專利名稱：：一種枳椇總黃酮的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種枳模總黃酮的制備方法、質(zhì)量控制方法及其在醫(yī)藥、食品、化妝品和保健品領(lǐng)域的應(yīng)用，屬于天然產(chǎn)物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：枳模(ifovembacerbaLindl)為鼠李科拐棗屬植物，別名南枳模、拐棗、木蜜、拐棗、雞爪子、萬(wàn)字果、金果等，為一種非常珍貴的藥食兼用果樹(shù)，主要分布陜西、江西、安徽、浙江、廣東、福建、湖北、湖南、廣西、四川、貴州、云南等省，資源極為豐富。以帶有肉質(zhì)果柄的果實(shí)或種子入藥，稱為"枳模子"，具有止渴除煩、解酒毒、利二便、醒酒安神、祛風(fēng)通絡(luò)止痙，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)和降血壓等作用，主治醉酒，煩熱，口渴，嘔吐，二便不利；同時(shí)，枳模的果柄、果實(shí)、葉、花、根皮等民間也用入藥，有治療風(fēng)濕等作用；屬于養(yǎng)陰、生津、潤(rùn)燥、止渴、涼血類藥物。黃酮為枳棋的有效活性成分，主要結(jié)構(gòu)為黃酮醇(苷)、黃垸醇和二氫黃酮醇類黃酮化合物，具有保肝、解酒毒、抗菌、抗氧化等作用。目前沒(méi)有枳?？傸S酮制備方法的文獻(xiàn)報(bào)道，嚴(yán)重的限制了枳模黃酮的利用和藥效作用的發(fā)揮。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種枳模果柄、果實(shí)、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮和果渣等總黃酮的制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種枳棋總黃酮作為藥物制劑、藥品輔料或功能因子在藥品、食品、化妝品和保健品領(lǐng)域的應(yīng)用。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種枳模總黃酮可單獨(dú)作為制劑或與某些保肝、解酒和抗氧化藥合用制成劑型，應(yīng)用于藥品、食品、化妝品和保健品領(lǐng)域。本發(fā)明提出的枳模總黃酮，是從枳模子、果柄、果實(shí)、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮和果渣等部位提取出來(lái)的黃酮類活性成分的組合，其中主要化合物結(jié)構(gòu)如下<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本發(fā)明所述材料，來(lái)源于鼠李科枳模屬植物枳模(//ovem'aacw^Lindl)。作為提取枳?？傸S酮的原材料，可以是市售枳棋子，也可以是枳模果柄、果實(shí)、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮和果渣等任一部位或全部植株，其中優(yōu)選的藥材部位為枳模果柄、果實(shí)、種子和果渣。上述所述的枳模包括未經(jīng)任何炮制處理的原藥材及飲片，還包括各種炮制品。本發(fā)明所述的枳棋總黃酮，是指從上述植物的任何部位提取得到的，含有多種黃酮類活性成分的組合物。這些總黃酮類成分主要包括槲皮素、槲皮素-3-0-ct-L-鼠李糖苷、槲皮素-3"-cc-L-鼠李糖基-(l-6)-y5-D-半乳糖苷、異槲皮素、蘆丁、(+)-二氫楊梅素、4，，5，，7-三羥基-3，，5，-二甲氧基黃酮、楊梅素、洋芹素、花旗松素、北枳犋醇、山萘酚、山萘酚-3-(9-ct-L-鼠李糖苷、(+)-焦兒茶素、山萘酚-3,7-(9-cc-L-二鼠李糖苷、山萘酚-3-0-cc-L-鼠李糖-(1—6)-0-y9-D-半乳糖苷、3,4'，5，5',7-五羥基-3'-甲氧基黃酮、枳棋素I、枳模素ii和枳模素m等。本發(fā)明所述的枳模各種黃酮活性成分之中，其最主要的是槲皮素、山萘酚、(+)-二氫楊梅素、楊梅素、北枳模醇、(+)-焦兒茶素、枳模素I、枳模素II和枳模素III及其衍生物等。作為枳?？傸S酮提取物，其中各黃酮類成分百分含量的總和為5100%(W/W)，其中優(yōu)選的為50100%(W/W)。