PC12細(xì)胞培養(yǎng)上清夜中乳酸脫氫酶活力，每組設(shè)5復(fù)孔。加入各試劑的次序及量按試劑盒說明進(jìn)行。乳酸脫氫酶活力(U/L)=(測定管OD值一測定對照管OD值)/(標(biāo)準(zhǔn)管OD值一標(biāo)準(zhǔn)對照管OD值)x標(biāo)準(zhǔn)管濃度(2nmol/ml)xl000mlx樣品稀釋倍數(shù)結(jié)果1、地塞米松對PC12細(xì)胞生長的影響結(jié)果顯示，在10'tl(^mol/L劑量范圍內(nèi)地塞米松抑制PC12細(xì)胞的生長，并與劑量成正相關(guān)。當(dāng)?shù)厝姿蓾舛葹?(Himol/L時對PC12細(xì)胞生長的抑制最明顯，作用24h存活率為59.6X。2448h時段，PC12細(xì)胞的存活率下降比較慢。4872h時段存活率大大下降，已經(jīng)不屬于延遲性損害過程。Bliss方法計(jì)算得24h時地塞米松的ICso約為916.3pmol/L。選擇1Opmol/L地塞米松做以下實(shí)驗(yàn)。2、丹參素鈉對地塞米松誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用丹參素鈉對PC12細(xì)胞生長無明顯影響，但可對抗地塞米松對PC12細(xì)胞生長的抑制作用，并與劑量成正相關(guān)。當(dāng)?shù)⑺剽c濃度為40(Himol/L時，PC12細(xì)胞的存活率為98.6%，幾乎完全抵消了地塞米松對PC12細(xì)胞生長的抑制作用。3、丹參素鈉對地塞米松誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞乳酸脫氫酶漏出的保護(hù)作用結(jié)果顯示，地塞米松損傷組乳酸脫氫酶的漏出率急劇升高，高達(dá)對照組的2倍；丹參素鈉可減少地塞米松誘導(dǎo)PC12細(xì)胞釋放乳酸脫氫酶，其效果與劑量成正相關(guān)。當(dāng)?shù)⑺剽c濃度為40(Himol/L時，其效果最明顯，抑制率達(dá)到60.4%(P<0.01)。十、丹參素鈉對谷氨酸鹽誘導(dǎo)的成年小鼠腦損傷的保護(hù)作用方法8周齡小鼠，雌雄兼有，隨機(jī)分組。除對照組外，小鼠接受谷氨酸單鈉(1.0、2.0、4.0g/kg/d，灌胃)和/或丹參素鈉(10、20、40mg/kg/d,腹腔注射)，連續(xù)10天。然后進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)和病理組織學(xué)檢查。1、Y-迷宮分辨學(xué)習(xí)記憶能力實(shí)驗(yàn)成年小鼠在谷氨酸單鈉和/或丹參素鈉處理后的第1天開始Y-迷宮分辨學(xué)習(xí)記憶實(shí)驗(yàn)，連續(xù)6天，第30天再重復(fù)一次。2、開野實(shí)驗(yàn)開野實(shí)驗(yàn)是用來檢測動物對新環(huán)境的反應(yīng)。在谷氨酸單鈉和/或丹參素鈉處理后的第7天開始實(shí)驗(yàn)，記錄小鼠3min內(nèi)的活動次數(shù)，每5天測一次，直到第27天結(jié)束。3、組織病理學(xué)檢查接受谷氨酸單鈉和/或丹參素鈉處理后第四天，小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉(60mg/kg)麻醉，用10%福爾馬林溶液作心臟灌流犧牲動物，取腦，置10%福爾馬林溶液中固定一周。通過海馬區(qū)進(jìn)行10pm厚度切片，常規(guī)HE染色。光鏡下檢查腦海馬區(qū)組織病理學(xué)變化。4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析Y迷宮和開野實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量資料分析法分析。結(jié)果1、丹參素鈉對谷氨酸單鈉誘導(dǎo)的小鼠Y-迷宮分辨學(xué)習(xí)記憶能力損傷的影響結(jié)果顯示，成年小鼠給予谷氨酸單鈉(l.O、2.0、4.0g/kg/dxl0，灌胃)對Y-迷宮分辨學(xué)習(xí)記憶能力有明顯的損傷。在谷氨酸單鈉處理后第1-6日及第85日，谷氨酸單鈉組小鼠的Y-迷宮分辨學(xué)習(xí)記憶能力明顯低于對照組(PO.OOl)。然而，丹參素鈉(20mg/kg/dxl0，腹腔注射)或谷氨酸單鈉(2.0g/kg/dx10，灌胃)+丹參素鈉(20mg/kg/dxl0，腹腔注射)組小鼠的Y-迷宮分辨學(xué)習(xí)記憶能力與對照組無明顯差別(PX).05)。