專利名稱：：一種含有褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖的組合物和其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明公開(kāi)了一種組合物，特別公開(kāi)了一種以褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖類物質(zhì)為活性成分的口服組合物，進(jìn)-一步的，本發(fā)明公開(kāi)了該組合物在防治化學(xué)肝損傷、調(diào)節(jié)免疫力方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：化學(xué)性肝損傷主要來(lái)自于工作環(huán)境、食物、藥品和大量飲酒帶來(lái)的有害物質(zhì)，這些物質(zhì)類型涵蓋無(wú)機(jī)毒物(重金屬、氯化物等)、農(nóng)藥、藥品和酒精等。作為人體重要解毒器官的肝臟，A有肝動(dòng)脈和肝靜脈兩個(gè)渠道血液供應(yīng)，化學(xué)物質(zhì)可通過(guò)胃腸道門靜脈或者體循環(huán)進(jìn)入肝臟進(jìn)行轉(zhuǎn)化，因此肝臟容易受到這些物質(zhì)中化學(xué)毒物的損害。自工業(yè)革命以來(lái)，大自然和工業(yè)生產(chǎn)中存在一些對(duì)肝臟有毒性的物質(zhì)，研究人員稱之為"親肝毒物"，這些物質(zhì)在人體中易導(dǎo)致患病，潛伏期短，病變過(guò)程與吸入劑量或者感染劑量呈現(xiàn)正相關(guān)，可引起肝臟細(xì)胞不同程度的壞死、脂肪變形、肝硬化和肝癌。工業(yè)生產(chǎn)中的原料、中間產(chǎn)物和最終產(chǎn)品均可能具有肝毒性，因此需要十分警惕化學(xué)性肝損傷的發(fā)生。同時(shí)這也要求研究人員能夠研究一些有效的防治肝損傷的藥品和保健品。肝臟是人體的重要器官，目前人類肝臟疾病患者越來(lái)越多，但是迄今為止尚缺乏療效明顯兼具副作用小的藥物。一般認(rèn)為，肝細(xì)胞損傷是多種作用的結(jié)果?；瘜W(xué)物質(zhì)(比如氯化碳、酒精等)所致肝損傷的病理機(jī)制多認(rèn)為與肝內(nèi)脂肪酸代謝障礙和自由基及其引發(fā)的過(guò)氧化有關(guān)。研究認(rèn)為，化學(xué)毒物可能通過(guò)如下病理機(jī)制侵染肝臟1.脂肪變性、四氯化碳、黃磷等干擾脂質(zhì)蛋白的合成轉(zhuǎn)運(yùn)路徑，最后形成脂肪肝。2.脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，這是一種毒性肝損傷的特定表現(xiàn)形式，例如四氯化碳等在體內(nèi)代謝時(shí)產(chǎn)生一種氧化能力很強(qiáng)的中間產(chǎn)物，這種中間產(chǎn)物作用于生物細(xì)胞膜上的脂質(zhì)形成過(guò)氧化,從而破壞膜的磷脂層空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生病理性改變。3.膽汁郁積反應(yīng)，主要源于肝臟細(xì)胞膜和微絨毛受損，引起膽汁酸排泄障礙?；瘜W(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的肝損傷可由其在肝細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)代謝引起。比如細(xì)胞內(nèi)的酒精能夠通過(guò)升高NADH/NAD的值抑制線粒體三羧酸循環(huán)，導(dǎo)致肝內(nèi)脂肪酸代謝障礙，氧化減弱以及NADH增多，促進(jìn)了脂肪酸的合成，使得中性脂肪在肝細(xì)胞內(nèi)堆積發(fā)生脂肪變性，嚴(yán)重的脂肪變性甚至導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死和肝內(nèi)纖維組織增生。肝損傷疾病，尤其是脂肪肝和肝功能異常多伴隨血脂水平增高，這揭示脂肪酸代謝紊亂與脂肪肝和肝損傷有一定關(guān)系。近年來(lái)的研究證實(shí)脂質(zhì)過(guò)氧化是一個(gè)重要的化學(xué)性肝損傷路徑，體內(nèi)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)可引起機(jī)體抗氧化能力下降，從而自由基的生成增加。隨之而來(lái)的自由基不僅氧化細(xì)胞膜脂質(zhì)，更重要的是會(huì)氧化細(xì)胞膜蛋白，從而導(dǎo)致肝細(xì)胞功能和結(jié)構(gòu)失常。SOD和CAT等自由基清除劑可分別清除脂質(zhì)過(guò)氧化作用中產(chǎn)生的具備高度反應(yīng)活性的超氧陰離子和羥自由基，防治脂質(zhì)過(guò)氧化導(dǎo)致的細(xì)胞損傷。免疫系統(tǒng)是人體內(nèi)最重要的生物系統(tǒng)之一，其功能對(duì)人體有很大影響。