專利名稱：：一種腦蛋白水解物氯化鈉注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藥品的制備方法，特別是涉及一種腦蛋白水解物氯化鈉注射液的制備方法。二
背景技術(shù)：
：目前，已知腦蛋白水解物的主要成分為游離氨基酸的混合物和分子量在10000以下的小分子肽，其中游離氨基酸占85%，動(dòng)物腦蛋白水解物屬于小分子天然神經(jīng)肽，它們作為有用的神經(jīng)調(diào)節(jié)物質(zhì)正在受到廣泛研究。腦蛋白水解物類藥物是目前國內(nèi)外廣泛用于治療由腦組織病變所引發(fā)的功能性疾病。臨床用于腦血管病及腦動(dòng)脈硬化、腦外傷后遺癥、腦軟化或中風(fēng)后遺癥、大腦發(fā)育不全、癡呆癥或老年性癡呆、以記憶力減退為主要表現(xiàn)的神經(jīng)衰弱、輕度嬰幼兒大腦發(fā)育不全等。該類藥物可促進(jìn)腦細(xì)胞DNA合成、修復(fù)及再生，能改善腦代謝、增強(qiáng)腦功能、促進(jìn)腦細(xì)胞成熟，改善智力以及供給腦細(xì)胞修復(fù)及再生所需的各種氨基酸。動(dòng)物腦蛋白水解物，可通過血腦屏障直接進(jìn)入腦神經(jīng)細(xì)胞中，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成并影響其呼吸鏈，它還具有抗缺氧的保護(hù)功能。國外70年代已開始生產(chǎn)腦蛋白水解物并用于臨床，國內(nèi)1995年由國家衛(wèi)生部批準(zhǔn)并開始生產(chǎn)。近幾年來，國內(nèi)外該類藥物的不斷增多?，F(xiàn)有的腦蛋白水解物制劑的制備方法之一是取新鮮豬腦去除表面的粘膜及血漬等，勻漿，加5倍體積的丙酮沉淀，沉淀分離后再加等量乙醚洗滌浸泡1小時(shí)，再過濾、真空干燥制成腦粉；腦粉用水溶解后，依次用胃蛋白酶、胰酶雙酶水解，水解液離心取上清液，加熱沸騰并迅速冷卻，然后經(jīng)板框過濾、超濾及減壓濃縮得水解液；水解液分批上S印hadexG-25凝膠層析柱層析，將活性峰收集液經(jīng)減壓濃縮、0.45um微孔過濾制成精晶液；根據(jù)所需藥液量，按國家藥品監(jiān)督管理局2000年12月28日頒布的藥品標(biāo)準(zhǔn)(編號(hào)WS1-XG-25-2000)計(jì)算氨基酸用量，添加相應(yīng)氨基酸配制成濃配液，然后稀配、灌裝成成品，經(jīng)蒸汽滅菌成無菌制劑。該方法的缺點(diǎn)是(l)設(shè)備投資大，生產(chǎn)周期長，生產(chǎn)效率低；用層析方法提純有效成分，每一過程需要3048小時(shí)，生產(chǎn)周期長；由于生產(chǎn)周期長，為保證藥品質(zhì)量，要求在28。C冷庫車間進(jìn)行S印hadexG-25凝膠柱層析，而S印hadexG-25凝膠層析材料必須進(jìn)口，價(jià)格昂貴，按年生產(chǎn)100萬支(10ml)腦蛋白水解物注射液計(jì)算，上述投入就達(dá)200萬元人民幣以上；使用減壓濃縮和離心的步驟，生產(chǎn)效率低，不利于對(duì)藥品質(zhì)量的控制；(2)使用大量的有機(jī)化學(xué)溶劑，丙酮和乙醚的沸點(diǎn)極低，是易燃、易爆、有毒的危險(xiǎn)化學(xué)品，乙醚還被用作麻醉劑，使用大量的丙酮和乙醚先將腦蛋白沉淀出來制成腦粉，此步驟非常危險(xiǎn)，必須在防爆車間內(nèi)生產(chǎn)，操作煩瑣，污染環(huán)境，危害操作人員的身體健康。公告號(hào)為CN1228082C的專利公開了一種腦蛋白水解物制劑的制備方法，該方法經(jīng)多次的微孔濾膜和超濾膜超濾，其缺點(diǎn)是(l)使用超濾膜進(jìn)行超濾濃縮回收率低，該工藝雖然采用了超濾技術(shù)，但使用的是截流分子量為1000的超濾膜進(jìn)行濃縮，使有效活性成分腦多肽不同程度的丟失，大大降低了收率；(2)多次經(jīng)過微孔濾膜和截流分子量為7萬和1萬的超濾膜，才得到超濾液，操作比較煩瑣。