專(zhuān)利名稱(chēng)：治療和/或預(yù)防胃潰瘍的組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療和/或預(yù)防個(gè)體的胃潰瘍癥狀。具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明 涉及用于處理胃潰瘍狀況的活性成分組合物及所述組合物的制備和使 用方法。所述組合物可以用作治療人胃潰瘍的輔助手段。
背景技術(shù)：
胃潰瘍是一種良性的胃黏膜損傷，損傷處黏膜上皮細(xì)胞會(huì)暴露在
酸和非類(lèi)固醇類(lèi)抗炎藥物(NSAIDs)中。它是一種會(huì)因壓力、放縱和焦 慮而被誘發(fā)的消化道問(wèn)題。胃潰瘍狀況在各年齡段都有發(fā)生，對(duì)男女 都有影響。據(jù)估計(jì)人口中的大約10%都會(huì)由于酸分泌和黏膜上皮細(xì)胞 的防御機(jī)制而發(fā)生胃潰瘍癥狀。隨著年齡的增加而提高的胃潰瘍發(fā)病 率可能與黏膜逐漸無(wú)法分泌保護(hù)層有關(guān)。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，據(jù)估計(jì)營(yíng)養(yǎng) 不良和不均衡的飲食會(huì)提高動(dòng)物對(duì)胃潰瘍狀況的易感性。有大量研究 和努力都是集中在減輕胃潰瘍的癥狀上。潰瘍狀況會(huì)給人們帶來(lái)嚴(yán)重 的不適和疼痛。常用藥物包括抗酸劑和H2-受體拮抗劑，這些藥物是 用于中和腸胃系統(tǒng)中分泌的酸，從而短時(shí)間內(nèi)減輕疼痛。本研究工作 致力于從草藥中發(fā)現(xiàn)預(yù)防和治療胃潰瘍癥狀的藥劑。
報(bào)導(dǎo)曾指出中草藥具有多種藥理學(xué)功能。中草藥還曾被報(bào)導(dǎo)對(duì)人 和大鼠腫瘤細(xì)胞有抗炎活性。此外，某些中草藥顯示出能抑制癌細(xì)胞 的增殖[l]。早期研究表明中草藥在動(dòng)物中可以加強(qiáng)環(huán)磷酰胺和放療 的抗癌活性。但是，所有這些草藥都沒(méi)有被單獨(dú)用于治療和預(yù)防胃潰
揚(yáng)病癥。
發(fā)明概述
本文公開(kāi)的一方面是提供一種用于給個(gè)體治療和 或預(yù)防胃潰瘍 疾病或病癥，比如潰瘍的藥物組合物。該組合物包含活性成分和藥學(xué)上可接受的載體，其中所述活性成分選自黃連中的黃連素和延胡索中 的延胡索乙素,或者它們的藥學(xué)上可接受的鹽。
本文公開(kāi)的另 一方面是提供一種給個(gè)體治療和/或預(yù)防胃潰瘍疾 病或病癥，比如潰瘍的方法。該方法包括將治療有效量的活性成分給
或者它們的藥學(xué)上可接受的鹽。可選地，用于治療和/或預(yù)防個(gè)體的胃 潰瘍疾病或病癥的方法包括將包含活性成分和藥學(xué)上可接受的載體的 治療有效量的藥物組合物給予個(gè)體，所述活性成分選自黃連的黃連素 和延胡索的延胡索乙素，或者它們的藥學(xué)上可接受的鹽。
本文公開(kāi)的再一方面是提供選自黃連的黃連素和延胡索的延胡索 乙素的活性成分，或者它們的藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療和/或預(yù)防 胃潰瘍疾病或病癥的藥物中的用途。
優(yōu)選的，本文公開(kāi)的藥物組合物或者藥物包含黃連的黃連素和延 胡索的延胡索乙素，或者它們的藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案
