專(zhuān)利名稱(chēng)：環(huán)胞菌素組合物的制作方法
環(huán)胞菌素組合物相關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)基于以下臨時(shí)申請(qǐng)，并依據(jù)35 U. S. C. §120要求以下臨時(shí)申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán) 2006年7月25日提交的系列號(hào)為60/820，239的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)；2006年10月17日提交的 系列號(hào)為60/829，796的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)；2006年10月17日提交的系列號(hào)為60/829，808的 美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)；2007年1月5日提交的系列號(hào)為60/883，525的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)；2007年5月 7日提交的系列號(hào)為60/916，352的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)；以及2006年12月11日提交的系列號(hào) 為60/869,459的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)；這其中的每一份臨時(shí)申請(qǐng)均通過(guò)援引全文納入本申請(qǐng)。
背景技術(shù)：
與淚腺功能或與流淚相關(guān)的異常通常會(huì)給遇受這類(lèi)異常的哺乳動(dòng)物帶來(lái)不適。


圖1將三種0. 05%環(huán)胞菌素A制劑中的一種單次局部滴注至新西蘭白兔的雙側(cè) 眼部后的平均(士 SD)角膜環(huán)胞菌素A濃度(半對(duì)數(shù))。圖2將三種0.05%環(huán)胞菌素A制劑中的一種單次局部滴注至新西蘭白兔的雙側(cè) 眼部后的平均(士 SD)結(jié)膜環(huán)胞菌素A濃度(半對(duì)數(shù))。圖3將三種0.05%環(huán)胞菌素A制劑中的一種單次局部滴注至新西蘭白兔的雙側(cè) 眼部后的平均(士 SD)鞏膜環(huán)胞菌素A濃度(半對(duì)數(shù))。圖4將三種0.05%環(huán)胞菌素A制劑中的一種單次局部滴注至新西蘭白兔的雙側(cè) 眼部后的平均(士 SD)瞼緣環(huán)胞菌素A濃度(半對(duì)數(shù))圖5將三種0.05%環(huán)胞菌素A制劑中的一種單次局部滴注至新西蘭白兔的雙側(cè) 眼部后的平均(士SD)鼻淚管環(huán)胞菌素A濃度(半對(duì)數(shù))。
具體實(shí)施例方式本文公開(kāi)了一種組合物，它含有濃度介于約0. 0001% (w/v)至約0. 05% (w/v)以 下的環(huán)胞菌素A。我們意外地發(fā)現(xiàn)，可制備具有治療效果的濃度為約0.05% (w/v)以下的環(huán)胞菌素 A的組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，將本文所公開(kāi)的組合物給予對(duì)其有所需的哺乳動(dòng)物的眼睛， 以增強(qiáng)或恢復(fù)淚腺流淚。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將本文所公開(kāi)的組合物給予對(duì)其有所需的哺乳動(dòng)物的眼 睛，以增加淚液缺乏眼睛中的淚液產(chǎn)生。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將本文所公開(kāi)的組合物給予對(duì)其有所需的哺乳動(dòng)物的眼 睛，以治療干燥性角膜結(jié)膜炎。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將本文所公開(kāi)的組合物給予對(duì)其有所需的哺乳動(dòng)物的眼 睛，以治療干眼病。
環(huán)胞菌素A環(huán)胞菌素A是具有免疫抑制性、結(jié)構(gòu)如上所示的環(huán)肽。已知它還具有其它名稱(chēng)，包 括環(huán)胞菌素、環(huán)胞菌素Α、環(huán)孢素和環(huán)孢素Α。治療方法一個(gè)實(shí)施方案是一種治療干眼病的方法，包括將含有濃度介于0.0001% (w/v)至 約0.05% (w/v)以下的環(huán)胞菌素A的組合物局部給予對(duì)其有所需的哺乳動(dòng)物。治療通常包括將本文所公開(kāi)組合物的10-50 μ L液滴局部給予所述哺乳動(dòng)物或人 的一只眼睛或雙眼。對(duì)每天給予人或哺乳動(dòng)物以提供有效緩解作用的液滴數(shù)的確定在本領(lǐng) 域普通技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物每天給予1至4次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物一天給予兩次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物一天僅給予一次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在將所述組合物一天僅給予一次達(dá)三個(gè)月時(shí)，不到14%的 患者會(huì)出現(xiàn)眼燒傷。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在將所述組合物一天僅給予一次達(dá)三個(gè)月時(shí)，不到10 %的 患者會(huì)出現(xiàn)眼燒傷。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在將所述組合物一天僅給予一次達(dá)三個(gè)月時(shí)，不到8%的患 者會(huì)出現(xiàn)眼燒傷。對(duì)于本申請(qǐng)的公開(kāi)內(nèi)容，“治療”、“醫(yī)治”或“療法”均指的是將化合物、組合物、具 有治療活性的試劑或藥物用于診斷、治愈、緩解、治療、預(yù)防疾病或其他不良病癥，或者用于 影響人或其他動(dòng)物的身體的結(jié)構(gòu)或任何功能。組合物環(huán)胞菌素A的濃度為約0.05%以下。這旨在表明，該濃度低于商購(gòu)的商標(biāo)名為 Restasis 的0. 05%環(huán)胞菌素A乳液中的濃度。在另一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)胞菌素A的濃度為約0. 005% (w/v)至約0. 04% (w/v)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)胞菌素A的濃度為約0. 02% (w/v)至約0. 04% (w/v)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)胞菌素A的濃度為約0. 005% (w/v)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)胞菌素A的濃度為約0. 015% (w/v)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)胞菌素A的濃度為約0. 02% (w/v)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)胞菌素A的濃度為約0. 03% (w/v)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)胞菌素A的濃度為約0. 04% (w/v)。
配制可眼用的液體，從而使得可將其局部給予眼睛。舒適度應(yīng)該最大到能夠?qū)崿F(xiàn) 的程度，但是有時(shí)制劑考慮因素(如藥物穩(wěn)定性、生物利用度等)可能迫使舒適度不能達(dá)到 最理想。在舒適度不能最大化的情況下，應(yīng)該制備液體，從而使得該液體局部眼部使用時(shí)為 患者所耐受。另外，可眼用的液體既可被包裝起來(lái)用于單次使用，也可含有防腐劑從而防止 在多次使用期間被污染。就眼部施用而言，通常使用生理鹽水溶液作為主要運(yùn)載體來(lái)制備溶液或藥劑。眼 用溶液通常通過(guò)合適的緩沖體系被維持在舒適的PH。所述制劑還可含有常規(guī)的可藥用防腐 齊U、穩(wěn)定劑和表面活性劑?？墒褂酶鞣N用于調(diào)整pH的緩沖劑和手段，只要所得到的制劑是可眼用的。因此， 緩沖劑包括但不限于乙酸鹽緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑和硼酸鹽緩沖劑。還可 根據(jù)需要使用酸和堿來(lái)調(diào)整這些制劑的PH。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物含有防腐劑。可用于本文公開(kāi)的藥物組合物的防腐劑包括但不限于陽(yáng)離子型防腐劑,例如季銨類(lèi)化合物,包括苯扎氯銨、polyquad等；基于胍的防腐劑,包括PHMB、氯己定等三氯叔丁醇；汞防腐劑,例如硫柳汞、醋酸苯汞和硝酸苯萊；和氧化防腐劑,例如穩(wěn)定的氧氯復(fù)合物(如Purite :)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物含有表面活性劑。表面活性劑可用于幫助溶解賦形劑或活性劑、分散組合物中的固體或液體、增加 濕度、改變液滴大小，或者基于多種其他目的用途。有用的表面活性劑包括但不限于以下類(lèi) 別的表面活性劑醇類(lèi)；氧化胺類(lèi)；嵌段聚合物類(lèi)；羧化的醇或烷基酚聚氧乙烯醚類(lèi)；羧酸 類(lèi)/脂肪酸類(lèi)；乙氧基化醇類(lèi)；乙氧基化烷基苯酚類(lèi)；乙氧基化芳基酚類(lèi)；乙氧基化脂肪酸 類(lèi)；乙氧基化脂肪酯類(lèi)或油類(lèi)(動(dòng)物油和植物油)；脂肪酯類(lèi)；脂肪酸甲酯乙氧基化物類(lèi)； 甘油酯類(lèi)；乙二醇酯類(lèi)；基于羊毛脂的衍生物；卵磷脂和卵磷脂衍生物；木質(zhì)素和木質(zhì)素衍 生物；甲酯類(lèi)；單酸甘油酯和衍生物；聚乙二醇；聚合物表面活性劑；丙氧基和乙氧基化脂 肪酸、醇類(lèi)或烷基苯酚類(lèi)；基于蛋白的表面活性劑；肌氨酸衍生物；失水山梨糖醇衍生物； 蔗糖和葡萄糖酯類(lèi)以及衍生物。具體而言，可使用乙氧基化物表面活性劑。乙氧基化物表面活性劑為具有-O(CH2CH2O)n-OH部分的表面活性劑，其中η至少為 約1。在一個(gè)實(shí)施方案中，η為約1至約10000。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為1至約1000。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為約1至約500。一些乙氧基化物含有一個(gè)乙氧基化物部分。換言之，在每個(gè)分子上均有單個(gè)乙氧 基化物鏈。具有乙氧基化物部分的表面活性劑的實(shí)例包括但不限于其中醇具有單個(gè)羥基單位的乙氧基醇類(lèi)；烷基酚聚氧乙烯醚類(lèi)；乙氧基脂肪酸類(lèi)；脂肪酸甲酯乙氧基化物類(lèi)；聚乙二醇等。乙氧基化物可含有一個(gè)以上的乙氧基部分。換言之，分子的幾個(gè)不同部分可連接 有乙氧基部分。實(shí)例包括但不限于嵌段聚合物；乙氧基化油類(lèi)；失水山梨糖醇衍生物；蔗 糖和葡萄糖乙氧基化物；等等。嵌段聚合物這些是具有結(jié)構(gòu)A-B-A’的聚合物，其中A和A’為一個(gè)或多個(gè)乙烯單 位的聚乙烯鏈，并且B為一個(gè)或多個(gè)丙烯單位的聚丙烯鏈。通常，但是并非必需，A和A’大
