專利名稱：：側(cè)金盞總黃酮口腔貼片及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種側(cè)金盞總黃酮制劑，具體地說是涉及一種側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，該貼片用于治療口腔潰瘍。本發(fā)明還涉及該側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的制備方法。
背景技術(shù)：
：側(cè)金盞為錦葵科植物黃蜀葵的干燥花，在民間有較多的應(yīng)用。我國古代有用側(cè)金盞治療口腔潰瘍的記載，《直指方》"小兒口瘡，燒末敷之"?，F(xiàn)代藥理研究結(jié)果表明，側(cè)金盞的乙醇提取物(含有總黃酮)具有明顯的抗炎，抗菌，鎮(zhèn)痛等藥理作用，該藥理作用證實(shí)了民間將其用于口瘡治療的可行性。我們經(jīng)化學(xué)成分及藥理預(yù)試驗(yàn)篩選發(fā)現(xiàn)，側(cè)金盞清利濕熱，消炎解毒，促進(jìn)潰瘍面愈合的作用的主要有效部位為總黃酮成分。據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道(黃蜀葵溶液及提取物—結(jié)晶m對(duì)口腔潰瘍止痛作用的臨床觀察和原理初步探討，安徽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1983，18(4):44;金絲桃苷對(duì)小鼠胃粘膜損傷的保護(hù)作用及機(jī)制，安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，34(3):178;)，側(cè)金盞黃酮成分對(duì)口腔黏膜具有消炎、鎮(zhèn)痛、促進(jìn)愈合的作用，治療口腔潰瘍具有顯著的療效?？谇毁N片是近年來發(fā)展起來的新劑型，并很快用于口腔疾病的治療，其劑型原理是利用藥用高分子材料與口腔粘膜發(fā)生生物粘附的特性，壓制成雙層貼片，藥物含在接觸粘膜表面的粘附層中，而惰性層朝向口腔，藥物單向釋放到潰瘍表面，使藥物定位于病灶部位,延長作用時(shí)間，可以克服藥物被唾液稀釋、生物利用度低的問題；同時(shí)有效成分由粘膜吸收，避免藥物的肝臟首過效應(yīng)，提高生物利用度；另外貼片直接粘附于潰瘍表面，還可以直接保護(hù)潰瘍面、有效促進(jìn)潰瘍愈合；且貼片易于給藥，移去制劑即可終止給藥,患者使用方便。中國發(fā)明專利申請00132507.8公開了一種抗口腔潰瘍藥物醋酸地塞米松口腔粘貼片及其制備方法。該粘貼片劑分為兩層，一側(cè)為含藥的粘附層；另一層為不溶于水的保護(hù)層，以減少藥物向口腔粘膜的對(duì)側(cè)的溶解和片劑在齒齦和口腔粘膜之間的雙向粘附，盡量使藥物向潰瘍面滲入和減少在口腔中的不適感。中國發(fā)明專利申請200510032791.7公開了一種有效治療口腔潰瘍及牙周腫痛的藥物及其制備方法，它是以99%1%(重量)的黃蜀葵花和1%99%(重量)的蜂膠為原料，通過下述步驟制備取黃蜀葵花，加入乙醇提取、合并提取液，回收乙醇，濃縮至無醇味，加沸水提取多次，過濾，濾液裝入大孔吸附樹脂柱中；用乙醇洗脫并收集洗脫液，回收乙醇，濃縮；再加入硅膠，拌勻，干燥，加入含水的有機(jī)溶劑浸泡并合并濾液，回收溶劑，干燥，得黃蜀葵花提取物粉；取蜂膠，粉碎成粗粉，加入乙醇提取并合并濾液，回收乙醇，濃縮，干燥，得蜂膠提取物粉；黃蜀葵花提取物粉、蜂膠提取物粉加適量的能形成凝膠的輔料，采用藥劑學(xué)的制備方法制成凝膠。本發(fā)明配方及制作方法獨(dú)特，治療效果顯著。由本發(fā)明人申請的中國發(fā)明專利申請200410035741.乂公開了一種治療口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)的藥物，利用黃蜀葵花總黃酮提取物作為藥物活性成分。該發(fā)明提供了黃蜀葵花總黃酮提取物的提取制備方法及黃蜀葵花總黃酮提取物不同制劑的制備方法。目前市場上尚未有以側(cè)金盞總黃酮提取物為原料，制備用于治療口腔潰瘍的制劑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，該貼片用于治療口腔潰瘍，具有藥物含量準(zhǔn)確可控、穩(wěn)定性好、對(duì)粘膜無剌激、對(duì)潰瘍面具有保護(hù)作用的優(yōu)點(diǎn)；同時(shí)該貼片為采用二次壓片或噴膜技術(shù)制備而成的雙層片，藥物能夠單向釋放到潰瘍表面，使藥物定位于病灶部位，延長作用時(shí)間，可以克服藥物被唾液稀釋、生物利用度低的問題；同時(shí)有效成分由粘膜吸收，避免藥物的肝臟首過效應(yīng)，提高生物利用度；另外貼片直接粘附于潰瘍表面，還可以直接保護(hù)潰瘍面、有效促進(jìn)潰瘍愈合；且貼片易于給藥，移去制劑即可終止給藥,患者使用方便。