一旦出現(xiàn)免疫系統(tǒng)功能失調(diào)，將會(huì)導(dǎo)致人體對(duì)疾病體康能力弱化。近年來(lái)免疫失調(diào)、免疫功能低下人群比例越來(lái)越大，長(zhǎng)期以往將導(dǎo)致免疫系統(tǒng)疾病患者急劇增多。免疫系統(tǒng)是人體抵御病原菌侵犯最重要的保衛(wèi)系統(tǒng)，這個(gè)系統(tǒng)由免疫器官(骨髓、胸腺、脾臟、淋巴結(jié)、扁桃體、小腸集合淋巴結(jié)、闌尾等)、免疫細(xì)胞(淋巴細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、血小板等)，以及免疫分子(補(bǔ)體、免疫球蛋白、細(xì)胞因子等)組成。它是機(jī)體防衛(wèi)病原體入侵最有效的武器，但其功能的亢進(jìn)會(huì)對(duì)自身器官或組織產(chǎn)生傷害。在很多自身疾病中，免疫系統(tǒng)功能失常往往是一個(gè)重要致病原因。免疫系統(tǒng)各組分功能的正常是維持機(jī)體免疫功能相對(duì)穩(wěn)定的保證，任何組分的缺陷或功能的亢進(jìn)都會(huì)給機(jī)體帶來(lái)?yè)p害。免疫系統(tǒng)各組分廣布全身，錯(cuò)綜復(fù)雜，特別是免疫細(xì)胞和免疫分子在機(jī)體內(nèi)不斷地產(chǎn)生、循環(huán)和更新。免疫系統(tǒng)具有高度的辨別力，能精確識(shí)別自己和非己物質(zhì)，以維持機(jī)體的相對(duì)穩(wěn)定性；同時(shí)還能接受、傳遞、擴(kuò)大、儲(chǔ)存和記憶有關(guān)免疫的信息，針對(duì)免疫信息發(fā)生正和負(fù)的應(yīng)答并不斷調(diào)整其應(yīng)答性，因此免疫系統(tǒng)功能的失調(diào)也會(huì)對(duì)人體極為不利人體的識(shí)別能力異常容易導(dǎo)致過(guò)敏現(xiàn)象的發(fā)生(使用某種食物、注射藥物出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)，甚至導(dǎo)致休克)，反之則會(huì)引起反復(fù)感染；人體的自我穩(wěn)定能力異常，會(huì)使免疫系統(tǒng)對(duì)自身的細(xì)胞作出反應(yīng)，引發(fā)A身免疫疾病。由此可見(jiàn)，人體免疫系統(tǒng)對(duì)人類的健康起著舉足輕重的作用，如果它的功能不穩(wěn)定，人體很有可能會(huì)被病毒、細(xì)菌這些病原體侵害。海藻是海洋水產(chǎn)資源的重要組成部分，海藻門褐子綱海帶目海帶科海帶屬的海帶(Lam/nar/ajaponicaaresch)是產(chǎn)量最高的海藻，我國(guó)的海帶產(chǎn)量位居世界首位。海帶又稱海洋蔬菜，含有豐富的功能性物質(zhì)，如碘、甘露醇、維生素(A、B、C、F)、?；撬嵋约叭梭w所需耍的微量元素硒、鈷、鉻，是一種既有食用價(jià)值，又有藥用、保健、工業(yè)、農(nóng)業(yè)價(jià)值的大型藻類產(chǎn)品。褐藻多糖硫酸酯是一類硫酸化的多糖，存在于褐藻中，根據(jù)國(guó)際命名原則統(tǒng)一稱為fucoidan(褐藻糖膠或褐藻聚糖，巖藻聚糖，褐藻多糖硫酸酯)?，F(xiàn)在人們對(duì)褐藻多糖硫酸酯的組成有了較為清晰地了解，它是一類化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜的多糖，以巖藻糖和硫酸基為主，隨著藻類的不同還含有半乳糖，木糖，糖醛酸等其他成分。海帶Fucoidan由巖藻糖。半乳糖，木糖，糖醛酸，阿拉伯糖等單糖組成。以巖藻糖和半乳糖為主，二者比例大約為3:1?，F(xiàn)有的研究己經(jīng)證實(shí)海帶多糖在防治肝損傷、調(diào)節(jié)免疫力方面具有良好的效果。在防治多種原因?qū)е碌幕瘜W(xué)肝損傷方面，研究證實(shí)褐藻多糖硫酸酯能增加某些抗氧化酶的活性，減少自由基的產(chǎn)生，從而減輕自由基對(duì)肝臟、腎臟組織的攻擊。因此，通過(guò)清除自由基及抗氧化作用，褐藻多糖硫酸酯可發(fā)揮肝保護(hù)作用。另外，褐藻多糖硫酸酯在體外能直接清除超氧陰離子自由基和羥基自由基(0H)，是一種很好的抗氧化劑；在體內(nèi)也有較強(qiáng)的清除活性氧自由基的能力，能顯著降低血清和組織中高脂質(zhì)過(guò)氧化物(LP0)的含量，顯著增強(qiáng)血清和組織中S0D活性。在調(diào)節(jié)免疫力方面，海帶硫酸多糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞激活及細(xì)胞毒作用的影響(聊城大學(xué)學(xué)報(bào)，2004.17(2)56-57)研究認(rèn)為海帶硫酸多糖能激活小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)其免疫機(jī)能，對(duì)抵抗和殺死腫瘤細(xì)胞具有積極作用。