致一樣長(zhǎng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，A和A’含有約2至約200個(gè)乙烯單位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A和A’含有約5至約100個(gè)乙烯單位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A和A’含有約7至約15個(gè)乙烯單位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A和A’含有約7、約8或約12個(gè)乙烯單位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，B含有約25至約100個(gè)丙烯單位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，B含有約30至約55個(gè)丙烯單位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，B含有約30、約34或約54個(gè)丙烯單位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，分子量為約1000至約20000。在另一個(gè)實(shí)施方案中，分子量為約2000至約10000。在另一個(gè)實(shí)施方案中，分子量為約2500、約3000、約3800或約8400。這些包括但不限于泊洛扎林其中A具有約12個(gè)環(huán)氧乙烷單元，B具有約34個(gè)環(huán)氧丙烷單元，A'具 有約12個(gè)環(huán)氧乙烷單元，并且平均分子量為約3000。泊洛沙姆182 其中A具有約8個(gè)環(huán)氧乙烷單元，B具有約30個(gè)環(huán)氧丙烷單元，A' 具有約8個(gè)環(huán)氧乙烷單元，并且平均分子量為約2500。泊洛沙姆188 其中A具有約75個(gè)環(huán)氧乙烷單元，B具有約30個(gè)環(huán)氧丙烷單元， A'具有約75個(gè)環(huán)氧乙烷單元，并且平均分子量為約8400。泊洛沙姆331 其中A具有約7個(gè)環(huán)氧乙烷單元，B具有約54個(gè)環(huán)氧丙烷單元，A' 具有約7個(gè)環(huán)氧乙烷單元，并且平均分子量為約3800 ；乙氧基化醇類(lèi)這些包括但不限于具有約6至約20個(gè)碳原子的線(xiàn)性醇類(lèi)的乙氧基化物。在一個(gè)實(shí)施方案中，線(xiàn)性醇類(lèi)具有約10至約16個(gè)碳原子。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為約1至約100。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為約1至約50。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為約5至約50個(gè)環(huán)氧乙烷單元。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為約1至約20個(gè)環(huán)氧乙烷單元。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為約30至約50個(gè)環(huán)氧乙烷單元。乙氧基化烷基苯酚類(lèi)這些是被乙氧基化的烷基苯酚類(lèi)，即酚OH由乙氧基化部分取代。這些包括但不限于辛基苯酚聚氧乙烯醚，即C8H17Ph (OCH2CH2O)ηΗ。
壬基苯酚聚氧乙烯醚，即C9H19Ph (OCH2CH2O)nH。其中η為約1至約100的上式的烷基苯酚。其中η為約1至約50的上式的烷基苯酚。其中η為約9至約15的上式的烷基本酚。辛基苯酚1.5摩爾聚氧乙烯醚(即η平均為約1.5)；辛基苯酚5摩爾聚氧乙烯醚； 辛基苯酚7摩爾聚氧乙烯醚；辛基苯酚9摩爾聚氧乙烯醚；辛基苯酚12摩爾聚氧乙烯醚； 辛基苯酚40摩爾聚氧乙烯醚；壬基苯酚1. 5摩爾聚氧乙烯醚；壬基苯酚4摩爾聚氧乙烯醚； 壬基苯酚6摩爾聚氧乙烯醚；壬基苯酚9摩爾聚氧乙烯醚；壬基苯酚10摩爾聚氧乙烯醚； 壬基苯酚10. 5摩爾聚氧乙烯醚；壬基苯酚12摩爾聚氧乙烯醚；壬基苯酚15摩爾聚氧乙烯 醚；壬基苯酚15摩爾聚氧乙烯醚；壬基苯酚30摩爾聚氧乙烯醚；和壬基苯酚40摩爾聚氧 乙烯醚；乙氧基化脂肪酸類(lèi)這些包括但不限于被酯化來(lái)形成以下物質(zhì)的乙氧基化物單酯類(lèi)，即RCO2 (CH2CH2O)nOH,其中RCO2H為脂肪酸；或者二酯類(lèi)，即 RCO2 (CH2CH2O) nC ( = 0) R。脂肪酸包括但不限于飽和脂肪酸類(lèi)，它們不具有C = C部分，包括肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、山 酸、木蠟酸。不飽和脂肪酸類(lèi)，包括以下的單不飽和脂肪酸類(lèi)，它們具有一個(gè)C = C基團(tuán)，例如棕櫚油酸、油酸和神經(jīng)酸；雙不飽和脂肪酸類(lèi)，它們具有兩個(gè)C = C基團(tuán)，例如亞油酸；三不飽和脂肪酸類(lèi)，它們具有三個(gè)C = C基團(tuán)，例如α-亞麻酸和Y-亞麻酸；四不飽和脂肪酸類(lèi)，它們具有四個(gè)C = C基團(tuán)，例如花牛四烯酸；五不飽和脂肪酸類(lèi)，它們具有五個(gè)C = C基團(tuán)，例如二十碳五烯酸。還可使用以下的月桂酸；14碳脂肪酸例如肉豆蔻酸；16碳脂肪酸例如棕櫚酸和棕櫚油酸；18碳脂 肪酸例如硬脂酸、油酸、亞油酸、α-亞麻酸和Y-亞麻酸；20碳脂肪酸例如二十碳五烯酸； 22碳脂肪酸例如花生酸；和24碳脂肪酸例如木蠟酸和神經(jīng)酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，η為約2至約100。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為約5至約50。在另一個(gè)實(shí)施方案中，η為約30至50。乙氧基化脂肪酯類(lèi)或油類(lèi)(動(dòng)物油和棺物油)。這些物質(zhì)是環(huán)氧乙烷與脂肪酯或油反應(yīng)得到的產(chǎn)物。在使用脂肪油時(shí)，產(chǎn)物為存 在于油中的脂肪酸的乙氧基化物、甘油的乙氧基化物、甘油單酯和甘油二酯的乙氧基化物 等的混合物。具體的實(shí)例包括但不限于以下油類(lèi)的乙氧基化物茴香油、蓖麻油、丁香油、山扁豆油、肉桂油；杏仁油、玉 米油(Corn oil)、花生油(Arachis oil)、棉籽油、紅花油、玉米油(Maize oil)、亞麻子油、菜籽油、大豆油、橄欖油、草貢蒿油、迷迭香油、花生油(Peanut oil)、薄荷油、葵花子油、桉 樹(shù)油和芝麻油；芫荽油、熏衣草油、香茅油、檜油、檸檬油、橙皮油、鼠尾草油、肉豆蔻油、茶樹(shù) 油、椰子油、動(dòng)物脂油和豬油；在一個(gè)實(shí)施方案中，每摩爾油甘油三酯使用1至約50摩爾的環(huán)氧乙烷。在另一個(gè)實(shí)施方案中，每摩爾油甘油三酯使用約30至約40摩爾的環(huán)氧乙烷。環(huán)氧乙烷還可與式為RCO2R'的脂肪酸酯反應(yīng)，形成RCO2(CH2CH2O)nR’。因此，式為 RCO2(CH2CH2O)nR'的表面活性劑也在考慮之中，其中RCO2H*脂肪酸，并且R’為具有1_6個(gè) 碳的烷基。一個(gè)實(shí)施方案是脂肪酸甲酯乙氧基化物，其中R’為甲基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，RCO2H*月桂酸；14碳脂肪酸例如肉豆蔻酸；16碳脂肪酸例 如棕櫚酸和棕櫚油酸；18碳脂肪酸例如硬脂酸、油酸、亞油酸、α -亞麻酸和γ -亞麻酸；20 碳脂肪酸例如二十碳五烯酸；22碳脂肪酸例如花生酸；或者24碳脂肪酸例如木蠟酸和神經(jīng)酸。聚乙二醇為未被取代的或者兩端以氧結(jié)束的乙氧基化物,即HO(CH2CH2O)nH,失水山梨糖醇衍牛物這些物質(zhì)是一條或多條乙氧基化的鏈冠以脂肪酸的乙氧基化山梨酸酯。例如，聚 山梨酯80具有一個(gè)油酸帽，如下面的結(jié)構(gòu)式所示。 這些化合物被命名為失水山梨糖醇聚氧乙烯(w+x+y+z)醚單(或二或三)脂肪酸 酉旨(POE (w+x+y+z)sorbitan mono (or di-or tri-)fatty acid)。例如，聚山梨酯80為失水山梨糖醇聚氧乙烯(20)醚單油酸酯(P0E(20)Sorbiten monooleate)0因此，括號(hào)中的數(shù)目為分子中環(huán)氧乙烷單元的總數(shù)，并且末尾為酸帽的數(shù)目和帽化酸。這些包括但不限于其中環(huán)氧乙烷單元的總數(shù)為3至30的失水山梨糖醇衍生物；其中環(huán)氧乙烷單元的總數(shù)為4、5或20的失水山梨糖醇衍生物；其中帽化酸為月桂酸、棕櫚酸、硬脂酸或油酸的失水山梨糖醇衍生物；失水山梨糖醇衍生物可為失水山梨糖醇聚氧乙烯醚單月桂酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯醚二月桂酸酯失水山梨糖醇聚氧乙烯醚三月桂酸酯失水山梨糖醇聚氧乙烯醚單棕櫚酸酯失水山梨糖醇聚氧乙烯醚二棕櫚酸酯
失水山梨糖醇聚氧乙烯醚三棕櫚酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯醚單硬脂酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯醚二硬脂酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯醚三硬脂酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯醚單油酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯醚二油酸酯；或失水山梨糖醇聚氧乙烯醚三油酸酯；具體實(shí)例包括失水山梨糖醇聚氧乙烯(20)醚單月桂酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯(4)醚單月桂 酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯(20)醚單棕櫚酸酯；聚氧乙烯(20)醚單硬脂酸酯；失水山梨 糖醇聚氧乙烯(20)醚單硬脂酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯(4)醚單硬脂酸酯；失水山梨糖 醇聚氧乙烯(20)醚三硬脂酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯(20)醚單油酸酯；失水山梨糖醇 聚氧乙烯(20)醚15單油酸酯；失水山梨糖醇聚氧乙烯(5)醚10單油酸酯；失水山梨糖醇 聚氧乙烯(20)醚三油酸酯；以及蔗糖和葡萄糖酯以及衍牛物盡管有很多基于蔗糖和葡萄糖的表面活性劑，但是仍有一些蔗糖和葡萄糖酯皿 衍生物與上文描述的山梨酸酯衍生物相似。換言之，糖的一個(gè)、幾個(gè)或全部羥基部分被乙氧 基化，并且一條或多條乙氧基化的鏈被冠以羧酸。其他蔗糖和葡萄糖酯僅被乙氧基化，但不 具有帽化的羧酸。其他蔗糖和葡萄糖酯可被乙氧基化并冠以通過(guò)與醇反應(yīng)形成的烷基基 團(tuán)。其他蔗糖和葡萄糖酯可為如下糖的酯或醚該糖具有疏水鏈，且該糖的其它位置存在乙 氧基化物取代。各種有用的運(yùn)載體可用于本文公開(kāi)的眼用制劑中。這些運(yùn)載體包括但不限于聚乙 烯醇、聚維酮、羥丙基甲基纖維素、泊洛沙姆、羧甲基纖維素、羥乙基纖維素和丙烯酸酯(如 Pemulen ) °張度調(diào)節(jié)劑可根據(jù)需要或在合適時(shí)加入。它們包括但不限于鹽類(lèi)，尤其是氯化鈉、 氯化鉀，甘露醇和甘油，或者任何其他合適的可眼用張度調(diào)節(jié)劑。在相似的情況下，可眼用的抗氧化劑包括但不限于偏亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、乙 酰半胱氨酸、丁羥茴醚和丁羥甲苯?？砂谘塾弥苿┲械钠渌x形劑組分為螯合劑。一種有用的螯合劑為乙二胺四 乙酸二鈉，但是其他螯合劑也可代替它或與之聯(lián)用。組合物可為水溶液或乳液或者一些其他可接受的液體形式。對(duì)于乳液而言，可使 用一種或多種油來(lái)形成該乳液，并且在某些情況下將需要一種或多種表面活性劑。合適的 油包括但不限于茴香油、蓖麻油、丁香油、山扁豆油、肉桂油、杏仁油、玉米油(corn oil)、花 生油(arachis oil)、棉籽油、紅花油、玉米油(Maize oil)、亞麻子油、菜籽油、大豆油、橄欖 油、草貢蒿油、迷迭香油、花生油(peanut oil)、薄荷油、葵花子油、桉樹(shù)油、芝麻油等。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物為水溶液。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物不含乙醇。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物不含透明質(zhì)酸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物不含維生素E TPGS0
在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物不含環(huán)糊精A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物不含環(huán)糊精。實(shí)施例1 純水組合物P、A、B和C依以下步驟制備。1.量取至一次生產(chǎn)量的約90%的純水并置于合適的燒杯或容器內(nèi)。2.用強(qiáng)力攪拌器(Rotosolver)開(kāi)始混合該水，以獲得強(qiáng)的渦流。3.將事先稱(chēng)重的羧甲基纖維素鈉加入該強(qiáng)的渦流中。繼續(xù)強(qiáng)烈混合至少1小時(shí)。4.將攪拌器調(diào)到較低速度。5.加入并溶解事先稱(chēng)重的聚山梨酯80。6.加入并溶解事先稱(chēng)重的甘油。7.加入并溶解事先稱(chēng)重的甘露醇。8.加入并溶解事先稱(chēng)重的二水檸檬酸鈉。9.加入并溶解事先稱(chēng)重的硼酸。10.加入并溶解事先稱(chēng)重的十水硼酸鈉。11.加入并溶解事先稱(chēng)重的氯化鉀。12.檢查pH，并在必要時(shí)進(jìn)行調(diào)整。目標(biāo)pH為7. 5+/-0. 1。13.加入并溶解事先稱(chēng)重的Purite。14.加入充足量的純水，以達(dá)到最終的一次生產(chǎn)量體積。這將得到最終的安慰劑制 劑(P)。
