專利名稱：Akt活性抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療關(guān)節(jié)炎的方法，其包括向有此需要的患者給藥有效量的抑制Akt/PKB的式(I)化合物。
本發(fā)明還涉及發(fā)現(xiàn)式(I)的化合物作為Akt/PKB抑制劑是活性的。
在本發(fā)明的另一方面中，本發(fā)明提供用于制備本發(fā)明的抑制Akt/PKB的化合物的新方法和新中間體。
本發(fā)明包括藥物組合物，該藥物組合物包含藥物載體和在本發(fā)明的方法中使用的化合物。
本發(fā)明還包括共同給藥本發(fā)明的抑制Akt/PKB的化合物以及其它活性組分的方法。
發(fā)明詳述 本發(fā)明涉及上述式(I)化合物。
本發(fā)明的式(I)化合物抑制Akt/PKB活性。具體地，在此公開的化合物抑制三種Akt/PKB同工型中的每一種。
包括在本發(fā)明式(I)化合物中的為下述化合物，和/或其可藥用鹽，其中 R41和R42獨(dú)立地選自氫、

鹵素、C1-4烷基、取代的C1-4烷基、C1-4烷氧基、取代的C1-4烷氧基、呋喃、取代的呋喃、噻吩和取代的噻吩， 其中Q為氮，Y選自氮和-C(R70)-，且Z選自氮和-C(R48)-，條件是Y和Z中至多一個(gè)為氮，且R30選自C1-4烷基和被1-3個(gè)氟原子取代的C1-4烷基，其中R70選自氫和鹵素，且R48選自氫、C1-4烷基、取代的C1-4烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、取代的雜環(huán)烷基和鹵素； R43選自氫、鹵素、C1-4烷基、取代的C1-4烷基、C1-4烷氧基、取代的C1-4烷氧基、呋喃和噻吩； R44不存在或R44選自-(CR60R61)mAR，其中AR為未被取代的；-(CR60R61)mAR，其中AR為被取代的；以及C1-6烷基， 其中m為0-3，且AR為單環(huán)或多環(huán)芳香環(huán)或飽和或不飽和的非-芳香環(huán)，其含有3-16個(gè)碳原子且任選含有1-3個(gè)雜原子，條件是當(dāng)該環(huán)為芳香環(huán)且碳原子數(shù)目為3時(shí)，該環(huán)至少含2個(gè)雜原子，以及當(dāng)該環(huán)為芳香環(huán)且碳原子數(shù)目為4時(shí)，該環(huán)至少含1個(gè)雜原子，且R60和R61獨(dú)立地選自氫和C1-4烷基，條件是當(dāng)m為3時(shí)，R60和R61總計(jì)不超過4個(gè)為C1-4烷基， R45選自氫和C1-4烷基； R20選自氫、C1-4烷基和羥基； X選自O(shè)、S和NR49，其中R49選自氫和C1-4烷基；且 n為0至2，且該部分若合適時(shí)任選被羥基C1-4烷基所取代； 條件是R41和R42中一個(gè)且僅有一個(gè)為
包括在本發(fā)明式(I)化合物中的為下列化合物，和/或其可藥用鹽，其中 R41和R42獨(dú)立地選自氫、

鹵素、C1-4烷基、三氟甲基、甲氧基、呋喃和噻吩， 其中Q為氮，Y選自氮和-C(R70)-，且Z選自氮和-C(R48)-，條件是Y和Z中至多一個(gè)為氮，且R30為C1-4烷基，其中R70選自氫和鹵素，且R48選自氫、C1-4烷基、三氟甲基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基和鹵素； R43選自氫、鹵素、C1-4烷基和甲氧基； R44不存在或R44選自-(CR60R61)mAAR，其中AAR為未被取代的；-(CR60R61)mAAR，其中AAR為被取代的；以及C1-6烷基， 其中m為0-3，且AAR選自苯基、吲哚、萘、吡啶和環(huán)己基，且R60和R61獨(dú)立地選自氫和甲基，條件是當(dāng)m為3時(shí)，R60和R61總計(jì)不超過4個(gè)為甲基， R45選自氫和C1-4烷基； R20選自氫、甲基和羥基； X選自O(shè)、S和NR49，其中R49選自氫和甲基；且 n為1-2，且該部分任選被羥基甲基所取代； 條件是R41和R42中一個(gè)且僅有一個(gè)為
包括在本發(fā)明式(I)化合物中的為下列化合物，和/或其可藥用鹽，其中 R41和R42獨(dú)立地選自氫、

鹵素、C1-4烷基、三氟甲基、甲氧基和呋喃， 其中Q為氮，Y選自氮和-C(R70)-，且Z選自氮和-C(R48)-，條件是Y和Z中至多一個(gè)為氮，且R30為C1-4烷基，其中R70選自氫和鹵素，且 R48選自氫、C1-4烷基、三氟甲基、苯基、環(huán)丙基和鹵素； R43選自氫、鹵素、C1-4烷基和甲氧基； R44不存在或R44選自-(CR60R61)mAAR，其中AAR為未被取代的；-(CR60R61)mAAR，其中AAR為被取代的；以及C1-6烷基， 其中m為0-3，且AAR選自苯基、吲哚、萘、吡啶和環(huán)己基，且R60和R61獨(dú)立地選自氫和甲基，條件是當(dāng)m為3時(shí)，R60和R61總計(jì)不超過4個(gè)為甲基， R45選自氫和C1-4烷基； R20選自氫、甲基和羥基； X選自O(shè)、S和NR49，其中R49選自氫和甲基；且 n為1-2，且該部分任選被羥基甲基所取代； 條件是R41和R42中一個(gè)且僅有一個(gè)為
包括在本發(fā)明式(I)化合物中的為下列化合物，和/或其可藥用鹽，其中 R41選自氯、乙基、甲基和甲氧基； R42為
其中Q為氮，Y為-CH-且Z為-C(R48)-，且R30選自甲基和乙基，其中R48選自氫、甲基、氯和溴； R43為氫； R44為-CH2-苯基，其中苯基被一個(gè)或兩個(gè)選自氟和三氟甲基的取代基所取代； R45為氫； R20為氫； X選自O(shè)和S；且 n為1。
包括在本發(fā)明式(I)化合物中的為式(AA)化合物，和/或其可藥用鹽
其中 R1和R2獨(dú)立地選自氫、

鹵素、C1-4烷基、呋喃和噻吩， 其中R6為C1-4烷基且R7選自氫、C1-4烷基和鹵素； R3選自氫、鹵素、C1-4烷基、呋喃和噻吩； R4選自-(CH2)m芳基和其中芳基被取代的-(CH2)m芳基，其中m為0至2； R5選自氫和C1-4烷基； X選自O(shè)和S；且 n為0至2； 條件是R1和R2中一個(gè)且僅有一個(gè)為

且進(jìn)一步條件是R1、R2和R3中至少一個(gè)為氫。
包括在本發(fā)明式(I)化合物中的為式(BB)化合物，和/或其可藥用鹽
其中 R8和R9獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-4烷基、呋喃和噻吩； R6為C1-4烷基； R7選自氫、C1-4烷基和鹵素； R10選自-(CH2)mC5-C12芳基和其中芳基被取代的-(CH2)mC5-C12芳基， 其中m為0至2； R11選自氫和C1-4烷基； X選自O(shè)和S；且 條件是R8和R9中至少一個(gè)為氫。
包括在本發(fā)明式(I)化合物中的為式(CC)化合物，和/或其可藥用鹽
其中 R12選自氫、鹵素、C1-4烷基、呋喃和噻吩； R13選自-(CH2)m苯基和其中苯基被取代的-(CH2)m苯基， 其中m為0至2； X選自O(shè)和S。
包括在本發(fā)明中的化合物為 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-(2-氨基-1-苯基乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-{[(2Z)-1-甲基-2-(2-丙烯-1-亞基)肼基]甲基}-2-噻吩甲酰胺； N-(2-氨基-1-苯基乙基)-4-{[(2Z)-1-甲基-2-(2-丙烯-1-亞基)肼基]甲基}-2-噻吩甲酰胺； N-(2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-(2-氨基-1-苯基乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(3-呋喃基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-3-(甲氧基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[3-氨基-1-(苯基甲基)丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； 4-溴-N-[2-(甲基氨基)-1-苯基乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-[1-(氨基甲基)-3-苯基丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[1-(氨基甲基)-3-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； 4-溴-N-[3-(甲基氨基)-1-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[3-(甲基氨基)-1-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； 4-溴-N-[2-(甲基氨基)-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 N-((1S)-2-氨基-1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[1-(氨基甲基)-2-甲基-2-苯基丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-1-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-(甲基氨基)-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-N-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[1-(氨基甲基)-2-甲基-2-苯基丙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-3，4-二溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氯苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(1H-吲哚-3-基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(1-萘基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(1-萘基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{2-氨基-1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{2-氨基-1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-(3-氨基-1-苯基丙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3，4-二溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-N-羥基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，6-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1[((3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-氯-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(3-吡啶基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1R)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(4-氟苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(4-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(3-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(2-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(4-氟苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(2-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(3-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-(2-氨基乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[2-氨基-1-(4-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-甲基乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-1-(氨基甲基)-3-甲基丁基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； (N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-[(1S，2S)-2-氨基-3-羥基-1-苯基丙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；和 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺； 和/或其可藥用鹽。
式(I)化合物包含于本發(fā)明的藥物組合物中，且在本發(fā)明的方法中使用。
本文所公開的某些化合物可包含一個(gè)或多個(gè)手性原子，或者能以兩種對映異構(gòu)體存在。因此，本發(fā)明的化合物包括對映異構(gòu)體的混合物以及經(jīng)純化的對映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)富集的混合物。同樣，應(yīng)當(dāng)理解，所有的互變異構(gòu)體和互變異構(gòu)體的混合物包括在式(I)化合物的范圍內(nèi)。
可以理解，本文所公開的某些化合物可形成溶劑合物，其通過由溶質(zhì)(在本發(fā)明中，式I化合物或其鹽)和溶劑形成各種化學(xué)計(jì)量的絡(luò)合物。對于本發(fā)明目的的此類溶劑不可影響溶質(zhì)的生物活性。適宜的溶劑的實(shí)例包括，但不限于，水、甲醇、乙醇和乙酸。優(yōu)選所使用的溶劑為可藥用溶劑。適宜的可藥用溶劑的實(shí)例包括，但不限于，水、乙醇和乙酸。最優(yōu)選所使用的溶劑為水。
術(shù)語“芳基”及其衍生術(shù)語(derivatives)，在此單獨(dú)使用或作為較大基團(tuán)如在“-(CH2)m芳基”中的一部分使用時(shí)，除非另有定義，指的是單環(huán)、雙環(huán)和三環(huán)體系，其總共具有5-14個(gè)環(huán)原子，其中至少一個(gè)環(huán)體系為芳香的，且其中體系中各環(huán)含有3-7個(gè)原子，如苯基、萘、四氫化萘和聯(lián)苯。
適宜地，術(shù)語“芳基”指的是具有總共5-7個(gè)環(huán)原子的單環(huán)芳香環(huán)體系。
術(shù)語“雜芳基”及其衍生術(shù)語，在此單獨(dú)使用或作為較大基團(tuán)如在“-(CH2)m雜芳基”中的一部分使用時(shí)，除非另有定義，指的是含有3-7個(gè)碳原子且含有1-3個(gè)雜原子的環(huán)狀芳香環(huán)，條件是當(dāng)碳原子數(shù)為3時(shí)，該芳香環(huán)含有至少2個(gè)雜原子。示例性的“雜芳基”包括吡啶和吲哚。
術(shù)語“環(huán)烷基”及其衍生術(shù)語，在此單獨(dú)使用或作為較大基團(tuán)如在“-(CH2)m環(huán)烷基”中的一部分使用時(shí)，除非另有定義，指的是具有3-7個(gè)碳原子的非-芳香性環(huán)狀烴環(huán)。示例性的“環(huán)烷基”包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。
術(shù)語“雜環(huán)烷基”及其衍生術(shù)語，在此單獨(dú)使用或作為較大基團(tuán)如在“-(CH2)m雜環(huán)烷基”中的一部分使用時(shí)，除非另有定義，指的是具有3-6個(gè)碳原子且含有1或2個(gè)雜原子的非-芳香性環(huán)狀烴環(huán)。示例性的“雜環(huán)烷基”包括哌嗪和吡咯烷。
術(shù)語“C5-C12芳基”，在此單獨(dú)使用或作為較大基團(tuán)如在“-(CH2)mC5-C12芳基”中的一部分使用時(shí)，指的是選自下列的芳基苯基、萘、四氫化萘和聯(lián)苯。
在此使用的術(shù)語“被取代”，除非另有定義，指的是主題化學(xué)部分具有1-5個(gè)取代基，適宜地，1-3個(gè)取代基，該取代基選自-CO2R20、C1-C4烷基、羥基C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、C1-C4烷基氨基、氨基C1-C4烷基、二C1-C4烷基氨基、羥基、硝基、四唑、氰基、氧代基團(tuán)、鹵素和三氟甲基，其中R20選自氫、C1-C4烷基和三氟甲基。
適宜地，在此使用的術(shù)語“被取代”指的是主題化學(xué)部分具有1-3個(gè)選自下列的取代基C1-C4烷基、羥基C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、C1-C4烷基氨基、氨基C1-C4烷基、羥基、四唑、鹵素和三氟甲基。
適宜地，在此使用的術(shù)語“被取代”指的是主題化學(xué)部分具有1-3個(gè)選自下列的取代基鹵素和三氟甲基。
在此使用的術(shù)語“雜原子”指的是氧、氮或硫。
在此使用的術(shù)語“鹵素”指的是選自溴、碘、氯和氟的取代基。
在此使用的在所有碳鏈中的術(shù)語“烷基”及其衍生術(shù)語，包括由術(shù)語“-(CH2)n”、“-(CH2)m”等定義的烷基鏈等，指的是直鏈或支鏈、飽和或不飽和的烴鏈，且除非另有定義，該碳鏈含有1-12個(gè)碳原子。在此使用的烷基的實(shí)例包括-CH3、-CH2-CH3、-CH2-CH2-CH3、-CH(CH3)2、-CH2-CH2-C(CH3)3、-C≡C-C(CH3)3、-C(CH3)3、-(CH2)3-CH3、-CH2-CH(CH3)2、-CH(CH3)-CH2-CH3、-CH＝CH2和-C≡C-CH3。
在此使用的術(shù)語“治療”及其派生術(shù)語，指的是預(yù)防性和治療性治療。例如，當(dāng)患者被認(rèn)為是對于癌癥的發(fā)生具有高風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，或當(dāng)患者已經(jīng)接觸了致癌物時(shí)，適合于進(jìn)行預(yù)防性治療。
在此使用的術(shù)語“有效量”及其派生術(shù)語，指的是例如由研究人員或臨床醫(yī)師尋求的組織、系統(tǒng)、動物或人會顯示出生理或醫(yī)學(xué)響應(yīng)的藥物或藥劑的量。而且，術(shù)語“治療有效量”及其派生術(shù)語指的是任何量，其與沒有接受此量的相應(yīng)患者相比，獲得了改善的治療、痊愈、預(yù)防或減輕疾病、病癥或副作用，或疾病或病癥的發(fā)展的速度降低。在本發(fā)明范圍內(nèi)該術(shù)語也包括增加正常生理功能的有效量。
式(I)化合物包含于本發(fā)明的藥物組合物中，并使用于本發(fā)明的方法中。當(dāng)存在-COOH或-OH時(shí)，可以使用可藥用酯，例如對于-COOH，為甲基、乙基、新戊酰氧基甲基酯等，對于-OH，為乙酸酯和馬來酸酯等，和那些在本領(lǐng)域中已知用于改進(jìn)溶解度或水解特性的酯，用作持續(xù)釋放或前藥制劑。
本發(fā)明化合物的可藥用鹽由本領(lǐng)域的技術(shù)人員方便地制備。
式(I)、(AA)、(BB)和(CC)的新化合物通常按照下面方案1-3顯示的方法制備，或通過類似的方法制備，條件是式(I)、(AA)、(BB)和(CC)中的X和′R′取代基分別不包括任何使得方案1-3中任一的方法不能進(jìn)行的取代基。所有的起始物料為商購或由商購的起始物料由本領(lǐng)域的技術(shù)人員方便地制備。
通用方案 方案1
試劑(a)鄰苯二甲酰亞胺，PPh3，DEAD，THF，室溫；(B)NH2NH2，MeOH，50℃。
氨基醇(I-1)在Mitsunobu條件下反應(yīng)，得到不同保護(hù)的二胺(I-2)。Mitsunobu反應(yīng)對于有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是公知的。對于此類轉(zhuǎn)化的方法和反應(yīng)條件討論于Synthesis 1981，1-28中。使用親核性胺如肼或甲胺于極性溶劑如甲醇中，選擇性脫保護(hù)(I-2)的鄰苯二甲酰亞胺基，得到胺(I-3)。對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員可用很多不同的保護(hù)基團(tuán)，且只要其不影響此處所列的方法均可使用。用于保護(hù)胺的方法描述于標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)，如Greene″Protective Groups in Organic Synthesis″(由Wiley-Interscience出版)。
方案2
試劑(a)PyBrop，(i-Pr)2NEt，(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，DCM，室溫；(b)5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑，K2CO3，Pd(PPh3)4，二噁烷/H2O；(c)TFA/DCM，室溫。
羧酸(II-1)與(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯反應(yīng)，得到酰胺(II-2)。多種酰胺偶聯(lián)劑如EDC、PyBrop等是商購可得的。酰胺偶聯(lián)反應(yīng)通常在溶劑如DCM或DMF中，利用有機(jī)堿如Et3N或(i-Pr)2NEt進(jìn)行。利用Suzuki偶聯(lián)方法，二溴化物(II-2)區(qū)域選擇性地與(2-{[(4，5-二溴-2-呋喃基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯偶聯(lián)。Suzuki-類偶聯(lián)通常利用鈀(0)催化劑如Pd(PPh3)4與無機(jī)堿如K2CO3、Na2CO3或K3PO4，于含醚溶劑如DME、二噁烷或THF的含水混合物中進(jìn)行。對于鈀-催化的偶聯(lián)方法描述于標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)，如Schlosser″Organometallics in Synthesis″(由Wileyand sons出版)。II-3使用HCl或TFA酸性處理以除去Boc保護(hù)基團(tuán)，得到胺(II-4)。對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員可用很多不同的保護(hù)基團(tuán)，且只要其不影響此處所列的方法均可使用。對于保護(hù)胺的方法描述于標(biāo)注參考文獻(xiàn)，如Greene″Protective Groups in Organic Synthesis″(由Wiley-Interscience出版)。
方案3
試劑(a)MeOH，H2SO4，60℃；(b)AlCl3，Br2，CHCl3；(c)5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑，K2CO3，Pd2(t-Bu)3，二噁烷/H2O，70℃；(d)NCS，THF，70℃；(e)6M NaOH，THF/MeOH，50℃；(f)PyBrop，(i-Pr)2NEt，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮，DCM，室溫；(g)NH2NH2，THF/MeOH，室溫。
羧酸(III-1)在標(biāo)準(zhǔn)Fisher酯化條件下酯化，并且然后使用Lewis酸選擇性鹵化，得到(III-2)。二鹵代酯與5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑利用Suzuki偶聯(lián)化學(xué)選擇性偶聯(lián)，得到(III-3)。Suzuki-類偶聯(lián)通常使用鈀(0)催化劑如Pd(PPh3)4與無機(jī)堿如K2CO3、Na2CO3或K3PO4，于含醚溶劑如DME、二噁烷或THF的含水混合物中進(jìn)行。對于鈀-催化偶聯(lián)的方法描述于標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)，如Schlosser″Organometallics inSynthesis″(由Wiley and sons出版)中。酯(III-3)使用NCS氯化，且在原位利用NaOH水溶液皂化。將得到的羧酸(III-4)與2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮偶聯(lián)，形成酰胺(III-5)。多種酰胺偶聯(lián)劑如EDC、PyBrop等商購可得。酰胺偶聯(lián)反應(yīng)通常在溶劑如DCM或DMF中，利用有機(jī)堿如Et3N或(i-Pr)2NEt進(jìn)行。酰胺(III-5)使用肼脫保護(hù)，得到胺(III-6)。對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員可用很多不同的保護(hù)基團(tuán)，且只要其不影響此處所列的方法均可使用。對于保護(hù)胺的方法描述于標(biāo)注參考文獻(xiàn)，如Greene″Protective Groups in Organic Synthesis″(由Wiley-Interscience出版)中。
本文中所用術(shù)語″共同給藥″及其派生術(shù)語意指或者同時(shí)給藥，或者以任何方式分開依次給藥本文所述的抑制AKT的化合物及其它的一種或多種活性成分，已知這些活性成分可用于治療癌癥(包括化療和輻射治療)或者可用于治療關(guān)節(jié)炎。本文所用術(shù)語“其它的一種或多種活性成分”，包括任何已知的或者將其給藥于需要癌癥或關(guān)節(jié)炎治療的患者時(shí)的有利性得到證實(shí)的化合物或治療劑。如果不同時(shí)給藥，優(yōu)選各化合物以彼此緊密接近的時(shí)間給藥。此外，各化合物是否以相同的劑型給藥并不重要，例如一個(gè)化合物可局部給藥而另一化合物可口服給藥。
在本發(fā)明中，對正在治療的易感腫瘤具有活性的任何抗腫瘤藥物，通常都可以在癌癥治療中共同給藥(co-administering)。這些藥物的實(shí)例可參見Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T.Devita and S.Hellman(editors)，6th edition(February 15，2001)，Lippincott Williams & WilkinsPublishers。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員會根據(jù)相關(guān)藥物和癌癥的具體特性，識別何種藥物組合是有用的。可用于本發(fā)明的典型抗腫瘤藥物包括但不限于，抗微管劑如二萜類化合物和長春花生物堿；鉑配位絡(luò)合物；烷基化劑如氮芥，氧氮磷環(huán)類(oxazaphosphorines)，烷基磺酸酯(alkylsulfonates)，亞硝基脲和三氮烯；抗生素(antibiotic agents)如蒽環(huán)類抗生素，放線菌素和博來霉素；拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑如表鬼臼脂毒素；抗代謝物，如嘌呤和嘧啶類似物及抗葉酸化合物；拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑如喜樹堿；激素和激素類似物；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑；非受體酪氨酸激酶血管生成抑制劑；免疫治療劑；促細(xì)胞凋亡劑；以及細(xì)胞周期信號抑制劑(cell cycle signaling inhibitors)。
與本發(fā)明的抑制AKT的化合物組合或共同給藥的其它活性成分(抗腫瘤藥)的實(shí)例是化學(xué)治療劑。
抗微管或抗有絲分裂劑是細(xì)胞周期特異性藥物(phase specific agent)，其在細(xì)胞周期中的M期或有絲分裂期對腫瘤細(xì)胞的微管是活性的?？刮⒐軇┑膶?shí)例包括但不限于二萜類化合物和長春花生物堿。
來源于天然的二萜類化合物是細(xì)胞周期特異性的抗癌劑，其在細(xì)胞周期中的G2/M期起作用。認(rèn)為二萜類化合物通過與該蛋白結(jié)合，使微管的β-微管蛋白亞單位穩(wěn)定。然后使蛋白質(zhì)的分解受到抑制，有絲分裂停止，接著發(fā)生細(xì)胞死亡。二萜類化合物的實(shí)例包括但不限于紫杉醇及其類似物多西紫杉醇。
紫杉醇，5β，20-環(huán)氧-1，2α，4，7β，10β，13α-六羥基紫杉(tax)-11-烯-9-酮4，10-二乙酸酯2-苯甲酸酯13-(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基異絲氨酸酯，其是從太平洋紫杉樹(Taxus brevifolia)中分離出來的天然二萜產(chǎn)物，且在商業(yè)上可得到可注射的溶液

其為萜類紫杉烷家族的成員。其在1971年由Wani等人首次分離出來(J.Am.Chem，Soc.，932325，1971)，并通過化學(xué)和X-射線結(jié)晶學(xué)方法表征其結(jié)構(gòu)。其活性的機(jī)理之一是紫杉醇能夠結(jié)合微管蛋白，進(jìn)而抑制癌細(xì)胞生長。Schiff等，Proc.Natl，Acad，Sci.USA，771561-1565(1980)；Schiff等，Nature，277665-667(1979)；Kumar，J.Biol，Chem，25610435-10441(1981)。有關(guān)某些紫杉醇衍生物的合成及抗癌活性的綜述，參見D.G.I.Kingston等，Studies in Organic Chemistry vol.26，標(biāo)題“Newtrends in Natural Products Chemistry 1986”，Attaur-Rahman，P.W.Le Quesne，Eds.(Elsevier，Amsterdam，1986)pp 219-235。
在美國，已經(jīng)批準(zhǔn)紫杉醇的臨床使用，用于治療難治的卵巢癌(Markman等，Yale Journal of Biology and Medicine，64583，1991；McGuire等，Ann.Intem，Med.，111273，1989)和用于治療乳腺癌(Holmes等，J.Nat.Cancer Inst.，831797，1991)。其為治療皮膚癌(Einzig等，Proc.Am.Soc.Clin，Oncol.，2046)及頭頸癌(head and neck carcinomas)(Forastire等，Sem.Oncol.，2056，1990)的可能的候選物。該化合物還具有治療多囊性腎病(Woo等，Nature，368750，1994)、肺癌和瘧疾的潛力。采用紫杉醇治療患者，導(dǎo)致骨髓抑制(多重細(xì)胞譜系(multiple cell lineages)，Ignoff，R.J.等，Cancer Chemotherapy Pocket Guide，1998)，這與高于閾濃度(50nM)的給藥(dosing)的持續(xù)時(shí)間有關(guān)(Kearns，C.M.等，Seminars in Oncology，3(6)p.16-23，1995)。
多西紫杉醇，5β-20-環(huán)氧-1，2α，4，7β，10β，13α-六羥基紫杉-11-烯-9-酮13-(2R，3S)-N-羧基-3-苯基異絲氨酸，N-叔丁基酯，4-乙酸酯2-苯甲酸酯，三水合物，在商業(yè)上可得到可注射的溶液

多西紫杉醇可用于治療乳腺癌。多西紫杉醇是適量(q.v.)紫杉醇的半合成衍生物，其是利用天然前體即從歐洲漿果紫杉樹的針葉中提取的10-去乙?；鶟{果赤霉素III制備的。多西紫杉醇的劑量限制性毒性是嗜中性白細(xì)胞減少癥。
長春花生物堿是來源于長春花屬植物的細(xì)胞周期特異性的抗腫瘤藥物。長春花生物堿通過特異性地結(jié)合微管蛋白而在細(xì)胞周期的M期(有絲分裂)起作用。因此，被結(jié)合的微管蛋白分子不能聚合成微管。認(rèn)為有絲分裂在中期被停止，隨后細(xì)胞死亡。長春花生物堿的實(shí)例包括但不限于長春堿，長春新堿，及長春瑞濱。
長春堿，長春堿硫酸鹽，在商業(yè)上可以

注射液得到。盡管已經(jīng)表明其有可能作為各種實(shí)體瘤的第二線治療，但是其最初是用于治療睪九癌和各種淋巴瘤，包括何杰金氏病及淋巴細(xì)胞和組織細(xì)胞的淋巴瘤。長春堿的劑量限制性副作用是骨髓抑制。
長春新堿，長春堿22-氧代-硫酸鹽，在商業(yè)上可以

注射液得到。長春新堿顯示可用于治療急性白血病，還發(fā)現(xiàn)用于治療何杰金氏和非何杰金氏惡性淋巴瘤。脫發(fā)和神經(jīng)影響是長春新堿最常見的副作用，并產(chǎn)生較小程度的骨髓抑制和胃腸粘膜炎作用。
長春瑞濱，3′，4′-二脫氫-4′-脫氧-C′-去甲長春堿(norvincaleukoblastine)[R-(R*，R*)-2，3-二羥基丁二酸(1∶2)(鹽)]，商業(yè)上可以長春瑞濱酒石酸鹽注射液

得到，是半合成的長春花生物堿。長春瑞濱可作為單獨(dú)的藥物或與其它化學(xué)治療劑如順鉑組合，用于治療各種實(shí)體瘤，特別是非小細(xì)胞肺癌、晚期乳腺癌及激素難治的前列腺癌。骨髓抑制是長春瑞濱最常見的劑量限制性副作用。
鉑配位絡(luò)合物是非細(xì)胞周期特異性的抗癌劑，其與DNA相互作用。鉑絡(luò)合物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，進(jìn)行水合作用，并與DNA形成內(nèi)部和相互間的交叉連接，導(dǎo)致對腫瘤不利的生物學(xué)作用。鉑配位絡(luò)合物的實(shí)例包括但不限于順鉑和卡鉑。
順鉑，順式-二氨二氯合鉑，商業(yè)上可以

注射液得到。順鉑最初用于治療轉(zhuǎn)移性睪丸癌和卵巢癌以及晚期的膀胱癌。順鉑的主要劑量限制性副作用是腎毒性和耳毒性，所述腎毒性可通過水合和利尿來控制。
卡鉑，二氨[1，1-環(huán)丁烷-二羧酸根(2-)-O，O′]合鉑，在商業(yè)上可以

注射液得到?？ㄣK最初用于晚期卵巢癌的一線和二線治療。骨髓抑制是卡鉑的劑量限制性毒性。
烷基化劑是非細(xì)胞周期抗癌的特異性藥物和強(qiáng)的親電試劑。通常，烷基化劑借助于烷基化作用，通過DNA分子的親核部分如磷酸基(phosphate)、氨基、巰基、羥基、羧基和咪唑基，與DNA形成共價(jià)連接。這種烷基化作用破壞核酸功能，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。烷基化劑的實(shí)例包括但不限于氮芥如環(huán)磷酰胺、美法侖和苯丁酸氮芥，烷基磺酸酯如白消安，亞硝基脲如卡莫司汀，及三氮烯如達(dá)卡巴嗪。
環(huán)磷酰胺，2-[雙(2-氯乙基)氨基]四氫-2H-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己二烯2-氧化物一水合物，商業(yè)上可以

注射液或片劑得到。環(huán)磷酰胺可作為單獨(dú)的藥物或與其它化學(xué)治療劑組合，用于治療惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤和白血病。脫發(fā)、惡心、嘔吐和白細(xì)胞減少癥是環(huán)磷酰胺最常見的劑量限制性副作用。
美法侖，4-[雙(2-氯乙基)氨基]-L-苯基丙氨酸，商業(yè)上可以

注射液或片劑得到。美法侖可用于多發(fā)性骨髓瘤和不可切除的卵巢上皮癌的姑息療法。骨髓抑制是美法侖最常見的劑量限制性副作用。
苯丁酸氮芥，4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酸，商業(yè)上可以

片劑得到。苯丁酸氮芥可用于慢性淋巴細(xì)胞性白血病，惡性淋巴瘤如淋巴肉瘤，巨濾泡性淋巴瘤，及何杰金氏病的姑息療法。骨髓抑制是苯丁酸氮芥最常見的劑量限制性副作用。
白消安，1，4-丁二醇二甲磺酸酯，商業(yè)上可以

片劑得到。白消安用于慢性髓細(xì)胞性白血病的姑息療法。骨髓抑制是白消安最常見的劑量限制性副作用。
卡莫司汀，1，3-[雙(2-氯乙基)-1-亞硝基脲，商業(yè)上可以

單瓶裝的凍干產(chǎn)物得到?？就】勺鳛閱为?dú)的藥物或與其它藥物組合，用于腦瘤、多發(fā)性骨髓瘤、何杰金氏病和非何杰金氏淋巴瘤的姑息療法。延遲的骨髓抑制是卡莫司汀最常見的劑量限制性副作用。
達(dá)卡巴嗪，5-(3，3-二甲基-1-三氮烯基)-咪唑-4-甲酰胺，商業(yè)上可以

單瓶裝的產(chǎn)物得到。達(dá)卡巴嗪可用于轉(zhuǎn)移性惡性黑素瘤的治療，并且可與其它藥物組合，用于何杰金氏病的二線治療。惡心、嘔吐和厭食是達(dá)卡巴嗪最常見的劑量限制性副作用。
抗生素類抗癌劑是非細(xì)胞周期特異性的藥物，其結(jié)合或嵌入DNA中。通常，這種作用導(dǎo)致穩(wěn)定的DNA絡(luò)合物或鏈斷裂，破壞核酸的正常功能，導(dǎo)致細(xì)胞死亡?？股仡惪鼓[瘤藥物的實(shí)例包括但不限于放線菌素如放線菌素D；蒽環(huán)類抗生素(anthrocyclins)如柔紅霉素和多柔比星；及博來霉素。
放線菌素D(dactinomycin)，也稱之為放線菌素D(actinomycin D)，商業(yè)上可以

注射劑得到。放線菌素D可用于Wilm氏腫瘤和橫紋肌肉瘤的治療。惡心、嘔吐和厭食是放線菌素D最常見的劑量限制性副作用。
柔紅霉素，(8S-順-)-8-乙酰基-10-[(3-氨基-2，3，6-三脫氧-α-L-來蘇-己吡喃糖基(hexopyranosyl))氧基]-7，8，9，10-四氫-6，8，11-三羥基-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮(naphthacenedione)鹽酸鹽，商業(yè)上可以

脂質(zhì)體注射劑或

注射劑得到。柔紅霉素可在急性非淋巴細(xì)胞白血病和晚期HIV相關(guān)的卡波西(Kaposi)肉瘤的治療中用于誘導(dǎo)緩解。骨髓抑制是柔紅霉素最常見的劑量限制性副作用。
多柔比星，(8S，10S)-104(3-氨基-2，3，6-三脫氧-α-L-來蘇-己吡喃糖基)氧基]-8-乙醇?；?7，8，9，10-四氫-6，8，11-三羥基-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮鹽酸鹽，商業(yè)上可以

或ADRIAMYCIN

注射液得到。多柔比星主要用于急性成淋巴細(xì)胞性白血病和急性成髓細(xì)胞性白血病的治療，但也可用作治療某些實(shí)體瘤和淋巴瘤的組分。骨髓抑制是多柔比星最常見的劑量限制性副作用。
博來霉素，是從輪絲鏈霉菌(streptomyces verticilus)菌株中分離出來的細(xì)胞毒素糖肽類抗生素的混合物，商業(yè)上可以

得到。博來霉素可作為單獨(dú)的藥物或與其它藥物組合，用于鱗狀細(xì)胞癌、淋巴瘤和睪丸癌的姑息療法。肺部和皮膚毒性是博來霉素最常見的劑量限制性副作用。
拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑包括但不限于表鬼臼毒素。
表鬼臼毒素是來源于曼德拉草(mandrake)植物的細(xì)胞周期特異性的抗腫瘤藥物。表鬼臼毒素通常通過與拓?fù)洚悩?gòu)酶II和DNA形成三元絡(luò)合物，導(dǎo)致DNA鏈斷裂來影響處于細(xì)胞周期的S和G2期的細(xì)胞。鏈斷裂積聚，接著細(xì)胞死亡。表鬼臼毒素的實(shí)例包括但不限于依托泊苷和替尼泊苷。
依托泊苷，4′-去甲基-表鬼臼毒素9[4，6-0-(R)-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷]，商業(yè)上可以

注射液或膠囊得到，并且常稱之為VP-16。依托泊苷可作為單獨(dú)的藥物或與其它化療劑組合，用于治療睪丸癌和非小細(xì)胞肺癌。骨髓抑制是依托泊苷最常見的副作用。白細(xì)胞減少癥的影響(incidence)往往比血小板減少癥的影響更嚴(yán)重。
替尼泊苷，4′-去甲基-表鬼臼毒素9[4，6-0-(R)-噻吩亞甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷]，商業(yè)上可以

注射液得到，并且常稱之為VM-26。替尼泊苷可作為單獨(dú)的藥物或與其它化療劑組合，用于治療兒童急性白血病。骨髓抑制是替尼泊苷最常見的劑量限制性副作用。替尼泊苷可引起白細(xì)胞減少癥和血小板減少癥。
抗代謝抗腫瘤藥物是細(xì)胞周期特異性的抗腫瘤藥物，其作用于細(xì)胞周期的S期(DNA合成)，通過抑制DNA的合成，或者通過抑制嘌呤或嘧啶堿基的合成進(jìn)而限制DNA的合成。因此，S期不能繼續(xù)下去，接著發(fā)生細(xì)胞死亡。抗代謝類抗腫瘤藥物的實(shí)例包括但不限于氟尿嘧啶，甲氨蝶呤，阿糖胞苷，巰嘌呤，硫鳥嘌呤，及吉西他濱。
5-氟尿嘧啶，5-氟-2，4-(1H，3H)嘧啶二酮，商業(yè)上可以氟尿嘧啶得到。5-氟尿嘧啶的給藥導(dǎo)致胸苷酸合成的抑制，并且還摻入到RNA和DNA中。結(jié)果通常是細(xì)胞死亡。5-氟尿嘧啶可作為單獨(dú)的藥物或與其它化療劑組合，用于治療乳腺癌、結(jié)腸癌、直腸癌、胃癌和胰腺癌。骨髓抑制和粘膜炎是5-氟尿嘧啶的劑量限制性副作用。其它的氟嘧啶類似物包括5-氟脫氧尿嘧啶核苷(氟尿苷)和一磷酸5-氟脫氧尿核苷。
阿糖胞苷，4-氨基-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基-2(1H)-嘧啶酮，商業(yè)上可以CYTOSAR-

得到，并且常稱之為Ara-C。認(rèn)為阿糖胞苷在S-期具有細(xì)胞周期專一性，其通過將阿糖胞苷末端摻入到生長的DNA鏈中而抑制DNA鏈的延長。阿糖胞苷可作為單獨(dú)的藥物或與其它化療劑組合，用于治療急性白血病。其它的胞苷類似物包括5-氮雜胞苷和2′，2′-二氟脫氧胞苷酸(吉西他濱)。阿糖胞苷引起白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥和粘膜炎。
巰嘌呤，1，7-二氫-6H-嘌呤-6-硫酮一水合物，商業(yè)上可以

得到。巰嘌呤在S-期具有細(xì)胞周期特異性，其通過至今尚未清楚的機(jī)理抑制DNA的合成。巰嘌呤可作為單獨(dú)的藥物或與其它化療劑組合，用于治療急性白血病。預(yù)期骨髓抑制和胃腸粘膜炎是高劑量巰嘌呤的副作用?？墒褂玫膸€嘌呤類似物是硫唑嘌呤。
硫鳥嘌呤，2-氨基-1，7-二氫-6H-嘌呤-6-硫酮，商業(yè)上可以

得到。硫鳥嘌呤在S-期具有細(xì)胞周期特異性，其通過至今尚未清楚的機(jī)理抑制DNA的合成。硫鳥嘌呤可作為單獨(dú)的藥物或與其它化療劑組合，用于治療急性白血病。骨髓抑制，包括白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥和貧血是給藥硫鳥嘌呤最常見的劑量限制性副作用。然而，還發(fā)生胃腸副作用，而且該副作用可能是劑量限制性的。其它的嘌呤類似物包括噴司他丁、赤羥基壬基腺嘌呤(erythrohydroxynonyl adenine)、磷酸氟達(dá)拉濱和克拉屈濱。
吉西他濱，2′-脫氧-2′，2′-二氟胞苷一鹽酸鹽(β-異構(gòu)體)，商業(yè)上可以

得到。吉西他濱通過阻斷細(xì)胞通過G1/S邊界的發(fā)展在S-期具有細(xì)胞周期特異性。吉西他濱可與順鉑組合，用于治療局部的晚期非小細(xì)胞肺癌，也可以單獨(dú)地用于治療局部的晚期胰腺癌。骨髓抑制，包括白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥和貧血是給藥吉西他濱最常見的劑量限制性副作用。
甲氨蝶呤，N-[4[[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲基氨基]苯甲?；鵠-L-谷氨酸，商業(yè)上可以甲氨蝶呤鈉得到。甲氨蝶呤在S-期具有細(xì)胞周期特異性作用，其通過抑制合成嘌呤核苷酸和胸苷酸所需的脫氫葉酸還原酶來抑制DNA的合成、修復(fù)和/或復(fù)制。甲氨蝶呤可作為單獨(dú)的藥物或與其它化療劑組合，用于治療絨毛膜癌，腦膜白血病，非何杰金氏淋巴瘤，以及乳腺癌、頭癌、頸癌、卵巢癌和膀胱癌。預(yù)期骨髓抑制(白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥和貧血)及粘膜炎是給藥甲氨蝶呤的副作用。
喜樹堿，包括喜樹堿和喜樹堿衍生物，其可作為拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑來使用或開發(fā)。認(rèn)為喜樹堿細(xì)胞毒素活性與其拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制活性相關(guān)。喜樹堿的實(shí)例包括但不限于伊立替康，托泊替康，及下述7-(4-甲基哌嗪基-亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20-喜樹堿的各種旋光體。
伊立替康HCl，(4S)-4，11-二乙基-4-羥基-9-[(4-哌啶子基哌啶子基)羰基氧基]-1H-吡喃并[3′，4′，6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，14(4H，12H)-二酮鹽酸鹽，商業(yè)上可以

注射液得到。
伊立替康是喜樹堿的衍生物，其與其活性代謝物SN-38一起結(jié)合在拓?fù)洚悩?gòu)酶I-DNA絡(luò)合物上。認(rèn)為由于雙鏈不可修復(fù)的(irreparable)斷裂，導(dǎo)致出現(xiàn)細(xì)胞毒性，所述斷裂是由拓?fù)洚悩?gòu)酶IDNA伊立替康或SN-38三元絡(luò)合物與復(fù)制酶之間的相互作用引起的。伊立替康可用于治療結(jié)腸或直腸的轉(zhuǎn)移癌。伊立替康HCl的劑量限制性副作用是骨髓抑制，包括嗜中性白細(xì)胞減少癥，以及包括腹瀉的GI效應(yīng)。
托泊替康HCl，(S)-10-[(二甲基氨基)甲基]-4-乙基-4，9-二羥基-1H-吡喃并[3′，4′，6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，14-(4H，12H)-二酮一鹽酸鹽，商業(yè)上可以

注射液得到。托泊替康是喜樹堿的衍生物，其與拓?fù)洚悩?gòu)酶I-DNA絡(luò)合物結(jié)合，并阻止單鏈斷裂的再連接，所述單鏈斷裂是拓?fù)洚悩?gòu)酶I響應(yīng)DNA分子的扭曲張力(torsional strain)所引起的。托泊替康用于卵巢轉(zhuǎn)移癌和小細(xì)胞肺癌的二線治療。托泊替康HCl的劑量限制性副作用是骨髓抑制，主要是嗜中性白細(xì)胞減少癥。
還有意義的是具有下面式A的喜樹堿衍生物，其目前正在開發(fā)之中，包括外消旋混合物(R，S)形式，以及R和S對映異構(gòu)體
已知的化學(xué)名稱是“7-(4-甲基哌嗪基(piperazino)-亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿(外消旋混合物)或者“7-(4-甲基哌嗪基-亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(R)-喜樹堿(R對映異構(gòu)體)或者“7-(4-甲基哌嗪基-亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(S對映異構(gòu)體)。所述化合物和相關(guān)的化合物包括其制備方法，參見美國專利號6063923，5342947，5559235，5491237及1997年11月24日提交的待審查美國專利申請第08/977217號。
激素和激素類似物是治療癌癥有用的化合物，其中在激素與癌的生長和/或缺乏生長之間存在關(guān)聯(lián)?？捎糜谥委煱┌Y的激素和激素類似物的實(shí)例包括但不限于腎上腺皮質(zhì)類固醇如潑尼松和潑尼松龍，其可用于治療惡性淋巴瘤和兒童急性白血??；氨魯米特和其它芳香酶抑制劑如阿那曲唑、來曲唑、伏羅唑(vorazole)、及依西美坦，其可用于治療腎上腺皮質(zhì)癌和包含雌激素受體的激素依賴性乳腺癌；黃體酮如醋酸甲地孕酮，其可用于治療激素依賴性乳腺癌和子宮內(nèi)膜癌；雌激素類，雄激素類，及抗雄激素類如氟他胺，尼魯米特，比卡魯胺，醋酸環(huán)丙孕酮(cyproterone acetate)和5α-還原酶如非那雄胺和度他雄胺，其可用于治療前列腺癌和良性前列腺肥大；抗雌激素類如他莫昔芬，托瑞米芬，雷洛昔芬，屈洛昔芬，iodoxyfene，以及選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMS)，如美國專利號5681835、5877219和6207716中所述的那些，其可用于治療激素依賴性乳腺癌及其它的易感癌癥；及促性腺激素釋放激素(GnRH)及其類似物，其刺激用于治療前列腺癌的促黃體生成激素(leutinizing hormone)(LH)和/或促卵泡激素(FSH)的釋放，例如LHRH激動劑和拮抗劑，如醋酸戈舍瑞林(goserelin acetate)和亮丙瑞林(luprolide)。
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是阻斷或抑制引起細(xì)胞內(nèi)變化的化學(xué)過程的抑制劑。這里所述的變化是指細(xì)胞的增殖或分化。可用于本發(fā)明的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑包括受體酪氨酸激酶、非受體酪氨酸激酶、SH2/SH3域阻斷劑、絲氨酸/蘇氨酸激酶、磷酯酰肌醇-3激酶、肌醇信號和Ras致癌基因的抑制劑。
若干蛋白質(zhì)酪氨酸激酶催化細(xì)胞生長的調(diào)節(jié)中所涉及的各種蛋白質(zhì)中的特定酪氨酰殘基的磷酸化。這種蛋白質(zhì)酪氨酸激酶可以廣義地分為受體或非受體激酶。
受體酪氨酸激酶是跨膜蛋白，其具有細(xì)胞外配體結(jié)合域、跨膜域和酪氨酸激酶域。受體酪氨酸激酶與細(xì)胞生長的調(diào)節(jié)有關(guān)，并且通常稱為生長因子受體。已經(jīng)表明，這些激酶中很多不當(dāng)和非受控活化，即異常的激酶生長因子受體活性，例如由過度表達(dá)或突變引起的上述活化，會導(dǎo)致非受控的細(xì)胞生長。因此，這種激酶的異?；钚砸呀?jīng)和惡性組織生長聯(lián)系在一起。因此，這種激酶的抑制劑可提供癌癥治療方法。舉例來說，生長因子受體包括表皮生長因子受體(EGFr)，血小板來源的生長因子受體(PDGFr)，erbB2，erbB4，血管內(nèi)皮生長因子受體(VEGFr)，具有類免疫球蛋白樣和表皮生長因子同源域(homology domains)的酪氨酸激酶(TIE-2)，胰島素生長因子-I(IGFI)受體，巨噬細(xì)胞集落刺激因子(cfms)，BTK，ckit，cmet，成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)受體，Trk受體(TrkA、TrkB和TrkC)，ephrin(eph)受體，及RET原癌基因。正在開發(fā)若干生長因子受體的抑制劑，其包括配體拮抗劑、抗體、酪氨酸激酶抑制劑和反義寡核苷酸。有關(guān)生長因子受體以及抑制生長因子受體功能的藥物的描述，參見例如Kath，John C.，Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(6)803-818；Shawver等DDT Vol 2，No.2 February 1997；及Lofts，F(xiàn).J.等，“Growth factor receptors as targets”，New Molecular Targets forCancer Chemotherapy，ed.Workman，Paul and Kerr，David，CRC press 1994，London。
酪氨酸激酶，其不是生長因子受體激酶，稱為非受體酪氨酸激酶。可用于本發(fā)明的作為抗癌藥物靶標(biāo)(target)或潛在靶標(biāo)的非受體酪氨酸激酶包括cSrc，Lck，F(xiàn)yn，Yes，Jak，cAbl，F(xiàn)AK(黏著斑激酶)，Bretons酪氨酸激酶，及Bcr-Abl。有關(guān)這種非受體激酶和抑制非受體酪氨酸激酶功能的藥物的描述，參見Sinh，S.and Corey，S.J.，(1999)Journal of Hematotherapy and Stem CellResearch 8(5)465-80；及Bolen，J.B.，Brugge，J.S.，(1997)Annual review ofImmunology.15371-404。
SH2/SH3域阻斷劑是破壞結(jié)合于各種酶或銜接(adaptor)蛋白中的SH2或SH3域的藥物，所述酶或銜接蛋白包括PI3-K p85亞單元、Src家族激酶、銜接分子(Shc、Crk、Nck、Grb2)、及Ras-GAP。有關(guān)SH2/SH3域作為抗癌藥物靶標(biāo)的論述，參見Smithgall，T.E.(1995)，Journal of Pharmacological andToxicological Methods.34(3)125-32。
絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑包括MAP激酶級聯(lián)阻斷劑(其包括Raf激酶(rafk)的阻斷劑)，促細(xì)胞分裂原或細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶(MEK)，及細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶(ERK)；及蛋白激酶C家族成員阻斷劑包括各PKC(α、β、γ、ε、μ、λ、ι、ζ)的阻斷劑，IkB激酶家族(IKKa、IKKb)，PKB家族激酶，akt激酶家族成員，及TGFβ受體激酶。有關(guān)這種絲氨酸/蘇氨酸激酶及其抑制劑的描述，參見Yamamoto，T.，Taya，S.，Kaibuchi，K.，(1999)，Journal of Biochemistry，126(5)799-803；Brodt，P，Samani，A.，and Navab，R.(2000)，BiochemicalPharmacology，60.1101-1107；Massague，J.，Weis-Garcia，F(xiàn).(1996)CancerSurveys.2741-64；Philip，P.A.，and Harris，A.L.(1995)，Cancer Treatment andResearch.783-27，Lackey，K.等Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，(10)，2000，223-226；美國專利號6,268,391；及Martinez-Iacaci，L.，等，Int.J.Cancer(2000)，88(1)，44-52。
本發(fā)明中還可以使用磷酯酰肌醇-3激酶家族成員的抑制劑，包括PI3-激酶、ATM、DNA-PK和Ku的阻斷劑。有關(guān)這類激酶的討論，參見Abraham，R.T.(1996)，Current Opinion in Immunology.8(3)412-8；Canman，C.E.，Lim，D.S.(1998)，Oncogene 17(25)3301-3308；Jackson，S.P.(1997)，InternationalJournal of Biochemistry and Cell Biology.29(7)935-8；及Zhong，H.等，Cancerres，(2000)60(6)，1541-1545。
本發(fā)明中還有意義的是肌醇信號抑制劑(Myo-inositol signalinginhibitors)，如磷脂酶C阻斷劑和肌醇類似物。這種信號抑制劑參見Powis，G.，and Kozikowski A.，(1994)New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed.，Paul Workman and David Kerr，CRC press 1994，London。
另一組信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑為Ras致癌基因(oncogene)的抑制劑。這類抑制劑包括法尼基轉(zhuǎn)移酶、牻牛兒基牻牛兒基(geranylgeranyl)轉(zhuǎn)移酶和CAAX蛋白酶的抑制劑，以及反義寡核苷酸、核酶和免疫療法。已經(jīng)表明，這類抑制劑阻斷包含野生型突變體Ras的細(xì)胞中的Ras活化，因而可充當(dāng)抗增殖劑。有關(guān)Ras致癌基因的抑制的討論，參見Scharovsky，O.G.，Rozados，V.R.，Gervasoni，S.I.Matar，P.(2000)，Journal of Biomedical Science.7(4)292-8；Ashby，M.N.(1998)，Current Opinion in Lipidology.9(2)99-102；及BioChim.Biophys.Acta，(19899)1423(3)19-30。
如上所述，受體激酶配體結(jié)合的抗體拮抗劑同樣可以充當(dāng)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑。該類信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑包括將人化的抗體用于受體酪氨酸激酶的細(xì)胞外配體結(jié)合域。例如，Imclone C225 EGFR特異性抗體(參見Green，M.C.等，Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors，Cancer Treat.Rev.，(2000)，26(4)，269-286)；

erbB2抗體(參見Tyrosine Kniase Signalling inBreast CancererbB Family Receptor Tyrosine Kniases，Breast Cancer Res.，2000，2(3)，176-183)；及2CB VEGFR2特異性抗體(參見Brekken，R.A.等，Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibodyblocks tumor growth in mice，Cancer Res.(2000)60，5117-5124)。
非受體激酶血管生成抑制劑也可用于本發(fā)明。與血管生成有關(guān)的VEGFR和TIE2抑制劑，已在上面關(guān)于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑中討論過(二者的受體均為受體酪氨酸激酶)。血管生成通常與erbB2/EGFR信號傳導(dǎo)相關(guān)聯(lián)，因?yàn)橐呀?jīng)表明erbB2和EGFR的抑制劑抑制血管生成，主要是VEGF的表達(dá)。因此，非受體酪氨酸激酶抑制劑可與本發(fā)明的化合物組合。例如，抗-VEGF抗體不能識別VEGFR(受體酪氨酸激酶)，但卻與配體結(jié)合；整聯(lián)蛋白(αv β3)的小分子抑制劑將抑制血管生成；也證實(shí)了內(nèi)皮抑制素和血管生成抑制素(非-RTK)可與公開的化合物組合使用(參見Bruns CJ等(2000)，Cancer Res.，602926-2935；Schreiber AB，Winkler ME，and Derynck R.(1986)，Science，2321250-1253；Yen L等(2000)，Oncogene 193460-3469)。
免疫治療方案中使用的藥物也可與式(I)化合物組合使用。存在大量的免疫對策，以產(chǎn)生免疫反應(yīng)。這些策略一般屬于腫瘤疫苗接種領(lǐng)域。通過用小分子抑制劑組合(combined)抑制信號途徑，可以大大地增強(qiáng)免疫方法的療效。有關(guān)抗erbB2/EGFR的免疫/腫瘤疫苗方法的討論，參見Reilly RT等(2000)，Cancer Res.603569-3576；及Chen Y，Hu D，Eling DJ，Robbins J，and Kipps TJ.(1998)，Cancer Res.581965-1971。
用于促細(xì)胞凋亡療法的藥物(例如bcl-2反義寡核苷酸)也可用于本發(fā)明的藥物組合(combination)。蛋白質(zhì)的Bcl-2家族的成員阻斷細(xì)胞凋亡。因此，bcl-2的增量調(diào)節(jié)(upregulation)與藥物抗性相聯(lián)系。研究表明，表皮生長因子(EGF)刺激bcl-2家族的抗細(xì)胞凋亡成員(即mcl-1)。因此，設(shè)計(jì)減量調(diào)節(jié)(downregulate)bcl-2在腫瘤中的表達(dá)的策略已經(jīng)證實(shí)在臨床上是有益的，現(xiàn)在正處于II/III期試驗(yàn)中，即Genta′s G3139 bcl-2反義寡核苷酸。有關(guān)這種利用bcl-2的反義寡核苷酸促細(xì)胞凋亡的策略的討論，參見Water JS等(2000)，J.Clin.Oncol.181812-1823；及Kitada S等(1994)，Antisense Res.Dev.471-79。
細(xì)胞周期信號抑制劑抑制細(xì)胞周期控制中所涉及的分子。稱作細(xì)胞周期蛋白依賴性蛋白激酶(CDK)的蛋白激酶家族，及其與稱作細(xì)胞周期蛋白的蛋白質(zhì)家族的相互作用，通過真核細(xì)胞周期控制細(xì)胞發(fā)展。對于通過細(xì)胞周期的正常細(xì)胞發(fā)展而言，不同細(xì)胞周期蛋白/CDK絡(luò)合物的配位活化和鈍化是必要的。若干細(xì)胞周期信號抑制劑正在開發(fā)中。例如，包括CDK2、CDK4和CDK6的細(xì)胞周期蛋白依賴性蛋白激酶的實(shí)例及其抑制劑，可參見Rosania等，Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(2)215-230。
在一個(gè)實(shí)施方案中，要求保護(hù)的本發(fā)明的癌癥治療方法包括將式(I)化合物和/或其可藥用鹽與至少一種例如選自下列的抗腫瘤藥物共同給藥抗微管劑、鉑配位絡(luò)合物、烷基化劑、抗生素、拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑、抗代謝物、拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑、激素和激素類似物、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑、非受體酪氨酸激酶血管生成抑制劑、免疫治療劑、促細(xì)胞凋亡劑、及細(xì)胞周期信號抑制劑。
因?yàn)楸景l(fā)明的藥物活性化合物具有AKT抑制劑活性，所以它們具有治療癌癥和關(guān)節(jié)炎的療效。
適宜地，本發(fā)明涉及治療選自下列的癌癥或減輕選自下列癌癥的嚴(yán)重程度的方法腦癌(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、惡性膠質(zhì)瘤、Bannayan-Zonana綜合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、炎性乳腺癌、維爾姆斯腫瘤、尤因肉瘤、橫紋肌肉瘤、室管膜細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、結(jié)腸癌、頭頸癌、腎癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨細(xì)胞瘤、甲狀腺癌， 淋巴母細(xì)胞T細(xì)胞白血病(Lymphoblastic T cell leukemia)、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、毛細(xì)胞白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓性白血病、慢性中性粒細(xì)胞性白血病、急性淋巴母細(xì)胞T細(xì)胞性白血病、漿細(xì)胞瘤、免疫母細(xì)胞大細(xì)胞白血病(Immunoblastic large cell leukemia)、套細(xì)胞白血病(Mantle cell leukemia)、多發(fā)性骨髓瘤巨核母細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤、急性巨核細(xì)胞白血病、前髓細(xì)胞性白血病、紅白血病， 惡性淋巴瘤、何杰金淋巴瘤、非-何杰金淋巴瘤、淋巴母細(xì)胞T細(xì)胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤， 神經(jīng)母細(xì)胞瘤、膀胱癌、膀胱上皮癌(urothelial cancer)、肺癌、外陰癌(vulval cancer)、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、間皮瘤、食管癌、唾液腺癌(salivary gland cancer)、肝細(xì)胞癌(hepatocellular cancer)、胃癌、鼻咽癌(nasopharangeal cancer)、頰癌(buccal cancer)、口腔癌(cancer of the mouth)、GIST(胃腸道間質(zhì)瘤)和睪丸癌。
適宜地，本發(fā)明涉及治療選自下列的癌癥或減輕選自下列的癌癥的嚴(yán)重程度的方法腦癌(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、惡性膠質(zhì)瘤、Bannayan-Zonana綜合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、結(jié)腸癌、頭頸癌、腎癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤和甲狀腺癌。
適宜地，本發(fā)明涉及治療選自下列的癌癥或減輕選自下列的癌癥的嚴(yán)重程度的方法卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌。
His-標(biāo)記的AKT1(aa 136-480)的分離與純化 利用Polytron勻漿器，將表達(dá)His-標(biāo)記的AKT1(aa 136-480)的昆蟲細(xì)胞于25mM HEPES，100mM NaCl，20mM咪唑(pH 7.5)中裂解(5mL裂解緩沖液/g細(xì)胞)。通過以28000xg離心30分鐘除去細(xì)胞碎片。上清液通過4.5微米的過濾器過濾，然后加載在用裂解緩沖液預(yù)平衡的鎳螯合柱上。將該柱用5柱體積(CV)的裂解緩沖液洗滌，然后用5CV 20％的緩沖液B洗滌，其中緩沖液B為25mM HEPES，100mM NaCl，300mM咪唑；pH 7.5。將His-標(biāo)記的AKT1(aa 136-480)用超過10CV的20～100％線性梯度的緩沖液B洗脫。將His-標(biāo)記的AKT1(136-480)洗脫級分(eluting fractions)合并，并用緩沖液C稀釋3倍，其中緩沖液C為25mM HEPES，pH 7.5。然后將樣品通過用緩沖液C預(yù)平衡的Q-Sepharose HP柱進(jìn)行色譜分離。將該柱用5CV的緩沖液C洗滌，然后用5CV的10％D，5CV的20％D，5CV的30％D，5CV的50％D，及5CV的100％D進(jìn)行分段洗脫；其中緩沖液D為25mMHEPES，1000mM NaCl；pH 7.5。將含His-標(biāo)記的AKT1(aa 136-480)的級分合并，并于10-kDa分子量截?cái)嗟臐饪s器(cutoff concentrator)中進(jìn)行濃縮。將His-標(biāo)記的AKT1(aa 136-480)通過Superdex 75凝膠過濾柱進(jìn)行色譜分離，該過濾柱用25mM HEPES，200mM NaCl，1mM DTT(pH 7.5)預(yù)平衡。利用SDS-PAGE和質(zhì)譜(mass spec)檢測His-標(biāo)記的AKT1(aa 136-480)級分。將蛋白合并(pooled)、濃縮并于-80℃下冷凍。
按類似的方式，分離和純化His-標(biāo)記的AKT2(aa 138-481)和His-標(biāo)記的AKT3(aa 135-479)。
His-標(biāo)記的AKT酶試驗(yàn) 在底物磷酸化試驗(yàn)中，測試本發(fā)明的化合物對AKT 1、2和3蛋白絲氨酸激酶的抑制活性。該試驗(yàn)檢測小分子有機(jī)化合物抑制肽底物的絲氨酸磷酸化的能力。底物磷酸化試驗(yàn)利用AKT 1、2或3的催化域。AKT 1、2和3還可以商購于Upstate USA，Inc。該方法測量分離的酶將γ-磷酸(phosphate)從ATP催化轉(zhuǎn)移至生物素化的合成肽SEQ.ID NO1(生物素-ahx-ARKRERAYSFGHHA-酰胺)的絲氨酸殘基上的能力。底物磷酸化通過下列方法檢測 試驗(yàn)在384孔U-形底的白色板中進(jìn)行。在室溫下，于20μl的試驗(yàn)體積中，將10nM活化的AKT酶培養(yǎng)40分鐘，所述試驗(yàn)體積包含50mM MOPS，pH 7.5，20mM MgCl2，4μM ATP，8μM肽，0.04μCi[g-33p]ATP/孔，1mMCHAPS，2mM DTT，及1μl的試驗(yàn)化合物于100％DMSO中。通過加入50μl SPA珠(bead)混合物(不含Mg2+和Ca2+的Dulbecco的PBS，0.1％ TritonX-100，5mM EDTA，50μM ATP，2.5mg/ml鏈霉抗生物素蛋白包被的SPA珠)，使反應(yīng)停止。將板密封，使微珠沉降過夜，然后將板在Packard Topcount微型板閃爍計(jì)數(shù)器(Packard Instrument Co.，Meriden，CT)中計(jì)數(shù)。
將劑量響應(yīng)數(shù)據(jù)以對照百分?jǐn)?shù)對化合物濃度進(jìn)行繪圖，所述對照百分?jǐn)?shù)是通過數(shù)據(jù)換算公式100*(U1-C2)/(C1-C2)計(jì)算出來的，其中U為待求的值，C1是就DMSO得到的平均對照值，及C2是就0.1M EDTA得到的平均對照值。將數(shù)據(jù)擬合成下述的曲線y＝((Vmax*x)/(K+x))，其中Vmax為上漸近線，K為IC50。
全長人(FL)AKT1的克隆 全長人AKT1基因通過PCR由含十四烷基化-AKT1-ER質(zhì)粒(Robert T.Abraham贈與，Duke University under MTA，Klippel等在Molecular andCellular Biology 1998 Volume 18p.5699中描述)使用5’引物SEQ.ID NO2，5’TATATAGGATCCATGAGCGACGTGGC 3’和3’引物SEQ.ID NO3，AAATTTCTCGAGTCAGGCCGTGCTGCTGG 3’擴(kuò)增。為了克隆目的，該5’引物含有BamHI位點(diǎn)且該3’引物含有XhoI位點(diǎn)。將所得PCR產(chǎn)物作為BamHI/XhoI片段亞克隆入pcDNA3中。使用Quik

