專利名稱：包含ipp和/或vpp的降血壓組合的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的降血壓組合物。
背景技術(shù)：
高血壓(Hypertension)(通常也稱為“血壓高(highblood pressure) ” 或 HTN) 是血壓慢性升高的醫(yī)學(xué)病癥。雖然正式稱謂是動(dòng)脈高血壓，但是不帶限定詞的詞語(yǔ)“高血 壓”也通常表示動(dòng)脈高血壓。高血壓可以被歸類為基本型(原發(fā))或繼發(fā)型。基本型高血壓 表示不存在解釋患者病癥的特定的醫(yī)學(xué)原因。繼發(fā)型高血壓表示血壓高是另外的病癥(繼 發(fā))的結(jié)果，所述病癥例如為腎病或某些腫瘤(特別是腎上腺)。持久型(Persistent)高 血壓是中風(fēng)、心臟病、心力衰竭和動(dòng)脈瘤的風(fēng)險(xiǎn)因子之一，并且是慢性腎衰竭的主導(dǎo)原因。 即使動(dòng)脈血壓的中度提高也會(huì)導(dǎo)致預(yù)期壽命(life expectancy)縮短。在嚴(yán)重的高壓下 (意味著平均動(dòng)脈壓比均值高50%或更多)，除非得到適當(dāng)?shù)闹委?，否則預(yù)計(jì)此人生存不超 過(guò)數(shù)年ο (來(lái)源:http //en. wikipedia. org/wiki/Hypertension).大部分教科書(shū)中提到，對(duì)涉及到的人群中多于90%而言，血壓高的原因是未知的。 遺傳傾向(genetics disposition)被認(rèn)為是相關(guān)的事實(shí)，但是目前所有血壓高中的大部分 通常與生活方式和飲食因素相關(guān)。在生活方式習(xí)慣中，例如喝咖啡、消耗酒精、缺乏鍛煉和 壓力可對(duì)血壓造成負(fù)面影響。飲食因素如含高飽和脂肪或含高鹽的食物以及肥胖癥同樣起 重要作用。特別地，生活方式的改變可非常有助于降低大部分人的血壓。在這一方面中，營(yíng)養(yǎng) 藥物可以是健康飲食的部分，用于降低提高的血壓。對(duì)這些人而言，目前存在被證明有幫助 的許多合適的化合物。目前存在這樣的趨勢(shì)——使用選定的、有時(shí)已經(jīng)是常規(guī)飲食的部分 的化合物。通常，這些選定的化合物隨即與常規(guī)食物攝入相比以提高的劑量被消耗。另一方面，總是存在將添加用于影響我們生理狀況的化合物的必須量最小化的需 要。不僅因?yàn)闈饪s和提取成本使生產(chǎn)成本非常高，而且公眾感覺(jué)營(yíng)養(yǎng)藥物中例如活性化合 物的量應(yīng)當(dāng)保持盡可能低。協(xié)同組合物能夠滿足這一要求，因此存在將活性化合物協(xié)同組 合的需要，從而降低活性化合物的所述量。進(jìn)行的另一觀察結(jié)果是抗高血壓藥(用于治療高血壓的化合物)僅對(duì)某一百分比 的患有高血壓的人具有積極影響。例如，發(fā)現(xiàn)ACE (血管緊張素轉(zhuǎn)化酶)抑制肽對(duì)大約三分 之二患有高血壓的人有效，其量對(duì)應(yīng)于許多處方藥。通常，需要降血壓效應(yīng)的人會(huì)將一種抗高血壓藥嘗試約兩個(gè)月，只有在兩個(gè)月后無(wú) 效果時(shí)才會(huì)嘗試另一抗高血壓藥。有時(shí)在實(shí)踐中，在發(fā)現(xiàn)降血壓效應(yīng)之前必須完成大量試驗(yàn)， 并且在實(shí)踐中，許多患者在獲得有意義的降血壓效應(yīng)之前，需要用多種降血壓藥丸治療。因此存在對(duì)下述降血壓組合物的需求，所述降血壓組合物會(huì)對(duì)更大量的人有效， 同時(shí)包含正常飲食中存在的那些化合物作為有效成分。