制備0.03% (A). 0. 04% (B) .0. 05% (C)的步驟15.量取滿(mǎn)足一次生產(chǎn)量要求所需的確切量的安慰劑(9815X)，并置于含有磁力 攪拌子的培養(yǎng)基瓶。16.加入并溶解事先稱(chēng)重的環(huán)孢菌素。慢速攪拌，避免起泡。通常需要過(guò)夜混合來(lái) 完全溶解該環(huán)孢菌素。17.過(guò)夜混合結(jié)束之后，通過(guò)Millipore MiIligard預(yù)過(guò)濾器和PalISuporlife無(wú) 菌過(guò)濾器抽取該環(huán)胞菌素溶液，并以無(wú)菌方式收集該濾液。18.然后將該無(wú)菌濾液以無(wú)菌方式分配到適于眼用的多劑量滴瓶中。19.應(yīng)對(duì)終產(chǎn)物的環(huán)孢菌素試樣、pH、重量克分子滲透壓濃度、粘度、Purite、無(wú)菌 度和抗微生物效力進(jìn)行測(cè)驗(yàn)。20.終產(chǎn)物應(yīng)常溫保存并避光。實(shí)施例2制備以下制劑。以本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法制備D和E。F的制備與上文所述A-C 的制備相同，所不同的是用Pemulen TR-2代替羧甲基纖維素鈉，并且不加入檸檬酸鹽和硼 酸鹽緩沖液。 牛物利用度本文公開(kāi)和使用的組合物為哺乳動(dòng)物提供了治療有效量的環(huán)胞菌素A。然而，盡管無(wú)意于以任何方式局限本發(fā)明的范圍，但是所述組合物中環(huán)孢菌素A的濃度可顯著低 于通常與治療有效濃度相關(guān)的那些濃度。例如，一種商業(yè)化制劑——阿勒根公司出售的 Restasis ——為ο. 05%環(huán)胞菌素A蓖麻油乳液。當(dāng)前正在開(kāi)發(fā)的其他組合物濃度為0.1% 或更高。本文報(bào)道了兔體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)。但是，人們認(rèn)為兔實(shí)驗(yàn)是對(duì)于包 含人類(lèi)在內(nèi)的其他哺乳動(dòng)物而言的有用的生物利用度模型。因此，盡管生物利用度參數(shù)在 權(quán)利要求書(shū)中被公開(kāi)并表征，但是不應(yīng)將它們解釋為僅僅是針對(duì)兔的處理，而應(yīng)被解釋為 由在兔中的生物利用度所表征和定義的組合物同樣被考慮用于對(duì)其他哺乳動(dòng)物尤其是人 的處理。在一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物AA相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢菌 素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物BB相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物CC相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物DD相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢菌 素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物EE相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物FF相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物GG相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢菌 素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物HH相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物II相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物JJ相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物KK相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物L(fēng)L相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物MM相比，所述組合物為人的角膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物AA相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢菌 素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物BB相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物CC相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物DD相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢菌 素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物EE相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物FF相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物GG相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢菌 素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物HH相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物II相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物JJ相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物KK相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物L(fēng)L相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與組合物MM相比，所述組合物為人的結(jié)膜提供更多的環(huán)孢 菌素A。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥之后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供了至少約500ng環(huán)胞菌素A/克該 兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥之后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供了至少約IOOOng環(huán)胞菌素A/克 該兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥之后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供了至少約1400ng環(huán)胞菌素A/克 該兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥之后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供了至少約2000ng環(huán)胞菌素A/克 該兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥之后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供了至少約2400ng環(huán)胞菌素A/克 該兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥之后24小時(shí)期間，為該兔的角膜提供了至少約17000ng環(huán)胞菌素A/克該兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物為含0. 005%至約0. 04%環(huán)孢菌素A的水溶液， 其中局部給予雌性新西蘭兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組合物，為該兔的角膜提供了至 少約17000ng環(huán)胞菌素A/克角膜，這可通過(guò)以下方法測(cè)定將所述組合物局部給予15只雌性新西蘭白兔測(cè)試受試者中的每一只的每只眼 睛；并在給予所述受試者后約0. 5小時(shí)、約2小時(shí)、約6小時(shí)、約12小時(shí)和約24小時(shí)，測(cè)
定三名受試者的角膜中環(huán)孢菌素A的量；其中每名受試者的角膜中環(huán)孢菌素A的量?jī)H測(cè)定一次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予新西蘭兔每只眼睛的所述組合物為所述兔的角膜提供 了至少約30000ng環(huán)胞菌素A/克角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予新西蘭兔每只眼睛的所述組合物為所述兔的角膜提供 了至少約45000ng環(huán)胞菌素A/克角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予新西蘭兔每只眼睛的所述組合物為所述兔的角膜提供 了至少約95000ng環(huán)胞菌素A/克角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予新西蘭兔每只眼睛的所述組合物為所述兔的角膜提供 了至少約155000ng環(huán)胞菌素A/克角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥之后24小時(shí)的時(shí)間段內(nèi)，為該兔的結(jié)膜提供了至少約6000ng環(huán)胞菌 素A/克該兔的結(jié)膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物為含0. 005%至約0. 04%環(huán)孢菌素A的水溶液， 其中局部給予新西蘭兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組合物，為該兔的結(jié)膜提供了至少約 6000ng環(huán)胞菌素A/克結(jié)膜，這可通過(guò)以下方法測(cè)定將所述組合物局部給予15只雌性新西蘭白兔測(cè)試受試者中的每一只的每只眼 睛；并在給予所述受試者后約0. 5小時(shí)、約2小時(shí)、約6小時(shí)、約12小時(shí)和約24小時(shí)，測(cè)
定三名受試者的結(jié)膜中環(huán)孢菌素A的量；其中每名受試者的結(jié)膜中環(huán)孢菌素A的量?jī)H測(cè)定一次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予新西蘭兔每只眼睛的所述組合物為所述兔的結(jié)膜提供 了至少約5000ng環(huán)胞菌素A/克結(jié)膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予新西蘭兔每只眼睛的所述組合物為所述兔的結(jié)膜提供 了至少約7000ng環(huán)胞菌素A/克結(jié)膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予新西蘭兔每只眼睛的所述組合物為所述兔的結(jié)膜提供 了至少約IOOOOng環(huán)胞菌素A/克結(jié)膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予新西蘭兔每只眼睛的所述組合物為所述兔的結(jié)膜提供 了至少約17000ng環(huán)胞菌素A/克結(jié)膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)于每天兩次被局部給予其雙眼35微升液滴形式的所述 組合物達(dá)十二個(gè)月的人而言，其環(huán)胞菌素A的血液水平為0. lmg/mL以下。藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究1
