專利名稱：：鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種從鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉中提取有效部位，該有效部位作為制備治療降血糖的用途，尤其是對(duì)治療2型糖尿病的用途。
背景技術(shù)：
：植物提取物是一個(gè)新興行業(yè)，從出現(xiàn)到現(xiàn)在才短短十幾年的時(shí)間，但在全世界掀起一股"回歸自然"的狂潮，人們?cè)诟杏X(jué)到化學(xué)合成藥物的附作用之后，對(duì)純天然的中草藥產(chǎn)生一種安全感，從而使得植物提取物的發(fā)展迅猛而勢(shì)不可擋。植物提取物市場(chǎng)跟植物藥市場(chǎng)是息息相關(guān)，2005年全球的植物藥市場(chǎng)是260億美元，其中歐洲:34.5%(德國(guó)、法國(guó)占了65%)，北美21%，亞洲|:26%，日本11.3%。全球植物藥市場(chǎng)發(fā)展速度為10%20%，全球植物提取物市場(chǎng)發(fā)展速度為15%20%。植物提取物主要活動(dòng)國(guó)家為美國(guó)、歐洲(其中德國(guó)、法國(guó)最為活躍)、中國(guó)、印度、韓國(guó)、日本、巴西等國(guó)家。美國(guó)是全球最后認(rèn)同植物藥的國(guó)家，但目前美國(guó)的植物提取物消耗量占了全球的60%以上。2005年美國(guó)植物提取物消耗量約為2^億美元左右，美國(guó)《食品大全》對(duì)2000家健康食品店進(jìn)行調(diào)査，結(jié)果表明以提取物作為使用類型的占7.4%。1992年，美國(guó)植物藥的銷售額是12億美元，到2005年達(dá)到70億美元，平均年增長(zhǎng)速度超過(guò)10%。2005年亞洲草藥提取物市場(chǎng)為15億美元，中國(guó)約4億美元，占26.7%左右；日本為3.2億美元，占21%。可見(jiàn)，中國(guó)植物藥還有待于更進(jìn)一步的發(fā)展。目前，植物提取物品種約在80種以上，北美市場(chǎng)的天然植物提取物主要有銀杏提取物——銀杏黃銅、綠茶提取物——茶多酚、醉椒提取物——KavaKava等。國(guó)內(nèi)天然植物提取物種類繁多，現(xiàn)有的品種可分為3類單味中藥提取物，如枳實(shí)、當(dāng)歸、黃芪、五味子、靈芝、蒺藜、厚樸、刺五加、貫葉連翹、紅車軸草、銀杏葉等提取物；復(fù)方中藥提取物，如補(bǔ)中益氣方提取物等；純化提取物，包括活性部位和單體化合物，如大豆異黃酮、人參皂苷、茶葉兒茶素、白藜盧醇、石杉?jí)A甲等。鷹嘴豆(C7cwfln'e""wwL.)起源于西亞、地中海沿岸，現(xiàn)全球播種面積已有1.5億畝，是目前世界上第二大食用豆類作物，維吾爾族名為諾胡提，在新疆有2500年的生長(zhǎng)歷史，是維吾爾醫(yī)常用藥材，已收載在中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部《藥品標(biāo)準(zhǔn)》維吾爾藥分冊(cè)和《維吾爾藥志》，具有清除異常體液，開(kāi)通體液閉阻，調(diào)節(jié)機(jī)體等作用。用于身體瘦弱，性欲低下，食欲不振，皮膚瘙癢及糖尿病等疾病。鷹嘴豆?fàn)I養(yǎng)成分較為豐富每100克干豆約含有水分10克、粗蛋白23克、淀粉47.3克、可溶性糖5.8克、脂肪5:3克、粗纖維6.3克、灰分3.2克。鷹嘴豆含有豐富的微量元素，其中維生素含量達(dá)42毫克，高于大部分豆類；鐵的含量達(dá)47毫克，比其它豆類高出90%，這使得食用鷹嘴豆產(chǎn)品能有效降低人體血清脂水平，減少膽固醇堆積，加強(qiáng)中老年人中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，對(duì)高血壓、心臟病有明顯的預(yù)防作用。經(jīng)對(duì)比研究表明鷹嘴豆、大豆、綠豆等在蛋白質(zhì)功效比值、生物價(jià)和消化率指標(biāo)上，鷹嘴豆為最高。1956年美國(guó)著名醫(yī)學(xué)專家克萊恩斯特通過(guò)大量的臨床經(jīng)驗(yàn)，證實(shí)了鷹嘴豆對(duì)70多種嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良疾病有明顯的療效。鷹嘴豆藥用價(jià)值也己被科學(xué)所證實(shí)具有強(qiáng)身健體、增強(qiáng)記憶力、治療預(yù)防糖尿病等功效。此外，鷹嘴豆籽粒還能防治膽病，可作利尿劑、催乳劑，治療失眠，預(yù)防皮膚病等?，F(xiàn)有資料分析，鷹嘴豆對(duì)高血糖小鼠具有很好的降糖和降血脂作用，可降低血清中血糖、胰島素及甘油三脂的濃度，增強(qiáng)葡萄糖激酶的活性，提示鷹嘴豆作為功能食品在糖尿病防治中扮演著重要的角色。研究還表明鷹嘴豆有很好的抗癌活性，Giron-CalleJ等發(fā)現(xiàn)鷹嘴豆乙醇和丙酮提取部分幾乎可以完全抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，表現(xiàn)出良好的抗腫瘤活性。研究發(fā)現(xiàn)鷹嘴豆中異黃酮、皂甙類等成分有較好的降血脂功效，而這些成分主要集中在鷹嘴豆胚芽中，因此，本發(fā)明人對(duì)鷹嘴豆豆芽進(jìn)行了降血糖的研究。