位點(diǎn)定向誘變試劑盒(Site Directed Mutagenesis Kit)(Stratagene)，通過定位誘變，編碼半胱氨酸25序列(TGC)中的突變轉(zhuǎn)化為編碼精氨酸25的野生型AKT1序列(CGC)。根據(jù)廠商建議使用AKT1誘變引物SEQ.ID NO4，5’ACCTGGCGGCCACGCTACTTCCTCC和選擇引物SEQ.ID NO5，5’CTCGAGCATGCAACTAGAGGGCC(設(shè)計(jì)成破壞pcDNA3多克隆位點(diǎn)中的XbaI位點(diǎn))。為了表達(dá)/提純目的，將AKT1作為BamHI/XhoI片段分離并克隆到pFastbacHTb(Invitrogen)的BamHI/XhoI位點(diǎn)中。
FL人AKT1的表達(dá) 使用Invitrogen的BAC-to-BAC桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)(catalog#10359-016)進(jìn)行表達(dá)。簡要地1)將cDNA從FastBac載體轉(zhuǎn)移到桿粒DNA，2)將該桿粒DNA分離并用于轉(zhuǎn)染Sf9昆蟲細(xì)胞，3)該病毒在Sf9細(xì)胞中產(chǎn)生，4)T.ni細(xì)胞用此病毒感染并送去提純。
FL人AKT1的提純 為了提純?nèi)LAKT1，將130g sf9細(xì)胞(批次#41646W02)重懸浮在裂解緩沖液(緩沖液A，1L，pH 7.5)中，該緩沖液中含有25mM HEPES，100mMNaCl和20mM咪唑。細(xì)胞裂解作用通過Avestin(在15K-20K psi下通過兩次)進(jìn)行。細(xì)胞碎片通過在16Krpm離心1小時(shí)除去，上清液與10ml鎳瓊脂糖凝膠(Nickel Sepharose)HP珠在4℃分批結(jié)合(batch bound)過夜。然后，將所述珠轉(zhuǎn)移到柱中，結(jié)合物料用緩沖液B(25mM HEPES，100mM NaCl，300mM咪唑，pH 7.5)洗脫。合并AKT洗脫級分，用緩沖液C(25mM HEPES，5mM DTT；pH 7.5)稀釋3倍。過濾樣品，在用緩沖液C預(yù)平衡的10mL Q-HP柱上以2mL/min色譜分離。
該Q-HP柱用3柱體積(CV)的緩沖液C洗滌，然后依次用5CV 10％ D，5CV 20％ D，5CV 30％ D，5CV 50％ D和5CV 100％ D分段洗脫；其中緩沖液D是25mM HEPES，1000mM NaCl，5mM DTT；pH 7.5。收集5mL級分。合并含AKT級分并濃縮至5ml。接著將蛋白加載到用25mM HEPES，200mM NaCl，5mM DTT(pH 7.5)預(yù)平衡的120ml Superdex 75大小分級柱(sizing column)上。收集2.5mL級分。
合并AKT 1洗脫級分，等分試樣(1ml)并在-80℃存儲。質(zhì)譜和SDS-PAGE分析用來確定提純的全長AKT1的純度和同一性。
全長AKT2和全長AKT3以類似的方式克隆、表達(dá)和提純。
AKT酶試驗(yàn) 在底物磷酸化試驗(yàn)中，對本發(fā)明的化合物測試AKT 1、2和3蛋白絲氨酸激酶抑制活性。此試驗(yàn)檢測小分子有機(jī)化合物抑制肽底物絲氨酸磷酸化的能力。該底物磷酸化試驗(yàn)使用AKT 1、2或3的催化域。AKT 1、2和3也從Upstate USA，Inc.商購。該方法測定分離的酶催化從ATP的γ-磷酸轉(zhuǎn)移到生物素化合成肽SEQID NO1(生物素-ahx-ARKRERAYSFGHHA-酰胺)的絲氨酸殘基上的能力。底物磷酸化通過下列方法檢測。
試驗(yàn)在384孔U型底白板中進(jìn)行。10nM激活的AKT酶在室溫下在20μl試驗(yàn)體積中培養(yǎng)40分鐘，所述試驗(yàn)體積含有50mM MOPS，pH 7.5，20mMMgCl2，4μM ATP，8μM肽，0.04μCi[g-33P]ATP/孔，1mM CHAPS，2mMDTT，和1μl的測試化合物在100％ DMSO中。該反應(yīng)通過加入50μl SPA珠混合物(不含Mg2+和Ca2+的Dulbecco的PBS，0.1％ Triton X-100，5mM EDTA，50μM ATP，2.5mg/ml鏈霉抗生物素蛋白-包被的SPA珠)中止。將該板密封，所述珠沉降過夜，然后將該板在Packard Topcount微型板閃爍計(jì)數(shù)器(PackardInstrument Co.，Meriden，CT)中進(jìn)行記數(shù)。
將劑量響應(yīng)數(shù)據(jù)以對照百分?jǐn)?shù)對化合物濃度進(jìn)行繪圖，所述對照百分?jǐn)?shù)是通過數(shù)據(jù)換算公式100*(U1-C2)/(C1-C2)計(jì)算出來的，其中U為待求的值，C1是就DMSO得到的平均對照值，及C2是就0.1M EDTA得到的平均對照值。將數(shù)據(jù)擬合成下述的曲線y＝((Vmax*x)/(K+x))，其中Vmax為上漸近線，K為IC50。
本發(fā)明的化合物在一個(gè)或多個(gè)上述試驗(yàn)中測試了對AKT1、AKT2和AKT3的活性。
大部分的實(shí)施例化合物通常根據(jù)上述AKT酶試驗(yàn)進(jìn)行測試，且在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示pIC50值對于全長AKT1，≥5.9；對于全長AKT2，≥5.0；和對于全長AKT3，≥5.0。
實(shí)施例31、32、91、95、120、128、140、161、167、169、170、190、222、225、237、249、258和259的化合物通常根據(jù)上述AKT酶試驗(yàn)進(jìn)行測試，且在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示pIC50值對于全長AKT1，≥8.6；和對于全長AKT2，≥7.5。大部分實(shí)施例31、32、91、95、120、128、140、161、167、169、170、190、222、225、237、249、258和259的化合物通常根據(jù)上述AKT酶試驗(yàn)進(jìn)行測試，且在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示pIC50值對于全長AKT3，≥7.6。
實(shí)施例96的化合物通常根據(jù)上述AKT酶試驗(yàn)進(jìn)行測試，且在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示pIC50值對于全長AKT1，等于9.0；對于全長AKT2，等于8.0；和對于全長AKT3，等于8.8。
實(shí)施例137的化合物通常根據(jù)上述AKT酶試驗(yàn)進(jìn)行測試，且在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示pIC50值對于全長AKT1，等于9.0；對于全長AKT2，等于7.8；和對于全長AKT3，等于8.4。
實(shí)施例224的化合物通常根據(jù)上述AKT酶試驗(yàn)進(jìn)行測試，且在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示pIC50值對于全長AKT1，等于8.7；和對于全長AKT2，等于7.8。
實(shí)施例161的化合物通常根據(jù)上述AKT酶試驗(yàn)進(jìn)行測試，且在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示pIC50值對于全長AKT1，等于8.8；對于全長AKT2，等于7.5；和對于全長AKT3，等于7.6。
實(shí)施例222的化合物通常根據(jù)上述AKT酶試驗(yàn)進(jìn)行測試，且在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示pIC50值對于全長AKT1，等于8.8；和對于全長AKT2，等于7.9；和對于全長AKT3，等于8.5。
在上述數(shù)據(jù)中，pIC50定義為-log(IC50)，其中IC50值以摩爾濃度單位表示。
在本發(fā)明范圍內(nèi)的藥學(xué)活性化合物在需要的哺乳動物，特別是在人中，被用作AKT抑制劑。
因此，本發(fā)明提供治療癌癥、關(guān)節(jié)炎以及需要AKT抑制的其它病癥的方法，其包括給藥有效量的式(I)的化合物和/或其可藥用的鹽、水合物、溶劑合物或前藥。還提供式(I)的化合物，其用于治療上述疾病狀態(tài)的方法中，這是因?yàn)樗鼈冿@示出作為Akt抑制劑的能力。該藥物可以通過任何常規(guī)給藥途徑包括但不限于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、口服、皮下、皮內(nèi)和腸胃外給藥需要的患者。
可將本發(fā)明的藥學(xué)活性化合物摻入到方便的劑型中，例如膠囊、片劑或可注射制劑。使用固體或液體藥物載體。固體載體包括淀粉、乳糖、硫酸鈣二水合物、石膏粉、蔗糖、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂和硬脂酸。液體載體包括糖漿、花生油、橄欖油、鹽水和水。類似地，所述載體或稀釋劑可以包括任何延長釋放的物質(zhì)，例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，單獨(dú)使用或與蠟一起使用。固體載體的數(shù)量可以廣泛地變化，但是優(yōu)選在每劑量單位約25mg至約1g之間。當(dāng)使用液體載體時(shí)，該制劑將以糖漿、酏劑、乳液、軟膠囊、無菌注射液例如安瓿、或含水或非水液體懸浮液的形式存在。
藥物制劑按照藥物化學(xué)家的常規(guī)技術(shù)進(jìn)行制備，對于片劑形式，如果需要的話，包括混合、造粒和壓制；或視情況而定進(jìn)行混合、填充和溶解各個(gè)組分，得到所需的口服或腸胃外產(chǎn)品。
本發(fā)明的藥學(xué)活性化合物在如上所述的藥物劑量單位中的劑量將是有效的、無毒的數(shù)量，優(yōu)選在0.001-100mg/kg活性化合物的范圍內(nèi)，優(yōu)選在0.001-50mg/kg的范圍內(nèi)。當(dāng)治療需要Akt抑制劑的人患者時(shí)，所選劑量優(yōu)選每日給藥1-6次，采用口服或胃腸外的形式。腸胃外給藥的優(yōu)選形式包括局部、直腸、經(jīng)皮、通過注射和連續(xù)輸液。用于人給藥的口服劑量單位優(yōu)選含有0.05-3500mg的活性化合物。優(yōu)選使用較低劑量的口服給藥。然而，當(dāng)對于患者為安全且方便時(shí)，也可使用高劑量的腸胃外給藥。
給藥的最佳劑量可以容易地由本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員確定，并且將根據(jù)所使用的具體的Akt抑制劑、制劑的濃度、給藥方式和疾病的發(fā)展?fàn)顩r而改變。根據(jù)所治療的具體患者的其它因素，包括患者年齡、體重、飲食和給藥時(shí)間，將需要調(diào)整劑量。
在哺乳動物包括人中誘導(dǎo)Akt抑制活性的本發(fā)明的方法，包括給藥需要這種活性的患者有效抑制Akt的量的本發(fā)明的藥學(xué)活性化合物。
本發(fā)明還提供式(I)的化合物在制備用作Akt抑制劑的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供式(I)的化合物在制備用于治療的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供式(I)的化合物在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供式(I)的化合物在制備用于治療關(guān)節(jié)炎的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供用作Akt抑制劑的藥物組合物，其包含式(I)的化合物和可藥用載體。
本發(fā)明還提供在治療癌癥中使用的藥物組合物，其包含式(I)的化合物和可藥用載體。
本發(fā)明還提供在治療關(guān)節(jié)炎中使用的藥物組合物，其包含式(I)的化合物和可藥用載體。
當(dāng)根據(jù)本發(fā)明給藥本發(fā)明的化合物時(shí)，預(yù)計(jì)不會出現(xiàn)無法接受的毒性作用。
此外，本發(fā)明的藥物活性化合物可以與其它活性組分共同給藥，所述組分例如治療癌癥或關(guān)節(jié)炎的已知的其它化合物，或已知當(dāng)與Akt抑制劑組合使用時(shí)具有效果的化合物。
不需要進(jìn)一步解釋，可以相信，本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員利用之前的描述，能夠盡最大程度地使用本發(fā)明。因此，下面的實(shí)施例僅僅作為例證進(jìn)行解釋而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)驗(yàn)說明 實(shí)施例1-328的化合物容易地根據(jù)方案1-3或通過類似方法制備。
制備例1 (2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備
a)(2-羥基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向2-氨基-1-苯基乙醇(5g，36.4mmol)于THF(182mL)中的溶液中一次加入Boc2O(8.7g，40.1mmol)。0.5小時(shí)后，濃縮溶液，且殘余物不用進(jìn)一步純化直接使用LC-MS(ES)m/z＝238(M+H)+。
b)[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向(2-羥基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2g，8.44mmol)，鄰苯二甲酰亞胺(1g，7.03mmol)和三苯基膦(2.76g，10.5mmol)于THF(35mL)中的溶液中滴加DEAD(1.7mL，10.5mmol)。0.5小時(shí)后，濃縮溶液，并通過柱色譜(硅膠，15％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(2g，80％)，為白色泡沫狀物L(fēng)C-MS(ES)m/z＝367(M+H)+。
c)(2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2g，5.46mmol)以及或者M(jìn)eNH2(40wt％的H2O溶液，10當(dāng)量)或者NH2NH2(10當(dāng)量)于MeOH(0.5M，10mL)中的溶液在密封管中加熱至60℃。12小時(shí)后，濃縮溶液，并通過柱色譜(硅膠-干法裝柱，2％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物(1.1g，85％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝237(M+H)+。
制備例2
(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備 a)1-氨基-3-苯基-2-丙醇
在25℃，將2-(苯基甲基)環(huán)氧乙烷(7.5g，56.3mmol)于NH4OH(100mL)中的溶液在密封管中攪拌。12小時(shí)后，將溶液濃縮并直接使用LCMS(ES)m/e 152(M+H)+。
b)(2-羥基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，向1-氨基-3-苯基-2-丙醇(7.6g，50mmole)于THF(50mL)中的溶液中加入(Boc)2O(12.0g，55mmole)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，并將殘余物在硅膠上(5％MeOH的DCM溶液(含0.5％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物(13.1g，91％)，為透明黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z 252(M+H)+。
c)[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，經(jīng)5分鐘，向(2-羥基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(10.0g，39.8mmol)，PPh3(12.5g，47.8mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(6.44g，43.8mmol)于THF(125mL)中的溶液中加入DEAD(9.4mL，59.7mmol)。在室溫1小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，2∶1)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(12.6g，83％)LCMS(ES)m/z 381(M+H)+。
d)(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 將NH2NH2(12.5mL，394mmol)加至(2-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(7.5g，19.7mmol)的THF/MeOH(50mL/50mL)溶液中，并在50℃在密封體系中攪拌。12小時(shí)后，將固體濾出，用甲醇洗滌。濃縮濾液，并使用5％MeOH的CHCl3溶液(含0.5％NH4OH)通過柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(3.75g，76％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝251(M+H)+。
制備例3
(3-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備 a)3-氨基-1-苯基-1-丙醇
將于THF(35mL)中的苯甲酰乙腈(benzoylacetonitrile)(2g，13.8mmol)通過加料漏斗滴加至0℃的LAH(1.6g，41.3mmol)于THF(35mL)中的溶液中。將得到的溶液溫?zé)嶂?5℃，然后加熱至60℃，持續(xù)另外2小時(shí)。冷卻至0℃后，滴加飽和酒石酸鉀鈉溶液，該溶液用DCM萃取幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，5-8％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到氨基醇(1.4g，67％)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z 152(M+H)+。
b)(3-羥基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將3-氨基-1-苯基-1-丙醇(1.4g，9.27mmol)溶于THF(50mL)，并一次加入Boc2O(2.4g，11.1mmol)。30分鐘后，濃縮溶液，且殘余物通過硅膠(silica)(0.5-1％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物(1.6g，69％)，為淺白色固體LCMS(ES)m/z 152(M+H)+。
c)[3-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，經(jīng)5分鐘，向(3-羥基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(3g，11.95mmol)，PPh3(4g，15.5mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(1.8g，11.95mmol)于THF(60mL)中的溶液中加入DEAD(2.4mL，15.5mmol)。在室溫1小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，4∶1)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(2.2g，48％)LCMS(ES)m/z 381(M+H)+。
d)(3-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 將NH2NH2(1.8mL，57.7mmol)加至[3-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.2g，5.79mmol)的THF/MeOH(1∶1，30mL)溶液中，并在50℃在密封體系中攪拌。12小時(shí)后，將固體濾出，用甲醇洗滌。濃縮濾液，并使用5％MeOH的CHCl3溶液(含1％NH4OH)通過柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(1.1g，76％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝251(M+H)+。
制備例4
(2-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備 a)2-(2-苯基乙基)環(huán)氧乙烷
在0℃，將3-氯過氧苯甲酸(12.1g，54.0mmol)一次加至3-丁烯-1-基苯(7.15g，54.1mmol)于CH2Cl2中的溶液中，接著溫?zé)嶂?5℃過夜。加入飽和NaHCO3，并分離混合物，得到的透明油狀物(8.0g，定量)不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z＝149(M+H)+。
b)1-氨基-4-苯基-2-丁醇
將2-(2-苯基乙基)環(huán)氧乙烷(8.0g，54mmol)置于含有7N NH3-MeOH(130mL)的密封管中，并在70℃攪拌2小時(shí)，接著濃縮至透明油狀物，其不用進(jìn)一步純化在下一步中使用。
c)(2-羥基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將1-氨基-4-苯基-2-丁醇(7.4g，50.0mmol)溶于THF(50mL)，并一次加入Boc2O(13g，59.6mmol)。30分鐘后，濃縮溶液，且殘余物通過硅膠填料(5％MeOH的DCM溶液(含0.5％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物(13.1g，91％)，為透明黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z 266(M+H)+。
d)[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-4-苯基丁基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，經(jīng)5分鐘，向(2-羥基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(3.0g，11.4mmol)，PPh3(3.6g，13.7mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(1.84g，12.5mmol)于THF(60mL)中的溶液中加入DEAD(1.8mL，11.4mmol)。在室溫0.5小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAC，2∶1)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(3.1g，69％)LCMS(ES)m/z 395(M+H)+。
e)(2-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 將NH2NH2(2.5mL，79.6mmol)加至(2-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(3.1g，7.83mmol)的THF/MeOH(40mL/40mL)溶液中，并攪拌過夜。12小時(shí)后，濃縮溶液，并使用5％MeOH的CHCl3溶液(含0.5％NH4OH)通過柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(1.4g，66％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝265(M+H)+。
制備例5
2-[(2S)-2-氨基-3-苯基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮的制備 a)[(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-(苯基甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，經(jīng)5分鐘，向(S)-(-)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-苯基-1-丙醇(3.0g，11.9mmole)，PPh3(3.74g，14.4mmole)和鄰苯二甲酰亞胺(1.93g，13.1mmole)于THF(75mL)中的溶液中加入DEAD(2.8mL，17.8mmole)。在室溫1.5小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAC，2∶1)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(4.3g，95％)LCMS(ES)m/z 381(M+H)+。
b)2-[(2S)-2-氨基-3-苯基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮 在室溫，向[(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-(苯基甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(4.3g，11.3mmole)于MeOH(100mL)中的溶液中加入4M HCl的二噁烷溶液(50mL)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮至白色固體(定量)LCMS(ES)m/z 281(M+H)+。
制備例6
2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮的制備 a)((1S)-2-羥基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在0℃，向N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(5g，15mmol)于THF(75mL)中的攪拌溶液中加入BH3-THF(45mL，45mmol-1M的THF溶液)。12小時(shí)后，反應(yīng)用AcOH∶MeOH(1∶5，24mL)終止，并在飽和NaHCO3水溶液和DCM之間分配。水相然后用DCM萃取幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并直接使用(4.2g，88％)LCMS(ES)m/e320(M+H)+。
b)((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向((1S)-2-羥基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(4.2g，13.2mmol)，三苯基膦(4.5g，17.1mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(1.9g，13.2mmol)于THF(66mL)中的溶液中加入偶氮二羧酸二乙基酯(2.7mL，17.1mmol)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，且殘余物在硅膠上(1％MeOH的DCM溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(3.2g，54％)，為白色固體LCMS(ES)m/z 449(M+H)+。
c)2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮 在室溫，向((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(3.2g，7.1mmol)于MeOH(35mL)中的溶液中加入4M HCl的二噁烷溶液(18mL)。12小時(shí)后，濃縮溶液，得到標(biāo)題化合物(2.7g，定量)，為HCl鹽LCMS(ES)m/z 349(M+H)+。
制備例7
5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑的制備 在0℃，向1-甲基吡唑(4.1g，50mmole)于THF(100mL)中的溶液中加入n-BuLi(2.2M的THF溶液，55mmole)。將反應(yīng)溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后冷卻至-78℃[J.Heterocyclic Chem.41，931(2004)]。向該反應(yīng)溶液中加入2-異丙氧基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷(12.3mL，60mmole)。在-78℃下15分鐘后，將反應(yīng)經(jīng)1小時(shí)溫?zé)嶂?℃。反應(yīng)用飽和NH4Cl溶液稀釋，并用DCM萃取。有機(jī)級分用H2O(2x100mL)洗滌，用Na2SO4干燥，真空濃縮，得到棕黃色固體(8.0g，77％)，其不用進(jìn)一步純化而使用。LCMS(ES)m/z 127(M+H)+對于[RB(OH)2]；1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.57(s，1H)，6.75(s，1H)，4.16(s，3H)，和1.41(s，12H)。
制備例8
(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備 a)3-氧代-4-苯基丁腈
在-78℃，向氰基乙酸(2g，23.5mmol)于THF(100mL)中的溶液中加入nBuLi(10mL，25.9mmol，2.5M的己烷溶液)。30分鐘后，滴加苯基乙酰氯(1.6mL，11.8mmol)。在另外30分鐘后，將溶液在1N HCl-Et2O之間分配，且水相用Et2O洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，30％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(770mg，40％)，為棕黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z 160(M+H)+。
b)(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 將3-氧代-4-苯基丁腈(1.1g，6.92mmol)于THF(10mL)中的溶液加至0℃的氫化鋁鋰(787mg，20.8mmol)于THF(25mL)中的溶液中。12小時(shí)后，溶液用H2O(943μL)，6N NaOH(716μL)和H2O(3.5mL)終止(quench)。過濾得到的沉淀，且填料用DCM洗滌幾次。將濾液濃縮，然后再溶于THF(30mL)，并一次加入Boc2O(1.5g，6.92mmol)。30分鐘后，濃縮溶液，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物(1g，55％-2步)，為橙色固體LCMS(ES)m/z 265(M+H)+。
c)[3-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-4-苯基丁基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，經(jīng)5分鐘，向(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1g，3.77mmol)，PPh3(1.3g，4.91mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(555mg，3.77mmol)于THF(18mL)中的溶液中加入DEAD(772μL，4.91mmol)。在室溫1小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，5∶1)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(725mg，49％)LCMS(ES)m/z 395(M+H)+。
d)(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 將NH2NH2(577μL，18.4mmol)加至[3-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-4-苯基丁基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(725mg，1.84mmol)的THF/MeOH(1∶1，10mL)溶液中，并在50℃在密封體系中攪拌。12小時(shí)后，將固體濾出，用甲醇洗滌。濃縮濾液，并使用5％MeOH的CHCl3溶液(含1％NH4OH)通過柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(483mg，定量)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝264(M+H)+。
制備例9
4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸的制備 在25℃，將溴(725μL，14.1mmol)于AcOH(2.8mL)中的溶液滴加至5-甲基-2-噻吩甲酸(2g，14.1mmol)和FeCl3(456mg，2.81mmol)在AcOH(28mL)中的溶液中。5小時(shí)后，將溶液傾倒至冰中，將沉淀濾出，并用水洗滌，得到標(biāo)題化合物(3g，定量)，為黃色粉末LCMS(ES)m/z 222(M+H)+。
制備例10
4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯的制備 將4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸(3g，13.6mmol)于MeOH(67mL)和H2SO4(3mL)中的溶液在50℃攪拌。12小時(shí)后，將溶液加至冰-H2O中，并將pH調(diào)節(jié)至～11。水相用DCM萃取幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并直接使用，得到標(biāo)題化合物(3g，94％)，為橙色固體LCMS(ES)m/z 236(M+H)+。
制備例11
4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸的制備 在25℃，將溴(634μL，12.3mmol)于AcOH(2.5mL)中的溶液滴加至5-氯-2-噻吩甲酸(2g，12.3mmol)和FeCl3(399mg，2.50mmol)于AcOH(25mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂粱亓鳎陂g加入另外的溴(634μL，12.3mmol)和FeCl3(399mg，2.50mmol)。7天后，將溶液傾倒至冰中，將沉淀濾出，并用水洗滌，得到標(biāo)題化合物(3g，定量)，為黃色粉末LCMS(ES)m/z 242(M+H)+。
制備例12
(3-氨基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備 a)(3-羥基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將3-(甲基氨基)-1-苯基-1-丙醇(4.12g，24.9mmol)溶于THF(30mL)，并一次加入Boc2O(1M/THF，30mL，30mmol)。30分鐘后，濃縮溶液，殘余物通過硅膠填料(5％MeOH的DCM溶液(含0.5％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物(6.4g，97％)，為透明黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z 265(M+H)+。
b)[3-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-3-苯基丙基]甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，經(jīng)5分鐘，向(3-羥基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.8g，10.4mmol)，PPh3(3.3g，12.7mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(1.86g，12.6mmol)于THF(50mL)中的溶液中加入DEAD(1.98mL，12.6mmol)。在室溫0.5小時(shí)后，加入MeOH(10mL)，并將反應(yīng)溶液吸附(absorbe)在硅膠上，并通過色譜(己烷/EtOAC，2∶1)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(2.7g，65％)LCMS(ES)m/z 395(M+H)+。
c)(3-氨基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 將NH2NH2(1.7mL，54.2mmol)加至[3-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-3-苯基丙基]甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.7g，6.8mmol)的THF/MeOH(5omL/10mL)溶液中，并攪拌過夜。12小時(shí)后，將溶液吸附在硅膠上，并使用5％MeOH的CHCl3溶液(含0.5％NH4OH)通過柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(1.4mg，77％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝265(M+H)+。
制備例13
(2-氨基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備 a)(2-羥基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，向1-(甲基氨基)-3-苯基-2-丙醇(13g，78mmol)[根據(jù)Galons，H.等Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.1979 14，165-170.制備]于THF(390mL)中的溶液中加入(Boc)2O(21.6g，99mmol)。在室溫?cái)嚢韬?小時(shí)，將反應(yīng)溶液吸附在硅膠上，并通過色譜(35％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(11.6g，56％)，為透明黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z 266(M+H)+。
b)[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-3-苯基丙基]甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在室溫，經(jīng)15分鐘，向(2-羥基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(11.6g，43.72mmol)，PPh3(14.3g，54.5mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(8.7g，59.1mmol)于THF(220mL)中的溶液中加入DEAD(8.5mL，54mmol)。在室溫0.5小時(shí)后，加入MeOH(10mL)，并將反應(yīng)溶液吸附在硅膠上，并通過色譜(己烷/EtOAC，2∶1)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(9.97g，57％)LCMS(ES)m/z 395(M+H)+。
c)(2-氨基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 將NH2NH2(7mL，0.2mol)加至[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-3-苯基丙基]甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.7g，6.8mmol)的THF/MeOH(100mL/25mL)溶液中，并攪拌過夜。12小時(shí)后，將溶液吸附在硅膠上，并使用5％MeOH的CHCl3溶液(含0.5％NH4OH)通過柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(5.8mg，88％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝265(M+H)+。
制備例14
2-(2-氨基-3-甲基-3-苯基丁基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮的制備 a)2-疊氮基-3-甲基-3-苯基丁酸甲酯
在-78℃，向KHMDS(36mL，17.9mmol)于THF(70mL)中的溶液中滴加于THF(15mL)中的3-甲基-3-苯基丁酸甲酯(3g，15.6mmol)。1小時(shí)后，經(jīng)10分鐘，滴加于THF(15mL)中的2，4，6-三異丙基苯磺酰疊氮化物(trisylazide)(5g，18.7mmol)。在另外5分鐘后，加入乙酸(4.1mL)，經(jīng)1小時(shí)將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?5℃。然后將溶液在H2O-DCM之間分配，水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(2.6g，71％)，含33％的3-甲基-3-苯基丁酸甲酯，其需要在下一步中純化LCMS(ES)m/e 234(M+H)+。
b)β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酯
將2-疊氮基-3-甲基-3-苯基丁酸甲酯(2.6g，11.2mmol)和PPh3(4.4g，16.7mmol)于H2O(400μL)和THF(100mL)中的溶液在25℃攪拌2天，在50℃攪拌12小時(shí)。將溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物(1.4g，定量)LCMS(ES)m/e 208(M+H)+。
c)2-氨基-3-甲基-3-苯基-1-丁醇
在0℃，向β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酯(1.4g，6.76mmol)于THF(20mL)中的溶液中滴加氫化鋁鋰(384mg，10.1mmol)于THF(10mL)中的溶液。經(jīng)12小時(shí)，溫?zé)嶂?5℃后，溶液通過依次添加H2O(659μL)，6N NaOH(500μL)和H2O(2.4mL)終止。過濾得到的沉淀，且填料用DCM徹底洗滌。濃縮濾液，并通過柱色譜(硅膠，2-5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物(770mg，64％)LCMS(ES)m/e 179(M+H)+。
d)[1-(羥基甲基)-2-甲基-2-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，將Boc2O(1g，4.76mmol)一次加至2-氨基-3-甲基-3-苯基-1-丁醇(770mg，4.33mmol)于THF(20mL)中的溶液中。30分鐘后，濃縮溶液，得到標(biāo)題化合物(1.2g，定量)，為白色固體，其不用進(jìn)一步純化而使用LCMS(ES)m/e 279(M+H)+。
e){1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]-2-甲基-2-苯基丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向[1-(羥基甲基)-2-甲基-2-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(775mg，2.8mmol)，三苯基膦(915mg，3.5mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(499mg，3.4mmol)于THF(15mL)中的溶液中加入偶氮二羧酸二乙基酯(0.54mL，3.4mmol)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，加入MeOH(5mL)，并將溶液吸附在硅膠上，并通過柱色譜(1％MeOH的DCM溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(723mg，64％)，為白色固體LCMS(ES)m/z 409(M+H)+。
f)2-(2-氨基-3-甲基-3-苯基丁基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮
在室溫，向{1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]-2-甲基-2-苯基丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(723mg，1.77mmol)于CHCl3∶MeOH(10∶1，55mL)中的溶液中加入4M HCl的二噁烷(10mL)溶液。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮至白色固體(定量)LCMS(ES)m/z 309(M+H)+。
制備例15
5-碘-1-甲基-1H-1，2，4-三唑的制備 在-70℃，經(jīng)15分鐘，將1-甲基-1H-1，2，4-三唑(2.05g，24.7mmol)緩慢加入到nBuLi的Et2O溶液中。將混合物在-70℃攪拌60分鐘，溫?zé)嶂?30℃。經(jīng)15分鐘，將I2(6.5g，25.6mmol)于THF(27mL)中的溶液緩慢加入，并將該混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪?0分鐘。將混合物用飽和Na2S2O3分配，分離各相，除去有機(jī)溶劑。粗產(chǎn)物碘化物不用進(jìn)一步純化而使用LCMS(ES)m/z 210(M+H)+。
制備例16
[2-氨基-2-(1-萘基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備 a)羥基(1-萘基)乙腈
在0℃，向氰化鉀于乙醚(100mL)中的溶液中滴加1-萘甲醛(1.56g，10mmol)和乙酸(1.41g，23.5mmol)于乙醚(10mL)中的混合物。將得到的混合物溫?zé)嶂?5℃，持續(xù)20小時(shí)，將沉淀濾出，濃縮濾液，得到為透明油狀的標(biāo)題化合物(1.67g，9.14mmol，91％)LCMS(ES)m/z 184(M+H)+。
b)2-氨基-1-(1-萘基)乙醇
在0℃，向羥基(1-萘基)乙腈(1.67g，9.14mol)于THF(90mL)中的溶液中滴加LAH-THF溶液(1M，11mL，11mmol)。2小時(shí)后，溶液通過依次添加H2O(0.42mL)，6N NaOH(6M，0.32mL)和H2O(1.6mL)終止。過濾得到的沉淀，濃縮濾液并直接使用，得到標(biāo)題化合物(0.897g，4.8mmol，53％)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z 188(M+H)+。
c)[2-羥基-2-(1-萘基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向2-氨基-1-(1-萘基)乙醇(1.38g，4.8mmol)于二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入Boc酸酐(1.155g，5.3mmole)。在室溫?cái)嚢?2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮，并在飽和NaHCO3/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.378g，4.8mmol，定量)LCMS(ES)m/z 288(M+H)+。
d)[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-2-(1-萘基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向[2-羥基-2-(1-萘基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.38g，4.8mmol)，三苯基膦(1.52g，5.76mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(0.74g，5.04mmol)于THF(50mL)中的溶液中加入偶氮二羧酸二乙基酯(0.87mL，5.52mmol)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，殘余物在硅膠上(20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(1.29g，3.1mmol，65％)，為白色固體LCMS(ES)m/z 387(M+H)+。
e)[2-氨基-2-(1-萘基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-2-(1-萘基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.29g，3.1mmol)于MeOH(30mL)中的溶液中加入無水肼(0.5mL，15.5mmol)。12小時(shí)后，將溶液在DCM/H2O之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(491mg，1.72mmole，55％)LCMS(ES)m/z 287(M+H)+。
制備例17
1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑的制備 在0℃，向NaH(60％，于礦物油中，3.5g，146mmol，用200mL己烷洗滌)于THF(200mL)中的懸浮液中滴加4-甲基-1H-吡唑(10g，122mmol)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，在0℃，向上述懸浮液中滴加MeI(7.3mL，117mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜。NaI副產(chǎn)物通過過濾除去，濾液在下一步直接使用。
在0℃，向上述1，4-二甲基吡唑的THF溶液中加入n-BuLi(2.5M的己烷溶液，58.5mL，146mmole)。將反應(yīng)溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，然后冷卻至-78℃[J.Heterocyclic Chem.41，931(2004)]。向該反應(yīng)溶液中加入2-異丙氧基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷(27.2g，146mmole)。在-78℃下15分鐘后，將反應(yīng)溫?zé)嶂?℃，并攪拌3小時(shí)。反應(yīng)用飽和NH4Cl溶液稀釋，并用DCM萃取。將有機(jī)物用Na2SO4干燥，真空濃縮，得到為棕色固體的標(biāo)題化合物(21g，78％)，其不用進(jìn)一步純化直接使用LC-MS141(M-C6H12)+，223(M+H)+。1H NMR(CDCl3)δ7.28(s，1H)，4.03(s，3H)，2.22(s，3H)，和1.32(s，12H)。
制備例18
2-[(2S)-2-氨基-3-(2，6-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮的制備 a)N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2，6-二氟-L-苯丙氨酸
將1，4-二噁烷(55mL)和水(12mL)加至于200mL圓底燒瓶中的2，6-二氟-L-苯丙氨酸(3.00g，12.62mmol)中。將該混合物冷卻至0℃，接著緩慢添加NaOH(12.62mL，31.6mmol)，然后添加Boc2O(3.42g，15.20mmol)。將混合物溫?zé)嶂潦覝?，并通過LC-MS監(jiān)測是否完全。完全后，將混合物冷卻至0℃，并通過緩慢添加2.5M HCl(12mL)調(diào)節(jié)為中性。減壓下除去溶劑。得到的固體與20％MeOH/CHCl3(150mL)進(jìn)行超聲，過濾，并除去有機(jī)溶劑，得到產(chǎn)物(4.3g，14.4mmol，定量)，為白色固體，其不用進(jìn)一步純化而在下一步中使用LC-MS(ES)m/z＝302(M+H)+。
b)[(1S)-2-(2，6-二氟苯基)-1-(羥基甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在0℃，將BH3.THF(64.7ml，64.7mmol)緩慢加入于200mL圓底燒瓶中的N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2，6-二氟-L-苯丙氨酸(4.33g，14.37mmol)的四氫呋喃(THF)(60mL)溶液中?；旌衔飻嚢?小時(shí)，然后置于冰箱中過夜。過量試劑通過在0℃緩慢添加AcOH的MeOH溶液而猝滅，并將該混合物溫?zé)嶂潦覝?，持續(xù)2小時(shí)。將THF體積減少1/2，并將產(chǎn)物于CHCl3和NaHCO3(飽和)水溶液之間分配。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并不用進(jìn)一步純化而直接使用(3.4g，78％)LC-MS(ES)m/z＝288(M+H)+。
c){(1S)-2-(2，6-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向200mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(58.8ml)中的[(1S)-2-(2，6-二氟苯基)-1-(羥基甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(3.38g，11.76mmol)，鄰苯二甲酰亞胺(2.02g，13.73mmol)，和PS-TPP(聚合物負(fù)載的三苯基膦)(2.15mmol/g，4.92g，14.76mmol)。加入DEAD(2.23ml，14.09mmol)，混合物在環(huán)境溫度攪拌大約30分鐘，此時(shí)加入MeOH?；旌衔锿ㄟ^塞力特硅藻土(celite)過濾吸附至硅膠上，并通過柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(2.7g，55％)LC-MS(ES)m/z＝317(M+H)+。
d)2-[(2S)-2-氨基-3-(2，6-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮 向200mL圓底燒瓶中加入于氯仿(75ml)和甲醇(10ml)中的{(1S)-2-(2，6-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.72g，6.40mmol)。加入HCl/1，4-二噁烷(40.0ml，160mmol)，并將混合物攪拌過夜。除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(2.4g，定量)，為HCl鹽LC-MS(ES)m/z＝317(M+H)+。
制備例19
2-[(2S)-2-氨基-3-(3-吡啶基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮的制備a)[(1S)-2-羥基-1-(3-吡啶基甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在0℃，向Boc-L-3-吡啶基苯胺(1.064g，4mmol)于THF(5mL)中的溶液中滴加BH3-THF(20mL，20mmol-1M的THF溶液)。2小時(shí)后，將反應(yīng)在0℃用AcOH∶MeOH(1∶5，14.3mL)，接著用Et3N(1.67mL，12mmol)和I2(2.03g，8mmol)終止。得到的混合物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度，并攪拌20小時(shí)，從棕色變?yōu)闊o色。將溶液濃縮，并在DCM和水之間分配。水相然后用DCM萃取幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到為無色油狀的所需產(chǎn)物，其不用進(jìn)一步純化而使用(957.6mg，95％)LC-MS(ES)m/z＝253(M+H)+。
b)[(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-(3-吡啶基甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向[(1S)-2-羥基-1-(3-吡啶基甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(958mg，3.8mmol)，三苯基膦(1.21g，4.6mmol)和鄰苯二甲酰亞胺(617mg，4.2mmol)于THF(40mL)中的溶液中加入偶氮二羧酸二乙基酯(0.72mL，4.6mmol)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，殘余物在硅膠上(0-50％乙酸乙酯/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(797mg，55％)，為白色固體LCMS(ES)m/z 382(M+H)+。
c)2-[(2S)-2-氨基-3-(3-吡啶基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮 在室溫，向[(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-(3-吡啶基甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(796.7mg，2.1mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入1M HCl的二噁烷溶液(10mL)。20小時(shí)后，濃縮溶液，得到標(biāo)題化合物(404mg，68％)，為HCl鹽LCMS(ES)m/z 282(M+H)+。
制備例20
1-甲基-1H-1，2，3-三唑的制備 向1，2，3-三唑(10g，145mmol)于150ml THF中的溶液中加入碳酸鉀(40g，290mmol)和MeI(13.58ml，217mmol)。得到的反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物過濾，濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物(9.2g，78％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.71(s，1H)，7.55(s，1H)，4.14(s，3H)。
制備例21 1，4-二甲基-5-(三丁基錫烷基)-1H-1，2，3-三唑的制備
a)1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑
在0℃，將甲胺溶液(25.4ml，50.8mmol，2M的MeOH溶液)滴加至N′-(2，2-二氯-1-甲基亞乙基)-4-甲基苯磺酰肼(參考Sakai，K.等Bull.Chem.Soc.Jpn.，1986，59，179-183)(3g，10.16mmol)于甲醇(10ml)中的懸浮液中。將固體溶于溶液中。將得到的暗棕色混合物在0℃攪拌2小時(shí)，蒸發(fā)，并過濾出固體，并用EtOAc淋洗。將合并的濾液濃縮，并在25M biotage柱上純化，其用50-75％的EA/己烷洗脫，得到0.57g棕色液體。LC-MS(ES)m/z＝98(M+H)+，1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.27(s，1H)，4.06(s，3H)，2.35(s，3H)。
b)1，4-二甲基-5-(三丁基錫烷基)-1H-1，2，3-三唑
在-78℃，在N2下，將1，4-二甲基-1，2，3-三唑(0.56g，5.77mmol)于THF(5mL)中的溶液滴加至BuLi(2.77ml，6.92mmol，2.5M的己烷溶液)于30mLTHF中的溶液中。將得到的渾濁的混合物在-70℃攪拌1小時(shí)。
然后加入三丁基氯化錫(1.711ml，6.34mmol)。反應(yīng)混合物變?yōu)橥该?，且在此溫度攪?0分鐘，逐漸溫?zé)嶂潦覝?。向該反?yīng)混合物中加入10ml NH4Cl和10ml水。反應(yīng)混合物用乙醚萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，并濃縮。殘余物在FCC上(20％EA/己烷)純化，得到1.7g透明液體(73％)。LC-MS(ES)m/z＝388(M+H)+，1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.05(s，3H)，2.38(s，3H)，1.5-0.9(m，27H)。
制備例22
[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(2，4-二氯苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的制備 將4-溴-2-噻吩甲酸(1.29g，6.22mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(2.0g，5.19mmol)，PyBrop(3.62g，7.78mmol)和Hunig堿(3.62ml，20.74mmol)于DCM(50ml)中的溶液在室溫?cái)嚢?0分鐘。反應(yīng)混合物用H2O，1N HCl，NaHCO3(飽和水溶液)和鹽水洗滌。除去溶劑，且將殘余物溶于MeOH，加入肼一水合物(1.3g，26mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。形成白色固體，過濾，并用DCM淋洗。向?yàn)V液中加入(Boc)2O(1.7g，7.78mmol)和NaHCO3(飽和水溶液，3ml)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，并用NaHCO3(飽和水溶液)和鹽水洗滌。除去溶劑，殘余物通過biotage(50％H/E)純化，得到產(chǎn)物(2.0g，76％)。LC-MS(ES)m/z＝531.0(M+Na)+。
實(shí)施例1
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 a)(2-{[(4，5-二溴-2-呋喃基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向4，5-二溴-2-呋喃甲酸(2.81g，10.4mmol)，PyBrOP(5.6g，12.0mmol)和二異丙基乙基胺(4.2mL，24.0mmol)于DCM(70mL)中的溶液中加入(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.0g，8.0mmol)。16小時(shí)后，將溶液在H2O之間分配，并用DCM洗滌。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，己烷/EtOAc，2∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(4.3g，82％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝503(M+H)+。
b)[2-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向(2-{[(4，5-二溴-2-呋喃基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.30g，0.60mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，8.6mL)中的溶液中加入K2CO3(0.25g，1.8mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(70mg，0.06mmol)，和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(0.12g，0.60mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)12小時(shí)。將反應(yīng)溶液傾倒至H2O(100mL)中，并用DCM萃取。將有機(jī)物干燥(Na2SO4)，真空濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，1∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(0.20g，66％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝504。
c)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺 將[2-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.20g，0.40mmol)溶于DCM(10mL)，并用TFA(5mL)處理。2小時(shí)后，濃縮溶液，并在反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)上純化，得到標(biāo)題化合物的TFA鹽(0.16g，91％)，為白色粉末LC-MS(ES)m/z＝405(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.59(s，1H)，7.33(m，3H)，7.30(m，2H)，6.85(s，1H)，4.57(m，1H)，4.03(s，3H)，3.25(m，1H)，3.14(m，1H)，和2.98(m，2H)。
實(shí)施例2
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)(2-{[(5-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向5-溴-2-噻吩甲酸(3.2g，15.2mmol)，PyBrOP(8.5g，18.2mmol)和二異丙基乙基胺(10.6mL，60.9mmol)于DCM(76mL)中的溶液中加入(2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(3.6g，3.14mmol)[在制備例1中制備]。16小時(shí)后，將溶液在H2O之間分配，并用DCM洗滌。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，1％MeOH的DCM溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(4g，62％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝426(M+H)+。
b)[2-苯基-2-({[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向(2-{[(5-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1g，2.35mmol)于DMF(9mL)中的溶液中加入KOAc(693mg，7.05mmol)，聯(lián)硼酸二頻那醇酯(bis(pinocolato)diboron)(1.2g，4.71mmol)和Pd(dppf)Cl2(169mg，0.212mmol)。將反應(yīng)內(nèi)容物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)18小時(shí)，且然后在6N NaOH和DCM之間分配。將含水級份的pH使用3M HCl調(diào)節(jié)至～3，并用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，在真空下濃縮至固體并在下一反應(yīng)中直接使用LC-MS(ES)m/z＝473(M+H)+硼酸酯，391(M+H)+硼酸。
c)[2-({[5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向[2-苯基-2-({[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(200mg，0.42mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，8.6mL)中的溶液中加入K2CO3(234mg，1.69mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(24mg，0.02mmol)，和5-碘-1-甲基-1H-吡唑(97mg，0.47mmol)[根據(jù)Effenberger，F(xiàn).；等J.Org.Chem.1984，49，24，4687制備]。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)12小時(shí)。將反應(yīng)溶液傾倒至H2O(100mL)中，并用DCM萃取。將有機(jī)物干燥(Na2SO4)，真空濃縮，并在硅膠上(1％MeOH的DCM溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(56mg，31％)，為黃色固體LC-MS(ES)m/z＝427。
d)N-(2-氨基-1-苯基乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[2-({[5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(56mg，0.131mmol)溶于MeOH(2mL)，并用過量4MHCl的二噁烷溶液(656μL，2.62mmol)處理。4小時(shí)后，濃縮溶液，得到標(biāo)題化合物(46mg，定量)，為黃色固體LC-MS(ES)m/z 327(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ9.46(d，J＝8.2Hz，1H)，8.27(bs，1H)，8.20(d，J＝4.0Hz，1H)，7.48-7.75(m，3H)，7.37-7.40(m，2H)，7.31-7.33(m，1H)，6.58(d，J＝1.9Hz，1H)，5.21-5.30(m，1H)，3.97(s，3H)，3.36-3.41(m，1H)，3.19-3.25(m，1H)。
實(shí)施例3
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例2制備，為棕黃色固體，除了用(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.65g，7.97mmol)[在制備例2中制備]代替(2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 341(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ8.74(d，J＝8.5Hz，1H)，8.05(bs，1H)，7.89(d，J＝3.9Hz，1H)，7.47(d，J＝1.9Hz，1H)，7.43(d，J＝3.9Hz，1H)，7.26-7.29(m，3H)，7.20-7.22(m，1H)，6.56(d，J＝2.0Hz，1H)，4.31-4.42(m，1H)，2.98-3.01(m，2H)，2.91-2.93(m，2H)。
實(shí)施例4
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-{[(2Z)-1-甲基-2-(2-丙烯-1-亞基)肼基]甲基}-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例2制備，為黃色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(1g，4.83mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.2g，4.83mmol)[在制備例2中制備]代替(2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 441(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ8.98(bs，1H)，8.29(s，1H)，8.17(bs，2H)，7.98(s，1H)，7.46(s，1H)，7.27-7.29(m，3H)，7.19(s，1H)，6.46(s，1H)，4.35-4.37(m，1H)，3.51(s，3H)，2.75-3.12(m，4H)。
實(shí)施例5
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-4-{[(2Z)-1-甲基-2-(2-丙烯-1-亞基)肼基]甲基}-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例2制備，為黃色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(650mg，3.14mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z 427(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ9.65(d，J＝7.3Hz，1H)，8.58(s，1H)，8.31(br s，2H)，7.99(s，1H)，7.42-7.51(m，2H)，7.72-7.80(m，2H)，7.20-7.31(m，1H)，6.51(s，1H)，3.52(s，1H)，5.25-5.35(m，1H)，3.51(s，3H)，3.32-3.48(m，1H)，3.15-3.21(m，1H)。
實(shí)施例6
N-(2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向5-溴-2-噻吩甲酸(100mg，0.48mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，6mL)中的溶液中加入K2CO3(267mg，1.93mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(28mg，24μmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(94mg，0.48mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)12小時(shí)，然后在6NNaOH和DCM之間分配。將水相的pH使用3M HCl調(diào)節(jié)至～3，并用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用(～100mg，定量)LC-MS(ES)m/z＝209(M+H)+。
b)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(100mg，0.48mmol)，PyBrOP(270mg，0.58mmol)和二異丙基乙基胺(420μL，2.4mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(168mg，0.48mmol)[來自制備例6]。16小時(shí)后，將溶液在H2O之間分配，并用DCM洗滌。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，濃縮，并通過柱色譜(硅膠)純化，得到標(biāo)題化合物(74mg，28％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝539(M+H)+。
c)N-(2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 在室溫，向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(74mg，0.14mmol)于MeOH/THF(2mL，1∶1)中的溶液中加入肼(86μL，2.75mmol)。在室溫?cái)嚢?8小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物。
將上述中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量4M HCl的二噁烷溶液(500μL)處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽LC-MS(ES)m/z＝409(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ8.97(d，J＝9.0Hz，1H)，8.17(bs，1H)，8.00(d，3.8Hz，1H)，7.68(d，J＝7.8Hz，1H)，7.55-7.61(m，2H)，7.42-7.47(m2H)，6.56(d，J＝2.0Hz，1H)，4.47-4.51(m，1H)，4.18(s，3H)，3.09-3.11(m，4H)。
實(shí)施例7
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1制備，為黃色固體，除了用4，5-二溴噻吩甲酸(376mg，1.32mmol)代替4，5-二溴呋喃甲酸LC-MS(ES)m/z＝419(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ8.92(d，J＝8.6Hz，1H)，8.03-8.06(m，2H)，7.56(d，J＝1.9Hz，1H)，7.26-7.32(m，3H)，7.21-7.23(m，1H)，6.55(d，J＝1.9Hz，1H)，4.32-4.42(m，1H)，3.77(s，3H)，3.00-3.01(m，2H)，2.89-2.91(m，2H)。
實(shí)施例8
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1制備，為黃色固體，除了用4，5-二溴噻吩甲酸(2.2g，7.69mmol)代替4，5-二溴呋喃甲酸，以及用(2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.1g，4.66mmol)代替(2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z＝406(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ9.47(d，J＝7.9Hz，1H)，8.26(s，1H)，8.17(bs，1H)，7.58(d，J＝1.6Hz，1H)，7.38-7.46(m，3H)，7.30-7.34(m，1H)，6.56(d，J＝1.6Hz，1H)，5.28-5.37(m，1H)，3.81(s，3H)，3.35-3.41(m，1H)，3.21-3.28(m，1H)。
實(shí)施例9
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用5-溴-2-呋喃甲酸(58mg，0.3mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z＝393(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.62(br s，1H)，7.57(m，1H)，7.51(m，3H)，7.22(m，1H)，6.91(m，1H)，6.76(m，1H)，4.6(m，1H)，4.07(m，3H)和3.15(m，4H)。
實(shí)施例10
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為黃色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(306mg，0.80mmol)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z＝409(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm2.81-2.88(m，1H)2.93(td，J＝9.03，4.93Hz，2H)3.09(dd，J＝13.89，5.31Hz，1H)4.00(s，3H)4.28-4.35(m，1H)6.53(d，J＝2.02Hz，1H)7.32(d，J＝4.04Hz，1H)7.45-7.52(m，3H)7.54-7.58(m，1H)7.60(s，1H)7.70(d，J＝4.04Hz，1H)。
實(shí)施例11
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4，5-二溴-2-噻吩甲酸(237mg，0.83mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z＝488(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.97-3.10(m，4H)3.78(s，3H)4.42-4.54(m，1H)6.56(d，J＝2.02Hz，1H)7.45(t，J＝7.58Hz，1H)7.50-7.54(m，1H)7.56-7.63(m，2H)7.71(d，J＝7.58Hz，1H)7.92(s，1H)8.76(d，J＝9.09Hz，1H)。
實(shí)施例12
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4，5-二溴-2-噻吩甲酸(237mg，0.83mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(206mg，0.535mmol)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z＝488(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δppm2.97-3.07(m，1H)3.10-3.21(m，2H)3.27(d，J＝3.54Hz，1H)3.82(s，3H)4.50-4.59(m，1H)6.51(d，J＝2.02Hz，1H)7.50-7.60(m，4H)7.62(s，1H)7.71(s，1H)。
實(shí)施例13
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用5-溴-2-呋喃甲酸(44mg，0.23mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(87mg，0.25mmol)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z＝393(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.63(br s，1H)，7.57(m，1H)，7.51(m，3H)，7.22(m，1H)，6.91(m，1H)，6.77(m，1H)，4.6(m，1H)，4.07(m，3H)和3.14(m，4H)。
實(shí)施例14
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4，5-二溴-2-呋喃甲酸(82mg，0.3mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(115mg，0.3mmol)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z＝472(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.61(m，2H)，7.53(m，3H)，7.30(m，1H)，6.84(m，1H)，4.59(m，1H)，4.03(s，3H)，3.28(m，1H)，3.17(m，2H)和3.01(m，1H)。
實(shí)施例15
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4，5-二溴-2-呋喃甲酸(82mg，0.3mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z＝472(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.71(m，1H)，7.60(m，1H)，7.53(m，2H)，7.44(m，1H)，7.33(m，1H)，6.88(m，1H)，4.7(m，1H)，4.06(s，3H)，3.25(m，3H)和3.09(m，1H)。
實(shí)施例16
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[2-({[4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向[2-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.35g，0.67mmol)[來自于實(shí)施例7]于二噁烷/H2O(5∶1，25∶5mL)中的溶液中加入K2CO3(0.28mg，2.0mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(77mg，0.06mmol)，和三甲基環(huán)三硼氧烷(trimethyl boroxine)(0.17mL，1.2mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)12小時(shí)。將反應(yīng)溶液真空濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，1∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(0.10g，33％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝455(M+H)+。
b)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[2-({[4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.10g，0.22mmol)溶于MeOH(10mL)和THF(5mL)中，并用4M HCl的二噁烷溶液(5mL)處理。4小時(shí)后，濃縮溶液，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(68mg，91％)，為白色粉末LC-MS(ES)m/z＝355(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.79(s，1H)，7.68(s，1H)，7.31(m，4H)，7.25(m，1H)，6.56(s，1H)，4.54(m，1H)，3.87(s，3H)，3.69(s，2H)，3.34(m，2H)，3.03(d，J＝7.6Hz，2H)和2.21(s，3H)。
實(shí)施例17
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(3-呋喃基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例16的方法制備，為白色固體，除了用3-呋喃硼酸(0.13g，1.2mmole)代替三甲基環(huán)三硼氧烷LC-MS(ES)m/z＝472(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ8.13(s，1H)，7.81(s，1H)，7.53(m，2H)，7.34(m，4H)，7.26(m，1H)，6.61(s，1H)，6.20(s，1H)，4.57(m，1H)，3.68(s，2H)，3.63(s，3H)，3.24(m，2H)和3.07(m，2H)。
實(shí)施例18
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-2-噻吩甲酸甲酯
向5-氯-2-噻吩甲酸(2.0g，12.3mmol)于無水MeOH(75mL)中的溶液中加入H2SO4(1mL)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)20小時(shí)，然后真空濃縮。將殘余物溶于DCM，并用飽和NaHCO3溶液洗滌幾次。有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用(21.3g，定量)LC-MS(ES)m/z＝177(M+H)+。
b)5-氯-4-碘-2-噻吩甲酸甲酯
向5-氯-2-噻吩甲酸(5.0g，28.0mmol)于乙酸(150mL)中的溶液中加入ZnCl2(38g，280mmoles)和芐基三甲基二氯碘酸銨(benzyltrimethylammoniumdichloroiodate)(20.5g，58.8mmole)[Bull.Chem.Soc.Jpn.64，2566-2568(1991)]。將反應(yīng)混合物加熱至70℃，持續(xù)48小時(shí)，然后真空濃縮。殘余物用己烷(2x200mL)萃取，己烷溶液用飽和NaHCO3溶液洗滌。有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，4∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(3.8g，45％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z＝302(M+H)+。
c)5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向5-氯-4-碘-2-噻吩甲酸甲酯(1.75g，5.8mmol)于二噁烷/H2O(50∶5mL)中的溶液中加入K2CO3(3.4g，24.9mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(0.96g，0.83mmol)，和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(3.4g，16.5mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)15小時(shí)。將反應(yīng)溶液真空濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，4∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(0.35g，24％)，為黃色油狀物L(fēng)C-MS(ES)m/z＝257(M+H)+。
d)5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(0.30g，1.17mmole)于THF(10mL)和MeOH(10mL)中的溶液中加入6N NaOH(5mL)。將反應(yīng)溶液加熱至50℃，持續(xù)2小時(shí)。將反應(yīng)溶液真空濃縮，使用3N HCl調(diào)節(jié)為酸性(pH～2)，并用DCM萃取。有機(jī)溶液干燥(Na2SO4)，并濃縮至固體(0.22g)，其不用進(jìn)一步純化而使用。LC-MS(ES)m/z＝243(M+H)+。
e)5-氯-N-[(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(0.21g，0.87mmol)，PyBrOP(610mg，1.3mmol)和二異丙基乙基胺(0.76mL，4.35mmol)于DCM(20mL)中的溶液中加入2-[(2S)-2-氨基-3-苯基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮HCl(380mg，0.96mmol)[根據(jù)制備例5制備]。16小時(shí)后，將溶液在H2O之間分配，并用DCM洗滌。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，濃縮，并通過柱色譜(硅膠)純化，得到標(biāo)題化合物(200mg，46％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝505(M+H)+。
f)N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 在室溫，向5-氯-N-[(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(200mg，0.40mmol)在MeOH/THF(10mL，1∶1)中的溶液中加入肼水合物(0.20mL，4.0mmol)。在室溫?cái)嚢?4小時(shí)后，將反應(yīng)溶液真空濃縮，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體。
將上述中性化合物溶于DCM(2mL)中，用過量4M HCl的二噁烷溶液(1mL)處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(102mg)LC-MS(ES)m/z＝375(M+H)+，7.78(s，1H)，7.63(s，1H)，7.31(m，4H)，7.26(m，1H)，6.55(s，1H)，4.54(m，1H)，3.91(s，3H)，3.24(m，2H)和3.03(m，2H)。
實(shí)施例19
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-3-(甲氧基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-3-羥基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
在密封管中將4，5-二溴-3-羥基-2-噻吩甲酸甲酯(500mg，1.59mmol)，5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(339mg，1.75mmol)，Pd(PPh3)4(92mg，79.4μmol)和K2CO3(876mg，6.35mmol)于二噁烷(6.6mL)和H2O(1.3mL)中混合。在80℃下12小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，0.5％MeOH的DCM溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(75mg，15％)，為棕色殘余物L(fēng)CMS(ES)m/z＝318(M+H)+。
b)4-溴-3-(甲氧基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
在25℃，向4-溴-3-羥基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(175mg，0.554mmol)，MeOH(26μL，0.609mmol)，PPh3(189mg，0.720mmol)于THF(6mL)中的溶液中一次加入DEAD(113μL，0.720mmol)。30分鐘后，將反應(yīng)濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(135mg，74％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝332(M+H)+。
c)[2-({[4-溴-3-(甲氧基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
i)將4-溴-3-(甲氧基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(135mg，0.410mmol)在6N NaOH(4mL)和THF(4mL)中的溶液在密封管中在80C攪拌。2小時(shí)后，將溶液使用1N HCl酸化至pH 3，然后用DCM萃取幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用LCMS(ES)m/z＝318(M+H)+。
ii)向粗產(chǎn)物酸，(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(88mg，0.351mmol)[來自于制備例2]，二異丙基乙基胺(305μL，1.76mmol)于DCM(3.5mL)中的溶液中一次加入PyBrop(196mg，0.422mmol)。12小時(shí)后，加入另外的二異丙基乙基胺(305μL，1.76mmol)和PyBrop(196mg，0.422mmol)。2小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用LCMS(ES)m/z＝550(M+H)+。
d)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-3-(甲氧基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[2-({[4-溴-3-(甲氧基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(粗物質(zhì)，來自于部分e)在TFA-DCM(3mL，1∶2)中的溶液在25℃攪拌。30分鐘后，濃縮溶液，殘余物通過硅膠填料(3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將該游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽LC-MS(ES)m/z 450(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.07(br.s.，3H)7.85(d，J＝8.84Hz，1H)7.58(d，J＝2.02Hz，1H)7.32(d，J＝7.07Hz，2H)7.26-7.29(m，2H)7.20-7.24(m，1H)6.54(d，J＝2.02Hz，1H)4.50-4.55(m，1H)3.79(d，J＝6.82Hz，3H)3.74(d，J＝6.57Hz，1H)3.17(s，1H)2.98-3.10(m，4H)。
實(shí)施例20
N-[3-氨基-1-(苯基甲基)丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向4，5-二溴-2-噻吩甲酸(1g，3.5mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，18mL)中的溶液中加入K2CO3(1.9g，13.98mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(201mg，0.175mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(678mg，3.5mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)12小時(shí)，然后在6N NaOH和DCM在之間分配。將水相的pH使用3M HCl調(diào)節(jié)至～3，并用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用(～1g，定量)LC-MS(ES)m/z＝288(M+H)+。
b)[3-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-4-苯基丁基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(250mg，0.874mmoD，PyBrOP(489mg，8.74mmol)和二異丙基乙基胺(762μL，4.37mmol)于DCM(8mL)中的溶液中加入(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(230mg，0.874mmol)[根據(jù)制備例8制備]。16小時(shí)后，將溶液在H2O之間分配，并用DCM洗滌。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，濃縮，并通過柱色譜(硅膠)純化，得到標(biāo)題化合物(130mg，29％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝533(M+H)+。
c)N-[3-氨基-1-(苯基甲基)丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[3-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-4-苯基丁基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(130mg，0.24mmol)于TFA-DCM(3mL，1∶2)中的溶液在25℃攪拌。30分鐘后，濃縮溶液，殘余物通過硅膠填料(3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將該游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(40mg，40％)，LC-MS(ES)m/z 433(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.68(d，J＝8.59Hz，1H)7.97(s，1H)7.77(br s，3H)7.57(d，J＝2.02Hz，1H)7.28(d，J＝2.27Hz，3H)7.25-7.32(m，2H)6.55(d，J＝2.02Hz，1H)4.17-4.24(m，1H)3.78(s，3H)2.77-2.89(m，4H)1.85-1.92(m，1H)1.81(td，J＝9.54，4.93Hz，1H)。
實(shí)施例21
4-溴-N-[2-(甲基氨基)-1-苯基乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1的方法制備，為灰白色固體，除了用(2-氨基-2-苯基乙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1g，4.02mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]代替(2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，以及用4，5-二溴-2-噻吩甲酸(1.89g，6.6mmol)代替4，5-二溴-2-呋喃甲酸LCMS(ES)m/z420(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.64(d，J＝8.34Hz，1H)8.91(br.s.，1H)8.33(s，1H)7.58(d，J＝2.02Hz，1H)7.42-7.50(m，2H)7.38-7.42(m，2H)7.34(d，J＝7.07Hz，1H)6.56(d，J＝2.02Hz，1H)5.37-5.44(m，1H)3.79(s，3H)3.47-3.54(m，1H)3.33(td，J＝8.46，3.79Hz，1H)2.63(t，J＝5.31Hz，3H)。
實(shí)施例22
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1的方法制備，為黃色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸(81mg，0.368mmol)[來自于制備例10]代替4，5-二溴-2-呋喃甲酸LC-MS(ES)m/z 355(M+H)+，1H NMR(400M[Hz，DMSO-d6)δppm 8.84(d，J＝8.34Hz，1H)8.15(br.s.，3H)8.00(s，1H)7.52(d，J＝1.77Hz，1H)7.24-7.31(m，4H)7.17-7.23(m，1H)6.36(d，J＝1.77Hz，1H)4.35(d，J＝3.03Hz，1H)3.78(s，3H)3.03(dd，J＝6.82，2.53Hz，1H)2.93-2.99(m，2H)2.90(d，J＝6.06Hz，1H)2.38(s，3H)。
實(shí)施例23
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸(250mg，1.04mmol)[來自于制備例11]代替4，5-二溴-2-呋喃甲酸LC-MS(ES)m/z 375(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.09(d，J＝8.59Hz，1H)8.14(s，3H)8.10(br.s.，1H)7.55(d，J＝1.77Hz，1H)7.25-7.32(m，4H)7.21(dd，J＝6.19，2.40Hz，1H)6.48(d，J＝2.02Hz，1H)4.35(d，J＝8.59Hz，1H)3.84(s，3H)2.99(d，J＝10.86Hz，1H)2.89-2.96(m，3H)。
實(shí)施例24
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向4-溴-2-噻吩甲酸(1g，4.83mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，16mL)中的溶液中加入K2CO3(2.7g，19mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(279mg，0.241mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(1.2g，6.27mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)2小時(shí)，并加入另外的四(三苯基膦)合Pd(0)(279mg，0.241mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(1.2g，6.27mmol)。12小時(shí)后，將反應(yīng)在6NNaOH和DCM之間分配。將水相的pH使用3M HCl調(diào)節(jié)至～3，并用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用(～1g，定量)LCMS(ES)m/z＝209(M+H)+。
b)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(600mg，2.88mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(384mg，2.88mmo1)于THF(14mL)中的溶液在密封管中在70℃攪拌。1小時(shí)后，將溶液在H2O-DCM之間分配，將水相調(diào)節(jié)至pH 3，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用(698mg，定量)LCMS(ES)m/z＝243(M+H)+。
c)[2-({[4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(350mg，1.45mmol)，(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(362mg，1.45mmol)[來自于制備例2]和二異丙基乙基胺(1.3mL，7.23mmol)于DCM(7mL)中的溶液中一次加入PyBrop(809mg，1.74mmol)。1小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用LCMS(ES)m/z＝476(M+H)+。
d)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[2-({[4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自于部分c的粗產(chǎn)物)在TFA-DCM(3mL，1∶2)中的溶液在25℃攪拌。30分鐘后，濃縮溶液，殘余物通過硅膠填料(4％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將上述游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(90mg，17％-2步)LCMS(ES)m/z 476(M+H)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.75(d，J＝8.08Hz，1H)8.10(d，J＝1.52Hz，2H)8.08(s，3H)7.68(s，1H)7.26-7.32(m，4H)7.22(dd，J＝6.06，2.53Hz，1H)4.39(br.s.，1H)3.87(s，3H)2.91(d，J＝7.33Hz，4H)。
實(shí)施例25
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸(1.3g，5.42mmol)，PyBrOP(3g，6.5mmol)和二異丙基乙基胺(4.7mL，27.1mmol)于DCM(54mL)中的溶液中加入2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(2.0g，5.42mmol)[在制備例6中制備]。1小時(shí)后，將溶液在H2O之間分配，并用DCM洗滌。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，濃縮并直接使用LCMS(ES)m/z＝572(M+H)+。
b){(2S)-2-{[(4-溴-5-氯-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向4-溴-5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(來自于部分a的粗產(chǎn)物)于THF-MeOH(1∶1，20mL)中的溶液加入肼(1.59mL，54.2mmol)。12小時(shí)后，溶液濾出，并將濾液濃縮，干法加載(dry load)至硅膠上，并通過柱色譜(2％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到游離堿，將其溶于THF(25mL)，并用Boc2O(1.2g，5.31mmol)處理。30分鐘后，濃縮溶液，得到為白色粉末的標(biāo)題化合物(800mg，27％-3步)LCMS(ES)m/z＝542(M+H)+。
c){(2S)-2-({[5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向{(2S)-2-{[(4-溴-5-氯-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(750mg，1.38mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，6mL)中的溶液中加入K2CO3(762mg，5.52mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(80mg，69μmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(373mg，1.8mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)2小時(shí)，加入另外的四(三苯基膦)合Pd(0)(80mg，69μmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(373mg，1.8mmol)。12小時(shí)后，將溶液傾倒至H2O(100mL)中，并用DCM萃取。將有機(jī)物干燥(Na2SO4)，真空濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，1∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(194mg，26％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝544。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將{(2S)-2-({[5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(194mg，0.357mmol)溶于TFA-DCM(3mL，1∶2)，并在25℃攪拌。30分鐘后，將溶液使用甲苯共沸來濃縮，殘余物通過硅膠填料(2-5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將上述游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(134mg，85％)LCMS(ES)m/z 444(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.10(d，J＝9.09Hz，1H)8.11(s，1H)8.10(bs，3H)7.70(d，J＝8.08Hz，1H)7.57(d，J＝2.02Hz，2H)7.43(s，1H)6.49(d，J＝2.02Hz，1H)4.47(br.s.，1H)3.85(s，3H)3.06(d，J＝8.34Hz，4H)。
實(shí)施例26
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例24的方法制備，為白色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(288mg，0.826mmol)[來自于制備例6]代替(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LCMS(ES)m/z 444(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(150mg，0.262mmol)于THF-MeOH(1∶1，2mL)中的溶液中加入肼(123μL，2.62mmol)。12小時(shí)后，將溶液濾出，并將濾液濃縮，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(2％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將上述游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(30mg，26％)LCMS(ES)m/z 444(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.69(s，1H)8.11(d，J＝1.26Hz，1H)8.03(d，J＝1.26Hz，1H)7.93(bs，3H)7.69(s，2H)7.53-7.59(m，2H)7.44(d，J＝4.80Hz，1H)4.49(br.s.，1H)3.87(s，3H)2.99-3.12(m，4H)。
實(shí)施例27
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例24的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸(1g，4.52mmol)[來自于制備例9]代替4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，并用NBS(325mg，2.43mmol)代替NCSLCMS(ES)m/z 434(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.65(br.s.，1H)8.01(br.s.，3H)7.80(s，1H)7.70(s，1H)7.25-7.32(m，4H)7.21(td，J＝6.19，2.78Hz，1H)4.31-4.35(m，1H)3.71(s，3H)2.86-2.92(m，4H)2.33(s，3H)。
實(shí)施例28
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例26的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸(1g，4.52mmol)[來自于制備例9]代替4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，并用NBS(325mg，2.43mmol)代替NCSLCMS(ES)m/z 502(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.81(br.s.，1H)8.05(br.s.，3H)7.83-7.90(m，1H)7.67-7.74(m，2H)7.53-7.60(m，2H)7.39-7.47(m，1H)4.48(d，J＝5.05Hz，1H)3.68-3.76(m，3H)3.01-3.08(m，4H)2.33(s，3H)。
實(shí)施例29
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例26的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸(1g，4.52mmol)[來自于制備例9]代替4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸LCMS(ES)m/z 457(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.76(br.s.，1H)8.03(br.s.，3H)7.86(s，1H)7.70(s，2H)7.53-7.60(m，2H)7.39-7.47(m，1H)4.46(d，J＝9.35Hz，1H)3.72(s，3H)3.03-3.10(m，4H)2.34(s，3H)。
實(shí)施例30
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例24的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸(1g，4.52mmol)[來自于制備例9]代替4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸LCMS(ES)m/z 389(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.67(br.s.，1H)8.01(br.s.，3H)7.82(s，1H)7.70(s，1H)7.25-7.32(m，4H)7.19-7.23(m，1H)4.31-4.38(m，1H)3.71(s，3H)2.97(br.s.，2H)2.89(t，J＝6.19Hz，2H)2.34(s，3H)。
實(shí)施例31
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a){(2S)-2-({[5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將{(2S)-2-({[5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(110mg，0.202mmol)[在實(shí)施例25中制備]和N-氯琥珀酰亞胺(35mg，0.263mmol)于THF(2mL)中的溶液在密封管中在70℃攪拌。1小時(shí)后，將溶液在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/z＝578(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將{(2S)-2-({[5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自部分a的粗產(chǎn)物)溶于TFA-DCM(3mL，1∶2)，并在25℃攪拌。30分鐘后，濃縮溶液，殘余物通過硅膠填料(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將上述游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(43mg，44％-2步)LCMS(ES)m/z 478(M+H)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.10(d，J＝8.84Hz，1H)8.06(s，4H)7.75(s，1H)7.70(d，J＝7.83Hz，1H)7.54-7.61(m，2H)7.43(t，J＝7.45Hz，1H)4.47(t，J＝8.84Hz，1H)3.78(s，3H)2.98-3.12(m，4H)。
實(shí)施例32
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的制備 a){(2S)-2-({[4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將{(2S)-2-({[5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(121mg，0.22mmol)[在實(shí)施例25中制備]和N-溴琥珀酰亞胺(52mg，0.290mmol)于THF(2mL)中的溶液在密封管中在70℃攪拌。1小時(shí)后，將溶液在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/z＝622(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將{(2S)-2-({[4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自于部分a的粗產(chǎn)物)溶于TFA-DCM(3mL，1∶2)，并在25℃攪拌。30分鐘后，濃縮溶液，殘余物通過硅膠填料(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將上述游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(42mg，44％-2步)LCMS(ES)m/z 522(M+H)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.13(d，J＝9.09Hz，1H)8.17(br.s.，1H)8.05(s，3H)7.75(s，1H)7.69(d，J＝7.83Hz，1H)7.54-7.61(m，2H)7.43(t，J＝7.58Hz，1H)4.46(d，J＝9.60Hz，1H)3.78(s，3H)2.99-3.13(m，4H)。
實(shí)施例33
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例24制備，為橙色油狀物，除了用N-溴琥珀酰亞胺(1g，5.77mmol)代替N-氯琥珀酰亞胺LCMS(ES)m/z 288(M+H)+。
b)4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(688mg，2.41mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，12mL)中的溶液中加入K2CO3(1.3g，9.6mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(139mg，0.120mmol)，和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(293mg，2.41mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)2小時(shí)，加入另外的四(三苯基膦)合Pd(0)(139mg，0.120mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(293mg，2.41mmol)。12小時(shí)后，將溶液傾倒至H2O中，并使用HCl水溶液將pH調(diào)節(jié)至～4。水相用DCM萃取幾次，將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，其不用進(jìn)一步純化而直接使用LC-MS(ES)m/z＝284(M+H)+。
c)[2-({[4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(341mg，1.2mmol)，(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(300mg，1.2mmol)[來自于制備例2]，二異丙基乙基胺(1mL，6.01mmol)于DCM(6mL)中的溶液中一次加入PyBrop(673mg，1.44mmol)。1小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用LCMS(ES)m/z＝517(M+H)+。
d)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[2-({[4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自于部分c的粗產(chǎn)物)于TFA-DCM(3mL，1∶2)中的溶液在25℃攪拌。30分鐘后，濃縮溶液，殘余物通過硅膠填料(4％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將上述游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(105mg，21％-3步)LCMS(ES)m/z 417(M+H)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.82(d，J＝8.34Hz，1H)8.14(br.s.，3H)7.96(s，1H)7.90(d，J＝1.26Hz，1H)7.82(s，1H)7.29(s，1H)7.25(t，J＝8.46Hz，9H)4.34(dd，J＝7.45，5.68Hz，1H)3.75(s，3H)2.94-3.00(m，2H)2.89(dd，J＝6.82，5.31Hz，2H)。
實(shí)施例34
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例33的方法制備，為白色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(420mg，1.2mmol)[來自于制備例6]代替(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LCMS(ES)m/z 615(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(來自于部分a的粗產(chǎn)物)于THF-MeOH(1∶1，10mL)中的溶液中加入肼(384μL，12mmol)。12小時(shí)后，濾出溶液，并將濾液濃縮，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(2％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
將上述游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(40mg，7％)LCMS(ES)m/z 485(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.78(d，J＝9.09Hz，1H)8.05(br.s.，3H)7.91(dd，J＝9.09，1.26Hz，2H)7.83(s，1H)7.69(d，J＝7.33Hz，1H)7.50-7.53(m，1H)7.43(d，J＝7.58Hz，1H)7.47(t，J＝6.82Hz，1H)7.23-7.30(m，4H)7.22(s，1H)4.47(br.s.，1H)3.75(s，3H)3.01(d，J＝8.08Hz，4H)。
實(shí)施例35
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向5-溴-4-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(1g，4.25mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，20mL)中的溶液中加入K2CO3(2.3g，17mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(108mg，0.213mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(1.2g，5.52mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)2小時(shí)，加入另外的四(三苯基膦)合Pd(0)(279mg，0.241mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(1.2g，6.27mmol)。12小時(shí)后，將反應(yīng)在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/z＝237(M+H)+。
b)4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(來自于部分a的粗產(chǎn)物)于THF(4mL)和6N NaOH(4mL)中的溶液加熱至70℃。1小時(shí)后，將溶液傾倒至H2O中，并使用HCl水溶液將pH調(diào)節(jié)至～4。水相用DCM萃取幾次，將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，為白色固體，其不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/z＝223(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例27的方法制備，為白色固體，除了用4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(424mg，1.92mmol)代替4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸LCMS(ES)m/z 457(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.84(d，J＝8.84Hz，1H)8.05(br.s.，3H)7.84(s，1H)7.74(s，1H)7.71(d，J＝8.08Hz，1H)7.56-7.63(m，2H)7.44(t，J＝7.20Hz，1H)4.47-4.54(m，1H)3.70(s，3H)2.93-3.12(m，4H)2.10(s，3H)。
實(shí)施例36
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向5-溴-4-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(1g，4.25mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，20mL)中的溶液中加入K2CO3(2.3g，17mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(108mg，0.213mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(1.2g，5.52mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)2小時(shí)，加入另外的四(三苯基膦)合Pd(0)(279mg，0.24mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(1.2g，6.27mmol)。12小時(shí)后，將反應(yīng)在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/z＝237(M+H)+。
b)4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(來自于部分a的粗產(chǎn)物)于THF(4mL)和6N NaOH(4mL)中的溶液加熱至70℃。1小時(shí)后，將溶液傾倒至H2O中，并使用HCl水溶液將pH調(diào)節(jié)至～4。水相用DCM萃取幾次，將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，其不用進(jìn)一步純化而直接使用LCMS(ES)m/z＝223(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例26的方法制備，為白色固體，除了用4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(424mg，1.92mmol)代替4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用N-溴琥珀酰亞胺(376mg，2.11mmol)代替N-氯琥珀酰亞胺LCMS(ES)m/z 502(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.84(d，J＝9.09Hz，1H)8.05(br.s.，3H)7.83(s，1H)7.67-7.74(m，2H)7.60(q，J＝7.83Hz，2H)7.40-7.47(m，1H)4.50(d，J＝4.04Hz，1H)3.71(s，3H)2.98-3.12(m，4H)2.09(s，3H)。
實(shí)施例37
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-2-噻吩甲酸甲酯
在25℃，向4-溴-2-噻吩甲酸(4g，19mmol)于MeOH(100mL)中的溶液中滴加H2SO4(5mL)。將溶液在50℃攪拌12小時(shí)，傾倒至冰-H2O中，并使用NaOH水溶液將pH調(diào)節(jié)至～11。水相用DCM萃取幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用(4.27g，定量)LCMS(ES)m/z 222(M+H)+。
b)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-2-噻吩甲酸甲酯(1g，4.52mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，16mL)中的溶液中加入K2CO3(2.7g，19mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(116mg，0.226mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(1.2g，5.88mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃。1小時(shí)后，將反應(yīng)在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM萃取幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用LCMS(ES)m/z 223(M+H)+。
c)4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(330mg，1.49mmol)和