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種工藝簡化、使用安全、可直接用于臨床的腦蛋白水解物氯化鈉注射液的制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案一種腦蛋白水解物氯化鈉注射液的制備方法，制備時(shí)按以下步驟進(jìn)行(1)稱量90克氯化鈉，加入3000ml注射用水溶解，加入活性炭、靜置，脫炭過濾，再加入注射用水至8000ml，配成氯化鈉溶液；(2)量取腦蛋白水解物原液1000ml，用8000道爾頓超濾膜超濾得濾液，將濾液加入所述的氯化鈉溶液中，再加入注射用水至10000ml，攪拌、使混合均勻，向混合液中通入氮?dú)猓?3)將所述的混合液經(jīng)0.45Mm和0.22Mm的濾膜分別過濾、灌裝、通氮，再封裝、滅菌即可。所述的腦蛋白水解物原液中的氨基酸為門冬氨酸2.40~3.60mg/ml、蘇氨酸0.21~0.39mg/ml、絲氨酸0.21~0.39mg/ml、谷氨酸3.20~4.80mg/ml、甘氨酸1.20~1.80mg/ml、丙氨酸2.40~3.60mg/ml、纈氨酸1.60~2.40mg/ml、蛋氨酸0.35~0.65mg/ml、異亮氨酸1.60~2.40mg/ml、亮氨酸4.80~7.20mg/ml、苯丙氨酸1.60~2.40mg/ml、賴氨酸4.80~7.20mg/ml、組氨酸1.041.56mg/ml、精氨酸0.30-1.10mg/ml、色氨酸0.35~0.65mg/ml和脯氨酸1.60~2.40mg/ml。所述的活性炭用量為每1萬ml注射液需活性炭1.5g，所述的滅菌是在121°C的條件下滅菌10分鐘。所述的混合液中每100ml含總氨基酸281~421mg、腦蛋白水解物按總氮量計(jì)55~67mg、氯化鈉0.855~0.945g，PH控制在6.9~7.5，每1ml含內(nèi)毒素小于0.5EU。本發(fā)明產(chǎn)品對(duì)腦蛋白水解物原液的要求腦蛋白水解物原液，是健康豬腦經(jīng)酶水解制成的含約16種游離氨基酸的混合物，并含有少量小分子肽，每1ml腦蛋白水解物溶液含游離氨基酸28.0842.14mg，腦蛋白水解物含小分子肽按總氮量計(jì)5.49~6.71mg。1.性狀本品為淺黃色澄明液體。2.鑒別(1)取本品2ml，加雙脲醛試劑(取硫酸銅0.75g和酒石酸鈉鉀0.3g，加水250ml使溶解，在攪拌下加入10%氫氧化鈉溶液150ml)4ml，應(yīng)顯紫紅色。(2)取本品，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版二部附錄VD)試驗(yàn)。色譜條件用凝膠色譜柱，以磷酸鹽緩沖液(取磷酸氫二鉀10.63g與磷酸二氫鉀5,31g，加異丙醇50ml，加水至1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至7.0)為流動(dòng)相，流速為lml/min，檢測波長為280nm。測定法取對(duì)照溶液及供試驗(yàn)品溶液各10ml注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試驗(yàn)品溶液的色譜圖應(yīng)與對(duì)照溶液的色譜圖基本一致。3.檢査(1)折光率本品的折光率(中國藥典2000年版二部附錄VIF)為1.341~1.343。(2)pH值應(yīng)為6.9~7.5(中國藥典2000年版二部附錄VIH)。(3)蛋白質(zhì)取本品5ml，加20%磺基水楊酸2ml，溶液應(yīng)澄清。(4)其他物質(zhì)參照上述的鑒別方法試驗(yàn)，按面積歸一化法計(jì)算，供試驗(yàn)品溶液色譜圖中與對(duì)照溶液色譜圖不一致的峰面積不得超過5.0%。