本發(fā)明所述的制備枳?？傸S酮，除了可用于醫(yī)藥工業(yè)，還可用于食品工業(yè)、化妝品工業(yè)和保健品工業(yè)。本發(fā)明所述的制備枳?？傸S酮可單獨(dú)制成制劑或與其他抗氧化、解酒毒、保肝養(yǎng)肝等藥物合用，用于酒精中毒、肝病和因自由基所致的各種疾病等的治療；這些制劑具有與枳?？傸S酮全部相同或相近的藥理活性和用途。本發(fā)明還提出了枳?？傸S酮提取物的制備方法，枳模子或果柄、果實(shí)、種子、種殼、根、莖、葉、花、枝、皮和果渣等任一部位或其組合，它可以采用以下任意一種方法，或這些方法的任意組合進(jìn)行制備(1)溶劑提取法；(2)溶劑萃取法；(3)大孔吸附樹(shù)脂法；(4)超臨界流體萃取法；(5)柱色譜法；(6)液-液逆流分配色譜法。在使用這些方法進(jìn)行制備時(shí)，一般包括以下幾個(gè)步驟(1)提取所用溶劑可以是水或任意一種醇類、酮類或酯類溶劑，或這些溶劑按一定比例組成的混合溶劑，或由這些溶劑與酸、堿、鹽配成的酸性或堿性溶劑。提取方法可以是煎煮、加熱回流、超聲提取、索氏提取、冷浸、滲漏、微波提取、高壓提取等。優(yōu)選的加熱回流提取工藝為用095%乙醇溶液(V/V)，溶劑用量為520倍量(mL/g)，5010(TC回流提取23h，回流提取25次。優(yōu)選的索氏提取工藝為用095%乙醇溶液(V/V)，以料液比為l:1050(g/mL)，60100。C連續(xù)加熱回流提取512h。優(yōu)選的超聲提取工藝為將枳模提取材料裝入超聲提取器內(nèi)，按料液比為1:615(g/mL)加入70%乙醇溶液(V/V)，采用溫度為3050°C，頻率為40kHz、功率為0.30.5W/cm2的超聲波提取1530分鐘，提取23次，合并提取液。優(yōu)選的微波提取工藝為以固液比l:2040(g/mL)加入095X乙醇溶液(V/V)浸泡2060分鐘，控制微波功率為900W，照射3050秒，取出后迅速冷卻至室溫，再照射2040秒，同法操作重復(fù)35次，過(guò)濾，合并提取液。(2)過(guò)濾包括離心、抽濾、超濾、壓濾等方法，使用或不使用以下任意一種澄清劑或其組合醇沉劑，明膠，高嶺土，各種樹(shù)脂，聚乙二醇，聚乙三醇，殼聚糖以及天然澄清劑成品如101果汁澄清劑、ZTC+1天然澄清劑等。優(yōu)選的過(guò)濾方法是使用硅藻土助濾劑用300號(hào)硅藻土和9(TC熱水對(duì)硅藻土過(guò)濾機(jī)進(jìn)行預(yù)涂和殺菌，再用20號(hào)硅藻土和90。C熱水對(duì)硅藻土過(guò)濾機(jī)進(jìn)行預(yù)涂和殺菌，將提取液用硅藻土過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得濾液。(3)濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發(fā)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)及煎煮濃縮等。(4)干燥包括真空干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等。當(dāng)采用萃取法進(jìn)行制備時(shí)，一般先將提取物混懸于水中，然后用垸烴類(如石油醚、己垸、汽油等)萃取除去脂溶性雜質(zhì)，然后用合適的極性溶劑，如乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇等，或是這些溶劑的混合物，萃取獲得其中的總黃酮成分，得到總黃酮。當(dāng)采用大孔吸附樹(shù)脂法進(jìn)行制備時(shí)，所用的大孔樹(shù)脂可以是非極性、弱極性、中等極性、弱堿性或弱酸性等任意一種類型，如D101、D4020、D3500、D941、D21、HP-20、HP-20、XDA-1、AB畫8、HPD400、S-8、HZ-806、H-50、H-30、LX-38、LX-28、LS-300B、LS-306、LSD-958、PA等，其中優(yōu)選的為弱極性或中等極性的樹(shù)脂，如LX-28、DlOl、PA等。所用的洗脫劑為水和含水的乙醇、甲醇、丙酮等，其中優(yōu)選的為5095%的乙醇溶液(V/V)。