(793mg，2.23mmol)于THF(7mL)和H2O(500μL)中的溶液在密封管中在70℃攪拌。1小時(shí)后，加入另外的selectfluor(793mg，2.23mmol)，并將該溶液再攪拌12小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(126mg，33％)，為白色固體LCMS(ES)m/z＝241(M+H)+。
d)4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(126mg，0.53mmol)于THF(1mL)和6N NaOH(1mL)中的溶液加熱至70℃。1小時(shí)后，將溶液傾倒至H2O中，并使用HCl水溶液將pH調(diào)節(jié)至～4。水相用DCM萃取幾次，將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，其不用進(jìn)一步純化而直接使用LCMS(ES)m/z＝227(M+H)+。
e)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(84mg，0.372mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(130mg，0.372mmol)[來自于制備例6]，二異丙基乙基胺(323μL，1.86mmol)于DCM(4mL)中的溶液中一次加入PyBrop(208mg，0.446mmol)。1小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，0.5％MeOH-DCM)純化，得到標(biāo)題化合物(135mg，65％)，為白色固體LCMS(ES)m/z＝557(M+H)+。
f)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(135mg，0.242mmol)于THF-MeOH(1∶1，2mL)中的溶液中加入肼(75μL，2.42mmol)。12小時(shí)后，濾出溶液，并將濾液濃縮，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。標(biāo)題化合物使用5-95％梯度的流動相，通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化，得到標(biāo)題化合物的TFA-鹽，其通過硅膠填料((5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，然后使用過量4M HCl的二噁烷溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽(40mg，26％)LCMS(ES)m/z 427(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.88(d，J＝8.84Hz，1H)8.13(s，1H)8.06(bs，3H)7.70(d，J＝7.83Hz，1H)7.55-7.62(m，3H)7.54(br.s.，1H)7.41(d，J＝2.53Hz，1H)4.49(d，J＝5.05Hz，1H)3.92(s，3H)2.99-3.11(m，4H)。
實(shí)施例38
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例37的方法制備，為黃色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(1g，4.26mmol)[來自于制備例11]代替4-溴-2-噻吩甲酸甲酯LCMS(ES)m/z 441(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.78(d，J＝9.60Hz，1H)8.03(br s，3H)7.91(s，1H)7.69(d，J＝7.83Hz，1H)7.62(d，J＝4.55Hz，1H)7.52-7.59(m，2H)7.39-7.46(m，1H)4.47(br.s.，1H)3.74(s，3H)3.06(br.s.，4H)2.36(s，3H)。
實(shí)施例39
N-[1-(氨基甲基)-3-苯基丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為黃色固體，除了用(2-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.44g，1.7mmol)[來自于制備例4]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z＝435(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.92-2.22(m，2H)2.71-2.82(m，2H)3.02-3.11(m，1H)3.12-3.24(m，1H)3.88(s，3H)4.30(s，1H)6.59(d，J＝1.77Hz，1H)7.17(t，J＝7.07Hz，1H)7.22-7.29(m，4H)7.67(d，J＝1.77Hz，1H)7.85(s，1H)。
實(shí)施例40
N-[1-(氨基甲基)-3-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為黃色固體，除了用5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(223mg，1.07mmol)代替4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用(2-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.51g，1.9mmol)[來自于制備例4]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 355(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm1.87-1.99(m，2H)2.69-2.91(m，4H)4.00-4.07(m，3H)4.08-4.16(m，1H)6.56(d，J＝2.02Hz，1H)7.15(t，J＝6.95Hz，1H)7.20-7.28(m，4H)7.35(d，J＝3.79Hz，1H)7.51(d，J＝1.77Hz，1H)7.79(d，J＝3.79Hz，1H)。
實(shí)施例41
4-溴-N-[3-(甲基氨基)-1-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為黃色固體，除了用(3-氨基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(289mg，1.09mmol)[來自于制備例12]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z435(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.12-2.23(m，2H)2.45-2.52(m，3H)2.64-2.74(m，1H)2.76(dd，J＝8.72，5.94Hz，1H)3.77-3.88(m，3H)5.10-5.20(m，1H)6.52(d，J＝2.02Hz，1H)7.30(d，J＝6.82Hz，1H)7.35-7.45(m，4H)7.57(d，J＝1.77Hz，1H)7.89(s，1H)。
實(shí)施例42
N-[3-(甲基氨基)-1-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為黃色固體，除了用(3-氨基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(430mg，1.63mmol)[來自于制備例12]代替(2-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，以及用5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(224mg，1.08mmol)代替4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z 355(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.18-2.28(m，2H)2.55(s，3H)2.77-2.85(m，1H)2.87(dd，J＝8.84，5.81Hz，1H)4.01(s，3H)5.19(dd，J＝8.59，6.57Hz，1H)6.55(d，J＝2.02Hz，1H)7.31(d，J＝7.07Hz，1H)7.34-7.41(m，3H)7.44-7.47(m，2H)7.50(d，J＝2.02Hz，1H)7.85(d，J＝4.04Hz，1H)。
實(shí)施例43
4-溴-N-[2-(甲基氨基)-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為黃色固體，除了用(2-氨基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.26g，1.09mmol)[來自于制備例12]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z435(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.60(s，3H)2.90-3.01(m，2H)3.06(d，J＝6.57Hz，2H)3.83(s，3H)4.48-4.58(m，1H)6.52(d，J＝1.77Hz，1H)7.17-7.27(m，1H)7.27-7.33(m，4H)7.57(d，J＝2.02Hz，1H)7.77(s，1H)。
實(shí)施例44
N-((1S)-2-氨基-1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6制備，為黃色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[4-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(0.22g，0.62mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物，其通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化(5-95％H2O(1％TFA)/MeCN(1％TFA))，得到TFA鹽LC-MS(ES)m/z 489(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 3.04-3.30(m，4H)3.81-3.85(m，3H)4.59(dd，J＝6.32，3.28Hz，1H)6.52(d，J＝2.02Hz，1H)7.50(d，J＝8.08Hz，2H)7.58(d，J＝2.02Hz，1H)7.64(d，J＝8.08Hz，2H)7.73(s，1H)。
實(shí)施例45
N-[1-(氨基甲基)-2-甲基-2-苯基丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(194mg，0.68mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-(2-氨基-3-甲基-3-苯基丁基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(0.20g，0.58mmol)[根據(jù)制備例16制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物，其通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化(5-95％H2O(1％TFA)/MeCN(1％TFA))，得到TFA鹽LC-MS(ES)m/z 448(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 1.40(s，3H)1.47(s，3H)2.85-2.92(m，1H)3.01(d，J＝11.37Hz，1H)3.83-3.86(m，3H)4.74(dd，J＝11.37，2.27Hz，1H)6.54(d，J＝2.02Hz，1H)7.28(t，J＝7.33Hz，1H)7.41(t，J＝7.71Hz，3H)7.52(d，J＝7.58Hz，2H)7.59(d，J＝2.02Hz，1H)7.89(s，1H)。
實(shí)施例46
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(135mg，0.47mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(153mg，0.44mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物，其通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化(5-95％H2O(1％TFA)/MeCN(1％TFA))，得到TFA鹽LC-MS(ES)m/z 491(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 3.03(dd，J＝13.89，9.35Hz，1H)3.14-3.21(m，1H)3.21-3.29(m，2H)3.84(s，3H)4.62-4.70(m，1H)6.53(d，J＝2.02Hz，1H)7.28-7.32(m，1H)7.33-7.37(m，1H)7.51(d，J＝2.02Hz，1H)7.58(d，J＝2.02Hz，1H)7.73-7.76(m，1H)。
實(shí)施例47
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例30的步驟制備，為淺黃色固體，除了用4，5-二溴-2-噻吩甲酸(2.84g，9.9mmol)代替4-溴-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z 457(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.95-3.07(m，4H)3.75(s，3H)4.44(dd，J＝6.44，4.93Hz，1H)7.18-7.24(m，1H)7.27-7.32(m，4H)7.59(s，1H)7.86(s，1H)。
實(shí)施例48
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺的制備 a)4，5-二溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸
在0℃，經(jīng)15分鐘，將NBS(6.3g，35.4mmo1)分批加至攪拌的1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸(2.1g，16.78mmol)于DMF(30mL)中的溶液中。添加結(jié)束后，混合物緩慢地升至70℃。1小時(shí)后，將溶液在H2O-CHCl3之間分配，將水相調(diào)節(jié)至pH 3，且水相用CHCl3洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，并真空濃縮，得到5-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸和4，5-二溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸的3∶4混合物(3.4g)，其不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/z＝206/286(M+H)+。
b)(2-{[(4，5-二溴-1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向5-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸和4，5-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸(1.3g)，(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.2g，4.8mmol)[來自于制備例2]和PyBrop(2.6g，5.6mmol)于CHCl3(30mL)中的溶液中加入二異丙基乙基胺(2.8mL，16.1mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜，吸附至硅膠上，并通過柱色譜[1∶3 EtOAc/己烷]純化，得到(2-{[(5-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯和(2-{[(4，5-二溴-1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的1∶1混合物(800mg)LCMS(ES)m/z＝438/518(M+H)+。
c)[2-({[4-溴-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向(2-{[(5-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯和(2-{[(4，5-二溴-1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的1∶1混合物(307mg)于二噁烷/H2O(5∶1，5.6mL)中的溶液中加入Cs2CO3(800mg，2.5mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(44mg，0.04mmol)和1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(157mg，0.75mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)2小時(shí)，其后加入另外的四(三苯基膦)合Pd(0)(20mg，0.02mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(177mg，0.85mmol)。12小時(shí)后，反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜純化，得到兩種異構(gòu)體標(biāo)題化合物[2-({[4-溴-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(17mg，0.033mmol)和[2-({[1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(20mg，0.05mmol)。
d)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺 將溶于CHCl3(4mL)和MeOH(1mL)中的[3-{[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]氨基}-3-氧代-2-(苯基甲基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.045g，0.09mmol)用4M HCl的二噁烷溶液(2mL)處理。在室溫?cái)嚢?8小時(shí)后，反應(yīng)溶液吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
將上述中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液(150μL)處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽LC-MS(ES)m/z 418(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.76-2.98(m，4H)3.57(d，J＝2.78Hz，3H)3.71(d，J＝1.26Hz，3H)4.28(ddd，J＝8.27，5.12，2.78Hz，1H)6.44(dd，J＝7.58，2.02Hz，1H)6.85(s，1H)7.18-7.24(m，1H)7.27-7.32(m，4H)7.61(d，J＝2.02Hz，1H)。
實(shí)施例49
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺的制備 將于CHCl3(4mL)和MeOH(1mL)中的[2-({[1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(20mg，0.05mmol)[在實(shí)施例48中制備]用4M HCl的二噁烷溶液(2mL)處理。在室溫?cái)嚢?8小時(shí)后，反應(yīng)溶液吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物。
將上述化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液(150μL)處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽LC-MS(ES)m/z 338(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 2.74-2.81(m，1H)2.83-2.90(m，2H)2.92-2.98(m，1H)3.63(s，3H)3.76(s，3H)4.29(ddd，J＝8.02，5.12，2.53Hz，1H)6.27(d，J＝4.04Hz，1H)6.39(d，J＝2.02Hz，1H)6.80(d，J＝4.04Hz，1H)7.20(td，J＝5.87，2.65Hz，1H)7.26-7.31(m，4H)7.57(d，J＝2.02Hz，1H)。
實(shí)施例50
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-1-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺的制備 a)(2-{[(4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(15mL)中的4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸(610mg，3.0mmol)，(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(748mg，2.99mmol)[根據(jù)制備例2的方法制備]和PyBrop(1.71g，3.67mmo1)。加入DIEA(1.8mL，10.3mmo1)，并將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(Hex/EtOAc)純化，得到標(biāo)題化合物(335mg，26％)LC-MS(ES)m/z＝438(M+H)+。
b)[2-({[1-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向(2-{[(4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(313mg，0.717mmol)于二噁烷/H2O(4∶1，6.25mL)中的溶液中加入Cs2CO3(840mg，2.6mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(62mg，0.05mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(202mg，1.04mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)12小時(shí)，然后在H2O和CHCl3之間分配。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(35％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(285mg，91％)LC-MS(ES)m/z＝438(M+H)+。
c)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-1-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺 將HCl的二噁烷溶液(4M，2mL)加至[2-({[1-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(285mg，0.65mmol)于CHCl3/MeOH(10∶1，10mL)中的溶液中，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(71mg，0.21mmol，32％)LC-MS(ES)m/z 338(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.77-2.93(m，4H)3.86(s，3H)3.92(s，3H)4.29(ddd，J＝8.15，4.74，2.02Hz，1H)6.30(d，J＝2.02Hz，1H)6.94(d，J＝1.77Hz，1H)7.14(d，J＝1.77Hz，1H)7.19(td，J＝5.56，3.03Hz，1H)7.25-7.30(m，4H)7.41(d，J＝1.77Hz，1H)。
實(shí)施例51
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(232mg，1.11mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物，其通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化(5-95％H2O(1％TFA)/MeCN(1％TFA))，得到TFA鹽LC-MS(ES)m/z 409(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.09-3.30(m，4H)3.97-4.00(m，3H)4.62-4.72(m，1H)6.48(d，J＝2.02Hz，1H)7.43(ddd，J＝8.08，4.42，4.17Hz，1H)7.51-7.56(m，3H)7.72(d，J＝7.83Hz，1H)7.89-7.93(m，2H)。
實(shí)施例52
N-[2-(甲基氨基)-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為黃色固體，除了用(2-氨基-3-苯基丙基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.32g，1.2mmol)[來自于制備例13]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，以及用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(220mg，1.06mmol)代替4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z 355(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.41(s，3H)2.81(td，J＝11.81，7.96Hz，2H)2.87-2.97(m，2H)3.96(s，3H)4.43-4.52(m，1H)6.45(d，J＝1.52Hz，1H)7.16-7.23(m，1H)7.25-7.30(m，4H)7.50(d，J＝1.52Hz，1H)7.85(d，J＝13.14Hz，2H)。
實(shí)施例53
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-N-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用2-[2-(甲基氨基)-3-苯基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.7mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl，以及用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(150mg，0.72mmol)代替4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜純化(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))，得到標(biāo)題化合物，其通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化(5-95％H2O(1％TFA)/MeCN(1％TFA))，得到TFA鹽LC-MS(ES)m/z 355(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 2.86(s，3H)2.97(dd，J＝14.02，8.72Hz，2H)3.12-3.23(m，2H)3.70(m，1H)3.97(s，3H)6.47(d，J＝2.02Hz，1H)7.30-7.35(m，1H)7.37-7.43(m，5H)7.51(d，J＝2.02Hz，1H)7.88(d，J＝1.52Hz，1H)7.94(d，J＝1.52Hz，1H)。
實(shí)施例54
N-[1-(氨基甲基)-2-甲基-2-苯基丙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(129mg，0.62mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-(2-氨基-3-甲基-3-苯基丁基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(0.20g，0.58mmol)[根據(jù)制備例14的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 369(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.36(s，3H)1.41(s，3H)2.61(d，J＝6.82Hz，2H)3.99(s，3H)4.49(t，J＝6.95Hz，1H)6.49(d，J＝1.77Hz，1H)7.23(t，J＝7.33Hz，1H)7.36(t，J＝7.71Hz，2H)7.47-7.52(m，3H)7.89(d，J＝1.26Hz，1H)8.00(d，J＝1.52Hz，1H))。
實(shí)施例55
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(99mg，0.48mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(155mg，0.44mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物，其通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化(5-95％H2O(1％TFA)/MeCN(1％TFA))，得到TFA鹽LC-MS(ES)m/z 411(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.05-3.28(m，4H)3.97(s，3H)4.63-4.72(m，1H)6.47(d，J＝2.02Hz，1H)7.26-7.29(m，1H)7.34-7.37(m，1H)7.49(d，J＝2.27Hz，1H)7.51(d，J＝2.02Hz，1H)7.86(d，J＝1.52Hz，1H)7.90(d，J＝1.52Hz，1H)。
實(shí)施例56
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(15mL)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(206mg，0.93mmol)[根據(jù)制備例9的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(209mg，0.60mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]和PyBrop(340mg，0.73mmol)。加入DIEA(0.81mL，4.65mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。結(jié)束后，將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-75％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(112mg，0.203mmol，22％)LC-MS(ES)m/z＝553(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(6mL)和甲醇(1mL)中的N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(112mg，0.203mmol)。加入肼(40μL，1.3mmol)，并將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。結(jié)束后，將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1 CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將上述中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(43mg，0.102mmol，50％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z 423(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.38(s，3H)3.01(m，1H)3.08(d，J＝6.57Hz，3H)3.76-3.83(m，3H)4.47(m，1H)6.37(d，J＝2.02Hz，1H)7.41(t，J＝7.58Hz，1H)7.50-7.57(m，2H)7.57-7.63(m，1H)7.68(d，J＝7.58Hz，1H)8.04(d，J＝9.09Hz，1H)8.15(s，3H)8.96(s，1H)。
實(shí)施例57
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(222mg，1.07mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(357mg，1.2mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 359(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.96-3.06(m，4H)3.92-3.98(m，3H)4.40(dd，J＝8.08，5.56Hz，1H)6.48(d，J＝1.77Hz，1H)7.02(td，J＝8.46，2.02Hz，1H)7.14(t，J＝8.08Hz，2H)7.26-7.35(m，1H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.99(d，J＝1.26Hz，1H)8.16-8.27(m，3H)8.34(d，J＝1.26Hz，1H)9.08(d，J＝8.34Hz，1H)。
實(shí)施例58
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(138mg，0.66mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(196mg，0.66mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物，其通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化(5-95％H2O(1％TFA)/MeCN(1％TFA))，得到TFA鹽LC-MS(ES)m/z 359(M+H)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.80-3.03(m，4H)3.89-3.97(m，3H)4.30-4.40(m，1H)6.45(d，J＝1.77Hz，1H)7.12(t，J＝8.84Hz，2H)7.29(dd，J＝8.34，5.56Hz，2H)7.48(d，J＝1.77Hz，1H)7.92(br.s，3H)7.96(d，J＝1.26Hz，1H)8.02(d，J＝1.26Hz，1H)8.58(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例59
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(189mg，0.91mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(297mg，0.85mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 409(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.06(d，J＝7.07Hz，4H)3.91-3.98(m，3H)4.35-4.45(m，1H)6.46(d，J＝1.77Hz，1H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.49-7.57(m，2H)7.58-7.63(m，1H)7.69(s，1H)7.98(d，J＝1.52Hz，1H)8.23(s，3H)8.32(d，J＝1.26Hz，1H)9.11(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例60
N-((1S)-2-氨基-1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(240mg，0.9mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[4-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(278mg，0.80mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 409(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.04(m，4H)3.96(s，3H)4.42(s，1H)6.44-6.49(m，1H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.52(d，J＝7.83Hz，2H)7.66(d，J＝8.08Hz，2H)8.01(s，1H)8.05-8.32(br.m，3H)8.34(m，1H)8.9-9.2(br.s，1H)。
實(shí)施例61
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[2-({[5-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向[3-苯基-2-({[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(154mg，0.32mmol)[根據(jù)實(shí)施例3的方法制備]于二噁烷/H2O(5∶1，3.1mL)中的溶液中加入Cs2CO3(415mg，1.27mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(29mg，0.03mmol)，和5-碘-1-甲基-1H-1，2，4-三唑(95mg，0.46mmol)[根據(jù)制備例15的方法制備]。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至85℃，持續(xù)12小時(shí)。將反應(yīng)在H2O和CHCl3之間分配，有機(jī)層用Na2SO4干燥，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(35-50％EtOAc/己烷)純化，得到為黃色固體的標(biāo)題化合物(61mg，28％)LC-MS(ES)m/z＝521。
b)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將HCl的二噁烷溶液(4M，1mL)加至[2-({[5-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(61mg，0.12mmol)于CHCl3/MeOH(10∶1，10mL)中的溶液中，并將混合物攪拌過夜。結(jié)束后，混合物吸附至硅膠上，并通過色譜(90∶10∶1 CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到為白色固體的標(biāo)題化合物的HCl鹽(30mg，0.09mmol，77％)LC-MS(ES)m/z 341(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.79-2.91(m，3H)2.94(t，J＝5.56Hz，1H)4.10(s，3H)4.25-4.34(m，1H)7.18(ddd，J＝8.27，5.75，3.16Hz，1H)7.24-7.29(m，4H)7.63(d，J＝4.04Hz，1H)7.75(d，J＝4.04Hz，1H)7.95(s，1H)。
實(shí)施例62
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[2-({[5-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向[2-苯基-2-({[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(72mg，0.15mmol)[根據(jù)實(shí)施例3的方法制備]于二噁烷/H2O(5∶1，1.4mL)中的溶液中加入Cs2CO3(200mg，0.61mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(8.5mg，0.01mmol)，和5-溴-1-甲基-1H-咪唑(64mg，0.40mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至85℃，持續(xù)12小時(shí)。結(jié)束后，將反應(yīng)混合物在H2O(25mL)和CHCl3之間分配。將有機(jī)物干燥(Na2SO4)，真空濃縮，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(35-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(19.6mg，31％)，為黃色固體LC-MS(ES)m/z＝441。
b)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將HCl的二噁烷溶液(4M，1mL)加至[2-({[5-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(19.6mg，0.04mmol)于CHCl3/MeOH(10∶1，5mL)中的溶液中。反應(yīng)結(jié)束后，將混合物吸附至硅膠上，并通過色譜(90∶10∶1 CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將上述中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到為白色固體的標(biāo)題化合物的HCl鹽(19mg，0.05mmol，定量)LC-MS(ES)m/z 341(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.77-2.83(m，1H)2.85-2.91(m，2H)2.93-2.99(m，1H)3.82(s，3H)4.30(ddd，J＝8.08，4.80，1.77Hz，1H)7.15-7.31(m，7H)7.69(d，J＝4.04Hz，1H)7.76(s，1H)。
實(shí)施例63
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-3，4-二溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用3，4-二溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(253mg，0.69mmol)代替5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物，其通過Gilson反相色譜進(jìn)一步純化(5-95％H2O(1％TFA)/MeCN(1％TFA))，得到TFA鹽LC-MS(ES)m/z 569(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.14-3.30(m，4H)3.82(s，3H)4.73(dd，J＝9.47，4.67Hz，1H)6.54(d，J＝2.02Hz，1H)7.44-7.50(m，1H)7.56-7.62(m，3H)7.74(d，J＝7.83Hz，1H)。
實(shí)施例64
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為黃色固體，除了用4，5-二溴-2-噻吩甲酸(143mg，0.50mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z 488(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.15(s，2H)3.23(s，2H)3.84(s，3H)4.65(s，1H)6.52-6.57(m，1H)7.46(s，1H)7.52-7.61(m，3H)7.72(s，1H)7.81(s，1H)。
實(shí)施例65
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氯苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4，5-二溴-2-噻吩甲酸(143mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(2-氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(157mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 455(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.11(s，1H)3.22(s，1H)3.27(s，2H)3.85(s，3H)4.70(s，1H)6.57(s，1H)7.26(s，2H)7.41(s，2H)7.66(s，1H)7.88(s，1H)。
實(shí)施例66
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為淺黃色固體，除了用4，5-二溴-2-噻吩甲酸(143mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(2-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(149mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 438(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.00(s，1H)3.09(s，1H)3.15(dd，J＝3.41，1.64Hz，2H)3.83(s，4H)4.58(s，1H)6.52(d，J＝2.02Hz，1H)7.08-7.17(m，3H)7.27-7.37(m，3H)7.59(d，J＝2.02Hz，1H)7.74(d，J＝3.54Hz，1H)。
實(shí)施例67
N-[(1S)-2-氨基-1-(1H-吲哚-3-基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為黃色固體，除了用4，5-二溴-2-噻吩甲酸(143mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(160mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 459(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.15(dt，J＝10.42，6.79Hz，3H)3.27(dd，J＝4.04，2.27Hz，1H)3.84(s，3H)4.63(d，J＝6.82Hz，1H)6.54(d，J＝2.02Hz，1H)7.05(t，J＝7.45Hz，1H)7.13(t，J＝7.07Hz，1H)7.19(s，1H)7.37(d，J＝8.08Hz，1H)7.64-7.73(m，2H)7.77(s，1H)。
實(shí)施例68
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的步驟制備，為黃色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(104mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(2-氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(157mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例6制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 375(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.11-3.20(m，1H)3.22-3.31(m，3H)4.23(s，3H)4.75(s，1H)6.96(s，1H)7.18-7.26(m，2H)7.38(d，J＝6.06Hz，1H)7.46(d，J＝4.55Hz，1H)8.22(s，2H)8.32(s，1H)。
實(shí)施例69
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為黃色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(104mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(2-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(149mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 359(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.06-3.17(m，2H)3.25-3.31(m，2H)4.18(s，3H)4.59-4.67(m，1H)6.88(s，1H)7.05-7.12(m，2H)7.23-7.30(m，1H)7.36-7.42(m，1H)8.12(d，J＝1.01Hz，1H)8.17(s，1H)8.21(s，1H)。
實(shí)施例70
N-[2-氨基-1-(1-萘基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為白色固體，除了用[2-氨基-2-(1-萘基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(143mg，0.5mmol)[來自于制備例16]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 456(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.60(s，1H)3.72(s，1H)3.84(s，3H)6.33(d，J＝10.11Hz，1H)6.55(s，1H)7.55-7.61(m，3H)7.64(d，J＝8.34Hz，1H)7.74(s，1H)7.92-7.99(m，2H)8.09(s，1H)8.26(s，1H)。
實(shí)施例71
N-[2-氨基-1-(1-萘基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(104mg，0.5mmol)代替4，5-二溴-2-噻吩甲酸，以及用[2-氨基-2-(1-萘基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(143mg，0.5mmol)[來自于制備例16]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 377(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.62(d，J＝4.04Hz，1H)3.67-3.78(m，1H)4.08-4.10(m，3H)6.35(s，1H)6.73(d，J＝2.27Hz，1H)7.55-7.60(m，2H)7.62-7.67(m，1H)7.76(d，J＝7.33Hz，1H)7.88(d，J＝2.53Hz，1H)7.93-7.99(m，2H)8.10(d，J＝1.52Hz，1H)8.23-8.27(m，2H)。
實(shí)施例72
N-{2-氨基-1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(104mg，0.5mmol)代替4，5-二溴-2-噻吩甲酸，以及用{2-氨基-2-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(152mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 395(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.36-3.39(m，1H)3.46-3.53(m，1H)3.98(s，3H)5.86-5.91(m，1H)6.48(s，1H)7.51(d，J＝2.02Hz，1H)7.60(s，1H)7.76(s，1H)7.83(d，J＝8.08Hz，2H)7.94(s，1H)8.05(s，1H)。
實(shí)施例73
N-{2-氨基-1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為白色固體，除了用{2-氨基-2-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(152mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 474(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.37(s，1H)3.65(s，1H)3.89-4.00(m，3H)5.88(s，1H)6.76(d，J＝2.27Hz，1H)7.58(s，1H)7.77(d，J＝9.60Hz，2H)7.91-8.03(m，2H)8.26(d，J＝2.27Hz，1H)。
實(shí)施例74
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例24的方法制備，為黃色固體，除了用NBS(194mg，1.09mmol)代替NCSLC-MS(ES)m/z 418(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.03(d，J＝7.33Hz，2H)3.23(s，2H)3.90(s，3H)4.56(d，J＝1.77Hz，1H)7.20-7.27(m，1H)7.28-7.34(m，4H)7.58(s，1H)7.96(s，2H)。
實(shí)施例75
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例25的方法制備，為黃色固體，除了用NBS(67mg，0.5mmol)代替NCSLC-MS(ES)m/z 488(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.10-3.19(m，1H)3.20-3.28(m，3H)3.91(s，3H)4.66(dd，J＝8.59，3.03Hz，1H)7.39-7.47(m，1H)7.51-7.58(m，2H)7.59(s，1H)7.72(d，J＝8.08Hz，1H)7.98(s，2H)。
實(shí)施例76
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為淺黃色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(104mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(158mg，0.5mmo1)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 395(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO)δppm 2.94-3.06(m，4H)3.95(s，3H)4.40(d，J＝6.06Hz，1H)6.46(d，J＝1.77Hz，1H)7.00-7.10(m，3H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.99(d，J＝1.26Hz，1H)8.10(s，2H)8.21(s，1H)8.92(d，J＝8.0Hz，1H)。
實(shí)施例77
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為灰白色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(104mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(157mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 395(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO)δppm 2.92-3.04(m，4H)3.92-3.98(m，3H)4.36(d，J＝5.56Hz，1H)6.47(s，1H)7.19-7.29(m，2H)7.29-7.35(m，1H)7.37-7.42(m，1H)7.47(s，1H)8.17(s，3H)8.85-9.07(m，1H)。
實(shí)施例78
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為灰白色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(104mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(157mg，0.5mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z 395(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO)δppm 2.92-2.97(m，2H)2.99-3.04(m，2H)4.01(s，3H)4.32-4.42(m，1H)6.43-6.50(m，1H)7.27-7.37(m，4H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.99(d，J＝1.26Hz，1H)8.21(s，3H)8.94-9.10(m，1H)。
實(shí)施例79
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為白色固體，除了用4，5-二溴-2-呋喃甲酸(135mg，0.5mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸LC-MS(ES)m/z 472(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO)δppm 3.11(d，J＝9.85Hz，1H)3.21-3.31(m，3H)4.06(s，3H)4.70(s，1H)6.87(d，J＝2.02Hz，1H)7.33(s，1H)7.41-7.48(m，1H)7.50-7.57(m，2H)7.60(d，J＝2.02Hz，1H)7.71(d，J＝7.83Hz，1H)。
實(shí)施例80
N-(3-氨基-1-苯基丙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為白色固體，除了用[3-(甲基氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(125mg，0.5mmoles)[來自于制備例3]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z420(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO)δppm 2.25-2.37(m，2H)2.96(d，J＝8.08Hz，1H)3.04-3.13(m，1H)3.84(s，3H)5.22(t，J＝7.58Hz，1H)6.53(d，J＝1.52Hz，1H)7.35(d，J＝6.57Hz，1H)7.44(dt，J＝15.09，7.48Hz，4H)7.58。
實(shí)施例81 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備
a)1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑
在室溫，向NaH(60％，于礦物油中，2.2g，55mmol)于THF(50mL)中的懸浮液中加入于THF(10mL)中的吡唑(3.4g，50mmol)。30分鐘后，向上述懸浮液中滴加EtI(7.75g，50mmol)。反應(yīng)結(jié)束(20小時(shí))后，將該懸浮液過濾，得到的溶液不用進(jìn)一步純化直接使用。
在0℃，向上述4-甲基吡唑(～50mmol)的溶液中加入n-BuLi(2.5M的己烷溶液，22mL，55mmol)。將反應(yīng)溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后冷卻至-78℃[J.Heterocyclic Chem.41，931(2004)]。向該反應(yīng)溶液中加入2-異丙氧基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷(10.2g，55mmol)。在-78℃下15分鐘后，將反應(yīng)經(jīng)1小時(shí)溫?zé)嶂?℃。反應(yīng)用飽和NH4Cl溶液稀釋，并用DCM萃取。將有機(jī)物用Na2SO4干燥，真空濃縮，得到棕黃色固體(9.8g，89％)，其不用進(jìn)一步純化而使用。LCMS(ES)m/z 141(M+H)+對于[RB(OH)2]；1HNMR(CDCl3，400MHz)δppm 7.52(d，J＝2Hz，1H)，6.36(d，J＝2Hz，1H)，4.48(q，J＝7.2Hz，2H)，1.44(t，J＝7.2Hz，3H)，1.36(s，12H)。
b)[2-({[5-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向(2-{[(5-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(100mg，0.23mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，6mL)中的溶液中加入K2CO3(100mg，0.72mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(30mg，26μmol)和1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(64mg，0.29mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至70℃。12小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(hex/EtOAc，40-60％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.074g，71％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z 455(M+H)+。
c)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將[2-({[5-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(74mg，0.16mmol)溶于DCM(2mL)，并用TFA(1mL)處理。1小時(shí)后，濃縮溶液，并通過硅膠使用4％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH)中和。標(biāo)題化合物進(jìn)一步使用反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，40-10％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽(47mg，50％)，為白色固體LCMS(ES)m/z 355(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.71(d，J＝3.8Hz，1H)，7.55(d，J＝2.0Hz，1H)，7.34-7.22(m，6H)，6.51(d.J＝1.8Hz，1H)，4.55(m，1H)，4.34(q，J＝7.1Hz，2H)，3.22(dd，J＝3.5，13.1Hz，1H)，3.13(dd，J＝10.1，13.1Hz，1H)，3.00(m，2H)，和1.42(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例82 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3，4-二溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1的方法制備，為黃色固體，除了用(3-苯基-2-{[(3，4，5-三溴-2-噻吩基)羰基]氨基}丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(120mg，0.20mmol)代替[2-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 499(M+H)+，1HNMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.59(d，J＝2.0Hz，1H)，7.37-7.24(m，5H)，6.53(d，J＝2.0Hz，1H)，4.62(m，1H)，3.27(d，J＝13.1，4.3Hz，1H)，3.21(dd，J＝13.1，9.4Hz，1H)，3.09(dd，J＝14.2，6.1Hz，1H)，3.02(dd，J＝13.9，9.1Hz，1H)，和1.96(s，3H)。
實(shí)施例83 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1的方法制備，為黃色固體，除了用1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(64.0mg，0.23mmol)[來自于制備例17]代替[2-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，以及用(2-{[(5-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(110mg，0.25mmol)代替(2-{[(5-溴-3-噻吩基)羰基]氨基}-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 355(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.75(d，J＝3.8Hz，1H)，7.40(br s，1H)，7.32-7.23(m，5H)，7.21(d，J＝3.8Hz，1H)，4.56(m，1H)，3.86(s，3H)，3.23(dd，J＝13.1，3.8Hz，1H)，3.15(dd，J＝12.9，10.1Hz，1H)，3.01(m，2H)和2.10(s，3H)。
實(shí)施例84 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1的方法制備，為黃色固體，除了用1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(77mg，0.23mmol)[來自于制備例17]代替1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑，以及用(2-{[(4，5-二溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(150mg，0.29mmol)代替[2-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 434(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.77(s，1H)，7.43(s，1H)，7.35-7.23(m，5H)，4.55(m，1H)，3.72(s，3H)，3.23(dd，J＝3.5Hz，1H)，3.13(dd，J＝10.6，13.1Hz，1H)，3.02-2.95(m，2H)，和1.99(s，3H)。
實(shí)施例85 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例1的方法制備，為黃色固體，除了用1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(220mg，1.0mmol)[來自于制備例17]代替1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑，以及用(2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(150mg，0.34mmol)代替[2-({[4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z＝355(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 8.14-8.13(m，3H)，7.35-7.20(m，5H)，4.58(m，1H)，4.07(s，3H)，3.36-3.22(m，2H)，3.12-3.01(m，2H)，和2.21(s，3H)。
實(shí)施例86 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-N-羥基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a){2-[[(4-溴-2-噻吩基)羰基](羥基)氨基]-3-苯基丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向4-溴-2-噻吩甲酸(1.0g，4.83mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入PyBrop(3.4g，7.24mmol)和Hunig堿(2mL，12.6mmol)。15分鐘后，將[2-(羥基氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(641mg，2.41mmol)加至于DCM(2mL)中的反應(yīng)混合物中，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，得到粗產(chǎn)物[2-([(4-溴-2-噻吩基)羰基]{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氧基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LC-MS(ES)m/z＝645(M+H)+。
向[2-([(4-溴-2-噻吩基)羰基]{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氧基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯于MeOH(5mL)中的溶液中加入K2CO3(1.0g，7.3mmol)。將該混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/己烷，30％)純化，得到標(biāo)題化合物(410mg，37％，2步)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z＝456(M+H)+。
b)[2-(羥基{[4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向{2-[[(4-溴-2-噻吩基)羰基](羥基)氨基]-3-苯基丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(100mg，0.22mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，6mL)中的溶液中加入K2CO3(91mg，0.66mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(23mg，0.022mmol)和1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(68mg，0.33mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至75℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，20-40％)純化，得到標(biāo)題化合物(87mg，87％)。LC-MS(ES)m/z＝456(M+H)+。
c)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-N-羥基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將[2-(羥基{[4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(84mg，0.19mmol)溶于DCM(2mL)，并用TFA(1mL)處理。將反應(yīng)攪拌1小時(shí)，并濃縮，通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，40-10％)純化，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽(51.2mg，64.8％)。LC-MS(ES)m/z 357(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 8.03(s，1H)，7.94(d，J＝1.8Hz，1H)，7.52(d，J＝1.8Hz，1H)，6.46(d，J＝1.8Hz，1H)，7.34-7.18(m，5H)，5.16(m，1H)，3.95(s，3H)，3.38(dd，J＝13.1，10.6Hz，1H)，3.17-3.11(m，2H)，和2.95(dd，J＝13.6，6.6Hz，1H)。
實(shí)施例87 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-溴-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-溴-2-噻吩甲酸(80mg，0.39mmol)于DCM(2mL)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(bromo-tris-pyrrolidinophosphoniumhexafluorophosphate，PyBrOP)(218mg，0.47mmol)，接著添加DIPEA(0.2mL，1.14mmol)。攪拌10分鐘后，將二胺2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(165mg，0.43mmol)加至上述溶液中。2小時(shí)后，將溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，10％MeOH的CH3C1溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(206mg，99％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 538(M+H)+。
b)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向4-溴-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(200mg，0.37mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，6mL)中的溶液中加入K2CO3(0.17g，1.23mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(42mg，0.036mmol)和1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(413mg，1.86mmol)[來自于制備例17]。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)2小時(shí)。將反應(yīng)溶液真空濃縮，并在硅膠上(10-50％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(192mg，94％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 553(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(110mg，0.198mmol)溶于MeOH(2mL)，并用NH2NH2(0.5mL，15.93mmol)處理。反應(yīng)攪拌10小時(shí)，濃縮，且將于DCM(2mL)中的殘余物用TFA(1.0mL)處理。攪拌2小時(shí)后，除去溶劑，殘余物通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，40-10％)純化，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽通過硅膠填料(90∶9∶1 CHCl3/MeOH/NH4OH)中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。然后將該游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物(62mg，34.6％)，為HCl鹽LC-MS(ES)m/z 423(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 8.27(s，1H)，8.22(s，1H)，8.18(s，1H)，7.70(d，7.8Hz，1H)，7.64(d，J＝7.6Hz，1H)，7.51(dd，J＝7.3，7.3Hz，1H)，7.41(dd，J＝7.6，7.3Hz，1H)，4.69(m，1H)，4.12(s，3H)，3.41-3.19(m，4H)，和2.24(s，3H)。
實(shí)施例88 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例87的方法制備，為白色固體，除了用1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(104mg，0.47mmol)代替1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑。LC-MS(ES)m/z＝423(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm8.35-8.31(m，2H)，8.21(br s，1H)，7.70(d，J＝7.8Hz，1H)，7.64(d，J＝7.3Hz，1H)，7.51(dd，J＝7.3，7.3Hz，1H)，7.42(dd J＝7.6，7.3Hz，1H)，7.00(m，1H)，4.70-4.61(m，3H)，3.40-3.17(m，4H)，和1.57(t，J＝6.8Hz，3H)。
實(shí)施例89 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-4-甲基-2-噻吩甲酸
向4-溴-2-噻吩甲酸(2.07g，10mmol)于DMF(5mL)中的溶液中一次加入NCS(2.7g，15mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃攪拌10小時(shí)，然后冷卻至室溫。加入水(5mL)后，所需的產(chǎn)物沉淀。將白色固體濾出并在高真空下干燥，得到1.9g(79％)。LC-MS(ES)m/z＝242(M+H)+， b)(2-{[(4-溴-5-氯-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向5-氯-4-甲基-2-噻吩甲酸(242mg，1.0mmol)和二異丙基乙基胺(2.5mL，14.60mmol)于DCM(50mL)中的溶液中一次加入PyBrOP(2.5g，5.30mmol)。30分鐘后，一次加入(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(250mg，1.0mmol)。2小時(shí)后，將溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，10-40％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(460mg，97％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝474(M+H)+。
c)[2-({[5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向(2-{[(4-溴-5-氯-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(100mg，0.21mmol)于THF(5mL)中的溶液中加入Na2CO3(2N，0.3mL，0.6mmol)，Pd(dppf)Cl2(20mg，24μmol)和1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(92mg，0.42mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中在N2下加熱至80℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(hex/EtOAc，20-50％)純化，得到標(biāo)題化合物(74mg，72％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z 489(M+H)+。
d)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將[2-({[5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(61mg，0.12mmol)溶于DCM(2mL)，并用TFA(1mL)處理。0.5小時(shí)后，濃縮溶液，并通過硅膠使用4％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH)中和。標(biāo)題化合物進(jìn)一步使用反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，40-10％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽(41mg，53％)，為白色固體。LC-MS(ES)m/z＝389(M+H)+。1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.61(d，J＝2.0Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.33-7.21(m，5H)，6.41(d，J＝2.0Hz，1H)，4.52(m，1H)，4.10(q，J＝7.1Hz，2H)，3.22(dd，J＝12.9，3.5Hz，1H)，3.12(dd，J＝12.6，10.1Hz，1H)，2.98(m，2H)，和1.35(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例90 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例89(c)的方法制備，為灰白色固體，除了用4-溴-5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(150mg，0.26mmol)代替(2-{[(4-溴-5-氯-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 587(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(110mg，0.19mmol)于MeOH/THF(5mL/0.5mL)中的溶液中加入肼(0.5mL，15.9mmol)。在室溫?cái)嚢柽^夜后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，40-10％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水，并通過氫氧化銨中和。混合物用DCM(5mL x 3)萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿，將其溶于MeOH(2mL)，并用HCl(aq，37％)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液濃縮，得到標(biāo)題化合物(26mg，26％)，為二-HCl鹽LC-MS(ES)m/z＝457(M+H)+。1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 8.28(d，J＝2.5Hz，1H)，8.07(s，1H)，7.70(d，J＝7.6Hz，1H)，7.62(d，J＝7.6Hz，1H)，7.53(dd，J＝7.3，7.6Hz，1H)，7.43(dd，J＝7.6，7.6Hz，1H)，6.90(d，J＝2.5Hz，1H)，4.66(m，1H)，4.43(q，J＝7.3Hz，2H)，3.37-3.16(m，4H)，和1.50(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例91 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向4-溴-5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(260mg，0.46mmol)于THF(5mL)中的溶液中加入Na2CO3(2N，0.7mL，1.4mmol)，Pd(dppf)Cl2(40mg，48μmol)和1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(303mg，1.38mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中在N2下加熱至75℃。8小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(10∶1 CHCl3/MeOH)純化，得到標(biāo)題化合物(196mg，73.4％)LC-MS(ES)m/z＝587(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(196mg，0.34mmol)于MeOH/THF(2mL/0.5mL)中的溶液中加入肼(0.5mL，15.9mmol)。在室溫?cái)嚢柽^夜后，將反應(yīng)混合物濃縮，并在硅膠上(50％MeOH于CHCl3中(含0.5％NH4OH)純化，得到標(biāo)題化合物的游離堿，將其溶于MeOH(2mL)，并用HCl(37％水溶液)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液濃縮，得到標(biāo)題化合物(107mg，51％)，為二-HCl鹽LC-MS(ES)m/z＝457(M+H)+。1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.96(s，1H)，7.90(m，1H)，7.70(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(d，J＝7.6Hz，1H)，7.53(t，J＝7.3Hz，1H)，7.43(t，J＝7.3Hz，1H)，4.66(m，1H)，3.91(s，3H)，3.33-3.14(m，4H)，和2.10(s，3H)。
實(shí)施例92 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-2-噻吩甲酸甲酯(1.0g，4.52mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，6mL)中的溶液中加入K2CO3(1.86g，13.5mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(260mg，0.23mmol)和1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.3g，5.85mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至70℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(hex/EtOAc，20-40％)純化，得到4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(0.7g，66％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z＝237(M+H)+。
向上述化合物(0.5g，2.11mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入NCS(0.364g，2.74mmol)。將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀录訜嶂?0℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，10-20％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.45g，78％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z 271(M+H)+。
(b)4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(0.3g，1.1mmol)于THF/H2O(5mL/0.5mL)中的溶液中加入KOH(0.2g，3.4mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)，然后濃縮，并用H2O(2mL)稀釋。使用HCl水溶液將pH調(diào)節(jié)至3。混合物用DCM(3x 5mL)萃取，將合并的有機(jī)級分真空濃縮，得到粗產(chǎn)物4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(260mg)，不用進(jìn)一步純化直接使用。LC-MS(ES)m/z＝256(M+H)+。
在25℃，向4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(0.26g，1.0mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(0.35g，1.1mmol)和DIPEA(0.5mL，2.86mmol)于DCM(5mL)中的溶液中一次加入PyBrOP(0.6g，1.2mmol)。2小時(shí)后，將溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.54g，91％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝588(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(350mg，0.60mmol)溶于MeOH(5mL)，并用NH2NH2(0.5mL，15.93mmol)處理。將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，并濃縮。殘余物通過柱色譜(硅膠，2-5％MeOH的CHCl3溶液(含0.5％NH4OH))純化，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其用于MeOH中的HCl(水溶液)處理，得到標(biāo)題化合物(0.16g，51％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z＝457(M+H)+。1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.97-7.94(m，2H)，7.71(d，J＝7.8Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.56-7.51(m，2H)，7.43(dd，J＝7.6，7.6Hz，1H)，4.67(m，1H)，4.22(q，J＝7.1Hz，2H)，3.36-3.12(m，4H)，和1.38(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例93 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(0.45g，1.9mmol)[參見實(shí)施例92(a)]于THF(5mL)中的溶液中加入NBS(0.33g，2.5mmol)。將該反應(yīng)混合物在氮?dú)庀录訜嶂?0℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/己烷，10-30％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.47g，78％)。LC-MS(ES)m/z＝316(M+H)+。
b)4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(0.2g，0.63mmol)于THF/H2O(5mL/1mL)中的溶液中加入KOH(0.15g，2.4mmol)。將該反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)10小時(shí)，然后濃縮，并用H2O(2mL)稀釋。使用HCl水溶液將pH調(diào)節(jié)至6?；旌衔镉肈CM(3x 5mL)萃取，將合并的有機(jī)級分真空濃縮，得到粗產(chǎn)物4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，其不用進(jìn)一步純化直接使用。LC-MS(ES)m/z＝302(M+H)+。
在25℃，向4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(156mg，0.52mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(0.18g，0.52mmol)和DIPEA(0.5mL，2.86mmol)于DCM(5mL)中的溶液中一次加入PyBrOP(0.29g，0.62mmol)。2小時(shí)后，將溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-60％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.281g，86％)。LC-MS(ES)m/z＝632(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(250mg，0.39mmol)溶于MeOH(5mL)，并用NH2NH2(0.5mL，15.93mmol)處理。將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，并濃縮。殘余物通過柱色譜[硅膠，2-10％MeOH的CHCl3溶液(含0.5％NH4OH)]純化，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其用于MeOH中的HCl(水溶液)處理，得到標(biāo)題化合物(144mg，51％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 502(M+H)+。1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.93-7.87(m，2H)，7.72(d，J＝8.1Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.57-7.51(m，2H)，7.43(t，J＝6.6Hz，1H)，4.67(m，1H)，4.25(q，J＝7.3Hz，2H)，3.37-3.11(m，4H)，和1.37(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例94
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)3-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-3-(甲氧基)-2-噻吩甲酸甲酯(250mg，0.10mmol)[根據(jù)Corral，C.；El-Ashmawy，M.B.；Lissavetzky，J.；Basilio，A.；Giraldez，A.；Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.22；1987；251-254.制備]，5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(250mg，1.20mmol)，Pd(PPh3)4(58mg，49.8μmol)和K2CO3(550mg，3.98mmol)于二噁烷(5mL)和H2O(1mL)中在密封管中混合。在80℃下12小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，0.5％MeOH的DCM溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(215mg，86％)，為棕色殘余物L(fēng)CMS(ES)m/z＝253(M+H)+。
b)[2-({[3-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
i)將3-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(215mg，0.853mmol)于6N NaOH(4mL)和THF(4mL)中的溶液在密封管中在70℃攪拌。2小時(shí)后，溶液使用1N HCl酸化至pH 3，然后用DCM萃取幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用LCMS(ES)m/z＝239(M+H)+。
i)向粗產(chǎn)物酸，(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(210mg，0.844mmol)[來自于制備例2]和二異丙基乙基胺(735μL，4.22mmol)于DCM(8mL)中的溶液中一次加入PyBrop(472mg，1.01mmol)。1小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用LCMS(ES)m/z＝471(M+H)+。
c)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將2-({[3-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自于部分b的粗產(chǎn)物)于TFA-DCM(3mL，1∶2)中的溶液在25℃攪拌。30分鐘后，將溶液使用甲苯共沸濃縮，殘余物通過硅膠填料(3％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，得到標(biāo)題化合物的游離堿。
然后將上述游離堿的MeOH溶液用過量4M HCl的二噁烷溶液處理，得到標(biāo)題化合物(270mg，86％-2步)，為HCl鹽LCMS(ES)m/z 371(M+H)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.06(br.s.，3H)7.91(s，1H)7.72(d，J＝8.59Hz，1H)7.52(d，J＝1.77Hz，1H)7.25-7.31(m，4H)7.18-7.23(m，1H)6.39(d，J＝2.02Hz，1H)4.52(br.s.，1H)3.78(s，3H)3.41(s，3H)2.97-3.05(m，4H)。
實(shí)施例95
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-2-噻吩甲酸甲酯
向5-氯-2-噻吩甲酸(20g，123mmoles)于MeOH(200mL)中的溶液中加入濃H2SO4(5mL)。加熱至55℃，持續(xù)12小時(shí)后，將反應(yīng)溶液濃縮，并用DCM(250mL)稀釋。將該DCM溶液用NaHCO3水溶液，然后用H2O洗滌，并用Na2SO4干燥。真空下濃縮，得到為黃色油狀物的標(biāo)題化合物(21.5g，99％)LCMS(ES)m/z 178(M+H)+。
b)4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯
向1L圓底燒瓶中加入溶于CHCl3(250mL)中的氯化鋁(11.32g，85mmol)和5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(10g，56.6mmol)。經(jīng)10分鐘，滴加Br2(4.08ml，79mmol)。在25℃攪拌6小時(shí)后，該亮橙色反應(yīng)溶液用飽和NaHCO3洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上[己烷/EtOAc，9∶1]純化，得到產(chǎn)物[12g，80％]，為白色固體。LCMS(ES)m/z 256(M+H)+。
c)5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向300mL密封燒瓶中加入于1，4-二噁烷(50ml)和H2O(6ml)中的1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二-氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(8.14g，39.1mmol)，碳酸鉀(12.98g，94mmol)，4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(8g，31.3mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.40g，0.78mmol)。在75℃攪拌90分鐘后，反應(yīng)溶液用DCM(100mL)稀釋，并用H2O洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。反應(yīng)殘余物在硅膠上[己烷/EtOAc，2∶1]純化，得到產(chǎn)物[5.7g，70％]，為棕黃色固體LCMS(ES)m/z 258(M+H)+。
d)5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向250mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(50ml)和MeOH(50mL)中的5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(4.4g，17.14mmol)和氫氧化鈉(28.6ml，171mmol)。將反應(yīng)溶液在室溫?cái)嚢?2小時(shí)，然后使用2.5MHCl調(diào)節(jié)為酸性(pH～2)，并用DCM萃取。分離有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，并濃縮至灰白色固體(4.2g，94％)，其不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/z243(M+H)+。
e)5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向500mL圓底燒瓶中加入于二氯甲烷(DCM)(150ml)中的5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(4.2g，17.31mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟表基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(6.37g，19.04mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]，N，N-二異丙基乙基胺(4.53ml，26.0mmol)和Pybrop(12.05g，26.0mmol)。在室溫?cái)嚢?2小時(shí)后，反應(yīng)溶液用H2O(2x 100mL)洗滌，有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。將粗產(chǎn)物加至硅膠柱上，并用[EtOAc/己烷，1∶1]洗脫，得到產(chǎn)物[7.8g，86％]，為白色固體LCMS(ES)m/z 524(M+H)+。
f)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向250mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(75ml)和甲醇(75mL)中的5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(7.8g，14.91mmol)和肼(14.50ml，298mmol)。在室溫24小時(shí)后，將沉淀濾出，濾液濃縮。粗產(chǎn)物在硅膠柱上[CHCl3/MeOH/NH4OH，90∶9∶1]純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
游離堿產(chǎn)物用4M HCl的二噁烷溶液(15mL)處理。5分鐘后，濃縮溶液，并在真空下干燥，得到產(chǎn)物(6.8g，95％)，為HCl鹽LCMS(ES)m/z 467(M+H)+，1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 7.97(s，2H)，7.31(s，1H)，7.14(m，2H)，6.98(m，1H)，6.75(s，1H)，4.54(m，1H)，3.98(s，3H)，3.24(m，2H)，3.04(m，2H)。
實(shí)施例96
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向500mL燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(100ml)(50mL)中的5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(5g，19.48mmol)[來自于實(shí)施例95]和NCS(3.12g，23.37mmol)。在70℃攪拌4小時(shí)后，該黃色反應(yīng)溶液用6MNaOH(32mL，195mmole)處理，并再攪拌2小時(shí)。反應(yīng)溶液用H2O(50mL)和DCM(200mL)稀釋。分離有機(jī)層，并使用6N HCl將水層調(diào)節(jié)為酸性。將該酸性水溶液用DCM(3x 200mL)萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到粗產(chǎn)物[2.6g，48％]，為棕黃色固體LCMS(ES)m/z 277(M+H)+。
b)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向500mL圓底燒瓶中加入于二氯甲烷(DCM)(150ml)中的5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(6g，21.65mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(7.25g，21.65mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]，N，N-二異丙基乙基胺(5.67ml，32.5mmol)和Pybrop(15.08g，32.5mmol)。在室溫?cái)嚢?2小時(shí)后，反應(yīng)溶液用H2O(2x 100mL)洗滌，有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。將粗產(chǎn)物加至硅膠柱上，并用[EtOAc/己烷，1∶1]洗脫，得到產(chǎn)物[9.0g，74％]，為白色固體LCMS(ES)m/z 558(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向250mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(75ml)和甲醇(75mL)中的5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(9g，16.15mmol)和肼(15.69ml，323mmol)。在室溫24小時(shí)后，將沉淀濾出，濃縮濾液，且將粗產(chǎn)物在硅膠柱上[CHCl3/MeOH/NH4OH，90∶9∶1]純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
游離堿產(chǎn)物用4M HCl的二噁烷溶液(15mL)處理。5分鐘后，將產(chǎn)物溶液濃縮，并在真空下干燥，得到產(chǎn)物(6.5g，91％)，為HCl鹽LCMS(ES)m/z428(M+H)+，1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 7.75(s，1H)，7.60(s，1H)，7.32(m，1H)7.14(m，2H)，6.98(m，1H)，4.54(m，1H)，3.78(s，3H)，3.24(m，2H)，3.02(m，2H)。
實(shí)施例97
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(250mg，0.974mmol)[根據(jù)實(shí)施例95中的方法制備]于乙腈(4.864ml)和H2O(486μl)中的溶液中加入selectfluor(449mg，1.27mmol)。將得到的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)，其后一次加入另外的selectfluor(449mg，1.266mmol)。攪拌12小時(shí)后，將溶液在H2O-DCM之間分配。水相用DCM-THF洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，10％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(65mg，0.237mmol，24.30％產(chǎn)率)，為黃色固體；LCMS(ES)m/z 274，276(M，M+H)。
b)5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(65mg，0.237mmol)于6N氫氧化鈉(0.39ml，2.37mmol)和四氫呋喃(2ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。將水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(54mg，0.17mmol，72％產(chǎn)率)，為黃色油狀物；LCMS(ES)m/e 261，263(M，M+2)+。
c)5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(53mg，0.203mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(78mg，0.203mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(0.18ml，1.02mmol)于DCM中的溶液一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(95mg，0.203mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，40％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(106mg，0.129mmol，63.5％產(chǎn)率)，為透明油狀物；LCMS(ES)m/e 591，593(M，M+H)+。
d)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(106mg，0.179mmol)于四氫呋喃(1.095ml)和甲醇(1.095ml)中的溶液中滴加肼(0.056ml，1.79mmol)。48小時(shí)后，濃縮溶液，干法裝柱(硅膠，5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))，起初通過柱色譜純化。然后將殘余物使用2％-95％的流動相，進(jìn)一步通過gilson反相色譜純化，得到標(biāo)題化合物的TFA鹽。該化合物通過硅膠填料(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))中和，濃縮，并通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(500μL)加入于MeOH(2ml)中的殘余物中，轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(17mg，0.029mmol，16.16％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/z＝461，463(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.11(s，1H)8.11(s，1H)7.71(br.s.，3H)7.66-7.70(m，2H)7.54-7.61(m，2H)7.41-7.44(m，1H)4.47(br.s.，1H)3.79(s，3H)3.07-3.16(m，4H)。
實(shí)施例98
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-5-乙基-2-噻吩甲酸(1g，4.25mmol)于甲醇(21.27ml)中的溶液中加入硫酸(0.23mL，4.25mmol)。將得到的溶液在50℃攪拌48小時(shí)。加入H2O(50mL)，并將反應(yīng)在冰浴中冷卻至0℃。將pH調(diào)節(jié)至～12，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到4-溴-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(1.060g，4.25mmol，100％產(chǎn)率)，不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/e 248，250(M，M+2)+。
b)5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，1.204mmol)的溶液，碳酸鉀(832mg，6.02mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(326mg，1.565mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(30.8mg，0.060mmol)在密封管中混合，并在80℃攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(301mg，1.204mmol，100％產(chǎn)率)，為棕色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e251(M+H)+。
c)5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，1.198mmol)于6N氫氧化鈉(2.397ml，1.198mmol)和四氫呋喃(5.992ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(283mg，1.2mmol，100％產(chǎn)率)，為黃色油狀物；LCMS(ES)m/z＝236(M+H)+。
d)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(283mg，1.2mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(461mg，1.2mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(1.043ml，5.99mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(615mg，1.317mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(486mg，0.86mmol，71.6％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 567(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(486mg，0.86mmol)于四氫呋喃(2.144ml)和甲醇(2.14ml)中的溶液中滴加肼(0.269ml，8.58mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法裝柱，并通過柱色譜(硅膠，5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。然后通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(500μL)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(250mg，0.491mmol，57.2％產(chǎn)率)-2HCl，為白色固體LCMS(ES)m/z＝437(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.84(d，J＝8.84Hz，1H)8.08(br.s.，3H)7.93(s，1H)7.69(d，J＝7.83Hz，1H)7.51-7.61(m，3H)7.39-7.46(m，1H)6.34(d，J＝2.02Hz，1H)4.48(br.s.，1H)3.77(s，3H)2.99-3.11(m，4H)2.74(q，J＝7.49Hz，2H)1.16(t，J＝7.45Hz，3H)。
實(shí)施例99
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(2g，8.51mmol)[在制備例10中制備]，碳酸鉀(5.88g，42.5mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.124g，10.21mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.217g，0.425mmol)于1，4-二噁烷(35.4ml)和H2O(7.09ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，25％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯。該反應(yīng)分批進(jìn)行(1g，3x 2g)，將其合并用于處理和純化，得到標(biāo)題化合物(5.5g，78％合并產(chǎn)率)，為粘稠狀黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e236(M+H)+。
b)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(580mg，2.45mmol)和N-溴琥珀酰亞胺(437mg，2.45mmol)于四氫呋喃(12.300ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。然后將溶液在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，然后通過柱色譜(硅膠，20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(600mg，1.90mmol，78％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 314，316(M，M+H)+。
c)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(420mg，1.33mmol)，碳酸鉀(921mg，6.66mmol)，PdCl2(dPPf)(98mg，0.13mmol)和三甲基環(huán)三硼氧烷(0.371ml，2.67mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(6.663ml)中的溶液在110℃在密封管中攪拌2小時(shí)。該反應(yīng)分兩批進(jìn)行(100mg和420mg)，將其合并，并在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(240mg，58％)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 251(M+H)+。
d)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸
將4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(240mg，0.96mmol)于6N氫氧化鈉(3.20ml，19.18mmol)和四氫呋喃(4.79ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(217mg，0.92mmol，96％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 236(M+H)+。
e)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(217mg，0.918mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(353mg，0.92mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(0.800ml，4.59mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(472mg，1.01mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(373mg，0.66mmol，71.7％產(chǎn)率)，為黃色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 567(M+H)+。
f)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(373mg，0.66mmol)于四氫呋喃(1.65ml)和甲醇(1.65ml)中的溶液中滴加肼(0.21ml，6.58mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加入至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(253mg，0.497mmol，75％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝437(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.80(d，J＝8.59Hz，1H)8.09(br.s.，3H)7.82(s，1H)7.69(d，J＝7.83Hz，1H)7.58(t，J＝8.08Hz，1H)7.43(t，J＝7.33Hz，1H)7.38(s，1H)4.47(br.s.，1H)3.64(s，3H)2.99-3.07(m，4H)2.27(s，3H)1.89(s，3H)。
實(shí)施例100
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸
將5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，1.2mmol)[在實(shí)施例98中制備]和N-氯琥珀酰亞胺(160mg，1.2mmol)于四氫呋喃(6ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。一次加入6N氫氧化鈉(1ml，5.99mmol)，將溶液再攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，然后通過柱色譜(硅膠，20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸(325mg，1.20mmol，100％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 271，273(M，M+2)+。
b)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸(200mg，0.74mmol)，N，N-二異丙基乙基胺(0.64ml，3.69mmol)和2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(284mg，0.74mmol)[根據(jù)制備例6制備]于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(414mg，0.886mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，50％ EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺(316mg，0.526mmol，71％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 601，603(M，M+2)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺(316mg，0.53mmol)于四氫呋喃(1.314ml)和甲醇(1.3ml)中的溶液中滴加肼(0.16ml，5.26mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，通過柱色譜(硅膠，5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，并通過將過量2M HCl的Et2O溶液(2ml)加入于MeOH(5ml)中的殘余物中，轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(163mg，0.30mmol，57％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/z＝471，473(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.82(br.s.，1H)8.04(bs，3H)7.85(s，1H)7.65-7.72(m，2H)7.52-7.59(m，2H)7.39-7.46(m，1H)4.41-4.47(m，1H)3.71(s，3H)2.98-3.07(m，4H)2.67(q，J＝7.58Hz，2H)1.16(t，J＝7.58Hz，3H)。
實(shí)施例101
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸
將5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，1.2mmol)[在實(shí)施例98中制備]和N-溴琥珀酰亞胺(213mg，1.2mmol)于四氫呋喃(5.99ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。一次加入氫氧化鈉水溶液(4.0ml，23.97mmol)，溶液再攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，然后通過柱色譜(硅膠，20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸(378mg，1.2mmol，100％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 314，316(M，M+2)+。
b)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸(200mg，0.57mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(181mg，0.57mmol)[根據(jù)制備例6制備]和N，N-二異丙基乙基胺(0.50ml，2.87mmol)于二氯甲烷(4.23ml)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(295mg，0.632mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺(240mg，0.37mmol，64.8％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 645，647(M，M+2)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺(240mg，0.37mmol)于四氫呋喃(1.31ml)和甲醇(1.31ml)中的溶液中滴加肼(0.12ml，3.72mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，通過柱色譜(硅膠，5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化，并通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(2ml)加入于MeOH(5ml)中的殘余物中，轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(167mg，0.28mmol，76％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/z＝515，517(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.77(dd，J＝15.66，9.09Hz，1H)8.02(br.s.，3H)7.80(s，1H)7.66-7.72(m，2H)7.54-7.61(m，2H)7.41-7.48(m，1H)4.42-4.47(m，1H)3.71(s，3H)2.98-3.06(m，4H)2.66(dd，J＝7.45，3.16Hz，2H)1.15(t，J＝7.45Hz，3H)。
實(shí)施例102
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2.75g，11.64mmol)[在實(shí)施例99中制備]和N-氯琥珀酰亞胺(1.55g，11.64mmol)于四氫呋喃(58ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。一次加入氫氧化鈉(9.70ml，58mmol)，將溶液再攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，然后通過柱色譜(硅膠，20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(2.3g，8.96mmol，77％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 257，259(M，M+2)+。
b)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(159mg，0.62mmol)，N，N-二異丙基乙基胺(0.54ml，3.10mmol)和2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.62mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用3-環(huán)己基-N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-L-丙氨酸(5g，18.4mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(347mg，0.74mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜純化(硅膠，45％EtOAc的己烷溶液)，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(231mg，0.44mmol，71％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 525，527(M，M+2)+。
c)N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(231mg，0.44mmol)于四氫呋喃(2.20ml)和甲醇(2.20ml)中的溶液中滴加肼(0.14ml，4.40mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。然后通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(124mg，0.27mmol，60％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝394，396(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.51(br.s.，1H)7.97(br.s.，3H)7.86(s，1H)7.70(s，1H)4.24-4.26(m，1H)3.71(s，3H)2.90-2.99(m，2H)2.36(s，3H)1.75-1.79(m，1H)1.611.64(m，4H)1.48-1.51(m，1H)1.31-1.36(m，2H)1.10-1.14(m，2H)0.91-0.94(m，2H)。
實(shí)施例103
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(250mg，1.06mmol)[在實(shí)施例99中制備]于6N氫氧化鈉(1.76ml，10.6mmol)和四氫呋喃(5.290ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，并在H2O-DCM之間分配。將水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(151mg，0.68mmol，64％產(chǎn)率)，為白色固體；LCMS(ES)m/z＝223(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(138mg，0.62mmol)，N，N-二異丙基乙基胺(0.541ml，3.10mmol)和2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.62mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用3-環(huán)己基-N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-L-丙氨酸(5g，18.4mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(347mg，0.74mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(285mg，0.581mmol，94％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 491，493(M，M+2)+。
c)N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(285mg，0.581mmol)于四氫呋喃(2.905ml)和甲醇(2.91ml)中的溶液中滴加肼(0.18ml，5.81mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。然后通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(173mg，0.40mmol，69％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝360(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.55(d，J＝8.59Hz，1H)8.01(br.s.，3)7.94(s，1H)7.52(d，J＝2.02Hz，1H)6.35(d，J＝1.77Hz，1H)4.24-4.27(m，1H)3.77(s，3H)2.91-2.94(m，2H)2.39(s，3H)1.72-1.77(m，1H)1.60-1.64(m，4H)1.49-1.52(m，1H)1.21-1.29(m，2H)1.15-1.25(m，2H)0.89-0.94(m，2H)。
實(shí)施例104