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開(kāi)了新穎的降血壓組合物，其至少對(duì)五分之四需要這類組合物的人有效。本發(fā)明的組合物包含-具有ACE抑制效應(yīng)的肽；和-至少一種能夠從天然來(lái)源提取或純化的化合物，所述化合物優(yōu)選地選自由 (0010、葡萄籽提取物、白藜蘆醇3606、維生素0、？吐3、6六8六、番茄紅素、山楂(Hawthorne)、 羥基酪醇組成的組，或優(yōu)選地根據(jù)葡萄籽提取物或分離物中存在的多酚的抗氧化作用而選 擇。優(yōu)選的肽是IPP(Ile-Pro-Pro)和 VPP (Val-Pro-Pro)。I 或 Ile 是異亮氨酸。V 或 Val是纈氨酸。P或Pro是脯氨酸。驚訝地發(fā)現(xiàn)，每種上述化合物與IPP和/或VPP的組合產(chǎn)生了協(xié)同的降血壓效應(yīng)， 即組合的效應(yīng)比每種個(gè)體化合物的降血壓效應(yīng)的總和更大。另外，驚訝地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的組 合物與每種有效成分相比對(duì)更大的人群有效。本發(fā)明還涉及生產(chǎn)本發(fā)明的組合物的方法，所述方法將是IPP和/或VPP的肽和 至少一種能夠從天然來(lái)源中提取或純化的化合物集合在一起來(lái)實(shí)現(xiàn)，所述化合物優(yōu)選地選 自由CoQIO、葡萄籽提取物、白藜蘆醇、EGCG、維生素D、Pufa, GABA、番茄紅素、山楂、羥基酪 醇組成的組，或優(yōu)選地根據(jù)葡萄籽提取物或分離物中存在的多酚的抗氧化作用而選擇。另外，本發(fā)明涉及-具有ACE抑制效應(yīng)的肽；和_至少一種能夠從天然來(lái)源中提取或純化的化合物，所述化合物優(yōu)選地選自由 CoQIO、葡萄籽提取物、白藜蘆醇、EGCG、維生素D、Pufa、GABA、番茄紅素、山楂、羥基酪醇組成 的組，或優(yōu)選地根據(jù)葡萄籽提取物或分離物中存在的多酚的抗氧化作用而選擇，在食物、飼料、營(yíng)養(yǎng)藥物或飲食補(bǔ)充物中的用途或用于制備食物、飼料、營(yíng)養(yǎng)藥物 或飲食補(bǔ)充物的用途。在該用途中，所述肽優(yōu)選地為IPP或VPP。另外，該用途涉及ACE抑制效應(yīng)或用于 降血壓。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，能夠從天然來(lái)源中提取或純化的肽和化合物一起對(duì)降血 壓具有協(xié)同效應(yīng)。本發(fā)明還涉及治療需要降血壓效應(yīng)的人的方法，所述方法包括對(duì)所述人施用本發(fā) 明的組合物。具有ACE抑制效應(yīng)的肽可以根據(jù)任何已知的方法生產(chǎn)。其可以從蛋白質(zhì)來(lái)源分 離，其可以通過(guò)化學(xué)或酶促水解蛋白質(zhì)來(lái)制備，或者可以合成生產(chǎn)。優(yōu)選地，所述肽通過(guò)水 解合適的蛋白質(zhì)生產(chǎn)，并且是水解產(chǎn)物的部分。水解產(chǎn)物可任選地被純化，從而提高水解產(chǎn) 物中的肽含量。酶促水解的底物包括全奶、脫脂奶、酸性酪蛋白、粗制凝乳酶酪蛋白、酸性乳 清產(chǎn)物或乳酪乳清產(chǎn)物。用于酶促水解的其它底物是基于膠原的動(dòng)物蛋白例如明膠，以及 骨或魚(yú)骨。另外，植物底物如小麥谷蛋白、研磨的大麥和從例如大豆、水稻或玉米獲得的蛋 白質(zhì)級(jí)分是合適的底物。優(yōu)選地使用奶或來(lái)自奶的蛋白質(zhì)，例如酪蛋白或乳清。從天然來(lái)源提取的化合物可以是·魚(yú)油(EPA/DHA)若干研究報(bào)道了 EPA/DHA對(duì)血壓的有利影響。