專利名稱：采用優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種安絡(luò)痛菌粉的生產(chǎn)方法，具體的說(shuō)是涉及一種用固體培養(yǎng)基生產(chǎn) 安絡(luò)痛菌粉的方法。
背景技術(shù)：
安絡(luò)痛具有通經(jīng)活絡(luò)和活血止痛的作用，用于治療坐骨神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、風(fēng)濕 關(guān)節(jié)痛等疾病，其化學(xué)成分有甘露醇、氨基酸、對(duì)羥基肉桂酸、麥角留醇。近年來(lái)的研究表明 安絡(luò)小皮傘菌藥用和保健價(jià)值都很高，是對(duì)人體安全、無(wú)毒副作用的鎮(zhèn)痛和抗風(fēng)濕藥物。安 絡(luò)痛粉是生產(chǎn)安絡(luò)痛的主要成分，安絡(luò)痛是采用白磨科皮傘屬安絡(luò)小皮傘菌經(jīng)菌種培養(yǎng)， 再經(jīng)固體培養(yǎng)基培養(yǎng)干燥、提取、混合所得。目前所用固體培養(yǎng)基的組分是用麥麩、瓊脂、蔗 糖、稻谷殼和水。該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，菌絲收得率低，因此生產(chǎn)時(shí)間長(zhǎng)，制造成本高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于克服上述不足提供一種采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的 方法，該方法培養(yǎng)時(shí)間短、菌絲收得率高、生產(chǎn)時(shí)間短，節(jié)約了生產(chǎn)成本。本發(fā)明的技術(shù)方案是一種采用優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，由以下步驟制備而成①.滅菌采用固體培養(yǎng)基，將固體培養(yǎng)基裝袋或裝入培養(yǎng)瓶，經(jīng)118°C _125°C滅 菌2-4h，所述固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩50-80份，稻谷殼20-30份，口服 葡萄糖5-20份，磷酸二氫鉀0. 05-0. 2份，硫酸鎂0. 025-0. 1份，加水至100份；②.接種培養(yǎng)常溫接種，接白蘑科安絡(luò)小皮傘菌菌種；③.培養(yǎng)23°C -27°C培養(yǎng)1. 5-2個(gè)月，55°C _65°C干燥12_24h得含水量3-5%的 安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取分兩次加入共6倍物料重量的95%乙醇，分兩次提取，第一次加4倍量 的乙醇，第一次煮沸1. 5-2. 5h，第二次加2倍量的乙醇，第二次煮沸l(wèi)_2h ；⑤.濃縮合并提取液，濃縮成含水20-30%的稠膏，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及 其培養(yǎng)基乙醇提取物；⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng) 基粉混合均勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物(按干燥品計(jì) 算)安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉=0.8-1. 2 0.8-1.2。上述采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，所述步驟①中固體培養(yǎng)基由以下重 量份的組分組成麥麩60份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂 0. 05份，加水至100份。上述采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，所述步驟①中固體培養(yǎng)基由以下重 量份的組分組成麥麩65份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂 0. 05份，加水至100份。
上述采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，所述步驟①中固體培養(yǎng)基由以下重 量份的組分組成麥麩75份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂 0. 05份，加水至100份。上述采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，所述步驟③25°C培養(yǎng)1. 8個(gè)月；步 驟④60°C干燥18h至含水量25%，加入6倍物料重量的95份乙醇，分兩次提取，第一次加 4倍量的乙醇，第一次煮沸2h，第二次加2倍量的乙醇，第二次煮沸1. 5h。在安絡(luò)小皮傘菌粉的生產(chǎn)過(guò)程中人們通常用的固體培養(yǎng)基是麥麩、瓊脂、蔗糖、稻 谷殼和水，從安絡(luò)小皮傘菌粉問(wèn)世以來(lái)，人們都認(rèn)為用這種固體培養(yǎng)基生產(chǎn)是最好的方法， 在這個(gè)領(lǐng)域內(nèi)人們的思維已經(jīng)固定在用麥麩、瓊脂、蔗糖、稻谷殼和水作為固體培養(yǎng)基原 料，而且認(rèn)為用這種固體培養(yǎng)基效果最好。本發(fā)明克服了本領(lǐng)域的這種技術(shù)偏見(jiàn)，在固體培 養(yǎng)基中加入了磷酸二氫鉀、硫酸鎂無(wú)機(jī)鹽和微量元素，這些無(wú)機(jī)鹽和微量元素在小皮傘菌 在生長(zhǎng)、繁殖的過(guò)程中以作為生理活性物質(zhì)的組成或生理活性作用的調(diào)節(jié)物。這些物質(zhì)在 低濃度時(shí)對(duì)小皮傘菌生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。磷磷在菌體生長(zhǎng)、繁殖和代謝活動(dòng)中起著極其重要 的作用。一方面磷是構(gòu)成核酸、磷脂、許多輔酶或輔基以及高能磷酸化合物的重要原料，另 一方面磷在代謝調(diào)節(jié)方面也起著很重要的作用。磷能促進(jìn)糖代謝的進(jìn)行，促進(jìn)小皮傘菌的 生長(zhǎng)。硫硫是菌體細(xì)胞蛋白質(zhì)的組成部分，是參與合成含硫氨基酸的元素，一些酶的活性 基，如輔酶A、生物素輔基，在生理作用上它是僅次于磷的一種重要元素，微生物從含硫無(wú)機(jī) 鹽或有機(jī)硫化物中得到硫，以硫酸鎂的形式人為提供硫元素。鉀鉀不參與生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)物 質(zhì)的組成，但它是細(xì)胞中重要的陽(yáng)離子之一，它是許多酶的激活劑，還與原生質(zhì)體的特性和 細(xì)胞膜的通透性有關(guān)。各種無(wú)機(jī)鉀鹽，尤其是磷酸鉀鹽可作為鉀源。這些物質(zhì)對(duì)小皮傘菌 生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，使得培養(yǎng)時(shí)間短，菌絲收得率高，從而縮短了生產(chǎn)時(shí)間，本發(fā)明固體培養(yǎng) 基各組分原料便宜、易得，使得成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。下表是安絡(luò)小皮傘菌傳統(tǒng)處方和本發(fā)明處方的組合考察 上表中處方5不在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)，處方6是傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)基，處方1-4 是本發(fā)明所用的固體培養(yǎng)基，從表中可以看出用本發(fā)明固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)間短，菌絲收得 率高，從而縮短了生產(chǎn)時(shí)間。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅菌2h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)23°C培養(yǎng)45天，55°C干 燥12h得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次提 取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1. 5h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸Ih ；⑤.濃 縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； ⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉混合均 勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng) 基粉=0.8 1，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計(jì)算。實(shí)施例2 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼
521kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg，硫酸鎂0. 03kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例1制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例3 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg，硫酸鎂0. 04kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例4 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. Ikg,硫酸鎂0. 05kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅菌 2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例5 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例6 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例7 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量3. 5 %的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例8 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例9 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. Ikg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅菌 2h ;步驟 231培養(yǎng)45天，551干燥1211得含水量4.5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實(shí)施例1。
實(shí)施例10 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C 滅菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例11 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實(shí)施例1。實(shí)施例12 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅菌2. 5h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)24°C培養(yǎng)50天，58°C 干燥14h得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次 提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1. 8h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 3h ； ⑤.濃縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉 混合均勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡(luò)小皮傘菌及 其培養(yǎng)基粉=1 1，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計(jì)算。實(shí)施例13 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg，硫酸鎂0. 03kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。實(shí)施例14 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg，硫酸鎂0. 04kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。實(shí)施例15 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。實(shí)施例16 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。