中，本文公開(kāi)的藥物組合物或藥物包含重量比大約50: l到大約l: 1 的黃連的黃連素和延胡索的延胡索乙素，優(yōu)選包括約25:1至3:1重量 比，更優(yōu)選15:1至5:1重量比，最優(yōu)選10:1重量比的黃連素和延胡索 乙素。本文公開(kāi)的優(yōu)選實(shí)施方案中，所述藥物組合物或者藥物可以包 含重量比大約9比1份的黃連的黃連素和延胡索的延胡索乙素。
附圖簡(jiǎn)述


圖1顯示了大鼠中吲咮美辛(indomethacin)誘發(fā)的胃潰瘍的代表性 肉眼可見(jiàn)表觀和位置。該大鼠用(A)只有黃連素(200 mg/kg)和(B)黃連 素(200 mg/kg)和延胡索乙素(20mg/kg)治療組合物進(jìn)行了預(yù)處理，1 小時(shí)后給予巧l哚美辛(0.4g/kg)。對(duì)照組給予等量的蒸餾水。
圖2顯示了大鼠中乙醇誘發(fā)的胃潰瘍的代表性肉眼可見(jiàn)表觀和位 置。該大鼠同樣用(A)只有黃連素(200 mg/kg)及(B)黃連素(200 mg/kg) 和延胡索乙素(20mg/kg)進(jìn)行了處理。具體見(jiàn)圖1。乙醇(20g/kg)代替 了吲哚美辛。
發(fā)明詳迷本文使用的術(shù)語(yǔ)"治療有效量"或"有效量"意在表示能有效實(shí)現(xiàn)其 預(yù)期目的的活性成分的用量。該劑量根據(jù)癥狀、性別、年齡和患者體 重，以及給藥方法、給藥時(shí)間和間隔以及藥物劑型的特性、分散性和 種類(lèi)，具體有效成分等而變化。通常，諸如黃連中的黃連素的活性成
分可以以每一個(gè)體每公斤體重大約1到10000 mg,優(yōu)選1到1000 mg， 更優(yōu)選10到500 mg,最優(yōu)選100到250 mg，比如100、 110、 120、 130、 140、 150、 160、 170、 180、 190、 200、 210、 220、 230、 240和 250mg的量，以單次或分開(kāi)的劑量進(jìn)行給藥。延胡索的延胡索乙素可 以以每一個(gè)體每/>斤體重大約0.01到1000 mg，優(yōu)選O.l到500mg， 更優(yōu)選l到100mg,最優(yōu)選10到20mg,比如10、 11、 12、 13、 14、 15、 16、 17、 18、 19和20mg的量，以單次或分開(kāi)的劑量進(jìn)行給藥。 但是，對(duì)于某些個(gè)體，可能使用這些范圍之外的劑量。
本文中的術(shù)語(yǔ)"藥物組合物"、"中(草)藥組合物"和"治療組 合物"可交替使用，均指含有黃連素和延胡索乙素的組合物。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的載體"表示可以用于藥物的有助 于將活性成分加工成制劑的賦形劑和輔助成分。所述制劑可以通過(guò)口 服、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi)給藥。優(yōu)選，所述制劑，特別是比 如藥片、糖衣丸、片劑和膠嚢以及合適的溶液，含有重量百分比為約 0.01%到99.99%，優(yōu)選約25%到75%的活性成分，以及賦形劑和/或輔 助成分。
適合作為載體的賦形劑包括填充劑，如糖類(lèi)，例如乳糖或蔗糖， 甘露糖或山梨糖；纖維素衍生物；疏酸鎂；磷酸鈣，比如磷酸三鈣或 者磷酸氬釣；以及粘合劑，比如淀粉糊，例如玉米淀粉、小麥淀粉、 大米淀粉、土豆淀粉；白明膠；黃芪膠；以及/或者聚乙烯吡咯烷酮。
適合作為載體的輔助成分包括調(diào)節(jié)流動(dòng)性的試劑和潤(rùn)滑劑，比如 滑石、硅土、硬脂酸或其鹽(比如硬脂酸鎂)，以及/或者聚乙二醇?？?以給藥片或糖衣添加染料或色素。