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的制備方法。本發(fā)明所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片由兩層組成，一層為含側(cè)金盞總黃酮提取物的黏附層，另一層為疏水的保護(hù)層。粘附層含有有效劑量的側(cè)金盞總黃酮提取物和藥學(xué)上可接受的輔料。其中，側(cè)金盞總黃酮提取物的有效劑量為1050mg/片。其他的藥用輔料包括生物黏附劑、填充劑、粘合劑、潤滑劑等。疏水保護(hù)層含有疏水材料和藥學(xué)上可接受的輔料。根據(jù)下面的藥理學(xué)篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果，含藥劑量優(yōu)選為2040mg/片。側(cè)金盞總黃酮提取物的有效劑量篩選藥理試驗(yàn)如下選用健康的新西蘭兔，建立醋酸誘發(fā)兔口腔黏膜潰瘍模型，并用游標(biāo)卡尺測量潰瘍面直徑計(jì)算潰瘍面積的大小。模型建立后，隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、大劑量組、中劑量組、小劑量組，每組5只。給藥前，各組潰瘍平均面積統(tǒng)計(jì)學(xué)無明顯差異(P>0.05)。陰性對(duì)照組每日用蒸餾水沖洗黏膜兩次；大劑量組，每日于潰瘍面涂敷受試提取物50mg，每日2次；中劑量組每日涂敷受試提取物20mg，每日2次；小劑量組每日涂敷受試提取物5mg。給藥期間每隔3天用游標(biāo)卡尺測量口腔潰瘍面一次，對(duì)潰瘍面積縮小50%所需時(shí)間的結(jié)果進(jìn)行比較，計(jì)算潰瘍面積縮小百分率。以縮小百分率為縱坐標(biāo)，給藥時(shí)間為橫坐標(biāo)做圖，求出各組潰瘍面積縮小50%所需時(shí)間。并對(duì)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組動(dòng)物取口腔黏膜進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。結(jié)果顯示，側(cè)金盞總黃酮提取物大劑量組、中劑量組(2050mg)各時(shí)間點(diǎn)平均潰瘍面積縮小與陰性對(duì)照組相比均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。卡波姆作為丙烯酸類高分子聚合物，具有良好的生物黏附性，且化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，安全、無刺激性及過敏反應(yīng)，因此將其作為含藥層的黏附劑，并輔以糊精和硬脂酸鎂制成側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，根據(jù)所得片劑的體外黏附力、口腔粘膜黏附時(shí)間、溶化時(shí)限、各時(shí)間點(diǎn)累積釋放度等指標(biāo)對(duì)卡波姆的種類和用量進(jìn)行了篩選。經(jīng)試驗(yàn)，卡波姆974P、卡波姆934P、卡波姆971P均可用，用量為1040mg/片，優(yōu)選為2030mg/片。三種型號(hào)的卡波姆在用量相同時(shí)，制成的片劑在體外黏附力、口腔粘膜黏附時(shí)間、溶化時(shí)限上差別不大，隨著用量的增加而有所增大；單用三種卡波姆的片劑累積釋放度在后段釋放較好，但均不能非常有效地控制藥物在前段時(shí)間的突釋。在上述處方的基礎(chǔ)上分別加入羥丙基纖維素(HPC-H、HPC-M)1040mg/片、海藻酸鈉525mg/片、羥丙甲纖維素(HPMC60RT5、60RT15、60RT25、60RT50、60RT4000、90SH-100000)1040mg/片、羧甲基纖維素鈉(CMC-NaFM6型、FH6型、FH6特高型)1040mg/片以調(diào)整片劑上述指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)所得的片劑的體外黏附力、口腔粘膜黏附時(shí)間、溶化時(shí)限、各時(shí)間點(diǎn)累積釋放度等指標(biāo)均有所改善，可以有效控制調(diào)節(jié)片劑在整個(gè)時(shí)段的釋放度。經(jīng)多次驗(yàn)證，以羥丙甲纖維素(HPMC60RT15、60RT25、60RT50)2030mg/片或羧甲基纖維素鈉(CMC-NaFM6型、FH6型、FH6特高型)1030mg/片與卡波姆1040mg/片配合效果最好制成的片劑在體外黏附力30~80g、口腔粘膜黏附時(shí)間26小時(shí)、溶化時(shí)限1~4小時(shí)，以在0.5、1、2小時(shí)或1、2、4小時(shí)時(shí)間測定，累積釋放度為10%~50%、35°/。