專利名稱：地來西坦在治療慢性疼痛中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及慢性疼痛的藥理學(xué)治療領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
與急性疼痛(所述急性疼痛起到提醒有機(jī)體關(guān)于即將來臨的危險(xiǎn) 或損害的重要生理作用)不同的是，慢性疼痛不牽涉任何的保護(hù)作用。
慢性疼痛可被分成兩個(gè)主要類別慢性炎性疼痛和慢性神經(jīng)性疼 痛。后者起因于神經(jīng)通路上由病害引起的直接病變，其可由感染、代 謝、血管或其它因素所致。在慢性炎性疼痛中，病變組織釋放產(chǎn)生疼 痛的因子，該因子又損傷神經(jīng)末端，產(chǎn)生惡性機(jī)制，該惡性機(jī)制維持 和加強(qiáng)疼痛感覺(痛覺過敏)或?qū)⑵渌愋偷母杏X轉(zhuǎn)化成疼痛(異常性 疼痛)。
慢性疼痛，無論是神經(jīng)性來源的還是炎性來源的，都是高度的未 被滿足的醫(yī)學(xué)需要狀況的重要流行病學(xué)方面；實(shí)際上，目前存在以有 效性有限和耐受性差的治療為特征的治療范圍。越來越多的患者遭受 由在現(xiàn)代肺瘤學(xué)中使用的抗腫瘤治療所誘導(dǎo)的醫(yī)源性神經(jīng)性疼痛的困 擾。特別是紫杉醇衍生藥物，順鉑和長春新堿是更經(jīng)常誘導(dǎo)疼痛的神 經(jīng)病變的藥物。目前，對于這種疼痛沒有有效的和/或被充分耐受的治 療。實(shí)際上，被成功用于其它形式的神經(jīng)性疼痛的經(jīng)典的抗癲癇藥或 抗才中肩卩藥諸:ft口拉莫三漆(Renno S. I. 2006， J.Clin. Oncol. ASC0 Annual Meeting Proceeding Part I vol. 24， No 18S: 8530)，加巴 噴丁(Wong G. Y. 2005， J. Clin. Oncol. ASC0 Annual Meeting Proceeding Part I vol. 23， No 16S: 8001 )或去甲替林(Hammack J. E. 2002， Pain 98:195-203)基于它們的治療指數(shù)，是絕對令人不滿 意的。核苷類似物反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(ddC， d4T， AZT)通常在AIDS治療中 被用作抗病毒藥物。這些藥物通常在延長的治療后引發(fā)嚴(yán)重程度不同 的周圍神經(jīng)病變。正如在化療劑的情況中，這些癥狀可能如此之強(qiáng)， 從而導(dǎo)致這些救生治療被縮短或中止。這些神經(jīng)病變的模式顯然不同 于由AID S進(jìn)展所誘導(dǎo)的那些；它們實(shí)際上以在大約治療第十周時(shí)在雙 手和雙腳中有非常強(qiáng)烈的灼熱不適感的突然發(fā)作為特征。相反地，HIV 導(dǎo)致的神經(jīng)病變具有非常緩慢的進(jìn)展(Dubinsky R. M. 1989， Muscle Nerve 12: 856-860)。就化療誘導(dǎo)的神經(jīng)病變而言，很難治療這種疼痛。
三環(huán)類抗抑郁藥阿米替林和鈉通道阻斷劑美西律，對各種形式的 疼痛性周圍神經(jīng)病變是有效的，但對這種神經(jīng)性疼痛不顯示任何顯著 的影響(Kieburtz K. 1998 Neurology 51 :1682-1688)。加巴噴丁顯 示出一些效力，盡管具有嚴(yán)重綜合征的患者很少達(dá)到令人滿意的結(jié)果 并且需要另外給予麻醉劑(McArthur J. C. 2001， The Hopkins HIV report, http: //www, hopkins-aids. edu/publicat ions/report/ mayOl _2.html)。
其它形式的神經(jīng)性疼痛可由病毒感染引起。例如，帶狀皰滲神經(jīng) 痛由在感染之后很久的水痘-帶狀皰療病毒的再活化所引起.這種神經(jīng) 病變的特征在于強(qiáng)烈的機(jī)械異常性疼痛，對熱刺激通常喪失敏感性和 自發(fā)的間歇性疼痛。疼痛強(qiáng)度損及罹患這一病況的患者的生命質(zhì)量。
在高的流行病學(xué)相關(guān)事件中，是被稱為頭痛的疼痛，其局部發(fā)生 于頭、臉和頸。當(dāng)頭疼以突發(fā)方式發(fā)生時(shí)，具有持續(xù)數(shù)小時(shí)到數(shù)天的 反復(fù)發(fā)作，并且與普通病態(tài)有關(guān)，其被稱作偏頭痛。已經(jīng)認(rèn)可了幾種 形式的偏頭痛，諸如普通型偏頭痛，典型偏頭痛，偏癱型偏頭痛，推 基底偏頭痛等等。
目前對于偏頭痛的治療，需要使用各種止痛藥，從非甾體抗炎藥 (NSAID)到鴉片樣物質(zhì)、抗組胺藥和麥角胺衍生物不等。在最近十年中， 已經(jīng)使用曲坦類5HT2拮抗劑；如果它們被迅速給予的話，通常能夠阻 斷偏頭痛發(fā)作。所有這些治療在效力和耐受性兩方面都顯示出嚴(yán)重的 局限性。在最嚴(yán)重的情況中一周發(fā)生多次的疼痛事件的病例中，采用抗癲癇藥、P阻斷劑和抗抑郁藥進(jìn)行超前治療。使用這些超前治療實(shí)
現(xiàn)的最大結(jié)果是疼痛事件的頻率和強(qiáng)度降低50%,但是它們不實(shí)現(xiàn)確 定的癥狀緩解。