本文7>開(kāi)的組合物可以配制成注射劑，比如靜月永內(nèi)、皮下和月幾內(nèi) 注射劑；栓劑或者舌下含片的形式。按照本領(lǐng)域普遍認(rèn)可的方法來(lái)制 備例如注射劑、栓劑、舌下含片、藥片和膠嚢等劑量形式的藥物制劑。制備注射制劑時(shí)，根據(jù)需要將有效成分與pH調(diào)節(jié)劑、緩沖液、
助溶劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑以及防腐劑混合，然后按照常規(guī)方法制備成 靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)注射制劑。
所述助溶劑的例子包括聚乙烯氫化的蓖麻油、聚山梨醇酯80、煙 堿、聚氧乙烯山梨醇酐單月桂酸酯、聚乙二醇(macrogol)以及蓖麻油脂 肪酸的乙基酯。懸浮劑的例子包括甲基纖維素、聚山梨醇酯80、羥乙
基纖維素、阿拉伯樹(shù)膠、黃芪膠粉、羧曱基纖維素鈉以及聚氧乙烯山 梨醇酐單月桂酸酯。
穩(wěn)定劑的例子包括亞石克酸鈉、焦亞硫酸鈉以及乙醚。防腐劑的例 子包括對(duì)羥基苯曱酸曱酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、山梨酸、苯酚、曱酚 和氯曱酚。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)活性化合物或藥物組合物是口服 時(shí)，其可以是藥片或膠嚢的形式，或者是水溶液或懸浮液。對(duì)于藥片， 常用的載體包括乳糖、甘露醇和玉米淀粉，并且常常加入潤(rùn)滑劑，比 如硬脂酸鎂。對(duì)于膠嚢形式，可以將活性成分以干燥的形式放在硬的 白明膠膠嚢中，或者通過(guò)合適的凝膠或液體載體，比如聚乙二醇液體 或角叉膠在軟白明膠膠嚢中進(jìn)行給藥。當(dāng)需要口服水懸浮液時(shí)，將活 性成分與乳化劑和懸浮劑組合。需要的話，可以加入某些甜味劑和/ 或增味劑。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述用于注射或口服的水溶液或懸浮 液劑量形式的藥物制劑包含黃連素和延胡索乙素的水溶液。
本文所用的術(shù)語(yǔ)"個(gè)體(們)"是指動(dòng)物(例如鳥(niǎo)類(lèi)、爬行動(dòng)物和哺乳 動(dòng)物)，優(yōu)選是哺乳動(dòng)物，包括非靈長(zhǎng)類(lèi)的(例如，駱駝、驢、斑馬、 牛、豬、馬、貓、狗、大鼠和小鼠)和靈長(zhǎng)類(lèi)(例如，猴、黑猩猩和人)。
本文所用的術(shù)語(yǔ)"協(xié)同的"是指兩或更多種療法或藥物的組合(例 如，預(yù)防或治療劑的組合)比其中單獨(dú)療法或藥物(例如 一 或多種預(yù)防 或治療劑)所取得效果相加更有效。組合療法(例如預(yù)防或治療劑的組 合)的協(xié)同效應(yīng)使得可以給予具有某癥狀(例如，胃潰瘍的狀況或其相 關(guān)癥狀)的個(gè)體更少量的單獨(dú)療法(例如預(yù)防或治療劑)的劑量，并且/ 或者減少所述療法的給藥頻率。以下實(shí)施例意在闡述本發(fā)明的實(shí)施方案，而不應(yīng)被理解為對(duì)發(fā)明 范圍的限定。
實(shí)施例 材料與方法
浙