研究采用灌胃方法，研究發(fā)現(xiàn)鷹嘴豆豆芽提取物對(duì)四氧嘧啶高血糖模型小鼠有明顯的降糖作用，雖然模型組動(dòng)物隨著時(shí)間延長(zhǎng)，血糖也逐漸降低，但給藥組的血糖下降百分率與其比較均有非常顯著的差異。由于2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展可由遺傳和環(huán)境因素的相互作用等引起，其中，胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙在發(fā)病機(jī)制中所起的重要作用。蛋白酪氨酸磷酸酶lB(ProteintyrosinephosphatasePTP1B)是胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)鍵的負(fù)調(diào)控子。PTP1B是胞內(nèi)PTP的代表，是第一個(gè)被鑒定并純化出的哺乳動(dòng)物蛋白酪氨酸磷酸酶，由435個(gè)氨基酸殘基組成，分子量約50KD，蛋白酪氨酸磷酸酶IB在人體各組織細(xì)胞中普遍存在并表達(dá)，并通過(guò)使激活的胰島素受體及胰島素受體底物(IRs-l)等去磷酸化失活而發(fā)揮生理功能。它可協(xié)調(diào)酪氨酸殘基磷酸化和去磷酸化之間的平衡，阻止胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。2型糖尿病和胰島素抵抗患者體內(nèi)特異的蛋白酪氨酸磷酸酶含量及活性均有所增加，當(dāng)?shù)鞍桌野彼崃姿崦副惶蕹?，不僅胰島素敏感性增高，而且糖尿病癥狀也有所改善。蛋白酪氨酸磷酸酶1B缺乏的小鼠與其野生型對(duì)照小鼠相比對(duì)胰島素更敏感，血糖控制更好，缺乏的小鼠與其野生型對(duì)照小鼠相比對(duì)胰島素更敏感，血糖控制更好，而且對(duì)飲食誘導(dǎo)的肥胖有更好的抵抗作用。因此，抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的作用已成為一種新的治療胰島素抵抗(IR)、II型糖尿病和肥胖的方法
發(fā)明內(nèi)容-本發(fā)明目的在于，提供一種采用溶劑提取法從新鮮鷹嘴豆豆胚、豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉、豆芽粉中得到總皂苷類、異黃酮類的有效部位，該有效部位經(jīng)初步的活性篩選試驗(yàn)證明真有蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)抑制劑作用，將該有效部位用于治療糖尿病的藥物或保健品的應(yīng)用，同時(shí)該有效部位或其衍生物可作為藥物組合物的應(yīng)用。本發(fā)明所述的采用溶劑提取法(醇提法或水提法)制備鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位及其制備方法和應(yīng)用，該有效部位中含有異黃酮和皂苷成分，具體操作按下列步驟進(jìn)行a、將鷹嘴豆用常規(guī)方法發(fā)芽；b、將新鮮鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆降芽粉和豆芽粉中加入2-10倍體積的甲醇或乙醇或異丙醇或丁醇，其濃度為10-100%。c、用超聲波或冷浸或加熱回流提取1—15次，每次1—3小時(shí)，其中超聲波提取溫度為20-40°C，回流提取溫度為60-80°C，用濾紙過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位；d、或?qū)⑿迈r鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉中加入2-10倍體積的純凈水；e、用超聲波或冷浸或加熱回流提取1一15次，每次2—4小時(shí)，其中超聲波提取溫度為20-6CTC，回流提取溫度為60-100。C分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得到水提取物有效部位。所述有效部位為總皂苷類和異黃酮類。將有效部位按常規(guī)方法制備為功能食品或按常規(guī)制藥方法制成膠囊或片劑或口服液或沖劑或注射液或緩釋制劑或控釋制劑；或?qū)⒂行Р课慌c中、西藥配伍制成膠囊或片劑或口服液或沖劑或注射液或緩釋制劑或控釋制劑。一種鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位的制備方法，該有效部位采用醇提法或水提法制備，具體操作按下列步驟進(jìn)行a、將鷹嘴豆用常規(guī)方法發(fā)芽；b、將新鮮鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉中加入2-10倍體積的甲醇或乙醇或異丙醇或丁醇，其濃度為10-100%。c、用超聲波或冷浸或加熱回流提取1一15次，每次1—3小時(shí)，其中超聲波提取溫度為20-40°C，回流提取溫度為60-8(TC，用濾紙過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位-,d、或?qū)⑿迈r鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉中加入2-10倍體積的純凈水；e、用超聲波或冷浸或加熱回流提取1一15次，每次2—4小時(shí)，其中超聲波提取溫度為20-60°C，回流提取溫度為60-10(TC，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得到水提取物有效部位。