將三種測(cè)試制劑之一的35 μ L等分試樣局部給予雌性新西蘭白兔(η = 3只兔/ 時(shí)間點(diǎn))的每只眼睛。在給藥后0.5、2、6、12、24、48和144小時(shí)，收集角膜、結(jié)膜、鞏膜、瞼 緣、鼻淚管和血樣。將從未經(jīng)實(shí)驗(yàn)的兔(η = 2)收集到的樣本作為給藥前樣本。血液中的 定量范圍為0. 2-40ng/mL，角膜和結(jié)膜中的為0. l-200ng，瞼緣和鼻淚管中的為0. I-IOOng, 鞏膜和淚腺中的為0. l-20ng。 在單次眼部滴注三種0. 05 %環(huán)孢菌素A制劑之一后的眼部組織中環(huán)孢菌素A的藥 物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié)在下表1中表1 NC =無(wú)法計(jì)算BLQ =低于定量限總之，在單次眼部滴注0. 05%環(huán)胞菌素A制劑之后，在使用組合物F時(shí)觀察到最高 的環(huán)胞菌素A眼組織暴露水平，其次為組合物E、再次為組合物D。材料測(cè)試物將上述的組合物D、E和F用于這些實(shí)驗(yàn)?；瘜W(xué)品、試劑和供應(yīng)商所有其他化學(xué)品均為試劑級(jí)或更高級(jí)別。動(dòng)物物種、品系、性別、年齡、體型、來(lái)源和鑒別重1. 8-2. 6kg 的雌性新西蘭白兔購(gòu)自 Charles River (St. Constant, Quebec, Canada)。永久性耳標(biāo)用來(lái)鑒別動(dòng)物。理由兔和人的眼部解剖學(xué)之間的相似性使兔成為非常好的動(dòng)物模型。動(dòng)物飼養(yǎng)所有動(dòng)物均圈養(yǎng)在配有時(shí)控?zé)晒鉄粝到y(tǒng)的環(huán)境受到控制的實(shí)驗(yàn)設(shè)施中，該時(shí)控?zé)?光燈系統(tǒng)提供了每日12小時(shí)光照/12小時(shí)避光期。室溫維持在61至72° F，并且相對(duì)濕度 介于30至70%。氣流范圍為每小時(shí)換氣10-30次。溫度、濕度和氣流由Edstrom Watchdog 系統(tǒng)第4.0版監(jiān)控。為這些動(dòng)物提供了合乎標(biāo)準(zhǔn)的兔高纖維膳食。由賣(mài)商提供膳食認(rèn)證和分析。沒(méi)有進(jìn)行制造商所提供的那些分析之外的分析。無(wú)限制提供由反向滲透處理純化得到的飲用 水。就可能干擾本研究進(jìn)行的任何污染物對(duì)水定期進(jìn)行分析。由制造商對(duì)動(dòng)物飼料進(jìn)行分析。動(dòng)物環(huán)境適應(yīng)在阿勒根公司適應(yīng)期間，就總體健康情況或行為的任何變化每天對(duì)動(dòng)物進(jìn)行觀 察。在開(kāi)始研究之前，將兔檢疫至少五天。在研究之前以及研究期間所有的動(dòng)物均表現(xiàn)為 健康的。動(dòng)物處死和處置通過(guò)將至少I(mǎi)mL戊巴比妥鈉注射到邊緣耳靜脈使動(dòng)物安樂(lè)死。研究設(shè)計(jì)和試驗(yàn)步驟研究設(shè)計(jì)表1研究設(shè)計(jì) 單次雙側(cè)給藥，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)3只兔(6只眼睛和3個(gè)血液樣本)。第4組的兩只動(dòng) 物沒(méi)有給藥，將其用作生物分析對(duì)照。給藥前，將65只動(dòng)物稱(chēng)重并將其分為四個(gè)研究組。研 究設(shè)計(jì)在表1中給出。這四個(gè)研究組在下表2中給出表2 η =每組的動(dòng)物數(shù)F =雌性處理前檢查在進(jìn)行研究之前，對(duì)每只動(dòng)物進(jìn)行體檢。使用標(biāo)準(zhǔn)化的數(shù)據(jù)收集表格，記錄下在給 藥之前以及眼部給藥之后隨即的總體觀察結(jié)果。隨機(jī)分組給藥之前，將65只動(dòng)物稱(chēng)重并隨機(jī)分為四個(gè)研究組。給藥步驟在研究的第0小時(shí)，通過(guò)雙側(cè)眼部滴注對(duì)動(dòng)物進(jìn)行一次給藥。臨給藥前，檢查眼睛的任何異常例如感染、紅眼或視力損害。僅使用沒(méi)有視力異常的動(dòng)物。將下眼瞼輕輕地拉 離眼睛。使用Gilson精度吸液管，將35 μ L給藥溶液滴注到每只眼睛的下結(jié)膜穹窿中。記 錄下給藥時(shí)間。輕輕地使眼睛閉合大約5秒鐘，以確保藥物均勻分布于眼睛中。給藥后對(duì) 眼部進(jìn)行總體觀察。就刺激指征對(duì)動(dòng)物(包括被給藥的眼睛)進(jìn)行主觀評(píng)價(jià)。記錄觀察結(jié)^ ο死亡率/發(fā)病率在研究期間觀察動(dòng)物的死亡率/發(fā)病率。體重在給藥前一天對(duì)動(dòng)物進(jìn)行稱(chēng)重，隨后進(jìn)行隨機(jī)分組。尸檢前血液采集在安樂(lè)死/尸檢前從每只兔采集血液。通過(guò)靜脈內(nèi)注射量為0. lmL/kg的氯胺酮 /賽拉嗪混合物(87mg/mL氯胺酮，13mg/mL賽拉嗪)來(lái)麻醉動(dòng)物。通過(guò)心臟穿刺采集血液。 大約有5mL血液被收集到IOmL淺紫蓋(K3EDTA)試管中。將血樣保存在約_15°C或約_15°C 以下，一直到進(jìn)行生物分析。安樂(lè)死在血液采集之后，通過(guò)靜脈內(nèi)注射商購(gòu)安樂(lè)死溶液使動(dòng)物安樂(lè)死。尸檢和眼組織收集在尸檢時(shí)，從雙眼收集眼部樣本，適合時(shí)將其沾干、稱(chēng)重并置于獨(dú)立的合適標(biāo)記的 硅烷化小瓶中。雙眼均用LENS PLUS ,沖洗，目的是洗去殘留在眼表面的殘余表面制劑。結(jié)膜將每只眼睛的上下結(jié)膜取出并放在一起，記錄下重量，置于各獨(dú)立的具有螺旋蓋 的玻璃13x100硅烷化試管中，并立即放到冰上。將樣本保存在約_15°C或低于約-15°C，一 直到進(jìn)行生物分析。角膜從每只眼睛取出整個(gè)角膜；記錄下重量，置于各獨(dú)立的具有螺旋蓋的玻璃13x100 硅烷化試管中，并立即放到冰上。將樣本保存在_15°C或_15°C以下，一直到進(jìn)行生物分析。鞏膜從每只眼睛取出鞏膜；記錄下重量，置于各獨(dú)立的具有螺旋蓋的玻璃13x100硅烷 化試管中，并立即放到冰上。將樣本保存在_15°C或_15°C以下，一直到進(jìn)行生物分析。鼻淚管取出含有與每只眼睛相連的鼻淚管的組織；記錄下重量，置于具有螺旋蓋的玻璃 13x100硅烷化試管中，并立即放到冰上。將樣本保存在_15°C或-15°C以下，一直到進(jìn)行生 物分析。瞼緣從每只眼睛取出瞼緣；記錄下重量，置于各獨(dú)立的具有螺旋蓋的玻璃13x100硅烷 化試管中，并立即放到冰上。將樣本保存在_15°C或_15°C以下，一直到進(jìn)行生物分析。樣本保存將血樣和眼部組織樣本保存在_15°C或_15°C以下，一直到進(jìn)行生物分析。生物分析
使用以下方法來(lái)對(duì)眼部組織和血液中的濃度進(jìn)行定量。通過(guò)在4°C下用2. OmL甲醇過(guò)夜浸漬來(lái)提取眼部組織樣本。隨后在室溫下用2. OmL 甲醇第二次浸漬并振蕩約一個(gè)小時(shí)。從總共4mL有機(jī)提取物(淚腺樣本的全部4mL均被分 析)中取出ImL等分試樣，并加入內(nèi)標(biāo)(20yL 500ng/mL的CsG)。將甲醇提取物蒸干，并用 200 μ L溶于50 50乙腈水中的2mM乙酸銨/0.4%甲酸重溶，用于LC MS/MS分析。用 于分析血樣的生物分析方法涉及到將內(nèi)標(biāo)CsG(10 μ L，500ng/mL)加入K3EDTA處理的兔血 的0. 5mL等分試樣中。在37°C下將血樣孵育30分鐘之后，用0. IN HCL(2mL)酸化樣本。將甲基叔丁 基醚(4mL)加入至各樣本并混合15分鐘。取出有機(jī)層并通過(guò)加入0. IN NaOH(2mL)使 其堿化。將有機(jī)提取物從水層分離出來(lái)、蒸干并用200yL溶于50 50乙腈水中 的2mM乙酸銨/0.4%甲酸重溶，用于LC MS/MS分析。使用PE Sciex API 3000質(zhì)譜儀 (Applied Biosystems, Foster City, CA)、Leap 自動(dòng)采樣儀(Carrboro，NC)和 HPLC 泵 (ShimadzuScientific Instruments，Columbia，MD)，通過(guò)LC-MS/MS來(lái)分析所述重溶樣本的 等分試樣(50 μ L)。在 Keystone BDS C8 柱(3μπι，2. 1x50mm，65°C )上進(jìn)行反相 HPLC，溶液梯 度洗脫(A =溶于水的2mM乙酸銨/0. 4%甲酸和B =溶于乙腈的2mM乙酸銨/0. 4%甲酸)， 流速為0. 3mL/min。MRM分析中所使用的前體-產(chǎn)物離子對(duì)為CSA的1203 (MH)+->425.5 和IS (環(huán)孢菌素G)的m/zl217 (MH)+^> 425.5。總分析時(shí)間為5分鐘，CsA和CsG的保 留時(shí)間分別為約1. 82和1. 86分鐘。數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)收集 處理前后全面眼部檢查 體重在前1天隨機(jī)化 給藥記錄 死亡率/發(fā)病率眷血樣尸檢前 眼組織樣本尸檢后數(shù)據(jù)計(jì)算和離群值分析除因合理的原因被漏掉的數(shù)據(jù)之外，原始數(shù)據(jù)中所有的數(shù)據(jù)均用于計(jì)算。藥物代謝動(dòng)力學(xué)分析Thermo Electron Watson (Philadelphia，PA)禾口Microsoft Excel (Redmond， Washington)用于藥物代謝動(dòng)力學(xué)計(jì)算。使用已知的非分割法來(lái)計(jì)算下列藥物代謝動(dòng)力學(xué)
( Tang-Lui, et. Al. PharmaceuticalResearch, Vol 5，No. 4，1988，238—241) 。 $ 可能的情況下，使用描述性統(tǒng)計(jì)學(xué)例如平均值和標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)描述藥物代謝動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)。濃度 時(shí)間曲線(xiàn)下面積(AUC)值被記錄為復(fù)合AUC，并且在可能的情況下，被記錄為平均值的士標(biāo) 準(zhǔn)誤差(SEM)。 低于定量限的數(shù)值和數(shù)字舍入如果用于計(jì)算平均值的一半以上的濃度值低于定量限(BLQ)，則在統(tǒng)計(jì)學(xué)上被表 示為無(wú)法計(jì)算(NC)。如果一半或一半以上的數(shù)值是可以計(jì)量的，則任何BLQ數(shù)值均由數(shù)值 “0”代替，并且由這些被代替的數(shù)值來(lái)計(jì)算平均值及其標(biāo)準(zhǔn)差(SD)。計(jì)算各處理組內(nèi)每個(gè) 采樣時(shí)間點(diǎn)的平均值以及平均值的標(biāo)準(zhǔn)差。在樣本數(shù)小于等于2時(shí)，僅列出平均值。所有 平均值均被記錄到3位有效數(shù)字，并且標(biāo)準(zhǔn)差記錄到的小數(shù)位與其各自的平均值相同。方案變化ο在時(shí)間點(diǎn)6小時(shí)收集眼組織樣本之前，不用Lens P1US 沖洗眼睛來(lái)洗去任何殘 留在眼表面的殘余表面制劑。由于該藥物通常會(huì)由眼表面快速吸收，因此認(rèn)為該改變對(duì)于 該研究所得到的結(jié)果影響甚微。另外，在6小時(shí)期間的兔眨眼同樣應(yīng)該會(huì)起到清除任何殘 余表面制劑的作用。ο縮略詞 注并非所有列出的縮略詞都會(huì)出現(xiàn)在此報(bào)道中。結(jié)果和討論角膜平均濃度和藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié)在表3和4中。單次雙側(cè)眼部給予兔三種 0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，角膜中環(huán)孢菌素A的濃度-時(shí)間曲線(xiàn)示于圖1。表3向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后， 環(huán)胞菌素A的平均角膜濃度。