丹參素鈉除能逆轉(zhuǎn)谷氨酸單鈉對小鼠Y-迷宮分辨學(xué)習(xí)記憶能力的損傷外，本身對成年小鼠的Y-迷宮分辨學(xué)習(xí)記憶能力并無明顯影響。2、丹參素鈉對谷氨酸單鈉引起的自主活動增加的保護(hù)作用成年小鼠給予谷氨酸單鈉(2.0、4.0g/kg/dxl0，灌胃)后，在一定程度上增加其自主活動，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.1〉PX).05)。丹參素鈉(20mg/kg/dxl0，腹腔注射)及谷氨酸單鈉(2.0g/kg/dxl0，灌胃)+丹參素鈉(20mg/kg/dxl0，腹腔注射)組與對照組相比則非常相近。結(jié)果顯示，丹參素鈉除能逆轉(zhuǎn)谷氨酸單鈉對自主活動的影響外，本身對成年小鼠的自主活動并無明顯影響。3、丹參素鈉對谷氨酸單鈉誘導(dǎo)的腦病理組織損傷的保護(hù)作用腦組織中對損傷最敏感的區(qū)域是海馬，海馬在學(xué)習(xí)記憶中起著重要的作用。結(jié)果顯示，成年小鼠給予谷氨酸單鈉(2.0g/kg/dxl0，灌胃)后，引起小鼠海馬神經(jīng)元變性和壞死(圖2B)。然而，丹參素鈉組和谷氨酸單鈉+丹參素鈉組小鼠海馬區(qū)未發(fā)現(xiàn)明顯的神經(jīng)元損傷(圖2C)。實(shí)施例實(shí)施例1:片劑NO組分1丹參素鈉2乳糖USP3玉米淀粉，食品級呈10%的純水槳狀物)4玉米淀粉，食品級5硬脂酸鎂NF合計(jì)用量(mg/粒)5010012212330409513037300400制造方法在適當(dāng)?shù)幕旌蠙C(jī)中混合第1、2組分15分鐘，第3組分與混合物?；Ｈ绻枰?，研磨潮濕的顆粒，并使之干燥。如果需要，通過一個初篩將干燥的顆粒過篩，并與第4組分混合10—15分鐘。加入第5組分混合l一3分鐘。在適當(dāng)?shù)膲浩瑱C(jī)中將混合物壓成適當(dāng)?shù)某叽绾椭亓?。?shí)施例2:膠囊劑<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>制造方法將第1、2、3組分在適當(dāng)?shù)幕旌蠙C(jī)中混合10—15分鐘，加入第4組分混合l一3分鐘。在適當(dāng)?shù)陌覚C(jī)上將該混合物裝入適當(dāng)?shù)哪z囊中。實(shí)施例3:注射液丹參素鈉100g或500g，葡萄糖400g或250g，加注射用水至10000ml。圖1、丹參酸(A)和丹參素鈉(B)的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖2、丹參素鈉對谷氨酸鹽誘導(dǎo)的成年小鼠腦損傷的保護(hù)作用除對照組外，小鼠接受谷氨酸單鈉(2.0g/kg/d，灌胃)和域丹參素鈉(40mg/kg/d，腹腔注射)，連續(xù)10天，其后檢查小鼠海馬區(qū)的病理組織學(xué)變化。A、對照，x200;B、谷氨酸單鈉(2.0g/kg/dxl0，灌胃)，x200,a.神經(jīng)元變性和壞死；C、谷氨酸單鈉(2.0g/kg/dxl0，灌胃)+丹參素鈉(40mg/kg/dxl0，腹腔注射)，x200。權(quán)利要求1.丹參素及其鈉鹽用于制備預(yù)防和治療抑郁癥的藥物。全文摘要丹參素，化學(xué)名D-(+)β-(3，4-二羥苯基)乳酸，是一種不穩(wěn)定的游離酸，常用其鈉鹽丹參素鈉。丹參素鈉能顯著縮短大小鼠游泳不動時間和小鼠懸尾不動時間，其作用優(yōu)于鹽酸氟西汀。丹參素鈉逆轉(zhuǎn)谷氨酸單鈉誘導(dǎo)的小鼠自主活動次數(shù)增加，延長小鼠睡眠的持續(xù)時間。丹參素鈉不對抗利血平引起的體溫降低、眼瞼下垂及運(yùn)動不能，不抑制5-羥色胺的重?cái)z取，不增強(qiáng)去甲腎上腺素的毒性。丹參素鈉對糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞損傷(包括乳酸脫氫酶漏出)，對谷氨酸鹽誘導(dǎo)的成年小鼠腦損傷均有強(qiáng)保護(hù)作用。丹參素鈉可能是通過保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞發(fā)揮抗抑郁作用的。文檔編號A61K31/192GK101310715SQ20071010932公開日2008年11月26日申請日期2007年5月23日優(yōu)先權(quán)日2007年5月23日發(fā)明者于廷曦申請人:于廷曦