吲哚美辛(indomethacin)、乙醇、氯化鈉、黃連素、福爾馬林購(gòu)自 sigma-Aldrich (St. Louis, MO)。實(shí)驗(yàn)中所用中藥飲片黃連和延胡索均從 中草藥店購(gòu)買(mǎi)。實(shí)驗(yàn)所用的其他材料和試劑均為分析級(jí)。將植物化合 物(提取物)溶于雙蒸水制備成不同濃度(例如，6.25 mg/mL、 12.5 mg/mL、 20mg/mL、 25 mg/mL、 50 mg/mL、和100mg/mL、 200 mg/mL 等)。吲哚美辛溶于5% NaHC03制備成濃度為8 mg/ml的溶液。
動(dòng)參
Sprague畫(huà)Dawley (SD)大鼠(180-200g)來(lái)自 Laboratory Animal Services Centre, CUHK。它們由該中心的技術(shù)人員提供12小時(shí)明/暗循 環(huán)，并給予不限量的商品鼠食和水。
乂乂黃遽#提取黃遂#
將黃連于室溫在水中浸泡1小時(shí)(藥物與水的重量體積比約為 1:10),然后煮大約3小時(shí)。水提取液是在溫的純乙醇(35。C)中邊攪拌 邊提取的(注更高溫度會(huì)增加其他不需要的成分的提取效果)。經(jīng)離 心和紗布除去沉淀后，加入氯化鈉制成1M溶液(pH2.0),將該溶液方文 在水水桶中以便收集結(jié)晶產(chǎn)物。提取和離心的步驟重復(fù)三次。收集微 黃色的產(chǎn)物用于實(shí)驗(yàn)。
^C^辨索哞提承延辨襲乙^
將中草藥飲片延胡索置于水中l(wèi)小時(shí)(藥物與水的重量體積比約為
1:10)，然后煮3小時(shí)。除去懸浮的草藥材料后，在一個(gè)分液瓶中用等 體積的含有乙醚、氯仿和乙醇(24: 8: 1, v/v/v)的X溶液提取水溶液。固體殘留物
收到等體積乙醇中。在用等體積乙醚提取前，加入氫氧化銨溶液(0.2 M)。將乙醚組分過(guò)濾，然后加入等體積的1.2 M NaOH。將溶液再次 過(guò)濾，然后用無(wú)水硫酸鈉干燥。殘余物溶于乙醚。乙醚組分在一個(gè)冰 水桶中用等體積的氯仿和乙醇(l: 3, v/v)沉淀過(guò)夜(結(jié)晶發(fā)生在用兩個(gè) 溶劑系統(tǒng)時(shí))。收集固體晶體。
將SD大鼠稱(chēng)重并隨機(jī)分組。將它們禁食24小時(shí)，但可以自由取 水。通過(guò)經(jīng)口管祠法將治療液給予禁食后的動(dòng)物(IO mL/kg)。在實(shí)施 例中使用的本發(fā)明所述的中藥組合物中，黃連素的劑量為6.25-200 mg/ml，即62.5mg/kg至2 g/kg體重；延胡索乙素的用量通常為20mg/kg 體重，最高給藥劑量為45 mg/kg體重(具體給藥劑量，例如參見(jiàn)表I-IV)。 對(duì)照組給予等量的蒸餾水。單獨(dú)的黃連素或延胡索乙素的給藥劑量見(jiàn) 下文所述。所有給藥每天一次，共7天。最后服藥或處理l小時(shí)后， 給動(dòng)物口服巧l哚美辛溶液(40mg/kg)或無(wú)水乙醇1.5ml/只。7小時(shí)后處 死動(dòng)物，取出胃。如果需要在給予吲哚美辛溶液或無(wú)水乙醇后，繼續(xù) 進(jìn)行中藥組合物或化合物的給藥，例如，繼續(xù)給藥1-3天，則在最后 一次給藥后4小時(shí)，處死動(dòng)物，取出胃。然后將福爾馬林溶液(1%)注 入胃內(nèi)。將鼠胃在10%福爾馬林溶液中固定IO分鐘，沿胃的彎曲切開(kāi)， 用自來(lái)水沖洗。將胃展在一張白紙上進(jìn)行檢驗(yàn)。按照已建立的方法[2] 測(cè)量每一潰瘍的尺寸(mm)并計(jì)算潰瘍指數(shù)。將中草藥提取物的抗?jié)?效果與對(duì)照組比較。潰瘍指數(shù)的計(jì)算方法如下[2]:
潰瘍指數(shù)=10/X,其中X=總粘膜面積/總的潰瘍面積。
f凝為、泌的^/量