平均值表示η = 6的平均值a用于計(jì)算t1/2的濃度時(shí)間點(diǎn)表4向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，
環(huán)胞菌素A在角膜中的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
a0-144小時(shí)的AUC區(qū)間被用于這三種制劑的計(jì)算。組合物F在單次雙側(cè)眼部滴注組合物F后，環(huán)胞菌素A被快速吸收到角膜中，角膜峰濃度 (Cmax)為4050士 1220ng/g，出現(xiàn)在給藥后0. 500小時(shí)。到最后一個(gè)檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)的濃度-時(shí)間 曲線(xiàn)下面積(AUC0_t)值為 163000士7000ng · hr/g，并且 AUCch24 數(shù)值為 59000ng · hr/g。最 終的半衰期(t1/2)為41. 3小時(shí)，平均滯留時(shí)間(MRT)為50. 3小時(shí)。組合物E在單次雙側(cè)眼部滴注組合物E后，環(huán)胞菌素A被吸收到角膜中，Cmax值為1100士 190ng/g，出現(xiàn)在給藥后 2. 00 小時(shí)。AUC。_t 值為 76200士3300ng · hr/g,并且 AUCch24 值為22100ng · hr/g。最終的t1/2為41. 7小時(shí)，MRT為56. 5小時(shí)。組合物D在單次雙側(cè)眼部滴注組合物D后，環(huán)胞菌素A被吸收到角膜中，Cmax值為 536士 138ng/g，出現(xiàn)在給藥后 6. 00 小時(shí)。AUC0_t 值為 29300士2000ng .hr/g，并且 AUCch24 值 為9450ng · hr/g。最終的t1/2為49. 8小時(shí)，MRT為61. 6小時(shí)。結(jié)膜平均濃度和藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié)在表5和6中。單次雙側(cè)眼部給予兔三種 0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，結(jié)膜中環(huán)孢菌素A的濃度-時(shí)間曲線(xiàn)示于圖2。表5向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后， 環(huán)胞菌素A的平均結(jié)膜濃度。 平均值表示η = 6的平均值BLQ =低于定量限a用于計(jì)算t1/2的濃度時(shí)間點(diǎn)表6向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，
環(huán)胞菌素A在結(jié)膜中的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
a0-48小時(shí)的AUC區(qū)間用于計(jì)算b0-24小時(shí)的AUC區(qū)間用于計(jì)算組合物F在單次雙側(cè)眼部滴注組合物F后，環(huán)胞菌素A被快速吸收到結(jié)膜中，Cmax值為 4460士650ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC0_t 值為 18100士800ng · hr/g,并且 AUCch24 值為17100ng · hr/g。最終的t1/2為11. 3小時(shí)，MRT為7. 37小時(shí)。組合物E在單次雙側(cè)眼部滴注組合物E后，環(huán)胞菌素A被快速吸收到結(jié)膜中，Cmax值為 2560士 1070ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC。_t 值為 11600士700ng .hr/g。最終的 t1/2 為5. 57小時(shí)，MRT為5. 93小時(shí)。組合物D在單次雙側(cè)眼部滴注組合物D后，環(huán)胞菌素A被快速吸收到結(jié)膜中，Cmax值為 694士410ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC。_t 值為 5290士480ng · hr/g。最終的 t1/2 為 4. 55小時(shí)，MRT為6. 07小時(shí)。鞏膜平均濃度和藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié)在表7和8中。單次雙側(cè)眼部給予兔三種 0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，鞏膜中環(huán)孢菌素A的濃度-時(shí)間曲線(xiàn)示于圖3。表7向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后， 環(huán)胞菌素A的平均鞏膜濃度。 平均值表示η = 6的平均值BLQ =低于定量限a用于計(jì)算t1/2的濃度時(shí)間點(diǎn)表8向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，環(huán)胞菌素A在鞏膜中的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
a0-144小時(shí)的AUC區(qū)間用于計(jì)算b0-48小時(shí)的AUC區(qū)間用于計(jì)算組合物F在單次雙側(cè)眼部滴注組合物F后，環(huán)胞菌素A被快速吸收到鞏膜中，Cmax值為 545士98ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC0_t 值為 6110±260ng .hr/g，并且 AUCch24 值為 3900ng · hr/g。最終的 t1/2 為 29. 7 小時(shí)，MRT 為 25. 3 小時(shí)。組合物E在單次雙側(cè)眼部滴注組合物E后，環(huán)胞菌素A被快速吸收到鞏膜中，Cmax值為 136士43ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC0_t 值為 2840士 150ng .hr/g，并且 AUCch24 值為 1560ng · hr/g。最終的 t1/2 為 24. 8 小時(shí)，MRT 為 26. 7 小時(shí)。組合物D在單次雙側(cè)眼部滴注組合物D后，環(huán)胞菌素A被吸收到鞏膜中，Cmax值為 53. 0 士 10. 9ng/g，出現(xiàn)在給藥后 6. 00 小時(shí)。AUC0_t 值為 1040 士 50ng · hr/g,并且 AUCch24 值 為792ng · hr/g。最終的t1/2為18. 7小時(shí)，MRT為23. 8小時(shí)。瞼緣平均濃度和藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié)在表9和10中。單次雙側(cè)眼部給予兔三種 0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，瞼緣中環(huán)孢菌素A的濃度-時(shí)間曲線(xiàn)示于圖4。表9向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后， 環(huán)胞菌素A的平均瞼緣濃度。
平均值表示η = 6的平均值a用于計(jì)算t1/2的濃度時(shí)間點(diǎn)表10向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后， 環(huán)胞菌素A在瞼緣中的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)。 a0-144小時(shí)的AUC區(qū)間用于這三種制劑的計(jì)算組合物F在單次雙側(cè)眼部滴注組合物F后，環(huán)胞菌素A被快速吸收到瞼緣中，Cmax值為 3120士 1040ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC。_t 值為 38300士5300ng 'hr/g,并且 AUC。_24 值為19900ng · hr/g。最終的t1/2為42. 5小時(shí)，MRT為40. 5小時(shí)。組合物E在單次雙側(cè)眼部滴注組合物E后，環(huán)胞菌素A被快速吸收到瞼緣中，Cmax值為 2020士980ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC。_t 值為 42200士 10800ng 'hr/g,并且 AUCch24值為17600ng · hr/g。最終的t1/2為38. 1小時(shí)，MRT為38. 4小時(shí)。組合物D在單次雙側(cè)眼部滴注組合物D后，環(huán)胞菌素A被吸收到瞼緣中，Cmax值為 2450士970ng/g，出現(xiàn)在給藥后 2. 00 小時(shí)。AUC0_t 值為 27700士3300ng · hr/g,并且 AUCch24 值為18000ng · hr/g。最終的t1/2為24. 4小時(shí)，MRT為21. 9小時(shí)。鼻淚管平均濃度和藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié)在表11和12中。單次雙側(cè)眼部給予兔三種 0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，鼻淚管中環(huán)孢菌素A的濃度-時(shí)間曲線(xiàn)示于圖5。表11向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后， 環(huán)胞菌素A的平均鼻淚管濃度。 平均值表示η = 6的平均值BLQ =低于定量限表12向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后，
環(huán)胞菌素A在鼻淚管中的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
NC =無(wú)法計(jì)算a 0-144小時(shí)的AUC區(qū)間用于計(jì)算b 0-48小時(shí)的AUC區(qū)間用于計(jì)算。0_12小時(shí)的AUC區(qū)間用于計(jì)算d 0-12小時(shí)的時(shí)間間隔用于計(jì)算組合物F在單次雙側(cè)眼部滴注組合物F后，環(huán)胞菌素A被快速排入并隨后吸收到鼻淚管組 織中，C-值為 195士201ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC0_t 值為 2190士350ng hr/g, 并且 AUCq_12 值為 478士86ng hr/g。MRT 為 17. 6 小時(shí)。組合物E在單次雙側(cè)眼部滴注組合物E后，環(huán)胞菌素A被快速排入并隨后吸收到鼻淚管組 織中，C-值為 74. 4士20. 9ng/g，出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC0_t 值為 1190士210ng hr/ g，并且 AUC0_12 值為 465士 106ng hr/g。MRT 為 24. 7 小時(shí)。組合物D在單次雙側(cè)眼部滴注組合物D后，環(huán)胞菌素A被快速排入并隨后吸收到鼻淚管組 織中，C-值為 72. 0士91. 7ng/g,出現(xiàn)在給藥后 0. 500 小時(shí)。AUC0_t 值為 279士39ng hr/g。 MRT為12. 1小時(shí)。血液血液中環(huán)孢菌素A的平均濃度總結(jié)在表13。表13向新西蘭白兔的雙側(cè)眼部單次局部滴注三種0. 05%環(huán)孢菌素A制劑之一后， 環(huán)胞菌素A的平均血液濃度。 平均值表示為n = 3的平均值BLQ=低于定量限組合物F單次雙側(cè)眼部滴注組合物F后，給藥后0. 5和2小時(shí)在血液中檢測(cè)到環(huán)胞菌素A 濃度分別為2. 21 士0. 33ng/mL和0. 463士0. 021ng/mL。在隨后所有的時(shí)間點(diǎn)，環(huán)胞菌素A水 平均低于定量限。組合物E單次雙側(cè)眼部滴注組合物E后，給藥后0. 5小時(shí)在血液中檢測(cè)到環(huán)胞菌素A濃度 為0.441 士0. 126ng/mL。在隨后所有的時(shí)間點(diǎn)，環(huán)胞菌素A水平均低于定量限。組合物D單次雙側(cè)眼部滴注組合物D后，在所有的時(shí)間點(diǎn)，環(huán)胞菌素A水平均低于定量限。將組合物F給予兔通常會(huì)將最高水平的環(huán)孢菌素A送遞給眼組織，在與組合物D 相比較時(shí)，觀察到濃度-時(shí)間曲線(xiàn)的曲線(xiàn)下面積(AUC)平均增加了 5倍。在與組合物D相 比較時(shí)，將組合物E給予兔使得AUC平均增加了 2倍。本研究中，在將組合物D給予新西蘭 白兔后所觀察到的藥物代謝動(dòng)力學(xué)分析與之前報(bào)道的數(shù)據(jù)非常吻合?！銇?lái)說(shuō)，組合物F的實(shí)測(cè)最終半衰期和平均滯留時(shí)間最長(zhǎng)，其次是組合物E，再 次是組合物D。因此，除了報(bào)道了角膜、結(jié)膜、鞏膜和瞼緣至24小時(shí)的AUC以及鼻淚管至12 小時(shí)的AUC外，還報(bào)道了至最后一個(gè)可檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)的AUC值，以對(duì)一天給一次藥之后相同區(qū) 間內(nèi)所達(dá)到的藥物水平進(jìn)行評(píng)估?？傮w上講，在比較AU(Vt值時(shí)所觀察到的趨勢(shì)同在比較 AUCQ_24或AUQ^時(shí)所觀察到的趨勢(shì)相一致。總之，藥物被制成組合物F水溶液時(shí)，在單次眼部滴注0. 05 %環(huán)胞菌素A制劑后觀 察到了最高的環(huán)胞菌素A眼組織暴露水平，其次是組合物E，再次是組合物D。血液藥物暴 露中也觀察到相應(yīng)的趨勢(shì)。盡管無(wú)意于限制本發(fā)明的范圍，但認(rèn)為這些藥物代謝動(dòng)力學(xué)結(jié)果表明濃度較之 前已知的濃度顯著低的環(huán)胞菌素A可被用于局部眼用組合物中，并且仍然可以獲得治療有 效量的環(huán)胞菌素A。藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究2以下組合物的制備方式與組合物D、E和F的相似。
