專利名稱：含有源自天然橡膠膠乳提取物的皮膚美白成分的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有源自天然橡膠膠乳提取物和任選的額外的去除 皮膚色素的美容活性劑的成分，其中膠乳中含有蛋白酶抑制劑。
背景技術(shù)：
不同膚色僅僅是簡單的由于構(gòu)成大多數(shù)皮膚表皮的角質(zhì)形成細(xì)胞中黑色 素濃度和分布的不同而形成的。黑色素含量越高，膚色越黑。黑色素是在位 于表皮基底膜的黑素細(xì)胞內(nèi)部黑素體中合成的色素的混合物。黑素體含有將 色素前體氨基酸酪氨酸轉(zhuǎn)化成黑色素必需的酶酪氨酸酶。含有黑色素的黑素 體轉(zhuǎn)移到樹突梢并移位進(jìn)入角質(zhì)形成細(xì)胞中，形成角質(zhì)形成細(xì)胞細(xì)胞核的帽。 黑素體轉(zhuǎn)移機(jī)制包括釋放黑素體、角質(zhì)形成細(xì)胞-黑素細(xì)胞的膜融合和吞噬作
用。建議由蛋白酶-激活受體-2 (PAR-2)來控制角質(zhì)形成細(xì)胞的黑素體攝食和 吞噬作用并發(fā)揮調(diào)節(jié)皮膚色素沉著的作用(1-4)。因此， 一種有效的皮膚美 白產(chǎn)品應(yīng)包括酪氨酸酶抑制劑或PAR-2抑制劑或兩者的組合。
a) 酪氨酸酶抑制劑。
在過去，通常用對苯二酚來局部提亮皮膚。其通過抑制酪氨酸轉(zhuǎn)化成黑 色素所需的酪氨酸酶來去除皮膚色素。然而，由于其潛在的毒性，濃度大于 2%即被視為毒品(drug)。延長使用它對黑素細(xì)胞是有毒的并可加重黑斑病。 殘余的對苯二酚在光和空氣存在與分子氧時(shí)發(fā)生反應(yīng)(自氧化作用)并變成 暗褐色。目前用于化妝品工業(yè)的數(shù)種天然酪氨酸酶抑制劑是來自熊果的熊果
苷、來自甘草的光甘草定和來自&1^118^^^7//"6 00^^的曲酸。
b) 蛋白酶-激活受體-2(PAR-2)抑制劑。
調(diào)節(jié)色素沉著的機(jī)制通過激活或抑制角質(zhì)形成細(xì)胞受體PAR-2來調(diào) 節(jié)。需要胰蛋白酶的蛋白水解活性來激活PAR-2受體，以將黑素體從黑 素細(xì)胞有效轉(zhuǎn)移到角質(zhì)形成細(xì)胞中。大豆胰蛋白酶抑制劑對角質(zhì)形成細(xì) 胞PAR-2通路的抑制己經(jīng)顯示通過減少黑素體的吞噬作用或黑色素傳 遞(l-4)來誘導(dǎo)去除色素。
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種新的成分，其源自當(dāng)?shù)爻湓５奶烊幌鹉z 膠乳的非橡膠成分并可自然的作用于皮膚使之褪色。

發(fā)明內(nèi)容
從橡膠樹(Z/eve" 6raw'fe似&)穿刺獲得的膠乳由懸浮在水性胞漿中的橡膠 和非橡膠顆粒組成。非橡膠殘余物通常作為廢物棄去。在本發(fā)明中，發(fā)現(xiàn)一 種小蛋白的非橡膠成分可抑制蛋白酶活性。本發(fā)明還公開了蛋白酶抑制劑的 適宜的提取方法及其在去除皮膚色素方面的應(yīng)用。


圖1:通過在黑色豬皮上局部應(yīng)用源自天然橡膠膠乳的提取物進(jìn)行的褪 色實(shí)驗(yàn)(A和B)。在9周內(nèi)一天兩次應(yīng)用提取物(斑點(diǎn)1和斑點(diǎn)2)和對苯二 酚(斑點(diǎn)3)的30%甘油溶液。
圖2:源自天然橡膠膠乳的提取物的胰蛋白酶抑制活性。
具體實(shí)施例方式