當(dāng)采用超臨界流體萃取法進(jìn)行制備時(shí)，可以對(duì)枳犋原料直接進(jìn)行萃取，也可以對(duì)上述任一方法和步驟所獲得的產(chǎn)物進(jìn)行萃取。萃取時(shí)可以使用或不使用以下任一種類溶劑及溶劑混合物水、醇類、酮類、酯類及醚溶劑。當(dāng)采用柱色譜法進(jìn)行制備時(shí)，其處理的對(duì)象可以是上述提取步驟所獲得的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法或超臨界流體萃取法初步純化后的產(chǎn)物。所用的固定相可以是硅膠、聚酰胺、氧化鋁、葡聚糖(Sephadex系列或Sephadex-20系列)、C-8、C-18、活性碳、纖維素等，所用的洗脫液因固定相的不同而不同，一般是水、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、石油醚等組成的混合溶劑。優(yōu)選的是聚酰胺柱色譜法。優(yōu)選的聚酰胺柱色譜法制備工藝為選用聚酰胺，枳模黃酮粗提取物上樣液濃度l:4l:16(以生藥量(g):分散毫升數(shù))，吸附流速29BV/h，樹(shù)脂柱徑高比1:31:15，上樣量為100500mg/mL(以生藥量計(jì))，020%乙醇溶液(V/V)洗脫15倍樹(shù)脂體積進(jìn)行除雜，除雜流速為27BV/h，用5095X乙醇溶液(V/V)洗脫37倍樹(shù)脂體積，洗脫流速為29BV/h，收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓干燥，得枳?？傸S酮。當(dāng)采用液-液逆流萃取法進(jìn)行制備時(shí)，其處理的對(duì)象可以是上述提取步驟的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法或超臨界流體萃取法初步純化后的產(chǎn)物。一般是將提取物混懸于水中，然后用低極性的烷烴類或醚類溶劑(如石油醚、己烷、汽油等)萃取除去脂溶性雜質(zhì)，然后用合適極性的溶劑，如氯仿、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇等，或是這些溶劑的混合物，萃取獲得其中的總黃酮成分，得枳棋總黃酮。該提取物可以單獨(dú)或與其它任何中西藥、食物、其他輔料按任意比例配伍，用于制備藥物、食品、保健品和化妝品，所得的藥物、食品、保健品和化妝品可以是膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、口服液、糖漿、沖劑、酒劑、注射劑、膏劑、散劑、飲料等。本發(fā)明質(zhì)量控制方法可包括以下含量測(cè)定方法中的一種或兩種1.總黃酮精密稱取12(TC干燥至恒重的盧丁對(duì)照品250mg，用無(wú)水甲醇溶解，轉(zhuǎn)移入250mL容量瓶中，用無(wú)水甲醇定容，搖勻。精確移取5.00mL置于50mL容量瓶中，用無(wú)水甲醇定容，搖勻。此蘆丁對(duì)照品溶液濃度為0.1mg/mL。準(zhǔn)確吸取0.1mg/mL蘆丁對(duì)照品溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL，分別置于25mL容量瓶中，各加50%乙醇溶液(V/V)至6mL，分別加5。/。亞硝酸鈉溶液(W/V)1.00mL，搖勻，放置6min后分別加100/。硝酸鋁溶液(W/V)1.00mL，搖勻，放置6min，再分別加1%氫氧化鈉溶液(W/V)10.00mL,再用50%乙醇溶液(V/V)定容，搖勻，放置15min后，以空白溶液為參比，在波長(zhǎng)510nm處測(cè)吸光度，得回歸方程。分別準(zhǔn)確吸取枳模黃酮提取物樣品各3份，每份20mg，置50mL容量瓶中，加50%乙醇溶液(V/V)超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻。按所述顯色并在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度A，由回歸方程計(jì)算樣品中總黃酮含量。2.槲皮素、山萘酚和北枳模醇的含量色譜條件色譜柱反相C18(4.6X250mm,5pm);流動(dòng)相3085^甲醇溶液(V/V)(用磷酸調(diào)pH至3.0)洗脫(020min);流速1.0mL/Min;檢測(cè)波長(zhǎng)360nm;柱溫室溫。