將大鼠禁食24小時(shí)，但可自由取水，水在實(shí)驗(yàn)前兩小時(shí)撤去。大 鼠隨機(jī)分組。按照已建立的方法[3]將幽門(mén)括約肌結(jié)扎。用乙醚將動(dòng)物 麻醉，在腹部做一切口。用細(xì)線將幽門(mén)括約肌結(jié)扎。在十二指腸處給 藥，并縫合傷口。 5小時(shí)后處死動(dòng)物。露出腹腔后，夾住胃賁門(mén)括約 肌，將胃液從賁門(mén)括約肌釋放到離心管中，然后于600 g離心IO分鐘。收集上清液。測(cè)量其體積并保存以用于下列分析[4]:
1. 確定分泌的酸的pH、總酸度和總體積
用pH計(jì)測(cè)量樣品的pH。取大約2ml樣品，大約1: 20稀釋后用 0.02 N NaOH滴定到pH 7。計(jì)算所需的NaOH的體積(ml)得出總酸度 (mEq/L)?？偹岫瘸艘悦啃r(shí)分泌的胃液的體積算出酸的總分泌體積 (uEq/hr)。
2. 確定胃蛋白酶活性和胃蛋白酶的分泌量
將雞卵白蛋白加入內(nèi)徑0.7mm的毛細(xì)管，然后置于85。C熱水以 使卵白蛋白凝結(jié)。然后將其切成2cm長(zhǎng)的圓柱形。取兩個(gè)這樣的圓柱 放入含有1 ml胃液和10 ml 0.1 N HC1的試管中。將試管塞好，于37。C 保溫24小時(shí)。測(cè)出圓柱每端變透明的部分的長(zhǎng)度，每個(gè)圓柱取2個(gè)讀 數(shù)，計(jì)算4個(gè)這樣的測(cè)量值的平均數(shù)。胃蛋白酶活性-變透明的蛋白圓 柱的平均長(zhǎng)度x 16(單位/ml)。胃蛋白酶分泌量-胃蛋白酶活性x每小 時(shí)分泌的胃液(單位/小時(shí))。
承j/試黃遽素和延辨,乙#對(duì)義晟的參響
研究過(guò)有效中藥提取物的組合物后，通過(guò)相同的方法對(duì)各個(gè)活性 成分進(jìn)行考察。將12只SD大鼠禁食24小時(shí)，但可自由取水。用水 將黃連素溶液稀釋?zhuān)频?.02-0.2 g/ml溶液。通過(guò)經(jīng)口管銅法將待測(cè) 化合物給予禁食后的動(dòng)物(10ml/kg)，每天給藥一次，共7天。類(lèi)似地， 在大鼠中研究了延胡索乙素(給藥劑量為20ml/kg體重，最高給藥劑量 為45 mg/kg體重)，但是單獨(dú)進(jìn)行延胡索乙素的給藥對(duì)大鼠潰瘍的沒(méi) 有抑制作用或效果不明顯。
結(jié)果
宏觀上，主要對(duì)吲哚美辛和乙醇引發(fā)的較淺或較深的不同潰瘍形 式的胃損傷進(jìn)行了評(píng)價(jià)。這項(xiàng)研究中，圖1顯示了表現(xiàn)為深入肌肉黏 膜區(qū)域的損傷的潰瘍。胃潰瘍幾乎總是位于胃黏膜區(qū)域。NSAID。引哚 美辛處理過(guò)的動(dòng)物的平均潰瘍面積一般在一個(gè)劑量的吲咮美辛和給藥 時(shí)程(例如在給藥后3到4天)中保持穩(wěn)定(例如，未處理組)。
在用最高到2 g/kg體重的黃連素或者45 mg/kg體重的延胡索乙素處理過(guò)的動(dòng)物中沒(méi)有觀察到死亡。與對(duì)照相比，大鼠沒(méi)有表現(xiàn)出任何
不適或體重減輕。因此，以高劑量的所述治療組合物進(jìn)行的7天處理
對(duì)于作為抗?jié)兯幬锸前踩珶o(wú)毒的。圖1顯示了給予中藥組合物(將單 獨(dú)提取的黃連素和延胡索乙素混合)后，吲哚美辛在大鼠中引發(fā)的胃潰 瘍的典型的肉眼可見(jiàn)表觀。其中黃連素和延胡索乙素聯(lián)合使用的效果