所述的制備方法，步驟b醇最佳濃度為60—70%所述的制備方法，步驟c醇超聲波提取溫度優(yōu)選為30-35°C，回流提取溫度優(yōu)選為70-80°C。-所述的制備方法，步驟e中超聲波提取溫度優(yōu)選為30-40°C，回流提取溫度優(yōu)選為80-96°C。一種鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位作為制備治療糖尿病降血糖藥物的用途或作為降糖功能食品的用途。本發(fā)明所述的從新鮮鷹嘴豆豆胚、豆芽段或千燥的鷹嘴豆胚芽粉、豆芽粉中提取降血糖有效成分的制備方法及其在功能食品及藥品中的應(yīng)用包括以下工藝步驟鷹嘴豆胚芽、豆芽的制備將精選后的豆類原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5cm—6cm水孔兼通氣孔。再加入適量的水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽。通常浸泡2h—3h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分。將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5h—6h淋水1次。豆芽長(zhǎng)至6cm—8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽、豆芽醇提物的制備將鷹嘴豆新鮮的胚芽、豆芽段(每段長(zhǎng)約2毫米)或干燥的胚芽、豆芽(25目)置于圓底燒瓶中，加入濃度為10—100%的醇，用超聲波或冷浸或加熱回流提取1一15次，每次1小時(shí)，濾紙過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提提物；鷹嘴豆胚芽、豆芽水提物的制備將新鮮的胚芽、豆芽段(每段長(zhǎng)約2毫米)或干燥的鷹嘴豆胚芽、豆芽(25目)置于圓底燒瓶中，加入純凈水，用超聲波或冷浸或加熱回流提取1一15次，每次2小時(shí)，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得到水提取物；鷹嘴豆胚芽、豆芽有效部位包括總皂苷類、異黃酮類等化合物。鷹嘴豆胚芽、豆芽有效部位作為制備降血糖的應(yīng)用?？蛇\(yùn)用鷹嘴豆胚芽、豆芽水提取物作為藥物制劑和食品的原料，對(duì)于加工成本的降低，成品質(zhì)量的提高，療效的穩(wěn)定將起著積極的意義，同時(shí)還有利于深加工鷹嘴豆豆芽藥效物質(zhì)的基礎(chǔ)研究，拓展該藥的安全性。具體實(shí)施方式實(shí)施例1(醇提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡2h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至6cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽、豆芽醇提物的制備將干燥的鷹嘴豆胚芽、豆芽粉過(guò)篩25目，各5克置于圓底燒瓶中，加入2倍體積濃度為10%的甲醇，用超聲波取'15次，每次l小時(shí)，濾紙過(guò)濾，合并濾液，超聲波控制溫度在20°C，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位。實(shí)施例2(水提物).用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為6cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡3h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔6h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至7cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽和豆芽水提物的制備將干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉過(guò)篩25目，各5克置于圓底燒瓶中，加入2倍體積的純凈水，用超聲波提取15次，每次2小時(shí)，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，超聲波控制溫度在20°C，減壓濃縮得到水提取物有效部位。實(shí)施例1和2有效部位包括總皂苷類、異黃酮類等化合物，作為制備治療糖尿病降血糖的藥物的用途或作為制備降血糖功能性保健食品的用途。篩選方法為用對(duì)-硝基苯基磷酸二鈉(pNPP)作為底物，以在陽(yáng)性藥物釩酸鈉為對(duì)照，利用酶標(biāo)儀進(jìn)行PTP1B酶抑制劑的高通量篩選，根據(jù)PTP1B水解pNPP的磷酸基團(tuán)而產(chǎn)生顏色反應(yīng)來(lái)測(cè)定PTP'1B的活性。