海帶硫酸多糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用(中國(guó)免疫學(xué)，2000.2(16))研究了一種包含L-巖藻糖、D-半乳糖等平均分子量為15000D的海帶多糖對(duì)小鼠吞噬細(xì)胞的激活作用。以腫瘤抑制率衡量，抑制腫瘤細(xì)胞病變有效率達(dá)到了86.5%。說(shuō)明海帶多糖可以有效激活巨噬細(xì)胞，分泌細(xì)胞毒效應(yīng)分子，提高巨噬細(xì)胞過(guò)氧化物酶活性以及吞噬功能。已有多篇文獻(xiàn)公開(kāi)了褐藻多糖硫酸酯的制備方法。日本專利昭46-2248采用十六烷氯化吡啶或十六烷三甲基溴化銨與褐藻多糖硫酸酯反應(yīng)成季胺鹽復(fù)合物，再利用該復(fù)合物對(duì)鹽的溶解度差異，用乙醇、甲醇和離子交換樹(shù)脂處理，純化除去褐藻膠、中性多糖和其它雜質(zhì)，而得到比較純化的褐藻多糖硫酸酸酯。CN1129109A則公開(kāi)了由干海帶浸泡、數(shù)次過(guò)濾、二次乙醇提取、一次乙醇洗滌、配合調(diào)節(jié)ra范圍等的堿凝析法。CN1344565A則公開(kāi)了另一種制備方法，包括原料預(yù)處理、控溫?cái)嚢杞?、離心、濃縮、乙醇沉淀、無(wú)水乙醇脫水等步驟。CN1517356A則將巖藻聚糖硫酸酯配制成水溶液，加入過(guò)氧化氫、次氯酸或亞硝酸及其鹽，將所得混合溶液加熱，用截留分子量3000-5000的膜超濾，得到巖藻聚糖硫酸酯低聚糖。CN1616494A以天然海藻硫酸多糖為原料，將海藻硫酸糖溶液中加入抗壞血酸和過(guò)氧化氫，控制反應(yīng)溫度，恒溫降解時(shí)間為0.5-3hr，再透析或超濾，減壓濃縮，制得4-100KDa的低分子量海藻硫酸多糖產(chǎn)物。另外，CN1670028A、CN1392160A、CN1197674A也分別公開(kāi)了采用絮凝等方法制備海藻多糖。在本發(fā)明中，以上發(fā)明公開(kāi)的技術(shù)方案均可被引入獲得本發(fā)明所用的褐藻多糖硫酸酯。靈芝(GanodermaLucidum)為擔(dān)子菌綱，多孔菌科靈芝屬。在植物學(xué)意義上，靈芝包括已知近兩百種多孔菌科靈芝屬植物中的任何一種，狹義上的靈芝是指為中華人民共和國(guó)藥典(2005版本，二部)所收載的赤芝或者紫芝的干燥子實(shí)體。根據(jù)藥典的描述，靈芝可以補(bǔ)氣安神、平咳固喘，同時(shí)靈芝也是美國(guó)《草藥藥典》收錄的僅有的十種中草藥之一?，F(xiàn)代研究表明靈芝的有效成份主要有靈芝多糖、靈芝酸、腺苷、麥角甾醇、皂甙、嘌呤、嘧啶、生物堿、內(nèi)酯等，靈芝多糖是靈芝藥理活性的主要成分，05版中國(guó)藥典一部已將靈芝多糖作為靈芝質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)表明，靈芝多糖在衰老、中毒和氧自由基起著主要作用。靈芝多糖可抑制氧化劑tBOOH引起的MO膜樣變性和壞死，提高細(xì)胞的存話率，另外對(duì)四氧嘧啶引發(fā)的小鼠氧自由基損傷也有保護(hù)作用。李明春等人(靈芝多糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞活性氧自由基的影響.中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2000，14(1):65—68)采用激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)靈芝多糖均一體GL所對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞(MO)活性氧自由基含量的影響，實(shí)驗(yàn)表明，靈芝多糖能降低小鼠腹腔M①活性氧自由基的產(chǎn)生，并能拮抗PMA引起的小鼠腹腔M①活性氧自由基的產(chǎn)量。已有的研究也證實(shí)了靈芝多糖在調(diào)節(jié)免疫力方面的應(yīng)用。靈芝孢子多糖對(duì)荷瘤小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用(中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007.38(2):162-166)，靈芝多糖對(duì)小鼠體液免疫功能的影響(暨南大學(xué)學(xué)報(bào)，2003.24(2):51-53)，靈芝多糖151服液對(duì)小鼠免疫功能影響的研究(泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004.25(6):586-588)等文獻(xiàn)采用多種實(shí)驗(yàn)方案驗(yàn)證了靈芝多糖對(duì)調(diào)節(jié)免疫的作用。中國(guó)專利申請(qǐng)CN02151784.3，CN03116403.X，CN200510049438.X等均公開(kāi)了靈芝多糖在調(diào)節(jié)人體免疫力中的應(yīng)用。