~80%及80%以上。含藥的黏附層的制備方法為將側(cè)金盞總黃酮提取物粉末與賦形劑及潤滑劑硬脂酸鎂混勻后直接壓片；或者先將側(cè)金盞總黃酮提取物粉末與填充劑混勻，然后濕法或干法制成顆粒，再與硬脂酸鎂混勻后壓片。疏水保護(hù)層的疏水材料可選自乙基纖維素、丙烯酸樹脂類、醋酸纖維素酞酸酯、羥丙甲纖維素酞酸酯、醋酸羥丙甲纖維素琥珀酸酯、甲基丙烯酸-丙烯酸甲酯共聚物中的一種或多種，通過試驗(yàn)，優(yōu)選為乙基纖維素；同時(shí)考慮片劑使用中識(shí)別的需要，在疏水層中加入著色劑。疏水保護(hù)層的制備可采用噴膜法或壓制法。噴膜法中，將乙基纖維素和著色劑(10:1~8:1(g/g))溶于30。/。1000/。乙醇中(乙基纖維素在乙醇溶液中的濃度為0.5°/。~10%(g/ml))，噴于或涂于含藥黏附層任一面，并吹干成膜。在壓制法中，同時(shí)加入硬脂酸鎂作為潤滑劑；制備時(shí)，將乙基纖維素(2040mg/片)、著色劑(15mg/片)、硬脂酸鎂(0.2~3mg/片)混勻后，與含藥層物料同置雙層壓片機(jī)上，分別填料后直接壓制成雙層片。本發(fā)明者經(jīng)過對(duì)本項(xiàng)目的反復(fù)銳意研究，完成本發(fā)明。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的主藥和輔料的組方配比為每片I、含藥的粘附層側(cè)金盞總黃酮提取物25mg糊精20mg'卡波姆25mg羥丙甲纖維素30mg硬脂酸鎂2mgII、疏水的保護(hù)層乙基纖維素30mg硬脂酸鎂lmg色淀3mg根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，本發(fā)明所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的制備方法，包括下述步驟I、制備側(cè)金盞總黃酮提取物，用等量遞加的方法與糊精混勻；II、加入卡波姆、羥丙甲纖維素和硬脂酸鎂，混合均勻，制粒；III、將乙基纖維素、色淀、硬脂酸鎂混合均勻；IV、采用二次壓片或噴膜的方式進(jìn)行壓片，即得。藥效學(xué)試驗(yàn)表明，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片對(duì)以醋酸致傷、機(jī)械損傷和細(xì)菌感染三種方法建立的兔口腔粘膜潰瘍模型均有明顯的治療作用(P<0.05)。其中大劑量一天4次給藥對(duì)三種模型均可迅速產(chǎn)生藥效，說明藥效持續(xù)有利于潰瘍的修復(fù)。三種模型中機(jī)械損傷和細(xì)菌感染大、中劑量組均可產(chǎn)生與對(duì)照組有顯著差異的藥效作用；抗菌試驗(yàn)結(jié)果顯示，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片對(duì)實(shí)驗(yàn)中的革蘭氏陽性及革蘭氏陰性菌均具有較強(qiáng)的殺滅或抑制作用；側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物大劑量(500mg/kg)，中劑量(250mg/kg)，灌胃給藥可明顯提高熱板法小鼠疼痛閾值；在500mg/kg劑量下明顯減少冰醋酸(0.6%)誘發(fā)的小鼠扭體次數(shù)(P<0.05)，說明側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物有一定的鎮(zhèn)痛作用；側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物對(duì)二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹的抑制作用，250-500mg/kg劑量組和阿司匹林陽性對(duì)照組比較，有較好的抑制作用(P〈0.05)。刺激性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明側(cè)金盞總黃酮口腔貼片經(jīng)單次及多次給藥對(duì)兔口腔粘膜均無明顯刺激作用。急性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物灌胃給藥的LD50>穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明將按照本發(fā)明制備的產(chǎn)品在40°C±2°C、75%±5%恒溫恒濕箱中，進(jìn)行加速試驗(yàn)，分別于放置后O、1、2、3個(gè)月取樣，檢測其性狀、鑒別、重量差異、溶出度、含量測定及衛(wèi)生學(xué)檢查等；又將按照本發(fā)明制備的產(chǎn)品在室溫下進(jìn)行長期穩(wěn)定性試驗(yàn)。結(jié)果表明，本發(fā)明提供的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片穩(wěn)定性良好。