專利名稱：：無菌異種醫(yī)用生物膜及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)用輔料生物工程領域，特別是以異種動物皮替代異體人皮領域。
背景技術：
：應用異體皮作為生物輔料救治大面積燒燙傷創(chuàng)面的方法已有幾十年歷史。但治療中存在排斥及黏附性差，生物相容性低等缺點。而且市場價格昂貴。且有國際人權之爭議。另外使用時還需要多次換藥(連同異體皮一起換掉)、削切痂，再做植皮手術。這樣一來既增加患者的痛苦，又在患者自身的供皮區(qū)留下疤痕或色素沉著，也給患者帶來沉重的經濟負擔。異種或異體生物膜自19世紀70年代末在外科醫(yī)學領域已采用胎盤組織膜用于臨床燒傷深n度、m度創(chuàng)面覆蓋，或作為夕卜科植皮手術試用，但是效果不佳。另外，河北省邢臺市在邯鄲醫(yī)院支持下用羊胎膜作為燒傷創(chuàng)面覆蓋，或作為外科植皮手術用，效果也不理想。其主要原因是a、醫(yī)用生物膜的選材必須適應人體皮膚組織的主要結構，當遭遇燒傷或燙傷時，首先是帶有膠原蛋白的表皮組織細胞損傷，還有部分真皮層細胞也有損傷，需要及時搶救使之恢復活性；這就需要采用帶有表皮膠原蛋白的生物膜及時覆蓋受傷創(chuàng)面，加以適當的抗生素，防止創(chuàng)面感染，才能挽救，激活患者自身的皮膚組織，加速患者上皮細胞的復活和生長。異種羊胎生物膜和異種生物膜均不含表皮細胞膠原蛋白組織，或f含量甚微.-,透氣相差，不利于引流；采用環(huán)氧乙垸滅菌，不但不能保鮮，而且滅菌不徹底，產品中有滅菌劑殘留，臨床中患者易感染。b、生物膜厚度過去為了貼服性好，追求生物膜越薄越好，達到0.20.3m加，一旦創(chuàng)面清創(chuàng)不徹底或局部細菌感染，生物膜2~3天就會融化成碎片，起不到保護創(chuàng)面的作用。應用異種動物皮經過科學處理后使皮膜達到無菌、無毒、無致敏、無皮內刺激狀態(tài)，皮膜來源容易，價格便宜，同時又可達到既保護患者創(chuàng)面，又促進上皮細胞生長的作用。可以大大提高治療效果。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于提供一種無菌異種醫(yī)用生物膜及其制備方法，通過選擇與人體結構相似的異種生物皮，經加工后具有與人類患者有著良好相容性的生物特性。一種無菌異種醫(yī)用生物膜，是經滅菌加工后的小豬皮，皮厚(X51.0mm，其特征在于，其表面分布若干裂口。所述的裂口呈U字形，U字形的圓弧形端斷裂，U字形的上開口處連接不斷。所述的裂口呈水平平行排列，或呈任何可以使裂口均勻分布的排列方式。所述的裂口深度(即U字形的高度〉和前、后、左、右間距均為0.5-1.0cm。裂口的平行行距為0.511;兩個裂口的之間的間距為0.8cm;在36cr^面積中含有23~28個裂口。當應用于上下肢、前后胸平整創(chuàng)面，采用規(guī)則分布的無菌異種醫(yī)用生物膜，便于醫(yī)生操作包扎。對于不平整的異型部位創(chuàng)面則采用混合型開裂口以便于引流和包扎。臨床中發(fā)現(xiàn)燒傷病人的皮膚恢復最快的部位常常位于植皮的邊緣和透氣性良好的部位，因此，原先的生物皮也曾采取打孔的辦法增加透氣性，但是，那樣做會使生物皮出現(xiàn)多處缺損，使創(chuàng)面失去生物皮的保護，造成傷口暴露感染或因為得不到生物皮上的膠原蛋白的滋養(yǎng)而影響創(chuàng)面修復。本發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物膜具有裂口(U字形的，如同蛇鱗紋一樣)，使皮膜與創(chuàng)面接觸良好，比之原先打孔豬皮增加了通透性，使創(chuàng)面細胞生長供氧充足，同時有利于引流創(chuàng)面滲出液，清除表皮中的污物，便于自體皮細胞生長。本發(fā)明生物膜透氣性大于打孔的生物皮；皮厚0.5~1.0111111，同時保持了創(chuàng)面被覆蓋，有利于防止患者體內水分、電解質、蛋白質的流失。臨床效果更佳。一種無菌異種醫(yī)用生物膜的制備方法，本方法選擇1個月至3個月小豬，經過選皮、去脂、去毛、裁剪、物理方法除菌、機切、拉尺、制成皮厚0.5~1.0111111的皮片，其特征在于,在生物膜上制出裂口，采用注射用水洗滌皮片后包裝，滅菌。方法中所述的滅菌采用核反應堆電子加速器輻照，輻照時間為1分鐘~5分鐘；放射劑量為50~55KGY。