炎性疼痛是另一種形式的慢性疼痛。其由直接激活局部位于初級 感覺神經(jīng)元上的傷害感受器或降低它們的激活閾的遞質(zhì)釋放所引起， 從而增加它們對不同性質(zhì)的疼痛刺激或非疼痛刺激的敏感性。被激發(fā) 的初級感覺神經(jīng)元又可釋放神經(jīng)遞質(zhì)，該神經(jīng)遞質(zhì)可以刺激由炎性過 程所募集的免疫細(xì)胞，導(dǎo)致另外的炎癥介質(zhì)的釋放。
這一現(xiàn)象，被稱為"神經(jīng)源性炎癥"，導(dǎo)致患者癥狀學(xué)的自放大。 骨關(guān)節(jié)炎是這種病變的特別嚴(yán)重的和疼痛的形式。骨關(guān)節(jié)炎是變性關(guān) 節(jié)炎的一種形式，引起一個(gè)或多個(gè)關(guān)節(jié)的軟骨的破壞和最終喪失。與 這一病變有關(guān)的大多數(shù)共同癥狀是在受影響的關(guān)節(jié)中在重復(fù)使用或在 長期不活動(dòng)后的疼痛(夜晚痛和靜息痛)。即使已經(jīng)闡明了在疼痛和 關(guān)節(jié)處的損害擴(kuò)展之間的關(guān)聯(lián)，但是這種疼痛的確切的病因仍是含糊 的；實(shí)際上，在關(guān)節(jié)處具有相對小的損害的患者遭受非常強(qiáng)烈的疼痛， 并且反之亦然；這一發(fā)現(xiàn)暗示了，其不僅僅是炎性疼痛，而且還存在 神經(jīng)性因素。被推薦的治療包括NSAID，甾族化合物和鴉片樣物質(zhì)， 但是這些藥物的使用與嚴(yán)重的副作用的發(fā)生有關(guān)；另外，它們在許多 情況中不顯現(xiàn)完全的效力(Altman R. D. 2000 Arthritis Rheum. 43: 1905-1915)。
纖維肌痛綜合征是慢性的、普遍存在的疼痛的最頻繁的原因，與 輔助性癥狀諸如睡眠失調(diào)和慢性疲勞有關(guān)(Rao S.G. 2007， Psychopharmacol. Bull. 40:24-67)。美國總?cè)巳旱膸缀?°/。遭受纖維 肌痛的困擾，中年女性處在增加的風(fēng)險(xiǎn)下。罹患纖維肌痛的患者在實(shí) 驗(yàn)條件下，在異常性疼痛和痛覺過敏兩種形式中，顯示出疼痛感覺的 定量異常；這些數(shù)據(jù)使人聯(lián)想到敏化的疼痛感覺的狀態(tài)。
最近，普瑞巴林和度洛西汀在用于治療纖維肌痛中的肌肉疼痛的 臨床試驗(yàn)中顯示出一些效力(Crofford L. J. 2005， Arthritis Rheum. 52:1264-1273; Maizels M. 2005， Am. Fam. Physician 71:483-490)。然而，目前，對于在纖維肌痛中的疼痛緩解的醫(yī)學(xué)治療是令人不滿意
的(Offenbaecher M. 2005， CNS Spectr. 10: 285-297)并且纖維肌痛 代表了 一類高度的未被滿足的醫(yī)學(xué)需要。
地來西坦(2， 5-二氧代六氫-lH-吡咯并[1， 2-a]咪唑)是下式(I)所 示的二環(huán)的吡咯烷酮類衍生物，
專利申請EP-A-335483要求保護(hù)其作為益智(nootropic)藥的藥 物用途，即能夠改善人和動(dòng)物的學(xué)習(xí)和記憶。劑量-應(yīng)答數(shù)據(jù)表明地來 西坦的益智活性在口服劑量大于10mg/kg時(shí)傾向于降低(J.Med. Chem. 1993， 36:4214-4220)。專利申請WO-A-93/09120要求保護(hù)用于制備 地來西坦及其對映體的方法。
W0-A-2004/085438要求保護(hù)2， 5-二氧代六氫-lH-吡咯并[1， 2-a〗 咪唑的一組衍生物；這些化合物的典型特征是在咪唑環(huán)的3位存在芳 族碳環(huán)或雜環(huán)；這些化合物，盡管應(yīng)用于疼痛病況的治療中，但是顯 示了不完全令人滿意的治療指數(shù)。
考慮到上述的背景，仍需要新的藥物，其就慢性疼痛而言具有高 的抗痛覺過敏和抗異常性疼痛活性，并且以高治療指數(shù)為特征。還需 要對于特性形式的用傳統(tǒng)的抗痛覺過敏藥不能充分治療的神經(jīng)性疼痛 的治療。
發(fā)明概述
本發(fā)明人已經(jīng)研究了在不同劑量下的地來西坦相對于先前關(guān)于該 化合物所述的行為，還考慮了與新劑量有關(guān)的可能的毒性變化.在這 些研究期間，發(fā)現(xiàn)了新的藥理學(xué)窗，在該藥理學(xué)窗中，地來西坦對神 經(jīng)性或炎性來源的慢性疼痛現(xiàn)象具有強(qiáng)的消退效果，不顯示任何毒性 效果。因此，公開了使用有效的和基本上無毒的化合物來治療這些致 虛弱性病變的可能性。


圖1:由奧沙利鉑誘導(dǎo)的神經(jīng)病變
*p<0. 01對用奧沙利鉑/媒介物治療的組。各值代表8-11只大鼠 的平均數(shù)土S. E. M.。在奧沙利鉑治療前三天開始給予化合物。 圖2:由ddC誘導(dǎo)的神經(jīng)病變
*p<0. 01， Ap<0. 05對ddC/媒介物組。各值代表用克表示的機(jī)械 閾的平均數(shù)士S. E. M.，每組總共具有10只大鼠。圖3:由ddC誘導(dǎo) 的神經(jīng)病變
*p<0. 01對ddC/媒介物組。各值(除了對照組之外)代表在兩個(gè) 實(shí)驗(yàn)中的18只大鼠的平均數(shù)士S. E. M.。圖4:在大鼠中由MIA誘導(dǎo) 的骨關(guān)節(jié)疼痛。