實(shí)施例17 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。實(shí)施例18 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。實(shí)施例19 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C 滅菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。實(shí)施例20 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施 例12。實(shí)施例21 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。實(shí)施例22 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C 滅菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例12制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例12。實(shí)施例23 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅菌2.8h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)25°C培養(yǎng)51天，59°C 干燥16h得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次 提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1. 9h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 4h ； ⑤.濃縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉 混合均勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡(luò)小皮傘菌及 其培養(yǎng)基粉=1.2 1，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計(jì)算。
實(shí)施例24 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg,硫酸鎂0. 03kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例25 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg,硫酸鎂0. 04kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例26 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例27 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例28 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0.05kg，加水至100 kg，裝袋，經(jīng)120 °C 滅菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例29 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0.05kg，加水至100 kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例30 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C 滅菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例31 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例32 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例33 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C 滅菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例23制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27 %，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例23。實(shí)施例34 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅菌3h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)25°C培養(yǎng)52天，60°C干 燥18h得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次提 取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 5h ；⑤.濃 縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； ⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉混合均 勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng) 基粉=1.2 0.8，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計(jì)算。實(shí)施例35 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg，硫酸鎂0. 03kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例36 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg，硫酸鎂0. 04kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例37 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例38 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121 °C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例39 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121 °C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例40 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121 °C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例41 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C 滅菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例42 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例43 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C 滅菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例44 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C 滅菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例34制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例34。實(shí)施例45 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅菌3. 5h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)26°C培養(yǎng)54天，62°C 干燥20h得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次 提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2. 2h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 7h ； ⑤.濃縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉 混合均勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉=0.8 1.2，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計(jì)算。實(shí)施例46 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg,硫酸鎂0. 03kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例47 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg,硫酸鎂0. 04kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例48 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例49 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例50 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例51 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30 %，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例52 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C 滅菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例53 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例54 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例55 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C 滅菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例45制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例45。實(shí)施例56 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅菌3.8h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)27°C培養(yǎng)55天，64°C 干燥22h得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次 提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2. 4h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 9h ； ⑤.濃縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉 混合均勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡(luò)小皮傘菌及 其培養(yǎng)基粉=0.8 1.2，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計(jì)算。實(shí)施例57 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg,硫酸鎂0. 03kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例58 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg,硫酸鎂0. 04kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例59 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例60 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基
13粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例61 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例62 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例63 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C 滅菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例64 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例65 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例66 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C 滅菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例56制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例56。實(shí)施例67 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅菌4h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)27°C培養(yǎng)60天，65°C干 燥24h得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次提 取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2. 5h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸2h ；⑤.濃 縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； ⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉混合均勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng) 基粉=1 1，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計(jì)算。實(shí)施例68 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg,硫酸鎂0. 03kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例69 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg,硫酸鎂0. 04kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例70 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例71 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25 %，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例72 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量3%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例73 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量3. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例74 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C 滅菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量4%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例75 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅
15菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例76 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C 滅菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量4. 5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例67。實(shí)施例77 本實(shí)施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C 滅菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時(shí)間同實(shí)施例67制得含水量5%的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27 %，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實(shí)施例67。上述實(shí)施例中的各原料在市場(chǎng)上容易買到。本發(fā)明還可以將固體培養(yǎng)基裝瓶滅菌，都可以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的。
1權(quán)利要求
一種采用優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，由以下步驟制備而成①.滅菌采用固體培養(yǎng)基，將固體培養(yǎng)基裝袋或裝入培養(yǎng)瓶，經(jīng)118℃-125℃滅菌2-4h，所述固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩50-80份，稻谷殼20-30份，口服葡萄糖5-20份，磷酸二氫鉀0.05-0.2份，硫酸鎂0.025-0.1份，加水至100份；②.接種培養(yǎng)常溫接種，接白蘑科安絡(luò)小皮傘菌種；③.培養(yǎng)23℃-27℃培養(yǎng)1.5-2個(gè)月，55℃-65℃干燥12-24h得含水量3-5％的安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95％的乙醇，分兩次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1.5-2.5h，第二次加2倍物料重量的乙醇，煮沸1-2h；⑤.濃縮合并提取液，濃縮成含水20-30％的稠膏，回收乙醇，得安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物；⑥.成粉加入安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉混合均勻，即得安絡(luò)痛菌粉，其中安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物∶安絡(luò)小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉＝0.8-1.2∶0.8-1.2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，其特征是所述步 驟①中固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩60份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份， 磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂0. 05份，加水至100份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，其特征是所述步 驟①中固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩65份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份， 磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂0. 05份，加水至100份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，其特征是所述步 驟①中固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩75份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份， 磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂0. 05份，加水至100份。
5.根據(jù)權(quán)利要求2、3或4中任一項(xiàng)所述的采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，其 特征是所述步驟③25°C培養(yǎng)1. 8個(gè)月；步驟④60°C干燥18h至含水量25%，加入6倍物 料重量的95份乙醇，分兩次提取，第一次加4倍量的乙醇，第一次煮沸2h，第二次加2倍量 的乙醇，第二次煮沸1.5h。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域，為菌種培養(yǎng)提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，解決了培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，菌絲收得率低問(wèn)題。一種采用優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡(luò)痛菌粉的方法，由固體培養(yǎng)基滅菌、接種培養(yǎng)、提取、濃縮、成粉幾個(gè)步驟，其中所述固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩50-80份，稻谷殼20-30份，口服葡萄糖5-20份，磷酸二氫鉀0.05-0.2份，硫酸鎂0.025-0.1份，加水至100份。各種無(wú)機(jī)鉀鹽，尤其是磷酸鉀鹽可作為鉀源。這些物質(zhì)對(duì)小皮傘菌生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，使得培養(yǎng)時(shí)間短，菌絲收得率高，從而縮短了生產(chǎn)時(shí)間，本發(fā)明固體培養(yǎng)基各組分原料便宜、易得，使得成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61P25/02GK101879189SQ20091006477
公開(kāi)日2010年11月10日 申請(qǐng)日期2009年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月4日
發(fā)明者張秀芬 申請(qǐng)人:漯河市方匯藥業(yè)有限公司