本發(fā)明提供的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片在臨床上可用于治療口腔潰瘍。用藥方式為口腔局部給藥，貼于患處，每次12片，每日用藥次數(shù)為34次，療程為57天。本發(fā)明提供的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，具有以下積極的技術(shù)效果1、本發(fā)明提供了一種側(cè)金盞總黃酮新制劑，其對(duì)口腔潰瘍具有明顯的治療作用，具有很高的臨床應(yīng)用價(jià)值。2、本發(fā)明利用雙層貼片技術(shù)，含藥的粘附層直接接觸口腔粘膜表面，而疏水的保護(hù)層朝向口腔，使藥物單向釋放到潰瘍表面，定位于病灶部位，延長作用時(shí)間，可以克服藥物被唾液稀釋、生物利用度低的問題；同時(shí)有效成分由粘膜吸收，避免藥物的肝臟首過效應(yīng)，提高生物利用度；另外該貼片直接粘附于潰瘍表面，還可以直接保護(hù)潰瘍面、有效促進(jìn)潰瘍愈合。3、本發(fā)明制劑穩(wěn)定性好，對(duì)潰瘍面無刺激。4、本發(fā)明制備工藝簡單，使用方便。以下通過對(duì)本發(fā)明具體實(shí)施方式的介紹，詳細(xì)說明本發(fā)明。發(fā)明的具體實(shí)施例方式側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的制備實(shí)施例1處方(1)含藥的黏附層側(cè)金盞總黃酮提取物粉末40g卡波姆971P30g糊精30g硬脂酸鎂1.5g疏水的保護(hù)層乙基纖維素30g檸檬黃色淀3g硬脂酸鎂制成1000片制備方法(1)制備含藥層的顆粒將處方量的側(cè)金盞總黃酮提取物粉末、卡波姆、糊精混勻后，用95%的乙醇溶液做潤濕劑，制粒、烘干、整粒，然后再與處方量的硬脂酸鎂混勻，備用。(2)制備疏水保護(hù)層的顆粒將處方量的乙基纖維素、檸檬黃色淀混勻后，以無水乙醇作為潤濕劑，制粒、烘干、整粒，然后再與處方量的硬脂酸鎂混勻，備用o(3)壓片將上述兩種顆粒壓成雙層片。實(shí)施例2處方(1)含藥的黏附層側(cè)金盞總黃酮提取物粉末卡波姆934P羥丙甲纖維素(60RT25)淀粉20g10g20g50glg(2)疏水的保護(hù)層乙基纖維素5g檸檬黃色素0.5g制成1000片制備方法(1)制備含藥層的顆粒將惻金盞總黃酮提取物粉末、卡波姆、羥丙甲纖維素、淀粉混勻，千法制成顆粒后，與硬脂酸鎂混勻，備用。(2)壓片將上述顆粒壓成直徑8mm、片重約100mg的片劑。(3)噴膜將乙基纖維素、黃色素用95X乙醇溶液100ml溶解，噴膜。實(shí)施例3處方(1)含藥的黏附層側(cè)金盞總黃酮提取物粉末卡波姆974P羧甲基纖維素鈉(FH6特高型)微晶纖維素(2)疏水的保護(hù)層乙基纖維素30g25g10g35g0.5g25g檸檬黃色淀硬脂酸鎂2g2.5g制備方法:(1)制備含藥層的顆粒將側(cè)金盞總黃酮提取物粉末、卡波姆、羧甲基纖維素鈉、微晶纖維素混勻，用水做潤濕劑，流化床制粒，然后與硬脂酸鎂混勻。(2)將乙基纖維素、檸檬黃色淀、硬脂酸鎂混勻，備用。(3)將上述兩組物料壓成雙層片。實(shí)施例4處方(1)含藥的黏附層側(cè)金盞總黃酮提取物粉末50g卡波姆974P20g羥丙基纖維素(HPC-H)15g預(yù)膠化淀粉15g硬脂酸鎂3g(2)疏水的保護(hù)層乙基纖維素40g檸檬黃色淀5g硬脂酸鎂3g制備方法(1)將含藥的黏附層的全部物料混勻，備用。(2)制備疏水層顆粒將乙基纖維素、檸檬黃色淀混勻，用30%乙醇溶液做潤濕劑，制粒、烘干、整粒，再與硬脂酸鎂混勻，備用。(3)壓片將上述兩種物料混壓成雙層片。實(shí)施例5處方(1)含藥的粘附層側(cè)金盞總黃酮提取物粉末35g卡波姆974P30g海藻酸鈉20g乳糖15g硬脂酸鎂0.5g(2)疏水的保護(hù)層乙基纖維素6g檸檬黃色淀0.7g制備方法(1)制備含藥層顆粒將側(cè)金盞總黃酮提取物粉末、卡波姆、海藻酸鈉、乳糖混勻后，以50%乙醇溶液做潤濕劑，制粒、烘干、整粒。(2)壓片將含藥層顆粒壓成直徑8mm、片重約100mg的片劑。(3)涂膜將乙基纖維素、檸檬黃色淀溶解、分散于100ml無水乙醇溶液中，刷涂或涂抹于片劑的任一面，并熱風(fēng)吹干成膜。實(shí)施例6處方(1)含藥的粘附層側(cè)金盞總黃酮提取物粉末卡波姆974P羥丙甲纖維素(90SH100000)甘露醇(2)疏水的保護(hù)層丙烯酸樹脂25g20g25g30glg4g0.5g制備方法(1)制備含藥層顆粒將側(cè)金盞總黃酮提取物粉末、卡波姆、羥丙甲纖維素、甘露醇混勻，加入75%乙醇溶液做潤濕劑，制粒、烘干、整粒，再與硬脂酸鎂混勻。(2)壓片將含藥層顆粒壓成直徑8mm、片重約100mg的片劑。(3)噴膜將丙烯酸樹脂、檸檬黃色素溶解于40X乙醇溶液100ml中，對(duì)上述片劑的單面進(jìn)行噴膜。