好于單獨(dú)使用黃連素的效果，其效果至少提高10%。圖2顯示了乙醇 誘發(fā)的胃潰瘍的典型的肉眼可見(jiàn)表觀。胃潰瘍指數(shù)表明，所有黃連素 和延胡索乙素治療組合物處理過(guò)的動(dòng)物中胃潰瘍均下降了 ，但黃連素 和延胡索乙素聯(lián)合使用的效果好于單獨(dú)使用黃連素的效果，其效果至 少提高10%。這個(gè)結(jié)果提示著大鼠胃中的適應(yīng)過(guò)程的開(kāi)始。
在分開(kāi)的實(shí)驗(yàn)中對(duì)所選中藥組合物對(duì)抗吲哚美辛和乙醇誘發(fā)的胃 潰瘍的效果進(jìn)行了評(píng)價(jià)。在吲哚美辛研究中，對(duì)照組的平均潰瘍數(shù)是 28,處理組大鼠是15,而在乙醇研究中，潰瘍平均數(shù)量是8(對(duì)照)和 4(處理組)。對(duì)于未處理動(dòng)物，潰瘍發(fā)生率是100%。中藥組合物處理 與未處理動(dòng)物比較，均顯示吲哚美辛和乙醇引起的胃潰瘍數(shù)量的明顯 減少(P0.05),而且中藥組合物處理組中吲哚美辛和乙醇引起的胃潰瘍 均得到了緩解。用中藥組合物進(jìn)行的處理以劑量相關(guān)方式抑制了胃潰 瘍。結(jié)果在表I和II中有總結(jié)。
我們還進(jìn)行了所述化合物的治療組合物的多個(gè)劑量和給藥時(shí)程的 實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中給予大鼠吲哚美辛。沒(méi)有用中藥組合物處理的組中，最 大的潰瘍面出現(xiàn)在第3天。用中藥組合物處理后，潰瘍持續(xù)減小。對(duì) 于潰瘍數(shù)量也注意到類(lèi)似的趨勢(shì)。
用中藥組合物處理大鼠使得胃液分泌和胃蛋白酶活性降低。這些 發(fā)現(xiàn)顯示了用所述治療組合物進(jìn)行的處理的有益效果。表III和IV總 結(jié)了這些結(jié)果。用中藥組合物預(yù)處理過(guò)的大鼠顯示胃潰瘍下降。
給予中藥組合物的大鼠中，由上述兩種損傷試劑導(dǎo)致的急性宏觀 胃損傷有明顯減輕。具體來(lái)說(shuō)，在中藥組合物處理的動(dòng)物中，相對(duì)吲 哚美辛誘發(fā)的損傷，測(cè)量到的損傷指數(shù)下降了 50-80%，相比之下，在 給予乙醇的動(dòng)物中，損傷下降了 40-85%。在吲哚美辛或乙醇處理后， 再進(jìn)行單劑量治療組合物的給藥或再進(jìn)行連續(xù)3天的給藥，會(huì)使大鼠
ii由上述兩種損傷試劑導(dǎo)致的急性宏觀胃損傷有更加明顯的減輕，潰瘍
可下降50-100%。而單獨(dú)使用黃連素進(jìn)行上述給藥未獲得此治療效果。 討論
乙醇和吲哚美辛誘發(fā)的胃潰瘍主要發(fā)生在胃黏膜區(qū)。這是一個(gè)成 熟的潰瘍模型的特征所在，它使得我們可以針對(duì)胃潰瘍的發(fā)生部位。 這些模型中的損傷同樣主要會(huì)導(dǎo)致侵蝕以及后續(xù)的潰瘍。常用的模型 不需要重新飼喂吲哚美辛來(lái)誘發(fā)潰瘍[5]。該模型簡(jiǎn)單可靠。而且，可 以經(jīng)皮下給予乙醇和吲哚美辛。本研究中，給予一個(gè)劑量后即在24 小時(shí)內(nèi)迅速發(fā)展出潰瘍，隨時(shí)間推移未出現(xiàn)死亡。
非類(lèi)固醇抗炎藥物(NASID)誘發(fā)的大鼠胃潰瘍模型是一種很方便 的模型，可以通過(guò)乙醇或吲哚美辛的皮下劑量給藥或口服給藥來(lái)產(chǎn)生。
我們知道這些藥物的潰瘍形成效果天然是系統(tǒng)性的。因此,在大鼠模 型中口胃給藥是優(yōu)選的NSAID給藥途徑。本研究中測(cè)試的大鼠模型與 人體情形有相當(dāng)?shù)南嚓P(guān)性，同時(shí)還能避免使用高劑量和死亡率。