酶反應(yīng)體系組成如下緩沖液(50mMHEPES,pH7.3，100mM氯化鈉，O.l%牛血清白蛋白，和1mM二硫代蘇糖醇)，PTP1B融合蛋白，pNPP,PTP1B特異抑制劑釩酸鈉(100pg/mL)。反應(yīng)體系混勻后在37r放置30min，加入1M氫氧化鈉終止反應(yīng)，置比色儀上測(cè)定405波長(zhǎng)條件下的吸收值(A)，測(cè)定結(jié)果減去本底值后計(jì)算酶活性。結(jié)果鷹嘴豆胚芽粉水提物組、醇提物組，豆芽粉水提物組、醇提物組都可顯著的抑制蛋白酪氨酸磷酸酶IB的活性，調(diào)節(jié)血糖，結(jié)果如下:<table>complextableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位對(duì)四氧嘧啶高血糖模型小鼠也有降糖作用。實(shí)施例3(醇提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5.5cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡2.5h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5.5h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽豆芽醇提物的制備將鷹嘴豆胚芽和豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入5倍體積濃度為50%的乙醇，用加熱回流提取5次，每次2小時(shí)，濾紙過(guò)濾，合并濾液，回流溫度控制溫度在80°C,減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位。實(shí)施例4(水提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5.5cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡2.5h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5.5h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽、豆芽水提物的制備將鷹嘴豆胚芽和豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入5倍體積的純凈水，用加熱回流提取5次，每次3小時(shí)，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，回流溫度控制在60°C，減壓濃縮得到水提取物有效部位。實(shí)施例3和4有效成分包括總皂苷類、異黃酮類化合物作為制備治療糖尿病降血糖的藥物的用途或作為制備降血糖功能性保健食品的用途。篩選方法與實(shí)施例1中的篩選方法相同，其結(jié)果鷹嘴豆胚芽水提物組、醇提物組，豆芽水提物組、醇提物組都可顯著的抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性，調(diào)節(jié)血糖，結(jié)果如下豆芽豆芽胚芽胚芽空白水提物醇提物水提物醇提物濃度(pg/mL)10010050100A(0min)0.0610.0780.0650.0750.06A(30min)0.640扁0.0720細(xì)0.073抑制率(％)98.6298.7996.0397.75鷹嘴豆胚芽和豆芽有效成分對(duì)四氧嘧啶高血糖模型小鼠也有降糖作用。實(shí)施例5(醇提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為6cm水孔兼通氣孔。再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡2h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5.5h淋水l次，豆芽長(zhǎng)至7cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽、豆芽醇提物的制備.將干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉(25目)各5克置于圓底燒瓶中，加入8倍體積濃度為70%的異丙醇，用冷浸提取8次，每次3小時(shí)，濾紙過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位。實(shí)施例6(水提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為6cm水孔兼通氣孔。再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡2h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5.5h淋水l次，豆芽長(zhǎng)至7cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽、豆芽水提物的制備將干燥的鷹嘴豆胚芽粉、豆芽粉(25目)各5克置于圓底燒瓶中，加入8倍體積的純凈水，用冷浸提取8次，每次4小時(shí)，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得到水提取物有效部位。