靈芝多糖的生產(chǎn)，除以野生或者人工栽培的靈芝子實(shí)體為原料外，也可從靈芝菌深層發(fā)酵的菌絲體或發(fā)酵液中提取。靈芝多糖分子量覆蓋很大，從幾百到數(shù)十萬(wàn)，除了小部分低分子外大多不溶于高濃度酒精而溶于熱水，因此比較適用水提取-醇沉淀工藝。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種組合物、制劑，同時(shí)本發(fā)明也公開(kāi)了該組合物、制劑的制備方法、應(yīng)用。申請(qǐng)人研究發(fā)現(xiàn)通過(guò)將褐藻多糖硫酸酯、靈芝多糖類物質(zhì)組合，對(duì)防治化學(xué)性肝損傷、調(diào)節(jié)免疫力具有協(xié)同的、突出的效果，其長(zhǎng)期使用安全性和保健效果均優(yōu)于現(xiàn)有產(chǎn)品。同時(shí)本發(fā)明組合物防治化學(xué)性肝損傷、調(diào)節(jié)免疫力成效上具有協(xié)同的治療作用。其療效高于單獨(dú)成分，總體上降低了多糖成分的使用量。安全研究發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明制劑沒(méi)有明顯的毒性反應(yīng)，適合長(zhǎng)期服用。本發(fā)明在本領(lǐng)域第一次引入褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖類物質(zhì)進(jìn)行組合用于作為防治化學(xué)性肝損傷。本發(fā)明申請(qǐng)人通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)研究首次確定了將褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖類物質(zhì)組合物用于防治化學(xué)性肝損傷的可行性。本發(fā)明在本領(lǐng)域第一次引入褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖組合物用于調(diào)節(jié)人體免疫力。本發(fā)明申請(qǐng)人通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)研究首次確定了將褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖組合物用于調(diào)節(jié)人體免疫力的可行性。本發(fā)明技術(shù)方案提供了一種褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖的組合物，包含活性成分褐藻多糖硫酸酯和具有明顯協(xié)同作用活性的靈芝多糖類物質(zhì)，其中靈芝多糖類物質(zhì)選自靈芝藥材、靈芝提取物、靈芝孢子粉提取物、靈芝破壁孢子粉提取物、靈芝菌絲體提取物等的一種或多種，優(yōu)選為靈芝菌絲體提取物。將本發(fā)明組合物用于藥物制劑時(shí)，還可選擇性的包括藥學(xué)上可接受的載體。相應(yīng)的，本發(fā)明提供了將該組合物用于防治化學(xué)性肝損傷、調(diào)節(jié)免疫力的用途。在本發(fā)明提供的技術(shù)方案中，提供了本發(fā)明組合物的口服制劑，其中含有本發(fā)明組合物和藥學(xué)上可接受的載體。褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖類物質(zhì)重量份數(shù)比可以是1:100-100:1,優(yōu)選為1:30-30:1，最優(yōu)選為1:10-10:1。本發(fā)明所用的褐藻多糖硫酸酯取材于海藻類生物，包括任何可以提供褐藻多糖硫酸酯的植物，包括馬尾藻、裙帶菜、羊棲菜、鼠尾藻、海黍子、昆布、泡葉藻或墨角藻等，優(yōu)選的植物為海帶，無(wú)論是人工養(yǎng)殖的還是天然生長(zhǎng)的。從這些植物中獲得的褐藻多糖硫酸酯方法可以引用
背景技術(shù)：
中所述的技術(shù)方法，所獲得的分子量在十萬(wàn)數(shù)量級(jí)水平上。從海帶、馬尾藻、海黍子中獲得的褐藻多糖硫酸酯平均分子量分別為350KD、550KD、980KD。本發(fā)明應(yīng)用時(shí)，可以使用這些分子量比較高的褐藻多糖硫酸酯，優(yōu)先選用分子量在5000D-200KD低分子量的褐藻多糖硫酸酯，所用低分子量褐藻多糖硫酸酯可以從海藻中提取也可以從高分子量褐藻多糖硫酸酯解聚而來(lái)。需要指出的是，隨著技術(shù)的持續(xù)進(jìn)步，可供本發(fā)明應(yīng)用的褐藻多糖硫酸酯分子量變化是落在本發(fā)明范圍內(nèi)的。所用的褐藻多糖硫酸酯的純度不小于50%，優(yōu)選為不小于70%，更優(yōu)選為不小于90%，最佳是不小于95%。根據(jù)所用藻類種類不同，所獲得的褐藻多糖硫酸酯主要的基團(tuán)巖藻糖、硫酸基含量存在一定的差異，但這種差異不影響本發(fā)明應(yīng)用于防治化學(xué)性肝損傷，所帶來(lái)的只是保健效果的強(qiáng)化或者弱化，這是屬于本發(fā)明范圍之內(nèi)的。