使用與已描述的那些分析方法相似的分析方法進(jìn)行藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究。參數(shù)如 下所示·測(cè)試制劑G、H和D·動(dòng)物物種/品系新西蘭白兔·性別雌性 數(shù)目2只兔/時(shí)間點(diǎn)(2只空白兔)·給藥途徑局部眼部·給藥方案雙側(cè)，QD (水溶液)/BID (組合物D) _5天 給藥體積35 μ L·時(shí)間點(diǎn)給藥后第1天和第5天-0. 5、2、6、12、24hr·分析方法LC_MS/MS
·分析對(duì)象環(huán)胞菌素A·數(shù)據(jù)分析Cmax、AUCch24、標(biāo)準(zhǔn)化的AUC劑量
角膜、淚液和血液中的結(jié)果示于以下表格中。表14.角膜中環(huán)胞菌素的生物利用度。

n = 2只兔/時(shí)間點(diǎn)BLQ-低于檢測(cè)限(0. 2ng/mL)表16.淚液中環(huán)胞菌素的生物利用度。 標(biāo)準(zhǔn)組合物這些組合物(AA-MM)被特別考慮用作比較標(biāo)準(zhǔn)品，以表征本文所公開(kāi)的組合物。以下組合物旨在表示與那些在 Kanai et. al. , TransplantationProceedings, Vol 21, No 1 (February), 1989 :3150_3152 (通過(guò)援引將其納入本文)中所公開(kāi)的組合物相同的 那些組合物組合物AA 由0. 025%環(huán)胞菌素A、40mg/mL a環(huán)糊精和水組成的溶液；組合物BB 由0. 009%環(huán)胞菌素A、20mg/mL a環(huán)糊精和水組成的溶液；禾口組合物CC 由0. 003%環(huán)胞菌素A、10mg/mL a環(huán)糊精和水組成的溶液。以下組合物旨在表示與那些在 Cheeks et. al.，Current Eye Research, Vol 11， No 7 (1992)，641-649 (通過(guò)援引將其納入本文)中所公開(kāi)的組合物相同的那些組合物組合物DD 含有0. 025%環(huán)胞菌素的40mg/mL的a環(huán)糊精溶液。以下組合物旨在表示與那些在 Tamilvanan，Stp Pharma SciNov-Dec ；11 (6) 421-426 (通過(guò)援引將其納入本文)中所公開(kāi)的組合物相同的那些組合物，所不同的是環(huán)胞 菌素A的濃度不同。組合物EE:由環(huán)胞菌素A(0.05w/w% )、蓖麻油(2. 5w/w % )、硬脂酰胺(0. 12w/ w% a-生育酚(0. 01w/w% )、苯扎氯銨(0. 01w/w% )和最高達(dá)100w/w%的水組成的乳液。以下組合物旨在表示與美國(guó)專(zhuān)利No. 5，051，402 (第七欄)所公開(kāi)的樣本C-E相同 的那些組合物。其整個(gè)公開(kāi)內(nèi)容通過(guò)援引納入本文。組合物FF 0. 25mL/mL的環(huán)胞菌素A、40mg/mL的a -環(huán)糊精和7. 79mg/mL的氯化 鈉；組合物GG 0. lOmL/mL的環(huán)胞菌素A、20mg/mL的a -環(huán)糊精和8. 40mg/mL的氯化 鈉；以及組合物HH 0. 05mL/mL的環(huán)胞菌素A、10mg/mL的a -環(huán)糊精和8. 70mg/mL的氯化鈉。以下組合物旨在表示與 Abdulrizak，Stp Pharma Sci Nov-Dec ；11 (6) 427-432 (通過(guò)援引納入本文)所公開(kāi)的組合物相同的組合物，所不同的是環(huán)胞菌素A的濃 度不同
組合物II 由環(huán)胞菌素A(0. 05w/w % )、蓖麻油(2. 5w/w % )、泊洛沙姆 188(0. 425w/w% )、甘油(2. 25w/w% )、Lipoid E-80 (0. 5w/w% )、硬脂酰胺(0. 12w/w% )、 生育酚(0. 01w/w% )、苯扎氯銨(0. 01w/w% )和水組成的乳液。以下組合物旨在表示與 Kuwano Mitsuaki et al. Pharm Res 2002Aug ； 19(1) 108-111所公開(kāi)的組合物相同的組合物。組合物JJ 由環(huán)胞菌素 A(0. 0865% )、乙醇(0. 1 % )、MYS-40 (2% HPMC(0. 3w/ v% )、磷酸二氫鈉(0. 2w/v% )和EDTA 二鈉(0. 01% w/v% )、用于將張度調(diào)節(jié)至287m0sm 的氯化鈉和水組成的溶液。組合物KK旨在表示在US20010041671(通過(guò)援引納入本文)的表1中以制劑1形 式所公開(kāi)的組合物。組合物L(fēng)L為在US20010041671中以制劑3形式所公開(kāi)的組合物，所不 同的是環(huán)胞菌素的濃度降低。組合物KK 環(huán)胞菌素A(0.02% )、透明質(zhì)酸鈉(0.05% )、吐溫80(0. 05 % )、 Na2HPO4 ‘ 12Η20(0·08% )、山梨糖醇(5. 46% )，補(bǔ)純水至 lOOmL，ρΗ 7. 0-7. 4，并且 mosm/L =295-305。組合物L(fēng)L:環(huán)胞菌素A(0. 2% )、透明質(zhì)酸鈉(0. 10% )、吐溫80(5. 00 % )、 Na2HPO4 · 12H20(0. 08% )、山梨糖醇(5. 16% )，補(bǔ)純水至 IOOmL, ρΗ 7. 0-7. 4，并且 mosm/L =295-305。以下組合物旨在表示在US 5，951，971 (通過(guò)援引納入本文)的實(shí)施例2所公開(kāi)的
組合物。組合物MM:環(huán)胞菌素A (0.025g)、硬脂酸-40-聚烴氧基酯(0. 5g)、羥丙基甲基纖 維素(0. 2g)、丁羥甲苯(0. 0005g)、乙醇(0. Ig)、氯化鈉(0. 73g)、磷酸二氫鈉(0. 2g)、依地 酸鈉(0. Ig)，用于將調(diào)ρΗ至6. 0的氫氧化鈉并補(bǔ)水至100mL。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物AA之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物AA所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物AA的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物BB之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物BB所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物BB的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物CC之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物CC所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物CC的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物DD之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物DD所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物DD的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物EE之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物EE所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物EE的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物FF之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物FF所提供的要多，其
34中所述組合物的液滴與組合物FF的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物GG之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物GG所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物GG的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物HH之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物HH所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物HH的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物II之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物II所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物II的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物JJ之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物JJ所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物JJ的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物KK之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物KK所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物KK的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物L(fēng)L之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物L(fēng)L所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物L(fēng)L的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物MM之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物MM所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物MM的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物AA之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物AA所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物AA的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物BB之