制備過程中操作潔凈伺溫度25±2";制備好的皮片儲存溫度為-88士2t:。在此溫度下存儲36個月能夠保質。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果是選擇豬皮是與人體生物相容性最好的異lt皮源；厚度適宜，加有裂口的設計，使應用時復溫快，使用方便。選用核反應堆電子加速器輻照比鈷-60輻照時間短即可達到同樣的滅菌效果，且對生物膜真皮細胞和成纖維組織沒有破壞作用。圖1是典型病例下肢燒傷創(chuàng)面圖像；圖2是典型病例下肢創(chuàng)面植膜后圖像；圖3是典型病例下肢創(chuàng)面生物膜脫落后圖像。圖4是術發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物膜上裂口的分布情況1;國5是本發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物膜上裂口的分布情況2;圖6是本發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物膜上裂口的分布情況3。具體實施例方式選用優(yōu)質防疫檢疫的1~3個月的乳豬期白色白毛品種，宰殺后立即取背部全皮，將毛皮平整鋪在已經消毒過的手術臺上。采用刮刀削去脂肪雜質后全毛皮浸入福爾馬林消毒液中，首次去除初始菌，10分l^后凈水洗滌3遍，反鋪于手術臺上，采用刮刀60°角度刮掉表皮長短絨毛，按照小于鼓式M-350mm取皮機機切刀架長與寬各lcm裁剪成長方形即成備皮^備皮浸泡在生物洗滌劑(如采用西安開米股份有限公司出品的開米蔬東清洗劑)中20分鐘去浮油再用活水沖洗5分鐘甩干，使皮片含水量在25%左右，按照皮厚0.5~1.0mm千分表定格機切，操作中防止刀片損傷膠原蛋白層，及真皮層的基底膜。厚度達標下機，使用生物洗滌劑洗去機械上的油脂后，再用清水刷洗擦干。機切下臺后進入無菌生產潔凈室檢測定尺，檢查是否達到僅保存完整的表皮+真皮+基底膜的結構，用肉眼觀察如未達標，將皮片表皮層平整貼到手術臺板上用刮刀人工修正，刮去多余的脂肪層，直至達標后用模具和沖床在每一皮片上擠壓出均勻分布的裂口，達到36cn^上分布23~28個裂O。裂口分布情況參見圖4~圖6。產品自檢(自檢項目包括物理指標鼓數及厚度)合格者包裝入袋，熱合封口，每袋都經過核反應堆電子加速器輻照，輻照時間為1分鐘5分鐘，放射劑量為50~55KGY。零下50°入庫冷凍。依據:GB/T14233.2-2005(生物實驗法)；GBA16886.4-2003(體外細胞毒性試驗)；GB/T16886.10-2005(刺激-致敏試驗)；GB/T16886.11-1997(全身毒性試驗)GB/T4233.2-2005(無菌試驗)；本產品物理性能、化學性能、生物性能經國家食品藥品監(jiān)督管理局質量檢測中心檢測，均符合標準。S卩本產品無毒、無菌、無刺激、無致敏、無病毒。自2008年初到2008年11月份，應用本發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物膜治療90例患者共111個II度燒傷創(chuàng)面取得令人滿意的效果，簡要報告如下資料與方法1、病例選擇本組患者共90例，男66例，女24例；其中12歲以下兒童32例；創(chuàng)面125呢TBSA，分為淺II度、深II度兩部分，淺II度創(chuàng)面31例，女8例；深II度創(chuàng)面80例，女21例。采用自身對照法觀察統(tǒng)一深度，面積相同的愈合時間。2、治療方法(1)治療組采用本發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物膜覆蓋創(chuàng)面，膜內側敷在創(chuàng)面上不留空隙，外用消毒紗布、棉墊加壓包扎；如有滲出液滲出敷料，更換外層紗布、棉墊，如果發(fā)生生物膜被滲出液液化，則及時清除生物膜。(2)對照組采用輻照豬皮生物敷料替換本發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物膜覆蓋創(chuàng)面，其它同上。3、觀察指標及療效判定采用茵際慣用的三度四分法區(qū)分創(chuàng)面，對照組與治療組選用同一深度、部位相應、面積接近的創(chuàng)面，肉眼觀察，以愈合時間為比較指標，治療組比對照組愈合提前1天及1天以上為有效，愈合時間相同或更長為無效。