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(150mg，0.62mmol)[在實(shí)施例95中制備]，N，N-二異丙基乙基胺(0.54ml，3.10mmol)和2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.62mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用3-環(huán)己基-N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-L-丙氨酸(5g，18.4mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(347mg，0.74mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，45％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-氯-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(168mg，0.33mmol，53％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 511，513(M，M+2)+。
b)N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(168mg，0.33mmol)于四氫呋喃(1.644ml)和甲醇(1.644ml)中的溶液中滴加肼(0.10ml，3.29mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。然后通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1mL)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(79mg，0.17mmol，53％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝380，382(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d ppm 8.82(d，J＝8.59Hz，1H)8.10(s，1H)7.99(br.s.，3H)7.55(d，J＝1.77Hz，1H)6.48(d，J＝2.02Hz，1H)4.22-4.28(m，1H)3.81(s，3H)2.90-2.95(m，2H)1.74-1.78(m，1H)1.62-1.65(m，4H)1.48-1.51(m，1H)1.37-1.39(m，2H)1.09-1.13(m，2H)0.92-0.96(m，2H)。
實(shí)施例105
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(250mg，1.058mmol)[在實(shí)施例99中制備]和N-溴琥珀酰亞胺(188mg，1.06mmol)于四氫呋喃(5.29ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。一次加入氫氧化鈉(3.53ml，21.16mmol)，并將溶液再攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(289mg，0.96mmol，91％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 301，303(M，M+2)+。
b)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(187mg，0.62mmol)，N，N-二異丙基乙基胺(0.54ml，3.10mmol)和2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.62mmol))[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用3-環(huán)己基-N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-L-丙氨酸(5g，18.4mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]于DCM中的溶液一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(347mg，0.74mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(226mg，0.40mmol，64％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 569，571(M，M+2)+。
c)N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(226mg，0.40mmol)于四氫呋喃(1.98ml)和甲醇(1.98ml)中的溶液中滴加肼(0.13ml，3.97mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜純化。然后通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(153mg，0.30mmol，75％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝439，441(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.51(br.s.，1H)7.96(br.s.，3H)7.83(br.s.，1H)7.70(s，1H)4.21-4.25(m，1H)3.94(s，3H)2.89-2.92(m，2H)2.35(s，3H)1.76-1.79(m，1H)1.60-1.64(m，4H)1.48-1.54(m，1H)1.26-1.32(m，2H)1.09-1.16(m，2H)0.92-0.95(m，1H)0.82-0.86(m，1H)。
實(shí)施例106
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(216mg，0.78mmol)[根據(jù)實(shí)施例96制備]，N，N-二異丙基乙基胺(0.68ml，3.90mmol)和2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(252mg，0.78mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用3-環(huán)己基-N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-L-丙氨酸(5g，18.4mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(401mg，0.86mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，40％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(303mg，0.55mmol，71％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 545，547(M，M+2)+。
b)N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(303mg，0.55mmol)于四氫呋喃(2.78ml)和甲醇(2.78ml)中的溶液中滴加肼(0.17ml，5.55mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。然后通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(190mg，0.389mmol，70.0％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝415，417(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.84(br.s.，1H)8.06(s，4H)7.74(s，1H)4.25(dd，J＝8.84，4.29Hz，1H)3.77(s，3H)2.87-2.93(m，2H)1.71-1.79(m，1H)1.64(d，J＝9.85Hz，3H)1.54(br.s.，1H)1.48(br.s.，1H)1.37(dd，J＝13.26，4.93Hz，1H)1.14(br.s.，1H)1.17(d，J＝7.33Hz，2H)0.93(d，J＝10.86Hz，1H)0.82-0.89(m，1H)。
實(shí)施例107
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸
將5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(50mg，0.21mmol)[在實(shí)施例95中制備]和NBS(36.7mg，0.21mmol)于四氫呋喃(2.06ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸(82mg，0.16mmol，79％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 257，259(M，M+2)+。
b)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸(81mg，0.252mmol)，N，N-二異丙基乙基胺(0.22ml，1.26mmol)和2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(81mg，0.25mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(141mg，0.302mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，40％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(47mg，0.080mmol，31.6％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 589，591(M，M+2)+。
c)N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(48mg，0.08mmol)于四氫呋喃(0.41ml)和甲醇(0.41ml)中的溶液中滴加肼(0.03ml，0.81mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。然后通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(11mg，0.02mmol，24％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝459，461(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.73(br.s.，1H)7.96(br.s.，4H)7.74(s，1H)4.21-4.26(m，1H)3.77(s，3H)2.92-2.99(m，2H)1.73-1.79(m，1H)1.62-1.67(m，4H)1.49-1.51(m，1H)1.25(br.s.，2H)1.06-1.13(m，2H)0.95(d，J＝6.82Hz，1H)0.82-0.89(m，1H)。
實(shí)施例108
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯
向4，5-二溴-2-呋喃甲酸(5.7g，21.1mmol)于甲醇(106ml)中的溶液中加入硫酸(11.3ml，211mmol)。將得到的溶液在50℃攪拌4天。將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯(5.5g，19.4mmol，92％產(chǎn)率)，不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/e 283(M+H)+。
b)4-溴-2-呋喃甲酸甲酯
在-40℃，向4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯(1g，3.52mmol)于四氫呋喃(14.1ml)中的溶液中加入異丙基氯化鎂(1.85ml，3.70mmol)。2小時(shí)后，加入H2O(3.52ml)，并將溶液溫?zé)嶂?5℃。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(3％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(470mg，2.04mmol，58％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/e 204，206(M，M+2)+。
c)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
將4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(470mg，2.29mmol)，碳酸鉀(1.58g，11.46mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2--二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(525mg，2.52mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(58.6mg，0.115mmol)于1，4-二噁烷(9.5ml)和水(1.9ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌1小時(shí)。將溶液在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(30％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(124mg，0.60mmol，26％產(chǎn)率)，為白色粉末LCMS(ES)m/e 206(M+H)+。
d)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-表)-2-呋喃甲酸
將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(124mg，0.60mmol)于6N氫氧化鈉(2.0ml，12.0mmol)和四氫呋喃(3.0ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌2小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(54mg，0.28mmol，47％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/e 192(M+H)+。
e)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(54mg，0.28mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(108mg，0.28mmol)[在制備例6中制備]和N，N-二異丙基乙基胺(0.24ml，1.40mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(158mg，0.34mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺(100mg，0.14mmol，50％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/e 523(M+H)+。
f)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向N-((1S)-2-(1，3--二.氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺(100mg，0.19mmol)于四氫呋喃(1ml)和甲醇(1ml)中的溶液中滴加肼(0.06ml，1.91mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的HCl鹽(56mg，0.12mmol，62％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝393(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.70(d，J＝9.09Hz，1H)8.28(s，1H)8.07(br.s.，3H)7.69(d，J＝8.08Hz，1H)7.56(d，J＝8.08Hz，2H)7.50(s，1H)7.45(d，J＝1.77Hz，2H)6.51(d，J＝1.77Hz，1H)4.50-4.57(m，1H)3.93(s，3H)3.02-3.16(m，4H)。
實(shí)施例109
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(200mg，0.64mmol)[在實(shí)施例99中制備]，碳酸鉀(438mg，3.17mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(324mg，0.64mmol)和2，4，6-三乙烯基環(huán)三硼氧烷(trivinylcycloboroxane)-吡啶絡(luò)合物(77mg，0.32mmol)于1，4-二噁烷(5.3ml)和H2O(1ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(135mg，0.515mmol，81％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝250(M+H)+。
b)4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯
向4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(135mg，0.52mmol)于甲醇(2.6ml)中的溶液中加入Pd-C(21.9mg，0.21mmok)。將反應(yīng)混合物在1atm(氣球)氫化1小時(shí)。然后將溶液用N2吹洗，通過塞力特硅藻土過濾，并濃縮，得到4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(145mg，0.51mmol，99％產(chǎn)率)，為黃色油狀物，其不用進(jìn)一步純化而使用LCMS(ES)m/e 265(M+H)+。
c)4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸
將4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(145mg，0.55mmol)于6N氫氧化鈉(1.8ml，10.97mmol)和四氫呋喃(4.8ml)中的溶液在密封管中在60℃攪拌12小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(137mg，0.55mmol，100％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 250(M+H)+。
d)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(137mg，0.55mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(211mg，0.55mmol)[在制備例6中制備]和二異丙基乙基胺(0.48ml，2.74mmol)于二氯甲烷(5.47ml)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(281mg，0.60mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，40-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(262mg，0.45mmol，82％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 581(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(262mg，0.45mmol)于四氫呋喃(2.256ml)和甲醇(2.256ml)中的溶液中滴加肼(0.14ml，4.51mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(170mg，0.32mmol，72％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝451(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.72(br.s.，1H)8.05(br.s.，2H)7.76(s，1H)7.69(d，J＝7.83Hz，1H)7.49-7.52(m，2H)7.40-7.45(m，2H)4.42-4.47(m，1H)3.61(br.s.，3H)3.01-3.07(m，4H)2.52-2.59(m，2H)2.26(s，3H)1.02-1.09(m，3H)。
實(shí)施例110
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯
將5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(980mg，3.92mmol)[在實(shí)施例98中制備]和N-溴琥珀酰亞胺(697mg，3.92mmol)于四氫呋喃(19.6ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，然后通過柱色譜(硅膠，10-40％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(1.1g，3.34mmol，85％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 329，331(M，M+2)+。
b)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，0.911mmol)，碳酸鉀(630mg，4.56mmol)，PdCl2(dPPf)(66.7mg，0.091mmol)和三甲基環(huán)三硼氧烷(0.25ml，1.82mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(9.1ml)中的溶液在密封管中在110℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(143mg，0.51mmol，56％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝265(M+H)+。
c)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸
將4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(143mg，0.54mmol)于6N氫氧化鈉(0.90ml，5.41mmol)和四氫呋喃(5.4ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸(136mg，0.54mmol，100％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 251(M+H)+。
d)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸(130mg，0.52mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.52mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(0.45ml，2.60mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(267mg，0.57mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺(278mg，0.43mmol，82％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 581(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺(278mg，0.48mmol)于四氫呋喃(2.4ml)和甲醇(2.4ml)中的溶液中滴加肼(0.15ml，4.79mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(3-15％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量2M HCl的Et2O溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(196mg，0.36mmol，76％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝451(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.86-8.93(m，1H)8.15(br.s.，3H)7.83(s，1H)7.69(d，J＝7.58Hz，1H)7.55(br.s.，1H)7.52(t，J＝7.45Hz，1H)7.42(t，J＝7.45Hz，1H)7.38(s，1H)4.22-4.27(m，1H)3.62(s，3H)2.97-3.09(m，4H)2.60(q，J＝7.49Hz，2H)1.88(s，3H)1.13(t，J＝7.58Hz，3H)。
實(shí)施例111
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，0.95mmol)，碳酸鉀(658mg，4.76mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(24.32mg，0.05mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-(1-甲基乙烯基)-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷(0.18ml，0.95mmol)于1，4-二噁烷(5.3ml)和H2O(1.0ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸甲酯(171mg，0.58mmol，61％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝276(M+H)+。
b)5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸甲酯
向5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸甲酯(171mg，0.62mmol)于甲醇(3ml)中的溶液中加入PdOH2(34.8mg，0.25mmol)。將反應(yīng)混合物在1atm(氣球)氫化1小時(shí)。然后將溶液用N2吹洗，通過塞力特硅藻土過濾，并濃縮，得到5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸甲酯(173mg，0.62mmol，100％產(chǎn)率)，為透明油狀物，其不用進(jìn)一步純化而使用LCMS(ES)m/e 279(M+H)+。
c)5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸
將5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸甲酯(173mg，0.62mmol)于6N氫氧化鈉(1ml，6.21mmol)和四氫呋喃(5.4ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸(148mg，0.49mmol，79％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e265(M+H)+。
d)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-甲基-441-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸(137mg，0.52mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.52mmol)[在制備例6中制備]和二異丙基乙基胺(0.45ml，2.60mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(267mg，0.572mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺(211mg，0.334mmol，64.2％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 595(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺(211mg，0.36mmol)于四氫呋喃(2.4ml)和甲醇(2.4ml)中的溶液中滴加肼(0.11ml，3.55mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4MHCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(108mg，0.20mmol，57％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝465(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.71(d，J＝8.59Hz，1H)8.07(br.s.，3H)7.74(s，1H)7.65-7.68(m，1H)7.55-7.60(m，1H)7.46-7.49(m，1H)7.39-7.46(m，2H)4.47(br.s.，1H)3.57(s，3H)2.99-3.05(m，4H)2.49-2.52(m，1H)2.25(s，3H)1.07-1.14(m，6H)。
實(shí)施例112
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-5-丙基-2-噻吩甲酸(5.0g，20.07mmol)于甲醇(100ml)中的溶液中加入硫酸(5.35ml，100mmol)。將得到的溶液在50℃攪拌36小時(shí)。加入H2O(50mL)，水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用飽和NaHCO3洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，得到4-溴-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(5.1g，18.61mmol，93％產(chǎn)率)，為黃色油狀物，不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/e 262，264(M，M+2)+。
b)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(1.0g，3.80mmol)的溶液，碳酸鉀(2.63g，19.00mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.949g，4.56mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.097g，0.19mmol)在密封管中混合，并在80℃攪拌1小時(shí)。反應(yīng)內(nèi)容物然后在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(1.07g，3.76mmol，99％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 265(M+H)+。
c)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸
將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(356mg，1.35mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(180mg，1.35mmol)于四氫呋喃(6.7ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。一次加入6N氫氧化鈉(2.2ml，13.47mmol)，并將該溶液再攪拌12小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸(357mg，1.25mmol，93％產(chǎn)率)，為黃色油狀物，不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS (ES)m/e271，273(M，M+2)+。
d)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸(148mg，0.52mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.52mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(0.45ml，2.60mmol)于DCM中的溶液一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(267mg，0.57mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺(245mg，0.39mmol，75％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 615，617(M，M+2)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺(245mg，0.40mmol)于四氫呋喃(2.4ml)和甲醇(2.4ml)中的溶液中滴加肼(0.12ml，3.98mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(178mg，0.32mmol，80％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝485，487(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.96(br.s.，1H)8.13(br.s.，3H)7.93(s，1H)7.66-7.73(m，2H)7.62(br.s.，1H)7.55(t，J＝7.45Hz，1H)7.42(t，J＝7.45Hz，1H)4.48(br.s.，1H)3.71(s，3H)2.99-3.08(m，4H)2.63(t，J＝7.20Hz，2H)1.53-1.57(m，2H)0.83(t，J＝7.33Hz，3H)。
實(shí)施例113
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸
將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(714mg，2.70mmol)[在實(shí)施例112中制備]和N-溴琥珀酰亞胺(481mg，2.70mmol)于四氫呋喃(12ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物分份，將一半溶液用6N氫氧化鈉(2.251ml，13.51mmol)處理。將反應(yīng)混合物在密封管中在70℃攪拌12小時(shí)，并在H2O-DCM之間分配。將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，并用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸(445mg，1.35mmol，50％產(chǎn)率)LCMS(ES)m/e 329，331(M，M+2)+。
b)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸(171mg，0.52mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.52mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(0.45ml，2.60mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(267mg，0.57mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺(251mg，0.37mmol，72％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 659，661(M，M+2)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺(251mg，0.38mmol)于四氫呋喃(2.4ml)和甲醇(2.4ml)中的溶液中滴加肼(0.12ml，3.81mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(178mg，0.30mmol，78％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝529，531(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.94(d，J＝8.84Hz，1H)8.10(br.s.，3H)7.87(d，J＝1.77Hz，1H)7.65-7.72(m，2H)7.58(dd，J＝14.78，7.71Hz，2H)7.43(t，J＝7.45Hz，1H)4.48(br.s.，1H)3.71(s，3H)2.99-3.08(m，4H)2.58-2.66(m，2H)1.53(ddd，J＝13.89，6.82，6.57Hz，2H)0.83(dd，J＝7.33，2.02Hz，3H)。
實(shí)施例114
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(714mg，2.70mmol)和N-溴琥珀酰亞胺(481mg，2.70mmol)于四氫呋喃(12ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物分份，將其一半在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(464mg，1.35mmol，50％產(chǎn)率)，為橙色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 343，345(M，M+2)+。
b)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基噻吩-2-甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(242mg，0.71mmol)，PdCl2(dppf)(52mg，0.07mmol)，碳酸鉀(487mg，3.53mmol)和三甲基環(huán)三硼氧烷(0.20ml，1.41mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(3.5ml)中的溶液在密封管中在110℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(184mg，0.60mmol，84％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝279(M+H)+。
c)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基噻吩-2-甲酸
將4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸甲酯(0.184g，0.66mmol)于6N氫氧化鈉(2.2ml，13.22mmol)和四氫呋喃(6.6ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸(180mg，0.66mmol，100％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 265(M+H)+。
d)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[2-(三氟甲基)芐基]乙基}-5-丙基噻吩-2-甲酰胺
在25℃，向4-(1，4-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酸(180mg，0.68mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(262mg，0.68mmol)[在制備例6中制備]和二異丙基乙基胺(0.59ml，3.40mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(350mg，0.75mmol)。將溶液在25℃攪拌2小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺(243mg，0.41mmol，60％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 595(M+H)+。
e)N-{(1S)-2-氨基-1-[2-(三氟甲基)芐基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基噻吩-2-甲酰胺
在25℃，向4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺(243mg，0.41mmol)于四氫呋喃(2ml)和甲醇(2ml)中的溶液中滴加肼(0.13ml，4.09mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(172mg，0.30mmol，74％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝465(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.80(br.s.，1H)8.08(br.s.，3H)7.78(s，1H)7.69(d，J＝7.58Hz，1H)7.50-7.55(m，2H)7.43(t，J＝7.71Hz，1H)7.37(s，1H)4.49(d，J＝10.36Hz，1H)3.61(s，3H)2.99-3.06(m，4H)2.54-2.59(m，2H)1.87(s，3H)1.48-1.55(m，2H)0.81(t，J＝7.33Hz，3H)。
實(shí)施例115
N-{(1S)-2-氨基-1-[2-(三氟甲基)芐基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)噻吩-2-甲酰胺的制備 a)5-甲基-4-{1-甲基-4-[(1E)-丙-1-烯-1-基]-1H-吡唑-5-基}噻吩-2-甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(320mg，1.015mmol)[在實(shí)施例99中制備]，碳酸鉀(702mg，5.08mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(25.9mg，0.05mmol)和(1Z)-1-丙烯-1-基硼酸(87mg，1.01mmol)于1，4-二噁烷(5.3ml)和水(1.3ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-甲基-4-{1-甲基-4-[(1Z)-1-丙烯-1-基]-1H-吡唑-5-基}-2-噻吩甲酸甲酯(243mg，0.88mmol，87％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝277(M+H)+。
b)5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向5-甲基-4-{1-甲基-4-[(1Z)-1-丙烯-1-基]-1H-吡唑-5-基}-2-噻吩甲酸甲酯(243mg，0.88mmol)于甲醇(6.8ml)中的溶液中加入Pd(OH)2(49mg，0.35mmol)。將反應(yīng)混合物在1atm(氣球)氫化1小時(shí)。然后將溶液用N2吹洗，通過塞力特硅藻土過濾，并濃縮，得到5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(217mg，0.69mmol，78％產(chǎn)率)，為透明油狀物，其不用進(jìn)一步純化而使用LCMS(ES)m/e 279(M+H)+。
c)5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(217mg，0.78mmol)于6N氫氧化鈉(2.60ml，15.59mmol)和四氫呋喃(5.4ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(242mg，0.78mmol，100％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 265(M+H)+。
d)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(206mg，0.78mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(300mg，0.78mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(0.68ml，3.90mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(400mg，0.86mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(283mg，0.46mmol，60％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 595(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(283mg，0.48mmol)于四氫呋喃(2.4ml)和甲醇(2.4ml)中的溶液中滴加肼(0.15ml，4.76mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(186mg，0.35mmol，73％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝465(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.81(br.s.，1H)8.13(br.s.，3H)7.79(s，1H)7.68(d，J＝7.58Hz，1H)7.59(d，J＝7.07Hz，1H)7.42-7.51(m，1H)7.38-7.45(m，2H)4.47(br.s.，1H)3.61(d，J＝2.78Hz，3H)2.99-3.08(m，4H)2.25(s，3H)2.11-2.21(m，2H)1.41-1.48(m，2H)0.83(br.s.，3H)。
實(shí)施例116
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
在0℃，向5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(1.5g，10.70mmol)和三氯化鋁(2.14g，16.06mmol)于氯仿(21ml)中的溶液中加入溴(0.77ml，14.99mmol)。將得到的溶液在0℃攪拌，并經(jīng)12小時(shí)，溫?zé)嶂潦覝?。將該反?yīng)分批進(jìn)行(1.5g和1g)，將各批合并，加至冰中，并在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(0.5-10％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(2.1g，54％)，為白色固體；LCMS(ES)m/z＝219，221(M，M+2)+。
b)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
將4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(2.1g，9.59mmol)，碳酸鉀(6.63g，47.9mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.19g，10.55mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.24g，0.48mmol)于1，4-二噁烷(40ml)和水(8ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌1小時(shí)。加入1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.19g，10.55mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.245g，0.48mmol)，并將反應(yīng)再攪拌1小時(shí)，并在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-40％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(1.7g，7.72mmol，81％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 221(M+H)+。
c)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(200mg，0.91mmol)于6N氫氧化鈉(2.3ml，13.62mmol)和四氫呋喃(4.5ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(130mg，0.57mmol，63％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 207(M+H)+。
d)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(130mg，0.63mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(243mg，0.63mmol)[在制備例6中制備]和二異丙基乙基胺(0.55ml，3.15mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(324mg，0.69mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺(190mg，0.23mmol，37％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 537(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺(190mg，0.35mmol)于四氫呋喃(1.5ml)和甲醇(1.5ml)中的溶液中滴加肼(0.11ml，3.54mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的HCl鹽(71mg，0.15mmol，42％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z 407(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.60(d，J＝9.60Hz，1H)8.04(br.s.，3H)7.70(d，J＝7.83Hz，1H)7.53-7.59(m，2H)7.49(d，J＝1.77Hz，1H)7.38-7.45(m，2H)6.33(br.s.，1H)4.52(br.s.，1H)3.80(s，3H)2.98-3.09(m，4H)2.38(s，3H)。
實(shí)施例117
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(600mg，2.72mmol)[在實(shí)施例116中制備]和N-溴琥珀酰亞胺(485mg，2.72mmol)于四氫呋喃(13.6ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物分份，一半溶液用6N氫氧化鈉(4.54ml，27.2mmol)處理，將其在密封管中在70℃攪拌4小時(shí)。將溶液在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮并直接使用，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(369mg，1.29mmol，48％產(chǎn)率)，為橙色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 285，287(M，M+2)+。
b)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(200mg，0.70mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(270mg，0.70mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(0.61ml，3.51mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(361mg，0.77mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(232mg，0.32mmol，46％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 615，617(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(232mg，0.38mmol)于四氫呋喃(2ml)和甲醇(2ml)中的溶液中滴加肼(0.12ml，3.77mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的HCl鹽(106mg，0.19mmol，50％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝485，487(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.60(d，J＝9.60Hz，1H)7.99(br.s.，3H)7.68(s，2H)7.71(d，J＝8.08Hz，1H)7.59(d，J＝7.33Hz，1H)7.44-7.56(m，1H)7.25-7.33(m，1H)4.50-4.57(m，1H)3.74(s，3H)2.99-3.07(m，4H)2.32(s，3H)。
實(shí)施例118
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(300mg，1.36mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(182mg，1.36mmol)于四氫呋喃(6.7ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。一次加入6N氫氧化鈉(3.4ml，20.4mmol)，并將該溶液再攪拌12小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(275mg，1.14mmol，84％產(chǎn)率)，為橙色油狀物，不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/e241，243(M，M+2)+。
b)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(200mg，0.83mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(320mg，0.83mmol)[根據(jù)制備例6制備]和二異丙基乙基胺(0.72m1，4.16mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(427mg，0.91mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(246mg，0.40mmol，49％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 571，573(M，M+2)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(246mg，0.43mmol)于四氫呋喃(2.1ml)和甲醇(2.1ml)中的溶液中滴加肼(135μl，4.31mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的HCl鹽(125mg，0.24mmol，56％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝441，443(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.63(d，J＝9.09Hz，1H)8.04(br.s.，3H)7.65-7.72(m，2H)7.59(d，J＝7.33Hz，1H)7.57(br.s.，1H)7.39-7.47(m，1H)7.29-7.37(m，1H)4.54(br.s.，1H)3.73(s，3H)2.98-3.09(m，4H)2.33(s，3H)。
實(shí)施例119
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(600mg，2.72mmol)[在實(shí)施例116中制備]和N-溴琥珀酰亞胺(485mg，2.72mmol)于四氫呋喃(13ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物分份，并將一半溶液在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(5-15％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(130mg，0.41mmol，15％產(chǎn)率)，為橙色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 299，301(M，M+2+。
b)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(130mg，0.43mmol)，碳酸鉀(300mg，2.17mmol)，PdCl2(dppf)(15.9mg，0.02mmol)和三甲基環(huán)三硼氧烷(0.12ml，0.87mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(3.5ml)中的溶液在密封管中在110℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(60mg，0.26mmol，59％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝235(M+H)+。
c)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸
將4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(60mg，0.26mmol)于6N氫氧化鈉(0.8ml，5.1mmol)和四氫呋喃(2.5ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(53mg，0.24mmol，94％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 221(M+H)+。
d)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(53mg，0.24mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(93mg，0.24mmol)[根據(jù)制備例6制備]和N，N-二異丙基乙基胺(0.21ml，1.20mmol)于二氯甲烷(2.4ml)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(124mg，0.26mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(113mg，0.21mmol，85％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 551(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(113mg，0.21mmol)于四氫呋喃(1mL)和甲醇(1mL)中的溶液中滴加肼(64μl，2.05mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的HCl鹽(32mg，0.06mmol，32％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝421(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.60(d，J＝9.09Hz，1H)8.05(br.s.，3H)7.70(d，J＝7.58Hz，1H)7.54-7.61(m，2H)7.40-7.47(m，1H)7.35(s，1H)7.27(s，1H)4.54(br.s.，1H)3.65(s，3H)2.98-3.07(m，4H)2.26(s，3H)1.90(s，3H)。
實(shí)施例120
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例100的方法制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(155mg，0.46mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝421，423(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.76(br.s.，1H)8.06(br.s.，3H)7.85(s，1H)7.69(s，1H)7.28-7.36(m，1H)7.12(d，J＝7.07Hz，2H)7.03(dd，J＝17.05，2.15Hz，1H)4.36(br.s.，1H)3.69(s，3H)2.93-3.02(m，4H)2.67(q，J＝7.33Hz，2H)1.16(t，J＝7.45Hz，3H)。
實(shí)施例121
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例110制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(241mg，0.72mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝401(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.76(br.S.，1H)8.11(br.S.，3H)7.79(s，1H)7.37(s，1H)7.28-7.36(m，1H)7.12(d，J＝6.82Hz，2H)7.03(td，J＝8.65，1.64Hz，1H)4.41-4.43(m，1H，遮住)3.60(br.S.，3H)2.99-3.02(m，4H)2.60(q，J＝7.33Hz，2H)1.86(s，3H)1.13(t，J＝7.45Hz，3H)。
實(shí)施例122
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例110制備，為黃色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(277mg，0.72mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝451(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.70(br.s.，1H)8.06(br.s.，3H)7.68-7.75(m，1H)7.52(s，1H)7.50-7.56(m，3H)7.37(s，1H)4.36(d，J＝8.84Hz，1H)3.58(br.s.，3H)2.98-3.02(m，4H)2.55-2.61(m，2H)1.86(s，3H)1.12(t，J＝7.58Hz，3H)。
實(shí)施例123
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯
將5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(1g，3.99mmol)[在實(shí)施例98中制備]和N-溴琥珀酰亞胺(0.711g，3.99mmol)于四氫呋喃(8ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(1.2g，3.54mmol，89％產(chǎn)率)，為橙色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 329，331(M，M+2)+ b)4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，0.911mmol)，碳酸鉀(630mg，4.56mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(23.29mg，0.05mmol)和2，4，6-三乙烯基環(huán)三硼氧烷(trivinylcycloboroxane)-吡啶絡(luò)合物(110mg，0.45mmol)于1，4-二噁烷(5ml)和水(1ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(187mg，0.66mmol，73％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝277(M+H)+。
c)5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(187mg，0.68mmol)于甲醇(2.5ml)中的溶液中加入Pd-C(7.20mg，0.07mmol)。將反應(yīng)混合物在1atm(氣球)氫化1小時(shí)。然后將溶液用N2吹洗，通過塞力特硅藻土過濾，并濃縮，得到5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(187mg，0.64mmol，95％產(chǎn)率)，為透明油狀物，其不用進(jìn)一步純化而使用LCMS(ES)m/e 279(M+H)+。
d)5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(181mg，0.65mmol)于6N氫氧化鈉(2.16ml，13.0mmol)和四氫呋喃(5.4ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(175mg，0.65mmol，100％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 265(M+H)+。
e)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(175mg，0.66mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(255mg，0.66mmol)[根據(jù)6的方法制備]和N，N-二異丙基乙基胺(0.58ml，3.31mmol)于二氯甲烷(4.6ml)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(340mg，0.73mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3--二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(232mg，0.38mmol，57％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 595(M+H)+。
f)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(232mg，0.39mmol)于四氫呋喃(2mL)和甲醇(2mL)中的溶液中滴加肼(122μl，3.90mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(176mg，0.38mmol，97％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝529，531(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.64(br.s.，1H)7.97(br.s.，3H)7.65-7.73(m，3H)7.57(d，J＝5.05Hz，2H)7.59(br.s.，1H)7.44(br.s.，1H)4.48(br.s.，1H)3.69(s，3H)2.98-3.12(m，4H)1.24(dd，J＝6.82，2.27Hz，3H)1.16(dd，J＝6.82，2.53Hz，3H)。
實(shí)施例124
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例123制備，為黃色固體，除了用(1Z)-1-丙烯-1-基硼酸(78mg，0.91mmol)代替2，4，6-三乙烯基環(huán)三硼氧烷-吡啶絡(luò)合物L(fēng)CMS(ES)m/z＝479(M+H)+，1H NMR(400M[Hz，DMSO-d6)δppm 8.63(s，1H)8.01(br.s.，3H)7.67(s，2H)7.56(d，J＝5.05Hz，2H)7.38-7.46(m，2H)4.42-4.47(m，1H)3.59(s，3H)2.98-3.02(m，4H)2.66-2.71(m，2H)1.40-1.47(m，2H)1.13(t，J＝7.52Hz，3H)0.83(t，J＝7.26Hz，3H)。
實(shí)施例125
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-2-噻吩甲酸(25g，121mmol)于甲醇(241ml)中的溶液中加入硫酸(32ml，604mmol)。將得到的溶液在50℃攪拌4天。將溶液在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到4-溴-2-噻吩甲酸甲酯(26g，118mmol，97％產(chǎn)率)，不用進(jìn)一步純化直接使用，LCMS(ES)m/e 222(M+H)+。
b)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-2-噻吩甲酸甲酯(2.5g，11.31mmol)，碳酸鉀(7.81g，56.5mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.59g，12.44mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.289g，0.56mmol)于1，4-二噁烷(47ml)和水(9ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌1小時(shí)。加入1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.59g，12.44mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.289g，0.56mmol)，并將反應(yīng)再攪拌1小時(shí)。將該混合物在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-40％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2.5g，11.25mmol，99％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/e 223(M+H)+。
c)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2.5g，11.25mmol)和N-溴琥珀酰亞胺(2.002g，11.25mmol)于四氫呋喃(56.2ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2.7g，8.97mmol，80％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/e 301，303(M，M+2)+。
d)4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，0.91mmol)，碳酸鉀(630mg，4.56mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(23mg，0.05mmol)和2，4，6-三乙烯基環(huán)三硼氧烷-吡啶絡(luò)合物(110mg，0.46mmol)于1，4-二噁烷(5ml)和水(1ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(187mg，0.66mmol，73％產(chǎn)率)，為透明油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝277(M+H)+。
e)4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(187mg，0.68mmol)于甲醇(2.5ml)中的溶液中加入Pd-C(7.20mg，0.07mmol)。將反應(yīng)混合物在1atm(氣球)氫化1小時(shí)。然后將溶液用N2吹洗，通過塞力特硅藻土過濾，并濃縮，得到5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(187mg，0.64mmol，95％產(chǎn)率)，為透明油狀物，其不用進(jìn)一步純化而使用LCMS(ES)m/e 279(M+H)+。
f)4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(202mg，0.81mmol)和NCS(108mg，0.81mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(4ml)中的溶液在密封管中在100℃攪拌1小時(shí)。加入另外的NCS(108mg，0.81mmol)，并將該溶液攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(2-30％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(135mg，0.45mmol，56％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 285(M+H)+。
g)4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(135mg，0.47mmol)于6N氫氧化鈉(1.6ml，9.48mmol)和四氫呋喃(5.4ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌12小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(120mg，0.41mmol，87％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 270，272(M，M+2)+。
h)4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(120mg，0.44mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(171mg，0.44mmol)[根據(jù)制備例6制備]和N，N-二異丙基乙基胺(0.39m1，2.22mmol)于二氯甲烷(4.6ml)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(228mg，0.49mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(190mg，0.30mmol，68％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/e 601，603(M，M+2)+。
i)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(190mg，0.32mmol)于四氫呋喃(1.58ml)和甲醇(1.58ml)中的溶液中滴加肼(0.08ml，2.53mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的乙醚溶液(2ml)加至于DCM(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的HCl鹽(145mg，0.26mmol，83％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝471，473(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.80(br.s.，1H)7.87-7.99(m，6H)7.69(d，J＝7.71Hz，1H))7.57(d，J＝7.83Hz，1H)7.40-7.44(m，1H)4.43-4.48(m，1H)3.74(s，3H)2.99-3.06(m，4H)2.40(d，J＝7.58Hz，2H)1.04(t，J＝7.58Hz，3H)。
實(shí)施例126
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例125制備，為黃色固體，除了用(1z)-1-丙烯-1-基硼酸(125mg，1.46mmol)代替2，4，6-三乙烯基環(huán)三硼氧烷-吡啶絡(luò)合物L(fēng)CMS(ES)m/z＝485，487(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.94(d，J＝9.09Hz，1H)8.05(s，4H)7.98(s，1H)7.69(d，J＝7.58Hz，1H)7.55-7.63(m，1H)7.52(t，J＝7.58Hz，1H)7.42(t，J＝7.33Hz，1H)4.49(d，J＝4.29Hz，1H)3.74(s，3H)2.98-3.09(m，4H)2.37(q，J＝7.07Hz，2H)1.37-1.45(m，2H)0.80(t，J＝7.33Hz，3H)。
實(shí)施例127
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯
向4，5-二溴-2-呋喃甲酸(25g，93mmol)于甲醇(185ml)中的溶液中加入硫酸(24.7ml，463mmol)。將得到的溶液在50℃攪拌12小時(shí)。將溶液在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯(23.67g，83mmol，90％產(chǎn)率)，不用進(jìn)一步純化直接使用，LCMS(ES)m/e 283，285，287(M，M+2，M+4)+。
b)4-溴-2-呋喃甲酸甲酯
在-40℃，向4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯(3.3g，11.62mmol)于四氫呋喃(46ml)中的溶液中加入異丙基氯化鎂(6.97ml，13.95mmol)。1小時(shí)后，加入水(11ml)，并將該溶液溫?zé)嶂?5℃。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(3％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(1.4g，6.49mmol，56％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/e 205，207(M，M+2)+。
c)4-溴-5-氯-2-呋喃甲酸甲酯
將4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(1.4g，6.83mmol)和NCS(0.912g，6.83mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(13.7ml)中的溶液在密封管中在100℃攪拌1小時(shí)。1小時(shí)后，將溶液在DCM-H2O之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(2-10％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-溴-5-氯-2-呋喃甲酸甲酯(1.348g，5.12mmol，75％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/e 238，240，242(M，M+2，M+4)+。
d)5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
將4-溴-5-氯-2-呋喃甲酸甲酯(1.1g，4.59mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.05g，5.05mmol)[根據(jù)制備例7制備]，碳酸鉀(3.17g，22.97mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.117g，0.23mmol)于1，4-二噁烷(19.14ml)和水(3.83ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，4-25％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(800mg，2.53mmol，55％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS m/e ES 240，242(M，M+2)+。
e)5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸
將5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(300mg，1.25mmol)于6N氫氧化鈉(4.16ml，24.93mmol)和四氫呋喃(5.4ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(267mg，0.59mmol，47％產(chǎn)率)，為白色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 265(M+H)+。
f)5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(134mg，0.59mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(228mg，0.59mmol)[根據(jù)制備例6制備]和N，N-二異丙基乙基胺(0.52ml，2.96mmol)于二氯甲烷(4.6ml)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(304mg，0.65mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺(202mg，0.33mmol，55.8％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 557，559(M，M+2)+。
g)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺(202mg，0.36mmol)于四氫呋喃(1.8ml)和甲醇(1.8ml)中的溶液中滴加肼(0.08ml，2.54mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(2％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量2M HCl的乙醚溶液(2ml)加至于DCM(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的HCl鹽(120mg，0.24mmol，66％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝427，429(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.87(d，J＝9.09Hz，1H)8.11(br.s.，3H)7.66-7.73(m，2H)7.57(t，J＝7.45Hz，2H)7.53(d，J＝1.52Hz，1H)7.44(d，J＝6.82Hz，1H)6.50(d，J＝1.52Hz，1H)4.43-4.51(m，1H)3.86(s，3H)2.99-3.17(m，4H)。
實(shí)施例128
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸
將5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(300mg，1.25mmol)[根據(jù)實(shí)施例127制備]和N-氯琥珀酰亞胺(166mg，1.25mmol)于四氫呋喃(6ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。一次加入6N氫氧化鈉(4.1ml，24.94mmol)，并將該溶液再攪拌12小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(232mg，0.44mmol，36％產(chǎn)率)，為黃色油狀物，不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/e 261，263(M，M+2)+。
b)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(116mg，0.44mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(171mg，0.44mmol)[根據(jù)制備例6制備]和N，N-二異丙基乙基胺(0.39ml，2.22mmol)于二氯甲烷(4.6ml)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(228mg，0.49mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-呋喃甲酰胺(116mg，0.19mmol，42％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 591，593(M，M+2)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-呋喃甲酰胺(116mg，0.20mmol)于四氫呋喃(1ml)和甲醇(1ml)中的溶液中滴加肼(0.04ml，1.37mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(2％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量2M HCl的乙醚溶液(2ml)加至于DCM(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的HCl鹽(68mg，0.13mmol，65％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝461，463(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.80(d，J＝9.09Hz，1H)8.03(br.s.，3H)7.66-7.73(m，2H)7.58-7.61(m，1H)7.52-7.59(m，2H)7.40-7.48(m，1H)4.5-4.57(m，1H)3.77(s，3H)2.98-3.09(m，4H)。
實(shí)施例129
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例125制備，為黃色固體，除了用4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(5g，24.39mmol)代替4-溴-2-噻吩甲酸甲酯LCMS(ES)m/z＝455，457(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.75(d，J＝9.09Hz，1H)8.23(s，1H)8.05(br.s.，3H)7.70(d，J＝7.83Hz，1H)7.53-7.60(m，2H)7.42＝0-7.43(m，2H)4.50-4.55(m，1H)3.74(s，3H)2.99-3.08(m，4H)2.39(q，J＝7.33Hz，2H)1.03(t，J＝7.45Hz，3H)。
實(shí)施例130
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例125制備，為黃色固體，除了用三甲基環(huán)三硼氧烷(0.78ml，5.61mmol)代替2，4，6-三乙烯基環(huán)三硼氧烷-吡啶絡(luò)合物，以及用4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(5g，24.39mmol)代替4-溴-2-噻吩甲酸甲酯LCMS(ES)m/z＝441，443(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.71(d，J＝9.35Hz，1H)8.27(s，1H)8.01(br.s.，3H)7.70(d，J＝7.58Hz，1H)7.55(t，J＝6.06Hz，2H)7.40-7.47(m，2H)4.50-4.57(m，1H)3.78(s，3H)2.99-3.08(m，4H)1.98(s，3H)。
實(shí)施例131
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺的制備 a)5-乙烯基-2-呋喃甲酸甲酯
將5-溴-2-呋喃甲酸甲酯(2.5g，12.19mmol)，碳酸鉀(8.43g，61.0mmol)，雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.312g，0.61mmol)和2，4，6-三乙烯基環(huán)三硼氧烷-吡啶絡(luò)合物(1.47g，6.10mmol)于1，4-二噁烷(50ml)和水(10ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-乙烯基-2-呋喃甲酸甲酯(1.3g，7.09mmol，58％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/z＝153(M+H)+。
b)5-乙基-2-呋喃甲酸甲酯
向5-乙烯基-2-呋喃甲酸甲酯(1.3g，8.54mmol)于甲醇(15ml)中的溶液中加入PdOH2(0.240g，1.71mmol)。將反應(yīng)混合物在1atm(氣球)氫化1小時(shí)。然后將溶液使用N2吹洗，通過塞力特硅藻土過濾，并濃縮，得到5-乙基-2-呋喃甲酸甲酯(1.2g，7.16mmol，84％產(chǎn)率)，為透明油狀物，其不用進(jìn)一步純化而使用LCMS(ES)m/e 155(M+H)+。
c)4-溴-5-乙基-2-呋喃甲酸甲酯
在25℃，向5-乙基-2-呋喃甲酸甲酯(1.2g，7.78mmol)和三氯化鋁(1.56g，11.68mmol)于氯仿(15ml)中的溶液中加入溴(0.56ml，10.90mmol)。將得到的溶液在密封管中在70℃攪拌2小時(shí)，然后將該溶液冷卻，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，5％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-溴-5-乙基-2-呋喃甲酸甲酯(1.1g，3.26mmol，41.8％產(chǎn)率)，為白色固體；LCMS(ES)m/z＝233，235(M，M+2)+。
d)5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
將4-溴-5-乙基-2-呋喃甲酸甲酯(1.1g，4.72mmol)的溶液，碳酸鉀(3.26g，23.60mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.178g，5.66mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.121g，0.24mmol)在密封管中混合，并在80℃攪拌1小時(shí)。LCMS顯示4∶1pdt/sm。加入另外的1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.178g，5.66mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.121g，0.24mmol)，并將該溶液再攪拌2小時(shí)，粗產(chǎn)物L(fēng)CMS清楚地顯示完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。反應(yīng)內(nèi)容物然后在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(950mg，3.37mmol，71.3％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 235(M+H)+。
e)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酸
將5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(950mg，4.06mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(542mg，4.06mmol)于四氫呋喃(20ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。一次加入6N氫氧化鈉(13.5ml，81mmol)，并將該溶液再攪拌另外1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4，用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酸(683mg，2.55mmol，62.8％產(chǎn)率)，為黃色油狀物，不用進(jìn)一步純化直接使用LCMS(ES)m/e 254，256(M，M+2)+。
f)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酸(145mg，0.57mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(219mg，0.57mmol)[根據(jù)制備例6制備]和N，N--二異丙基乙基胺(0.50ml，2.85mmol)于二氯甲烷(4.6ml)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(292mg，0.63mmol)。將溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺(250mg，0.41mmol，71％產(chǎn)率)，為白色固體LCMS(ES)m/e 585，587(M，M+2)+。
g)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-IH-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3--二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺(250mg，0.43mmol)于四氫呋喃(1.8ml)和甲醇(1.8ml)中的溶液中滴加肼(0.13ml，4.27mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(2％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量2M HCl的乙醚溶液(2ml)加至于DCM(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺的HCl鹽(166mg，0.30mmol，70％產(chǎn)率)，為黃色固體LCMS(ES)m/z＝455，457(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.59(br.s.，1H)8.06(br.s.，3H)7.67(s，1H)7.70(d，J＝7.83Hz，1H)7.59(d，J＝4.29Hz，2H)7.44(d，J＝4.04Hz，1H)7.31(d，J＝5.81Hz，1H)4.50-4.57(m，1H)3.72(s，3H)2.99-3.12(m，4H)2.63(q，J＝7.33Hz，2H)1.21(t，J＝7.45Hz，3H)。
實(shí)施例132
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例131制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(170mg，0.57mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝405，407(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.56(d，J＝8.59Hz，1H)8.09(br.s.，3H)7.67(s，1H)7.33(s，1H)7.31(dd，J＝8.34，5.81Hz，2H)7.12(t，J＝8.72Hz，2H)4.36-4.39(m，1H)3.71(s，3H)2.91-3.03(m，4H)2.62(q，J＝7.58Hz，2H)1.20(t，J＝7.45Hz，3H)。
實(shí)施例133
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例131制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(170mg，0.57mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝405，407(M，M+2)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.62(d，J＝8.59Hz，1H)8.13(br.s.，3H)7.67(s，1H)7.30-7.37(m，2H)7.12(d，J＝6.32Hz，2H)7.04(t，J＝8.59Hz，1H)4.40-4.47(m，1H)3.71(s，3H)2.95-3.09(m，4H)2.62(q，J＝7.07Hz，2H)1.20(t，J＝7.33Hz，3H)。
實(shí)施例134
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例127的方法制備，為白色泡沫狀物，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(295mg，0.88mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝377，379(M，M+2)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.87(d，J＝8.84Hz，1H)8.16(br.s.，3H)7.70-7.77(m，1H)7.53(d，J＝1.77Hz，1H)7.32(t，J＝7.20Hz，1H)7.09-7.14(m，1H)7.11(d，J＝6.57Hz，2H)7.04(t，J＝8.59Hz，1H)6.49(d，J＝1.77Hz，1H)4.41-4.44(m，1H)3.86(s，3H)2.95-3.00(m，4H)。
實(shí)施例135
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例127的方法制備，為白色泡沫狀物，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(295mg，0.88mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝377，379(M，M+2)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.80(d，J＝8.84Hz，1H)8.11(br.s.，3H)7.71(s，1H)7.53(d，J＝1.77Hz，1H)7.29(dd，J＝8.59，5.56Hz，2H)7.12(t，J＝8.84Hz，2H)6.49(d，J＝1.77Hz，1H)4.32-4.38(m，1H)3.86(s，3H)2.99-3.01(m，4H)。
實(shí)施例136
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例127的方法制備，為白色泡沫狀物，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(340mg，0.88mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝427，429(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.83(d，J＝8.84Hz，1H)8.11(br.s.，3H)7.62-7.69(m，2H)7.51-7.59(m，4H)6.48(d，J＝1.77Hz，1H)4.39-4.44(m，1H)3.85(s，3H)2.97-3.05(m，4H)。
實(shí)施例137
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例128的方法制備，為白色泡沫狀物，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(321mg，0.96mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝411，413(M，M+2)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.77(d，J＝8.84Hz，1H)8.04(br.s.，3H)7.72(s，1H)7.59(s，1H)7.30-7.38(m，1H)7.11(d，J＝7.58Hz，2H)7.05(t，J＝8.59Hz，1H)4.39-4.43(m，1H)3.77(s，3H)2.97-3.03(m，4H)。
實(shí)施例138
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例128的方法制備，為白色泡沫狀物，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(221mg，0.58mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝461，463(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.83(d，J＝8.84Hz，1H)8.10(br.s.，3H)7.72(s，1H)7.64(s，1H)7.52-7.60(m，4H)4.39-4.41(m，1H)3.76(s，3H)2.98-3.05(m，4H)。
實(shí)施例139
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例128的方法制備，為白色泡沫狀物，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(256mg，0.77mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝411，413(M，M+2)+，1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.78(d，J＝8.59Hz，1H)8.06(br.s.，3H)7.72(s，1H)7.60(s，1H)7.30(dd，J＝8.59，5.56Hz，2H)7.13(t，J＝8.84Hz，2H)4.35-4.42(m，1H)3.77(s，3H)2.99(br.s.，2H)2.86-2.93(m，2H)。
實(shí)施例140
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例127的方法制備，為白色固體，除了用1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.02g，4.59mmol)[根據(jù)制備例17制備]代替1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(132mg，0.39mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝391，393(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.75(d，J＝8.84Hz，1H)8.04(br.s.，3H)7.55(s，1H)7.37(s，1H)7.30-7.36(m，1H)7.11-7.15(m，2H)7.05-7.10(m，1H)4.42(br.s.，1H)3.70(s，3H)2.97(br.s.，2H)2.92-2.96(m，2H)1.94(s，3H)。
實(shí)施例141
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4--二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例127的方法制備，為黃色固體，除了用1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(3.06g，13.78mmol)[根據(jù)制備例17制備]代替1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(174mg，0.52mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝391，393(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.81(d，J＝8.59Hz，1H)8.14(br.s.，3H)7.59(s，1H)7.37(s，1H)7.30(dd，J＝8.59，5.56Hz，2H)7.12(t，J＝8.84Hz，2H)4.32-4.38(m，1H)3.70(s，3H)2.98(d，J＝5.81Hz，2H)2.91(d，J＝6.32Hz，2H)1.94(s，3H)。
實(shí)施例142
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例127的方法制備，為黃色固體，除了用1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(3.06g，13.78mmol)[根據(jù)制備例17制備]代替1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.52mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝441，443(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.83(br.s.，1H)8.15(br.s.，2H)7.63(br.s.，1H)7.52-7.58(m，4H)7.37(s，1H)4.38-4.42(m，1H)3.68(s，3H)2.97-3.08(m，4H)1.93(s，3H)。
實(shí)施例143
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例127的方法制備，為黃色固體，除了用1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(3.06g，13.78mmol)[根據(jù)制備例17制備]代替1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200mg，0.52mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LCMS(ES)m/z＝441，443(M，M+2)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.87(d，J＝9.35Hz，1H)8.11(br.s.，3H)7.70(d，J＝7.83Hz，1H)7.52-7.57(m，3H)7.41-7.47(m，1H)7.38(s，1H)4.39-4.43(m，1H)3.71(s，3H)2.98-3.09(m，4H)1.95(s，3H)。
實(shí)施例144
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向4，5-溴-2-噻吩甲酸(3.30g，11.54mmol)于二噁烷/H2O(4∶1，100mL)中的溶液中加入K2CO3(5.5g，40.0mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(671mg，0.58mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(2.66g，13.71mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)12小時(shí)。將反應(yīng)混合物在H2O和CHCl3之間分配。使用6N HCl將水相的pH調(diào)節(jié)至～3，并用CHCl3洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用(3.3g，定量)LC-MS(ES)m/z＝289(M+H)+。
b)4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
在室溫，將N-氯琥珀酰亞胺(NCS)(299mg，2.194mmol)分批加至30mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(6mL)中的4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(503mg，1.23mmol)。將混合物加熱至70℃，持續(xù)2小時(shí)。結(jié)束后，反應(yīng)混合物在CHCl3和H2O之間分配，有機(jī)層用Na2SO4干燥，溶劑通過真空蒸餾除去，得到標(biāo)題化合物(0.54mg，定量)，其不用進(jìn)一步純化而使用。LC-MS(ES)m/z＝321(M+H)+。
c)4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(4mL)中的4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(224mg，0.52mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(201mg，0.52mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]和PyBrop(295mg，0.63mmol)。加入DIEA(0.46mL，2.63mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(己烷/EtOAc)純化，得到標(biāo)題化合物(153mg，43％)LC-MS(ES)m/z＝651(M+H)+。
d)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(2.5mL)和甲醇(0.5mL)中的4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(153mg，0.223mmol)。加入肼(50μL，1.59mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。結(jié)束后，混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(68mg，0.11mmol，48.7％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝523(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.02-3.14(m，4H)3.73(s，3H)4.50(s，1H)7.40-7.48(m，1H)7.56-7.64(m，2H)7.71(d，J＝7.83Hz，1H)7.77(s，1H)8.14(s，3H)8.21(s，1H)9.24(d，J＝9.09Hz，1H)。
實(shí)施例145
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-溴-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例144的方法制備，除了用N-溴琥珀酰亞胺(NBS)(287mg，1.596mmol)代替NCSLC-MS(ES)m/z＝364(M+H)+。
b)4-溴-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(4mL)中的4-溴-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(238mg，0.52mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(209mg，0.54mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]和PyBrop(293mg，0.63mmol)。加入DIEA(0.46mL，2.62mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(硅膠)(3∶1hex/EtOAc)純化，得到標(biāo)題化合物(229mg，60％)LC-MS(ES)m/z＝695(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(2.5mL)和甲醇(0.5mL)中的4-溴-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(229mg，0.312mmol)。加入肼(60μL，1.91mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH；12g柱)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液(500mL)處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(104mg，0.15mmol，49％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝567(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.10(s，4H)3.74(s，3H)4.50(s，1H)7.45(ddd，J＝7.96，4.17，4.04Hz，1H)7.60(d，J＝4.04Hz，2H)7.71(d，J＝7.58Hz，1H)7.76(s，1H)8.11(s，3H)8.19(s，1H)9.19(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例146
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向4-溴-2-噻吩甲酸(3.91g，18.9mmol)于二噁烷/H2O(4∶1，100mL)中的溶液中加入Cs2CO3(21.7g，66.6mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(1.1g，0.95mmol)和1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(3.94g，18.94mmol)[根據(jù)制備例7的方法制備]。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至85℃，持續(xù)12小時(shí)，并在H2O和CHCl3之間分配。使用6N HCl將水相的pH調(diào)節(jié)至～3，并用CHCl3洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，真空濃縮并不用進(jìn)一步純化直接使用(2.84g，13.64mmol，72％)LC-MS(ES)m/z＝209(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(5mL)中的4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(183mg，0.88mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(0.3g，0.85mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3，4-二氟-L-苯丙氨酸(2.03g，6.74mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(528mg，1.13mmol)。加入DIEA(0.77mL，4.41mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-75％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(149mg，30％)LC-MS(ES)m/z＝507(M+H)+ c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4--二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(149mg，0.265mmol)。加入肼(60μL，1.91mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(71mg，0.15mmol，57％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝377(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.96(d，J＝6.06Hz，2H)3.00-3.06(m，2H)3.97(s，3H)4.33-4.42(m，1H)6.48(d，J＝1.77Hz，1H)7.14(s，1H)7.30-7.42(m，2H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.99(d，J＝1.26Hz，1H)8.22(s，3H)8.35(d，J＝1.26Hz，1H)9.09(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例147
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-{(1S)-2-(3，4-氯苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(4mL)中的4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(160mg，0.62mmol)[根據(jù)實(shí)施例146的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(0.26g，0.67mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用3，4-二氯-N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-L-苯丙氨酸(2.03g，6.07mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(376mg，0.80mmol)。加入DIEA(0.55mL，3.15mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-75％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(149mg，30％)LC-MS(ES)m/z＝539(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4.5mL)和甲醇(0.45mL)中的N-{(1S)-2-(3，4-二氯苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(211mg，0.34mmol)。加入肼(75μL，2.390mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。結(jié)束后，將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(83mg，0.16mmol，48％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝411(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.95-3.07(m，4H)3.97(s，3H)4.32-4.43(m，1H)6.48(d，J＝1.77Hz，1H)7.29(dd，J＝8.21，1.89Hz，1H)7.47(d，J＝2.02Hz，1H)7.54(d，J＝8.08Hz，1H)7.60(d，J＝1.77Hz，1H)8.00(d，J＝1.26Hz，1H)8.22(s，3H)8.35(d，J＝1.01Hz，1H)9.11(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例148
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，6-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-{(1S)-2-(2，6-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3--二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8mL)中的4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(160mg，0.62mmol)[根據(jù)實(shí)施例146的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，6-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(231mg，0.69mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備]和PyBrop(353mg，0.75mmol)。加入DIEA(0.64mL，3.66mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-75％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(149mg，0.21mmol，30％)LC-MS(ES)m/z＝507(M+H)+ b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，6-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3.6mL)和甲醇(0.4mL)中的N-{(1S)-2-(2，6-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(168mg，0.32mmol)。加入肼(70μL，2.23mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(101mg，0.214mmol，68％)LC-MS(ES)m/z＝377(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.92-3.03(m，3H)3.17(m，1H)3.97(s，3H)4.46(m，1H)6.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.05(t，J＝7.83Hz，2H)7.27-7.38(m，1H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.99(d，J＝1.26Hz，1H)8.23(d，J＝1.26Hz，4H)8.92(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例149
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(15mL)中的4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(257mg，0.93mmol)[根據(jù)實(shí)施例146的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(476mg，0.81mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備，除了用2，5-二氟-L-苯丙氨酸(3.02g，15.0mmol)代替2，6-二氟-L-苯丙氨酸]和PyBrop(535mg，1.14mmol)。加入DIEA(0.808mL，4.63mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-75％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(225mg，34％)LC-MS(ES)m/z＝507(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(0.8mL)中的N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(225mg，0.31mmol)。加入肼(60μL，1.91mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。將該化合物再在反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)上進(jìn)一步純化，得到TFA鹽，將其在硅膠上(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)中和。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(90.5mg，0.19mmol，63％)LC-MS(ES)m/z＝377(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.95-3.01(m，2H)3.03-3.10(m，2H)3.92-3.98(m，3H)4.41-4.51(m，1H)6.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.05-7.13(m，1H)7.20(td，J＝9.09，4.55Hz，1H)7.27(ddd，J＝9.09，5.81，3.28Hz，1H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.99(d，J＝1.52Hz，1H)8.18(s，3H)8.29(d，J＝1.26Hz，1H)9.03(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例150
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-{(1S)-2-(2，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(10mL)中的4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(222mg，0.80mmol)[根據(jù)實(shí)施例146的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(331mg，0.78mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備，除了用2，5-二氟-L-苯丙氨酸(1.0g，4.97mmol)代替2，6-二氟-L-苯丙氨酸]和PyBrop(448mg，0.96mmol)。加入DIEA(700μL，4.01mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-75％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(249mg，0.36mmol，46％)LC-MS(ES)m/z＝507(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(5mL)和甲醇(1mL)中的N-{(1S)-2-(2，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(249mg，0.36mmol)。加入肼(80μL，2.55mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。化合物在反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)上進(jìn)一步純化，得到TFA鹽，將其在硅膠上(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)中和。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(81mg，0.18mmol，50％)LC-MS(ES)m/z＝377(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.88-2.98(m，2H)2.98-3.09(m，2H)3.93-3.98(m，3H)4.38-4.47(m，1H)6.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.00(td，J＝8.46，2.27Hz，1H)7.19(td，J＝9.85，2.53Hz，1H)7.38-7.45(m，1H)7.47(d，J＝1.77Hz，1H)7.99(d，J＝1.26Hz，1H)8.18(br.s，3H)8.27(d，J＝1.26Hz，1H)8.99(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例151
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向125mL密封燒瓶中加入于1，4-二噁烷(27ml)和水(7ml)中的4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(1.56g，6.64mmol)[根據(jù)制備例10的方法制備]，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.67g，8.03mmol)[根據(jù)制備例7的方法制備]，K2CO3(2.76g，19.97mmol)和Pd(PtBu3)2(170mg，0.33mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至85℃，持續(xù)3小時(shí)，冷卻至室溫，并在H2O和CHCl3之間分配。將有機(jī)級分干燥(Na2SO4)，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(0-15％EtOAc/己烷)純化(385mg，1.4mmol，30％)LC-MS(ES)m/z＝237(M+H)+。
b)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向100mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(31ml)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(1.34g，5.67mmol)。加入6N NaOH(31ml，186mmol)，將反應(yīng)混合物在70℃攪拌過夜。將反應(yīng)混合物通過緩慢添加6N HCl中和，并在CHCl3和H2O之間分配。分離各層，有機(jī)層用Na2SO4干燥，并除去溶劑。得到的固體不用進(jìn)一步純化而使用(0.71g，2.81mmol，96％)LC-MS(ES)m/z＝223(M+H)+。
c)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9mL)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(201mg，0.91mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(301mg，0.87mmol)[根據(jù)制備例6制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(4.98g，14.95mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(519mg，1.11mmol)。加入DIEA(790μL，4.52mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(247mg，45％)LC-MS(ES)m/z＝553(M+H)+。
d)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(6mL)和甲醇(600μL)中的N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(374mg，0.64mmol)。加入肼(125μL，3.98mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(135mg，0.27mmol，42％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝423(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.37(s，3H)2.95-3.11(m，4H)3.78(s，3H)4.32-4.42(m，1H)6.34(d，J＝1.77Hz，1H)7.48-7.56(m，3H)7.58-7.61(m，1H)7.67(s，1H)8.04(s，1H)8.21(s，3H)8.98(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例152
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9mL)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(201mg，0.91mmol)[根據(jù)實(shí)施例95的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(301mg，0.87mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(519mg，1.11mmol)。加入DIEA(790μL，4.52mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(186mg，32％)LC-MS(ES)m/z＝553(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(10mL)和甲醇(1mL)中的5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(185mg，0.34mmol)。加入肼(63μL，2.0mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(101mg，0.24mmol，72％)LC-MS(ES)m/z＝393(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.90-3.1(m，4H)3.85(s，3H)4.33(s，1H)6.48(d，J＝1.77Hz，1H)7.10(t，J＝8.84Hz，2H)7.32(dd，J＝8.46，5.68Hz，2H)7.55(d，J＝2.02Hz，1H)8.19(s，3H)8.23-8.28(m，1H)9.25(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例153
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(10mL)中的5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(226mg，0.93mmol)[根據(jù)實(shí)施例95的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(519mg，1.349mmol)[根據(jù)制備例6制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(515mg，1.1mmol)。加入DIEA(820μL，4.70mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(379mg，69％)LC-MS(ES)m/z＝573(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(10mL)和甲醇(1mL)中的5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(378mg，0.64mmol)。加入肼(122μL，3.89mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(222mg，0.41mmol，64％)LC-MS(ES)m/z＝443(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.05(d，J＝6.82Hz，4H)3.84(s，3H)4.37(d，J＝5.05Hz，1H)6.46(d，J＝1.77Hz，1H)7.49-7.57(m，3H)7.58-7.61(m，1H)7.67(s，1H)8.20(s，3H)8.24(s，1H)9.31(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例154