(5)細(xì)菌內(nèi)毒素取本品，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄XIE),每1ml含細(xì)菌內(nèi)毒素應(yīng)小于1.5EU。(6)無菌取本品，依法檢査(中國藥典2000年版二部附錄XIH)，應(yīng)符合規(guī)定。4.含量測定(1)氨基酸取本品，用適宜的氨基酸分析儀進(jìn)行分析測定，另取相應(yīng)的氨基酸對(duì)照品制成相應(yīng)濃度的對(duì)照品溶液，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算各種氨基酸的含量。氨基酸的含量應(yīng)符合下列規(guī)定門冬氨酸2.40~3.60mg/ml、蘇氨酸0.21~0.39mg/ml、絲氨酸0.21~0.39mg/ml、谷氨酸3.204.80mg/ml、甘氨酸1.201.80mg/ml、丙氨酸2.40~3.60mg/ml、纈氨酸1.60~2.40mg/ml、蛋氨酸0.35~0.65mg/ml、異亮氨酸1.60~2.40mg/ml、亮氨酸4.807.20mg/ml、苯丙氨酸1.60~2.40mg/ml、賴氨酸4.80~7.20mg/ml、組氨酸1.04~1.56mg/ml、精氨酸0.301.10mg/ml、色氨酸0.35~0.65mg/ml和脯氨酸1.60~2.40mg/ml，總量為28.08~42.12mg/ml。(2)總氮取本品，依法測定(中國藥典2000年版二部附錄VIID第二法)，總氮量為5.49~6.71mg/ml。為了控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們采用高效液相色譜法和薄層層析法對(duì)腦蛋白水解物原液進(jìn)行測定，計(jì)算活性成分的Rf值，并進(jìn)行比較。1.實(shí)驗(yàn)儀器與材料LC-6A高效液相色譜儀(shimadzu)，SPD-6AV紫外檢測器(shimadzu)，XK96-A快速混合器(姜堰市新康醫(yī)渦旋振蕩器)，微量取樣器,腦蛋白水解物原液樣品(對(duì)3個(gè)批次)，腦蛋白水解物原液對(duì)照品一腦活素(奧地利，批號(hào)611327)，正亮氨酸(吉爾生化上海有限公司)，醋酸鈉分析純，其余均為色譜純，衍生化試劑為異硫氰酸苯酯溶液。2.實(shí)驗(yàn)方法2.1色譜條件色譜柱為ACCQ'TagTM(3.9腿X150ram，4um，流動(dòng)相原液100ml，加雙蒸水稀釋至1000ml，B為乙腈-水(60:40)，二元梯度洗脫，流速為0.8ml/min，柱溫37。C，檢測波長254nm，進(jìn)樣量為1.0ul。2.2氨基酸對(duì)照品溶液及供試品溶液的配制精密量取氨基酸對(duì)照品溶液15.00ml，置于25ml量瓶中，用水稀釋，定容，搖勻，作為該實(shí)驗(yàn)氨基酸對(duì)照品溶液。精密量取腦蛋白水解物原液樣品lmL置于10ml量瓶中，用O.lmol/ml鹽酸稀釋至刻度，搖勻，該溶液為供試品溶液。2.3正亮氨酸內(nèi)標(biāo)溶液的配制取正亮氨酸18mg，用0.lmol/ml鹽酸溶解，并稀釋至10ml，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.8mg/ml。2.4衍生化反應(yīng)精密量取氨基酸對(duì)照品溶液及供試品溶液各200uL置2Ul離心管中，精密加入正亮氨酸內(nèi)標(biāo)溶液20ul，加入lmol/L三乙胺-乙腈溶液(144:856)和0.lmol/L異硫氰酸苯酯溶液各120uL，于渦旋震蕩儀中點(diǎn)振搖勻5min(600r/min)，室溫放置45min，加入正己烷300yl，于渦旋振蕩儀中點(diǎn)振搖勻5min(600r/min)后靜置15min，吸取下層溶液，用0.45um濾膜過濾。2.5薄層層析法對(duì)三個(gè)批次的腦蛋白水解物原液樣本與進(jìn)口腦活素進(jìn)行測定，計(jì)算活性成分的Rf值。