EPA和DHA可調(diào)控信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的胞內(nèi)Ca2+離子，這導(dǎo)致血管肌肉膨脹。其它推測(cè)的機(jī)制包括1^4八仏3平衡朝向TXA3的移位，并 以血管收縮性TxA2為代價(jià)；改變前列腺素合成；增強(qiáng)細(xì)胞膜流動(dòng)性，導(dǎo)致改變的離子通道 活性?！ぞG茶(ECGC)對(duì)EGCG而言，一些研究報(bào)道了對(duì)大鼠血壓的有利影響，但是沒(méi)有研究報(bào)道在人中 的效應(yīng)。作用機(jī)制對(duì)綠茶而言，推定的降血壓應(yīng)答下潛在的基本機(jī)制應(yīng)當(dāng)在于多酚的抗氧化作用。 該抗氧化效應(yīng)會(huì)改善內(nèi)源血管擴(kuò)張藥一氧化氮(NO)的生物利用率。一些體外研究提出大 量多酚的ACE-抑制作用，但是這一效應(yīng)尚未在人中證實(shí)?！?y -氨基-丁酸(GABA)GABA已在若干文章(見(jiàn)參考文獻(xiàn))中被描述為降低血壓。所有四種研究具有不同 的設(shè)計(jì)，并使用來(lái)自不同來(lái)源的GABA。所有四種研究均在日本進(jìn)行。因?yàn)橐灾卸葎┝渴┯玫腉ABA不跨越血-腦屏障，所以其對(duì)血壓的影響被認(rèn)為是通 過(guò)外周機(jī)制而發(fā)生?；谠诖笫笾械难芯?，最可能的機(jī)制似乎是通過(guò)阻斷交感神經(jīng)末梢或神經(jīng)節(jié)點(diǎn)處 的GABA6受體來(lái)減弱交感神經(jīng)傳遞。然而，GABA與外周苯并二氮雜卓類受體的結(jié)合已被描 述，并且同樣可部分解釋GABA的低血壓效應(yīng)。1. Inoue K，Shirai T，Ochiai H， 等，Blood-pressure-lowering effect of a novel fermented milk containing gamma-aminobutyric acid (GABA) in mild hypertensives. EUR J CLIN NUTR 57(3) :490_495MAR 2003.2. Kazami D，Ogura N，F(xiàn)ukuchi T，等，Antihypertensive effect of Japanese taste seasoning containing gamma-amino butyric acid on mildly hypertensive and high-normal blood pressure subjects and normal subjects. J JPN SOC FOOD SCI 49(6) :409-4152002.3. Watanabe 等,J. Jap. Food Sci. Technol. (2003)50167-173 :GABA-enriched Agaricus blazei mushrooms， mildly hypertensive subjects， placebo controlled double blind cross—over，14subjects，lweek4. Tsuchida T，等，J Jpn Soc Nutr Food Sci (2003) 56 97-102 :GABA_rich Chlorella in 60 subjects with high-normal BP and hypertension.·葡萄籽提取物(包括白藜蘆醇)來(lái) 自 University of California at Davis 的 Faseb Journal (The FASEB Journal. 2007 ；21 :750. 