*p<0. 01對MIA/媒介物組。各值代表在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中的18只大鼠的 平均數(shù)士S. E. M.。
圖5:在大鼠中的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)(轉(zhuǎn)棒儀(rotarod))
各值代表在8只大鼠的組中在30秒內(nèi)掉落次數(shù)的平均數(shù)土S. E.M.。
圖6:在大鼠中的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)(轉(zhuǎn)棒儀)
各值代表在8只大鼠的組中在30秒內(nèi)掉落次數(shù)的平均數(shù)士S. E. M. 。 *p<0. 01對用媒介物處理的動(dòng)物。 圖7:在小鼠中的運(yùn)動(dòng)活動(dòng)(洞板)
*p<0. 01對用媒介物處理的組。各值代表18只小鼠的平均數(shù)± S. E. M.。實(shí)驗(yàn)在口服給藥后進(jìn)行30分鐘。
發(fā)明詳述
本發(fā)明的第一目的是地來西坦或其藥學(xué)可接受的溶劑合物在制備 可用于治療和/或預(yù)防慢性疼痛的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及用于治 療和/或預(yù)防慢性疼痛的地來西坦或其藥學(xué)可接受的溶劑合物。
本發(fā)明的另 一個(gè)目的是用于治療和/或預(yù)防慢性疼痛的方法，包括對有需要的患者給予藥學(xué)有效劑量的地來西坦。
地來西坦是手性化合物。對于本發(fā)明的范圍，術(shù)語"地來西坦，，
是指地來西坦的被分離的(R)或(S)對映體，或其中兩種對映體以等量或不同量存在的混合物。因此，作為本發(fā)明的目的的所述應(yīng)用、方法和藥物組合物延伸到這些混合物或地來西坦的單一對映體。
根據(jù)本發(fā)明，地來西坦可單獨(dú)被給藥或者與任何其它的可用于治療或預(yù)防慢性疼痛或引起該慢性疼痛的疾病的活性成分聯(lián)合給藥。本發(fā)明的一部分還在于給予與引起作為副作用的慢性疼痛事件的活性成分聯(lián)合使用的、特別是與抗腫瘤藥和抗病毒藥聯(lián)合使用的地來西坦；這些藥物的非限制性實(shí)例是紫杉醇，長春新堿，順鉑，奧沙利鉑，核苷反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑抗病毒藥(ddC， d4T， AZT)，它們中的許多在HIV感染治療中是金標(biāo)準(zhǔn)抗病毒藥
通過要求保護(hù)的應(yīng)用和方法，有可能有效地和高度安全地治療各類慢性疼痛，無論是神經(jīng)性來源還是炎性來源。根據(jù)本發(fā)明被治療的慢性疼痛的優(yōu)選實(shí)例如下所示1.由化療劑或其它抑制生長治療(例如放療)誘導(dǎo)的疼痛；在造成神經(jīng)病變的化療劑中，可提及紫杉醇、長春新堿、順鉑、奧沙利鉑；
2.由抗病毒藥諸如核苷反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(ddC、 d4T、 AZT)誘導(dǎo)的疼痛；3.復(fù)雜性局部疼痛綜合癥，幻肢痛，丘腦綜合征，脊推綜合征；
4. 由骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性骨關(guān)節(jié)炎形式誘導(dǎo)的疼痛；
5. 由頭痛(整個(gè)頭痛和半邊頭痛；由血管、感染、自身免疫、代謝紊亂和腫瘤因素所致的頭痛；源于顱內(nèi)高壓的頭痛，源于假性腦瘤的頭痛，有和沒有先兆的典型偏頭痛，偏癱型偏頭痛和其它的運(yùn)動(dòng)并發(fā)癥，兒童和少年偏頭痛，Bickerstaff綜合征等等)誘導(dǎo)的疼痛。
6. 由纖維肌痛誘導(dǎo)的疼痛。
具有突出的效力并因此在本發(fā)明的范圍內(nèi)被優(yōu)選的是由抗病毒藥、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和自身免疫骨關(guān)節(jié)炎誘導(dǎo)的疼痛的治療。在本發(fā)明的范圍內(nèi)，在目前的治療中，地來西坦的抗痛覺過敏效
果在10到300毫克/千克、優(yōu)選在100到300毫克/千克的口服劑量范圍內(nèi)被發(fā)揮。該抗痛覺過敏效果還可通過與口服途徑不同的給藥途徑即肌肉內(nèi)或靜脈內(nèi)途徑來實(shí)現(xiàn)；在這些情況下，地來西坦以允許獲得可與在口服給藥10-300毫克/千克后所獲得的血液水平相比的量被給予?？捎糜诩∪鈨?nèi)給藥的參考值為約5到約150毫克/千克；可用于靜脈內(nèi)給藥的參考值為約2到約60毫克/千克。
因此，本發(fā)明涵蓋了可用于上述治療的地來西坦的藥物組合物。這些組合物包含大于先前被推薦用于益智活性的量的量的該活性成分。
活性成分的量是上面所述的那些(用亳克/千克表示)。這些組合物具有可用于給予上述劑量的劑量單位。典型地，在口服組合物中，它們包含500到15000亳克；在肌肉內(nèi)組合物中，它們包含250到7500毫克；在靜脈內(nèi)組合物中，它們包含100到3000亳克。
地來西坦可根據(jù)已知的方法進(jìn)行藥學(xué)配制?？筛鶕?jù)治療的需要來選擇各種藥物組合物。