上述各實(shí)施例制得的片劑，其體外黏附力、口腔黏附時(shí)間、溶化時(shí)限、在0.5h、lh、2h、4h時(shí)的累積釋放度數(shù)據(jù)分別見表l:表l不同實(shí)施例所得片劑檢査結(jié)果實(shí)施例123456體外粘膜黏附力46,85g57.82g77.64g48.53g47.62g72.58g口腔黏附時(shí)間3h50'3h40'5h30'3h55'4hl5'3h40'溶化時(shí)間3hlO'lh55'3h55'2h40'2h50'2h3'各時(shí)間0.5h--31.536.5點(diǎn)的累lh45.760.427.541.442.661.8積釋放2h63.999.757.461.264.698.8度(％)4h101.5--94.799.4100.5--側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例7一、實(shí)驗(yàn)材料1.試驗(yàn)藥品受試物側(cè)金盞總黃酮口腔貼片。批號(hào)20030320。由山東省生物藥物研究院提供。陽性對(duì)照物三金牌桂林西瓜霜，批準(zhǔn)文號(hào)國藥準(zhǔn)字Z45021599,批號(hào)030817，規(guī)格2.5克/瓶，由桂林三金藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。2.試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄兼用；新西蘭純種健康白兔，雌雄兼用，雌者無孕，由山東魯抗醫(yī)藥集團(tuán)提供，合格證號(hào)SCXK魯20030006。3.實(shí)驗(yàn)儀器XZC-2B型自控溫度熱板儀。二、試驗(yàn)方法1.試驗(yàn)動(dòng)物的選擇試驗(yàn)前對(duì)購進(jìn)的28只、體重1.7—2.4kg的新西蘭兔進(jìn)行健康檢查(1)活潑健康、皮毛有光澤、足爪清潔無潰破；(2)肉眼觀察口腔黏膜紅潤無潰瘍、無異常分泌物等口腔疾病的動(dòng)物用于本試驗(yàn)。2.機(jī)械損傷性兔口腔黏膜潰瘍模型的建立將兔整體置固定器內(nèi)固定，只頭部外露，一人用左手固定兔頭，右手翻起兔左上唇，試驗(yàn)者持眼科鑷子輕輕鉗起黏膜，并用眼科剪將鉗起黏膜剪下致傷，24h后觀察潰瘍面形成情況。黏膜損傷后24h，可見潰瘍表面呈白色或淡黃色、圓形或橢圓形的潰瘍，潰瘍面周圍有充血、水腫，中央略凹陷，有少許淡黃色滲出物。用游標(biāo)卡尺測量潰瘍面直徑計(jì)算潰瘍面積的大小。3.試驗(yàn)步驟選擇潰瘍面直徑4.0-6.5mm之間的白兔25只，隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、陽性對(duì)照組、大劑量組、中劑量組、小劑量組，每組5只；給藥前，各組平均潰瘍面積統(tǒng)計(jì)學(xué)處理無明顯差異(P〉0.05)。陰性對(duì)照組每日用蒸餾水沖冼黏膜兩次；大劑量組間隔2h于潰瘍面涂敷受試藥l次，每日4次；中劑量組間隔4h涂敷受試藥l次，每日2次；小劑量組每日涂敷受試藥l次；每次涂敷藥20-30mg;陽性對(duì)照組間隔2h于潰瘍面噴敷西瓜霜1次，每次涂敷藥20-30mg，每日4次。從給藥2天后每天用游標(biāo)卡尺測量各兔口腔潰瘍直徑一次，詳細(xì)記錄數(shù)據(jù)。4.潰瘍面積縮小50%所需時(shí)間的計(jì)算方法潰瘍面積縮小百分率=(給藥前潰瘍面積一給藥后潰瘍面積)/給藥前潰瘍面積X100。/。。以縮小百分率為縱坐標(biāo)，給藥時(shí)間為橫坐標(biāo)做圖，求出各組潰瘍縮小50%所需時(shí)間。'三、試驗(yàn)結(jié)果1.結(jié)果分析表2結(jié)果顯示，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片大劑量組、中劑量組及陽性對(duì)照組潰瘍面積縮小與對(duì)照組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表2治療機(jī)械損傷性口腔潰瘍試驗(yàn)結(jié)果(n=5，單位mm2)藥前面積藥后2天面積藥后3天面積藥后4天面積藥后5天面積藥后6天面積組別_(x±sD)(x±sD)(x±sD)(x±sD)(x±sD)(x±sD)陰性對(duì)照20.74±5.9415.81±5.2610.41±3,725.06±2.561.30±0.790.07±0.04陽性對(duì)照19.29±5.479.56±2.393.60±1.11*1.16±0.74*0.10±0,07*全愈大劑量組20.70±5.6611.35±2.755.09±0.73*1.71±1.20*0.10±0.08*全愈中劑量組20.10±4.0811.02±1.405.32±0.64*1.79±0.49*0.13土0.08*0.11±0.07小劑量組21.54±9.5414.00±7.518.34±4.104.33±2.330.98±0.520.09±0.07*與陰性對(duì)照組比較P〈0.052.