本發(fā)明所指的褐藻多糖硫酸酯涵蓋化學(xué)上所普遍接受的褐藻多糖硫酸酯定義的一類化學(xué)物質(zhì)。本發(fā)明所用靈芝多糖類物質(zhì)不受提取工藝的限制?？梢砸枚喾N方法來(lái)獲得。例如廣州食品工業(yè)科技(2003.19(4):12-15)所提到的現(xiàn)有的獲取靈芝多糖的技術(shù)方法；靈芝多糖生物學(xué)功能及其提取方法研究(黑龍江醫(yī)藥2007.3(20):207-209)所提到的技術(shù)方法。在本發(fā)明中，一個(gè)優(yōu)選的提取工藝可以是將靈芝菌絲體用水提取(優(yōu)先用水煮法或者水回流法，水溫80-IOO'C，時(shí)間l-4小時(shí))，然后用醇沉淀(優(yōu)選乙醇，濃度60-95%,溫度4-3(TC，時(shí)間3-12小時(shí))，由此可獲得富含靈芝多糖的初提物。重復(fù)上述過(guò)程1-3次。即可得本發(fā)明靈芝多糖。根據(jù)本發(fā)明的精神，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以得知應(yīng)用其他若千常用藥材用與替代本發(fā)明所用的靈芝來(lái)達(dá)到類似或者相同的實(shí)施效果。通過(guò)目前已上市的若干防治化學(xué)肝損傷保健品的功效成分和文獻(xiàn)，例如靈芝枸杞復(fù)合抗氧化作用(食品與機(jī)械，2004.6)公開(kāi)了靈芝多糖、枸杞多糖對(duì)羥基自由基、超氧陰離子自由基等均有良好的防治作用。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以知道枸杞多糖同樣可以起到類如本發(fā)明靈芝多糖的效果。這是涵蓋在本發(fā)明范圍內(nèi)的。本發(fā)明發(fā)明人同時(shí)研究了將褐藻多糖硫酸酯靈芝多糖組合物加入維生素C所帶來(lái)的效果改善，申請(qǐng)人的實(shí)驗(yàn)顯示維生素C可以在本發(fā)明組合的基礎(chǔ)上進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明效果有所提高，因此本發(fā)明還包括著這樣一個(gè)技術(shù)方案在本發(fā)明組合物的基礎(chǔ)上，加入適量維生素C來(lái)改善本發(fā)明的實(shí)施效果。本發(fā)明組合物可以直接制成制劑，也可以選擇性地加入藥學(xué)載體然后制成口服制劑。本發(fā)明組合物對(duì)防治人體化學(xué)性肝損傷、調(diào)節(jié)免疫力具有積極作用，因此可以適用于亞健康人群做保健品。本發(fā)明所述的保健品泛指可以提高和保護(hù)人體健康狀態(tài)的產(chǎn)品，包括食物和飲料。所指的食物包括但不限于小麥制品、淀粉制品、肉類制品、植物提取物、奶乳、保健糖等；所指的飲料包括所有人體可飲用的液體制品包括普通的飲用飲料和用于提高特定機(jī)能的功能飲料，比如運(yùn)動(dòng)飲料。本發(fā)明在應(yīng)用于保健品時(shí)，還可以在最終制備為產(chǎn)品時(shí)加入其他營(yíng)養(yǎng)成分使用，這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括淀粉、葡萄糖、乳糖、甘露糖、蔗糖、糖漿、蜂蜜、多種氨基酸、鈣鐵鋅、維生素等。本發(fā)明組合物具體應(yīng)用時(shí)，可以與輔料結(jié)合使用。輔料可包括賦形劑、抗氧劑、PH調(diào)節(jié)劑、防腐劑、等滲劑等任何藥學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)上可接受的、安全性有保證的輔料。本發(fā)明組合物可以制備為多種類型，包括膠囊、片劑、粉劑、顆粒劑、口服液或糖漿等,優(yōu)選為膠囊和口服液。改變產(chǎn)品的外表存在形式屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員可以聯(lián)想到的技術(shù)方案,因此改變最終產(chǎn)品的形狀屬于本發(fā)明的覆蓋范圍。申請(qǐng)人對(duì)本發(fā)明產(chǎn)品功能進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)與褐藻多糖硫酸酯或靈芝多糖單獨(dú)應(yīng)用相比，本發(fā)明組合物應(yīng)用可顯著降低肝臟、腦組織和血液中的過(guò)氧化物含量、提高體內(nèi)抗氧化劑活性、清除自由基和脂質(zhì)過(guò)氧化作用，具有協(xié)同的療效。長(zhǎng)期服用本發(fā)明產(chǎn)品具有護(hù)肝作用，并對(duì)預(yù)防和/或治療化學(xué)性肝損傷有積極作用。免疫調(diào)節(jié)作用的研究發(fā)現(xiàn)本發(fā)明應(yīng)用可顯著提高調(diào)節(jié)人體免疫力的效果，并且能同時(shí)調(diào)節(jié)體液、淋巴、細(xì)胞等多個(gè)免疫系統(tǒng)，具有協(xié)同的療效。