專利名稱：一種類脂質(zhì)體及其制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物制劑及制備方法技術(shù)領(lǐng)域，進(jìn)一步將是提供一種類脂質(zhì)體及其制 劑的制備方法，同時(shí)還公開了銀杏葉提取物類脂質(zhì)體及其制備方法。
背景技術(shù)：
類脂質(zhì)體是在脂質(zhì)體基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型微粒給藥系統(tǒng)。它是以非離子表 面活性劑代替兩性表面活性劑磷脂為主要膜材所構(gòu)成的一種脂質(zhì)雙分子層微型囊泡， 可將藥物包封于雙分子層中制成單室或多室超微型載體給藥系統(tǒng)。類脂質(zhì)體具有滲透 活性而且穩(wěn)定，是一種很有發(fā)展前途的新型藥物載體，正日益引起人們的關(guān)注。
類脂質(zhì)體具有類似脂質(zhì)體封閉的雙層結(jié)構(gòu)，但不易泄漏，粒徑較小的的類脂質(zhì)體 (〈150nm)，不容易被巨噬細(xì)胞吞噬，可以延長在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，具有優(yōu)良的組織 通透性，尤其可在有滲漏性血管組織(腫瘤、炎癥區(qū)或梗死區(qū)等)聚集；類脂質(zhì)體不 易被腎排泄，粒徑大的類脂質(zhì)體也可在肝、脾濃集，而有被動(dòng)靶向作用。此外由于類 脂質(zhì)體具有雙分子層結(jié)構(gòu)，既可以包封水溶性藥物，又可以包封于脂溶性藥物。
類脂質(zhì)體作為新的靶向藥物載體，目前僅到達(dá)臨床階段，但現(xiàn)有的研究已經(jīng)證實(shí) 了類脂質(zhì)體作為藥物傳遞系統(tǒng)具有很大的優(yōu)勢。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，靜脈注射包封藥物的類 脂質(zhì)體在肝中的藥物濃度最高。同時(shí)，可以通過在類脂質(zhì)體表面進(jìn)行一定的修飾，改 變藥物在體內(nèi)的分布狀態(tài)。
載藥類脂質(zhì)體由于在制備中摻入非離子表面活性劑，而非離子表面活性劑的聚氧 乙烯基可在其表面生成立體位阻屏障，在血液中不易被血漿蛋白識別、攝取，從而在 血液中的駐留時(shí)間較普通脂質(zhì)體有顯著延長。
本發(fā)明所制備的類脂質(zhì)體及其制劑，能協(xié)助藥物通過血腦屏障，降低被肝組織巨 噬細(xì)胞的吞噬，延長在體內(nèi)循環(huán)組織的停留時(shí)間，減輕中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者的痛苦， 降低其在治療、應(yīng)用中出現(xiàn)的全身性副作用，使新型制劑的技術(shù)得以應(yīng)用，同時(shí)使對 中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病有效的中藥有效部位的藥物又有新的給藥途徑，擴(kuò)大中藥制劑應(yīng)用 的范圍，創(chuàng)造更大的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種類脂質(zhì)體及其制劑的制備方法，以延長藥物在體內(nèi)的循 環(huán)時(shí)間，從而增加藥物向腦部轉(zhuǎn)運(yùn)的能力。本發(fā)明將類脂質(zhì)體制成粉末以提高載藥類脂質(zhì)體的穩(wěn)定性及服用的方便性。 本發(fā)明的目的通過以下方案予以實(shí)現(xiàn)
本發(fā)明的類脂質(zhì)體由被載藥物與載體按(1 68) : 100質(zhì)量比構(gòu)成，所述的載體
為非離子表面活性劑和膽固醇組成，其摩爾比值為l: (0.5 1.5)。
本發(fā)明所述的被載藥類選自苷類、生物堿類、肽類、黃酮類、內(nèi)酯類化合物任
意一種或多種混合。
本發(fā)明所述的非離子表面活性劑選自聚甘油烷烴醚、糖基二烴基醚、冠醚、酯 類表面活性劑、聚氧乙烯基醚、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(普朗尼克)、卞澤、吐溫、 司盤、單(雙)烷基聚丙三醇醚、膽甾烯三氧乙烯醚、甘油單月桂酸酯中的一種或多種 混合。
在所述的類脂質(zhì)體中，還可填加有二鯨蠟磷酸酯作穩(wěn)定劑，與被載藥物的質(zhì)量配
比為1 : (0 1.5)。
在所述的類脂質(zhì)體中，非離子表面活性劑的HLB值為2 18。 本發(fā)明類脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟
按上述比例取非離子表面活性劑、膽固醇，加入有機(jī)溶劑使其溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形 成薄膜；將干燥的薄膜溶于乙醚中，再加入被載藥物溶液和磷酸鹽緩沖液，超聲處理， 將超聲后的溶液中再加入磷酸鹽緩沖液，水合，置于3CTC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜， 制成類脂質(zhì)體混懸液；將類脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)，得粒徑為0.05 2pm的類 脂質(zhì)體。
本發(fā)明所述的有機(jī)溶劑選自甲醇、二氯甲烷、乙醇、氯仿、乙醚中的一種或多種 混合。
本發(fā)明類脂質(zhì)體粉末的制備方法如下類脂質(zhì)體混懸液中加入凍干保護(hù)劑，其比 例為10: (0.6 l)mL/g，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，得類脂質(zhì)體粉末；