潰瘍縮小50%所需時(shí)間比較根據(jù)公式計(jì)算出不同給藥時(shí)間潰瘍面積縮小百分率，結(jié)果見表3。表3不同給藥時(shí)間潰瘍縮小百分率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>以縮小百分率為縱坐標(biāo)，給藥時(shí)間為橫坐標(biāo)做圖，求出各組潰瘍縮小50%所需時(shí)間。結(jié)果表明，由機(jī)械損傷誘發(fā)的兔口腔黏膜潰瘍面積縮小50%所需時(shí)間分別為陰性對(duì)照組為3.0天，陽性對(duì)照組為1.8天，大劑量組為2.1天，中劑量組為2.2天，小劑量組為2.6天。詳見說明書附圖，附圖l是各組潰瘍面積縮小50%所需時(shí)間比較圖。四、結(jié)論機(jī)械性損傷誘發(fā)的兔口腔潰瘍，用側(cè)金盞總黃酮口腔貼片進(jìn)行的試驗(yàn)性治療，結(jié)果顯示，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片大劑量(每日給藥4次)、中劑量(每日給藥2次)及陽性對(duì)照物于給藥的第3、4、5天有明顯的治療作用(P<0.05)，小劑量治療效果不明顯(P〉0.05)。至給藥第6天時(shí)各組口腔潰瘍均全愈或接近全愈。由機(jī)械損傷誘發(fā)的兔口腔黏膜潰瘍面積縮小50%所需時(shí)間經(jīng)計(jì)算分別為，陰性對(duì)照組為3.0天，陽性對(duì)照組為1.8天，大劑量組為2.1天，中劑量組為2.2天，小劑量組為2.6天。從潰瘍面積縮小程度和潰瘍面積縮小50%所需時(shí)間綜合評(píng)價(jià)，說明側(cè)金盞總黃酮口腔貼片大劑量組和中劑量組對(duì)機(jī)械損傷誘發(fā)兔口腔潰瘍有明顯治療作用(P<0.05)。實(shí)施例8一、實(shí)驗(yàn)材料l.試驗(yàn)藥品受試物側(cè)金盞總黃酮口腔貼片。批號(hào)20030320。由山東生物藥物研究院提供。陽性對(duì)照物三金牌桂林西瓜霜，批準(zhǔn)文號(hào)國藥準(zhǔn)字Z45021599，批號(hào)030817，規(guī)格2.5克/瓶，由桂林三金藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。2.試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄兼用；新西蘭純種健康白兔，雌雄兼用，雌者無孕，由山東魯抗醫(yī)藥集團(tuán)提供，合格證號(hào)SCXK魯20030006。3.實(shí)驗(yàn)儀器XZC-2B型自控溫度熱板儀。二、試驗(yàn)方法1.熱板法預(yù)選痛閾(熱板溫度55士0.5。C)在30秒鐘內(nèi)的小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物大劑量(500mg/kg)組、中劑量(250mg/kg)組、小劑量(125mg/kg)組，陽性對(duì)照(500mg/kg)組及空白對(duì)照組，灌胃給藥，體積0.8ml/20g，對(duì)照組給等體積的水。將小鼠置XZC-2B型自控溫度熱板儀中，分別測定各鼠給藥后90、120、150分鐘時(shí)的疼痛閾值。2.扭體法取18-22g健康小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物大劑量組(500mg/kg)、中劑量組(250mg/kg)、小劑量組(125mg/kg)，陽性對(duì)照組(西瓜霜，500mg/kg)及空白對(duì)照組。灌胃給藥，體積0.8ml/20g，對(duì)照組給等體積的水。給藥后1.5小時(shí)，各組分別腹腔注射0.6%的冰醋酸0.2ml/20g，腹腔注射0.6%的冰醋酸后即刻記錄各組小鼠15分鐘內(nèi)的扭體次數(shù)。三、試驗(yàn)結(jié)果1.熱板法結(jié)果見表4。結(jié)果表明，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物大劑量、中劑量及陽性對(duì)照物可明顯提高熱板法所引起的疼痛閾值(P<0.05)。表4.對(duì)小鼠熱板致痛的影響(n=10)劑量藥后不同時(shí)間(秒鐘)痛閾值(s，X土SD)組別(mg/kg)90120150陰性對(duì)照_19.3±4.7418.8±3.5220.1±4.31陽性對(duì)照50025.6±7.23*23.8±5.35*20.6±3.13大劑量組50028.0±9.60*24.1±6.26*22.1±4.56中劑量組25025.4±6.57*23.7±4.60*20.7±4.03小劑量組_^_21.8±4.52_21.1±4.53_21.0±5.19*分別與空白對(duì)照組相比P<0.052.