儀器器具玻板(18cmX18cm、5cmX20cm)、干燥箱、點(diǎn)樣器(平頭微量進(jìn)樣器、毛細(xì)管)、展開室(平底或雙槽層析缸)、研缽、玻棒、烘箱；吸附劑用硅膠G、0.5%茚三酮-丙酮顯色劑。腦蛋白水解物原液樣本批號(hào)分別為(0705181，0705182，0705183)。2.5.1硅膠G薄層板的制備薄層用的玻璃板預(yù)先用洗液洗干凈并烘干，玻璃板要求表面光滑。稱取選擇白色、高純度并具有一定粒度分布的薄層層析用試劑硅膠G粉16g，加入35ml蒸餾水，用玻棒在燒杯中慢慢攪拌至硅膠槳液分散均勻、黏稠度適中，然后傾倒在干凈、干燥的坡璃板上，用玻棒將硅膠G由一端向另一端推動(dòng)，用指尖彈動(dòng)平板，使硅膠G鋪成厚薄均勻的薄層。待薄板表面水分開干燥后置于烘箱內(nèi)，待溫度升至ll(TC后活化30min。冷卻至室溫后取出，置于干燥器中備用(注意:.避免薄板驟熱、驟冷使薄層斷裂或在展層過程中脫落)。制成的薄層板，要求表面平整，厚薄均勻。2.5.2點(diǎn)樣取制備好的薄板一塊，在距底邊1.5cm處劃一條直線，在直線上每隔5cm作為一記號(hào)(用鉛筆輕點(diǎn)一下，不可將薄層刺破)，共2個(gè)點(diǎn)。用0.5mm直徑的毛細(xì)管吸取取樣品量約550ug，點(diǎn)樣體積約l一1.5ul，可分次滴加，控制點(diǎn)樣斑點(diǎn)直徑不超過2mm。在點(diǎn)樣過程中可用吹風(fēng)機(jī)冷熱風(fēng)交替吹干樣品，也可以讓樣品自然干燥。2.5.3展開劑與展層第一展開劑正丁醇:冰醋酸:蒸餾水分別為4:1:0.8，第二展開劑正丁醇:冰醋酸:蒸餾水分別為4:1:1.2，將己點(diǎn)樣的薄板點(diǎn)樣一端放入盛有展層溶劑的層析缸中，展層液面不得超過點(diǎn)樣線，層析缸密閉，自下向上展層，當(dāng)展層溶劑從點(diǎn)樣點(diǎn)向上展開約10cm處時(shí)取出薄板，前沿用鉛筆或小針作一記號(hào)，60°C烘箱內(nèi)烘干或晾干。2.5.4將0.5%茚三酮一丙酮顯色劑均勻噴霧在薄層上，置85'C烘箱內(nèi)加熱至層析斑點(diǎn)顯現(xiàn)。2.6肽圖分析色譜柱TSKGEL2000SWXL(7.8*300ram)，流動(dòng)相磷酸鹽緩沖液配制用取磷酸氫二鉀10.63g，磷酸二氫鉀5.31g，加異丙醇50ml，加水使溶解成1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)PH至7.0，流速1.0ml/min，進(jìn)樣量10yl，柱溫25°C，檢驗(yàn)流長280nm。3.結(jié)果3.116種游離氨基酸含量檢査結(jié)果取衍生化反應(yīng)后的氨基酸對(duì)照品溶液及供試品溶液各1UL進(jìn)行測定，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算氨基酸含量，見表1和圖1。表l各種游離氨基酸含量(f±S，g/L).<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>3.2肽圖分析色譜柱流動(dòng)相磷酸鹽緩沖液(用Na2HP04'H205.31g和NaH2P04H2010.63g，加異丙醇50ml，加水至lOOOml混合，用磷酸調(diào)節(jié)PH至7.0)，流速1.0ml/min;進(jìn)樣量10ul，柱溫25，檢測流長250nm，見圖2。3.3薄層層析法經(jīng)過雙向二次展開，可以看出，樣品中腦蛋白水解物與進(jìn)口腦活素均包含三種活性肽成分，兩者相比各活性成分接近，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，屬于同一總體，且三個(gè)批次的樣本，每批次重復(fù)實(shí)驗(yàn)8次均與進(jìn)口腦活素結(jié)果一致，成分穩(wěn)定，見圖3、圖4和表2。