33)的摘要報(bào)道，服用葡萄籽提取物(300mg)后，就收縮期和舒張期 血壓而言，患有前_高血壓的受試者中血壓降低8/6mmHg。作用機(jī)制對(duì)葡萄籽提取物而言，推定的降血壓應(yīng)答下潛在的基本作用機(jī)制應(yīng)當(dāng)在于多酚的 抗氧化作用。該抗氧化效應(yīng)會(huì)改善內(nèi)源血管擴(kuò)張藥一氧化氮(NO)的生物利用率。一些體 外研究提出大量多酚的ACE-抑制作用，但是這一效應(yīng)尚未在人中證實(shí)?！の骷t柿提取物(番茄紅素)
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僅一項(xiàng)研究公開(kāi)了西紅柿提取物在人中降血壓的特性，但是其似乎是具有強(qiáng)有力 效應(yīng)的精心設(shè)計(jì)的研究(安慰劑對(duì)照研究中-IOmmHg降低。Egelhard，Am Heart J. 2006)。作用機(jī)制對(duì)西紅柿提取物而言，推定的降血壓應(yīng)答下潛在的基本作用機(jī)制應(yīng)當(dāng)在于多酚的 抗氧化作用。該抗氧化效應(yīng)會(huì)改善內(nèi)源血管擴(kuò)張藥一氧化氮(NO)的生物利用率。一些體 外研究提出大量多酚的ACE-抑制作用，但是這一效應(yīng)尚未在人中證實(shí)?！ら蠙焯崛∥?羥基酪醇)在同行評(píng)議的文獻(xiàn)(peer-reviewed literature)中未報(bào)道效應(yīng)。(注意對(duì)橄欖葉 提取物而言存在一些證據(jù))。作用機(jī)制對(duì)橄欖提取物而言，推定的降血壓應(yīng)答下潛在的基本作用機(jī)制應(yīng)當(dāng)在于多酚的抗 氧化作用。該抗氧化效應(yīng)會(huì)改善內(nèi)源血管擴(kuò)張藥一氧化氮(NO)的生物利用率。一些體外 研究提出大量多酚的ACE-抑制作用，但是這一效應(yīng)尚未在人中證實(shí)。·維生素D關(guān)于維生素D干預(yù)(1-20 μ g/天)對(duì)血壓的影響出版了 7項(xiàng)對(duì)人的研究(綜述參 閱Zitterman 2003 ；未報(bào)道更近期的研究)，所述研究具有從無(wú)影響到有影響的不同結(jié)果。 維生素D改善Ca2+代謝，并且提出Ca2+改善血壓?；蛘?，有指征指出維生素D及其代謝產(chǎn)物 可抑制ACE?！?B類維生素補(bǔ)充B類生物素來(lái)降低血壓導(dǎo)致了混合的結(jié)果。一些文章描述了效應(yīng)的缺乏。 有限量的研究報(bào)道了對(duì)血壓的較小的有益影響(Aybak，1995 ；Stehouwer, 2001 ；Mangoni, 2002)。應(yīng)當(dāng)注意，一項(xiàng)研究(Mangoni)中的受試者均為吸煙者，并且僅有一項(xiàng)研究與安慰 劑組進(jìn)行了正確的比較?！ど介谝粋€(gè)研究中，山楂顯示有降低血壓的趨勢(shì)(Phytother Res. 2002Feb ； 16(1) 48-54.)作用機(jī)制對(duì)綠茶而言，推定的降血壓應(yīng)答下潛在的基本機(jī)制應(yīng)當(dāng)在于多酚的抗氧化作用。 該抗氧化效應(yīng)會(huì)改善內(nèi)源血管擴(kuò)張藥一氧化氮(NO)的生物利用率。一些體外研究提出大 量多酚的ACE-抑制作用，但是這一效應(yīng)尚未在人中證實(shí)?！?CoQlO 或 QlO在2007 年(Journal of Human Hypertension (2007) 21，297-306)進(jìn)行了對(duì)輔酶 QlO的降血壓潛能的薈萃分析(meta-analysis)，所述分析進(jìn)行了大量臨床試驗(yàn)。