一種腦靶向的塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種量子點(diǎn)脂質(zhì)體及其制備方法，具體設(shè)及一種腦祀向的塞來昔布量 子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 塞來昔布是輝瑞公司1999年上市的治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié) 炎的藥物，分子式為Cl?出4F3N3O2S，由于晶體結(jié)構(gòu)的原因，其理化性質(zhì)較差，主要表現(xiàn)在:在 水中不溶，堆密度低，易粘結(jié)，可壓性差。目前塞來昔布的上市制劑主要為塞來昔布膠囊，缺 點(diǎn)比較突出：首先，塞來昔布的低溶解度導(dǎo)致其口服制劑的生物利用度很低，所W 口服吸收 很慢;其次，塞來昔布膠囊不具備緩釋特征和示蹤特征;再者，易產(chǎn)生胃腸道不良反應(yīng)，并對 屯、血管、肝膽及腎臟都存在一定危害。因此，需要一種能夠克服塞來昔布口服制劑的缺點(diǎn)， 在增加塞來昔布生物利用度的同時(shí)兼具緩釋特征和失蹤特征的制劑將會(huì)給患者提供更好 的治療選擇。輝瑞的C0X-2抑制劑Celecoxib用于老年癡呆的治療，曾進(jìn)入S期臨床研究， 后來由于結(jié)果不理想而被終止了，它給了我們一種提示，即可W通過制劑學(xué)手段，利用載體 的優(yōu)勢，改善塞來昔布的劑型后充分發(fā)揮并發(fā)掘其治療作用。
[0003] 量子點(diǎn)，又可稱為納米晶，是一種由II-VI族或HI-V族元素組成的納米顆粒。量 子點(diǎn)的粒徑一般介于1~IOnm之間，由于電子和空穴被量子限域，連續(xù)的能帶結(jié)構(gòu)變成具有 分子特性的分立能級結(jié)構(gòu)，受激后可W發(fā)射巧光。基于量子效應(yīng)，量子點(diǎn)在太陽能電池，發(fā) 光器件，光學(xué)生物標(biāo)記等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。1997年W來，隨著量子點(diǎn)制備技術(shù)的不 斷提高，量子點(diǎn)己越來越可能應(yīng)用于生物學(xué)研究。1998年，Alivisatos和Nie兩個(gè)研究小組 分別在Science上發(fā)表有關(guān)量子點(diǎn)作為生物探針的論文，首次將量子點(diǎn)作為生物巧光標(biāo)記， 并且應(yīng)用于活細(xì)胞體系，他們解決了如何將量子點(diǎn)溶于水溶液，W及量子點(diǎn)如何通過表面 的活性基團(tuán)與生物大分子偶聯(lián)的問題，由此掀起了量子點(diǎn)的研究熱潮。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對塞來昔布現(xiàn)有制劑的缺點(diǎn)，并結(jié)合量子點(diǎn)的一系列優(yōu)點(diǎn)，本發(fā)明提供一種腦 祀向的塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液及其制備方法。脂質(zhì)體由于其具有能夠和細(xì)胞膜融 合，緩慢釋放藥物，穩(wěn)定性高等優(yōu)勢，成為本發(fā)明的優(yōu)勢載體。它可W將藥物粉末或溶液包 埋在直徑為納米級的微粒中，運(yùn)種微粒具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)入人體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng) 吞隧而激活機(jī)體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，從而提高藥物的治療指 數(shù)，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性。