也可按照類脂質(zhì)體混懸液與載體質(zhì)量比為1 : (1 6);出風(fēng)溫度8(TC 12(TC; 進(jìn)風(fēng)溫度120°C 210°C;進(jìn)料流量25 40mL . min—',噴霧干燥，得類脂質(zhì)體粉末。
本發(fā)明所述的高壓均質(zhì)機(jī)壓力為500bar 1000bar。
本發(fā)明的積極效果在于是采用改良薄膜分散-勻化法、冷凍干燥法/噴霧干燥法 制備類脂質(zhì)體。該發(fā)明類脂質(zhì)體具有避免藥物被肝組織網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬，延長藥 物在體內(nèi)的滯留時(shí)間，協(xié)助藥物通過血腦屏障的能力。本發(fā)明類脂質(zhì)體具有穩(wěn)定性好， 工藝簡單，適合大工業(yè)生產(chǎn)的特點(diǎn)。


圖1為銀杏葉類脂質(zhì)體粒徑分布圖； 圖2為銀杏葉類脂質(zhì)體顯微鏡圖3為銀杏葉類脂質(zhì)體在PBS (pH6.8)中的累計(jì)釋放率。
圖4為石杉堿甲脂質(zhì)體粒徑分布圖5為石杉堿甲脂質(zhì)體在PBS (pH6.8)中的累計(jì)釋放率。 圖6為鼠婦鎮(zhèn)痛肽脂質(zhì)體粒徑分布圖； 圖7為鼠婦鎮(zhèn)痛肽脂質(zhì)體在PBS (pH6.8)中的累計(jì)釋放率。
具體實(shí)施例方式
為了便于理解本發(fā)明，特例舉以下實(shí)施例。其作用被理解為是對本發(fā)明的闡釋而 非對本發(fā)明的任何形式的限制。 實(shí)施例1
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 1. 0284g，司盤80: 0. 6140g, 膽固醇0.8576g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物 0.3750g)和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷 酸鹽緩沖液，水合溫度6(TC,置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體 混懸液；將類脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。銀杏葉類脂質(zhì)體粒徑分布圖見圖1;銀 杏葉類脂質(zhì)體顯微鏡圖見圖2。
實(shí)施例2
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(乙醚40mL，乙醇40mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形 成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0.050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。實(shí)施例3
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5631g，司盤80: 0. 2737g， 膽固醇0.4132g，加入混合有機(jī)溶劑(乙醇20mL，氯仿60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形 成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0.050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例4
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑，(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物 0. 1125g)和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷 酸鹽緩沖液，水合溫度60'C，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體 混懸液；將類脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例5
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 4736g，司盤80: 0. 2827g， 膽固醇0.4937g,加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL，甲醇60mU使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40niL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度60'C，置于30'C恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h,即得。
實(shí)施例6
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度80'C，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例7
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 4671g，司盤80: 0. 3390g， 膽固醇0.4439g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-80'C預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例8