結(jié)論是輔 酶QlO在高血壓患者中具有降低收縮期血壓而無(wú)顯著副作用的潛能。如上文所討論的，對(duì)本發(fā)明第二組分所進(jìn)行的研究結(jié)果在大部分情況下是可疑 的。因此，這些化合物在本發(fā)明的組合物中顯示如此積極的影響是相當(dāng)令人驚訝的。特別 地，CoQIO、葡萄籽提取物和多酚是優(yōu)選的第二化合物。蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物、水解產(chǎn)物或經(jīng)水解 的蛋白質(zhì)表示所述產(chǎn)物通過(guò)蛋白質(zhì)的酶促水解而形成，經(jīng)富集的水解產(chǎn)物是例如富含選定 的肽的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的級(jí)分，或者其中肽或多肽已從水解產(chǎn)物中去除。因此，富集的水解產(chǎn)物優(yōu)選地是多種肽的混合物(或一種肽混合物)。因此，本發(fā)明的肽混合物是至少兩種、 優(yōu)選地至少三種、更優(yōu)選地至少四種肽的混合物。更優(yōu)選地，混合物包含下述肽群體，其中 多于50%，優(yōu)選地甚至多于60%，最優(yōu)選地多于75%的存在的肽具有低于500Da的分子量。 本發(fā)明中使用的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物具有7和50之間的DH、優(yōu)選地10和40之間的DH、最優(yōu)選 地15和30之間的DH?！半摹被颉肮央摹痹诒疚闹斜欢x為通過(guò)肽鍵連接的至少兩個(gè)氨基酸的鏈。術(shù)語(yǔ)“肽” 和“寡肽”被認(rèn)為是同義詞(如普遍所認(rèn)可的)，并且每個(gè)術(shù)語(yǔ)可疑根據(jù)上下文的需要互換 使用。“多肽”在本文中被定義為含有多于30個(gè)氨基酸殘基的鏈。根據(jù)普遍實(shí)踐，本文所有 (寡)肽和多肽式或序列從左到右以從氨基端到羧基端的方向書(shū)寫(xiě)。在本文中使用時(shí)，蛋白 質(zhì)被定義為非水解的蛋白質(zhì)。另外，特別是一般地討論蛋白質(zhì)時(shí)，蛋白質(zhì)也可表示多肽、肽 和游離氨基酸的總和?！坝坞x氨基酸”是不通過(guò)肽鍵與另一氨基酸連接的氨基酸。在該申請(qǐng)文件中，“氨基 酸”可能在若干情況下使用時(shí)也表示“游離氨基酸”。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物中游離氨基酸 的量少于總蛋白質(zhì)的5wt%。在本文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)營(yíng)養(yǎng)藥物表示在營(yíng)養(yǎng)和藥物兩種應(yīng)用領(lǐng)域中的有用性。因 此，包含本發(fā)明組合物的新穎的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物可用作食物和飲料的補(bǔ)充物，或作為用于 腸內(nèi)或腸胃外應(yīng)用的藥物配制物或藥物，其可以是固體配制物例如膠囊或片劑，或液體配 制物例如溶液、懸浮液或乳液。用于特定營(yíng)養(yǎng)用途(Foods for Special Nutritional Uses)的食物的例子包 括運(yùn)動(dòng)食物、瘦身食物、嬰兒配方和臨床食物的范疇。在本文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)食物補(bǔ)充物 表示由口攝取的產(chǎn)物，其含有旨在補(bǔ)充飲食的化合物或多種化合物的混合物。