本發(fā)明W塞來昔布脂質(zhì)體為出發(fā)點(diǎn)，并利用量 子點(diǎn)的光學(xué)特性，研究塞來昔布脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)鼻飼后腦部的吸收分布情況，進(jìn)一步發(fā)掘 并發(fā)揮塞來昔布對阿爾茨海默癥的治療前景。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案為： 一種腦祀向的塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液，按照重量百分比的成分為：塞來昔布 0.055~0.55%，量子點(diǎn)0.^0.55%，憐脂1~3%，膽固醇0.2~1.5%，緩沖液90~98〇/〇。
[0006] 所述量子點(diǎn)為簇基化CdSeS/aiS，Aem =490~665nm。
[0007] 所述憐脂可選用天然憐脂和/或合成憐脂，所述天然憐脂選自蛋黃卵憐脂、氨化蛋 黃憐脂、蛋黃憐脂酷甘油、蛋黃憐脂酷絲氨酸、蛋黃憐脂酷肌醇、大豆卵憐脂、氨化大豆憐 月旨、大豆憐脂酷甘油、大豆憐脂酷絲氨酸、大豆憐脂酷肌醇中的一種或幾種;所述合成憐脂 選自二油酷憐脂酷膽堿、二硬脂酸憐脂酷膽堿、二棟桐酷憐脂酷膽堿、二肉豆違酷憐脂酷膽 堿、二月桂酷憐脂酷膽堿、二油釀憐脂酷甘油、二硬脂酸憐脂酷甘油、二棟桐酷憐脂酷甘油、 二肉豆違酷憐脂酷甘油、二月桂酷憐脂酷甘油中的一種或幾種，優(yōu)選為大豆卵憐脂。
[000引所述緩沖液選自pH值為6.0~6.5的憐酸鹽緩沖液、構(gòu)祿酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖 液、棚酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液中的一種或幾種，優(yōu)選為憐酸二氨鋼-憐酸氨二鋼緩沖液。
[0009] 所述塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液的制備方法，按照W下工藝步驟進(jìn)行： (1) 室溫下將量子點(diǎn)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、N-徑基班巧酷亞胺與去 離子水超聲至溶解； (2) 加入塞來昔布攬拌反應(yīng)，反應(yīng)完成后降溫至0~5° C過夜； (3) 離屯、出沉淀，將沉淀用去離子水清洗、離屯、=次后，干燥得到塞來昔布-量子點(diǎn)復(fù)合 物； (4) 將塞來昔布-量子點(diǎn)復(fù)合物、憐脂和膽固醇溶于有機(jī)溶劑中，蒸除有機(jī)溶劑，得到脂 質(zhì)膜； 巧)將緩沖液預(yù)熱至50~60°C，加入到脂質(zhì)膜中，保溫水化10~60min，得到脂質(zhì)體初乳； (6)采用薄膜超聲分散法將脂質(zhì)體初乳分散，得到塞來昔布-量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液。
[0010] 所述步驟(2)的反應(yīng)條件為:溫度35~40° C，反應(yīng)時(shí)間^化。
[0011] 所述步驟(3)的離屯、條件為:轉(zhuǎn)速13000~15000巧m，時(shí)間5~30min。
[0012] 所述步驟(3)的干燥條件為:溫度35~40°C。
[0013] 所述步驟(4)的有機(jī)溶劑選自氯仿、乙醇、甲醇、叔下醇、正下醇、異丙醇、丙酬、乙 酸、苯甲醇、正己燒中的一種或幾種，優(yōu)選為按體積比為IA~9/1的氯仿/甲醇混合溶劑。
[0014] 本發(fā)明的塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液在動(dòng)物模型試驗(yàn)中經(jīng)鼻飼給藥后具有明 顯的腦祀向性，對阿爾茨海默病有潛在的治療作用。