實(shí)施例5和6有效成分包括總皂苷類、異黃酮類化合物作為制備治療糖尿病的藥物降血糖的用途或作為制備降血糖功能性保健食品的用途。篩選方法與實(shí)施例1中的篩選方法相同，其結(jié)果鷹嘴豆胚芽水提物組、醇提物組，豆芽水提物組、醇提物組都可顯著的抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性，調(diào)節(jié)血糖，結(jié)果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>抑制率(％)_98.7998.497.4197,92鷹嘴豆胚芽和豆芽有效成分對(duì)四氧嘧啶高血糖模型小鼠也有降糖作用。實(shí)施例7(醇提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5cm水孔兼通氣孔。再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡3h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔6h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽和豆芽醇提物的制備-將鷹嘴豆胚芽和豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入10倍體積濃度為100%的丁醇，用超聲波提取10次，每次1.5小時(shí)，濾紙過(guò)濾，合并濾液，超聲波控制溫度在35°C，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位。實(shí)施例8(水提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5cm水孔兼通氣孔。再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡3h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔6h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;.鷹嘴豆胚芽、豆芽水提物的制備將鷹嘴豆胚芽和豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入8倍體積的純凈水，用超聲波提取10次，每次2小時(shí)，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，超聲波控制溫度在35°C，減壓濃縮得到水提取物有效部位。實(shí)施例7和8有效成分包括總皂苷類、異黃酮類等化合物，作為制備治療糖尿病降血糖的藥物的用途或作為制備降血糖功能性保健食品的用途。篩選方法與實(shí)施例1中的篩選方法相同，其結(jié)果鷹嘴豆胚芽水提物組、醇提物組，豆芽水提物組、醇提物組都可顯著的抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性，調(diào)節(jié)血糖，結(jié)果如下豆芽豆芽胚芽胚芽空白水提物醇提物'水提物醇提物濃度(pg/mL)10075100100A(0min)0.0610.0780.0570,0550.053A(30min)0.640.0910.0620.0710細(xì)抑制率(％)97.卯99.2396.5198.72鷹嘴豆胚芽和豆芽有效成分對(duì)四氧嘧啶高血糖模型小鼠也有降糖作用。實(shí)施例9(醇提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；.將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為6cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡3h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5h淋水l次，豆芽長(zhǎng)至6cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽、豆芽醇提物的制備將干燥的鷹嘴豆胚芽粉、豆芽粉(25目)各5克置于圓底燒瓶中，加入4倍體積濃度為40。/。的乙醇，用加熱回流提取3次，每次3小時(shí)，濾紙過(guò)濾，合并濾液，回流溫度控制在75°G，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位。實(shí)施例10(水提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為6cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡3h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至6cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽和豆芽水提物的制備將鷹嘴豆胚芽和豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入4倍體積的純凈水，用加熱回流提取3次，每次4小時(shí)，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，回流溫度控制在96°C，減壓濃縮得到水提取物有效部位。