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 3780g，司盤80: 0. 3997g， 膽固醇0.4723g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值UL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例9
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇；0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(氯仿80mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成薄膜。將 干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0.050g)和100mL磷 酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液，水合溫度 60°C,置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 0.6加入凍干保護(hù)劑甘 露醇，于-80'C預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。 實(shí)施例10
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 0. 8加入凍干保護(hù)劑甘 露醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例11
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度60。C，置于30。C恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑山梨 醇，于-80。C預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例12
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g,加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 0.6加入凍干保護(hù)劑蔗 糖，于-80。C預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。實(shí)施例13
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 0.6加入凍干保護(hù)劑氯 化鈉，于-80'C預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例14
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3CTC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 0.6加入凍干保護(hù)劑海 藻糖，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例15
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3CTC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與甘露醇質(zhì)量比為1 : 1;出風(fēng)溫度9CTC;進(jìn)風(fēng) 溫度150。C;進(jìn)料流量30mL . min—''，噴霧干燥，即得。
實(shí)施例16
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC,置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與甘露醇質(zhì)量比為1 : 6;出風(fēng)溫度9(TC;進(jìn)風(fēng) 溫度150。C;進(jìn)料流量30mL . mirf'，噴霧干燥，即得。
實(shí)施例17
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3CTC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與乳糖質(zhì)量比為1 : 1;出風(fēng)溫度9(TC;進(jìn)風(fēng)溫 度15(TC;進(jìn)料流量30mL . min—''，噴霧干燥，即得。
實(shí)施例18
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL，甲醇60raL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與葡萄糖質(zhì)量比為1 : 1;出風(fēng)溫度9(TC;進(jìn)風(fēng) 溫度150。C;進(jìn)料流量30mL . min—1'，噴霧干燥，即得。
實(shí)施例19
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與甘氨酸質(zhì)量比為1 : 1;出風(fēng)溫度9(TC;進(jìn)風(fēng) 溫度150。C;進(jìn)料流量30mL . min—",噴霧干燥，即得。
實(shí)施例20