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9mL)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(200mg，0.90mmol)[根據(jù)實(shí)施例151的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(288mg，0.86mmol)[根據(jù)制備例6制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(512mg，1.09mmol)。加入DIEA(790μL，4.52mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(162mg，32％)LC-MS(ES)m/z＝503(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(162mg，0.29mmol)于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(300μL)中的溶液。加入肼(58μL，1.85mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化?；衔镌诜聪郒PLC上(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)進(jìn)一步純化，得到TFA鹽，將其在硅膠上(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)中和。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(222mg，0.41mmol，64％)LC-MS(ES)m/z＝373(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.38(s，3H)2.89-3.02(m，4H)3.79(s，3H)4.26-4.48(m，1H)6.36(d，J＝1.77Hz，1H)7.10(t，J＝8.72Hz，2H)7.26-7.35(m，2H)7.52(d，J＝1.77Hz，1H)8.02(s，1H)8.17(s，3H)8.88(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例155
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9mL)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(200mg，0.90mmol)[根據(jù)實(shí)施例151的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(291mg，0.87mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-氟-L-苯丙氨酸(5.03g，17.8mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(512mg，1.09mmol)。加入DIEA(790μL，4.52mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(250mg，50％)LC-MS(ES)m/z＝503(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(400μL)中的N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(250mg，0.45mmol)。加入肼(66μL，2.10mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。化合物在反相HPLC上(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)進(jìn)一步純化，得到TFA鹽，將其在硅膠上(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)中和。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(142mg，0.31mmol，70％)LC-MS(ES)m/z＝373(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.38(s，3H)2.92-3.04(m，4H)3.79(s，3H)4.30-4.43(m，1H)6.36(d，J＝1.77Hz，1H)7.02(td，J＝8.53，2.15Hz，1H)7.13(t，J＝7.83Hz，2H)7.26-7.35(m，1H)7.52(d，J＝2.02Hz，1H)8.04(s，1H)8.19(s，3H)8.93(d，J＝8.34Hz，1H)。
實(shí)施例156
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
在室溫，將NBS(747mg，4.20mmol)分批加至50mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(17mL)中的4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(860mg，3.48mmol)[根據(jù)實(shí)施例37的方法制備]。將該混合物加熱至70℃，持續(xù)1.5小時(shí)，冷卻至室溫，并在CHCl3和H2O之間分配。將有機(jī)層用Na2SO4干燥，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(20-40％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(867mg，83％)LC-MS(ES)m/z＝303(M+H)+。
b)4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向20mL密封管反應(yīng)器中加入于四氫呋喃(THF)(8.5mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(505mg，1.68mmol)，環(huán)丙基硼酸(447mg，5.20mmol)，碳酸銫(1.90g，5.84mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(43.6mg，0.05mmol)。將反應(yīng)加熱至70℃，持續(xù)1.5小時(shí)，冷卻，并在CHCl3和H2O之間分配。將有機(jī)層用Na2SO4干燥，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(20-40％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.42g，1.60mmol，95％)LC-MS(ES)m/z＝251(M+H)+。
c)4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向100mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(8ml)中的4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(0.42g，1.60mmol)。緩慢加入6N NaOH(8ml，48.0mmol)，并將反應(yīng)在70℃攪拌過夜。反應(yīng)冷卻，并在CHCl3和H2O之間分配。通過添加6N HCl，將水層的pH調(diào)節(jié)至～3。分離各層，有機(jī)層用Na2SO4干燥，并除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(0.42g，1.60mmol，95％)，其不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z＝249(M+H)+。
d)4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(6mL)中的4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(105mg，0.42mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(152mg，0.39mmol)[根據(jù)制備例6制備]和PyBrop(246mg，0.52mmol)。加入DIEA(370μL，2.19mmol)，并將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(171mg，66％)LC-MS(ES)m/z＝579(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(5mL)和甲醇(2mL)中的4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(102mg，0.18mmol)。加入肼(40μL，1.27mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(65mg，0.12mmol，66％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝449(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.45-0.54(m，2H)0.76-0.83(m，2H)1.62-1.71(m，1H)3.03-3.21(m，4H)3.82(s，3H)4.46-4.56(m，1H)7.21(s，1H)7.42(t，J＝7.45Hz，1H)7.53(t，J＝7.45Hz，1H)7.66(dd，J＝19.96，7.58Hz，2H)7.95(d，J＝1.26Hz，1H)8.18(s，3H)8.24(d，J＝1.26Hz，1H)9.11(d，J＝9.09Hz，1H)。
實(shí)施例157
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向5mL密封管反應(yīng)器中加入于1，4-二噁烷(6.3mL)和水(1.6mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(473mg，1.57mmol)[根據(jù)實(shí)施例156的方法制備]，吡啶-三乙烯基環(huán)三硼氧烷(1∶1)(666mg，2.77mmol)，Pd(PtBu3)2(16.8mg，0.03mmol)和Cs2CO3(1.72g，5.28mmol)。將反應(yīng)在70℃加熱，持續(xù)2小時(shí)，并在CHCl3(75mL)/H2O(75mL)之間分配。將有機(jī)層用Na2SO4干燥，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/己烷)純化，得到所需的產(chǎn)物L(fēng)C-MS(ES)m/z＝249(M+H)+。
b)4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向100mL圓底燒瓶中加入于乙酸乙酯(15mL)中的4-(4-乙烯基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯和10％Pd/C。將該混合物稍微排空，用氣球中的H2重新填充，并在H2的氣氛中劇烈攪拌1小時(shí)。反應(yīng)通過0.2μm PTFE膜過濾器過濾，并不用進(jìn)一步純化而使用(153mg，0.60mmol，87％)LC-MS(ES)m/z＝251(M+H)+。
c)4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向100mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)中的4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(192mg，0.77mmol)。緩慢加入6N NaOH(4mL，24.0mmol)，將反應(yīng)在70℃攪拌過夜。將反應(yīng)冷卻至室溫，并在CHCl3和H2O之間分配，通過添加6N HCl，并將水層的pH調(diào)節(jié)至pH 3。分離各層，有機(jī)層用Na2SO4干燥，并除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(181mg，定量)，不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z＝237(M+H)+。
d)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(6mL)中的4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(106mg，0.45mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(164mg，0.43mmol)[根據(jù)制備例6制備]和PyBrop(254mg，0.54mmol)。加入DIEA(400μL，2.29mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(182mg，0.32mmol，71％)LC-MS(ES)m/z＝567(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(5mL)和甲醇(2mL)中的N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(101mg，0.18mmol)。加入肼(40μL，1.27mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(65mg，0.12mmol，68％)LC-MS(ES)m/z＝437(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.10(t，J＝7.45Hz，3H)2.44(q，J＝7.41Hz，2H)2.94-3.17(m，4H)3.80(s，3H)4.41-4.57(m，1H)7.37-7.45(m，2H)7.53(t，J＝7.45Hz，1H)7.66(dd，J＝19.96，7.58Hz，2H)7.88(d，J＝1.01Hz，1H)8.16(s，4H)9.10(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例158
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸
在室溫，將NCS(1.355g，10.15mmol)分批加至150mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(40ml)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2.0g，8.46mmol)[根據(jù)制備例10的方法制備]。將該混合物加熱至70℃，持續(xù)2小時(shí)。加入6N NaOH(28ml，168mmol)，并將該混合物在70℃再攪拌另外2小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，并在CHCl3和H2O之間分配。通過添加6N HCl，將水層的pH調(diào)節(jié)至～3。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(2.36g，9.19mmol，定量)LC-MS(ES)m/z＝257(M+H)+。
b)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(181mg，0.70mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(250mg，0.65mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(4.98g，15.0mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(399mg，0.85mmol)。加入DIEA(620μL，3.55mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(319mg，0.50mmol，71％)LC-MS(ES)m/z＝587(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4.9mL)和甲醇(0.5mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(319mg，0.50mmol)。加入肼(119μL，3.79mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(204mg，0.39mmol，79％)LC-MS(ES)m/z＝457(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.33(s，3H)2.95-3.10(m，4H)3.71(s，3H)4.31-4.41(m，1H)7.49-7.61(m，3H)7.66(s，1H)7.69(s，1H)7.94(s，1H)8.16(s，3H)8.90(s，1H)。
實(shí)施例159
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸
在室溫，將NBS(1.84g，10.33mmol)分批加至150mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(40ml)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2g，8.46mmol)[根據(jù)制備例10的方法制備]。將該混合物加熱至70℃，持續(xù)1小時(shí)。然后加入6N NaOH(28ml，168mmol)，并將混合物在70℃攪拌2小時(shí)。將混合物在CHCl3和H2O之間分配，并將水層使用6N HCl調(diào)節(jié)為酸性。水相用CHCl3洗滌幾次，將有機(jī)級分合并，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(2.68g，8.9mmol，定量)LC-MS(ES)m/z＝302(M+H)+。
b)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8.5mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(256mg，0.85mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(1272mg，3.80mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(485mg，1.03mmol)。加入DIEA(750μL，4.29mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(319mg，0.50mmol，71％)LC-MS(ES)m/z＝583(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(133mg，0.21mmol)。加入肼(50μL，1.59mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(90mg，0.17mmole，83％)LC-MS(ES)m/z＝453(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.33(s，3H)2.82-3.08(m，4H)3.72(s，3H)4.24-4.39(m，1H)7.11(t，J＝8.84Hz，2H)7.26-7.35(m，2H)7.69(s，1H)7.89(s，1H)8.03-8.25(m，3H)8.73-8.90(m，1H)。
實(shí)施例160
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(14mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(276mg，1.08mmol)[根據(jù)實(shí)施例158的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(317mg，0.95mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(612mg，1.31mmol)。加入DIEA(940μL，5.38mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(319mg，0.50mmol，71％)LC-MS(ES)m/z＝537(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(145mg，0.25mmol)。加入肼(60μL，1.91mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(88mg，0.19mmol，77％)LC-MS(ES)m/z＝407(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.34(s，3H)2.81-3.10(m，4H)3.72(s，3H)4.25-4.40(m，1H)7.10(t，J＝8.84Hz，2H)7.31(dd，J＝8.21，5.68Hz，2H)7.69(s，1H)7.94(s，1H)8.15(s，3H)8.85(s，1H)。
實(shí)施例161
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(187mg，0.73mmol)[根據(jù)實(shí)施例158的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(233mg，0.70mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-氟-L-苯丙氨酸(5.03g，17.8mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(412mg，0.88mmol)。加入DIEA(640μL，3.66mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(180mg，0.30mmol，42％)LC-MS(ES)m/z＝537(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(186mg，0.31mmol)。加入肼(76μL，2.42mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(108mg，0.231，74％)LC-MS(ES)m/z＝407(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.34(s，3H)2.91-3.03(m，4H)3.71(s，3H)4.31-4.41(m，1H)7.02(td，J＝8.59，2.02Hz，1H)7.13(t，J＝7.07Hz，2H)7.26-7.36(m，1H)7.69(s，1H)7.95(s，1H)8.15(s，3H)8.88(d，J＝6.32Hz，1H)。
實(shí)施例162
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(7mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(191mg，0.63mmol)[根據(jù)實(shí)施例159的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(209mg，0.62mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-氟-L-苯丙氨酸(5.03g，17.8mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(359mg，0.77mmol)。加入DIEA(560μL，3.21mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(171mg，0.29mmol，46％)LC-MS(ES)m/z＝583(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(171mg，0.29mmol)。加入肼(66μL，2.10mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(123mg，0.26mmol，88％)LC-MS(ES)m/z＝453(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.33(s，3H)2.91-3.03(m，4H)3.72(s，3H)4.31-4.41(m，1H)7.02(td，J＝8.46，2.02Hz，1H)7.12(d，J＝7.33Hz，2H)7.27-7.35(m，1H)7.64-7.71(m，1H)7.92(s，1H)8.14(s，3H)8.79-8.93(m，1H)。
實(shí)施例163
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(6mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(180mg，0.60mmol)[根據(jù)實(shí)施例159的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(203mg，0.58mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(4.98g，15.0mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(340mg，0.72mmol)。加入DIEA(530μL，3.03mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(259mg，0.41mmol，69％)LC-MS(ES)m/z＝633(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(259mg，0.41mmol)。加入肼(90μL，2.87mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(172mg，0.33mmol，80％)LC-MS(ES)m/z＝503(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.32(s，3H)3.03(d，J＝6.06Hz，4H)3.71(d，J＝5.81Hz，3H)4.31-4.41(m，1H)7.49-7.56(m，2H)7.60(d，J＝6.82Hz，1H)7.64-7.71(m，2H)7.93(d，J＝12.88Hz，1H)8.18(s，3H)8.88-8.99(m，1H)。
實(shí)施例164
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯
在室溫，將NBS(2.03g，11.41mmol)分批加至75mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(40ml)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2.1g，8.89mmol)[根據(jù)制備例10的方法制備]。將該混合物加熱至70℃，持續(xù)1小時(shí)。反應(yīng)混合物在CHCl3和H2O之間分配，有機(jī)層用Na2SO4干燥，將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(15-40％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(2.57g，8.15mmol，92％)LC-MS(ES)m/z＝316(M+H)+。
b)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯
向350mL密封燒瓶反應(yīng)器中加入于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(41ml)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(2.57g，8.15mmol)，三甲基環(huán)三硼氧烷(2.27ml，16.31mmol)，K2CO3(3.47g，25.1mmol)和Pd(dppf)Cl2(426mg，0.83mmol)。將反應(yīng)在110℃加熱，持續(xù)1小時(shí)。將該混合物在CHCl3/H2O之間分配，分離有機(jī)層，并用Na2SO4干燥。將得到的物質(zhì)吸附至硅膠上，并通過柱色譜(0-15％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(1.3g，4.76mmol，58％)LC-MS(ES)m/z＝251(M+H)+。
c)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸
向100mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(25mL)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(1.31g，5.23mmol)。緩慢加入6NNaOH(30mL，180mmol)，并將反應(yīng)在70℃攪拌過夜。反應(yīng)冷卻至室溫，并在CHCl3和H2O之間分配，通過添加6N HCl，并將水層的pH調(diào)節(jié)至pH3。分離各層，將有機(jī)層用Na2SO4干燥，并除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.3g，5.5mmol，定量)，其不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z＝237(M+H)+。
d)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(7mL)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(170mg，0.68mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(256mg，0.67mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(4.98g，15.0mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(387mg，0.83mmol)。加入DIEA(600μL，3.44mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(311mg，0.55mmol，80％)LC-MS(ES)m/z＝567(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1.4mL)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(311mg，0.55mmol)。加入肼(122μL，3.89mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(234mg，0.44mmol，79％)LC-MS(ES)m/z＝437(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.87(s，3H)2.26(s，3H)3.03(d，J＝6.82Hz，4H)3.62(s，3H)4.31-4.41(m，1H)7.38(s，1H)7.49-7.56(m，2H)7.58-7.61(m，1H)7.65(s，1H)7.87(s，1H)8.20(s，3H)8.89(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例165
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3--二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8mL)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(207mg，0.83mmol)[根據(jù)實(shí)施例164的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(279mg，0.83mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-氟-L-苯丙氨酸(5.03g，17.8mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(469mg，1.00mmol)。加入DIEA(730μL，4.18mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(209mg，0.36mmol，43％)LC-MS(ES)m/z＝517(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(201mg，0.39mmol)。加入肼(86μL，2.74mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(163mg，0.34mmol，87％)LC-MS(ES)m/z＝387(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.88(s，3H)2.27(s，3H)2.87-3.09(m，4H)3.173.63(s，3H)4.28-4.45(m，1H)6.97-7.06(m，1H)7.13(t，J＝7.20Hz，2H)7.27-7.35(m，1H)7.38(s，1H)7.89(s，1H)8.20(s，3H)8.88(d，J＝7.58Hz，1H)。
實(shí)施例166
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(10mL)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(253mg，1.02mmol)[根據(jù)實(shí)施例164的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(335mg，1.00mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(574mg，1.23mmol)。加入DIEA(930μL，5.32mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(132mg，0.25mmol，24％)LC-MS(ES)m/z＝517(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(2mL)和甲醇(1mL)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(132mg，0.26mmol)。加入肼(57μL，1.82mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(95∶5∶0.5CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(104mg，0.22mmol，84％)LC-MS(ES)m/z＝387(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.88(s，3H)2.27(s，3H)2.84-3.11(m，4H)3.63(s，3H)4.24-4.39(m，1H)7.10(t，J＝8.72Hz，2H)7.31(dd，J＝8.21，5.68Hz，2H)7.38(s，1H)7.87(s，1H)8.18(s，3H)8.83(s，1H)。
實(shí)施例167
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸
在室溫，將NBS(1.243g，6.98mmol)分批加至150mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(40ml)中的5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(1.47g，5.73mmol)[根據(jù)實(shí)施例151的方法制備]。將該混合物加熱至70℃，持續(xù)1小時(shí)。然后加入6N NaOH(20ml，120mmol)，并將該混合物在70℃再攪拌2小時(shí)。將該混合物在CHCl3和H2O之間分配，有機(jī)層用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，其不用進(jìn)一步純化而使用(385mg，1.4mmol，30％)LC-MS(ES)m/z＝302(M+H)+。
b)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(6mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸(204mg，0.60mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(215mg，0.64mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-氟-L-苯丙氨酸(5.03g，17.7mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(380mg，0.81mmol)。加入DIEA(570μL，3.26mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(247mg，45％)LC-MS(ES)m/z＝603(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(1.2mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(133mg，0.22mmol)。加入肼(50μL，1.59mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(145mg，0.30mmol，66％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝473(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.91-3.03(m，4H)3.77(s，3H)4.30-4.41(m，1H)7.04(td，J＝8.53，2.15Hz，1H)7.12(d，J＝7.07Hz，2H)7.28-7.36(m，1H)7.74(s，1H)8.02-8.14(m，4H)9.06(s，1H)。
實(shí)施例168
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(7mL)中的5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(264mg，0.95mmol)[根據(jù)實(shí)施例96的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(306mg，0.80mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(4.98g，15.0mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(450mg，0.96mmol)。加入DIEA(660μl，3.78mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(303mg，0.44mmol，56％)LC-MS(ES)m/z＝607(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1.5mL)中的5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(303mg，0.50mmol)。加入肼(120μL，3.82mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(177mg，0.31mmol，61％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝479(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.97-3.08(m，4H)3.76(s，3H)4.28-4.44(m，1H)7.50-7.61(m，3H)7.66(s，1H)7.71-7.75(m，1H)8.10(s，4H)9.16(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例169
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(5mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸(183mg，0.54mmol)[根據(jù)實(shí)施例167的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(201mg，0.52mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(4.98g，15.0mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(298mg，0.64mmol)。加入DIEA(470μL，2.69mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(246mg，0.36mmol，69％)LC-MS(ES)m/z＝653(M+H)+。
d)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(246mg，0.38mmol)。加入肼(0.083mL，2.64mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(134mg，0.22mmol，57％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝523(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.04(d，J＝4.55Hz，4H)3.76(s，3H)4.29-443(m，1H)7.50-7.61(m，3H)7.66(s，1H)7.70-7.75(m，1H)8.06-8.18(m，4H)9.17(s，1H)。
實(shí)施例170
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(10mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸(340mg，1.00mmol)[根據(jù)實(shí)施例167的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(374mg，1.12mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(626mg，1.34mmol)。加入DIEA(980μL，5.61mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(229mg，0.35mmol，31％)LC-MS(ES)m/z＝603(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1.2mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(229mg，0.38mmol)。加入肼(90μL，2.87mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(99mg，0.17mmol，45％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝473(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.90(d，J＝6.82Hz，2H)2.95-3.06(m，2H)3.77(s，3H)4.27-4.39(m，1H)7.11(t，J＝8.72Hz，2H)7.26-7.35(m，2H)7.74(s，1H)8.01-8.21(m，4H)9.06(s，1H)。
實(shí)施例171
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9.5mL)中的5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(320mg，1.16mmol)[根據(jù)實(shí)施例168的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(318mg，0.95mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(535mg，1.14mmol)。加入DIEA(840μl，4.81mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(106mg，0.16mmol，17％)LC-MS(ES)m/z＝557(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(1.5mL)中的5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(106mg，0.19mmol)。加入肼(45μL，1.43mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(65mg，0.12mmol，65％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝429(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.82-3.10(m，4H)3.77(s，3H)4.27-4.38(m，1H)7.11(t，J＝8.72Hz，2H)7.26-7.35(m，2H)7.68-7.76(m，1H)8.10(s，4H)9.11(d，J＝7.33Hz，1H)。
實(shí)施例172
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3--二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8.5mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(219mg，0.85mmol)[根據(jù)實(shí)施例158的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(290mg，0.82mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備，除了用2，5-二氟-L-苯丙氨酸(3.02g，15.0mmol)代替2，6-二氟-L-苯丙氨酸]和PyBrop(481mg，1.03mmol)。加入DIEA(750μL，4.29mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(246mg，0.44mmol，52％)LC-MS(ES)m/z＝555(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(246mg，0.44mmol)。加入肼(100μL，3.19mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(147mg，0.28mmol，64％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝425(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.34(s，3H)2.93-3.07(m，4H)3.71(s，3H)4.34-4.50(m，1H)7.04-7.14(m，1H)7.19(td，J＝9.03，4.67Hz，2H)7.69(s，1H)7.93(s，1H)8.14(s，3H)8.87(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例173
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(7.5mL)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(171mg，0.77mmol)[根據(jù)實(shí)施例151的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(270mg，0.77mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備，除了用2，5-二氟-L-苯丙氨酸(3.02g，15.0mmoD代替2，6-二氟-L-苯丙氨酸]和PyBrop(436mg，0.93mmol)。加入DIEA(680μL，3.89mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(246mg，0.44mmol，52％)LC-MS(ES)m/z＝521(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(243mg，0.47mmol)。加入肼(0.103mL，3.27mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜純化(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(132mg，0.27mmol，58％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝391(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.38(s，3H)2.87-3.10(m，4H)3.78(s，3H)4.36-4.47(m，1H)6.35(d，J＝1.77Hz，1H)7.05-7.13(m，1H)7.16-7.28(m，2H)7.52(d，J＝1.52Hz，1H)8.00(s，1H)8.16(s，3H)8.88(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例174
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8.5mL)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酸(208mg，0.88mmol)[根據(jù)實(shí)施例164的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(288mg，0.82mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備，除了用2，5-二氟-L-苯丙氨酸(3.02g，15.0mmol)代替2，6-二氟-L-苯丙氨酸]和PyBrop(503mg，1.07mmol)。加入DIEA(770μL，4.41mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(292mg，0.55mmol，62％)LC-MS(ES)m/z＝535(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(5mL)和甲醇(1mL)中的N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺(292mg，0.55mmol)。加入肼(120μL，3.82mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(163mg，0.32mmol，59％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝405(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.88(s，3H)2.27(s，3H)2.94-3.06(m，4H)3.63(s，3H)4.35-4.49(m，1H)7.05-7.12(m，1H)7.16-7.27(m，2H)7.38(s，1H)7.86(s，1H)8.16(s，3H)8.83(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例175
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8.5mL)中的5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(235mg，0.85mmol)[根據(jù)實(shí)施例96的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(290mg，0.82mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備，除了用2，5-二氟-L-苯丙氨酸(3.02g，15.0mmol)代替2，6-二氟-L-苯丙氨酸]和PyBrop(479mg，1.02mmol)。加入DIEA(742μL，4.25mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(174mg，0.30mmol，36％)LC-MS(ES)m/z＝575(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3.6mL)和甲醇(1mL)中的5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(174mg，0.30mmol)。加入肼(70μL，2.23mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(115mg，0.21mmol，70％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝445(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.88-3.09(m，4H)3.76(s，3H)4.33-4.48(m，1H)7.06-7.15(m，1H)7.20(td，J＝9.09，4.55Hz，2H)7.74(s，1H)8.10(s，1H)8.13(s，3H)9.14(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例176
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向350mL密封燒瓶反應(yīng)器中加入于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(57mL)中的4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(3.45g，11.46mmol)[根據(jù)實(shí)施例156的方法制備]，三甲基環(huán)三硼氧烷(2.7ml，19.40mmol)，K2CO3(4.75g，34.4mmol)和Pd(dppf)Cl2(599mg，1.17mmol)。將反應(yīng)在110℃加熱，持續(xù)1小時(shí)，冷卻至室溫，并在CHCl3/H2O之間分配。分離有機(jī)層，用Na2SO4干燥，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(0-30％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(2.07g，8.76mmol，76％)LC-MS(ES)m/z＝251(M+H)+。
b)4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
在室溫，將NCS(1.78g，13.09mmol)分批加至125mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(40ml)中的4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2.07g，8.76mmol)。將該混合物加熱至100℃，持續(xù)1小時(shí)。結(jié)束后，將產(chǎn)物在CHCl3和H2O之間分配，有機(jī)層用Na2SO4干燥，溶劑通過真空蒸餾除去，得到標(biāo)題化合物(2.18g，7.97mmol，91％)，其不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z＝271(M+H)+。
c)4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向100mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(30ml)中的4-(3-氯-1，4--二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(2.15g，7.94mmol)。緩慢加入6N NaOH(30mL，180mmol)，并將該反應(yīng)在70℃攪拌過夜。反應(yīng)冷卻至室溫，并在CHCl3和H2O之間分配，通過添加6N HCl，并將水層的pH調(diào)節(jié)至～3。分離各層，有機(jī)層用Na2SO4干燥，并除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.35g，5.26mmol，66％)，其不用進(jìn)一步純化而在下一步中使用LC-MS(ES)m/z＝257(M+H)+。
d)4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(10mL)中的4-(3-氯-1，4--二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(294mg，1.14mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(409mg，1.22mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(645mg，1.38mmol)。加入DIEA(1mL，5.73mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(534mg，0.92mmol，81％)LC-MS(ES)m/z＝537(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(9mL)和甲醇(1mL)中的4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(534mg，0.994mmol)。加入肼(220μL，7.01mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(354mg，0.70mmol，70％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝407(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.99(s，3H)2.91-3.02(m，4H)3.79(s，3H)4.30-4.41(m，1H)7.10(t，J＝8.84Hz，2H)7.27-7.36(m，2H)8.01(d，J＝1.26Hz，1H)8.15(s，3H)8.21(d，J＝1.26Hz，1H)9.04(d，J＝8.34Hz，1H)。
實(shí)施例177
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(10mL)中的4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(291mg，1.13mmol)[根據(jù)實(shí)施例176的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(409mg，1.22mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-氟-L-苯丙氨酸(5.03g，17.8mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(654mg，1.39mmol)。加入DIEA(1mL，5.73mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(427mg，0.76mmol，67％)LC-MS(ES)m/z＝537(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(7.5mL)和甲醇(1mL)中的4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(427mg，0.79mmol)。加入肼(175μL，5.58mmol)，并將該溶液在25℃攪拌過夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(296mg，0.59mmol，74％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝407(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.99(s，3H)2.95-3.06(m，4H)3.79(s，3H)4.33-4.45(m，1H)7.02(td，J＝8.59，2.02Hz，1H)7.09-7.18(m，2H)7.26-7.36(m，1H)8.01(d，J＝1.01Hz，1H)8.16(s，3H)8.22(s，1H)9.07(d，J＝8.34Hz，1H)。
實(shí)施例178
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(3-氯-1，4-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(6mL)中的4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(150mg，0.58mmol)[根據(jù)實(shí)施例176的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(176mg，0.54mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用3-環(huán)己基-N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-L-丙氨酸(5g，18.4mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(336mg，0.72mmol)。加入DIEA(520μL，2.98mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(336mg，0.61mmol，定量)LC-MS(ES)m/z＝526(M+H)+。
b)N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(6.5mL)和甲醇(1mL)中的4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-環(huán)己基-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(366mg，0.697mmol)。加入肼(155μL，4.94mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(173mg，0.35mmol，50％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝395(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.80-0.92(m，1H)0.92-1.01(m，1H)1.13(d，J＝6.57Hz，2H)1.22(d，J＝12.88Hz，1H)1.29(s，1H)1.32-1.43(m，1H)1.48-1.56(m，1H)1.58(d，J＝5.05Hz，1H)1.63(s，3H)1.73-1.84(m，1H)1.99(s，3H)2.94(d，J＝5.31Hz，2H)3.78(s，3H)4.22-4.36(m，1H)8.03(s，1H)8.05(s，3H)8.19(s，1H)8.80(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例179
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9.5mL)中的4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(238mg，0.93mmo1)[根據(jù)實(shí)施例176的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(355mg，0.92mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(5.0g，15.0mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(532mg，1.13mmol)。加入DIEA(820μL，4.70mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(448mg，0.72mmol，78％)LC-MS(ES)m/z＝587(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(7.5mL)和甲醇(1mL)中的4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(468mg，0.80mmol)。加入肼(175μL，5.58mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(321mg，0.58mmol，72％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝457(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.98(s，3H)3.05(d，J＝7.07Hz，4H)3.77(s，3H)4.33-4.44(m，1H)7.49-7.57(m，2H)7.58-7.62(m，1H)7.66(s，1H)8.01(d，J＝1.26Hz，1H)8.11(s，3H)8.17(d，J＝1.26Hz，1H)9.02(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例180
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(6mL)中的5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(147mg，0.61mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(216mg，0.61mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備，除了用2，5-二氟-L-苯丙氨酸(3.02g，15.0mmol)代替2，6-二氟-L-苯丙氨酸]和PyBrop(341.4mg，0.73mmol)。加入DIEA(530μL，3.03mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(233mg，0.43mmol，71％)LC-MS(ES)m/z＝541(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(5mL)和甲醇(1mL)中的5-氯-N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(233mg，0.43mmol)。加入肼(95μL，3.03mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(165mg，0.32mmol，75％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝411(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.88-3.14(m，4H)3.85(s，3H)4.37-4.50(m，1H)6.48(d，J＝1.77Hz，1H)7.09(t，J＝8.34Hz，1H)7.19(dt，J＝9.09，4.55Hz，1H)7.29(ddd，J＝8.84，5.68，3.16Hz，1H)7.55(d，J＝1.52Hz，1H)8.22(s，3H)8.27(s，1H)9.32(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例181
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例109的方法制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(184mg，0.55mmol)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮[根據(jù)制備例6制備]LC-MS(ES)m/z＝401(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.04(t，J＝7.33Hz，3H)2.13-2.33(m，5H)2.86-3.08(m，4H)3.60(s，3H)4.27-4.43(m，1H)6.96-7.07(m，1H)7.11(d，J＝6.32Hz，2H)7.30(s，1H)7.43(s，1H)7.85(s，1H)8.19(s，3H)8.85(s，1H)。
實(shí)施例182
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例109的方法制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(207mg，0.62mmol)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮[根據(jù)制備例6制備]LC-MS(ES)m/z＝401(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.04(t，J＝7.20Hz，3H)2.25(s，5H)2.88-3.00(m，4H)3.61(s，3H)4.25-4.40(m，1H)7.01-7.17(m，2H)7.26-7.35(m，2H)7.42(s，1H)7.82(s，1H)8.17(s，3H)8.81(s，1H)。
實(shí)施例183
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例109的方法制備，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(158mg，0.41mmol)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮[根據(jù)制備例6制備]LC-MS(ES)m/z＝451(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.04(t，J＝7.33Hz，3H)2.24(s，5H)3.03(d，J＝6.32Hz，4H)3.59(s，3H)4.35(s，1H)7.42(s，1H)7.46-7.57(m，2H)7.59(d，J＝6.57Hz，1H)7.64(s，1H)7.84(s，1H)8.20(s，3H)8.88(s，1H)。
實(shí)施例184
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的制備 a)5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
向帶有冷凝器的200mL圓底燒瓶中加入于甲醇(100mL)中的5-甲基-2-呋喃甲酸(2.5g，19.82mmol)。在室溫，緩慢加入H2SO4(10.5mL，197mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)過夜。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并將NaHCO3飽和溶液加入使成中性pH，接著添加5N NaOH至pH 10。加入CHCl3，并分離有機(jī)相，用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(2.3g，16.3mmol，82％)LC-MS(ES)m/z＝141(M+H)+。
b)4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
在室溫，向5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(2.33g，16.29mmol)和氯化鋁(3.3g，24.75mmol)于氯仿(50ml)中的溶液中加入Br2(1.1ml，21.35mmol)。將得到的溶液在150mL密封管反應(yīng)器中在室溫?cái)嚢?小時(shí)。結(jié)束后，將溶液在冰浴中冷卻，加入H2O，并將反應(yīng)在CHCl3/H2O之間分配。有機(jī)層用NaHCO3洗滌，然后用Na2S2O3洗滌。將有機(jī)層用Na2SO4干燥，濃縮，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(0-20％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(2.13g，9.72mmol，60％)LC-MS(ES)m/z＝221(M+H)+。
c)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
向5mL密封燒瓶反應(yīng)器中加入于1，4-二噁烷(23mL)中的4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(1.13g，5.16mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.31g，6.30mmol)[根據(jù)制備例7的方法制備]，K3PO4(3.87g，18.23mmol)和Pd2(dba)3(153mg，0.17mmol)和P(OMe)3(32μL，0.27mmol)。將反應(yīng)在95℃加熱，持續(xù)4小時(shí)，冷卻至室溫，并在CHCl3/H2O之間分配。分離有機(jī)層，用Na2SO4干燥，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(0-15％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(967mg，4.39mmol，85％)LC-MS(ES)m/z＝271(M+H)+。
d)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸
在室溫，將NCS(709mg，5.31mmol)分批加至150mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(20mL)中的5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(967mg，4.39mmol)。將混合物加熱至70℃，持續(xù)1小時(shí)。然后加入6N NaOH(20mL，120mmol)，并將該混合物在70℃再攪拌2小時(shí)。將混合物在CHCl3和H2O之間分配，并使用6N HCl將水相的pH調(diào)節(jié)至～3。分離有機(jī)層，用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(1.13g，4.41mmol，定量)，其不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z＝241(M+H)+。
e)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(244mg，0.95mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(320mg，0.95mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-氟-L-苯丙氨酸(5.0g，17.8mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(533mg，1.14mmol)。加入DIEA(830μL，4.75mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(242mg，0.465mmol，49％)LC-MS(ES)m/z＝521(M+H)+。
f)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3.6mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(238mg，0.46mmol)。加入肼(100μL，3.19mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(157mg，0.32mmol，71％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝391(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.31(s，3H)2.91-3.03(m，4H)3.73(s，3H)4.36-4.49(m，1H)7.03(t，J＝7.71Hz，1H)7.07-7.14(m，2H)7.29-7.37(m，1H)7.39(s，1H)7.67(s，1H)8.14(s，3H)8.65(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例185
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸
在-78℃，經(jīng)15分鐘，將2-(甲氧基)噻吩(1.01g，8.85mmol)緩慢地加至100mL圓底燒瓶中，該燒瓶含有于四氫呋喃(THF)(40mL)中的2.5MnBuLi的己烷溶液(3.8mL，9.50mmol)。溫?zé)嶂潦覝睾?，并攪?小時(shí)，將該混合物冷卻至-35℃，并加入粉碎的固體CO2。將混合物溫?zé)嶂潦覝?，持續(xù)3小時(shí)，并在冰浴中冷卻，用NH4Cl(飽和)終止。將該冷反應(yīng)混合物在CHCl3/H2O之間分配，使用6N HCl將水層調(diào)節(jié)為酸性。分離的有機(jī)層用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(1.3g，8.05mmol，91％)，其不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z＝159(M+H)+。
b)5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸甲酯
向配有冷凝器的200mL圓底燒瓶中加入于甲醇(40mL)中的5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸(1.3g，8.22mmol)。在室溫緩慢加入H2SO4(5mL，94mmol)，并將該反應(yīng)在50℃攪拌過夜。將混合物冷卻至0℃，并將飽和NaHCO3加入使成中性pH，接著添加5N NaOH至pH 10。將該混合物在H2O/CHCl3之間分配，分離有機(jī)相，并用Na2SO4干燥。將該溶液吸附至硅膠上，并通過柱色譜(5-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(827mg，4.56mmol，56％)LC-MS(ES)m/z＝173(M+H)+。
c)4-溴-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸甲酯
在室溫，將NBS(903mg，5.07mmol)分批加至5mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(20mL)中的5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸甲酯(0.73g，4.23mmol)，并將該反應(yīng)攪拌1小時(shí)。加入另外的NBS(249mg)，在室溫1小時(shí)后，將產(chǎn)物在CHCl3和H2O之間分配。將有機(jī)層用Na2SO4干燥，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(0-25％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(825mg，3.19mmol，75％)LC-MS(ES)m/z＝252(M+H)+。
d)5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向350mL密封燒瓶反應(yīng)器中加入于1，4-二噁烷(12mL)和水(3mL)中的4-溴-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸甲酯(772mg，3.07mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(773mg，3.72mmol)[根據(jù)制備例7的方法制備]，K2CO3(1.419g，10.27mmol)和Pd(Pt-Bu3)2(103mg，0.20mmol)。將反應(yīng)在85℃加熱，持續(xù)2小時(shí)。將該混合物在CHCl3/H2O之間分配，并將水層使用6N HCl調(diào)節(jié)為酸性。將分離的有機(jī)層用Na2SO4干燥，并蒸發(fā)。將得到的物質(zhì)吸附至硅膠上，并通過柱色譜(0-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(967mg，4.39mmol，85％)LC-MS(ES)m/z＝253(M+H)+。
e)5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向100mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)中的5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(203mg，0.805mmol)。緩慢加入6N NaOH(4mL，24.0mmol)，將反應(yīng)混合物在70℃攪拌過夜。通過添加6NHCl中和混合物，并在CHCl3和H2O之間分配。分離各層，有機(jī)層用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(152mg，0.64mmol，79％)，其不用進(jìn)一步純化而在下一步中使用LC-MS(ES)m/z＝239(M+H)+。
f)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(6mL)中的5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(148mg，0.62mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(242mg，0.63mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]和PyBrop(356mg，0.76mmol)。加入DIEA(550μL，3.15mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(303mg，0.51mmol，82％)LC-MS(ES)m/z＝569(M+H)+。
g)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(303mg，0.51mmol)。加入肼(110μL，3.50mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜純化(90101CHCl3/MeOH/NH4OH)。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(122mg，0.23mmol，45％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝439(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.93-3.02(m，1H)3.03-3.14(m，3H)3.82(s，3H)3.98(s，3H)4.41-4.53(m，1H)6.32(s，1H)7.38-7.49(m，2H)7.52-7.63(m，2H)7.68(d，J＝7.58Hz，1H)8.01(s，1H)8.17(s，3H)8.93(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例186
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(9.5mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(248mg，0.97mmol)[根據(jù)實(shí)施例184的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(321mg，0.96mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(557mg，1.19mmol)。加入DIEA(840μL，4.81mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(167mg，0.26mmol，67％)。LC-MS(ES)m/z＝521(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(2.5mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(144mg，0.27mmol)。加入肼(60μL，1.91mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(100mg，0.21mmol，74％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝391(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.31(s，3H)2.83-2.93(m，2H)2.94-3.04(m，2H)3.73(s，3H)4.32-4.44(m，1H)7.12(t，J＝8.59Hz，2H)7.25-7.33(m，2H)7.35(s，1H)7.67(s，1H)8.07(s，3H)8.57(d，J＝8.59Hz，1H)。
實(shí)施例187
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8.5mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(230mg，0.90mmol)[根據(jù)實(shí)施例184的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(348mg，0.90mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(4.98g，15.0mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(502mg，1.07mmol)。加入DIEA(790μL，4.52mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(247mg，0.43mmol，48％)。LC-MS(ES)m/z＝571(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(247mg，0.433mmol)。加入肼(95μL，3.03mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(206mg，0.38mmol，88％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝441(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.30(s，3H)2.97-3.08(m，4H)3.71(s，3H)4.35-4.49(m，1H)7.36(s，1H)7.54(dt，J＝19.20，7.20Hz，3H)7.62-7.68(m，2H)8.14(s，3H)8.65(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例188
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸
在室溫，將NCS(382mg，2.80mmol)分批加至50mL密封管反應(yīng)器中，該反應(yīng)器含有于四氫呋喃(THF)(12mL)中的5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(642mg，2.54mmol)[根據(jù)實(shí)施例185的方法制備]。將混合物加熱至70℃，持續(xù)1小時(shí)。將該反應(yīng)冷卻至室溫，加入6N NaOH(10mL，60.0mmol)，并將該混合物在70℃攪拌另外3小時(shí)。將混合物在CHCl3和H2O之間分配，并使用6N HCl將水層調(diào)節(jié)為酸性。有機(jī)層用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(759mg，2.51mmol，98％)，其不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z＝273(M+H)+。
b)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(3.5mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸(85mg，0.31mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(119mg，0.31mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]和PyBrop(180mg，0.384mmol)。加入DIEA(270μL，1.54mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(94mg，0.14mmol，45％)LC-MS(ES)m/z＝603(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(2mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺(94mg，0.16mmol)。加入肼(35μL，1.12mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(27mg，0.05mmol，31％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝473(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.93-3.14(m，4H)3.73(s，3H)4.00(s，3H)4.41-4.54(m，1H)7.43(t，J＝7.45Hz，1H)7.57(ddd，J＝14.59，7.58，7.39Hz，2H)7.62-7.65(m，1H)7.69(d，J＝7.83Hz，1H)7.82-7.89(m，1H)8.12(s，3H)8.80(d，J＝9.09Hz，1H)。
實(shí)施例189
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向350mL密封燒瓶反應(yīng)器中加入于1，4-二噁烷(6mL)和水(1.5mL)中的4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(409mg，1.60mmol)[根據(jù)實(shí)施例95的方法制備]，1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(388mg，1.75mmol)[根據(jù)制備例17的方法制備]，K2CO3(676mg，4.89mmol)和Pd(PtBu3)2(32mg，0.06mmol)。將反應(yīng)在85℃加熱，持續(xù)3小時(shí)。反應(yīng)在CHCl3/H2O之間分配，并使用6N HCl將水層的pH調(diào)節(jié)至～3。分離的有機(jī)層用Na2SO4干燥，吸附至硅膠上，并通過柱色譜(10-65％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(106mg，0.39mmol，％)；LC-MS(ES)m/z＝271(M+H)+。
b)5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向100mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(2mL)中的5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(106mg，0.39mmoD。緩慢加入6N NaOH(2mL，12.00mmol)，并將該反應(yīng)混合物在70℃攪拌過夜。將反應(yīng)冷卻至室溫，并在CHCl3和H2O之間分配，并通過添加6N HCl將水層的pH調(diào)節(jié)至～3。分離各層，有機(jī)層用Na2SO4干燥，并濃縮，得到所需化合物(96mg，0.37mmol，95％)LC-MS(ES)m/z＝257(M+H)+。
c)5-氯-N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(4mL)中的5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(96mg，0.37mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(125mg，0.40mmol)[根據(jù)制備例18的方法制備，除了用2，5-二氟-L-苯丙氨酸(3.02g，15.0mmol)代替2，6-二氟-L-苯丙氨酸]和PyBrop(225mg，0.48mmol)。加入DIEA(330μL，1.89mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(98mg，0.13mmol，34％)LC-MS(ES)m/z＝535(M+H)+。
d)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(1mL)中的5-氯-N-{(1S)-2-(2，5-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(98mg，0.18mmol)。加入肼(40μL，1.27mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(52mg，0.10mmol，56％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝425(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.94(s，3H)2.87-3.09(m，4H)3.69(s，3H)4.42(d，J＝6.32Hz，1H)7.10(ddd，J＝12.00，8.34，3.41Hz，1H)7.20(td，J＝9.16，4.67Hz，1H)7.27(ddd，J＝8.97，5.56，3.16Hz，1H)7.39(s，1H)8.06(s，1H)8.13(s，3H)9.13(d，J＝8.84Hz，1H)。
實(shí)施例190
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(8mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸(220mg，0.81mmol)[根據(jù)實(shí)施例188的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(281mg，0.84mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-氟-L-苯丙氨酸(5.03g，17.8mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(472mg，1.0mmol)。加入DIEA(710μL，4.07mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(281mg，0.51mmol，63％)LC-MS(ES)m/z＝553(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4.5mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺(281mg，0.51mmol)。加入肼(120μL，3.82mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(145mg，0.28mmol，55％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝423(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.86-3.04(m，4H)3.71(s，3H)4.02(s，3H)4.31-4.41(m，1H)7.00-7.07(m，1H)7.11(d，J＝7.58Hz，2H)7.28-7.36(m，1H)7.64(s，1H)7.73-7.78(m，1H)7.98(s，3H)8.54(s，1H)。
實(shí)施例191
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(7.6mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸(208mg，0.76mmol)[根據(jù)實(shí)施例188的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(257mg，0.77mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-氟-L-苯丙氨酸(4.95g，17.5mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(435mg，0.93mmol)。加入DIEA(670μL，3.84mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(238mg，0.43mmol，56％)LC-MS(ES)m/z＝553(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(4mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺(238mg，0.43mmol)。加入肼(95μL，3.03mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(113mg，0.22mmol，50％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝423(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.82-2.92(m，2H)2.93-3.03(m，2H)3.71(s，3H)4.02(s，3H)4.26-4.37(m，1H)7.11(t，J＝8.46Hz，2H)7.26-7.32(m，2H)7.64(s，1H)7.69-7.84(m，1H)7.95(s，3H)8.45-8.52(m，1H)。
實(shí)施例192
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺
向50mL圓底燒瓶中加入于氯仿(7.6mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酸(210mg，0.77mmol)[根據(jù)實(shí)施例188的方法制備]，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(294mg，0.764mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備，除了用N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-3-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸(4.98g，15.0mmol)代替N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-(三氟甲基)-L-苯丙氨酸]和PyBrop(442mg，0.94mmol)。加入DIEA(670μL，3.84mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(25-70％EtOAc/Hex)純化，得到標(biāo)題化合物(238mg，0.43mmol，56％)LC-MS(ES)m/z＝603(M+H)+。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中加入于四氫呋喃(THF)(3mL)和甲醇(1mL)中的4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺(203mg，0.34mmol)。加入肼(80μL，2.55mmol)，將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物吸附至硅膠上，并通過柱色譜(90∶10∶1CHCl3/MeOH/NH4OH)純化。
將所得中性化合物溶于MeOH(2mL)，用過量2M HCl的Et2O溶液處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(86mg，0.15mmol，44％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z＝473(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.92-3.08(m，4H)3.70(s，3H)4.01(s，3H)4.30-4.42(m，1H)7.50-7.60(m，3H)7.61-7.66(m，2H)7.73-7.81(m，1H)8.00(s，3H)8.52-8.68(m，1H)。
實(shí)施例193
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-氯-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向5-溴-4-氯-2-噻吩甲酸(482mg，2mmol)于二噁烷/H2O(4∶1，10mL)中的溶液中加入1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯合鈀(II)二氯甲烷絡(luò)合物(16.3mg，0.02mmol)，碳酸鉀(828mg，6mmol)和5-(5，5-二甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(832mg，4mmol)[根據(jù)制備例7制備]。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至80℃，持續(xù)20小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾倒至H2O(100mL)中，并用DCM萃取。有機(jī)層用Na2SO4干燥，濃縮，并使用硅膠(EtOAc/己烷(0-45％梯度))純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(401.7mg，83％)LC-MS(ES)m/z＝243(M+H)+。
b)4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
在70℃，將4-氯-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(121mg，0.5mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(67mg，0.5mmol)于THF(5mL)中的溶液在密封管中攪拌。4小時(shí)后，濃縮溶液，并在DCM和H2O之間分配。水層用DCM萃取幾次。合并有機(jī)級分，濃縮，并使用甲苯共沸干燥，得到標(biāo)題化合物，為棕色油狀物(136mg，98％)LC-MS(ES)m/z＝278(M+H)+。
c)4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(136.1mg，0.49mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(179mg，0.51mmol)[根據(jù)制備例6制備]，二異丙基乙基胺(260μL，1.5mmol)于DCM(5mL)中的溶液中一次加入PyBrop(341mg，0.75mmol)。1小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，梯度0-50％乙酸乙酯/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(242mg，82％)，為白色固體LCMS(ES)m/z＝607(M+H)+。
d)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(242mg，0.4mmol)于THF-MeOH(1∶1，4mL)中的溶液中加入肼(75μL，2.42mmol)。12小時(shí)后，將溶液濃縮。得到的殘余物在DCM和H2O之間分配。有機(jī)物用水洗滌三次，并使用6N HCl水溶液酸化至pH～1。得到的混合物用水萃取。合并含水級分，并濃縮，得到所需產(chǎn)物的二-HCl鹽，為淺黃色固體(77mg，40％)LCMS(ES)m/z 477(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm3.08-3.11(m，4H)3.75(s，3H)4.50(br.s.，1H)7.45(t，J＝6.95Hz，1H)7.55-7.63(m，2H)7.71(d，J＝7.83Hz，1H)7.78(s，1H)8.02-8.10(m，3H)8.12(s，1H)9.12(d，J＝9.09Hz，1H)。
實(shí)施例194
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-氯-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例193的方法制備，為淺黃色固體，除了用N-溴琥珀酰亞胺(89mg，0.5mmol)代替N-氯琥珀酰亞胺LCMS(ES)m/z 522(M+H)+，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.0-3.13(m，4H)3.76(s，3H)4.50(br.s.，1H)7.46(d，J＝7.58Hz，1H)7.55-7.66(m，2H)7.71(d，J＝7.83Hz，1H)7.78(s，1H)8.04(br.s.，4H)。
實(shí)施例195
N-[(1S)-2-氨基-1-(3-吡啶基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例6的方法制備，為淺黃色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(62mg，0.3mmol)代替5-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-吡啶基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HCl(84mg，0.3mmol)[根據(jù)制備例19制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮-HClLC-MS(ES)m/z＝342(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δppm3.17(dd，J＝13.89，10.86Hz，1H)3.33-3.36(m，2H)3.36-3.44(m，1H)3.96(s，3H)4.70(dd，J＝14.02，6.19Hz，1H)6.47(s，1H)7.51(s，1H)7.88(d，J＝1.26Hz，1H)7.94(s，1H)8.02(t，J＝6.32Hz，1H)8.61(d，J＝7.83Hz，1H)8.76(br.s.，1H)8.89(br.s.，1H)。
實(shí)施例196
N-[(1R)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(83mg，0.4mmol)代替4，5-二溴-2-噻吩甲酸，以及用[(2R)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(94mg，0.4mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備例]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z＝327(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δppm 3.44(d，J＝4.29Hz，1H)3.63(br.s.，1H)4.18(s，3H)5.47(dd，J＝10.36，4.55Hz，1H)6.88(d，J＝2.78Hz，1H)7.38(d，J＝7.07Hz，1H)7.44(t，J＝7.33Hz，2H)7.55(d，J＝7.83Hz，2H)8.08(d，J＝2.53Hz，1H)8.18(d，J＝1.26Hz，1H)8.42(d，J＝1.26Hz，1H)。
實(shí)施例197
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例20的方法制備，為白色固體，除了用4-溴-2-噻吩甲酸(83mg，0.4mmol)代替4，5-二溴-2-噻吩甲酸，以及用[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(94mg，0.4mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z327(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.44(d，J＝2.78Hz，1H)3.60(br.s.，1H)4.06(br.s.，3H)5.47(dd，J＝10.36，4.29Hz，1H)6.70(br.s.，1H)7.38(d，J＝6.82Hz，1H)7.44(t，J＝7.20Hz，2H)7.53(d，J＝7.58Hz，2H)7.79(br.s.，1H)8.04(br.s.，1H)8.32(br.s.，1H)。
實(shí)施例198
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(2g，8.51mmol)[在制備例10中制備]，碳酸鉀(5.88g，42.5mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.12g，10.21mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.22g，0.43mmol)于1，4-二噁烷(35ml)和H2O(7ml)中的溶液在密封管中在80℃攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，25％EtOAc的己烷溶液)純化，得到5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯。該反應(yīng)分幾次進(jìn)行(1g，3x 2g)，將反應(yīng)混合物合并用于后處理和純化，得到標(biāo)題化合物(5.5g，78％組合產(chǎn)率)，為粘稠黃色油狀物L(fēng)C-MS(ES)m/e 236(M+H)+。
b)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(94mg，0.4mmol)于6N氫氧化鈉(0.67ml，4mmol)和四氫呋喃(4ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。將水相調(diào)節(jié)至pH～3，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到所需產(chǎn)物(67mg，0.3mmol，75％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)C-MS(ES)m/e 223(M+H)+。
c)[(2S)-2-({[5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(67mg，0.3mmol)，[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(71mg，0.3mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]和二異丙基乙基胺(0.16ml，0.9mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(210mg，0.45mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(87mg，0.2mmol，65％產(chǎn)率)，為黃色泡沫狀物L(fēng)C-MS(ES)m/e 441(M+H)+。
d).N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向[(2S)-2-({[4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(87mg，0.2mmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(0.5mL，2mmol)，將其在環(huán)境溫度攪拌15小時(shí)。將溶液用水萃取三次。合并含水級分，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的二-HCl鹽，為白色固體(26mg，0.06mmol，32％)LC-MS(ES)m/z 341(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 2.49(br.s.，3H)3.43(d，J＝4.80Hz，1H)3.55(d，J＝10.36Hz，1H)3.95(s，3H)5.41-5.43(m，1H)6.66(d，J＝2.27Hz，1H)7.38(d，J＝7.07Hz，1H)7.44(t，J＝7.33Hz，2H)7.48-7.53(m，2H)7.94-8.02(m，2H)。
實(shí)施例199
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例24的方法制備，為白色固體，除了用5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(89mg，0.4mmol)[根據(jù)實(shí)施例198制備]代替4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(94mg，0.4mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 375(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 2.38-2.41(m，1H)，3.38(d，J＝1.52Hz，1H)3.49(d，J＝10.86Hz，1H)3.73(br.s.，3H)5.41(d，J＝3.54Hz，1H)7.30-7.50(m，5H)7.54-7.62(m，1H)7.81(br.s.，1H)。
實(shí)施例200
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例24的方法制備，為白色固體，除了用5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(168mg，0.5mmol)[根據(jù)實(shí)施例198制備]代替4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，用N-溴琥珀酰亞胺(88.5mg，0.5mmol)代替N-氯琥珀酰亞胺，并用(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(71mg，0.3mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]代替(3-氨基-4-苯基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 341(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.39(d，J＝4.04Hz，3H)3.42(br.s.，1H)3.55(br.s.，1H)3.75-3.78(m，3H)5.45(m，1H)7.37(d，J＝7.07Hz，1H)7.40-7.46(m，2H)7.49(br.s.，2H)7.59-7.68(m，1H)7.80-7.88(m，1H)。
實(shí)施例201
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(2.56g，10.00mmol)[根據(jù)實(shí)施例95制備]，5-(5，5-二甲基)-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(3.88g，20.0mmol)[根據(jù)制備例7制備]，碳酸鉀(4.15g，30.0mmol)和1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯合鈀(II)二氯甲烷絡(luò)合物(0.073g，0.1mmol)于1，4-二噁烷(12mL)和水(3.00mL)中的溶液在密封管中在80℃加熱。3小時(shí)后，加入另一批5-(5，5-二甲基)-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑(1.94g，10.0mmol)和1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯合鈀(II)二氯甲烷絡(luò)合物(0.073g，0.1mmol)。2小時(shí)后，將混合物濃縮，并通過硅膠純化，使用0-35％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(1.74g，3.35mmol，34％)LC-MS(ES)m/z 257(M+H)+。
b)5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(304mg，1.18mmol)于6N氫氧化鈉(2ml，12mmol)和四氫呋喃(10ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～3，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到所需產(chǎn)物(276mg，1.14mmol，96％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)C-MS(ES)m/e 244(M+H)+。
c)[(2S)-2-({[5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(60mg，0.25mmol)，[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(58mg，0.25mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]和二異丙基乙基胺(0.12ml，0.75mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(190mg，0.41mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(90mg，0.20mmol，79％產(chǎn)率)，為無色油狀物L(fēng)C-MS(ES)m/e 461(M+H)+。
d)N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向[(2S)-2-({[5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(90mg，0.20mmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(0.5mL，2mmol)。15小時(shí)后，將溶液用水萃取三次。合并含水級分，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的二-HCl鹽，為白色固體(63mg，0.14mmol，74％)LC-MS(ES)m/z 361(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.41(dd，J＝13.01，4.17Hz，1H)3.63(d，J＝10.86Hz，1H)4.08(s，3H)5.45(dd，J＝10.48，4.17Hz，1H)6.87(d，J＝2.27Hz，1H)7.36(d，J＝7.33Hz，1H)7.42(t，J＝7.33Hz，2H)7.54(d，J＝7.07Hz，2H)8.14(d，J＝2.27Hz，1H)8.27(s，1H)。
實(shí)施例202
N-[2-氨基-1-(4-氟苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例201的方法制備，為白色固體，除了用[2-氨基-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(63mg，0.25mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z＝379(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δppm 3.40(dd，J＝13.01，4.42Hz，1H)3.66(d，J＝2.02Hz，1H)4.03-4.15(m，3H)5.46(dd，J＝10.36，4.29Hz，1H)6.84(d，J＝2.53Hz，1H)7.15(t，J＝8.72Hz，2H)7.60(dd，J＝8.59，5.05Hz，2H)8.10(d，J＝2.53Hz，1H)8.29(s，1H)。
實(shí)施例203
N-[2-氨基-1-(4-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例201的方法制備，為白色固體，除了用[2-氨基-2-(4-氯苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(45mg，0.17mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z＝396(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δppm 3.40(d，J＝4.55Hz，1H)3.58(d，J＝10.36Hz，1H)3.98(s，3H)5.41(d，J＝4.55Hz，1H)6.71(s，1H)7.43(dt，J＝4.74，2.31Hz，2H)7.47-7.56(m，2H)7.92(br.s.，1H)8.13(s，1H)。
實(shí)施例204
N-[2-氨基-1-(3-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例201的方法制備，為白色固體，除了用[2-氨基-2-(3-氯苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(67mg，0.25mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z＝396(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δppm 3.41(dd，J＝12.76，4.93Hz，5H)3.36-3.47(m，3H)3.63(s，2H)3.59(d，J＝10.61Hz，6H)3.95(s，9H)4.02(d，J＝3.03Hz，15H)5.41(dd，J＝9.09，3.79Hz，8H)6.67(d，J＝2.27Hz，3H)6.78(br.s.，4H)7.33-7.49(m，23H)7.56(br.s.，7H)8.06(br.s.，8H)8.16(d，J＝16.93Hz，6H)。
實(shí)施例205
N-[2-氨基-1-(2-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例201的方法制備，為白色固體，除了用[2-氨基-2-(2-氯苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(67mg，0.25mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z＝396(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δppm 3.39(br.s.，1H)3.56(d，J＝10.86Hz，1H)4.05(d，J＝3.03Hz，3H)5.87(dd，J＝10.74，3.41Hz，1H)6.81(br.s.，1H)7.39(br.s.，2H)7.50(d，J＝6.57Hz，1H)7.70(d，J＝7.07Hz，1H)8.04(br.s.，1H)8.26(br.s.，1H)。
實(shí)施例206
N-[2-氨基-1-(4-氟苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[2-({[4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(67mg，0.24mmol)[根據(jù)實(shí)施例193制備]，[2-氨基-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(61mg，0.24mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]，二異丙基乙基胺(126μL，0.72mmol)于DCM(5mL)中的溶液中一次加入PyBrop(168mg，0.36mmol)。1小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，梯度0-50％乙酸乙酯/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(93mg，0.18mmol，76％)，為白色固體LCMS(ES)m/z＝514(M+H)+。
b)N-[2-氨基-1-(4-氟苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向[2-({[4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(90mg，0.17mmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(0.43mL，1.75mmol)。15小時(shí)后，將溶液用水萃取三次。合并含水級分，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的二-HCl鹽，為白色固體(39.6mg，0.09mmol，52％)LC-MS(ES)m/z 414(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 3.42(d，J＝2.78Hz，1H)3.56(br.s.，1H)3.79(s，3H)5.43(dd，J＝10.23，4.67Hz，1H)7.11-7.22(m，2H)7.49-7.57(m，2H)7.60(s，1H)7.93(br.s.，1H)。
實(shí)施例207
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例206的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(57mg，0.24mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]代替[2-氨基-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 396(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.42(br.s.，1H)3.57(d，J＝11.12Hz，1H)3.80(s，3H)5.44(dd，J＝10.36，4.29Hz，1H)7.37(d，J＝2.53Hz，1H)7.40-7.47(m，2H)7.48-7.55(m，2H)7.60(s，1H)7.95(br.s.，1H)。
實(shí)施例208
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸
向5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，1.169mmol)[根據(jù)實(shí)施例193的方法制備]于THF(10ml)中的溶液中加入N-溴琥珀酰亞胺(212mg，1.19mmol)。將該混合物密封，并在70℃加熱。2小時(shí)后，一次加入6N NaOH溶液(2.0ml，6.0M，11.84mmol)。將得到的混合物再攪拌2小時(shí)，并在DCM-H2O之間分配。將水相的pH調(diào)節(jié)至～3，并用DCM萃取幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，得到標(biāo)題化合物，為無色油狀物(105mg，28％)LC-MS(ES)m/z＝322(M+H)+。
b)[(2S)-2-({[4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸(80mg，0.25mmol)，[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(59mg，0.25mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]，二異丙基乙基胺(128μL，0.75mmol)于DCM(5mL)中的溶液中一次加入PyBrop(168mg，0.36mmol)。3小時(shí)后，將反應(yīng)內(nèi)容物在H2O/DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，梯度0-50％乙酸乙酯/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(110mg，0.18mmol，73％)，為白色固體LCMS(ES)m/z＝540(M+H)+。
c)N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺 向[(2S)-2-({[4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(81mg，0.15mmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(0.38mL，1.5mmol)。15小時(shí)后，將溶液用水萃取三次。合并含水級分，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的-二-HCl鹽，為白色固體(18.3mg，0.04mmol，26％)LC-MS(ES)m/z 440(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.40(d，J＝13.89Hz，1H)3.60(br.s.，1H)3.80(br.s.，3H)5.38-5.50(m，1H)7.37(d，J＝7.33Hz，1H)7.43(t，J＝7.45Hz，2H)7.52(d，J＝7.58Hz，2H)7.61(s，1H)8.02(br.s.，1H) 實(shí)施例209
N-[2-氨基-1-(2-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例206的方法制備，為白色固體，除了用[2-氨基-2-(3-氯苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(67mg，0.25mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替[2-氨基-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 430(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.45(d，J＝5.56Hz，2H)3.72-3.81(m，3H)5.86(dd，J＝9.22，4.42Hz，1H)7.41(d，J＝2.02Hz，2H)7.48-7.55(m，1H)7.58(br.s.，2H)7.83(s，1H) 實(shí)施例210
N-[2-氨基-1-(3-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例206的方法制備，為白色固體，除了用[2-氨基-2-(3-氯苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(67mg，0.25mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替[2-氨基-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸l，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 430(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 3.44(d，J＝3.54Hz，1H)3.55(d，J＝10.61Hz，1H)3.80(s，3H)5.42(dd，J＝10.36，4.29Hz，1H)7.35-7.49(m，3H)7.55(s，1H)7.59(s，1H)7.95(d，J＝14.40Hz，1H)。
實(shí)施例211
N-(2-氨基乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例206的方法制備，為白色固體，除了用(2-氨基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(58mg，0.36mmol)代替[2-氨基-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 320(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.17(d，J＝5.81Hz，2H)3.66(br.s.，2H)3.78(s，3H)7.60(s，1H)7.66(s，1H)。
實(shí)施例212
N-[2-氨基-1-(4-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例206的方法制備，為白色固體，除了用[2-氨基-2-(4-氯苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(65mg，0.24mmol)[根據(jù)制備例16的方法制備]代替[2-氨基-2-(4-氟苯基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯LC-MS(ES)m/z 431(M+H)+，1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 3.43(d，J＝4.55Hz，1H)3.53(d，J＝10.11Hz，1H)3.79(s，3H)5.43(dd，J＝10.36，4.55Hz，1H)7.43-7.47(m，2H)7.48-7.53(m，2H)7.60(s，1H)7.94(s，1H)。
實(shí)施例213
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例99的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(73mg，0.25mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 375(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 0.91-0.99(m，1H)，1.01-1.10(m.，1H)1.39-1.47(m.，3H)1.37-1.48(m，2H)1.65-1.77(m，5H)1.89(br.s.，1H)2.10(s，3H)2.45(s，3H)3.07-3.16(m，2H)3.91-3.98(m，3H)4.42(br.s.，1H)7.91(br.s.，1H)8.24(s，1H)。
實(shí)施例214
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[(2S)-2-({[4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
在25℃，向5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(110mg，0.4mmol)[在實(shí)施例99中制備]，2-[(2S)-2-氨基-4-甲基戊基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(99mg，0.4mmol)[根據(jù)制備例1的方法制備]和二異丙基乙基胺(0.2ml，1.2mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(280mg，0.6mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(113mg，0.22mmol，56％產(chǎn)率)，為無色油狀物L(fēng)C-MS(ES)m/e 506(M+H)+。