扭體法試驗(yàn)結(jié)果見表5。結(jié)果表明側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物大劑量與陽性對(duì)照物對(duì)醋酸引起的小鼠扭體次數(shù)明顯減少(P<0.05)。表5.對(duì)小鼠扭體反應(yīng)的影響(n=10，X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>四、結(jié)論:試驗(yàn)結(jié)果表明，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物大劑量(500mg/kg)、中劑量(250mg/kg)可明顯提高熱板法試驗(yàn)小鼠疼痛閾值；灌胃給藥(500mg/kg)可明顯抑制由冰醋酸(0.6%)誘發(fā)的小鼠扭體反應(yīng)，使動(dòng)物扭體次數(shù)明顯減少(P<0.05)，說明側(cè)金盞總黃酮口腔貼片提取物有一定的鎮(zhèn)痛作用。側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的刺激性實(shí)驗(yàn)實(shí)施例9一、試驗(yàn)材料1.受試物側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，批號(hào)20030320。2.賦形劑空白片本品為雙層片，黏貼層為白色，隔離層為黃色。3.試驗(yàn)動(dòng)物新西蘭白兔12只，體重2.3—2.8kg，活潑健康，肉眼觀察無明顯口腔疾病的動(dòng)物9只供本試驗(yàn)用。提供單位由山東魯抗醫(yī)藥集團(tuán)有限公司提供，合格證號(hào)SCXK魯20030006二、試驗(yàn)方法l.試驗(yàn)分組隨機(jī)將動(dòng)物分為側(cè)金盞總黃酮口腔貼片組、賦形劑空白片對(duì)照組和陰性對(duì)照組，每組3只。2.給藥方法給藥時(shí)，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片組和空白貼片組，將白兔置于固定器內(nèi)，一人用雙手固定兔頭，試驗(yàn)者左手掀起兔左上唇，右手持鑷子夾住側(cè)金盞總黃酮口腔貼片或空白貼片，將其置于上唇黏膜處，被動(dòng)固定1分鐘后，用自制彈力兔嘴固定器固定4小時(shí)，以保證受試物與口腔黏膜密切接觸不致脫落，解除固定后，立即觀察貼片處黏膜部位變化情況；每天給藥一次，連續(xù)給藥一周，陰性對(duì)照組兔口腔黏膜每日用生理鹽水沖洗1次并用同法處理觀察。停藥后繼續(xù)觀察二周。三、觀察結(jié)果每曰受試物與口腔黏膜接觸4小時(shí)解除固定后與次日晨觀察，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片處黏膜無明顯紅腫、充血、潰破和異常分泌物等刺激癥狀，與賦形劑及陰性對(duì)照組相比無明顯差別。連續(xù)給藥一周，未見明顯改變。停藥后繼續(xù)觀察二周，均未見明顯異常改變。四、結(jié)論試驗(yàn)結(jié)果顯示，側(cè)金盞總黃酮口腔貼片經(jīng)多次給藥對(duì)兔口腔黏膜無明顯刺激作用。側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)實(shí)施例10將按照本發(fā)明制備的產(chǎn)品在40'C土2'C、75%±5%恒溫恒濕箱中，進(jìn)行加速試驗(yàn)，分別于放置后0、1、2、3個(gè)月取樣，檢測其性狀、鑒別、重量差異、溶出度、含量測定及衛(wèi)生學(xué)檢査等；又將按照本發(fā)明制備的產(chǎn)品在室溫下進(jìn)行長期穩(wěn)定性試驗(yàn)。結(jié)果表明，本發(fā)明提供的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片穩(wěn)定性良好。側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的臨床預(yù)試實(shí)施例ll將按照本發(fā)明制備的產(chǎn)品，采取隨機(jī)的原則，共觀察40例，其中治療組20例，對(duì)照組20例。進(jìn)行了臨床療效和安全性考察，結(jié)果表明，治療組疾病療效總有效率95.00%,愈顯率75.00%。對(duì)照組(意可貼片)疾病總有效率90.00%，愈顯率75.00%;經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(P>0.05)，兩組療效無顯著差異。