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80: 0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與賴氨酸質(zhì)量比為1 : 1;出風(fēng)溫度90'C;進(jìn)風(fēng) 溫度15(TC;進(jìn)料流量30mL min—、噴霧干燥，即得。
實(shí)施例21
以銀杏葉提取物為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0. 5142g，司盤80:0. 3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0. 050g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與高分子物質(zhì)質(zhì)量比為1 : 1;出風(fēng)溫度9(TC; 進(jìn)風(fēng)溫度15(TC;進(jìn)料流量30mL . rain—1',噴霧干燥，即得。
實(shí)施例22
以石杉堿甲為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0.5142g，司盤80: 0.3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0.650g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲l(kin，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與乳糖質(zhì)量比為1 : 4;出風(fēng)溫度9(TC;進(jìn)風(fēng)溫 度15(TC;進(jìn)料流量30mL mirf1',噴霧干燥，即得。粒徑分布圖見圖1;實(shí)施例23
以石杉堿甲為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0.5142g,司盤80: 0.3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL,甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0.650g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與乳糖質(zhì)量比為1 : 6;出風(fēng)溫度9(TC;進(jìn)風(fēng)溫 度150。C;進(jìn)料流量30mL . mirf'，噴霧干燥，即得。
實(shí)施例24
以石杉堿甲為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 1.0284g，司盤80: 0.6140g， 膽固醇0.8576g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0.650g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與乳糖質(zhì)量比為1 : 6;出風(fēng)溫度9(TC;進(jìn)風(fēng)溫 度150。C;進(jìn)料流量30mL . min—' ，噴霧干燥，即得。
實(shí)施例25
以石杉堿甲為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0.5142g，司盤80: 0.3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，甲醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0.650g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6(TC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
噴霧干燥時(shí)按照類脂質(zhì)體混懸液與乳糖質(zhì)量比為1 : 6;出風(fēng)溫度9(TC;進(jìn)風(fēng)溫 度150。C;進(jìn)料流量30mL . mirr''，噴霧干燥，即得。
上述的石杉堿甲類脂質(zhì)體粒徑分布圖見圖4;
石杉堿甲脂類質(zhì)體在PBS (pH6.8)中的累計(jì)釋放率見圖5。
實(shí)施例26以鼠婦鎮(zhèn)痛肽為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: L0284g，司盤80: 0.6140g， 膽固醇0.8576g,加入有機(jī)溶劑(二氯甲烷20mL，乙醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成 薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含銀杏葉提取物0.5875g)和 lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度6CTC，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-80'C預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例27