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制分別精密吸取稱取槲皮素、山萘酚和北枳模醇對(duì)照品，用甲醇溶解分別配制成濃度為IOO、288、190pg/mL對(duì)照品溶液，0、2、5、10、15、20jiL注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積，以對(duì)照進(jìn)樣量(Pg)為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。含量測(cè)定精密稱取3批總黃酮提取物樣品各3份，每份約20mg，置于50mL量瓶中，加甲醇超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為槲皮素、山萘酚和北枳模醇含量測(cè)定的供試樣品溶液，精密吸取上述供試樣品溶液2(^L注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積，計(jì)算含量。3.(+)-二氫楊梅素色譜條件色譜柱反相C18(4.6X250mm,5pm);流動(dòng)相2540%甲醇溶液(v/V)(用磷酸調(diào)pH至3.0)洗脫(050min);流速1.0mL/Min;檢測(cè)波長(zhǎng)294nm;柱溫室溫。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制分別精密吸取(+)-二氫楊梅素對(duì)照品溶液(2.(Vg4iL)0、2、5、10、15、20pL注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積，以對(duì)照進(jìn)樣量(|Ag)為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。含量測(cè)定精密稱取3批總黃酮提取物樣品各3份，每份約20mg，置于50mL量瓶中，加20%乙腈溶液(V/V)超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為(+)-二氫楊梅黃素含量測(cè)定的供試樣品溶液，精密吸取上述供試樣品溶液2(HiL注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積，計(jì)算含量。4.楊梅素色譜條件色譜柱反相C18(4.6X250mm,5|im);流動(dòng)相4060%甲醇溶液(V/V)(用磷酸調(diào)pH至3.0)洗脫(050min);流速1.0mL/Min;檢測(cè)波長(zhǎng)370nm;柱溫室溫。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱取楊梅素對(duì)照品9.80mg、置100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。用甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，配成9.8、19.6、29.4、39.2、49.0pg/mL系列濃度的楊梅素溶液注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積，以對(duì)照進(jìn)樣量(Mg)為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。含量測(cè)定精密稱取3批總黃酮提取物樣品各3份，每份約20mg,置于50mL量瓶中，加甲醇超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為楊梅素含量測(cè)定的供試樣品溶液，精密吸取上述供試樣品溶液20pL注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積，計(jì)算含量。4.(+)-焦兒茶素、枳模素I、枳模素n和枳犋素in色譜條件色譜柱反相C18(4.6X250mm，5pm);流動(dòng)相1540%甲醇溶液(V/V)洗脫(040min);流速1.0mL/Min;檢測(cè)波長(zhǎng)280nm。