這些產(chǎn)物 中的化合物或多種化合物的混合物可包含維生素、礦物質(zhì)、草藥(herbs)或其它植物 (botanicals)和氨基酸。飲食補(bǔ)充物也可以是提取物或濃縮物，并且可以許多形式存在，例 如片劑、膠囊、軟凝膠、凝膠膠囊(gelcaps)、液體或粉末。在本文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)營(yíng)養(yǎng)藥物表 示在營(yíng)養(yǎng)和藥物兩種應(yīng)用領(lǐng)域中的有用性。根據(jù)本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物可以是適合施用 給動(dòng)物體(包括人體)的任何形式，特別是常規(guī)用于口施用的任何形式，例如固體形式例如 食物或飼料(添加劑/補(bǔ)充物)、食物或飼料預(yù)混物、片劑、丸劑、顆粒、錠劑、膠囊和泡騰配 制物例如粉末和片劑，或者是液體形式例如溶液、乳液或懸浮液，例如飲料、糊劑和油性懸 浮液。并入根據(jù)本發(fā)明的水解產(chǎn)物的受控(延遲)釋放配制物也構(gòu)成本發(fā)明的部分。另外， 可以向本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物中添加多-維生素和礦物質(zhì)補(bǔ)充物，獲得適量的在一些飲 食中缺失的必須營(yíng)養(yǎng)物。多-維生素和礦物質(zhì)補(bǔ)充物也可以用于疾病預(yù)防和生活方式導(dǎo)致 的防止養(yǎng)分流式和缺乏。如上文所述，食物或飲料被合適地用于施用本發(fā)明。可用于補(bǔ)充本發(fā)明的組合物 的飲料可以是飲料(例如運(yùn)動(dòng)飲品、能量飲品或其它軟飲)的形式，或任何其它合適的養(yǎng)分 制備物的形式。運(yùn)動(dòng)飲品是假設(shè)為運(yùn)動(dòng)員補(bǔ)水以及補(bǔ)充電解質(zhì)、糖和其它養(yǎng)分的飲料。運(yùn)動(dòng) 飲品通常是等滲的，表示它們含有與人體中存在的相同比例的養(yǎng)分。(來(lái)源http:// en. wikipedia. org/wiki/Sports_drink)能量飲品是含有(法定的)興奮藥、維生素(特別是B類維生素)和礦物質(zhì)的飲料，其目的是給予使用者能量的突然發(fā)作。常見(jiàn)的成分包括咖啡因、瓜拉那(gimrana，來(lái)自 瓜拉那植物的咖啡因)、?；撬?、多種形式的人參、麥芽糖糊精、肌醇、肉毒堿、肌酸、葡糖醛 酸內(nèi)酯和銀杏。一些可含有高水平的糖或葡萄糖。許多這類飲料是經(jīng)過(guò)調(diào)味和/或著色的 (來(lái)源:http://en. wikipedia. org/wiki/Energy_drink)軟飲是不含有酒精的飲品，與含有酒精的硬飲相對(duì)。通常，該術(shù)語(yǔ)僅用于冷飲料。 熱巧克力、茶和咖啡不被認(rèn)為是軟飲。該術(shù)語(yǔ)最初專門表示充二氧化碳的飲品，目前仍以這 禾中方式廣泛使用(http://en. wikipedia. org/wiki/Soft_drink)。本文中使用的氨基酸的單字母和三字母代碼是本領(lǐng)域普遍已知的，并且可在 Sambrook，等，(Molecular Cloning :A Laboratory Manual,2nd, ed. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY，1989)中 找到。內(nèi)切蛋白酶在本文中被定義為以內(nèi)切方式水解多肽中肽鍵并且屬于EC 3. 4類的 酶。內(nèi)切蛋白酶以催化機(jī)制為基礎(chǔ)被分為亞-亞類。存在絲氨酸內(nèi)切蛋白酶(EC 3.4.21)、 半胱氨酸內(nèi)切蛋白酶(EC 3. 4. 