具體實(shí)施例方式如下實(shí)施例旨在說(shuō)明本發(fā)明具體實(shí)施方案，并不限定本發(fā)明保護(hù)范圍。在實(shí)施例中所用的靈芝多糖為依據(jù)本發(fā)明說(shuō)明書第六頁(yè)所獲得的。制備實(shí)施例1一.lmg10mg18mg18mg15mg10mg2tng則定重量后制成膠囊。褐藻多糖硫酸酷靈芝多糖淀粉甘露醇微晶纖維素硅膠將上述成分?jǐn)嚢杌靹虺山M合物，制備實(shí)施例2褐藻多糖硫酸酯靈芝多糖淀粉甘露醇葡萄糖微晶纖維素硅膠20mg5mg20mg22mg15mg10mg2mg將上述成分?jǐn)嚢杌靹虺山M合物，制備實(shí)施例3l定重量后制成膠囊褐藻多糖硫酸酯靈芝多糖淀粉甘露醇微晶纖維素硅膠50mg5mg24mg24mg15mg10mg3mg將上述成分?jǐn)嚢杌靹虺山M合物，測(cè)定重量后制成膠囊-制備實(shí)施例4褐藻多糖硫酸酯靈芝多糖血紅素鐵維生素C葉酸40mg9rag8ug400ug將上述成分混勻研磨成粉末溶解于去離子水至1000ml,進(jìn)行密封、滅菌和分裝，制備為符合特定規(guī)格的口服液。在大規(guī)模生產(chǎn)中本發(fā)明制備口服液可以在用量上進(jìn)行放大，充分溶解后進(jìn)行罐裝然后密封、滅菌和分裝為符合規(guī)格的口服液，比如500ral，1L等。對(duì)比實(shí)施例1褐藻多糖硫酸酯20mg淀粉20mg甘露醇24mg葡萄糖16mg微晶纖維素10mg硅膠2mg將上述成分?jǐn)嚢杌靹虺山M合物，測(cè)定重量后制成膠囊。對(duì)比實(shí)施例2靈芝多糖5mg淀粉20mg甘露醇20mg葡萄糖16mg微晶纖維素10mg硅膠2mg將上述成分?jǐn)嚢杌靹虺山M合物，測(cè)定重量后制成膠囊。實(shí)驗(yàn)例1實(shí)驗(yàn)材料小白鼠，健康狀況良好。本發(fā)明組合物，褐藻多糖硫酸酯靈芝多糖4:1,溶于水制為混懸液。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目急性毒性試驗(yàn)30天喂養(yǎng)試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法l.急毒性試驗(yàn)選擇小白鼠40只，雌雄各20只，體重為18-22g。雌雄小鼠各隨機(jī)分成四個(gè)劑量組16.00，7.27，3.31，1.50g/KG(bw),小鼠灌胃后連續(xù)觀察15d，記錄毒性表現(xiàn)和死亡情況。2.30d喂養(yǎng)試驗(yàn)采用的樣品同急毒性試驗(yàn)，選用體重為55-70g的Wistar大鼠，將大鼠分為對(duì)照組和三個(gè)劑量組，高劑量B組采用4.50g/kg(bw),中劑量C組0.90g/kg(bw),低劑量D組0.16g/kg(bw)，每組十只大鼠，對(duì)照A組喂食正常基礎(chǔ)飼料，飼料攝入量按照大鼠體重10%計(jì)算。連續(xù)觀察三十天。觀察指標(biāo)包括(1)臨床觀察動(dòng)物的一般表現(xiàn)、行為、中毒癥狀、死亡癥狀，每周稱取一次體重和攝入量，計(jì)算食物總利用率。(2)血常規(guī)及生化指標(biāo)在試驗(yàn)第三十一天微靜脈取血，測(cè)定血紅蛋白HGB、紅細(xì)胞RBC、白細(xì)胞WBC。l.急毒性試驗(yàn)結(jié)果如下表1本發(fā)明組合物急毒性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>假定生產(chǎn)的保健品以成人60kg體重日攝入量0.05g/kg.bw，對(duì)照我們采用的最高對(duì)照組，相當(dāng)于成人攝入量的320倍。試驗(yàn)觀察十四天未見(jiàn)中毒癥狀，死亡數(shù)為零。受試物對(duì)兩種性別的小鼠急毒性LDm均大于15.OOg/kg.bw.根據(jù)現(xiàn)行的毒性分級(jí)，屬于無(wú)毒級(jí)別。2.30天喂養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果1.對(duì)大鼠體重的影響，結(jié)果參見(jiàn)附圖l結(jié)論各組動(dòng)物生長(zhǎng)正常。與對(duì)照組比較，各劑量組與之不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)2.對(duì)大鼠食物吸收率的影響，結(jié)果參見(jiàn)附圖2結(jié)論動(dòng)物喂食30天，動(dòng)物未出現(xiàn)拒食現(xiàn)象。各劑量組動(dòng)物與對(duì)照組動(dòng)物食物吸收率不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)3.