表2薄層層析游離氨基酸及小分子多肽Rf值(f±S，g/L)成分l成分2成分3腦活素樣品l樣品2樣品30.723±0.0770.703±0.0860.702±0.0800.706±0.0620.448±0馬0.454±0.0700.448±0.0790.463±0.0900.197±0.0530.199±0.0410.183±0.00.191±0.059FP0.150.9300.080.9730.160.920根據(jù)雙向薄層層析結(jié)果，計(jì)算出小分子多肽Rf值的95%正常值范圍質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，為產(chǎn)品質(zhì)量控制提供簡便可行的依據(jù)。Rf值95%質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算公式Rf值95%質(zhì)控=J±1.96xS成分l:0.5610.847，成分2:0.3040扁，成分3:0.0990.2834.結(jié)論高壓液相色譜法和雙向薄層層析法測定結(jié)果均顯示，三個(gè)批次的樣本與進(jìn)口腦活素活性肽成分一致；而且雙向薄層層析法具有費(fèi)用低，方法簡便，快速，準(zhǔn)確等特點(diǎn)，有利于在生產(chǎn)中對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)控。本產(chǎn)品已經(jīng)確立95%的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，以保證產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠。本發(fā)明的積極有益效果1、本發(fā)明直接向腦蛋白水解物原液中添加氯化鈉，制成的腦蛋白水解物氯化鈉注射液，可直接用于臨床，適應(yīng)于顱腦外傷、腦血管疾病(腦供血不足、腦梗塞)后遺癥伴有的記憶減退等病癥，使用時(shí)無需再次稀釋，避免了二次污染，提高了藥品的安全性，方便臨床使用。2、本發(fā)明的產(chǎn)品含有大量的游離氨基酸和低分子肽，氨基酸可在腦內(nèi)迅速代謝，對(duì)腦功能不全者有輔助改善作用，對(duì)于蛋白質(zhì)缺乏、神經(jīng)衰弱以及一般蛋白質(zhì)消化吸收障礙的治療，效果明顯。3、本發(fā)明的方法科學(xué)合理、簡化。腦蛋白水解物中需要的多肽分子量一般在600010000之間，由于超濾介質(zhì)微孔分布有一定范圍，采用8000道爾頓直接超濾濃縮液，有效活性成分腦多肽丟失少，降低了分子量大于10000的多肽物質(zhì)存在的可能性，提高了有效活性成分的收率。整個(gè)生產(chǎn)過程只需一次超濾，就可以完全除去熱原，超濾時(shí)間少，簡化了操作過程。四圖l氨基酸HPLC色譜圖圖2腦蛋白水解物肽圖分析圖3第一批樣品腦蛋白水解物與進(jìn)口腦活素活性肽成分雙向?qū)游鰣D圖4第二批樣品腦蛋白水解物與進(jìn)口腦活素活性肽成分雙向?qū)游鰣D五具體實(shí)施例方式實(shí)施例腦蛋白水解物氯化鈉注射液的制備方法稱量90克氯化鈉，加3000ml注射用水溶解，加1.5克活性炭，靜置，脫炭過濾，加注射用水至8000ml，配成氯化鈉溶液；量取1000ml腦蛋白水解物原液，其中，門冬氨酸2.40-3.60mg/ml、蘇氨酸0.21~0.39mg/ml、絲氨酸0.21-0.39mg/ml、谷氨酸3.20"4.80mg/ml、甘氨酸1.201.80mg/ml、丙氨酸2.40~3.60mg/ml、纈氨酸1.602.40mg/ml、蛋氨酸0.35~0.65mg/ml、異亮氨酸1.60~2.40mg/ml、亮氨酸4.80~7.20mg/ml、苯丙氨酸1.60~2.40mg/ml、賴氨酸4.807.20mg/ml、組氨酸1.04~1.56mg/ml、精氨酸0.30~1.10mg/ml、色氨酸0.35~0.65mg/ml和脯氨酸1.60~2.40mg/ml。