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物BB所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物BB的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物CC之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物CC所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物CC的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物DD之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物DD所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物DD的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物EE之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物EE所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物EE的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物FF之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物FF所提供的要多，其中所述組合物的液滴與組合物FF的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物GG之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物GG所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物GG的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物HH之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物HH所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物HH的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物II之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物II所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物II的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物JJ之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物JJ所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物JJ的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物KK之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物KK所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物KK的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物L(fēng)L之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物L(fēng)L所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物L(fēng)L的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物MM之后30分 鐘，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物MM所提供的要多，其 中所述組合物的液滴與組合物MM的液滴體積相同。在人或動(dòng)物中的兩種組合物的比較可通過(guò)將要求保護(hù)的組合物給予一只眼睛并 將第二種組合物給予另一只眼睛等方式來(lái)進(jìn)行。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物AA之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物AA所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物AA的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物BB之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物BB所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物BB的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物CC之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物CC所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物CC的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物DD之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物DD所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物DD的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物EE之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物EE所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物EE的液滴體積相同。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物FF之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物FF所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物FF的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物GG之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物GG所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物GG的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物HH之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物HH所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物HH的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物II之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物II所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物II的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物JJ之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物JJ所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物JJ的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物KK之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物KK所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物KK的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物L(fēng)L之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物L(fēng)L所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物L(fēng)L的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物MM之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的角膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物MM所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物MM的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物AA之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物AA所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物AA的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物BB之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物BB所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物BB的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物CC之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物CC所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物CC的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物DD之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物DD所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物DD的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物EE之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物EE所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物EE的液滴體積相同。
37