血清學(xué)檢查結(jié)果結(jié)果參見(jiàn)附圖3(本圖中血清蛋白單位為g/dl、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為*1012/1)白細(xì)胞計(jì)數(shù)為*109/1)結(jié)論劑量組與對(duì)照組沒(méi)有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P〉0.05)。綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以認(rèn)為本品無(wú)副作用。實(shí)驗(yàn)例2材料與方法Wistar大鼠，188-212g;本發(fā)明組合物，規(guī)格為每份25mg，褐藻多糖硫酸酯靈芝多糖4:1，溶于水制為混懸液；四氯化碳；谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT:谷草轉(zhuǎn)氨酶AST;甘油三酯TG。劑量分組設(shè)置三個(gè)劑量組500rag/kd.bw.d(高劑量組)，250rag/kd.bw.d(中劑量組)，120mg/kd.bw.d(低劑量組)，受試物稀釋至所需要的濃度，另外設(shè)置褐藻多糖硫酸酯對(duì)照組(簡(jiǎn)寫為A對(duì)照組)、靈芝多糖對(duì)照組(B對(duì)照組)和四氯化碳模型組、陰性對(duì)照組。褐藻多糖硫酸酯對(duì)照組給與褐藻多糖硫酸酯250rag/kd.bw.d，靈芝多糖對(duì)照組給與靈芝多糖250rag/kg.bw.d，四氯化碳模型組，陰性對(duì)照組給與蒸餾水。實(shí)驗(yàn)方法以2%四氯化碳造急性化學(xué)肝臟損傷模型:各劑量組依據(jù)設(shè)定劑量給予本發(fā)明組合物(灌胃量5.00ml/kg.bw)，A,B對(duì)照組分別給予褐藻多糖硫酸酯、靈芝多糖?？瞻讓?duì)照組、模型組給予蒸餾水，連續(xù)三十天。第30天將各組動(dòng)物隔夜禁食16小時(shí)，然后將模型組、組合物劑量組、A，B對(duì)照組一次性灌胃給予四氯化碳(2%濃度、5ml/kg.Bw).劑量組、A、B對(duì)照組繼續(xù)給與受試物至24小時(shí)后結(jié)束試驗(yàn)，處死動(dòng)物。，取血分離血清，測(cè)定ALT、AST以及肝組織中TG含量，并取肝臟作病理切片。病理組織學(xué)觀察肝細(xì)胞以變性、壞死等為技術(shù)指標(biāo)，。ALT、AST、TG檢查結(jié)果參見(jiàn)附圖4，5，6。由圖可見(jiàn)，本發(fā)明組合物高劑量組的ALT低于四氯化碳模型組，差異顯著；高劑量組的AST低于四氯化碳模型組，差異顯著。同時(shí)還可以看出，在同等劑量250mg/kd.bw.d下，本發(fā)明效果明顯優(yōu)于單獨(dú)的褐藻多糖硫酸酯、靈芝多糖，差異顯著。相對(duì)分別取得了ALT指標(biāo)26.0%、26.7%,AST指標(biāo)8.3%、7%的改善，可以認(rèn)為效果取得了明顯進(jìn)步。在TG指標(biāo)上也有約5%的改善。肝細(xì)胞病理學(xué)組織觀察結(jié)果參見(jiàn)附圖7由圖可見(jiàn)，本發(fā)明高劑量組肝細(xì)胞病變程度明顯小于四氯化碳模型組，差異顯著。在病理改變程度上，明顯優(yōu)于褐藻多糖硫酸酯、靈芝多糖的單獨(dú)應(yīng)用。同等劑量下本發(fā)明組合物相對(duì)于褐藻多糖硫酸酯、靈芝多糖單獨(dú)應(yīng)用效果取得了11.9%、12.0%的改善，改善效果明顯。上述試驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明所公開(kāi)的組合物可以有效防治化學(xué)肝損傷、有效提高人體免疫能力。對(duì)比對(duì)照組，本發(fā)明組合物用于防治化學(xué)性肝損傷效果明顯，同等用量下效果明顯好于兩個(gè)單獨(dú)組分。實(shí)驗(yàn)例3選用雌性小鼠，隨機(jī)分為四組，體重18-22g。本發(fā)明組合物，其中褐藻多糖硫酸酯靈芝多糖3:l,溶解于去離子水制成混懸液。注射用環(huán)磷酰胺(cyclophospha—mide，Cy)，用于免疫力低下模型構(gòu)建。綿羊紅細(xì)胞(she印e—rythrocyte，SRBC)。按照人體正常使用量成人60kg體重日攝入量0.05g/kg.Bw，涉及分成高中低三個(gè)劑量組(劑量分別相當(dāng)于正常人使用量的5，2，l倍)，每組十只。另外設(shè)置褐藻多糖硫酸酯對(duì)照組、靈芝多糖對(duì)照組、模型組、對(duì)照組，分別給予正常人體用量2倍的褐藻多糖硫酸酯、靈芝多糖、蒸餾水、蒸餾水，分別記為A對(duì)照組、B對(duì)照組、模型組。采用灌胃給藥，每日一次。20天后測(cè)定各項(xiàng)免疫指標(biāo)。其中在第十五天時(shí)除對(duì)照組外每只小鼠腹腔注射Cy50mg/kg(對(duì)照組給予等容量生理鹽水)連續(xù)2d，制備免疫功能低下的動(dòng)物模型.