這些組合物可通過混合并且可適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行調(diào)整以用于口服給藥或非腸道給藥被制備，并且照這樣，可以片劑、膠嚢、經(jīng)口制備物、粉劑、顆粒劑、小球、用于注射或輸注的液體溶液、懸浮劑或栓劑的形式,皮給予。
用于口服給藥的片劑和膠嚢通常在劑量單位中被提供并且可包含傳統(tǒng)的賦形劑諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、制片劑、潤滑劑、去垢劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和潤濕劑。片劑可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法被包衣。
適當(dāng)?shù)奶畛鋭┌ɡ缋w維素，甘露醇，乳糖和類似試劑。適當(dāng)?shù)谋澜鈩┌ǖ矸郏垡蚁┻量┩橥偷矸垩苌镏T如淀粉羥基乙酸鈉。適當(dāng)?shù)臐櫥瑒┌ɡ缬仓徭V。適當(dāng)?shù)臐櫇駝┌ɡ缡榛蛩徕c。
這些固體口服組合物可釆用傳統(tǒng)的混合、填充或壓片方法來制備。混合操作可重復(fù)進(jìn)行以使活性劑在包含大量填充劑的組合物中分散。這些操作是傳統(tǒng)的。
口服液體組合物可以例如水性或油性懸浮劑，溶液，乳劑，糖漿劑或酏劑的形式被提供，或者以在使用時(shí)用水或適當(dāng)?shù)囊后w載體進(jìn)行重構(gòu)的干燥產(chǎn)品形式被提供。液體組合物可以包含傳統(tǒng)的添加劑諸如助懸劑例如山梨醇，糖漿，曱基纖維素，明膠，羥乙基纖維素，羧甲纖維素，硬脂酸鋁凝膠或氫化可食用油脂，乳化劑例如卵磷脂，單油
酸山梨醇酐酯或阿拉伯膠；非水性載體(其可以包括可食用油)例如杏仁油，分餾椰子油，油性酯諸如甘油酯，丙二醇或乙醇；防腐劑例如對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯曱酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，還包含傳統(tǒng)的調(diào)味劑或著色劑?？诜苿┻€包括傳統(tǒng)的持續(xù)釋放制劑，諸如具有腸溶包衣的片劑或顆粒劑。
對于非腸道給藥，可制備包含活性化合物和無菌載體的流體劑量單位?；钚曰衔锔鶕?jù)載體和濃度的不同可以被懸浮或溶解。非腸道溶液通常通過將化合物溶解在載體中并進(jìn)行過濾滅菌，然后填充在適當(dāng)?shù)男∑炕虬碴持胁⒚芊鈦碇苽洹Ｗ魟┲T如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑可以有利地被溶于載體中。為了增加穩(wěn)定性，組合物在填充到小瓶中后經(jīng)過冷凍并且真空除去水。非腸道懸浮劑可基本上以相同的方式被制備，不同之處在于活性化合物可被懸浮而非溶解在載體中，并且在被懸浮在無菌載體之前可通過暴露于環(huán)氧乙烷下進(jìn)行滅菌。表面活性劑或濕潤劑可有利地被加入以幫助本發(fā)明化合物的均勻分布。
另 一個(gè)用于本發(fā)明化合物給藥的方法是指局部治療。局部制劑可包含例如骨劑，霜?jiǎng)?，洗劑，凝膠劑，溶液劑，糊劑，和/或可包含脂質(zhì)體，膠束和/或微球體。
另一個(gè)用于本發(fā)明化合物給藥的方法是指透皮遞送。典型的透皮制劑包括傳統(tǒng)的水性和非水性的媒介物諸如霜?jiǎng)?、油劑、洗劑或糊劑，或者可為膜劑或加藥貼劑的形式。
作為一般慣例，所述組合物通常附有用于有關(guān)治療的書寫或打印的說明書。提供了以下所述的本發(fā)明的實(shí)施例，其僅用于說明性目的，而非限制性目的。實(shí)施例部分1.方法
1.1由化療誘導(dǎo)的周圍神經(jīng)病(CIPN)
通過對成年的雄性Sprague-Dawley大鼠(150-200 g,供應(yīng)商Harlan)重復(fù)給藥長春新堿、紫杉醇或奧沙利鉑來誘導(dǎo)周圍神經(jīng)病。分別使用以下的方案
長春新堿在150jag/kg的劑量下通過靜脈內(nèi)途徑注射藥物。每2天進(jìn)行處理，歷經(jīng)5次，直到達(dá)到750 pg/kg的累積劑量。在最后一次注射后4天，進(jìn)行爪壓力試驗(yàn)(MarchandF.等人，2003， BrainRes. 980: 1 17-120)。
紫杉醇通過在第1、 3、 5和8天， 一天一次腹膜內(nèi)給藥0.5mg/kg誘導(dǎo)紫杉醇神經(jīng)病變。累積的紫杉醇劑量是2mg/kg。在最后一次注射紫杉醇后14-18天進(jìn)行藥理學(xué)試驗(yàn)(Polomano R. C.等人，2001 ，Pain 94:293-304)。
奧沙利鉑通過腹腔內(nèi)途徑注射2. 4mg/kg，連續(xù)5天，然后中斷2天(一個(gè)循環(huán))。總共進(jìn)行3個(gè)循環(huán)，達(dá)到36mg/kg的累積劑量(Cavaletti G. 2001 ， Eur. J. Cancer 37:2457-2463)。在最后一次注射奧沙利鉑后48小時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)。
1.2由抗病毒藥誘導(dǎo)的神經(jīng)病變