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物FF之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物FF所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物FF的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物GG之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物GG所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物GG的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物HH之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物HH所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物HH的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物II之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物II所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物II的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物JJ之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物JJ所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物JJ的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物KK之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物KK所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物KK的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物L(fēng)L之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物L(fēng)L所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物L(fēng)L的液滴體積相同。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在局部眼部給予一滴本發(fā)明組合物或組合物MM之后24小 時(shí)期間，所述組合物為雌性新西蘭白兔的結(jié)膜提供的環(huán)胞菌素A比組合物MM所提供的要 多，其中所述組合物的液滴與組合物MM的液滴體積相同。在一個(gè)實(shí)施方案中，其中局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述 組合物，在所述局部給藥后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供了至少約500ng環(huán)胞菌素A/克該 兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供了至少約2000ng環(huán)胞菌素A/克該 兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供了至少約2400ng環(huán)胞菌素A/克該 兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥后24小時(shí)期間，為該兔的角膜提供了至少約17000ng環(huán)胞菌素A/克 該兔的角膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組 合物，在所述局部給藥后24小時(shí)期間，為該兔的結(jié)膜提供了至少約3300ng環(huán)胞菌素A/克 該兔的結(jié)膜。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物為含0. 005%至約0. 04%環(huán)孢菌素A的水溶液， 其中局部給予新西蘭兔的每只眼睛一滴35 y L的所述組合物，為該兔的角膜提供了至少約 17000ng的環(huán)胞菌素A/克角膜，這通過(guò)以下步驟測(cè)得將所述組合物局部給予15只雌性新西蘭白兔測(cè)試受試者中的每一只的每只眼 睛，并在給予所述受試者后約0. 5小時(shí)、約2小時(shí)、約6小時(shí)、約12小時(shí)和約24小時(shí)測(cè)
定三名受試者的角膜中環(huán)孢菌素A的量，其中僅對(duì)每名受試者的角膜中環(huán)孢菌素A的量測(cè)
量一次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物為含0. 005%至約0. 04%環(huán)孢菌素A的水溶液， 其中局部給予新西蘭兔的每只眼睛一滴35 y L的所述組合物，為該兔的結(jié)膜提供了至少約 17000ng的環(huán)胞菌素A/克結(jié)膜，這通過(guò)以下步驟測(cè)得將所述組合物局部給予15只雌性新西蘭白兔測(cè)試受試者中的每一只的每只眼 睛，并在給予所述受試者后約0. 5小時(shí)、約2小時(shí)、約6小時(shí)、約12小時(shí)和約24小時(shí)測(cè)
定三名受試者的結(jié)膜中環(huán)孢菌素A的量，其中僅對(duì)每名受試者的結(jié)膜中環(huán)孢菌素A的量測(cè)
量一次。如上所述，除兔之外，這些組合物還適合用于其他哺乳動(dòng)物，包括人在內(nèi)。因此，在 權(quán)利要求書(shū)或其他地方通過(guò)兔體內(nèi)生物利用度表征的任何組合物均被考慮用于人或另一 種哺乳動(dòng)物。通過(guò)在兔中的生物利用度來(lái)定義組合物不應(yīng)被解釋為將使用該組合物的治 療方法局限于用于兔，而應(yīng)該將采用該組合物的治療解釋為包括對(duì)人和其他哺乳動(dòng)物的治療。以上描述詳細(xì)說(shuō)明了可用來(lái)實(shí)施本發(fā)明且代表被認(rèn)為是最佳方式的具體方法和 組合物。但是，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言顯而易見(jiàn)的是，具有所需藥物學(xué)性質(zhì)的其他組 合物可以相似方式制備得到。因此，不管出現(xiàn)在上文中的內(nèi)容有多詳細(xì)，都不應(yīng)該被解釋為 對(duì)其整體范圍的限制；更確切地說(shuō)，本發(fā)明的范圍僅受制于對(duì)權(quán)利要求的法律解釋。
權(quán)利要求
一種組合物，含有濃度為約0.0001％(w/v)至低于約0.05％(w/v)的環(huán)胞菌素A。
2.權(quán)利要求1的組合物，為水溶液。
3.權(quán)利要求1的濃度，其中環(huán)胞菌素A的濃度為約0.02% (w/v)至約0. 04% (w/v)。
4.權(quán)利要求2的組合物，其中環(huán)胞菌素A的濃度為約0.02%(w/v)至約0.04% (w/v) 0
5.權(quán)利要求2的組合物，不含乙醇。
6.權(quán)利要求2的組合物，不含透明質(zhì)酸。
7.權(quán)利要求2的組合物，不含環(huán)糊精A。
8.權(quán)利要求6的組合物，不含環(huán)糊精。
9.權(quán)利要求8的組合物，不含乙醇。
10.權(quán)利要求9的組合物，不含維生素ETPGS0
11.權(quán)利要求9的組合物，不含透明質(zhì)酸。
12.權(quán)利要求1的組合物，其中局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35yL的所 述組合物，在所述局部給藥之后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供至少約500ng環(huán)胞菌素A/克 該兔的角膜。
13.權(quán)利要求1的組合物，其中局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35μ L的所述 組合物，在所述局部給藥之后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供至少約IOOOng環(huán)胞菌素A/克 該兔的角膜。
14.權(quán)利要求1的組合物，其中局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35μ L的所述 組合物，在所述局部給藥之后30分鐘時(shí)，為該兔的角膜提供至少約1400ng環(huán)胞菌素A/克 該兔的角膜。
15.權(quán)利要求1的組合物，其中局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35μ L的所述 組合物，在所述局部給藥之后24小時(shí)期間，為該兔的角膜提供至少約17000ng · hr環(huán)胞菌 素A/克該兔的角膜。
16.權(quán)利要求2的組合物，其中局部給予雌性新西蘭白兔的每只眼睛一滴35μ L的所 述組合物，在所述局部給藥后24小時(shí)期間，為該兔的結(jié)膜提供至少約3300ng -hr環(huán)胞菌素 A/克該兔的結(jié)膜。
17.權(quán)利要求2的組合物，其中所述組合物為含0.005%(w/v)至約0.04% (w/v)環(huán)孢 菌素A的水溶液，其中局部給予新西蘭兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組合物，為該兔的角 膜提供至少約17000ng · hr的環(huán)胞菌素A/克角膜，這通過(guò)以下步驟測(cè)得將所述組合物局部給予15只雌性新西蘭白兔測(cè)試受試者中的每一只的每只眼睛；并在給予所述受試者后約0. 5小時(shí)、約2小時(shí)、約6小時(shí)、約12小時(shí)和約24小時(shí)，測(cè)定三 名受試者的角膜中環(huán)孢菌素A的量；其中僅對(duì)每名受試者的角膜中環(huán)孢菌素A的量測(cè)量一次。
18.權(quán)利要求2的組合物，其中所述組合物為含0.005%(w/v)至約0.04% (w/v)環(huán)孢 菌素A的水溶液，其中局部給予新西蘭兔的每只眼睛一滴35 μ L的所述組合物，為該兔的結(jié) 膜提供至少約6000ng環(huán)胞菌素A/克結(jié)膜，這通過(guò)以下方法測(cè)定將所述組合物局部給予15只雌性新西蘭白兔測(cè)試受試者中的每一只的每只眼睛；并在給予所述受試者后約0. 5小時(shí)、約2小時(shí)、約6小時(shí)、約12小時(shí)和約24小時(shí)，測(cè)定三 名受試者的結(jié)膜中環(huán)孢菌素A的量；其中每名受試者的結(jié)膜中環(huán)孢菌素A的量?jī)H測(cè)定一次。
19.權(quán)利要求1的組合物，還含有表面活性劑。
20.權(quán)利要求1的組合物，還含有防腐劑。
21.一種方法，包括將權(quán)利要求1的組合物局部給予對(duì)此有所需的哺乳動(dòng)物的眼睛來(lái) 增強(qiáng)或恢復(fù)淚腺流淚。
22.權(quán)利要求21的方法，其中所述方法增加了淚液缺乏眼睛中的淚液產(chǎn)生。
23.權(quán)利要求21的方法，其中所述方法有效治療干燥性角膜結(jié)膜炎。
24.權(quán)利要求21的方法，其中所述方法有效治療干眼病。
25.權(quán)利要求21的方法，其中所述哺乳動(dòng)物為病人，并且在將所述組合物一天僅給予 一次達(dá)三個(gè)月時(shí)，其中不到10%的病人會(huì)出現(xiàn)燒傷或刺痛。
26.權(quán)利要求21的方法，其中所述哺乳動(dòng)物為病人，并且在將所述組合物一天僅給予 一次達(dá)三個(gè)月時(shí)，其中不到10%的病人會(huì)出現(xiàn)眼燒傷。
27.權(quán)利要求21的方法，其中所述組合物一天僅給予一次。
28.—種水溶液，含有濃度為0.01% (w/v)至0.019% (w/v)的環(huán)孢菌素A。
29.權(quán)利要求28的組合物，其中環(huán)胞菌素A的濃度為約0.015% (w/v)。
30.一種水溶液，含有濃度為0.01% (w/v)至0.02% (w/v)的環(huán)孢菌素A和95% (w/ w)以上的水。
31.一種水溶液，含有濃度為0.01% (w/v)至0.02% (w/v)的環(huán)孢菌素A，并且不含濃 度為0.05% (w/v)的透明質(zhì)酸鈉。
32.權(quán)利要求31的水溶液，不含透明質(zhì)酸鈉。
33.一種水溶液，含有濃度為0.01% (w/v)至0.02% (w/v)的環(huán)孢菌素A，并且不含濃 度為0.05 (w/v)的聚山梨酯80。
34.權(quán)利要求31的水溶液，含有0.至的聚山梨酯80。
35.一種具有容器的試劑盒，該容器盛有含濃度為0.005% (w/v)至0.03% (w/v)的環(huán) 孢菌素A的水溶液，其中所述容器能夠配送滴眼液，并且其中所述組合物已在所述容器中 保存了至少兩個(gè)月。
36.一種組合物，含有濃度為0.01% (w/v)至0.02% (w/v)的環(huán)胞菌素A，以及防腐劑。
37.權(quán)利要求36的組合物，其中所述環(huán)胞菌素A的濃度為約0.015%(w/v) 0
38.權(quán)利要求2的組合物，其中所述環(huán)胞菌素A的濃度為約0.04%(w/v) 0
39.權(quán)利要求2的組合物，其中所述環(huán)胞菌素A的濃度為約0.005%(w/v) 0
全文摘要
本文公開(kāi)了與環(huán)孢菌素相關(guān)的治療方法、組合物和藥劑。
文檔編號(hào)A61K9/00GK101896160SQ200780034568
公開(kāi)日2010年11月24日 申請(qǐng)日期2007年7月23日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月17日
發(fā)明者A·摩根, M·阿塔爾, R·M·希夫曼, R·S·格雷厄姆, W·田 申請(qǐng)人:阿勒根公司