用8000道爾頓超濾膜超濾上述原液，將濾液加入所述的氯化鈉溶液中；再加入注射用水至lOOOOml，向溶液中通入氮?dú)?。測定溶液中各成分含量，使每100ml注射液含總氨基酸281421mg、腦蛋白水解物按總氮量計(jì)55~67mg、氯化鈉0.855~0.945g，PH控制在6.9~7.5，檢測細(xì)菌內(nèi)毒素，每lml注射液含內(nèi)毒素小于0.5EU。合格后，將藥液經(jīng)0.45Mra和0.22Mm的濾膜分別過濾、灌裝、通氮，按塞、軋蓋；在12rC滅菌10分鐘。燈檢，貼簽，包裝。權(quán)利要求1、一種腦蛋白水解物氯化鈉注射液的制備方法，其特征在于，制備時(shí)按以下步驟進(jìn)行(1)稱量90克氯化鈉，加入3000ml注射用水溶解，加入活性炭、靜置，脫炭過濾，再加入注射用水至8000ml，配成氯化鈉溶液；(2)量取腦蛋白水解物原液1000ml，用8000道爾頓超濾膜超濾得濾液，將濾液加入所述的氯化鈉溶液中，再加入注射用水至10000ml，攪拌、使混合均勻，向混合液中通入氮?dú)猓?3)將所述的混合液經(jīng)0.45μm和0.22μm的濾膜分別過濾、灌裝、通氮，再封裝、滅菌即可。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射液的制備方法，其特征在于，所述的腦蛋白水解物原液中的氨基酸為門冬氨酸2.40~3.60mg/ml、蘇氨酸0.21~0.39mg/ml、絲氨酸0.21-0.39mg/ml、谷氨酸3.20~4.80mg/ml、甘氨酸1.20-1.80mg/ml、丙氨酸2.40~3.60mg/ml、纈氨酸1.60~2.40mg/ml、蛋氨酸0.35~0.65mg/ml、異亮氨酸1.60~2.40mg/ml、亮氨酸4.80~7.20mg/ml、苯丙氨酸1.60~2.40mg/ml、賴氨酸4.80~7.20mg/ml、組氨酸1.04~1.56mg/ml、精氨酸0.30~1.10mg/ml、色氨酸0.350.65mg/ml和脯氨酸1.602.40mg/ml。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射液的制備方法，其特征在于，所述的活性炭用量為每1萬ml注射液需活性炭1.5g，所述的滅菌是在12rC的條件下滅菌10分鐘。4、根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的注射液的制備方法，其特征在于，所述的混合液中每100ml含總氨基酸281~421mg、腦蛋白水解物按總氮量計(jì)5567mg、氯化鈉0.855~0.945g，PH控制在6.9~7.5，每1ml含內(nèi)毒素小于0.5EU。全文摘要本發(fā)明公開了一種腦蛋白水解物氯化鈉注射液的制備方法。制備時(shí)先稱量90克氯化鈉，加入3000ml注射用水溶解，加入活性炭、靜置，脫炭過濾，再加入注射用水至8000ml，配成氯化鈉溶液；量取腦蛋白水解物原液1000ml，用8000道爾頓超濾膜超濾，將濾液加入氯化鈉溶液中，再加入注射用水至10000ml，攪拌、使混合均勻，向混合液中通入氮?dú)?；將混合液?jīng)0.45μm和0.22μm的濾膜分別過濾、灌裝、通氮，再封裝、滅菌即可。本發(fā)明的注射液可直接用于臨床，使用時(shí)無需再次稀釋，避免了二次污染，提高了藥品的安全性，方便臨床使用；生產(chǎn)中只進(jìn)行一次超濾，操作簡化。文檔編號(hào)A61K38/01GK101204576SQ20071019309公開日2008年6月25日申請(qǐng)日期2007年12月12日優(yōu)先權(quán)日2007年12月12日發(fā)明者王憲堂申請(qǐng)人:新鄉(xiāng)市奇利生物技術(shù)工程有限公司