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制分別精密吸取(+)-焦兒茶素、枳模素I、枳模素n和枳模素III對(duì)照品溶液(0.027pg/nL)0、2、5、10、15、20nL注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積，以對(duì)照進(jìn)樣量(jug)為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。含量測(cè)定精密稱取3批總黃酮提取物樣品各3份，每份約20mg，置于50mL量瓶中，用50%甲醇溶液(V/V)溶液超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為(+)-焦兒茶素、枳模素i、枳模素n和枳模素m含量測(cè)定的供試樣品溶液，精密吸取上述供試樣品溶液20ML注入液相色譜儀，測(cè)定各色譜峰峰面積，計(jì)算含量。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:枳?？傸S酮的制備方法成熟干燥枳模子1Kg粉碎至60目，以固液比1:7(g/mL)加入60%乙醇溶液(V/V)浸泡60分鐘，控制微波功率為900W，照射30秒，取出后迅速冷卻至室溫，再照射40秒，同法操作重復(fù)3次，過(guò)濾，合并提取液。提取液減壓濃縮至20%(V/V)，將其懸浮于水，然后依次用正己垸、乙酸乙酯萃??；取乙酸乙酯萃取物用硅藻土過(guò)濾機(jī)過(guò)濾先用300號(hào)硅藻土和9(TC熱水對(duì)硅藻土過(guò)濾機(jī)進(jìn)行預(yù)涂和殺菌，再用20號(hào)硅藻土和9(TC熱水對(duì)硅藻土過(guò)濾機(jī)進(jìn)行預(yù)涂和殺菌，然后將提取液用硅藻土過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得濾液；真空濃縮干燥得枳棋總黃酮。測(cè)定總黃酮的含量為75%，其中槲皮素、山萘酚、(+)-二氫楊梅素、楊梅素、北枳模醇、(+)-焦兒茶素、枳模素I、枳犋素II和枳模素III及其衍生物等含量和為63%。實(shí)施例2:枳模總黃酮的制備方法取成熟干燥枳模種子1Kg粉碎，過(guò)100目篩，加入7倍量(mL/g)70%乙醇溶液(V/V)，回流提取3次，每次2小時(shí)，提取液濃縮除去乙醇，將其懸浮于水，石油醚萃取除去色素等雜質(zhì)，水相提取液上LX-38型大孔樹(shù)脂柱，緩慢上樣，先用水洗脫4個(gè)柱留體積，改用10%乙醇溶液(V/V)洗脫5倍柱留體積，最后用95。/。乙醇溶液(V/V)洗脫，當(dāng)10。/。AlCl3溶液(W/V)檢測(cè)成陰性時(shí)，停止收集，合并95%乙醇溶液(V/V)洗脫溶劑，真空濃縮干燥得枳模總黃酮。測(cè)定總黃酮的含量為75%，其中槲皮素、山萘酚、(+)-二氫楊梅素、楊梅素、北枳模醇、(+)-焦兒茶素、枳模素I、枳模素II和枳模素III及其衍生物等的含量和為67%。實(shí)施例3:枳模總黃酮的制備方法取枳模果柄去汁后的干燥果渣1Kg，粉碎，過(guò)100目篩，濾除纖維素等雜質(zhì)，粉末千燥，8倍量(mL/g)的70。/。乙醇溶液(V/V)80。C熱回流提取3次，每次2小時(shí)，合并濾液，真空濃縮除去乙醇，蒸餾水溶解，上AB-8型大孔樹(shù)脂柱，緩慢上樣，先用水洗脫流出近無(wú)色，再用3倍樹(shù)脂床體積20%乙醇溶液(V/V)沖洗除雜，沖洗液棄去，用7倍樹(shù)脂床體積的60%乙醇溶液(V/V)洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏干燥得枳?？傸S酮。測(cè)定總黃酮的含量為73%,其中槲皮素、山萘酚、(+)-二氫楊梅素、楊梅素、北枳模醇、(+)-焦兒茶素、枳模素i、枳模素n和枳模素ni及其衍生物等的含量和為55%。實(shí)施例4:枳?？傸S酮的制備方法取枳棋葉lKg粉碎至50目，按照l(shuí):10(g/mL)料液比加入75%乙醇溶液(V/V)，7(TC加熱回流提取2h，提取3次，合并提取液，回收溶劑除去乙醇，加水分散溶解，使水溶液濃度為l:5倍(生藥量(g):分散毫升數(shù))，通過(guò)5L聚酰胺，吸附流速2.5BV/h，柱床莖高比為1:8，上樣量為200mg/mL(以生藥量計(jì))，用4倍柱床體積的水和3倍樹(shù)脂床體積10%乙醇溶液(V/V)沖洗除雜，沖洗液棄去，用6倍樹(shù)脂床體積的80%乙醇溶液(V/V)洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏干燥得枳模總黃酮。