新鮮膠乳是一種通過穿刺橡膠樹(Hevea bmsiliensis)獲得的乳狀液體。在其 懸浮液中不僅僅含有橡膠顆粒(30-35克％)還含有其它非橡膠顆粒。己經(jīng)提 取并發(fā)現(xiàn)在除去橡膠顆粒后的水性膠乳漿液中的一種活性化合物可誘導(dǎo)去除
皮膚色素。 提取方法
加入甲酸使新鮮膠乳凝結(jié)。通過滾筒之間的壓榨從橡膠凝結(jié)物中收集膠乳
漿液。通過一系列包括那些具有MWCO S 10 kD的膜對其進(jìn)行超濾以及噴霧 干燥。隨后通過丙酮分餾從噴霧干燥的粉末中純化膠乳蛋白酶抑制劑。
源自天然橡膠膠乳的提取物在體內(nèi)去除皮膚色素上的功效
通過在天然黑色皮膚的豬上局部應(yīng)用源自天然橡膠膠乳的蛋白酶抑制劑 來進(jìn)行體內(nèi)褪色實(shí)驗(yàn)。在豬的背部一天兩次局部應(yīng)用含有提取物或5%對苯 二酚的30%甘油溶液，持續(xù)9周。黑色皮膚上的類似的有記號的褪色顯示了 提取物或?qū)Ρ蕉拥膽?yīng)用點(diǎn)(圖l)。
源自天然橡膠乳漿液的提取物的蛋白酶抑制作用
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)源自天然橡膠乳漿液的提取物可抑制絲氨酸蛋白酶、胰蛋白 酶的活性。需要胰蛋白酶來激活PAR-2，以在接受者的角質(zhì)形成細(xì)胞中 攝取和分布黑色素。提取物可以劑量依賴性的方式抑制胰蛋白酶活性(圖 2)。
權(quán)利要求
1、一種可去除哺乳動物皮膚色素的成分，包括分子量小于10kD的從橡膠樹(Hevea brasiliensis)的膠乳漿液、根、嫩枝、葉或果實(shí)提取獲得的橡膠膠乳提取物。
2、 依據(jù)權(quán)利要求1的成分，其中橡膠膠乳提取物是從橡膠膠乳中采 用酸使橡膠膠乳凝結(jié)并通過壓搾從凝結(jié)的膠乳中分離出酸化漿液獲得 的。
3、 權(quán)利要求1-2的成分的提取方法，包括以下步驟a、 用包括〈10kD的不同分子量的截流膜超濾所述酸化漿液；b、 噴霧干燥所述超濾液；c、 所述超濾液進(jìn)行>40%飽和度的丙酮分餾。
4、 依據(jù)權(quán)利要求l或2的成分，包含小蛋白和肽的組合。
5、 依據(jù)權(quán)利要求l或2的成分，包含具有以下整個(gè)氨基酸序列或一 部分的天然或片斷的蛋白DLNFNR VRVF VDENRVVTQVPAIG
6、依據(jù)權(quán)利要求1、 2、 4或5任一的成分，其中所述提取物含有 至少一種蛋白酶抑制活性劑，并且蛋白酶抑制活性劑是絲氨酸蛋白酶抑 制劑。
7、 依據(jù)權(quán)利要求l、 2、 4、 5或6任一的成分，其中所述至少一種絲 氨酸蛋白酶抑制劑的存在的量是局部活性成分總量的大約.001% (w/v) 至30 % (w/v)。
8、 依據(jù)權(quán)利要求1、 2、 4、 5、 6或7的成分依據(jù)，其中所述成分有美白哺乳動物皮膚的效果。
9、依據(jù)權(quán)利要求l、 2、 4、 5、 6或7任一的成分，其中所述成分用 于皮膚美白產(chǎn)品中。
全文摘要
一種含有源自天然橡膠漿的提取物的皮膚美白成分，其中天然橡膠漿含有蛋白酶抑制劑及其活性肽片斷。提取方法包括酸和熱處理、超濾和溶劑分餾。已經(jīng)顯示該提取物具有誘導(dǎo)去除哺乳動物皮膚色素的效果。
文檔編號A61K8/97GK101204362SQ20071016630
公開日2008年6月25日 申請日期2007年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月21日
發(fā)明者拉普彭·威迪蘇萬納庫 申請人:泰國卓越生命科學(xué)中心