4、統(tǒng)計方法愈合時間(天)采用T檢驗比較均值用X土S統(tǒng)計。結果顯示i治療組愈合時間較對照組明顯提前(P<0.05~0.01,參見表l)，治療組有效率達93.29%(參見表2)。未見患者有嚴重不適或過敏、中毒癥狀。表1無菌異種醫(yī)用生物膜治療燒傷創(chuàng)面的愈合時間比較(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注*與對照組1:匕較P<0.05;"與對照組比較P〈0.01.表2無菌異;沖醫(yī)用生物膜治療燒傷創(chuàng)面的療效比較<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注平均有效率為93.29%。討論傳統(tǒng)的燒傷創(chuàng)面修復以抗感染，增強機體營養(yǎng)及保護創(chuàng)面為主，最終達到自然愈合，時間較長。本發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物媒潔白柔軟且無毒、無菌、無剌激、無抗原性，皮膜制作裂口使得創(chuàng)面透氣性好；采用電子加速器核技術進行快速輻贈、滅菌，消除了異種生物的排斥反應，促進上皮細胞組織增生，加速倉d面愈合，具有傷口愈合迅速，減少瘢痕的治療功效。此次臨床試驗共治療了lll個燒傷創(chuàng)面，特別是深II度燒傷創(chuàng)面療效顯著患者燒傷創(chuàng)面愈合時間短，減少了患者住院費用，針對大面積燒傷患者異體皮源缺乏，起到了替代異體皮的作用。不但休克期過渡平穩(wěn)，全身毒血癥反應輕，而且創(chuàng)面愈合快，療程短，是當今治療燒傷創(chuàng)面較理想的生物敷料。參見附圖l，典型病例于某，女，33歲，重癥，燒傷面積90%,入院前因創(chuàng)面處理不當，其下肢創(chuàng)面感染嚴重，經過切削痂后圖像參見附圖1。圖像顯示患者表皮已經被損壞。參見圖2，典型病例于某下肢覆蓋本發(fā)明無菌異種醫(yī)用生物膜后圖像。圖像顯示患者皮損部位被生物膜嚴密包裹。參見圖3，典型病例下肢創(chuàng)面生物膜脫落后圖像。圖像顯示患者下肢創(chuàng)面在覆蓋本發(fā)明生物膜3周后自體皮長出，生物膜脫落，創(chuàng)面愈合的情況。權利要求1、一種無菌異種醫(yī)用生物膜，是經滅菌加工后的小豬皮，皮厚0.5~1.0mm，其特征在于，表面分布若干裂口。2、根據權利要求l所述的無菌異種醫(yī)用生物膜，其特征在于，所述的裂口呈U字形，U字形的圓弧形端斷裂，U字形的上開口處連接不斷。3、根據權利要求l所述的無菌異種醫(yī)用生物膜，其特征在于，所述的裂口呈水平平行排列，或呈任何可以使裂口均勻分布的排列方式。4、根據權利要求l所述的無菌異種醫(yī)用生物膜，其特征在于，所述的裂口深度和前、后、左、右間距均為0.51.0cm。5、根據權利要求l所述的無菌異種醫(yī)用生物膜，其特征在于，所述的裂口的平行行距為0.5cm;兩個裂口的之間的間距為0.8cm;在36or^面積中含有2328個裂口o6、一種無菌異種醫(yī)用生物膜的制備方法，選甩豬皮，經過選皮、去脂、去毛、裁剪、物理方法除菌、機切、拉尺、制成皮厚0.5~1.011的皮片，其特征在于，在生物膜上制出裂口，采用注射用水洗滌皮片后包裝，滅菌。7、根據權利要求6所述的無菌異種醫(yī)用生物膜的制備方法，其特征在于，所述的滅菌采用核反應堆電子加速器輻照，輻照時間為1分鐘5分鐘；放射劑量為50~55KGY。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)用輔料生物工程領域。一種無菌異種醫(yī)用生物膜，是經滅菌加工后的小豬皮，皮厚0.5～1.0mm，其特征在于，表面分布若干裂口。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果是選擇豬皮是與人體生物相容性最好的異種皮源；厚度適宜，加有裂口的設計，使應用時復溫快，使用方便。選用核反應堆電子加速器輻照比鈷-60輻照時間短即可達到同樣的滅菌效果，且對生物膜真皮細胞和成纖維組織沒有破壞作用。文檔編號A61L2/08GK101548914SQ20091006794公開日2009年10月7日申請日期2009年2月26日優(yōu)先權日2009年2月26日發(fā)明者冠陳申請人:冠陳