第二十天每鼠尾靜脈注入離心后50%的印度墨汁(0.lml/10g)，2rain和10min后分別從眼球取血401，并將其加到4ml0.1%NaHC03溶液中，600nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度值，按文獻(xiàn)方法測(cè)定吞噬指數(shù)，記錄小鼠體重，活殺取胸腺并稱濕重，以小鼠胸腺重/體重(mg/g)作為胸腺指數(shù)。半數(shù)溶血值、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的測(cè)定方法采用常規(guī)的文獻(xiàn)方法，比如文獻(xiàn)淮山藥多糖免疫調(diào)節(jié)作用研究(時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007.18(5))所采用的方案DTH測(cè)試方法如下制備DTH模型，第十五天每鼠腹部涂1%DNFB丙酮麻油溶液50ml致敏，次日同劑量強(qiáng)化l次，同時(shí)除對(duì)照組外制備免疫低下模型，該模型構(gòu)建方法參考上述用于測(cè)試胸腺指數(shù)、吞噬指數(shù)的模型構(gòu)建方法。致敏后三天，將1%DNFB溶液均勻涂抹于小鼠右耳進(jìn)行攻擊。攻擊24h，引頸處死小鼠，剪下左右耳殼，用直徑9mm打孔器打下圓耳片稱重,左右耳片之差為腫脹度。抗疲勞能力測(cè)試無(wú)關(guān)于免疫力，因此沒(méi)有模型組，也無(wú)需采用免疫力低下模型構(gòu)建，只需對(duì)照組即可。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結(jié)果6:表7對(duì)小鼠抗疲勞能力的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>對(duì)比對(duì)照實(shí)驗(yàn)組的的數(shù)據(jù)，本發(fā)明提高免疫力的效果優(yōu)于單獨(dú)使用單一成分。本發(fā)明調(diào)節(jié)免疫功能涵蓋了調(diào)節(jié)體液系統(tǒng)和吞噬細(xì)胞及淋巴系統(tǒng)，能夠全方位的增強(qiáng)人體免疫力。表現(xiàn)在l.在正常劑量下全方位的增強(qiáng)免疫功能，包括體液免疫、吞噬細(xì)胞、淋巴免疫。。2.把組合物單位濃度提高一定劑量(比如5倍量)，可以抑制人體免疫機(jī)能的增強(qiáng)，或者降低人體免疫機(jī)能。說(shuō)明本發(fā)明用途可以雙向調(diào)節(jié)免疫機(jī)能，高劑量下對(duì)免疫力亢奮有一定抑制作用。權(quán)利要求1.一種藥物組合物，含有褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖類物質(zhì)，其中的靈芝多糖類物質(zhì)選自靈芝藥材、靈芝提取物、靈芝孢子粉提取物、靈芝破壁孢子粉提取物、靈芝菌絲體提取物等的一種或多種。2.根據(jù)權(quán)利要求l的組合物，其中褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖的重量比為1:100-100:1。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其為藥品或保健品的形式。4.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，組合物中還含有藥學(xué)可接受的輔料或保健品可接受的添加劑。5.根據(jù)權(quán)利要求l的組合物，其特征是組合物中還可含有維生素C。6.根據(jù)權(quán)利要求l、2或4的組合物，其為片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、粉劑、口服液或糖漿。7.權(quán)利要求16的組合物在制備保肝藥物或保健品中的用途。8.權(quán)利要求16的組合物在制備治療或預(yù)防化學(xué)性肝損傷的藥物或保健品中的用途。9.權(quán)利要求16的組合物在制備調(diào)節(jié)人體免疫力的藥物或保健品中的用途。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種組合物，該組合物含有褐藻多糖硫酸酯和靈芝多糖類物質(zhì)。本發(fā)明公開(kāi)了本發(fā)明組合物在防治化學(xué)性肝損傷、調(diào)節(jié)免疫力藥品和保健品中的應(yīng)用。發(fā)明人的研究表明，本發(fā)明組合物應(yīng)用于藥品或者保健品長(zhǎng)期服用對(duì)調(diào)節(jié)人體免疫系統(tǒng)平衡、增強(qiáng)對(duì)疾病抵御能力、治療化學(xué)性肝損傷均有良好的效果。本發(fā)明同時(shí)公開(kāi)了組合物的制備工藝。文檔編號(hào)A61P37/02GK101361764SQ20081011949公開(kāi)日2009年2月11日申請(qǐng)日期2008年9月1日優(yōu)先權(quán)日2008年9月1日發(fā)明者郝守祝申請(qǐng)人:北京世紀(jì)博康醫(yī)藥科技有限公司