成年雄性Sprague-Dawley大鼠(150-200 g，供應(yīng)商Harlan)采用單次給藥25 mg/kg的核苷反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑ddC(2'，3'-雙脫氧胞苷)或d4T(2、3'-二脫氫-3'-脫氧胸苷)通過靜脈內(nèi)途徑進(jìn)行處理。給予這些抗HIV藥物誘導(dǎo)了對機(jī)械刺激的顯著的異常性疼痛應(yīng)答(JosephE. K. 2004， Pain 107: 147-158)。在注射后第5-10天之間達(dá)到爪壓力閾的最大降低。在第10天進(jìn)行試驗(yàn)。
1. 3頭痛在大鼠的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭嘘U明了腦膜和大腦血管是疼痛敏感的結(jié)構(gòu)并 且受到三叉神經(jīng)的高度支配。三叉神經(jīng)纖維的激活引起腦膜組織的神 經(jīng)源性炎性，其已被提議作為偏頭痛性疼痛和其它頭痛的基本機(jī)理。
(Bolay H. 2002， Nature Medicine 8: 136-142)。才艮椐這些基礎(chǔ)，通 常利用在進(jìn)行三叉神經(jīng)的電刺激后的血管神經(jīng)炎癥的動(dòng)物模型來發(fā)現(xiàn) 潛在的有效的藥物。成年雄性Sprague-Dawley大鼠(150-200 g體重， Harlan)用戊巴比妥鈉@(60 mg/kg i.p.)麻醉，并置于腦功能區(qū)定位 框架中。然后插入同側(cè)電極并刺激三叉神經(jīng)核以誘導(dǎo)腦膜神經(jīng)炎癥， 其可通過滲出的伊文思藍(lán)染料或放射性標(biāo)記的牛血清白蛋白被檢測 到。
1.4在大鼠中的關(guān)節(jié)炎性疼痛
通過在被麻醉的大鼠(雄性成年Sprague-Dawley大鼠，150-200 g， 供應(yīng)商Harlan)中通過關(guān)節(jié)內(nèi)注射0. 1 ml的Freund，s完全佐劑(CFA) 誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎癥。在CFA給藥后14天使用爪壓力試驗(yàn)評價(jià)機(jī)械痛覺過敏 (Shan S 2006， Pain 129:64-75)。
1.5在大鼠中的骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)疼痛
通過在被麻醉的大鼠(雄性成年Sprague-Dawley大鼠，150-200 克，供應(yīng)商Harlan)的左膝關(guān)節(jié)內(nèi)單次給藥2 mg (在25 n 1的體積中) 的2-碘醋酸鈉來誘導(dǎo)骨關(guān)節(jié)炎(Fernihough J. 2004， Pain 112:83-93)。該處理誘導(dǎo)了關(guān)節(jié)的漸進(jìn)性退化和痛覺過敏的形成，模 擬了在人中所觀察到的組織學(xué)和行為水平。在處理后7天進(jìn)行藥理學(xué) 試驗(yàn)。
1.6a機(jī)械痛覺過敏的評價(jià)爪壓力試驗(yàn)
使用爪壓力試驗(yàn)測定了大鼠(雄性成年Sprague-Dawley大鼠， 150-200 g,供應(yīng)商Harlan)中的機(jī)械痛覺過敏。采用痛覺測量器(Ugo Basile， Italy)測定傷害感受閾，所述痛覺測量器才艮據(jù)LeightonG. E.
131988， Br. J. Pharmacol. 93: 553-560所述方法以恒定速率(32 g/s) 施加力。在處理之前和在處理后的不同時(shí)間評價(jià)引起縮爪的刺激。結(jié) 果代表機(jī)械閾值(用克表示)。為了避免對動(dòng)物爪造成任何可能的損 害，將施加的最大力固定在240克。
1.6b機(jī)械異常性疼痛的評價(jià)von Frey試驗(yàn)
將大鼠(雄性成年Sprague-Dawley大鼠，150-200 g，供應(yīng)商 Harlan)置于室中，該室具有被塑料圓頂覆蓋的金屬網(wǎng)地板，其能夠使 動(dòng)物自由行動(dòng)，但不能跳越。使用電子vonFrey儀器向左后爪的中部 跖皮膚內(nèi)傳送機(jī)械刺激。截止值固定在50克，而力增加速率(坡道持 續(xù)時(shí)間)在20秒內(nèi)固定。
1. 7在大鼠中的Irwin試驗(yàn)
為了檢驗(yàn)化合物的給藥是否可誘導(dǎo)中央介導(dǎo)的副作用，根據(jù) "Irwin試驗(yàn)"方案(其是一種用于評價(jià)在動(dòng)物中由藥物治療所誘導(dǎo) 的行為和生理學(xué)變化的系統(tǒng)的和定量的方案)，通過皮下途徑和口服 途徑，用地來西坦處理成年雄性Sprague-Dawley大鼠(150-200，供應(yīng) 商 Harlan)并進(jìn)行監(jiān)控(Irwin 1968， Psychopharmacologia 13:222-257)。
在給藥后對大鼠進(jìn)行不斷的監(jiān)控，歷時(shí)30分鐘。在給藥后在每天 上午9點(diǎn)重復(fù)監(jiān)控歷時(shí)4天。
1.8在大鼠中的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)