實(shí)施例9和IO有效成分包括總皂苷類、異黃酮類等化合物，作為制備治療糖尿病降血糖的藥物用途或作為制備降血糖功能性保健食品的用途。篩選方法與實(shí)施例1中的篩選方法相同，其結(jié)果鷹嘴豆胚芽水提物組、醇提物組，豆芽水提物組、醇提物組都可顯著的抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性，調(diào)節(jié)血糖，結(jié)果如下<table>complextableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>鷹嘴豆胚芽和豆芽有效成分對(duì)四氧嘧啶高血糖模型小鼠也有降糖作用。實(shí)施例11(醇提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡2.5h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5.5h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽、豆芽醇提物的制備將新鮮的鷹嘴豆胚芽段、豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入5倍體積濃度為60%的異丙醇，用超聲波提取3次，每次1.5小時(shí)，濾紙過(guò)濾，合并濾液，超聲波控制溫度在3(TC，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位。實(shí)施例12(水提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗千凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡2.5h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔5.5h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽、豆芽水提物的制備將新鮮的鷹嘴豆胚芽段、豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入5倍體積的純凈水，用超聲波提取15次，每次2小時(shí)，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，超聲波控制溫度在40°C，減壓濃縮得到水提取物有效部位。實(shí)施例11和12有效成分包括總皂苷類、異黃酮類等化合物作為制備治療糖尿病降血糖的藥物用途或作為制備降血糖功能性保健食品的用途。篩選方法與實(shí)施例1中的篩選方法相同，其結(jié)果鷹嘴豆胚芽水提物組、醇提物組，豆芽水提物組、醇提物組都可顯著的抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性，調(diào)節(jié)血糖，結(jié)果如下空白豆芽水提物旦牙醇提物胚芽水提物胚芽醇提物濃度(pg/mL)100畫50100A(0min)0,0610.0650.0610,0710.053A(30油)0.640.0770.0720.0790馬抑制率(％)98.4198.5198.6598.54鷹嘴豆胚芽和豆芽有效成分對(duì)四氧嘧啶高血糖模型小鼠也有降糖作用。實(shí)施例13(醇提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡3h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔6h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;鷹嘴豆胚芽和豆芽醇提物的制備將新鮮的鷹嘴豆胚芽段、豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入7倍體積濃度為90%的甲醇，用超聲波提取10次，每次1小時(shí)，濾紙過(guò)濾，合并濾液，超聲波溫度控制在25X:，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位。實(shí)施例14(水提物)用常規(guī)方法使鷹嘴豆發(fā)芽；將精選后的鷹嘴豆原料，經(jīng)水洗干凈后放入容器內(nèi)，容器上面要求有淋洗裝置，底部邊沿要留出孔徑為5cm水孔兼通氣孔，再加入水進(jìn)行浸泡，以利于其發(fā)芽，通常浸泡3h，即可保證原料豆粒能夠吸足水分，將經(jīng)浸泡后吸足水分的原料豆粒，室溫下每隔6h淋水1次，豆芽長(zhǎng)至8cm長(zhǎng)時(shí)即可，最長(zhǎng)不超過(guò)10cm;.鷹嘴豆胚芽、豆芽水提物的制備將新鮮的鷹嘴豆胚芽段、豆芽切成段，每段長(zhǎng)約2毫米，各5克置于圓底燒瓶中，加入10倍體積的純凈水，用超聲波提取5次，每次2小時(shí)，分別用紗布、濾紙過(guò)濾，合并濾液，超聲波溫度控制在33°C，減壓濃縮得到水提取物有效部位。實(shí)施例13和14有效部位包括總皂苷類、異黃酮類化合物，作為制備治療糖尿病降血糖的藥物用途或作為制備降血糖功能性保健食品的用途。