d)N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 向[(2S)-2-({[4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩基]羰基}氨基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(99mg，0.22mmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(0.5mL，2mmol)。15小時(shí)后，將溶液用水萃取三次。合并含水級分，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的二-HCl鹽，為灰白色固體(40mg，0.11mmol，52％)LC-MS(ES)m/z 355(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.99-2.14(m，3H)2.43(s，3H)3.39(d，J＝9.85Hz，1H))3.60(d，J＝9.85Hz，1H)3.92(br.s.，3H)5.44(d，J＝8.84Hz，1H)7.36(d，J＝2.53Hz，1H)7.43(t，J＝5.94Hz，2H)7.49-7.57(m，2H)8.03(br.s.，1H)8.14(br.s.，1H)。
實(shí)施例215
N-[(1S)-2-氨基-1-甲基乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例106的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(74mg，0.36mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 333(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.37(d，J＝6.82Hz，3H)3.11-3.14(m，2H)3.79(s，3H)4.38-4.40(m，1H)7.60(br.s.，1H)7.83(d，J＝2.27Hz，1H)。
實(shí)施例216
N-{(1S)-2-氨基-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例100的方法制備，為灰白色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(348mg，1.0mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 471(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.24(t，J＝7.33Hz，3H)2.54(d，J＝8.84Hz，2H)2.74(q，J＝7.24Hz，2H)3.05-3.16(m，1H)3.26(d，J＝4.80Hz，1H)3.66-3.79(m，3H)4.54(br.s.，1H)7.47-7.56(m，2H)7.57-7.76(m，4H)。
實(shí)施例217
N-[(1S)-1-(氨基甲基)-3-甲基丁基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例106的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-4-甲基戊基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(99mg，0.4mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 376(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 0.99(t，J＝6.44Hz，6H)1.42(s，1H)1.63-1.80(m，2H)3.04(br.s.，1H)3.14(d，J＝3.54Hz，1H)3.80(s，3H)4.42(br.s.，1H)7.59(s，1H)7.84(d，J＝6.06Hz，1H)。
實(shí)施例218
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯
向5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(600mg，2.40mmol)[根據(jù)實(shí)施例98制備]于四氫呋喃(THF)(10ml)中的溶液中加入N-溴琥珀酰亞胺(512mg，2.88mmol)。將該混合物在密封管中在70℃攪拌2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物濃縮，并使用硅膠純化，使用0-5％梯度(乙酸乙酯/己烷)洗脫，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 330(M+H)+。
b)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(635mg，1.93mmol)，碳酸鉀(1.33g，9.64mmol)，PdCl2(dppf)(141mg，0.19mmol)和三甲基環(huán)三硼氧烷(0.54ml，3.86mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(3ml)中的溶液在密封管中在110℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，并在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(10-50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(488mg，96％)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 265(M+H)+。
c)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸
將4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸甲酯(488mg，1.85mmol)于6N氫氧化鈉(3.08ml，18.5mmol)和四氫呋喃(10ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，為黃色泡沫狀物(448mg，1.79mmol，96％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 251(M+H)+。
d)4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-乙基-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酸(250mg，1.0mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[4-(氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(313mg，1.05mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]和二異丙基乙基胺(0.52ml，3mmol)于DCM中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(746mg，1.6mmol)。將溶液在25℃攪拌12小時(shí)，然后在H2O-DCM之間分配。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(硅膠，30-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(490mg，0.92mmol，92％產(chǎn)率)，為黃色泡沫狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 531(M+H)+。
e)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺 在25℃，向4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-乙基-2-噻吩甲酰胺(400mg，0.75mmol)于甲醇(8ml)中的溶液中滴加加入肼(0.12ml，3.77mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽，為黃色固體LC-MS(ES)m/z 401(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm1.28(t，J＝7.58Hz，3H)2.07(s，3H)2.75(m，2H)3.02(d，J＝6.32Hz，2H)3.22(br.s.，2H)3.92(d，J＝2.27Hz，3H)4.53(br.s.，1H)7.02(t，J＝8.59Hz，2H)7.34(m，2H)，7.80(s，1H)8.13-8.25(m，1H)。
實(shí)施例219
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例103的方法制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(332mg，1.05mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 391(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.44(s，3H)2.91-3.02(m，2H)3.16(d，J＝10.11Hz，1H)3.24(dd，J＝13.14，3.54Hz，1H)3.82(s，3H)4.50(d，J＝3.54Hz，1H)6.44(d，J＝2.02Hz，1H)7.05-7.13(m，1H)7.15-7.25(m，2H)，7.67-7.70(m，2H)。
實(shí)施例220
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例102的方法制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(332mg，1.05mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 425(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.40(s，3H)2.95-3.03(m，2H)3.23-3.26(m，2H)3.76(br，s，3H)4.96-4.52(m，1H)，7.07-7.15(m，2H)7.22-7.28(m，1H)7.55-7.77(m，2H)。
實(shí)施例221
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例104的方法制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(332mg，1.05mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 411(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 3.02(d，J＝7.33Hz，2H)3.24(d，J＝6.82Hz，2H)4.01(d，J＝7.58Hz，3H)4.52(d，J＝7.07Hz，1H)6.78(d，J＝11.87Hz，1H)7.08-7.21(m，1H)7.26-7.28(m，1H)7.94-8.08(m，2H)。
實(shí)施例222
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例106的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(332mg，1.05mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 446(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.95-3.05(m，2H)3.22-3.23(m，2H)3.79(s，3H)4.52(br.s.，1H)7.08-7.21(m，2H)7.27-7.26(m，2H)7.60(s，1H)7.83(br.s.，1H). 實(shí)施例223
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例99的方法制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(332mg，1.05mmol)[根據(jù)制備例6制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 405(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.09(s，15H)2.42(s，3H)3.04(d，J＝7.07Hz，2H)3.27(d，J＝4.80Hz，2H)3.88-4.01(m，3H)4.54(br.s.，1H)7.08-7.21(m，2H)7.29(d，J＝7.58Hz，1H)7.92(br.s.，1H)8.15-8.26(m，1H)。
實(shí)施例224
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
將4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(470mg，2.29mmol)，碳酸鉀(1584mg，11.46mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(525mg，2.52mmol)[根據(jù)制備例7制備]和雙-(三叔丁基膦)鈀(0)(58.6mg，0.12mmol)于1，4-二噁烷(9.55ml)和水(1.9ml)中的溶液在80℃攪拌。1小時(shí)后，將溶液在H2O-DCM之間分配，且水相用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，濃縮，并通過柱色譜(30％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(124mg，0.60mmol，26％產(chǎn)率)，為白色粉末LCMS(ES)m/e 206(M+H)+。
b)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(412mg，2.0mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(267mg，2.0mmol)于DMF(10mL)中的溶液在75℃加熱30分鐘。加入另一批N-氯琥珀酰亞胺(267mg，2.0mmol)。1小時(shí)后，將混合物濃縮，并使用硅膠純化，使用0-55％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(225mg，0.82mmol，71％產(chǎn)率)LCMS(ES)m/e 276(M+H)+。
c)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸
將5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(224mg，0.82mmol)于6N氫氧化鈉(1.36ml，8.2mmol)和四氫呋喃(5ml)中的溶液在密封管中在70℃攪拌1小時(shí)。將得到的溶液冷卻，然后在H2O-DCM之間分配。水相調(diào)節(jié)至pH～4，然后用DCM洗滌幾次。將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(201mg，0.77mmol，94％產(chǎn)率)，為黃色油狀物L(fēng)CMS(ES)m/e 262(M+H)+ d)5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-呋喃甲酰胺
向5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(200mg，0.77mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(254mg，0.80mmol)和N，N-二異丙基乙基胺(0.40ml，2.30mmol)于DCM(10ml)中的溶液中加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(536mg，1.15mmol)。在環(huán)境溫度攪拌20小時(shí)后，將混合物濃縮，并使用硅膠柱純化，使用梯度(0-50％乙酸乙酯/己烷)洗脫，得到標(biāo)題化合物，為灰白色泡沫狀固體(304mg，0.54mmol，71％產(chǎn)率)LCMS(ES)m/e 560(M+H)+。
e)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺 在25℃，向5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-呋喃甲酰胺(304mg，0.54mmol)于甲醇(5ml)中的溶液中滴加肼(0.08ml，2.7mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽，為黃色固體LC-MS(ES)m/z 430(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm2.91-3.05(m，2H)3.17-3.28(m，2H)3.81(s，3H)4.57(d，J＝9.60Hz，1H)7.12(br.s.，1H)7.18-7.28(m.，2H)7.36-7.39(m，1H)7.58(s，1H)。
實(shí)施例225
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例127的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(147mg，0.46mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 395(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.90-3.06(m，2H)3.18-3.24(m，2H)3.98(d，J＝17.68Hz，3H)4.52-4.64(m，1H)6.67(d，J＝1.77Hz，1H)7.19(dd，J＝10.11，8.59Hz，2H)7.26(td，J＝9.73，2.27Hz，1H)7.51(d，J＝19.96Hz，1H)7.93(br.s.，1H)。
實(shí)施例226
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺制備 a)4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
將4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯(3.7g，13.03mmol)[根據(jù)實(shí)施例127制備]和反式-二氯雙(三苯基膦)合鈀(II)(0.46g，0.65mmol)于THF(50ml)中混合，得到黃色懸浮液。在室溫滴加甲基氯化鋅的THF溶液(11.40ml，22.81mmol)。在環(huán)境溫度攪拌20小時(shí)后，濃縮溶液，并使用硅膠純化，并使用0-30％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.45g，6.61mmol，51％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z 220(M+H)+。
b)5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸
向4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(500mg，2.28mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(950mg，4.57mmol)[根據(jù)制備例7制備]和碳酸鉀(315mg，2.28mmol)于1，4-二噁烷(8mL)和水(2.0mL)中的溶液中加入雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(117mg，0.23mmol)。將該混合物加熱至80℃，15小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮。將殘余物在DCM和水之間分配。將有機(jī)層濃縮，并溶于四氫呋喃(THF)(8.0mL)。溶液用6N氫氧化鈉水溶液(3.80mL，22.83mmol)處理，并加熱至75℃。15小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并在DCM和水之間分配。使用2N HCl水溶液將水層酸化至pH～3，并用DCM萃取幾次。合并有機(jī)級分，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(401mg，1.95mmol，85％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z 207(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二-氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
向5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(200mg，0.97mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(322mg，1.02mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]和N，N--二異丙基乙基胺(0.51ml，2.91mmol)于DCM(10ml)中的溶液中加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(678mg，1.46mmol)。在環(huán)境溫度攪拌20小時(shí)后，將混合物濃縮，并使用硅膠純化，使用0-50％乙酸乙酯/己烷梯度液洗脫，得到標(biāo)題化合物，為灰白色泡沫狀固體(181mg，0.36mmol，37％產(chǎn)率)LCMS(ES)m/e 505(M+H)+。
e)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺 在25℃，向N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺(176mg，0.35mmol)于甲醇(5ml)中的溶液中滴加肼(0.22ml，0.7mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 430(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.91-3.05(m，2H)3.17-3.28(m，2H)3.81(s，3H)4.57(d，J＝9.60Hz，1H)7.12(br.s.，1H)7.18-7.28(m.，2H)7.36-7.39(m，1H)7.58(s，1H)。
實(shí)施例227
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸
向5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸(150mg，0.73mmol)[在實(shí)施例126中制備]于THF(10ml)中的溶液中加入N-氯琥珀酰亞胺(97mg，0.73mmol)。在密封管中在70℃攪拌20小時(shí)后，將該混合物在H2O-DCM之間分配，并將水相的pH調(diào)節(jié)至～4。水相用DCM洗滌幾次，將合并的有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，為灰白色泡沫狀固體(152mg，0.63mmol，87％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z 241(M+H)+。
b)4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸(150mg，0.62mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(207mg，0.65mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]和N，N-二異丙基乙基胺(0.33ml，1.87mmol)于DCM(10ml)中的溶液中加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(436mg，0.94mmol)。在環(huán)境溫度攪拌20小時(shí)后，將混合物濃縮，并使用硅膠純化，使用0-50％乙酸乙酯/己烷的梯度液洗脫，得到標(biāo)題化合物，為灰白色泡沫狀物(200mg，0.35mmol，57％產(chǎn)率)LC-MS(ES)m/z 539(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺 在25℃，向4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(210mg，0.39mmol)于甲醇(5ml)中的溶液中滴加肼(0.02ml，0.78mmol)。12小時(shí)后，濃縮溶液，干法加載至硅膠上，并通過柱色譜(5％MeOH的DCM溶液(含1％NH4OH))純化。通過將過量4M HCl的二噁烷溶液(1ml)加至于MeOH(2ml)中的殘余物中，將該游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 409(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.38(s，3H)2.98(d，J＝9.35Hz，1H)3.01(d，J＝5.56Hz，1H)3.23(dd，J＝13.01，8.97Hz，2H)3.73-3.83(m，3H)4.56(d，J＝9.35Hz，1H)7.17(s，1H)7.18-7.32(m，3H)7.57(s，1H)。
實(shí)施例228
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例118的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(253mg，0.8mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 409(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.05-2.15(m，3H)2.91-3.07(m，2H)3.16-3.26m.，2H)3.91(br.s.，3H)4.57-4.59(m.，1H)7.09-7.31(m，3H)7.51(br.s.，1H)8.07(br.s.，1H)。
實(shí)施例229
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例119的方法制備，為黃色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(302mg，0.95mmol)[根據(jù)制備例6的方法制備]代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 389(M+H)+，1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 2.04-2.15(m，3H)2.35-2.47(m，3H)2.99-3.02(m，，2H)3.18-3.24(m，2H)3.86-3.96(m，3H)4.56-4.62(m，1H)7.16-7.26(m，4H)8.07(s，1H)。
實(shí)施例230 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(220mg，0.857mmol)[來自于實(shí)施例92]于DCM(5mL)中的溶液中一次加入PyBrOP(440mg，0.857mmol)，接著添加DIPEA(1.5mL，8.59mmol)。10分鐘后，將二胺2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(256mg，0.857mmol)加至上述溶液中。2小時(shí)后，濃縮溶液，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.39g，81％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝537(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(0.11mL，3.54mmol)加至于MeOH(4mL)中的4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(380mg，0.708mmol)中。10小時(shí)后，在真空下除去溶劑，得到殘余物，將其溶于DCM(15mL)，并用H2O(10mLx3)洗滌。
向上述DCM溶液中加入HCl水溶液(12N，2.95mL，35.4mmol)。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM(10mlx3)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(160mg，47％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝407(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 9.18-8.8(m，1H)，8.28-8.08(m，4H)，8.04(s，1H)，7.27-7.43(m，1)，7.08-7.24(m，2H)，6.91-7.08(m，1H)，4.4-4.34(m，1H)，4.14(q，J＝7.3Hz，2H)，3.15-2.80(m，4H)，和1.29(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例231 N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例230的方法制備，為灰白色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(339mg，0.97mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z＝457(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.92(brs，1H)，7.89-7.80(m，1H)，7.63-7.59(m，3H)，7.56-7.48(m，2H)，4.61-4.53(m，1H)，4.21-4.15(m，2H)，3.46-3.21(m，2H)，3.18-3.02(m，2H)，和1.35(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例232 N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例230的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(584mg，1.95mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z＝407(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.93(d，J＝1.3Hz，1H)，7.85(d，J＝1.3Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.34-7.31(m，2H)，7.05-7.01(m，2H)，4.52(m，1H)，4.19(q，J＝7.3Hz，2H)，3.26-3.12(m，2H)，3.05-2.94(m，2H)，和1.36(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例233 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例230的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(200m g，0.63mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z＝425(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.88(d，J＝8.3Hz，1H)，8.16-8.06(m，4H)，7.71(s，1H)，7.39-7.30(m，2H)，7.12(m，1H)，4.35(m，1H)，4.14(q，J＝7.1Hz，2H)，3.08-2.87(m，4H)，和1.29(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例234 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例93的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(149mg，0.50mmol)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z＝582(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例230(b)的方法制備，為灰白色固體，除了用N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(240mg，0.41mmol)代替4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺LC-MS(ES)m/z＝452(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 9.24-8.85(m，1H)，8.26-8.13(m，4H)，8.03(s，1H)，7.03(s，1H)，7.34-7.29(m，1H)，7.16-7.13(m，2H)，7.05-7.00(m，1H)，4.39(m，1H)，4.14(q，J＝7.3Hz，2H)，3.06-2.96(m，4H)，和1.28(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例235 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，1.17mmol)于THF(2mL)中的溶液中加入Na2CO3(2M，1.76mL，3.52mmol)，Pd(dppf)Cl2(86，0.117mmol)和1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(313mg，1.41mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中在N2中加熱至80℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，20-50％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.272g，82％)，為淺黃色漿狀物L(fēng)C-MS(ES)m/z＝271(M+H)+。
b)5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
在N2中，將5-氯-4-[(1Z)-1-(1-乙基-2-次甲基肼基)-1-丙烯-1-基]-2-噻吩甲酸甲酯(260mg，0.96mmol)和1-氯-2，5-吡咯烷二酮(154mg，1.15mmol)于THF(4mL)中在70℃加熱2小時(shí)，濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，10-30％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.281g，83％)，為糖漿狀物L(fēng)C-MS(ES)m/z＝305(M+H)+。
c)5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(260mg，0.85mmol)于THF/H2O(4mL/1mL)中的溶液中加入KOH(478mg，8.52mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(5mL x3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸，其不用進(jìn)一步純化直接使用。
d)5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(～0.85mmol)于DCM(5mL)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)(477mg，1.02mmol)，接著添加DIPEA(0.744mL，4.26mmol)。攪拌10分鐘后，將二胺2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(356mg，1.02mmol)加至上述溶液中。2小時(shí)后，濃縮溶液，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.416g，79％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝621(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(410mg，0.66mmol)溶于MeOH(2mL)，并用NH2NH2(1.04mL，33mmol)處理。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水，并通過氫氧化銨中和。將該混合物用DCM(5mL x 3)萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿，將其溶于MeOH(2mL)，并用HCl(4M的二噁烷溶液，1.6mL)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液濃縮，得到標(biāo)題化合物(160mg，42％)，為二-HCl鹽LC-MSm/z＝491(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 9.34(J＝8.8Hz，1H)，8.38-8.03(m，3H)，7.77(s，1H)，7.69-7.59(m，2H)，7.53(dd，J＝7.3，7.3Hz，1H)，7.42(dd，J＝7.6，7.6Hz，1H)，4.48(m，1H)，4.13-4.00(m，2H)，3.17-2.90(m，4H)，和1.29(m，3H)。
實(shí)施例236 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(180mg，0.618mmol)[來自于實(shí)施例235(c)]于DCM(5mL)中的溶液中一次加入PyBrOP，接著添加DIPEA(0.54mL，3.09mmol)。攪拌10分鐘后，將2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(203mg，0.68mmol)一次加至上述溶液中。攪拌2小時(shí)后，將溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(285mg，77％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z＝571(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(0.15ml，4.78mmol)加至于MeOH(5mL)中的5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(280mg，0.49mmol)中。10小時(shí)后，在真空下除去溶劑。將得到的殘余物溶于DCM(15mL)，并用H2O(10mLx 3)洗滌。向DCM溶液中加入HCl(12N，1.0mL)。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM(10ml x 3)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(179mg，67.5％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z＝441(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.72-7.67(m，1H)，7.62(s，1H)，7.35-7.29(m，1H)，7.14-7.17(m，2H)，7.00-6.96(m，1H)，4.53(m，1H)，4.14-3.97(m，2H)，3.37-3.15(m，2H)，3.07-2.97(m，2H)，和1.33(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例237 N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物(190mg，70％)根據(jù)實(shí)施例236的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(231mg，0.77mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 441(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz，沒有校正MeOD溶劑峰的化學(xué)位移)δppm 6.09(s，1H)，6.08(s，1H)，5.78-5.75(m，2H)，5.53-5.48(m，2H)，2.96(m，1H)，2.51(m，2H)，1.71-1.67(m，1H)，1.62-1.54(m，1H)，1.49-1.38(m，2H)，和-0.21(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例238 N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物(228mg，58.2％)根據(jù)實(shí)施例236的方法制備，為灰白色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(156mg，0.45mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 491(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.66-7.49(m，6H)，4.60-4.47(m，1H)，4.09-4.01(m，2H)，3.36-3.18(m，2H)，3.16-3.01(m，2H)，和1.33(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例239 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-溴-5-碘-2-噻吩甲酸甲酯
在-78℃，將nBuLi(2.05mL，5.13mmol)加至4，5-二溴-2-噻吩甲酸甲酯(1.4g，4.67mmol)于THF(10mL)中的溶液中?；旌衔飻嚢?0分鐘后，加入于3mL THF中的I2(1.185g，4.67mmol)。將得到的溶液在-78℃攪拌1小時(shí)后，其在-78℃用Na2S2O3終止，并溫?zé)嶂潦覝?。反?yīng)混合物用DCM萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮。粗產(chǎn)物在硅膠上(EtOAc/Hex，0-10％)純化，得到標(biāo)題化合物(1.3g，56％)，為黃色固體LC-MS(ES)m/z 348(M+H)+。
b)4-溴-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-5-碘-2-噻吩甲酸甲酯(500mg，1.44mmol)，碘化銅(I)(137mg，0.72mmol)和氟化鉀(251mg，4.32mmol)于DMF/HMPA(5ml/5mL)中的溶液中加入二氟(氟磺?；?乙酸甲酯(1.1g，5.76mmol)。在N2中，將該混合物在密封管中在70℃加熱。1小時(shí)后，反應(yīng)用NH4Cl(飽和)(2mL)終止，用乙醚(5mL x 5)萃取，并用蒸餾水(5mL x 5)洗滌。將合并的有機(jī)相用Mg2SO4干燥，并在硅膠上(EtOAc/Hex，20-50％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.82g)，含有60％不可分離的雜質(zhì)LC-MS m/z(ES)290(M+H)+。
c)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酸甲酯(0.8g，40％純度，1.11mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.299g，1.434mmol)，四(三苯基膦)合鈀(0)(0.128g，0.11mmol)和K2CO3(0.459g，3.32mmol)于二噁烷/H2O(5mL/1mL)中的混合物在密封管中加熱至70℃。12小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，40-60％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.25g，70％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z 291(M+H)+。
d)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酸
向4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酸甲酯(250mg，0.77mmol)于THF/H2O(3mL/0.3mL)中的溶液中加入KOH(217mg，3.88mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3。混合物用DCM(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸(235mg，80％純)，其不用進(jìn)一步純化直接在下一步中使用LC-MS(ES)277(M+H)+。
e)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酰胺
在室溫，將4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酸(235mg，80％純度，0.68mmol)，三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(phosphoniumhexafluorophosphate)(PyBrOP)(381mg，0.19mmol)，DIPEA(0.59mL，3.4mmol}和2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(261mg，0.75mmol)于DCM(5mL)中的混合攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(386mg，86％)，為白色固體LC-MS(ES)607(M+H)+。
f)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酰胺
將N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酰胺(150mg，0.25mmol)溶于MeOH(5mL)，并用NH2NH2(0.76mL，24.2mmol)處理。將反應(yīng)攪拌5小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水，加入氫氧化銨(0.32mL，30％wt％，2.46mmol)?；旌衔镉肈CM(5mL x 3)萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿。將該游離堿化合物溶于MeOH(2mL)，并用HCl(4M的二噁烷溶液，0.62mL，2.48mmol)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液濃縮，得到標(biāo)題化合物(90mg，66％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 477(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.00(d，J＝1.1Hz，1H)，7.77(d，J＝1.8Hz，1H)，7.72(d，J＝7.8Hz，1H)，7.59-7.52(m，2H)，7.44(d，J＝7.4Hz，1H)，6.57(d，J＝2.0Hz，1H)，4.67(m，1H)，3.87(s，3H)，和3.37-3.14(m，4H)。
實(shí)施例240 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)1-乙基-4-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑
在室溫，向NaH(4.3g，60％，108mmol)于THF(200mL)中的懸浮液中滴加4-甲基-1H-吡唑(6.8g，83mmol)。30分鐘后，滴加EtI(8.03mL，99mmol)。反應(yīng)結(jié)束后(2小時(shí))，反應(yīng)溶液用飽和NH4Cl水溶液稀釋，并用乙醚萃取。該乙醚級分用水(3x100mL)洗滌，用MgSO4干燥。
在0℃，向上述4-甲基吡唑的乙醚溶液中滴加n-BuLi(36.4mL，2.5M的己烷溶液，91mmol)。將反應(yīng)溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后冷卻至-78℃[J.Heterocyclic Chem.41，931(2004)]。向該反應(yīng)溶液中加入2-異丙氧基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷(18.49g，99mmol)。在-78℃下15分鐘后，將反應(yīng)經(jīng)1小時(shí)溫?zé)嶂?℃。反應(yīng)用飽和NH4Cl溶稀稀釋，并用DCM萃取。將有機(jī)物用Na2SO4干燥，真空濃縮，得到1-乙基-4-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(16g，80％純度)，為糖漿狀物，其不用進(jìn)一步純化而使用LC-MS(ES)m/z 155(M+H)+對于[RB(OH)2]。
b)4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，1.36mmol)，1-乙基-4-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(449mg，1.9mmol)，Pd(Ph3P)4(157mg，0.136mmol)，和K2CO3(536mg，4.07mmol)的混合物在70℃加熱2小時(shí)，濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，10-30％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.27g，79％)，為糖漿狀物L(fēng)C-MS m/z＝251(M+H)+。
c)4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(270mg，1.08mmol)于THF/H2O(2mL/0.4mL)中的溶液中加入KOH(303mg，1.79mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3。混合物用DCM(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸(240mg)，其不用進(jìn)一步純化在下一步直接使用LC-MS m/z＝237(M+H)+。
d)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(240mg，1.02mmol)和三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(Pybrop)(568mg，1.22mmol)的混合物中加入DIPEA(1.77ml，10.16mmol)。10分鐘后，加入2-{(2S，4Z)-2-氨基-4-[(1E)-1-(三氟甲基)-1-丙烯-1-基]-4，6-庚二烯-1-基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(425mg，1.22mmol)。2小時(shí)后，將溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(365mg，63％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 567(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(365mg，0.64mmol)溶于MeOH(8mL)，并用NH2NH2(0.1mL，3.22mmol)處理。將反應(yīng)攪拌5小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水，并加入氫氧化銨(4.18mL，30％wt％，32.2mmol)。混合物用DCM(5mL x 3)萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿。將該游離堿化合物溶于MeOH(2mL)，并用HCl(4M的二噁烷溶液，3.22mL，12.88mml)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液濃縮，得到標(biāo)題化合物(190mg，56.7％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z437(M+H)+，NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.96(m，1H)，8.17-8.04(m，4H)，7.87(s，1H)，7.69(d，J＝7.6Hz，1H)，7.62(m，1H)，7.53(dd，J＝7.3，7.3Hz，1H)，7.42(d，J＝7.6Hz，1H)，7.38(s，1H)，4.50(m，1H)，4.09(q，J＝7.3Hz，2H)，3.18-2.98(m，4H)，2.00(s，3H)，和1.27(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例241 (N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(125mg，0.53mmol)[來自于實(shí)施例240(c)]于DCM(5mL)中的溶液中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)(350mg，0.75mmol)，接著添加DIPEA(0.7ml，4.0mmol)。10分鐘后，將2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(180mg，0.60mmol)加至上述溶液中。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物(258mg，94％)純化，為白色固體LC-MS(ES)m/z 517(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(0.1mL，3.19mmol)加至于MeOH(5ml)中的N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(252mg，0.49mmol)中。10小時(shí)后，在真空下除去溶劑。將得到的殘余物溶于DCM(10mL)，并用H2O(10mL x 3)洗滌。
向上述DCM溶液中加入HCl(36％，2mL)。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM (10ml x 3)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(170mg，72％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 387(M+H)+，NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.87(d，J＝8.9Hz，1H)，8.08(br s，2H)，8.01(s，1H)，7.08(s，1H)，7.37(s，1H)，7.35-7.29(m，1H)，7.16-7.10(m，2H)，7.05-7.00(m，1H)，4.38(m，1H)，4.07(q，J＝7.3Hz，2H)，3.04-2.94(m，4H)，2.00(s，3H)，和1.26(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例242 N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物(180mg，67％)根據(jù)實(shí)施例241的方法制備，為灰白色固體，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(220mg，0.63mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 437(M+H)+，NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.96(d，J＝8.84Hz，1H)，8.15(m，2H)，8.04(d，J＝1.3Hz，1H)，7.86(d，J＝1.3Hz，1H)，7.69-7.49(m，4H)，7.36(s，1H)，4.39(m，1H)，4.09(q，J＝7.1Hz，2H)，3.11-3.00(m，4H)，1.99(s，3H)，和1.25(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例243 N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例241的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(160mg，0.536mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 387(M+H)+，NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.90(d，J＝8.6Hz，1H)，8.13(m，2H)，8.03(d，J＝1.3Hz，1H)，7.87(d，J＝1.3Hz，1H)，7.38-7.30(m，3H)，7.12-7.08(m，2H)，4.36(m，1H)，4.07(q，J＝7.1Hz，2H)，3.07-2.97(m，2H)，2.96-2.88(m，2H)，2.00(s，3H)，和1.25(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例244 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物(210mg，72％)根據(jù)實(shí)施例241的方法制備，為灰白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(240mg，0.76mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 405(M+H)+，NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.99(d，J＝8.34Hz，1H)，8.16(m，2H)，8.09(d，J＝1.0Hz，1H)，7.87(d，J＝1.0Hz，1H)，7.40-7.30(m，3H)，7.13(br s，1H)，4.36(m，1H)，4.08(q，J＝7.3Hz，2H)，3.06-2.99(m，2H)，2.96-2.33(m，2H)，2.00(s，3H)，和1.26(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例245 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(230mg，0.9mmol)，1-乙基-4-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(425mg，1.8mmol)，PdCl2(dppf)(65.9mg，0.09mmol)，和碳酸鈉(2N水溶液，1.35mL，2.7mmol)于THF(5mL)中的混合物在密封管中加熱至70℃。5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，40-60％)純化，得到標(biāo)題化合物(241mg，92％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z＝285(M+H)+。
b)5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(260mg，0.90mmol)于THF/H2O(2mL/2mL)中的溶液中加入KOH(201mg，3.6mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，其不用進(jìn)一步純化直接使用LC-MS(ES)m/z 271(M+H)+。
c)5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向上述于DCM(5mL)中的酸中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)(542mg，1.16mmol)，接著添加DIPEA(0.16mL，0.90mmol)。10分鐘后，一次加入2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(312mg，0.90mmol)。2小時(shí)后，反應(yīng)溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(278mg，49％，2步)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 601(M+H)+。
d)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(255mg，0.42mmol)溶于MeOH(2mL)，并用NH2NH2(0.13mL，4.2mmol)處理。將反應(yīng)攪拌5小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水，并加入氫氧化銨?；旌衔镉肈CM(5mL x 3)萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿。將該游離堿化合物溶于MeOH(1mL)，并用HCl(4M二噁烷溶液，2.1mL)處理。攪拌過夜后，將混合物濃縮，得到120mg標(biāo)題化合物(120mg，49％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 471(M+H)+，1H NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.91(br s，2h)，7.71(m，1H)，7.59(m，1H)，7.53(m，1H)，7.44(m，1H)，4.65(m，1H)，4.21(m，2H)，3.37-3.14(m，4H)，2.07(s，3H)，和1.40(m，3H)。
實(shí)施例246 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在25℃，向5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(130mg，0.48mmol)[來自于實(shí)施例245(b)]于DCM(5mL)中的溶液中一次加入PyBrOP(250mg，0.54mmol)，接著添加DIPEA(0.7mL，4.01mmol)。10分鐘后，將2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(150mg，0.50mmol)加至上述溶液中。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(210mg，79％)，為白色固體LC-MS m/z(ES)551(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(0.1mL，3.19mmol)加至于MeOH(3mL)中的5-氯-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(201mg，0.36mmol)中。10小時(shí)后，在真空下除去溶劑。將得到的殘余物溶于DCM(10mL)，并用H2O(10mL x 3)洗滌。向DCM溶液中加入HCl(36％，2mL)。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM(10ml x 3)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(101mg，53％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 421(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 9.02(d，J＝8.3Hz，1H)，8.08(s，2H)，7.97(s，1H)，7.42(s，1H)，7.32(m，1H)，7.15-7.09(m，1H)，7.06-7.01(m，1H)，4.35(m，1H)，3.95(m，2H)，3.05-2.98(m，2H)，2.96-2.88(m，2H)，和1.92(s，3H)，和1.24(t，J＝6.6Hz，3H)。
實(shí)施例247 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物(95mg，50.2％)根據(jù)實(shí)施例246的方法制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(152mg，0.48mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 439(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 9.10(d，J＝8.6Hz，1H)，8.13(s，2H)，8.03(s，1H)，7.42(s，1H)，7.39-7.30(m，2H)，7.15-7.10(m，1H)，4.33(m，1H)，3.95(m，2H)，3.05-2.99(m，2H)，2.96-2.88(m，2H)，1.92，和1.24(t，J＝6.3Hz，3H)。
實(shí)施例248 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-(4-乙烯基-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
在N2中，將4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(200mg，0.64mmol)，Pd(Ph3P)4(73.3mg，0.06mmol)，和三丁基(乙烯基)錫烷(302mg，0.95mmol)的混合物在密封管中在90℃加熱1小時(shí)。混合物在硅膠上(10％-20％EtOAc的Hex溶液)純化，得到標(biāo)題化合物(151mg，76％)LC-MS(ES)m/z263(M+H)+。
b)4-(1，4-二乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將Pd/C(12mg，10％)加至4-(4-乙烯基-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸乙基酯(150mg，0.57mmol)于EtOH中的溶液中。體系中的空氣在真空下除去。將反應(yīng)混合物在氣球氫下攪拌10小時(shí)。反應(yīng)用MeOH(2mL)稀釋，并通過塞力特硅藻土過濾。濃縮反應(yīng)溶液，得到標(biāo)題化合物(149mg，94％)，為黃色油狀物L(fēng)C-MS(ES)m/z 265(M+H)+。
c)4-(1，4-二乙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向4-(1，4-二乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(149mg，0.56mmol)于THF/H2O(5mL/5mL)中的溶液中加入KOH(158mg，2.82mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸，其不用進(jìn)一步純化直接使用LC-MS(ES)m/z 251(M+H)+。
在25℃，向上述于DCM(5mL)中的酸中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)(315mg，0.68mmol)，接著添加DIPEA(0.98mL，5.64mmol)和2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(196mg，0.56mmol)。2小時(shí)后，濃縮溶液，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.315g，94％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 581(M+H)+。
d)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將4-(1，4-二乙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(310mg，0.53mmol)溶于MeOH(1mL)，并用NH2NH2(0.34mL，10.68mmol)處理。將反應(yīng)攪拌5小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水(2mL)，并加入氫氧化銨(3.47mL，30％，26.7mmol)。混合物用DCM(5mL x 3)萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿。將該游離堿溶于MeOH(1mL)，并用HCl(4M的二噁烷溶液，2.1mL)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液濃縮，得到標(biāo)題化合物(140mg，48％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 451(M+H)+，1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.25-8.23(m，1H)，8.16-8.14(m，1H)，8.10-8.08(m，1H)，7.71-7.67(m，1H)，7.65-7.61(m，1H)，7.52-7.47(m，1H)，7.44-7.39(m，1H)，4.69(m，1H)，4.45-4.37(m，2H)，3.39-3.18(m，4H)，2.63-2.55(m，2H)，1.49-1.44(m，3H)，和1.24-1.19(m，3H)。
實(shí)施例249 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
方法A 向4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(500mg，1.96mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入Na2CO3水溶液(2N，3mL，6.0mmol)，PdCl2(dppf)(143mg，0.196mmol)和1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(522mg，2.35mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至70℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，10-20％)純化，得到標(biāo)題化合物(410mg，77％)，為棕黃色固體LC-MS(ES)m/z 271(M+H)+。
方法B 向250mL密封燒瓶中加入于1，4-二噁烷(120mL)和H2O(20ml)中的1，4-二甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(10.43g，47.0mmol)，碳酸鉀(16.23g，117mmol)，4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(10g，39.1mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(1.6g，3.13mmol)。在70℃攪拌90分鐘后，反應(yīng)溶液用DCM(100mL)稀釋，并用H2O洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上(己烷/EtOAC，10-30％)純化，得到標(biāo)題化合物(7.6g，72％)，為棕黃色固體LC-MS(ES)m/z 271(M+H)+。
b)5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸
向5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(7.6g，28.1mmol)于THF/H2O(30mL/5mL)中的溶液中加入KOH(4.72g，84mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)1小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(50mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸(6.8g，94％)，其不用進(jìn)一步純化在下一步直接使用LCMS(ES)m/z257(M+H)+。
c)5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
向500mL圓底燒瓶中加入于二氯甲烷(DCM)(100mL)中的5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸(6.8g，26.5mmol)，2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(8.69g，29.1mmol)，N，N-二異丙基乙基胺(14mL，80mmol)和Pybrop(18.52g，39.7mmol)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，反應(yīng)溶液用H2O(2x100mL)洗滌，有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。將粗產(chǎn)物加至硅膠柱上，并用(EtOAc/己烷，1∶1)洗脫，得到標(biāo)題化合物(6.1g，42.9％)，為白色固體LCMS(ES)m/z 537(M+H)+。
d)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(4mL，127mmol)加至于MeOH(30ml)中的5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(5.2g，9.68mmol)中。10小時(shí)后，在真空下除去溶劑。將得到的殘余物溶于DCM(200mL)中，并用H2O(50mLx5)洗滌。
向上述DCM溶液中加入HCl(36％，50mL，600mmol)。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM(50ml x 5)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(3.8g，79％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 407(M+H)+，NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 8.75(d，J＝8.8Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.85(m，1H)，7.34-7.29(m，1H)，7.15-7.09(m，2H)，7.00-6.95(m，1H)，4.54(m，1H)，3.88(s，3H)，3.26-3.18(m，2H)，3.09-2.98(m，2H)，和2.08(s，3H)。
實(shí)施例250 N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例249的方法制備，為白色固體(180mg，68％)，除了用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(209mg，0.6mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 457(M+H)+，NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.94(s，1H)，7.90(s，1H)，7.65-7.60(m，2H)，7.55-7.48(m，2H)，4.55(m，1)，3.89(s，3H)，3.37-3.27(m，2H)，3.16-3.06(m，2H)，和2.08(s，3H)。
實(shí)施例251 N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例249的方法制備，為白色固體(95mg，39％)，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(584mg，1.96mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮LC-MS(ES)m/z 407(M+H)+，NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.81(s，2H)，7.35-7.31(m，2H)，7.06-7.01(m，2H)，4.51(m，1H)，3.89(s，3H)，3.25-3.16(m，2H)，3.05-2.94(m，2H)，和2.07(s，3H)。
實(shí)施例252 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
a)4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
向4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(500mg，2.439mmol)于THF(5mL)中的溶液中加入Na2CO3水溶液(2N，3.6mL，7.2mmol)，PdCl2(dppf)(160mg，0.22mmol)，和1-乙基-4-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(700mg，2.96mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至70℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，20-40％)純化，得到標(biāo)題化合物(460mg，76％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z 235(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
向4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(210mg，0.90mmol)于THF/H2O(5mL/0.5mL)中的溶液中加入KOH(200mg，3.56mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O(2mL)稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸，其不用進(jìn)一步純化在下一步直接使用LC-MS(ES)m/z 221(M+H)+。
在25℃，向于DCM(5mL)中的粗產(chǎn)物4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸中一次加入PyBrOP(370mg，0.79mmol)，接著添加DIPEA(0.8mL，4.58mmol)。10分鐘后，將2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(220mg，0.74mmol)加至反應(yīng)溶液中。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(164mg，54％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 501(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(0.1mL，3.19mmol)加至N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺(150mg，0.3mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中。10小時(shí)后，在真空下除去溶劑。將得到的殘余物溶于DCM(10mL)，并用H2O(10mL x3)洗滌。
向DCM溶液中加入HCl(36％，1mL，12mmol)。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM(10ml x 3)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(80mg，57％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 371(M+H)+，NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 8.19(s，1H)，8.05(s，1H)，7.44(s，1H)，7.32(m，1H)，7.16-7.08(m，2H)，6.97(m，1H)，4.62(m，1H)，4.37(q，J＝7.1Hz，2H)，3.38-3.18(m，2H)，3.10-2.99(m，2H)，2.15(s，3H)，和1.46(t，J＝7.1Hz，3H)。
實(shí)施例253 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
a)4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
向4-溴-2-呋喃甲酸甲酯(1.0g，4.88mmol)于THF(20mL)中的溶液中加入Na2CO3水溶液(2N，8mL，16mmoL)，PdCl2(dppf)(0.35g，0.49mmol)和1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.3g，5.85mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至70℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，20-40％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.8g，74.5％)，為淺黃色固體LC-MS(ES)m/z＝221(M+H)+。
b)4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
將4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(300mg，1.36mmol)和NCS(218mg，1.63mmol)于THF(5mL)中的混合物在密封管中加熱至70℃。5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，10-20％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(260mg，75％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 255(M+H)+。
c)4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-呋喃甲酰胺
向4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(250mg，0.98mmol)于THF/H2O(5mL/0.5mL)中的溶液中加入KOH(200mg，3.56mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮后，用H2O(2mL)稀釋，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(5mL x3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸，其不用進(jìn)一步純化直接使用LC-MS(ES)m/z 241(M+H)+。
在25℃，向上述于DCM(5mL)中的粗產(chǎn)物酸中一次加入PyBrOP(550mg，1.18mmol)，接著添加DIPEA(0.7mL，4.01mmol)。10分鐘后，將2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(322mg，1.08mmol)加至反應(yīng)溶液中。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，20-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(360mg，70％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 521(M+H)+。
d)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(0.15mL，4.78mmol)加至4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-呋喃甲酰胺(350mg，0.67mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中。10小時(shí)后，在真空下除去溶劑。將得到的殘余物溶于DCM(15mL)，并用H2O(10mLx 3)洗滌。
向上述DCM溶液中加入HCl(36％，2mL，23.7mmol))。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM(10ml x 3)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(260mg，78％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 391(M+H)+。NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.70(m，1H)，8.29(s，1H)，8.02(m，2H)，7.70(s，1H)，7.50-7.45(m，1H)，7.36-7.30(m，1H)，7.14-7.08(m，2H)，7.06-7.01(m，1H)，4.43(m，1H)，4.16(q，J＝7.3Hz，2H)，3.04-2.88(m，4H)，和1.30(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例254 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-溴-3-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-2-噻吩甲酸甲酯
在0℃，向4-溴-3-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2-噻吩甲酸甲酯(0.948g，4.0mmol)于CH2Cl2(5mL)和吡啶(1mL)中的溶液中加入Tf2O(1.0mL，6.0mmol)?；旌衔飻嚢?小時(shí)，傾倒至冰水(10mL)中，并用CH2Cl2(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，并濃縮，得到紅色漿狀物，其不用進(jìn)一步純化在下一步直接使用LC-MS(ES)m/z 370(M+H)+。
b)4-溴-3-甲基-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-3-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2-噻吩甲酸甲酯(825mg，2.25mmol)于二噁烷/H2O(5mL/1mL)中的溶液中加入K2CO3(930mg，6.75mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(260mg，0.22mmol)，和甲基硼酸(175mg，2.91mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至70℃，持續(xù)12小時(shí)。將反應(yīng)溶液真空濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，9∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(441mg，84％)，為棕色固體LC-MS(ES)m/z 236(M+H)+。
c)4-[1-(二甲基氨基)乙烯基]-3-甲基-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-3-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(300mg，1.27mmol)于二噁烷/H2O(5mL/1mL)中的溶液中加入K2CO3(525mg，3.80mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(15mg，0.01mmol)，和1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(345mg，1.7mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至70℃，持續(xù)2小時(shí)。將反應(yīng)溶液真空濃縮，并在硅膠上(己烷/EtOAc，9∶1 to 4∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(270mg，90％)LC-MS(ES)m/z 237(M+H)+。
d)[2-({[3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向4-[1-(二甲基氨基)乙烯基]-3-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(50mg，0.21mmol)于THF/H2O(2mL/0.5mL)中的溶液中加入KOH(122mg，2.1mmol)。將得到的混合物加熱至50℃，持續(xù)2小時(shí)。在真空下除去THF，水層用6N HCl酸化至pH 3，并用CH2Cl2(5mL x 3)萃取。有機(jī)級分用Na2SO4干燥，并濃縮，得到粗產(chǎn)物3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸，其在下一步中直接使用。
向粗產(chǎn)物3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸于DCM(2mL)中的溶液中加入PyBrop(0.14g，0.3mmol)和DIPEA(0.1mL，0.57mmol)。15分鐘后，將(2-氨基-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯一次加至該反應(yīng)中，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)溶液真空濃縮，并在硅膠上(EtOAc/己烷，20-50％)純化，得到標(biāo)題化合物(51mg，49％，2步)，為固體LC-MS(ES)m/z455(M+H)+。
e)N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向[2-({[3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(51mg，0.11mmol)于DCM(1mL)中的溶液中加入TFA(1mL)。將反應(yīng)攪拌5小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，40-10％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽(16mg，41％)LC-MS(ES)m/z 355(M+H)+。NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.64(s，1H)，7.56(d，J＝1.8Hz，1H)，7.36-7.30(m，4H)，7.28-7.21(m，1H)，6.30(d，J＝2.0Hz，1H)，4.58(m，1H)，3.69(s，3H)，3.27-3.13(m，2H)，3.07-2.93(m，2H)，和2.13(s，3H)。
實(shí)施例255 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺
a)4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-2-噻吩甲酸甲酯(1.0g，4.5mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，12mL)中的溶液中加入K2CO3(1.86mg，13.5mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(300mg，0.25mmol)，和1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(1.23g，5.9mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至75℃，持續(xù)2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex 10-40％)純化，得到標(biāo)題化合物(701mg，70％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 223(M+H)+。
b)4-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(700mg，3.15mmol)于THF(5mL)中的溶液中一次加入NIS(922mg，4.09mmol)。將反應(yīng)混合物在75℃攪拌10小時(shí)，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex10-20％)純化，得到標(biāo)題化合物(470mg，43％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 350(M+H)+。
c)4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸甲酯
向4-(4-碘-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(470mg，1.35mmol)，碘化銅(I)(256mg，1.35mmol)和氟化鉀(78mg，1.35mmol)于無水DMF/HMPA(2ml/2mL)中的溶液中加入三乙基(三氟甲基)硅烷(745mg，4.04mmol)。在N2中，將該混合物在密封管中加熱至70℃。10小時(shí)后，反應(yīng)用NH4Cl(飽和)(2mL)終止，用乙醚(5mL x 5)萃取，并用蒸餾水(5mL x 5)洗滌。將合并的有機(jī)相用Mg2SO4干燥，并在硅膠上(EtOAc/Hex，10-30％)純化，得到標(biāo)題化合物(0.29g，74％)，為黃色糖漿狀物L(fēng)C-MS(ES)m/z 291(M+H)+。
d)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺
向4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酸甲酯(150mg，0.52mmol)于THF/H2O(2mL/0.5mL)中的溶液中加入KOH(116mg，2.0mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)2小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸，其不用進(jìn)一步純化在下一步中直接使用LC-MS(ES)m/z 277(M+H)+。
在25℃，向上述于DCM(5mL)中的酸中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)(279mg，0.59mmol)，接著添加DIPEA(0.5mL，2.87mmol)和2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(174mg，0.5mmol)。2小時(shí)后，濃縮溶液，并通過柱色譜(硅膠，1-10％MeOH/CHCl3)純化，得到標(biāo)題化合物(0.21g，67％，2步)LC-MS(ES)m/z 607(M+H)+。
e)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺
將N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺(210mg，0.35mmol)溶于MeOH(2mL)，并用NH2NH2(0.5mL，15.9mmol)處理。將反應(yīng)攪拌10小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，40-10％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水，并用氫氧化銨中和?；旌衔镉肈CM萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿。將該游離堿化合物溶于MeOH，并用HCl(水溶液)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)濃縮，得到標(biāo)題化合物(95mg，57％)，為白色固體。LC-MSLC-MS(ES)m/z 477(M+H)+。NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 8.92(d，J＝9.1Hz，1H)，8.06(m，4H)，7.99(s，1H)，7.69(d，J＝7.6Hz，1H)，7.59(d，J＝7.6Hz，1H)，7.53(m，1H)，7.43(m，1H)，4.49(m，1H)，3.83(s，3H)，和3.14-2.99(m，4H)。
實(shí)施例256 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)1-丙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑
在0℃，向NaH(60％，于礦物油中，4.0g，100mmol)于THF(200mL)中的懸浮液中滴加1H-吡唑(6.8g，100mmol)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，在0℃滴加PrI(17.85g，105mmol)。將反應(yīng)混合物再攪拌10小時(shí)，并通過LC-MS監(jiān)測m/e＝111(M+H)+。反應(yīng)結(jié)束后，通過過濾除去NaI。得到的含1-丙基-1H-吡唑的THF溶液在下一步中直接使用。
在-78℃，向上述1-丙基-1H-吡唑的THF溶液中加入n-BuLi(2.5M的己烷溶液，40mL，100mmol)。將反應(yīng)溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后再冷卻至-78℃[J.Heterocyclic Chem.41，931(2004)]。向該反應(yīng)溶液中加入2-異丙氧基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧雜硼雜環(huán)戊烷(18.6g，100mmol)。在-78℃下30分鐘后，反應(yīng)用飽和NH4Cl溶液終止，并用DCM萃取。將有機(jī)物用Na2SO4干燥，并真空濃縮，得到標(biāo)題化合物，為棕色固體，其不用進(jìn)一步純化直接使用LC-MS(ES)m/z 154(M+H)+對于[RB(OH)2]。
b)4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向4-溴-2-噻吩甲酸甲酯(221mg，1.0mmol)于二噁烷/H2O(5∶1，6mL)中的溶液中加入K2CO3(414mg，3.0mmol)，四(三苯基膦)合Pd(0)(60mg，0.05mmol)，和1-丙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(404mg，1.5mmol)。將反應(yīng)混合物在密封管中加熱至70℃，持續(xù)2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex 10-40％)純化，得到標(biāo)題化合物(176mg，70％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 251(M+H)+。
c)N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
向4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(160mg，0.64mmol)于THF/H2O(2mL/1mL)中的溶液中加入KOH(151mg，2.56mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)2小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸，其不用進(jìn)一步純化在下一步中直接使用。LCMS(ES)m/z＝237(M+H)+。
在25℃，向上述于DCM(2mL)中的酸中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)(298mg，0.64mmol)，接著添加DIPEA(0.2mL，1.15mmol)和2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(208mg，0.6mmol)。1小時(shí)后，濃縮溶液，并通過柱色譜(硅膠，1-10％MeOH/CHCl3)純化，得到標(biāo)題化合物(0.22g，61％，2步)LC-MS(ES)m/z 567(M+H)+。
d)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(220mg，0.36mmol)溶于MeOH(2mL)，并用NH2NH2(0.3mL，9.56mmol)處理。將反應(yīng)攪拌10小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水，并用氫氧化銨中和。混合物用DCM萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿。將該游離堿化合物溶于MeOH(2mL)，并用HCl(4M的二噁烷溶液)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液濃縮，得到標(biāo)題化合物(112mg，57％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 437(M+H)+，NMR(d6-DMSO，400MHz)δppm 9.06-8.99(m，1H)，8.23-8.02(m，4H)，7.92(br s，1H)，7.69(d，J＝7.8Hz，1H)，7.62-7.49(m，3H)，7.42(m，1H)，4.50(m，1H)，4.20(m，2H)，3.15-2.99(m，4H)，1.74(m，2H)，和0.80(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例257 N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)4-(4-氯-1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(250mg，1.0mmol)和NCS(200mg，1.5mmol)于THF(5mL)中的混合物在密封管中加熱至70℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，10％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(199mg，70％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 285(M+H)+。
b)4-(4-氯-1-丙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺
向4-(4-氯-1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(199mg，0.7mmol)于THF/H2O(2mL/0.5mL)中的溶液中加入KOH(100mg，1.7mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)2小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(5mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸，其不用進(jìn)一步純化在下一步中直接使用LC-MS(ES)m/z 271(M+H)+。
在25℃，向上述于DCM(5mL)中的酸中一次加入三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸鹽(PyBrOP)(326mg，0.7mmol)，接著添加DIPEA(0.3mL，1.15mmol)和2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(232mg，0.7mmol)。10分鐘后，將溶液濃縮，并通過柱色譜(硅膠，1-10％MeOH/CHCl3)純化，得到標(biāo)題化合物(312mg，74％，2步)LC-MS(ES)m/z601(M+H)+。
c)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將4-(4-氯-1-丙基-1H-吡唑-5-基)-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-2-噻吩甲酰胺(312mg，0.52mmol)溶于MeOH(2mL)，并用NH2NH2(0.5mL，15.9mmol)處理。將反應(yīng)攪拌10小時(shí)，濃縮，并通過反相HPLC(C18柱H2O/CH3CN，95-5％)純化，得到標(biāo)題化合物的雙-TFA鹽。將該雙-TFA鹽溶于水中，并用氫氧化銨中和?；旌衔镉肈CM萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物的游離堿。將該游離堿化合物溶于MeOH(2mL)，并用HCl(水溶液)處理。攪拌過夜后，將反應(yīng)濃縮，得到標(biāo)題化合物(185mg，66％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z471(M+H)+，NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.92(m，2H)，7.74-7.68(m，1H)，7.60(s，1H)，7.58-7.51(m，2H)，7.45-7.41(m，1H)，4.67(m，1H)，4.15(t.J＝7.1Hz，2H)，3.37-3.09(m，4H)，1.77(m，2H)，和0.82(t，J＝7.6Hz，3H)。
實(shí)施例258 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
a)5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
向100mL密封燒瓶中加入于1，2-二甲氧基乙烷(DME)(50mL)和H2O(10ml)中的1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.61g，11.74mmol)，碳酸鉀(3.25g，23.48mmol)，4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(2g，7.83mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.4g，0.78mmol)。在70℃攪拌3小時(shí)后，反應(yīng)溶液用DCM(100mL)稀釋，并用H2O洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上[EtOAc/己烷，10-30％]純化，得到產(chǎn)物[1.8g，85％]，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 271(M+H)+。
b)5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
在N2中，將5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(1.8g，6.65mmol)和NCS(1.3g，9.74mmol)于THF(10mL)中加熱至70℃，持續(xù)2小時(shí)。將反應(yīng)溶液濃縮，并在硅膠上(EtOAc/Hex，10-30％)純化，得到標(biāo)題化合物(1.5g，74％)，為糖漿狀物L(fēng)C-MS(ES)m/z 305(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
標(biāo)題化合物(290mg，58.4％)根據(jù)實(shí)施例236的方法制備，為灰白色固體，除了用5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(526mg，1.662mmol)代替5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺LC-MS(ES)m/z459(M+H)+，NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.76(m，1H)，7.62(s，1H)，7.28-7.22(m，1H)，7.20-7.10(m，2H)，4.52(m，1H)，4.07(m，2H)，3.27-3.16(m2H)，3.05-2.94(m，2H)，和1.34(m，3H)。
實(shí)施例259 N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
a)5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
向100mL密封燒瓶中加入于1，2-二甲氧基乙烷(DME)(30mL)和H2O(5mL)中的1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.61g，11.74mmol)，碳酸鉀(3.25g，23.48mmol)，4-溴-5-氯-2-呋喃甲酸甲酯(1.85g，8.33mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.16g，0.31mmol)。在75℃攪拌2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液用DCM(100mL)稀釋，并用H2O洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上[EtOAc/己烷，10-30％]純化，得到產(chǎn)物(0.8g，50.1％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 255(M+H)+。
b)5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯
將5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(800mg，3.14mmol)和NCS(600mg，4.49mmol)于THF(5mL)中的混合物在密封管中加熱至70℃。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，10-20％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(710mg，78％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 289(M+H)+。
c)5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-呋喃甲酰胺
向5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酸甲酯(480mg，1.66mmol)于THF/H2O(5mL/1mL)中的溶液中加入KOH(460mg，8.20mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮并用H2O(2mL)稀釋后，將pH調(diào)節(jié)至3?；旌衔镉肈CM(10mL x3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸(420mg，92％)，其不用進(jìn)一步純化直接使用LC-MS(ES)m/z 275(M+H)+。
在25℃，向上述于DCM(5mL)中的酸(400mg)中一次加入PyBrOP(881mg，1.89mmol)，接著添加DIPEA(1.5mL，8.59mmol)。10分鐘后，加入2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(506mg，1.60mmol)。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，30-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(655mg，79％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 573(M+H)+。
c)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(0.5mL，15.93mmol)加至5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-2-呋喃甲酰胺(610mg，1.06mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中。10小時(shí)后，在真空下除去溶劑。將得到的殘余物溶于DCM(20mL)，并用H2O(20mL x 3)洗滌。
向DCM溶液中加入HCl(36％，10mL，120mmol)。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM(30ml x 3)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(410mg，87％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 443(M+H)+，NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.61(s，1H)，7.36(s，1H)，7.29-7.10(m，3H)，4.57(m，1H)，4.09(q，J＝7.3Hz，2H)，3.27-3.23(m，1H)，3.20-3.14(m，1H)，3.06-3.01(m，1H)，2.97-2.92(m，1H)，和1.36(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例260
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(根據(jù)制備例22制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-苯基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮)(236mg，0.537mmol)，1-甲基-5-(三丁基錫烷基)-1H-1，2，3-三唑(200mg，0.537mmol)(根據(jù)專利IPN WO97/01553制備)，Pd(PPh3)2Cl2(37.7mg，0.054mmol)，三乙胺(74.9μl，0.537mmol)和甲苯(3ml)的混合物通過N2吹洗并密封。將該反應(yīng)混合物在110℃加熱4小時(shí)。LC/MS顯示反應(yīng)結(jié)束。將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題產(chǎn)物(120mg，51％)LCMS(ES)m/z＝442.2(M+H)。
b)N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[(2S)-2-({(4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(60mg，0.14mmol)于TFA-DCM(4ml，1∶3)中的溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。LCMS顯示反應(yīng)結(jié)束。將反應(yīng)混合物濃縮，且將殘余物通過反相HPLC(5％-65％乙腈的水溶液，含有0.1％TFA)純化，得到42.2mg(67％)的TFA鹽，為白色固體。LCMS(ES)m/z 342.2(M+H)+，1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.06(d，J＝1.52Hz，1H)，7.87-7.91(m，2H)，7.34-7.21(m，5H)，4.55(m，1H)，4.19(s，3H)，3.30-3.21(m，1H)，3.09-3.18(m，1H)，3.01(d，J＝7.6Hz，2H) 實(shí)施例261
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[(2S)-2-({[5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
向[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(70mg，0.16mmol)于2ml DMF中的溶液中加入NCS(42.3mg，0.32mmol)。將該反應(yīng)混合物在50℃加熱2小時(shí)，然后用50ml EtOAc稀釋。有機(jī)層用H2O洗滌，并濃縮，得到為粗混合物的標(biāo)題產(chǎn)物，其不用進(jìn)一步純化在下一步中使用。LCMS(ES)m/z＝510.2(M+H)。
b)N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[(2S)-2-({[5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自于a的粗產(chǎn)物)于TFA-DCM(4ml，1∶3)中的溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，且將殘余物通過反相HPLC(5％-65％乙腈的水溶液，含有0.1％TFA)純化，得到10mg白色固體(12％，2步)，為TFA鹽。LCMS(ES)m/z 410.0/412.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.62(s，1H)，7.32-7.25(m，5H)，4.55(m，1H)，4.02(s，3H)，3.21(m，1H)，3.10(m，1H)，2.98(d，2H)。
實(shí)施例262
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例260的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(123mg，0.27mmol)代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 360.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.05(d，J＝1.6Hz，1H)，7.89-7.91(m，2H)，7.33-7.30(m，2H，7.06-7.02(m，2H)，4.55(m，1H)，4.20(s，3H)，3.23(m，1H)，3.17(m，1H)，2.99(m，2H)。
實(shí)施例263
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[(2S)-3-(3，4-二氟苯基)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(50mg，0.11mmol)，1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-1，2，3-三唑(44mg，0.21mmol)，Na2CO3(2N，0.1ml)和PddppfCl2(8.6mg，0.01mmol)于3ml 1，4-二噁烷中的溶液在MW反應(yīng)器中于150℃輻射20分鐘。將該粗反應(yīng)混合物通過柱色譜(硅膠，70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題產(chǎn)物(29mg，46％)LCMS(ES)m/z＝478.2(M+H)。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例260b)制備，除了用[(2S)-3-(3，4-二氟苯基)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(29mg，0.06mmol)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 378.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.07(d，J＝1.6Hz，1H)，7.88-7.91(m，2H)，7.23-7.09(m，3H)，4.55(m，1H)，4.20(s，3H)，3.24(m，1H)，3.15(m，1H)，2.98(m，2H)。
實(shí)施例264
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-(4-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(68mg，0.15mmol)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 428.0/430.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.66(s，1H)，7.30(m，2H)，7.04(m，2H)，4.55(m，1H)，4.02(s，3H，3.21-3.10(m，2H)，2.98(m，2H)。
實(shí)施例265
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例263的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(300mg，0.66mmol)代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 360.2(M+H)+，1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.06(d，J＝1.6Hz，1H)，7.90(m，2H)，7.33-7.30(m，1H)，7.13-7.09(m，2H)，6.98-6.95(m，1H)，4.55(m，1H)，4.19(s，3H)，3.24(m，1H)，3.17(m，1H)，3.04-2.99(m，2H)。
實(shí)施例266
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例263的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，5-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(300mg，0.66mmol)代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 378.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.06(d，J＝1.6Hz，1H)，7.91(m，2H)，6.96-6.93(m，2H)，6.84-6.83(m，1H)，4.55(m，1H)，4.19(s，3H)，3.24(m，1H)，3.19(m，1H)，3.05-2.98(m，2H)。
實(shí)施例267
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-三氟甲基苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例263的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3-(三氟甲基)苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(500mg，0.99mmol)代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 410.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.06(d，J＝1.2Hz，1H)，7.97(s，1H)，7.91(s，1H)，7.72(d，J＝1.2Hz，1H)7.54(m，2H)，7.44(m，1H)，4.55(m，1H)，4.21(s，3H)，3.30-3.10(m，4H)。
實(shí)施例268
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-(3-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(50mg，0.11mmol)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 428.0/430.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.63(s，1H)，7.33(m，1H)，7.12-7.07(m，3H)，4.55(m，1H)，4.02(s，3H)，3.23-2.98(m，4H)。
實(shí)施例269
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-(三氟甲基)苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
在N2中，將1-甲基-5-(三丁基錫烷基)-1H-1，2，3-三唑(2.0g，5.37mmol)，4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯(1.25g，4.9mmol)，Pd(PPh3)2Cl2(171mg，0.244mmol)，三乙胺(0.68ml，4.89mmol)和甲苯(3ml)的混合物在110℃加熱4小時(shí)。反應(yīng)混合物通過柱色譜(硅膠，50％-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(400mg，32％)LCMS(ES)m/z 258.2(M+H)+。
b)5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸
將5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(400mg，1.55mmol)和1N LiOH(2.0ml，2.0mmol)于THF(6ml)中的溶液在室溫?cái)嚢柽^夜。除去THF后，將殘余物用10ml H2O稀釋，并用DCM(10ml x 2)洗滌。水層用1N HCl酸化至pH 3，然后用EtOAc(30ml x 4)萃取。合并有機(jī)層，并濃縮，得到370mg標(biāo)題化合物，為白色固體。LCMS(ES)m/z 244.0(M+H)+。
c)5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸(370mg，1.52mmol)，2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(來自于制備例6，529mg，1.52mmol)，PyBrop(708mg，1.52mmol)和DIPEA(2.65ml，15.2mmol)于20ml DCM中的溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物用50mlDCM稀釋，并用H2O，0.1N HCl和鹽水洗滌。將有機(jī)層濃縮，且殘余物通過柱色譜(硅膠，50％-70％EtOAc的己烷溶液)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(700mg，80％)LCMS(ES)m/z 574.0(M+H)+。
d)N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-(三氟甲基)苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(700mg，1.22mmol)和肼(0.19mL，6.1mmol)于5mL MeOH中的溶液在室溫?cái)嚢柽^夜，用200ml H2O稀釋，并用DCM(100ml x2)萃取。將合并的有機(jī)層濃縮，將得到的固體溶于6N HCl(50ml)。水層用DCM(50ml x2)洗滌。丟棄有機(jī)層，且將剩余的水溶液濃縮，得到產(chǎn)物的HCl鹽(490mg，75％)LCMS(ES)m/z444.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.10(m，1H)，7.92(m，1H)，7.73(m，1H)，7.57(m，1H)，7.44(m，1H)，4.65(m，1H)，4.17(s，3H)，3.25-3.11(m，4H)。
實(shí)施例270
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269的方法制備，為灰白色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯(來自于制備例10)代替4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-苯基丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(制備例5)代替2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z 356.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.60(s，1H)，8.01(s，1H)，7.34-7.21(m，5H)，4.55(m，1H)，4.26(s，3H)，3.25(m，2H)，3.03(m，2H)，2.21(s，3H)。
實(shí)施例271
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-(三氟甲基)苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，為白色固體，除了用N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-(三氟甲基)苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(120mg，0.27mmol)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 478.0/480.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.79(s，1H)，7.73(d，J＝7.6Hz，1H)，7.56(m，2H)，7.45(m，1H)，4.65(m，1H)，4.05(s，3H)，3.29-3.10(m，4H)。
實(shí)施例272
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-({[5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(在實(shí)施例270中制備)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 390.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.72(s，1H)，7.31-7.22(m，5H)，4.55(m，1H)，3.99(s，3H)，3.19(m，2H)，3.02(m，2H)，2.41(s，3H)。
實(shí)施例273
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269a)的方法制備，除了用4-溴-2-噻吩甲酸甲酯代替4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯。LCMS(ES)m/z 224.0(M+H)+。
b)4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯
將4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯(500mg，2.24mmol)和NCS(1196mg，8.96mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(10ml)中的溶液在50℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用50ml EtOAc稀釋。有機(jī)層用H2O(50ml x2)和鹽水(50ml)洗滌，然后濃縮，得到460mg粗混合物，其不用進(jìn)一步純化在下一步中直接使用。LCMS(ES)m/z 258.0(M+H)+。
c)4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸
標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269b)的方法制備，除了用4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸甲酯代替4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯。LCMS(ES)m/z 244.0(M+H)+。
d)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269c-d)的方法制備，除了用4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸代替4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z 412.0/414.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm8.13(m，1H)，8.06(m，1H)，6.97(m，2H)，6.82(m，1H)，4.55(m，1H)，4.16(s，3H)，3.26(m 2H)，3.04(m，2H)。
實(shí)施例274
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例273的方法制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(82mg，0.15mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z412.0/414.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.12(d，J＝1Hz，1H)，8.05(d，J＝1Hz，1H)7.30-7.10(m，3H)，4.55(m，1H)，4.16(s，3H)，3.26(m 2H)，2.99(m，2H)。
實(shí)施例275
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-(三氟甲基)苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例274的方法制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(2-(三氟甲基)苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(130mg，0.23mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z 444.0/446.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)