測(cè)定枳棋總黃酮含量為54%，其中槲皮素、山萘酚、(+)-二氫楊梅素、楊梅素、北枳犋醇、(+>焦兒茶素、枳犋素I、枳模素11和枳模素111及其衍生物等的含量和為45%。實(shí)施例5:枳棋總黃酮片的制備枳模總黃酮10g淀粉10g上述組分混合均勻，加滑石粉適量，壓制成100片。實(shí)施例6:枳棋總黃酮復(fù)方制劑的制備枳?？傸S酮20g升麻提取物10g葛根提取物10g川連提取物15g上述組分混合均勻，裝入硬明膠膠囊中，共200粒膠囊。權(quán)利要求1.一種枳椇總黃酮的制備方法，其特征在于，本發(fā)明提出的枳椇總黃酮是從枳椇中提取出來(lái)含有多種黃酮類活性成分的組合物。這些總黃酮類成分主要包括槲皮素、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-(1-6)-β-D-半乳糖苷、異槲皮素、蘆丁、(+)-二氫楊梅素、4’，5’，7-三羥基-3’，5’-二甲氧基黃酮、楊梅素、洋芹素、花旗松素、北枳椇醇、山奈酚、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷、(+)-焦兒茶素、山柰酚-3，7-O-α-L-二鼠李糖苷、山萘酚-3-o-a-L-鼠李糖-(1→6)-O-β-D-半乳糖苷、3，4’，5，5’，7-五羥基-3’-甲氧基黃酮、枳椇素I、枳椇素II和枳椇素III等。其中最主要的活性成分是最主要的是槲皮素、山奈酚、(+)-二氫楊梅素、楊梅素、北枳椇醇、(+)-焦兒茶素、枳椇素I、枳椇素II和枳椇素III及其衍生物等。2.如權(quán)利要求1所述的一種枳?？傸S酮的制備方法，其特征在于枳模(/fcvem'aMw^Lindl)為鼠李科枳模屬，作為制備枳模總黃酮的原材料，可以是市售枳模子，也可以是枳模果柄、果實(shí)、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮或果渣等任一部位或其組合，其中優(yōu)選的藥材部位為枳模果柄、果實(shí)、種子和果渣；上述所述的枳棋包括未經(jīng)任何炮制處理的原藥材及飲片，還包括各種炮制品。3.如權(quán)利要求1所述的一種枳棋總黃酮的制備方法，其特征在于，作為枳棋總黃酮，其中各黃酮類成分百分含量的總和為5100%(W/W)，其中優(yōu)選的為50100%(W/W)。4.如權(quán)利要求1所述的一種枳模總黃酮的制備方法，其特征在于，作為枳?？傸S酮，除了可用于醫(yī)藥工業(yè)，還可用于食品工業(yè)、化妝品工業(yè)和保健品工業(yè)。5.如權(quán)利要求14所述的一種枳?？傸S酮的制備方法，其特征在于采用以下任意一種方法溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法、超臨界流體萃取法、柱色譜法和液-液逆流分配色譜法，或這些方法的任意組合進(jìn)行制備。6、如權(quán)利要求5所述的一種枳?？傸S酮的制備方法，其特征在于當(dāng)使用這些方法進(jìn)行枳棋總黃酮制備時(shí)，一般包括以下一個(gè)或幾個(gè)步驟①提取所用溶劑可以是水或任意一種醇類、酮類或酯類溶劑，或這些溶劑按一定比例組成的混合溶劑，或由這些溶劑與酸、堿、鹽配成的酸性或堿性溶劑。提取方法可以是煎煮、加熱回流、超聲提取、冷浸、滲漏、微波提取、高壓提取等。優(yōu)選的加熱回流提取工藝為用095%乙醇溶液(V/V)，溶劑用量為520倍量(mL/g)，5010(TC回流提取，每次23h，提取25次。優(yōu)選的索氏提取工藝為用095%乙醇溶液(V/V)，以料液比為l:1050(g/mL)，60100。C連續(xù)加熱回流提取512h。優(yōu)選的超聲提取工藝為將北枳模提取材料裝入超聲提取器內(nèi)，按料液比為1:615(g/mL)加入70X乙醇溶液(V/V)，采用溫度為3050°C，頻率為40kHz、功率為0.30.5W/cr^的超聲波提取1530分鐘，提取23次，合并提取液。優(yōu)選的微波提取工藝為以固液比l:2040(g/mL)加入095X乙醇溶液(V/V)浸泡2060分鐘，控制微波功率為900W，照射3050秒，取出后迅速冷卻至室溫，再照射2040秒，同法操作重復(fù)35次，過(guò)濾，合并提取液。