專利名稱：：含有乙酰環(huán)丙基多西他賽和曲妥單抗的抗腫瘤組合物的制作方法含有乙酰環(huán)丙基多西他賽和曲妥單抗的抗腫瘤組合物本發(fā)明涉及能有效用于治療腫瘤性疾病的乙酰環(huán)丙基多西他賽和曲妥單抗(商品名為赫塞汀)的組合。乙酸環(huán)丙基泰索帝的結(jié)構(gòu)如下OCOCeH通常，使用劑量隨待治療患者而不同，腹膜內(nèi)給藥的劑量為l到100mg/kg，靜脈內(nèi)給藥的劑量為1到100mg/kg?？笶rbB2的單克隆抗體(也被稱作曲妥單抗)在EP153114中被描述為鼠科動物抗體，該抗體結(jié)合人類乳腺癌抗原，所述抗原還結(jié)合有選自一系列雜交瘤的參比抗體。所述雜交瘤包括ATCCHB8488(260F9),ATCCHB84卯(113F1),ATCCHB8486(266B2),ATCCHB8484C11),ATCCHB8697(33F8),ATCCHB8485(317G5),ATCCHB8696(520C9)ATCCHB8662(260F9-1C9)。赫塞汀通過大規(guī)模培養(yǎng)的基因工程中國倉鼠卵巢(ChineseHamsterOvary(CHO))細(xì)胞系分泌抗體至培養(yǎng)基中生產(chǎn)。使用標(biāo)準(zhǔn)色譜和過濾的方法從CHO培養(yǎng)基中提純該抗體。赫塞汀是在全世界注冊的商品。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，當(dāng)乙酰環(huán)丙基多西他賽與至少一種在抗癌治療中發(fā)明中限于曲妥單抗或赫賽汀的物質(zhì)聯(lián)合給藥時，乙酰環(huán)丙基多西他賽的效果會有相當(dāng)程度的提高。此外，由于產(chǎn)品的作用依賴于使用劑量，可以通過結(jié)合使用乙酰環(huán)丙基多西他賽和造血型生長因子(例如G-CSF，GM-CSF)或者某種促白血球素或者它們與其他具有治療作用的物質(zhì)的組合來使用低劑量、提高活性并且減少毒性現(xiàn)象或延緩毒性發(fā)作。本發(fā)明聯(lián)合藥物的改善效果可通過測定治療的協(xié)同作用來說明。如果療效優(yōu)于各組分在以最大耐受劑量單獨使用時的效果，所述聯(lián)合藥物顯示出治療的協(xié)同作用。為了說明聯(lián)合藥物的效果，在研究過程中有必要比較聯(lián)合藥物的最大耐受劑量與各單獨組分的最大耐受劑量。這個效果可以被量化，例如，如下方程式所確定的1og,。(被殺死的細(xì)胞)log,o(被殺死的細(xì)胞)=T-C(日)/3.32xTd其中T-C代表的是肺瘤生長的延遲，它是腫瘤治療組(T)和腫瘤治療組(C)達(dá)到預(yù)定值(例如lg)的平均時間，Td代表對照動物中腫瘤體積增大到2倍所需要的時間[T.H.Corbett等，Cancer.40，2660-2680(1977);F.MSchabel等，CancerDrugDevelopment,PartB，MethodsinC肌c6rRss6arch,17，3-51,NewYork,AcademicPressInc.(1979)]。如果log,o(被殺死的細(xì)胞)大于或等于0.7則認(rèn)為產(chǎn)品有效，如果logm(被殺死的細(xì)胞)大于2.8則認(rèn)為產(chǎn)品非常有效。以最大耐受劑量使用的聯(lián)合藥物，其中各組分的劑量沒有超過其最大耐受劑量，如果其logK)(被殺死的細(xì)胞)的值大于最佳組分單獨給藥時的log,o(被殺死的細(xì)胞)值，就顯現(xiàn)出治療協(xié)同作用。當(dāng)與各組分單獨使用時相比，如果logu)(被殺死的細(xì)胞)的差值大于1,則甚至可以認(rèn)為聯(lián)合藥物有更強(qiáng)的協(xié)同作用。通過以下方法可以實^^性地測定Jf關(guān)合藥物在固體腫瘤上的療效接受實驗的動物一般為小鼠。在第0天，在小鼠皮下雙向接種30-60mg肺瘤片斷。在接受各種治療試驗和對照試驗之前，將患有腫瘤的動物混合在一起。對于晚期腫瘤的治療，允許腫瘤生長到期望的大小，剔出肺瘤沒有充分生長的動物。