ppm 8.13(d，J＝1Hz，1H)，8.09(d，J＝1Hz，1H)，7.72(m，1H)，7.56(m，2H)，7.43(m，1H)，4.60(m，1H)，4.17(s，3H)，3.26-3.15(m，4H)。
實(shí)施例276
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例273的方法制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(4-氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(73mg，0.14mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z 410.0/412.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.12(d，J＝1Hz，1H)，8.03(d，J＝1Hz，1H)，7.31(m，4H)，4.55(m，1H)，4.15(s，3H)，3.26(m 2H)，3.05(m，2H)。
實(shí)施例277
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例273的方法制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(67mg，0.12mmol)代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z444.0/448.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)

ppm 8.12(d，J＝1Hz，1H)，8.03(d，J＝1Hz，1H)，7.49(d，1H)，7.38(d，1H)，7.25(m，1H)，4.60(m，1H)，4.16(s，3H)，3.30-3.09(m，4H)。
實(shí)施例278
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例263的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(環(huán)己基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(300mg，0.67mmol)代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 348.2(M+H)+，1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.09(d，J＝1Hz，1H)，8.03(d，J＝1Hz，1H)，7.91(s，1H)，4.48(m，1H)，4.22(s，3H)，3.20(m 1H)，3.05(m，1H)，2.00-0.95(m，13H)。
實(shí)施例279
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-環(huán)己基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(50mg，0.11mmol)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 416.0/418.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.74(s，1H)，4.48(m，1H)，4.04(s，3H)，3.40-2.95(m 2H)，1.90-0.95(m，13H)。
實(shí)施例280
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269的方法制備，為白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-環(huán)己基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-{(2S)-2-氨基-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z 382.2(M+H)+，1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.93(s，1H)，7.81(m，1H)，4.43(m，1H)，4.10(s，3H)，3.17(m 1H)，3.05(m，1H)，2.00-0.90(m，13H)。
實(shí)施例281
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)261的方法制備，為灰白色固體，除了用[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-環(huán)己基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(100mg，0.22mmol)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，并將NCS的量降至1當(dāng)量。LCMS(ES)m/z 382.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.15(d，J＝1Hz，1H)，8.08(d，J＝1Hz，1H)，4.45(m，1H)，4.16(s，3H)，3.14(m 1H)，3.05(m，1H)，2.00-0.90(m，13H)。
實(shí)施例282
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-溴-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 將[(2S)-2-({[5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-環(huán)己基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(140mg，0.29mmol，在實(shí)施例280中制備)和NBS(103mg，0.58mmol)于2mL DMF中的溶液在100℃加熱2小時(shí)。反應(yīng)混合物通過反相HPLC(5-65％乙腈的H2O溶液，含有1％TFA)純化，得到14.1mg(8％)標(biāo)題化合物，為白色固體。LCMS(ES)m/z 462.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.75(s，1H)，4.43(m，1H)，4.05(s，3H)，3.17(m 1H)，3.05(m，1H)，2.00-0.90(m，13H)。
實(shí)施例283
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例260的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(5-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(270mg，0.62mmol)代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 342.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.96(s，1H)，7.75(d，J＝3.6Hz，1H)，7.47(d，J＝3.6Hz，1H)，7.31-7.22(m，5H)，4.55(m，1H)，4.21(s，3H)，3.20(m，2H)2.99(m，2H)。
實(shí)施例284
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-({[5-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(68mg，0.15mmol)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 376.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)