22)、天冬氨酸內(nèi)切蛋白酶(EC 3. 4. 23)、金屬內(nèi)切蛋白酶 (EC 3.4.24)和蘇氨酸內(nèi)切蛋白酶(EC3.4.25)的亞-亞類。外切蛋白酶在本文中被定義為 水解與末端α-氨基相鄰的肽鍵的酶(“氨肽酶”)或末端羧基和次末端氨基酸之間肽鍵的 酶(“羧肽酶”)。通常，根據(jù)本發(fā)明的組合物具有無(wú)刺激性(bland)或中性的口味和改善的在酸性 條件下的溶解度，并且可以被用作其它飲料(例如運(yùn)動(dòng)飲品或軟飲或健康飲品或發(fā)酵產(chǎn) 物)的基礎(chǔ)。術(shù)語(yǔ)本發(fā)明組合物或產(chǎn)物的無(wú)刺激性口味表示水樣品中3wt%蛋白質(zhì)的苦味 水平，與溶于蒸餾水中15mg/升硫酸奎寧的水平相似或更低，所述口味是在14°C下品嘗的。實(shí)現(xiàn)期望的水解程度所需的酶量取決于使用的酶。然而，以下述方式優(yōu)化酶劑量 和溫育條件，所述方式使得在典型地6到20個(gè)小時(shí)的溫育期后大部分酪蛋白級(jí)分溶于反應(yīng) 的水相中。大部分表示在PH 4下，酪蛋白基本中存在的少于20%，優(yōu)選地少于10%，更優(yōu) 選地少于5%的蛋白質(zhì)在2000g離心10分鐘后能夠被沉淀。可以在水解后使用的酶失活步驟可以是熱處理，其包括在至少85°C的溫度下加熱 至少10分鐘。如果使用更高的溫度或更極端的pH值，則更短的時(shí)期是可行的。這類熱處 理優(yōu)選地在酸性pH值、優(yōu)選地在3和7之間的pH值下進(jìn)行。酶失活處理可以對(duì)兩種級(jí)分 單獨(dú)地進(jìn)行，或者可以在將所述級(jí)分混合形成本發(fā)明的組合物之后進(jìn)行。任選地，為了從最終產(chǎn)物中去除未溶的材料，優(yōu)選傾析或在例如2000_4000g下低 速離心，這能夠以工業(yè)規(guī)模進(jìn)行。任選地，可以使用超濾器、微濾器、硅藻土、玻璃纖維濾器 或使用錯(cuò)流過(guò)濾來(lái)過(guò)濾每種水解產(chǎn)物或兩種水解產(chǎn)物的混合物?？梢酝ㄟ^(guò)染料-明膠測(cè)試 驗(yàn)證酶的完全失活。任選地，可以用失活的木炭或用納米過(guò)濾、離子交換或電透析來(lái)處理經(jīng)過(guò)濾的最 終水解產(chǎn)物，以去除過(guò)剩的鹽?？梢詫⒔?jīng)過(guò)濾的水解產(chǎn)物巴氏消毒或滅菌，需要時(shí)通過(guò)干燥 技術(shù)(例如政法、納米過(guò)濾、噴霧干燥、流化床干燥或其組合)進(jìn)一步濃縮。優(yōu)選地，獲得的 產(chǎn)物是顆粒形式。可以原樣或優(yōu)選地在離心后，將含有經(jīng)水解的酪蛋白的級(jí)分濃縮并干燥。經(jīng)干燥 的產(chǎn)物可以再溶解于含經(jīng)水解的乳清蛋白的級(jí)分中，以獲得期望的蛋白質(zhì)濃度和蛋白質(zhì)比例，然后在需要時(shí)離心或過(guò)濾并巴氏消毒或滅菌，獲得根據(jù)本發(fā)明的產(chǎn)物。顯然，可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行額外的酶處理(例如乳糖酶)，或者可用不同類型的起始培 養(yǎng)物發(fā)酵，或者可與所有種類的成分例如油、脂肪、乳化劑、碳水化合物、水果濃縮物、調(diào)味 料、著色劑、酒精、二氧化碳、增稠劑、酸化劑、抗氧化劑、草藥或草藥提取物、促進(jìn)健康的化 合物例如維生素或原維生素或生物活性劑或含色氨酸的肽或氨基酸合并，配制符合市場(chǎng)需 要的產(chǎn)物。水解程度使用快速 OPA 測(cè)試(Nielsen, P. M. ；Petersen, D. ；Dambmann, C. Improved method for determining food protein degree of hydrolysis. Journal of Food Science 2001, 66,642-646)，監(jiān)測(cè)用多種水解混合物溫育期間獲得的水解程度(DH)。水解程度是通過(guò)酶促 水解反應(yīng)使肽鍵斷裂的程度。