將選定的動物隨^L分組進(jìn)行治療試驗和對照試驗。為了從腫瘤特定的效果中分辨出毒性作用，對未患有腫瘤的動物進(jìn)行同患有腫瘤的動物一樣的治療?；瘜W(xué)療法通常從接種后的第3到22天開始，這取決于腫瘤的類型，每天觀察動物。對不同的動物組每周稱重3或4次直至達(dá)到最大失重，然后對該組進(jìn)行每周至少一次的稱重直到試驗結(jié)束。每周測量腫瘤2或3次直到腫瘤達(dá)到大約2g;如果腫瘤達(dá)到2g前動物死亡，則每周測量肺瘤2或3次直到直到動物死亡。將死亡的動物進(jìn)行尸體解剖。根據(jù)記錄的不同參數(shù)確定抗腫瘤活性。在一項關(guān)于白血病的聯(lián)合藥物的研究中，給動物接種特定數(shù)量的細(xì)胞，通過與對照組對比受治療小鼠的存活時間的增加來確定抗腫瘤活性。如果存活時間增加大于27%，則認(rèn)為該產(chǎn)品具有活性；如果增加大于75%，則認(rèn)為對P388白血病非常有效。在如下表格中舉例給出了乙酰環(huán)丙基多西他賽同赫賽汀的聯(lián)合藥物在以最適合劑量使用時得到的結(jié)果。通過帶有皮下移植腫瘤的小鼠來評估乙酰環(huán)丙基多西他賽同赫賽汀的聯(lián)合藥物。用于評估各聯(lián)合藥物的腫瘤模型通?；谀[瘤模型對各種藥物單用治療時的反應(yīng)性來選擇。使用周期性靜脈注射方案，對每種藥物及每種聯(lián)合藥物進(jìn)行全劑量反應(yīng)試驗。在此處，選定的腫瘤是來源于惡性胸腔積液的人類乳腺癌UISO-BCA-l。原發(fā)腫瘤是分化良好的浸潤性乳腺導(dǎo)管癌。實施了乳房切除術(shù)后(postmasectomy)的放射線療法。在治療左鎖骨上腫塊后三年進(jìn)行化學(xué)療法(IO個療程，用環(huán)磷酰胺、甲氨蟲泉呤、5-Fu和他莫昔芬)。治療后一個月在疾病發(fā)展中對腫瘤細(xì)胞抽取樣品^Me/2to等，7卯"。通過植入棵鼠2.107個細(xì)胞建立該腫瘤模型，通過連續(xù)皮下移植作為腫瘤碎片維持下來。使用液式細(xì)胞術(shù)，UISO-BCA-l肺瘤表達(dá)HER-2，而不表達(dá)PgP(mdr)。5異種移植物對多西他賽具有耐藥性，對乙酰環(huán)丙基多西他賽及5-氟尿嘧啶具有敏感性，對于阿霉素、環(huán)磷酰胺及長春新堿具有較低敏感性。研究被安排成3組劑量反應(yīng)-單獨使用乙酰環(huán)丙基多西他賽(52.1-12.4mg/kg/靜脈注射，第17、21、25天)。-單獨使用赫賽汀(40-2.5mg/kg/sc注射，第17、21、25、29天)。-聯(lián)合使用，兩種藥物同時注射。使用了如下的終點>誘發(fā)20%體重減輕或者〉10%藥物死亡時的劑量表示毒性，由log(被殺死的細(xì)胞)=(T-C)/[3.32x(胂瘤倍增時間(天))]確定最大無毒劑量(HNTD)。(T代表經(jīng)治療小鼠達(dá)到lg的時間，C代表對照小鼠達(dá)到同樣大小的時間(26.2天))。1og(被殺死的細(xì)胞)小于0.7說明沒有抗腫瘤活性，1og0皮殺死的細(xì)胞)大于2.8說明具有高的治療活性。反應(yīng)速率部分消退(PR)相當(dāng)于消退大于最初腫瘤載荷的50%，完全消退(CR)相當(dāng)于消退到低于觸診的極限。治療協(xié)同作用如果與單獨-使用任意藥物相比更具有活性，則聯(lián)合藥物具有治療協(xié)同作用(log(被殺死的細(xì)胞)的值至少為1)。乙酸環(huán)丙泰索帝同赫賽汀組合物治療棵鼠體中異種移M類乳房腫瘤UISO國BCA-l<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>腫瘤倍增時間=5.0天。每組腫瘤載荷中值-125mg。對照組達(dá)到lg的天數(shù)=26.2天使用的縮寫bwl=體重減輕，T-C-腫瘤生長延遲，CR-完全消退這種聯(lián)合藥物具有協(xié)同作用，與觀察到的最好的單獨藥物乙酰環(huán)丙基多西他賽相比，具有高出1個log(被殺死的細(xì)胞)值的更強(qiáng)的活性。