轉(zhuǎn)棒儀試驗(yàn)允許評價(jià)化合物對運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)的影響。將成年雄性 Sprague-Dawley大鼠(200-220 g，供應(yīng)商Harlan, Milan)置于直徑 為6厘米和長度為35厘米的、以恒定速度(16 rpm)旋轉(zhuǎn)的、高度為 25 cm的塑料棒上。將棒分成4個(gè)相同部分，使得最多4只動(dòng)物可同 時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)。要求動(dòng)物在30秒內(nèi)行走以對抗轉(zhuǎn)筒的運(yùn)動(dòng)。根據(jù)Vaught 等人，1985， Neuropharmacology 24: 211-216的方法，記錄在30秒 內(nèi)從轉(zhuǎn)棒儀掉落的時(shí)間作為掉落次數(shù)。在各實(shí)驗(yàn)中，在給藥供試化合物之前(預(yù)試驗(yàn))和之后測量運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)。將預(yù)試驗(yàn)中得分小于3和掉 落次數(shù)大于6的大鼠丟棄。
1.9在大鼠中的轉(zhuǎn)棒儀/共濟(jì)失調(diào)
通過Veneroni等人，2003， Pain, 102: 17-25所述方法進(jìn)行該試 驗(yàn)。通過大鼠不能保持在旋轉(zhuǎn)棒(IO rpm)上所歷時(shí)的試驗(yàn)時(shí)段來評價(jià) 神經(jīng)病學(xué)缺陷。計(jì)算中毒劑量作為引起25 UTD25)或50。/。(TDs。)的掉落 大鼠的劑量(僅對于加巴噴丁而言，中毒劑量是TD16 -掉落的大鼠中 的16%)。
1. 10在小鼠中的洞板實(shí)驗(yàn)
洞板試驗(yàn)允許研究當(dāng)嚙齒類動(dòng)物面臨新環(huán)境時(shí)所述嚙齒類動(dòng)物的 行為(Boissier JR 1964， Therapie 19:571-583)。該試驗(yàn)?zāi)軌蛟u價(jià) 動(dòng)物的最初的探索活動(dòng)及其由給藥所引起的可能的變化。
洞板試驗(yàn)使用40平方厘米的平板，其具有16個(gè)齊平安裝的圓柱 形孔(直徑為3厘米)，以等距的網(wǎng)格狀方式進(jìn)行4 x 4分布。將小鼠(雄 性Swiss Webster小鼠，重25-30 g,供應(yīng)商Morini)—個(gè)接一個(gè)地 置于板的中心，并允許其自由行動(dòng)，各自歷時(shí)5分鐘。兩根光電橫梁， 從中點(diǎn)到對邊的中點(diǎn)穿過平板，并由此將該平板分成四個(gè)相同的四分 體，自動(dòng)記錄在平板表面上的動(dòng)物的行動(dòng)。在16個(gè)孔的每個(gè)孔中的微 型光電管記錄了小鼠對孔的探索活動(dòng)(頭傾伏動(dòng)作)。
2. 結(jié)杲(抗痛覺過敏活性)
2.1在大鼠中由奧沙利鉑誘導(dǎo)的神經(jīng)病變
在由重復(fù)給藥奧沙利鉑后誘導(dǎo)的神經(jīng)病變模型中，采用爪壓力試 驗(yàn)評價(jià)地來西坦的影響。結(jié)果如圖l所示。地來西坦在IOO和300毫 克/千克的劑量下一天一次口服給予，在奧沙利鉑處理前三天開始和在 用奧沙利鉑自身進(jìn)行處理期間被給予。在300毫克/千克的劑量下，地 來西坦顯著降低機(jī)械痛覺過敏。在給藥后30分鐘到4小時(shí)之間，該效果是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的。
2.2由抗病毒藥誘導(dǎo)的神經(jīng)病變
試驗(yàn)結(jié)果(von Frey試驗(yàn))如圖2所示。在100毫克/千克的劑 量下，在給藥后15-30分鐘，地來西坦完全反轉(zhuǎn)由ddC誘導(dǎo)的異常性 疼痛，機(jī)械閾在被處理的動(dòng)物中和在對照動(dòng)物中處于相同水平。在處 理后45分鐘，這一效果仍然是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的。
地來西坦是外消旋化合物；合成了兩個(gè)相應(yīng)的對映體并在由ddC 誘導(dǎo)的神經(jīng)病變模型中分別進(jìn)行試驗(yàn)。兩個(gè)化合物在150和300毫克/ 千克的劑量下被口服給藥并且使用爪壓力試驗(yàn)評價(jià)了它們的抗痛覺過 敏活性。結(jié)果如圖3所示。(R)-地來西坦在給藥后15-45分鐘，在300 毫克/千克的劑量下，誘導(dǎo)了疼痛機(jī)械閾的顯著降低。(S)對映體在給 藥后15分鐘，在300亳克/千克的劑量下，誘導(dǎo)顯著效果。這些數(shù)據(jù) 說明了地來西坦的單一對映體也具有效力。
2. 3在大鼠中的骨關(guān)節(jié)性疼痛