權(quán)利要求
組合物，其包含 肽，所述肽是IPP和/或VPP；和 至少一種能夠從天然來(lái)源中提取或純化的化合物，所述化合物優(yōu)選地選自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜蘆醇、EGCG、維生素D、Pufa、GABA、番茄紅素、山楂、羥基酪醇組成的組，或優(yōu)選地根據(jù)葡萄籽提取物或分離物中存在的多酚的抗氧化作用而選擇。
2.包含權(quán)利要求1或2的組合物的食物、飼料、營(yíng)養(yǎng)藥物或飲食補(bǔ)充物。
3.權(quán)利要求1的組合物，其用作營(yíng)養(yǎng)藥物，優(yōu)選地用作藥物。
4.生產(chǎn)根據(jù)權(quán)利要求1到3中任一項(xiàng)的組合物的方法，所述方法將是IPP和/或VPP 的肽和至少一種能夠從天然來(lái)源中提取或純化的化合物集合在一起來(lái)實(shí)現(xiàn)，所述化合物優(yōu) 選地選自由CoQIO、葡萄籽提取物、白藜蘆醇、EGCG、維生素D、Pufa, GABA、番茄紅素、山楂、 羥基酪醇組成的組，或優(yōu)選地根據(jù)葡萄籽提取物或分離物中存在的多酚的抗氧化作用而選 擇。
5.是IPP和/或VPP的肽和至少一種能夠從天然來(lái)源中提取或純化的化合物在食物、 飼料、營(yíng)養(yǎng)藥物或飲食補(bǔ)充物中的用途或用于制備食物、飼料、營(yíng)養(yǎng)藥物或飲食補(bǔ)充物的用 途，所述化合物優(yōu)選地選自由CoQIO、葡萄籽提取物、白藜蘆醇、EGCG、維生素D、Pufa、GABA、 番茄紅素、山楂、羥基酪醇組成的組，或優(yōu)選地根據(jù)葡萄籽提取物或分離物中存在的多酚的 抗氧化作用而選擇。
6.權(quán)利要求5的用途，其中含有所述肽和能夠從天然來(lái)源提取或純化的化合物的食 物、飼料、營(yíng)養(yǎng)藥物或飲食補(bǔ)充物用于ACE抑制效應(yīng)或用于降血壓。
7.權(quán)利要求5到6中任一項(xiàng)的用途，其中所述肽IPP和/或VPP和能夠從天然來(lái)源提 取或純化的化合物一起對(duì)降血壓具有協(xié)同效應(yīng)。
8.治療需要降血壓效應(yīng)的人的方法，所述方法包括對(duì)所述人施用根據(jù)權(quán)利要求1到3 中任一項(xiàng)的組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種組合物，其包含是IPP和/或VPP的肽；和至少一種能夠從天然來(lái)源提取或純化的化合物，所述化合物優(yōu)選地選自由CoQ10、葡萄籽提取物、白藜蘆醇、EGCG、維生素D、Pufa、GABA、番茄紅素、山楂、羥基酪醇組成的組，或優(yōu)選地根據(jù)葡萄籽提取物或分離物中存在的多酚的抗氧化作用而選擇。
文檔編號(hào)A61K31/05GK101909645SQ200880124732
公開(kāi)日2010年12月8日 申請(qǐng)日期2008年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月14日
發(fā)明者盧卡斯·希瑞爾·杰勒德·海丹·范德, 瓊?cè)鹚埂た藙诳?申請(qǐng)人:帝斯曼知識(shí)產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司