ppm7.82(m，1H)，7.55(d，J＝3.6Hz，1H)，7.47(d，J＝3.6Hz，1H)，7.32-7.23(m，5H)，4.55(m，1H)，4.19(s，3H)，3.20(m，2H)，3.02(m，2H)。
實(shí)施例285
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269的方法制備，為灰白色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(參見Bach，T.；Kruger，L.Synlett 1998，1185-1186)代替4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯。LCMS(ES)m/z 408.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.09(s，1H)，7.71(m，1H)，7.55(m，2H)，7.43(m，2H)，4.68(m，1H)，4.13(s，3H)，3.25-3.15(m，4H)，2.48(s，3H)。
實(shí)施例286
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例260的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-呋喃基)羰基]氨基}-3-(2-(三氟甲基)苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(200mg，0.4mmol)代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 394.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.23(s，1H)，7.93(s，1H)，7.71(d，1H)，7.54(m，2H)，7.43(m，2H)，4.75(m，1H)，4.18(s，3H)，3.30-3.10(m，4H)。
實(shí)施例287
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃基]羰基}氨基)-3-(2-(三氟甲基)苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(90mg，0.18mmol)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LCMS(ES)m/z 462.0/464.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.73(m，1H)，7.56(m，2H)，7.45(m，1H)，7.40(s，1H)，4.75(m，1H)，4.05(s，3H)，3.30-3.10(m，4H)。
實(shí)施例288
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-氟苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269的方法制備，為灰白色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯代替4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[3-氟苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z 358.2(M+H)+，1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.47(s，1H)，7.44(s，1H)，7.35(m，1H)，7.15(m，2H)，6.96(m，1H)，4.65(m，1H)，4.22(s，3H)，3.25(m，2H)，3.04(m，2H)，2.49(s，3H)。
實(shí)施例289
N-((1S)-2-氨基-1-{[3，5-二氟苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269的方法制備，為灰白色固體，除了用4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯代替4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯，以及用2-{(2S)-2-氨基-3--[3，5-二氟苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LCMS(ES)m/z 376.2(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.30(s，1H)，7.43(s，1H)，6.95(m，2H)，6.82(m，1H)，4.53(m，1H)，4.18(s，3H)，3.25(m，2H)，3.07(m，2H)，2.48(s，3H)。
實(shí)施例290
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，為白色固體，除了用N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(根據(jù)實(shí)施例263制備)代替[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，并根據(jù)實(shí)施例269脫保護(hù)。LCMS(ES)m/z446.0/448.0(M+H)+，1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.88(s，1H)，7.20-7.15(m，3H)，4.53(m，1H)，4.05(s，3H)，3.23(m，2H)，3.00(m，2H)。
實(shí)施例291
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
將((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(根據(jù)制備例22制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-苯基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮)(200mg，0.455mmol))，5，5，5′，5′-四甲基-2，2′-聯(lián)-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷(123mg，0.546mmol)，乙酸鉀(134mg，1.366mmol)，和PdCl2(dPPf)2(16.7mg，0.023mmol)于無水THF(3ml)中的懸浮液加入密封管中，并加熱至80℃，持續(xù)1小時(shí)。然后加入5-碘-1-甲基-1H-1，2，4-三唑(114mg，0.546mmol)，2M碳酸鈉(0.34ml，0.683mmol)和Pd(Ph3P)4(26.3mg，0.023mmol)。將該混合物在85℃加熱2小時(shí)。除去溶劑，殘余物通過biotage(70％H/E)純化，得到標(biāo)題化合物(120mg，60％)。
b)N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
將TFA(1ml)加至[(2S)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)-3-苯基丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(100mg，0.226mmol)于DCM(5ml)中的溶液中。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?0分鐘。除去溶劑，殘余物通過反相HPLC(10％org～60％org)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(90mg，87％)。LC-MS(ES)m/z 342.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.03(m，2H)，7.22-7.31(m，5H)，4.60(m，1H)，4.08(s，3H)，3.10-3.20(m，2H)，3.00(m，2H)。
實(shí)施例292
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[(2S)-3-(3，4-二-氟苯基)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
該中間體根據(jù)實(shí)施例291a)的方法制備，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LC-MS(ES)m/z＝478.2(M+H)+。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 將[(2S)-3-(3，4-二氟苯基)-2-({[4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩基]羰基}氨基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(279mg，0.497mmol)和NCS(133mg，0.993mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(3ml)中的溶液在110℃加熱1小時(shí)。將粗反應(yīng)混合物濃縮，且殘余物通過快速柱色譜在硅膠(DCMMeOH∶NH4OH 9∶1∶1)上純化，得到為游離堿的產(chǎn)物，其用0.13mL 2NHCl水溶液(2當(dāng)量)處理，得到75mg HCl鹽，為灰白色固體。LC-MS(ES)m/z＝412(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ8.80(s，1H)，8.18(s，1H)，7.3-7.1(m，3H)，4.54(m，1H)，4.11(s，3H)，3.26(d，J＝7Hz，2H)，3.03(d，J＝8Hz，2H)。
實(shí)施例293
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291的方法制備，為灰白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終產(chǎn)物通過快速柱色譜在硅膠(DCM∶MeOH∶NH4OH9∶1∶1)上純化，得到游離堿，其用2N HCl水溶液處理，得到HCl鹽。LC-MS(ES)m/z＝378(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ8.78(s，1H)，8.50(d，J＝2Hz，1H)，8.36(d，J＝2Hz，1H)，7.3-7.1(m，3H)，4.57(m，1H)，4.23(s，3H)，3.27(d，J＝8Hz，2H)，3.04(d，J＝8Hz，2H)。
實(shí)施例294
N-[(1S，2S)-2-氨基-3-羥基-1-苯基丙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)[(1S，2S)-2-氨基-1-({[(1，1-二甲基乙基)(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
標(biāo)題化合物根據(jù)制備例1制備，除了用[(1R，2R)-1-({[(1，1-二甲基乙基)(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-羥基-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(參考Veeresa，G.；Datta，Apurba.Stereoselective synthesis of chloramphenicolfrom D-serine.Tetrahedron Letters(1998)，39(46)，8503-8504)代替(2-羥基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。
b)N-[(1S，2S)-2-氨基-3-羥基-1-苯基丙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 該中間體根據(jù)實(shí)施例261的方法制備，除了用[(1S，2S)-2-氨基-1-({[(1，1-二甲基乙基)(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-苯基乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替(2-氨基-2-苯基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LC-MS(ES)m/z＝425.0/427.0(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.86(s，1H)，7.59(s，1H)，7.56-7.38(m，5H)，5.50(m，1H)，3.91-3.84(m，3H)。
實(shí)施例295
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 a)4-溴-5-氯-2-呋喃甲酸甲酯
在0℃，將異丙基氯化鎂(1.20ml，2.40mmol)滴加至4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯(568mg，2.0mmol)于四氫呋喃(THF)(16ml)中的溶液中。將得到的混合物在此溫度攪拌30分鐘，然后冷卻至-78℃。滴加己基氯乙烷(hexylchloroethane)(568mg，2.401mmol)于THF(1mL)中的溶液，將得到的混合物在此溫度攪拌1小時(shí)。反應(yīng)通過添加NH4Cl(飽和水溶液)終止，并將得到的混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。加入乙醚和水，并丟棄水層。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，并濃縮，得到0.34g產(chǎn)物，含有其異丙基酯。
b)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例273的方法制備，除了用4-溴-5-氯-2-呋喃甲酸甲酯代替4-溴-2-噻吩甲酸甲酯，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。最終產(chǎn)物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z＝412.0/414.0(M+H)+，1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.44(s，1H)，7.33(m，1H)，7.14-7.07(m，2H)，6.98(m，1H)，4.55(m，1H)，4.05(s，3H)，3.25-2.98(m，4H)。
實(shí)施例296
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備
a)((2S)-2-{[(4-溴-5-氯-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 將((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(根據(jù)制備例22制備，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-苯基丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮)(200mg，0.455mmol)和NCS(61mg，0.455mmol)于DMF(3ml)中的溶液在密封管中在50℃加熱2小時(shí)。除去溶劑，殘余物通過biotage(30％Hex/EtOAc)純化，得到標(biāo)題化合物(140mg，65％)。
b)N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291的方法制備，為白色固體，除了用((2S)-2-{[(4-溴-5-氯-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LC-MS(ES)m/z 376.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.12(s，1H)，7.74(s，1H)，7.31-7.35(m，5H)，4.58(m，1H)，3.94(s，3H)，3.35(m，2H)，3.05(m，2H)。
實(shí)施例297
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291的方法制備，為白色固體，除了用{(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；LC-MS(ES)m/z 410.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.33(m，2H)，7.73(m，1H)，7.41-7.56(m，4H)，4.70(m，1H)，4.13(s，3H)，3.36(m，2H)，3.18(m，2H)。
實(shí)施例298
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LC-MS(ES)m/z 360.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.24(s，1H)，8.06(m，2H)，7.29-7.34(m，2H)，7.01-7.05(m，2H)，4.66(m，1H)，4.08(s，3H)，3.23(m，2H)，3.15(m，2H)。
實(shí)施例299
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。LC-MS(ES)m/z 394.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.10(s，1H)，7.70(s，1H)，7.28-7.31(m，2H)，7.01-7.06(m，2H)，4.56(m，1H)，3.92(s，3H)，3.21(m，2H)，2.96(m，2H)。
實(shí)施例300
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291的方法制備，為白色固體，除了用((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-環(huán)己基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。LC-MS(ES)m/z 348.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.27(m，1H)，8.13(s，1H)，8.02(s，1H)，4.56(m，1H)，4.11(s，3H)，3.16(m，1H)，3.02(m，1H)，1.17-1.95(m，13H)。
實(shí)施例301
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292的方法制備，為白色固體，除了用((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-環(huán)己基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。LC-MS(ES)m/z 382.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.10(s，1H)，7.82(s，br，1H)，4.42(m，1H)，3.94(s，3H)，3.16-3.30(m，1H)，2.98-3.10(m，1H)，1.06-1.96(m，13H) 實(shí)施例302
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292的方法制備，為白色固體，除了用{(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基1氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；最終化合物通過RP-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。LC-MS(ES)m/z 444.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.20(s，br，1H)，7.86(s，br，1H)，7.71(m，1H)，7.42-7.56(m，3H)，4.63(m，1H)，3.96(s，3H)，3.09-3.27(m，4H)。
實(shí)施例303
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；LC-MS(ES)m/z 360.2(M+H)+，1 NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.24(s，1H)，8.02(m，2H)，7.30(m，1H)7.06-7.13(m，2H)，6.96(m，1H)，4.63(m，1H)，4.08(s，3H)，3.09-3.27(m，4H)。
實(shí)施例304
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；最終化合物通過RP-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。LC-MS(ES)m/z 394.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.10(s，1H)，7.70(s，1H)，7.31(m，1H)，6.97-7.11(m，3H)，4.52(m，1H)，3.92(s，3H)，2.96-3.26(m，4H) 實(shí)施例305
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291制備，為白色固體，除了用{(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 410.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.81(s，1H)，8.51(d，J＝1Hz，1H)，8.39(d，J＝1Hz，1H)，7.64(m，2H)，7.50(m，2H)，4.66(m，1H)，4.23(s，3H)，3.30(m，2H)，3.15(m，2H)。
實(shí)施例306
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292制備，為白色固體，除了用{(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[3-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 440.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.53(s，1H)，8.02(s，1H)，7.50-7.64(m，4H)，4.56(m，1H)，4.03(s，3H)，3.10-3.27(m，4H)。
實(shí)施例307
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，5-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 378.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.68(s，1H)，8.47(d，J＝1Hz，1H)，8.35(d，J＝1Hz，1H)，6.96(m，2H)，6.80(m，1H)，4.60(m，1H)，4.21(s，3H)，3.28(m，2H)，3.08(m，2H)。
實(shí)施例308
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，5-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 412.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.44(s，1H)，7.98(s，1H)，6.96(m，2H)，6.82(m，1H)，4.66(m，1H)，4.01(s，3H)，3.20-3.25(m，2H)，3.02-3.05(m，2H)。
實(shí)施例309
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a){(2S)-2-{[(4-溴-5-甲基-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯
該中間體根據(jù)制備例22制備，除了用4-溴-5-甲基-2-噻吩甲酸(Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(2002)，12(3)，491-495)代替4-溴-2-噻吩甲酸，以及用2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-[(2S)-2-氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。
b)N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291的方法制備，為白色固體，除了用{(2S)-2-{[(4-溴-5-甲基-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 424.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.68(s，1H)，8.04(s，1H)，7.70(m，1H)，7.58(m，1H)，7.52(m，1H)，7.43(m，1H)，4.65(m，1H)，4.05(s，3H)，3.16-3.28(m，4H)，2.59(s，3H)。
實(shí)施例310
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(2-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；LC-MS(ES)m/z 360.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.60(s，1H)，8.43(d，J＝1Hz，1H)，8.24(d，J＝1Hz，1H)，7.37(m，1H)，7.27(m，1H)，7.08(m，2H)，4.66(m，1H)，4.19(s，3H)，3.27(m，2H)，3.10(s，2H) 實(shí)施例311
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例260的方法制備，為白色固體，除了用{(2S)-2-{[(4-溴-5-甲基-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 360.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.31(s，1H)，7.94(s，1H)，7.70(m，1H)，7.56(m，2H)，7.43(m，1H)，4.65(m，1H)，4.19(s，3H)，3.15-3.28(m，4H)，2.50(s，3H)。
實(shí)施例312
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261制備，為白色固體，除了用{(2S)-2-{[(4-溴-5-甲基-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 458.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.70(m，2H)，7.55(m，2H)，7.44(m，1H)，4.67(m，1H)，3.99(s，3H)，3.12-3.21(m，4H)，2.42(s，3H)。
實(shí)施例313
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 394.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.49(s，1H)，7.95(s，1H)，7.27-7.36(m，2H)，7.06-7.13(m，2H)，4.61(m，1H)，4.03(s，3H)，3.02-3.25(m，4H)。
實(shí)施例314
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291制備，為白色固體，除了用{(2S)-2-{[(4-溴-2-呋喃基)羰基]氨基}-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 394.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.50(s，1H)，8.43(s，1H)，7.71(m，1H)，7.61(s，1H)，7.54(m，2H)，7.42(m，1H)，4.66(m，1H)，4.14(s，3H)，3.25(m，2H)，3.14(m，2H)。
實(shí)施例315
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例260制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(2，4-二氯苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自于制備例22)代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 410.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.14(m，2H)，7.47(d，J＝1Hz，1H)，7.41(d，J＝1Hz，1H)，7.25(m，1H)，4.68(m，1H)，4.30(s，3H)，3.11-3.28(m，4H)。
實(shí)施例316
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(2，4-二氯苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自于制備例22)代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 410.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.71(s，1H)，8.47(d，J＝1Hz，1H)，8.34(d，J＝1Hz，1H)，7.45(m，2H)，7.23(m，1H)，4.71(m，1H)，4.23(s，3H)，3.14-3.22(m，4H) 實(shí)施例317
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292的方法制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(2，4-二氯苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 446.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.65(s，1H)，8.11(s，1H)，7.44(m，2H)，7.25(m，1H)，4.68(m，1H)，4.08(s，3H)，3.10-3.23(m，4H)。
實(shí)施例318
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(2，4-二氯苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(來自于制備例21)代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 480.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.80(m，1H)，7.48(m，1H)，7.39(m，1H)，7.27(m，1H)，4.66(m，1H)，4.05(s，3H)，3.08-3.14(m，4H) 實(shí)施例319
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例291制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(4-氯苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 376.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.68(s，1H)，8.46(d，J＝1Hz，1H)，8.29(d，J＝1Hz，1H)，7.27-7.34(m，4H)，4.57(m，1H)，4.21(s，3H)，3.25(m，2H)，3.04(m，2H) 實(shí)施例320
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例292制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(4-氯苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，4-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 410.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.47(s，1H)，7.97(s，1H)，7.30(m，4H)，4.60(m，1H)，4.03(s，3H)，3.22(m，2H)，3.00(m，2H)。
實(shí)施例321
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(3，5-二氟苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 446.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.80(s，1H)，6.95(m，2H)，6.84(m，1H)，4.62(m，1H)，4.04(s，3H)，3.20(m，2H)，3.01(m，2H)。
實(shí)施例322
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例261制備，為白色固體，除了用[(2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-(4-氯苯基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替((2S)-2-{[(4-溴-2-噻吩基)羰基]氨基}-3-苯基丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯；最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 444.0(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.73(s，1H)，7.30(m，4H)，4.66(m，1H)，4.04(s，3H)，3.18(m，2H)，2.99(m，2H)。
實(shí)施例323
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 a)4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸
該中間體根據(jù)實(shí)施例269a)和b)的方法制備，除了用1，4-二甲基-5-(三丁基錫烷基)-1H-1，2，3-三唑(來自于制備例21)代替1-甲基-5-(三丁基錫烷基)-1H-1，2，3-三唑，以及用4-溴-2-噻吩甲酸甲酯代替4-溴-5-氯-2-噻吩甲酸甲酯。LC-MS(ES)m/z 224.2(M+H)+。
b)4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
該中間體根據(jù)實(shí)施例269c)的方法制備，除了用4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸代替5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酸，以及用2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-{(2S)-2-氨基-3-[2-(三氟甲基)苯基]丙基}-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LC-MS(ES)m/z 504.2(M+H)+。
c)5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺
將4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺(254mg，0.454mmol)，和NCS(60.6mg，0.454mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(5mL)中的溶液在40℃加熱過夜。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，其用H2O 3X和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，并濃縮。殘余物在25g Biotage柱上純化，其使用50-100％EtOAc/己烷洗脫，得到76mg(28％)產(chǎn)物，為白色泡沫狀固體，以及63mg回收的起始物料。LC-MS(ES)m/z 538.0(M+H)+。
d)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例269d)的方法制備，為白色固體，除了用5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺代替5-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺。最終化合物通過RP-HPLC純化，并使用2N HCl水溶液轉(zhuǎn)化為HCl鹽。LC-MS(ES)m/z 408.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.88(m，1H)，7.30(m，1H)，7.10(m，2H)，6.96(m，1H)，4.65(m，1H)，4.10(s，3H)，3.21(m，2H)，3.03(m，2H)，2.06(s，3H)。
實(shí)施例324
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例323a)、b)和d)的方法制備，為白色固體，除了用4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺代替5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-N-{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-2-噻吩甲酰胺。LC-MS(ES)m/z 374.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.09(d，J＝1Hz，1H)，8.06(d，J＝1Hz，1H)，7.31(m，1H)，7.16(m，1H)，6.96(m，1H)，4.56(m，1H)，4.20(s，3H)，3.23(m，2H)，3.05(m，2H)，2.47(s，3H)。
實(shí)施例325
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例323a)，b)和d)的方法制備，為白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LC-MS(ES)m/z 392.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ8.13(m，2H)，6.99(m，2H)，6.79(m，1H)，4.59(m，1H)，4.22(s，3H)，3.26(m，2H)，3.06(m，2H)，2.49(s，3H)。
實(shí)施例326
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例323的方法制備，為白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，5-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LC-MS(ES)m/z 426.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.88(s，1H)，6.96(m，2H)，6.82(m，1H)，4.62(m，1H)，4.07(s，3H)，3.22(m，2H)，3.05(m，2H)，2.34(s，3H)。
實(shí)施例327
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺的制備 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例323的方法制備，為白色固體，除了用2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮代替2-[(2S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮。LC-MS(ES)m/z 426.2(M+H)+，1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.87(s，1H)，7.12-7.26(m，3H)，4.62(m，1H)，4.08(s，3H)，3.21(m，2H)，3.00(m，2H)，2.36(s，3H)。
實(shí)施例328
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺 a)4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
在室溫，向4，5-二溴-2-呋喃甲酸甲酯(4.5g，15.85mmol)和氯化雙(三苯基膦)合鈀(II)(0.38g，0.541mmol)于THF(100mL)中的溶液中滴加(甲基)氯化鋅(chloro(methyl)zinc)(15mL，30mmol)。攪拌10小時(shí)后，反應(yīng)用NH4Cl(飽和)(50mL)終止。將混合物用EtOAc(50mL x 3)萃取，并將合并的有機(jī)層用MgSO4干燥。在真空下除去溶劑，得到的殘余物通過柱色譜(硅膠，EtOAc/Hex 10-20％)純化，得到標(biāo)題化合物(2.5g，72％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 220(M+H)+。
b)4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
向100mL密封燒瓶中加入于1，2-二甲氧基乙烷(6mL)和H2O(1mL)中的1-乙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.2g，9.91mmol)，碳酸鉀(2.84g，20.54mmol)，4-溴-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(1.5g，6.85mmol)和雙(三叔丁基膦)合鈀(0)(0.175g，0.34mmol)。在72℃攪拌2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液用DCM(50mL)稀釋，并用H2O洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上[EtOAC/己烷，10-30％]純化，得到產(chǎn)物[1.1g，68.6％]，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 235(M+H)+。
c)4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯
將4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(950mg，4.06mmol)和NCS(650mg，4.87mmol)于THF(10mL)中的混合物在密封管中在70℃加熱。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，10-20％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(970mg，89％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 269(M+H)+。
d)4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-二氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
向4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酸甲酯(500mg，1.86mmol)于THF/H2O(5mL/1mL)中的溶液中加入KOH(500mg，8.91mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將混合物濃縮，用H2O(2mL)稀釋，并將pH調(diào)節(jié)至3。混合物用DCM(10mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到粗產(chǎn)物酸(460mg，97％)，其不用進(jìn)一步純化直接使用LC-MS(ES)m/z 255(M+H)+。
在25℃，向上述于DCM(5mL)中的酸(221mg，0.869mmol)中一次加入PyBrOP(480mg，1.03mmol)，接著添加DIPEA(1.0mL，5.73mmol)。10分鐘后，將2-[(2S)-2-氨基-3-(3，4-二氟苯基)丙基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(250mg，0.79mmol)加至該反應(yīng)溶液中。1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮，并通過柱色譜(硅膠，30-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題化合物(401mg，92％)，為白色固體LC-MS(ES)m/z 553(M+H)+。
e)N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺
在室溫，將NH2NH2(0.5mL，15.93mmol)加至于MeOH(5mL)中的4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-N-{(1S)-2-(3，4-氟苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-5-甲基-2-呋喃甲酰胺(260mg，0.47mmol)中。48小時(shí)后，在真空下除去溶劑。得到的殘余物溶于DCM(20mL)，并用H2O(20mL x 3)洗滌。
向DCM溶液中加入HCl(36％，10mL，120mmol)。1小時(shí)后，分離水相，并用DCM(30ml x 3)洗滌。在高真空下除去水，得到標(biāo)題化合物(140mg，69.7％)，為灰白色固體LC-MS(ES)m/z 423(M+H)+，NMR(d4-MeOD，400MHz)δppm 7.59(s，1H)，7.27-7.16(m，3H)，7.13-7.08(m，1H)，4.56(m，1H)，4.06(q，J＝7.3Hz，2H)，3.26-3.22(m，1H)，3.17-3.11(m，1H)，3.05-3.00(m，1H)，2.97-2.91(m，1H)，2.36(s，3H)，和1.33(t，J＝7.3Hz，3H)。
實(shí)施例329-膠囊組合物 通過按下面表I中所示比例，用各成分填充標(biāo)準(zhǔn)雙部分硬明膠膠囊，制備用于將本發(fā)明的化合物給藥的口服劑型。
表I 組分 量 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺25mg (實(shí)施例1的化合物) 乳糖 55mg 滑石 16mg 硬脂酸鎂 4mg 實(shí)施例330-可注射的腸胃外組合物 通過將1.5重量％的N-(2-氨基-1-苯基乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(實(shí)施例2的化合物)在10體積％的丙二醇的水溶液中攪拌，制備將本發(fā)明的化合物給藥的可注射劑型。
實(shí)施例331-片劑組合物 用10％的明膠溶液，將下面表II所示的蔗糖、硫酸鈣二水合物和Akt抑制劑按所示的比例混合和造粒。將濕的顆粒篩分，干燥，并與淀粉、滑石粉和硬脂酸混合；篩分并壓制成片劑。
表II 組分量 N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺20mg (實(shí)施例3的化合物) 硫酸鈣二水合物 30mg 蔗糖4mg 淀粉2mg 滑石1mg 硬脂酸 0.5mg 盡管上面已經(jīng)說明了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，但是應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明并不限于本文中所公開的明確說明，而且保留在權(quán)利要求書范圍內(nèi)的所有修改的權(quán)利。
序列表
<110>史密絲克萊恩比徹姆公司(SMITHKLINE BEECHAM C0RP0RATI0N)
<120>AKT活性抑制劑
<130>PU62316-US
<150>60/888586
<151>2007-02-07
<160>5
<170>FastSEQ for Windows Version 4.0
<210>1
<211>14
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>生物素化的合成肽
<400>1
Ala Arg Lys Arg Glu Arg Ala Tyr Ser Phe Gly His His Ala
1 5 10
<210>2
<211>26
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>2
tatataggat ccatgagcga cgtggc26
<210>3
<211>29
<212>DNA
<213>人工序列
<400>3
aaatttctcg agtcaggccg tgctgctgg 29
<210>4
<211>25
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>4
acctggcggc cacgctactt cctcc25
<210>5
<211>23
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>5
ctcgagcatg caactagagg gcc 2權(quán)利要求
1.式(I)化合物，和/或其可藥用鹽
其中
R41和R42獨(dú)立地選自氫、
鹵素、C1-4烷基、取代的C1-4烷基、C1-4烷氧基、取代的C1-4烷氧基、呋喃、取代的呋喃、噻吩和取代的噻吩，
其中Q和Y獨(dú)立地選自氮和-C(R70)-，且Z選自氮和-C(R48)-，條件為Q、Y和Z中至少一個(gè)且至多兩個(gè)為氮，且R30選自C1-4烷基和被1-3個(gè)氟原子取代的C1-4烷基，其中R70選自氫和鹵素，且R48選自氫、C1-4烷基、取代的C1-4烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、取代的雜環(huán)烷基和鹵素；
R43選自氫、鹵素、C1-4烷基、取代的C1-4烷基、C1-4烷氧基、取代的C1-4烷氧基、呋喃和噻吩；
R44不存在或R44選自-(CR60R61)mAR，其中AR為未被取代的；-(CR60R61)mAR，其中AR為被取代的；以及C1-6烷基，
其中m為0-3，且AR為單環(huán)或多環(huán)芳香環(huán)或飽和或不飽和的非-芳香環(huán)，其含有3-16個(gè)碳原子且任選含有1-3個(gè)雜原子，條件是當(dāng)該環(huán)為芳香環(huán)且碳原子數(shù)目為3時(shí)，該環(huán)至少含2個(gè)雜原子，以及當(dāng)該環(huán)為芳香環(huán)且碳原子數(shù)目為4時(shí)，該環(huán)至少含1個(gè)雜原子，且R60和R61獨(dú)立地選自氫和C1-4烷基，條件是當(dāng)m為3時(shí)，R60和R61總計(jì)不超過4個(gè)為C1-4烷基，
R45選自氫和C1-4烷基；
R20選自氫、C1-4烷基和羥基；
X選自O(shè)、S和NR49，其中R49選自氫和C1-4烷基；且
n為0至2，且該部分若合適時(shí)任選被羥基C1-4烷基所取代；
條件是R41和R42中一個(gè)且僅有一個(gè)為
2.權(quán)利要求1的式(I)化合物和/或其可藥用鹽，其中
R41和R42獨(dú)立地選自氫、
鹵素、C1-4烷基、三氟甲基、甲氧基和呋喃，
其中Q為氮，Y選自氮和-C(R70)-，且Z選自氮和-C(R48)-，條件是Y和Z中至多一個(gè)為氮，且R30為C1-4烷基，其中R70選自氫和鹵素，且R48選自氫、C1-4烷基、三氟甲基、苯基、環(huán)丙基和鹵素；
R43選自氫、鹵素、C1-4烷基和甲氧基；
R44不存在或R44選自-(CR60R61)mAAR，其中AAR為未被取代的；-(CR60R61)mAAR，其中AAR為被取代的；以及C1-6烷基，
其中m為0-3，且AAR選自苯基、吲哚、萘、吡啶和環(huán)己基，且R60和R61獨(dú)立地選自氫和甲基，條件是當(dāng)m為3時(shí)，R60和R61總計(jì)不超過4個(gè)為甲基，
R45選自氫和C1-4烷基；
R20選自氫、甲基和羥基；
X選自O(shè)、S和NR49，其中R49選自氫和甲基；且
n為1-2，且該部分任選被羥基甲基所取代；
條件是R41和R42中一個(gè)且僅有一個(gè)為
3.權(quán)利要求1的由下式(AA)所表示的化合物和/或其可藥用鹽
其中
R1和R2獨(dú)立地選自氫、
鹵素、C1-4烷基、呋喃和噻吩，
其中R6為C1-4烷基，且R7選自氫、C1-4烷基和鹵素；
R3選自氫、鹵素、C1-4烷基、呋喃和噻吩；
R4選自-(CH2)m芳基和其中芳基被取代的-(CH2)m芳基，其中m為0至2；
R5選自氫和C1-4烷基；
X選自O(shè)和S；且
n為0至2；
條件是R1和R2中一個(gè)且僅有一個(gè)為
且進(jìn)一步的條件為R1、R2和R3中至少一個(gè)為氫。
4.權(quán)利要求1的化合物和/或其可藥用鹽，所述化合物選自
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-{[(2Z)-1-甲基-2-(2-丙烯-1-亞基)肼基]甲基}-2-噻吩甲酰胺；
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-4-{[(2Z)-1-甲基-2-(2-丙烯-1-亞基)肼基]甲基}-2-噻吩甲酰胺；
N-(2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(3-呋喃基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-3-(甲氧基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[3-氨基-1-(苯基甲基)丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
4-溴-N-[2-(甲基氨基)-1-苯基乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-[1-(氨基甲基)-3-苯基丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[1-(氨基甲基)-3-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
4-溴-N-[3-(甲基氨基)-1-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[3-(甲基氨基)-1-苯基丙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
4-溴-N-[2-(甲基氨基)-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺
N-((1S)-2-氨基-1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[1-(氨基甲基)-2-甲基-2-苯基丙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-1-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-1-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-(甲基氨基)-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-N-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[1-(氨基甲基)-2-甲基-2-苯基丙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[4-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-3，4-二溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氯苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(1H-吲哚-3-基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(1-萘基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(1-萘基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{2-氨基-1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{2-氨基-1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-(3-氨基-1-苯基丙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3，4-二溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-N-羥基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氟-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-[1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-丙基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-乙基-4-(1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1-甲基-4-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，6-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-環(huán)丙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(3-氯-1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-乙基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(甲氧基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-氯-5-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-氯-5-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(3-吡啶基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1R)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(4-氟苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(4-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(3-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(2-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(4-氟苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(2-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(3-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-(2-氨基乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(4-氯苯基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-苯基乙基]-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-甲基乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-1-(氨基甲基)-3-甲基丁基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(三氟甲基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
(N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1，4-二乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-乙基-4-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基]-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-丙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-N-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(4-溴-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S)-2-氨基-1-(環(huán)己基甲基)乙基]-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-甲基-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺； N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(2，4-二氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氯苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，5-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[(1S，2S)-2-氨基-3-羥基-1-苯基丙基]-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-1，2，3-三唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；和
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-呋喃甲酰胺。
5.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1的化合物和/或其可藥用鹽以及可藥用載體。
6.制備藥物組合物的方法，所述藥物組合物包含可藥用載體或稀釋劑以及有效量的權(quán)利要求1所述的式(I)化合物和/或其可藥用鹽，該方法包括將式(I)化合物和/或其可藥用鹽與可藥用載體或稀釋劑混合。
7.在需要的哺乳動物中治療選自癌癥和關(guān)節(jié)炎的疾病或病癥或減輕選自癌癥和關(guān)節(jié)炎的疾病或病癥的嚴(yán)重程度的方法，所述方法包括向該哺乳動物給藥治療有效量的權(quán)利要求1所述的式I化合物和/或其可藥用鹽。
8.權(quán)利要求7的方法，其中所述哺乳動物為人。
9.治療選自癌癥和關(guān)節(jié)炎的疾病或病癥或減輕選自癌癥和關(guān)節(jié)炎的疾病或病癥的嚴(yán)重程度的方法，所述方法包括向該哺乳動物給藥治療有效量的權(quán)利要求3所述的式(AA)化合物和/或其可藥用鹽。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述哺乳動物為人。
11.權(quán)利要求7的方法，其中所述癌癥選自腦癌(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、惡性膠質(zhì)瘤、Bannayan-Zonana綜合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、結(jié)腸癌、頭頸癌、腎癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤和甲狀腺癌。
12.權(quán)利要求9的方法，其中所述癌癥選自腦癌(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、惡性膠質(zhì)瘤、Bannayan-Zonana綜合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、結(jié)腸癌、頭頸癌、腎癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤和甲狀腺癌。
13.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物和/或其可藥用鹽在制備藥物中的用途，該藥物用于治療選自癌癥和關(guān)節(jié)炎的疾病或病癥或減輕選自癌癥和關(guān)節(jié)炎的疾病或病癥的嚴(yán)重程度。
14.在需要的哺乳動物中抑制Akt活性的方法，所述方法包括向此類哺乳動物給藥治療有效量的權(quán)利要求1所述的式I化合物和/或其可藥用鹽。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述哺乳動物為人。
16.在需要的哺乳動物中治療癌癥的方法，其包括向此類哺乳動物給藥治療有效量的
a)權(quán)利要求1所述的式(I)化合物和/或其可藥用鹽；和
b)至少一種抗腫瘤藥。
17.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥選自基本上由下列藥物所構(gòu)成的組抗微管劑、鉑配位絡(luò)合物、烷基化劑、抗生素、拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑、抗代謝物、拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑、激素和激素類似物、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑；非受體酪氨酸激酶血管生成抑制劑；免疫治療劑；促細(xì)胞凋亡劑；和細(xì)胞周期信號抑制劑。
18.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是選自二萜類化合物和長春花生物堿的抗微管劑。
19.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是二萜類化合物。
20.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是長春花生物堿。
21.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是鉑配位絡(luò)合物。
22.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是紫杉醇、卡鉑或長春瑞濱。
23.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是紫杉醇。
24.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是卡鉑。
25.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是長春瑞濱。
26.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑。
27.權(quán)利要求26的方法，其中所述的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是生長因子受體激酶的抑制劑，所述生長因子受體激酶選自VEGFR2、TIE2、PDGFR、BTK、IGFR-1、TrkA、TrkB、TrkC和c-fms。
28.權(quán)利要求26的方法，其中所述的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑，所述絲氨酸/蘇氨酸激酶選自rafk、akt和PKC-zeta。
29.權(quán)利要求26的方法，其中所述的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑，所述絲氨酸/蘇氨酸激酶選自src族激酶。
30.權(quán)利要求29的方法，其中所述的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是c-src的抑制劑。
31.權(quán)利要求26的方法，其中所述的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是Ras致癌基因的抑制劑，其選自法尼基轉(zhuǎn)移酶和牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶的抑制劑。
32.權(quán)利要求26的方法，其中所述的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是選自PI3K的絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑。
33.權(quán)利要求16的方法，其中所述的至少一種抗腫瘤藥是細(xì)胞周期信號抑制劑。
34.權(quán)利要求33的方法，其中所述的細(xì)胞周期信號抑制劑選自CDK2、CDK4和CDK6的抑制劑。
35.權(quán)利要求16所述的藥物組合，其用于治療。
36.權(quán)利要求16所述的藥物組合在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
37.權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，和/或其可藥用鹽，其中
R41選自氯、乙基、甲基和甲氧基；
R42為
其中Q為氮，Y為-CH-，且Z為-C(R48)-，且R30選自甲基和乙基，其中R48選自氫、甲基、氯和溴；
R43為氫；
R44為-CH2-苯基，其中所述苯基被一個(gè)或兩個(gè)選自氟和三氟甲基的取代基所取代；
R45為氫；
R20為氫；
X選自O(shè)和S；且
n為1。
38.權(quán)利要求7的方法，其中所述的癌癥選自腦癌(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、惡性膠質(zhì)瘤、Bannayan-Zonana綜合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、炎性乳腺癌、維爾姆斯腫瘤、尤因肉瘤、橫紋肌肉瘤、室管膜細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、結(jié)腸癌、頭頸癌、腎癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨細(xì)胞瘤、甲狀腺癌，
淋巴母細(xì)胞T細(xì)胞白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、毛細(xì)胞白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓性白血病、慢性中性粒細(xì)胞性白血病、急性淋巴母細(xì)胞T細(xì)胞性白血病、漿細(xì)胞瘤、免疫母細(xì)胞大細(xì)胞白血病、套細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤巨核母細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤、急性巨核細(xì)胞白血病、前髓細(xì)胞性白血病、紅白血病，
惡性淋巴瘤、何杰金淋巴瘤、非-何杰金淋巴瘤、淋巴母細(xì)胞T細(xì)胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤，
神經(jīng)母細(xì)胞瘤、膀胱癌、膀胱上皮癌、肺癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、間皮瘤、食管癌、唾液腺癌、肝細(xì)胞癌、胃癌、鼻咽癌、頰癌、口腔癌、GIST(胃腸道間質(zhì)瘤)和睪丸癌。
39.權(quán)利要求38的方法，其中所述哺乳動物為人。
40.權(quán)利要求3的化合物和/或其可藥用鹽，所述化合物選自
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-{[(2Z)-1-甲基-2-(2-丙烯-1-亞基)肼基]甲基}-2-噻吩甲酰胺；
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-4-{[(2Z)-1-甲基-2-(2-丙烯-1-亞基)肼基]甲基}-2-噻吩甲酰胺；
N-(2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-(2-氨基-1-苯基乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-溴-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；和
N-[2-氨基-1-(苯基甲基)乙基]-4-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺。
41.權(quán)利要求1的化合物和/或其可藥用鹽，所述化合物選自
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-乙基-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-((1S)-2-氨基-1-{[3-(三氟甲基)苯基]甲基}乙基)-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(甲氧基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(4-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(1，4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；和
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺。
42.權(quán)利要求1的化合物和/或其可藥用鹽，所述化合物選自
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺；
N-{(1S)-2-氨基-1-[(3，4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰胺。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的雜環(huán)甲酰胺化合物，此類化合物作為蛋白激酶B活性抑制劑的用途以及在治療癌癥和關(guān)節(jié)炎中的用途。
文檔編號A61K31/12GK101646427SQ200880010632
公開日2010年2月10日 申請日期2008年2月7日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月7日
發(fā)明者馬克·A·西費(fèi)爾德, 米根·B·勞斯, 德克·A·西爾丁, 西蒙·皮斯, 丹尼斯·S·亞馬希塔, 肯尼思·C·麥克納爾蒂 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司