在通過關(guān)節(jié)內(nèi)注射一碘代醋酸鈉(MIA)所誘導(dǎo)的骨關(guān)節(jié)疼痛模型 中，評價(jià)了地來西坦的抗痛覺過敏潛力(爪壓力試驗(yàn))。試驗(yàn)結(jié)果如圖 4所示。地來西坦及其(R)對映體二者，在150毫克/千克的劑量下， 在給藥后15-30分鐘，都在反轉(zhuǎn)由MIA誘導(dǎo)的痛覺過敏中顯示了統(tǒng)計(jì) 學(xué)顯著效果。在300毫克/千克的劑量下，地來西坦完全反轉(zhuǎn)由MIA 誘導(dǎo)的痛覺過敏，機(jī)械閾在被處理的動(dòng)物中和在對照動(dòng)物中，在給藥 后15-45分鐘，處于相同水平；該效果在給藥后60分鐘仍然是統(tǒng)計(jì)學(xué) 顯著的。(R)對映體的效果在處理后45分鐘仍然是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的。3. 結(jié)果(耐受性)為了檢驗(yàn)地來西坦是否可能誘導(dǎo)不希望的副作用，在大 鼠的轉(zhuǎn)棒儀模型(運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)和共濟(jì)失調(diào))中和在小鼠的洞板模型(自發(fā) 活動(dòng)和探索活動(dòng))中試驗(yàn)所述化合物。
3.1在大鼠中的轉(zhuǎn)棒儀試驗(yàn)在急性毒性實(shí)驗(yàn)中，在3000毫克/千克劑量下被口服給予的地來 西坦(是在先前的藥理學(xué)活性試驗(yàn)中所用劑量的20倍)不改變在轉(zhuǎn)棒 儀試驗(yàn)中的大鼠運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)，如圖5所示。
不同地是，如圖6所示，參考化合物l-(3-氰基苯基)-四氫吡咯 并[1, 2-a]咪唑-2， 5-二酮(W02004/085438的式(I)的代表性化合物， 參見實(shí)施例13)顯著改變動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)，增加了從300毫克/千克開 始的掉落次數(shù)；這些數(shù)據(jù)顯示了所述參考化合物具有更低的耐受性水 平。
3.2在大鼠中的轉(zhuǎn)棒儀/共濟(jì)失調(diào)試驗(yàn)
口服給予的地來西坦的TDu是6000毫克/千克，從而證明了該化 合物具有非常高的安全性和耐受性。
在參考標(biāo)準(zhǔn)中，口服給予的曲馬多表現(xiàn)出最高的毒性，其TDs。為 253毫克/千克，而口服給予的普瑞巴林和左乙拉西坦顯示出的TDs。分 別為536和2000亳克/千克?？诜o予的加巴噴丁顯示出的TD"為1000 亳克/千克。
3. 3在大鼠中的Irwin試驗(yàn)
通過皮下途徑以1000毫克/千克劑量被給予的地來西坦和通過口 服途徑以3000毫克/千克劑量被給予的地來西坦在所有的被觀察的行 為參數(shù)中未顯示任何的影響。
3.4在小鼠中的洞板試驗(yàn)
在洞板試驗(yàn)中，以3000毫克/千克被口服給予的地來西坦不顯著 降低自發(fā)活動(dòng)(每只動(dòng)物在平板上的移動(dòng)次數(shù))或好奇心(頭傾伏次 數(shù))，如圖7所示。
相反地，以1000毫克/千克被給予的加巴噴丁在被評價(jià)的兩個(gè)參 數(shù)中都引起統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著降低。
173.5在大鼠中的初步毒性通過口服途徑和靜脈內(nèi)途徑給予單一 劑量對Sprague-Dawley大鼠口服或靜脈內(nèi)給予3000亳克/千克的單 一劑量的地來西坦被實(shí)質(zhì)上很好地耐受。在實(shí)驗(yàn)期間未觀察到毒性跡 象。行為觀測、血和尿分析未顯示在被測量的臨床參數(shù)中有任何劑量 相關(guān)變化。
3.6在大鼠中的重復(fù)毒性口服，4和13周
對Sprague-Dawley大鼠重復(fù)口服給藥地來西坦，歷時(shí)4周，并且 高達(dá)2500毫克/千克/日的最大劑量沒有在死亡率、癥狀學(xué)或正常行為 改變方面產(chǎn)生任何改變。
對Sprague-Dawley大鼠重復(fù)口服給藥地來西坦，歷時(shí)13周，并 且2500亳克/千克/日的最大劑量被很好地耐受。無死亡率或相應(yīng)的臨 床征象，以及在所有的劑量水平下都未觀察到體重、水和食物的消耗 以及體溫有改變。血液學(xué)、臨床化學(xué)、血凝參數(shù)和尿分析在所有的供
試劑量下都未顯示被評價(jià)的不同的參數(shù)具有藥物相關(guān)變化。注意到?jīng)] 有與地來西坦給藥有關(guān)的宏觀或微觀的病變或異常。
3.7在食蟹猴中的重復(fù)毒性口服，4和13周。
對食蟹猴重復(fù)口服給藥地來西坦歷時(shí)4周，并且2000亳克/千克/ 日的最大劑量被動(dòng)物很好地耐受。在用2000亳克/千克最大劑量處理 的一些動(dòng)物中觀察到食物消耗和體重略有降低。
對食蟹猴重復(fù)口服給藥地來西坦歷時(shí)13周，并且2000亳克/千克 /日的最大劑量被動(dòng)物很好地耐受。無死亡率或相應(yīng)的臨床征象，以及 在所有的劑量水平下都未觀察到體重、水和食物的消耗以及體溫有改 變。血液學(xué)、臨床化學(xué)、血凝參數(shù)和尿分析在所有的供試劑量下都未 顯示被評價(jià)的不同的參數(shù)具有藥物相關(guān)變化。注意到?jīng)]有與地來西坦 給藥有關(guān)的宏觀或微觀的病變或異常。