以鼠婦鎮(zhèn)痛肽為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0.5142g，司盤80: 0.3070g， 膽固醇0.4288g，加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL，乙醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含鼠婦鎮(zhèn)痛肽0. 5875g) 和100mL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度60。C，置于3(TC恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 1加入凍干保護(hù)劑甘露 醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
實(shí)施例28
以鼠婦鎮(zhèn)痛肽為藥物，制備成類脂質(zhì)體。取吐溫80: 0.5142g，司盤80: 0.3070g， 膽固醇0.4288g,加入混合有機(jī)溶劑(二氯甲垸20mL,乙醇60mL)使溶解，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)形成薄膜。將干燥的薄膜溶乙醚30mL中，加入藥物的溶液(含鼠婦鎮(zhèn)痛肽0. 5875g) 和lOOmL磷酸鹽緩沖液中，超聲10min，將超聲后的溶液中再加入40mL磷酸鹽緩沖液， 水合溫度60。C，置于30。C恒溫水浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類 脂質(zhì)體混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)。
按照類脂質(zhì)體混懸液與凍干保護(hù)劑比值(mL : g)為10 : 0.8加入凍干保護(hù)劑甘 露醇，于-8(TC預(yù)凍24h，冷凍干燥24h，即得。
上述的鼠婦鎮(zhèn)痛肽類脂質(zhì)體粒徑分布圖見圖6;
鼠婦鎮(zhèn)痛肽脂類質(zhì)體在PBS (p服.8)中的累計(jì)釋放率見圖7。
試驗(yàn)例
銀杏葉類脂質(zhì)體粒徑分布圖見圖1;銀杏葉類脂質(zhì)體顯微鏡圖見圖2。以下試驗(yàn)表明本發(fā)明銀杏葉提取物類脂質(zhì)體(粒徑0.05 2pm)的實(shí)施例，可以 延長銀杏總黃酮的釋放，采用透析法測定其累積釋放度。以磷酸鹽緩沖液(pH=6.8) 為釋放介質(zhì)，溫度為37士rC，轉(zhuǎn)速為75r/min。分別在10min， 20min， 30min， lh， 2h， 3h， 6h， 12h， 24h， 48h時(shí)測定銀杏總黃酮的累積釋放量。其在磷酸鹽緩沖液(p^6. 8) 中12h內(nèi)累計(jì)釋放率達(dá)到80%以上，且可持續(xù)釋放至48h (見圖3)。
體內(nèi)分布試驗(yàn)
本發(fā)明銀杏葉提取物類脂質(zhì)體與銀杏葉片進(jìn)行比較，大鼠灌胃給藥后，測定大鼠 心臟、肝、脾、腎、腦及血液中銀杏總黃酮的含量，探討口服給予本發(fā)明后大鼠體內(nèi) 的分布情況。
1. 實(shí)驗(yàn)材料
1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar雄性大鼠20只，體重200土20g，實(shí)驗(yàn)用飼料為鼠專用飼料， 所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料均購于吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號 0010428。
1.2藥品與試劑銀杏葉提取物類脂質(zhì)體，采用實(shí)例方法制備；槲皮素對照品，中國 藥品生物制品檢定所，批號10081-200406;山奈素對照品，中國藥品生物制品檢定
所，批號110861-200406;異鼠李素對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號
110860-200406;銀杏葉片(總黃酮醇苷9.6mg/片、萜類內(nèi)酯2.4mg/片)，石家莊以嶺 藥業(yè)有限公司，批號080801。
1.3儀器BS224S電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；高效液相輸液泵 (LC-10ATKP)，日本島津公司；高效液相檢測器(SPD-10AJ^)，日本島津公司；N2000 色譜工作站，浙江大學(xué)智達(dá)信息工程有限公司；DY89-I型電動(dòng)玻璃勻漿機(jī)，寧波新 芝科器研究所；Minispin型離心機(jī)，德國eppendorf公司。
2. 實(shí)驗(yàn)方法
2. 1動(dòng)物分組及給藥取體重為180 220g雄性大鼠，隨機(jī)分為二組。 一組按5. 184mg (總黃酮醇苷)*kg—'的劑量灌胃給予GbEN凍干粉末，另一組給予等劑量的市售銀杏 葉片。連續(xù)給藥3天。
2.2組織及血液樣品制備連續(xù)給藥3天后，末次給藥lh后，斷頭處死大鼠，取心、 肝、脾、肺、腎、腦，用生理鹽水沖洗干凈，用濾紙吸干，稱重；精密稱定后(其中 肝只取一部分，重量約為2g)置勻漿器中，加25y。HC12mL勻漿，將勻漿液置于50mL 圓底燒瓶中，加8mL甲醇，加熱回流30min。放冷，6000r min—1離心5min，精密吸取上清液，蒸干，加甲醇200pL使溶解；于12000r'min—離心10min，精密吸取上清 液20pL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，計(jì)算各組織中總黃酮醇苷的含量。另取大 鼠血液2mL置試管中，加肝素抗凝，加25MHC1 2mL勻槳，將勻漿液置于50mL圓底 燒瓶中，加8mL甲醇，加熱回流30min。放冷，6000r min—1離心5min，精密吸取上 清液，蒸干，加甲醇20(^L使溶解，于12000r *min—'離心10min，精密吸取20pL進(jìn) 樣，注入液相色譜儀，記錄峰面積，計(jì)算血中總黃酮醇苷的含量。結(jié)果見表l。