篩選方法與實(shí)施例1中的篩選方法相同，其結(jié)果鷹嘴豆胚芽水提物組、醇提物組，豆芽水提物組、醇提物組都可顯著的抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性，調(diào)節(jié)血糖，結(jié)果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>鷹嘴豆胚芽和豆芽有效成分對(duì)四氧嘧啶高血糖模型小鼠也有降糖作用。權(quán)利要求1、一種采用溶劑提取法制備鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位，其特征在于按下列步驟進(jìn)行a、將鷹嘴豆用常規(guī)方法發(fā)芽；b、將新鮮鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉中加入2-10倍體積的濃度為10-100％的甲醇或乙醇或異丙醇或丁醇；c、用超聲波或冷浸或加熱回流提取1-15次，每次1-3小時(shí)，其中超聲波提取溫度為20-40℃，回流提取溫度為60-80℃，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位；d、或?qū)⑿迈r鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉中加入2-10倍體積的純凈水；e、用超聲波或冷浸或加熱回流提取1-15次，每次2-4小時(shí)，其中超聲波提取溫度為20-60℃，回流提取溫度為60-100℃，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得到水提取物有效部位。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位，其特征在于有效部位為總皂苷類和異黃酮類。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位，其特征在于將有效部位按常規(guī)方法制備為功能食品或按常規(guī)制藥方法制成膠囊或片劑或口服液或沖劑或注射液或緩釋制劑或控釋制劑；或?qū)⒂行Р课慌c中、西藥配伍制成膠囊或片劑或口服液或沖劑或注射液或緩釋制劑或控釋制劑。4、一種鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位的制備方法，其特征在于該有效部位采用溶劑提取法即醇提法或水提法制備，具體操作按下列步驟進(jìn)行a、將鷹嘴豆用常規(guī)方法發(fā)芽；b、將新鮮鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉中加入2-10倍體積的甲醇或乙醇或異丙醇或丁醇，其濃度為10-100%;c、用超聲波或冷浸或加熱回流提取1—15次，每次l一3小時(shí)，其中超聲波提取溫度為20-40°C，回流提取溫度為60-80°C，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至無(wú)醇味，得到醇提物有效部位總皂苷類、異黃酮類；d、或?qū)⑿迈r鷹嘴豆胚芽和豆芽或干燥的鷹嘴豆胚芽粉和豆芽粉中加入2-10倍體積的純凈水；e、用超聲波或冷浸或加熱回流提取1—15次，每次2—4小時(shí)，其中超聲波提取溫度為20-6(TC，回流提取溫度為60-10(TC，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得到水提取物有效部位總皂苷類、異黃酮類。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于步驟b中的醇最佳濃度為60—70%。6、根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于步驟c醇超聲波提取溫度優(yōu)選為30-35°C，回流提取溫度優(yōu)選為70-80°C。7、根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于步驟e中超聲波提取溫度優(yōu)選為30-40°C，回流提取溫度優(yōu)選為80-96°C。8、一種鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位作為制備治療糖尿病的降血糖藥物的用途或作為降糖功能食品的用途。全文摘要本發(fā)明涉及一種鷹嘴豆胚芽和豆芽有效部位及其制備方法和應(yīng)用，采用醇提法或水提法從鷹嘴豆豆胚、豆芽中得到總皂苷類、異黃酮類的有效部位，該有效部位經(jīng)初步的活性篩選試驗(yàn)證明具有蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)抑制劑作用。將該有效部位用于治療糖尿病的藥物或保健品的應(yīng)用，同時(shí)該有效部位或其衍生物作為藥物組合物的應(yīng)用。文檔編號(hào)A61K36/185GK101199581SQ200710180020公開(kāi)日2008年6月18日申請(qǐng)日期2007年11月5日優(yōu)先權(quán)日2007年11月5日發(fā)明者信學(xué)雷,珍程,阿不力米提·伊力,阿吉爾克拜爾·艾薩,馬慶玲,高艷華申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所