在本試驗中，重要的是要注意到，與單獨以最高無毒劑量的乙酰環(huán)丙基多西他賽的log(被殺死的細(xì)胞)值為1.3相比，以最高無毒劑量(每次注射32.3mg/kg，總劑量96.9mg/kg)給予乙酰環(huán)丙基多西他賽，同時給予最低劑量的赫賽汀(2.5mg/kg/天，總量10mg/kg)具有協(xié)同作用，其log(被殺死的細(xì)胞)值為2.6。另外，該聯(lián)合藥物得到了6/8完全消退及2/8長期無腫瘤存活的結(jié)果，單獨使用乙酰環(huán)丙基多西他賽的沒有消退。在該聯(lián)合藥物以7劑量水平時觀察到很好的抗腫瘤活性。特別是，所述聯(lián)合藥物的有益之處在于各組分可以按比各組分單獨使用時的劑量低得多的劑量來使用。上面的表格總結(jié)了研究中單獨藥物與各組聯(lián)合藥物的治療反應(yīng)及最高無毒劑量。因此，本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明的聯(lián)合藥物的藥物組合物。組成所述聯(lián)合藥物的各組分可以同時、半同時、單獨地或者間隔一段時間給藥，以達(dá)到該聯(lián)合藥物的最大功效；在給藥過程中，給藥方式可由快速給藥變?yōu)檫B續(xù)輸液。結(jié)果，就本發(fā)明而言，所述聯(lián)合藥物不僅僅局限于通過各組分間物理結(jié)合得到的產(chǎn)物，而且還包括那些容許同時或者隔段時間單獨給藥的聯(lián)合藥物。本發(fā)明的組合物是優(yōu)選可以通過腸胃外(parentally)給藥的組合物。但是就局部區(qū)域治療的情況，所述組合物可以經(jīng)口服、皮下或腹膜內(nèi)給藥。用于腸胃外給藥(parentaladministration)的組合物通常為藥學(xué)上可接受的無菌溶液或者懸浮液，任選在使用的時候可以按需制備。對于非水溶液或混浮液制劑，可以使用天然植物油，如橄欖油、芝麻油或液體石油；或者可以注射的有機(jī)酯類，如油酸乙酯。無菌水溶液可以由產(chǎn)品的水溶液組成。只要適當(dāng)?shù)恼{(diào)整pH值并且使溶液等滲(例如使用足量的氯化鈉或葡萄糖)，水溶液也適合靜脈給藥?？梢圆扇〖訜峄蛘咂渌粫?fù)面影響組合物的方式滅菌。聯(lián)合藥物也可采用脂質(zhì)體的形式或者與環(huán)糊精或聚乙二醇載體聯(lián)合使用的形式。用于口服、皮下或腹膜內(nèi)給藥的組合物優(yōu)選為水混浮液或溶液。在本發(fā)明的聯(lián)合藥物中，可以同時、單獨或者間隔一段時間使用各組分，紫杉烷衍生物的量占聯(lián)合藥物重量的10-90%十分有利，可以依據(jù)相關(guān)物質(zhì)的性質(zhì)、所需達(dá)到的療效及待治療癌癥的性質(zhì)改8變含量。本發(fā)明的聯(lián)合藥物在治療乳腺癌、卵巢癌、肺癌及黑色素瘤、白血病方面十分有用。它們可以主要用于對于通常使用的紫杉烷類化合物(taxoids)如泰索或泰索帝具有耐藥性的癌癥的治療。它們優(yōu)選用于對泰索和/或泰索帝具有耐藥性的乳腺癌。權(quán)利要求1.一種聯(lián)合藥物，所述聯(lián)合藥物包含式1的化合物或者，以及至少一種抗ErbB2的單克隆抗體2.權(quán)利要求l的聯(lián)合藥物，所述聯(lián)合藥物還包括造血類型的生長因子。3.式1化合物在制備用于治療對紫杉烷類化合物具有耐藥性的癌癥的權(quán)利要求1的聯(lián)合藥物中的用途。全文摘要描述了一種由以下組分組成的藥物組合物乙酸環(huán)丙基泰索帝或其衍生物，以及烷基化劑、抗代謝物、紡錘體抑制劑、表葉毒素、抗生素、酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、鉑配位復(fù)合物、生物反應(yīng)修飾劑、生長因子抑制劑中的至少一種。文檔編號A61K39/395GK101495144SQ200780028690公開日2009年7月29日申請日期2007年7月31日優(yōu)先權(quán)日2006年8月3日發(fā)明者C·弗羅蒙德,M·-C·比塞里,P·夫里格諾德申請人:賽諾菲-安萬特