[0015] 本發(fā)明的有益效果如下： 1. 本發(fā)明將塞來昔布-量子點(diǎn)包裹于脂質(zhì)體內(nèi)，改善了塞來昔布的非水溶特性，并且使 塞來昔布具備緩釋特征； 2. 本發(fā)明采用量子點(diǎn)作為巧光生物標(biāo)記物，可實(shí)時(shí)監(jiān)控塞來昔布脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)鼻飼 給藥后在腦部的吸收分布情況，使塞來昔布給藥系統(tǒng)具備示蹤特征； 3. 本發(fā)明的塞來昔布-量子點(diǎn)藥物載體脂質(zhì)體具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，可在體內(nèi)降解、無毒 性和無免疫原性，而且可W提高藥物治療指數(shù)、降低藥物毒性和減少藥物副作用。
[0016] 4.本發(fā)明的塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體的腦部吸收分布結(jié)果顯示其在腦組織中廣泛 分布，藥物的吸收分布情況良好，有望開發(fā)成腦祀向的制劑，而應(yīng)用于阿爾茨海默癥的治 療。此外，本發(fā)明的研究過程也為脂質(zhì)體的給藥方式提供了新思路。
【附圖說明】
[0017] 圖1為塞來昔布的紅外分析圖譜； 圖2為本發(fā)明實(shí)施例1制備的塞來昔布量子點(diǎn)的紅外分析圖譜； 圖3為本發(fā)明實(shí)施例1制備的塞來昔布量子點(diǎn)的脂質(zhì)體混懸液在不同時(shí)間點(diǎn)的累積釋 放率對時(shí)間的變化曲線圖。
[0018] 圖4為動(dòng)物模型試驗(yàn)中本發(fā)明的塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液在大腦及各組織中 的分布情況對比圖，其中，A為小鼠大腦的嗅球、腦前部、腦中部、腦后部和小腦的系統(tǒng)劃分 圖；B為塞來昔布-量子點(diǎn)和本發(fā)明的塞來昔布-量子點(diǎn)脂質(zhì)體在A圖中各區(qū)域的分布情況對 比圖，白色箭頭指向處為巧光點(diǎn);C為塞來昔布-量子點(diǎn)和本發(fā)明的塞來昔布-量子點(diǎn)脂質(zhì)體 經(jīng)小鼠鼻飼給藥后在不同時(shí)間段在小鼠不同組織中的濃度對比圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 本發(fā)明實(shí)施采用的塞來昔布原料為市購純度在99%W上的原料藥，使用前先進(jìn)行 重結(jié)晶純化處理，待液相歸一化純度達(dá)到99.9%后再作為原料進(jìn)行塞來昔布量子點(diǎn)的脂質(zhì) 體混懸液的制備。
[0020] 本發(fā)明實(shí)施采用的量子點(diǎn)，憐脂，膽固醇均為市售醫(yī)藥級原料藥。
[0021] 本發(fā)明實(shí)施采用的緩沖液為自制產(chǎn)品，其中的緩沖鹽均為市售醫(yī)藥級原料藥。
[0022] 實(shí)施例1 一種腦祀向的塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液，按照重量百分比的成分為：塞來昔布 0.055%，簇基化CdSeS/aiS (Aem=540nm)量子點(diǎn)0.1%，蛋黃卵憐脂1%，膽固醇0.2%，構(gòu)祿酸 鋼緩沖液98.645%。
[0023] 所述腦祀向的塞來昔布量子點(diǎn)脂質(zhì)體混懸液的制備方法，按照W下工藝步驟進(jìn) 行： (1) 室溫下將簇基化CdSeS/化S^em 54化m)量子點(diǎn)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二 亞胺、N-徑基班巧酷亞胺與去離子水超聲至溶解； (2) 加入塞來昔布在溫度為35~40° C的條件下攬拌反應(yīng)化，反應(yīng)完成后降溫至0~5° C過 夜； (3) 離屯、出沉淀，將沉淀用去離子水清洗、離屯、S次后，其中離屯、條件為：轉(zhuǎn)速 1500化pm，時(shí)間IOmin，35~40° C干燥得到塞來昔布-量子點(diǎn)復(fù)合物； (4) 將塞來昔布-量子點(diǎn)復(fù)合物、蛋黃卵憐脂和膽固醇溶于氯仿/甲醇（V/V 9/1)中，減 壓蒸除有機(jī)溶劑，得到脂質(zhì)膜；