總而言之，這些數(shù)據(jù)顯示了，在本發(fā)明的典型的劑量范圍內(nèi)，地 來西坦具有強(qiáng)的抗痛覺過敏活性。高的作用效力通過以下事實(shí)得以證實(shí)該化合物比加巴噴丁顯示出顯著更高的效力，加巴噴丁在慢性疼 痛治療中到目前為止被認(rèn)為是金標(biāo)準(zhǔn)。相對于不同來源的慢性疼痛 (即，由化療誘導(dǎo)的疼痛、由抗病毒藥誘導(dǎo)的疼痛、骨關(guān)節(jié)疼痛、頭 痛等等)所發(fā)現(xiàn)的活性表明了本文所推薦治療的廣泛的應(yīng)用范圍。另 外，在所述動(dòng)物模型中所示的數(shù)據(jù)突出了地來西坦對與抗病毒藥治療 有關(guān)的慢性疼痛和骨關(guān)節(jié)疼痛以及相關(guān)病變具有特殊的效力。另外， 在本發(fā)明的典型的劑量下，地來西坦被證明比現(xiàn)有技術(shù)的加巴噴丁或 吡咯并咪哇衍生物更加被耐受。
權(quán)利要求
1.地來西坦或其藥學(xué)可接受的溶劑合物，其單獨(dú)或與其它活性成分聯(lián)合，在制備用于治療和/或預(yù)防慢性疼痛的藥物中的應(yīng)用。2.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中與地來西坦聯(lián)合給藥的藥物是抗腫瘤藥或抗病毒藥。
2.權(quán)利 要求l的應(yīng)用，其中與地來西坦聯(lián)合給藥的藥物是抗肺瘤藥或抗病毒藥。
3. 權(quán)利要求2的應(yīng)用，其中與地來西坦聯(lián)合給藥的藥物選自紫 杉醇，長春新堿，順鉑，奧沙利鉑，核苷反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑抗病毒藥及其 衍生物。
4. 權(quán)利要求1-3的應(yīng)用，其用于治療由化療劑、其它抑制生長 治療和/或抗病毒藥i秀導(dǎo)的疼痛。
5. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其用于治療復(fù)雜性局部疼痛綜合癥。
6. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其用于治療幻肢痛。
7. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其用于治療丘腦綜合征和脊推綜合征。
8. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其用于治療由骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 自身免疫骨關(guān)節(jié)炎形式誘導(dǎo)的疼痛。
9. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其用于治療頭痛。
10. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其用于治療纖維肌痛。
11. 權(quán)利要求1-10的應(yīng)用，其用于制備劑量單位對于口服，可 用于給予10到300亳克/千克的地來西坦，對于肌肉內(nèi)，可用于給予5 到150毫克/千克的地來西坦；對于靜脈內(nèi)，可用于給予2到60毫克/千克的地來西坦。
12. 權(quán)利要求1-ll的應(yīng)用，其用于制備劑量單位對于口服，其 中地來西坦的含量為500到15000毫克；對于肌肉內(nèi)，其中地來西坦的 含量為250到7500毫克；對于靜脈內(nèi)，其中地來西坦的含量為100到 3000毫克。
13. 用于治療和/或預(yù)防慢性疼痛的藥物組合物，包含單獨(dú)的或與 其它活性成分聯(lián)合的地來西坦或其藥學(xué)可接受的溶劑合物。
14. 權(quán)利要求13的藥物組合物，其為劑量單位的形式對于口服， 可用于給予10到300毫克/千克的地來西坦，對于肌肉內(nèi)，可用于給予 5到150毫克/千克的地來西坦；對于靜脈內(nèi)，可用于給予2到60毫克/ 千克的地來西坦。
15. 權(quán)利要求13-14的藥物組合物，其用于制備劑量單位對于口 服，其中地來西坦的含量為500到15000毫克；對于肌肉內(nèi)，其中地來 西坦的含量為250到7500毫克；對于靜脈內(nèi)，其中地來西坦的含量為 100到3000亳克。
16. 權(quán)利要求13-15的藥物組合物，其選自片劑，膠嚢，經(jīng)口制備 物，粉劑，顆粒劑，小球，用于注射或輸注的液體溶液，懸浮劑，乳劑， 糖漿劑，酏劑，干粉劑或粒子，持續(xù)釋放制劑，骨劑，霜?jiǎng)?，洗劑，?膠劑，糊劑，用于透皮施用的膜劑或加藥貼劑。
17. 地來西坦或其藥學(xué)可接受的溶劑合物，其單獨(dú)或與其它活性成 分聯(lián)合，用于治療和/或預(yù)防慢性疼痛。
全文摘要
本發(fā)明公開了地來西坦在治療慢性疼痛中的應(yīng)用。在劑量高于先前所公開的關(guān)于其認(rèn)知增強(qiáng)活性(即改善學(xué)習(xí)和記憶)的劑量下，地來西坦能夠完全反轉(zhuǎn)與若干個(gè)慢性疼痛動(dòng)物模型有關(guān)的痛覺過敏或異常性疼痛。地來西坦在與抗病毒藥和化療藥治療有關(guān)的醫(yī)源性神經(jīng)病變中和在由骨關(guān)節(jié)炎引起的疼痛性病況中顯示高活性。另外，地來西坦在比最高治療劑量高10倍的劑量下沒有毒性。因此公開了使用高效的和基本上無毒的化合物來治療這種致虛弱性病變的可能性。
文檔編號A61K31/4188GK101677984SQ200880015837
公開日2010年3月24日 申請日期2008年4月15日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月16日
發(fā)明者C·格拉蒂尼, C·法里納, P·佩特利羅 申請人:紐羅圖恩股份公司