表l大鼠體內(nèi)各組織中總黃酮醇苷的含量(n=10)
組織及血液 GbEN組大鼠的組織分布 銀杏葉片組大鼠的組織分布
(含量昭/mL) (含量嗎/mL)
注:口服給予GbEN與市售銀杏葉片比較，承為p〈0.05，"為pO.Ol，承"為p0.001
結(jié)論從表上可以看出，與銀杏葉片相比，本發(fā)明銀杏葉提取物類脂質(zhì)體在大鼠 的肝的濃度顯著降低，在血液、心臟、肺、腎中的含量顯著升高，本發(fā)明銀杏葉提取 物類脂質(zhì)體能降低被肝組織巨噬細(xì)胞的吞噬，延長在循環(huán)組織的停留時(shí)間，增加在心
臟、肺和腎中的含量；尤其在腦部檢測到銀杏葉總黃酮醇苷，本發(fā)明銀杏葉提取物類 脂質(zhì)體能夠通過血腦屏障。
0.3288±0.0052*** 0.5139±0.0018*** 0.2657±0.0040*** 0.5496±0.0066*** 0.4797±0.0088***
0.3401±0.0047 0.8179±0.0102***
0.0982±0.0178 0.6397±0.0162 0.2309±0.0084 0.2339±0.0036 0.1013±0.0028
0.6948±0.0146
,汗捭市腎丄兇^
權(quán)利要求
1.一種類脂質(zhì)體，其特征是由被載藥物與載體按(1～68)∶100質(zhì)量比構(gòu)成，所述的載體為非離子表面活性劑和膽固醇，其摩爾比值1∶(0.5～1.5)。
2. 權(quán)利要求1所述類脂質(zhì)體，其特征在于被載藥類選自苷類、生物堿類、肽類、黃酮類、內(nèi)酯類化合物任意一種或多種混合。
3. 如權(quán)利要求1所述的類脂質(zhì)體，其特征在于非離子表面活性劑的HLB值為2 18。
4. 權(quán)利要求1所述類脂質(zhì)體，其特征在于所述的非離子表面活性劑選自聚甘油烷烴醚、糖基二烴基醚、冠醚、酯類表面活性劑、聚氧乙烯基醚、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、卞澤、吐溫、司盤、單(雙)烷基聚丙 三醇醚、膽甾烯三氧乙烯醚、甘油單月桂酸酯中的一種或多種混合。
5. 如權(quán)利要求1所述的類脂質(zhì)體，其特征在于還填加有二鯨蠟磷酸酯作穩(wěn)定劑，與被載藥物的質(zhì)量配比為1 : (0 1.5)。
6. 如權(quán)利要求1所述的類脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟取非離子表面活性劑、膽固醇，加入有機(jī)溶劑使其溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成薄膜;將干燥的薄膜溶于乙醚中，加入被載藥物溶液和磷酸鹽緩沖液中， 超聲，將超聲后的溶液中再加入磷酸鹽緩沖液，水合，置于3(TC恒溫水 浴振蕩器中振蕩過夜，制成類脂質(zhì)體混懸液；將類脂質(zhì)體混懸液通過高壓 均質(zhì)機(jī)，得類脂質(zhì)體。
7. 權(quán)利要求6所述類脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于有機(jī)溶劑選自 甲醇、二氯甲烷、乙醇、氯仿、乙醚中的一種或多種混合。
8. 權(quán)利要求6所述類脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于高壓均質(zhì)機(jī)壓力為500bar 1000bar。
9. 權(quán)利要求6所述類脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于類脂質(zhì)體混懸 液中加入凍干保護(hù)劑，其比例為10 : (0.6 1)mL g1，于-80。C預(yù)凍24h， 冷凍干燥24h，得類脂質(zhì)體粉末。
10. 權(quán)利要求6所述類脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于按照類脂質(zhì) 體混懸液與載體質(zhì)量比為1 : (1 6);出風(fēng)溫度80。C 12(TC;進(jìn)風(fēng)溫度 120°C 210°C;進(jìn)料流量25 40mL . min—i，噴霧干燥，得類脂質(zhì)體粉末。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種類脂質(zhì)體及其制劑的制備方法，是采用改良薄膜分散-勻化法、冷凍干燥法/噴霧干燥法制備類脂質(zhì)體。處方組成為藥物與載體的質(zhì)量配比為1～68∶100，非離子表面活性劑(調(diào)節(jié)HLB值2～18)與膽固醇的摩爾比值1∶0.5～1.5，以及藥物與穩(wěn)定劑(二鯨蠟磷酸酯)的質(zhì)量比值1∶0～1.5。該制備工藝包括制備空白類脂質(zhì)體、均質(zhì)化類脂質(zhì)體、制備載藥類脂質(zhì)體及其混懸液，冷凍干燥/噴霧干燥制成類脂質(zhì)體粉末。該發(fā)明類脂質(zhì)體具有避免藥物被肝組織網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬，延長藥物在體內(nèi)的滯留時(shí)間，協(xié)助藥物通過血腦屏障的能力。本發(fā)明類脂質(zhì)體具有穩(wěn)定性好，工藝簡單，適合大工業(yè)生產(chǎn)的特點(diǎn)。
文檔編號A61K9/127GK101612124SQ200910067289
公開日2009年12月30日 申請日期2009年7月15日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月15日
發(fā)明者孫黎黎, 孟慶繁, 張煒煜, 波 楊, 滕利榮, 王德利, 王貞佐, 逯家輝, 葉 金 申請人:吉林大學(xué)