②過(guò)濾包括離心、抽濾、超濾、壓濾等方法，使用或不使用以下任意一種澄清劑或其組合醇沉劑，明膠，高嶺土，各種樹(shù)脂，聚乙二醇，聚乙三醇，殼聚糖以及天然澄清劑成品如101果汁澄清劑、ZTC+1天然澄清劑等。優(yōu)選的過(guò)濾方法是使用硅藻土助濾劑用300號(hào)硅藻土和9(TC熱水對(duì)硅藻土過(guò)濾機(jī)進(jìn)行預(yù)涂和殺菌，再用20號(hào)硅藻土和90。C熱水對(duì)硅藻土過(guò)濾機(jī)進(jìn)行預(yù)涂和殺菌，將提取液用硅藻土過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得濾液。(D濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發(fā)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)及煎煮濃縮等。干燥包括真空干燥、噴霧干燥、冷凍千燥等。7、如權(quán)利要求6所述的一種枳犋總黃酮的制備方法，其特征在于，當(dāng)采用大孔吸附樹(shù)脂法進(jìn)行制備時(shí)，所用的大孔樹(shù)脂可以是非極性、弱極性、中等極性、弱堿性或弱酸性等任意一種類型，如D101、D4020、D3500、D941、D21、HP-20、HP-20、XDA-1、AB-8、HPD400、S畫8、HZ-806、H-50、H-30、LX-38、LX-28、LS-300B、LS-306、LSD-958、PA等，其中優(yōu)選的為弱極性或中等極性的樹(shù)脂，如LX-38、DlOl、AB-8等；所用的洗脫劑為水和含水的乙醇、甲醇、丙酮等，其中優(yōu)選的為50950^的乙醇溶液(V/V)。8、如權(quán)利要求5所述的一種枳棋總黃酮的制備方法，其特征在于優(yōu)選的是聚酰胺柱色譜法選用聚酰胺，枳模粗提取物上樣液濃度1:41:16(以生藥量(g):分散毫升數(shù))，吸附流速29BV/h，樹(shù)脂柱徑高比1:31:15，上樣量為100500mg/mL(以生藥量計(jì))，020X乙醇溶液(V/V)洗脫15倍樹(shù)脂體積進(jìn)行除雜，除雜流速為27BV/h，用5095%乙醇溶液(V/V)洗脫37倍樹(shù)脂體積，洗脫流速為29BV/h，收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓干燥，得枳?？傸S酮。9、如權(quán)利要求14所述的一種枳模總黃酮的制備方法，其特征在于該枳?？傸S酮可以單獨(dú)或與其它任何中西藥、食物或輔料按任意比例配伍，用于制備藥物、食品、化妝品和保健品，所得的藥物、食品、化妝品和保健品可以是膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、口服液、糖漿、沖劑、酒劑、注射劑、膏劑、散劑、飲料等。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種枳椇總黃酮的制備方法。該方法是采用溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹(shù)脂法、液-液逆流分配色譜法、超臨界流體萃取法或柱色譜法中任意一種方法，或這些方法的任意組合，從枳椇果柄、果實(shí)、種子、種殼、根、莖、葉、花、枝、皮、皮和果渣等任一部位或其組合制備枳椇總黃酮；制備的總黃酮為多種黃酮類活性成分的組合，其中最主要的活性成分槲皮素、山萘酚、(+)-二氫楊梅素、楊梅素、北枳椇醇、(+)-焦兒茶素、枳椇素I、枳椇素II和枳椇素III及其衍生物等；各黃酮類成分百分含量的總和以重量計(jì)為5～100％，可用于醫(yī)藥工業(yè)、食品工業(yè)、化妝品工業(yè)和保健品工業(yè)。文檔編號(hào)A61P39/00GK101336987SQ200810150589公開(kāi)日2009年1月7日申請(qǐng)日期2008年8月12日優(yōu)先權(quán)日2008年8月12日發(fā)明者吳萬(wàn)興,師進(jìn)霖,張存莉申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)