治療組在改善潰瘍面積、滲出面積，水腫面積、灼熱疼痛、口渴欲飲、煩熱方面，與對(duì)照組比療效無顯著性差異(P〉0.05)，在改善面紅口鼻灼干而熱、便干尿赤方面療效有顯著性差異(P<0.05)，治療組優(yōu)于對(duì)照組。臨床觀察期間，未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)及毒副作用。說明該藥臨床應(yīng)用安全，適用于復(fù)發(fā)性口瘡，中醫(yī)辨證心脾積熱證。以上對(duì)本發(fā)明的詳細(xì)描述并不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明做出各種改變和變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求所定義的范圍。權(quán)利要求1、一種側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，其特征在于，該貼片分為兩層，分別為含藥的粘附層和疏水的保護(hù)層，含藥的粘附層含有側(cè)金盞總黃酮提取物10～50mg和粘附材料，粘附材料選自卡波姆、羥丙甲纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、海藻酸鈉中的一種或多種。2、如權(quán)利要求l所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，其特征在于，所述含藥的粘附層含有側(cè)金盞總黃酮提取物25mg。3、如權(quán)利要求l所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，其特征在于，所述粘附材料為卡波姆，含量為2040mg。4、如權(quán)利要求l所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，其特征在于，所述含藥的粘附層進(jìn)一步含有藥學(xué)上可接受的輔料。5、如權(quán)利要求l所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，其特征在于，所述疏水的保護(hù)層含有疏水材料和藥學(xué)上可接受的輔料，其中所述疏水材料為乙基纖維素。6、如權(quán)利要求l所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，其特征在于，所述含藥的粘附層含有:側(cè)金盞總黃酮提取物1050mg、糊精2040mg、卡波姆2040mg、硬脂酸鎂25mg;所述疏水的保護(hù)層含有乙基纖維素2040mg、色淀25mg。7、如權(quán)利要求6所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片，其特征在于，所述貼片的組方配比為I、含藥的粘附層側(cè)金盞總黃酮提取物'25mg糊精20mg卡波姆25mg羥丙甲纖維素30mg硬脂酸鎂2mgTT論+i^但始巨JL"哪水口'J汰1^^:乙基纖維素30mg硬脂酸鎂lmg色淀3mg。8、制備權(quán)利要求6所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的方法，包括下述步驟-①制備側(cè)金盞總黃酮提取物，用等量遞加的方法與糊精混勻；②加入卡波姆、羥丙甲纖維素和硬脂酸鎂，混合均勻，制粒；③將乙基纖維素、色淀、硬脂酸鎂混合均勻；④采用二次壓片的方式進(jìn)行壓片，即得。9、制備權(quán)利要求6所述的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片的方法，包括下述步驟:①制備側(cè)金盞總黃酮提取物，用等量遞加的方法與糊精混勻；②加入卡波姆、海藻酸鈉和硬脂酸鎂，混合均勻，制粒，壓片；③將含有乙基纖維素、色淀的溶液噴涂于藥片表面，晾干，即得。全文摘要本發(fā)明涉及一種側(cè)金盞總黃酮口腔貼片及其制備方法。該口腔貼片分為兩層，一層為含藥的粘附層，另一層為疏水的保護(hù)層，含藥的粘附層含有側(cè)金盞總黃酮提取物10～50mg，該粘附層直接接觸口腔粘膜表面，而疏水的保護(hù)層朝向口腔，使藥物單向釋放到潰瘍表面，定位于病灶部位，延長作用時(shí)間，可以克服藥物被唾液稀釋、生物利用度低的問題；同時(shí)有效成分由粘膜吸收，避免藥物的肝臟首過效應(yīng)，提高生物利用度；另外該貼片直接粘附于潰瘍表面，還可以直接保護(hù)潰瘍面、有效促進(jìn)潰瘍愈合。本發(fā)明提供的側(cè)金盞總黃酮口腔貼片在臨床上可用于治療口腔潰瘍。文檔編號(hào)A61K36/185GK101450087SQ200710113698公開日2009年6月10日申請日期2007年11月30日優(yōu)先權(quán)日2007年11月30日發(fā)明者凌沛學(xué),劉妍妍,史國玉,吳永霞,尚立霞,玲張,張建強(qiáng),張新房,曲延偉申請人:凌沛學(xué)