我們實(shí)現(xiàn)了本研究的目的，即開(kāi)發(fā)一種來(lái)自中草藥的活性成分的 醫(yī)療制劑，并采用不同胃潰瘍模型評(píng)價(jià)了其在預(yù)防和治療胃潰瘍方面 的藥理學(xué)益處。制成了所述化合物的治療組合物。
我們鑒定到了中草藥中顯示出對(duì)胃潰瘍預(yù)防和治療有顯著效果的 活性原料。黃連和延胡索的活性成分顯示出對(duì)胃潰瘍的協(xié)同效應(yīng)。含
索乙素的效果好，但單獨(dú)使用延胡索乙素卻沒(méi)有觀察到明顯的效果。 而且更高劑量(〉45mg/kg)的延胡索乙素會(huì)產(chǎn)生副作用，例如，在大鼠 實(shí)驗(yàn)中觀察到大鼠變得昏昏欲睡，不活躍。延胡索已知具有止痛效果 [6]。文獻(xiàn)中沒(méi)有任何關(guān)于這些制劑對(duì)于治療胃潰瘍的治療效果的報(bào) 導(dǎo)。我們的研究顯示，中藥組合物的藥理學(xué)作用可能與抑制環(huán)氧合酶 和胃潰瘍病理學(xué)中的其他生物因子有關(guān)。
總之，我們清楚地展示了中藥提取物對(duì)有害藥物誘發(fā)的胃潰瘍的 治療效果。將中藥治療組合物以劑量形式給予大鼠能夠有效地預(yù)防和 治療胃潰瘍。1. 治療和預(yù)防的最有效劑量是0.1-0.2 g/kg。我們?cè)诖笫笊蠂L試了 黃連素的極高的劑量[2000mg/kg]，并無(wú)毒性。但是，有效劑量為0.05 至0.2g/kg體重。
2. 我們測(cè)試了消化道特異的不同的中藥提取物。首先每次一種地 研究了各種中草藥的提取物對(duì)大鼠胃潰瘍的治療和預(yù)防，其中潰瘍的 誘發(fā)過(guò)程使用了不同的模型藥物或化學(xué)物質(zhì)。我們開(kāi)發(fā)的治療組合物 包含重量比包括約25:1至3:1，優(yōu)選，15:1至5:1，最優(yōu)選約10: l或 約9比1的來(lái)自黃連的黃連素和來(lái)自延胡索的延胡索乙素。我們的工 作包括了在大鼠上進(jìn)行的乙醇和NSAID誘發(fā)的胃潰瘍研究。
3. 我們認(rèn)為利用治療組合物對(duì)胃潰瘍的成功治療和預(yù)防歸因于產(chǎn) 酸減少，黏膜的適應(yīng)能力以及化合物在黏膜區(qū)的緩沖能力加強(qiáng)(表IV)。 適應(yīng)是使胃損傷最小化的胃的內(nèi)在能力。胃適應(yīng)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人中都 已有證實(shí)[7]。大鼠胃黏膜適應(yīng)顯然只發(fā)生在NSAID誘發(fā)的大鼠發(fā)展 成胃潰瘍時(shí)。本研究顯示，基于我們的研究中大鼠胃的不同微觀表現(xiàn)， 胃適應(yīng)可能涉及到對(duì)胃黏膜修復(fù)的刺激，以及胃黏膜發(fā)展出對(duì)有害試 劑的抗性。適應(yīng)后的胃黏膜變得更能抵抗對(duì)乙醇、吲哚美辛和其他試 劑的損傷作用。但是，最近的研究表明生長(zhǎng)因子(EGF)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 a(TGFa)參與了攝取NSAID后的胃適應(yīng)[8]。使用所述治療組合物進(jìn)行 治療能夠增加這些生長(zhǎng)因子的表達(dá)，胃上皮細(xì)胞增殖隨之提高。因此， 用草藥進(jìn)行的治療可以減少胃潰瘍。此外， 一氧化氮^L認(rèn)為在適應(yīng)過(guò) 程中發(fā)揮了一定的作用。對(duì)于這一適應(yīng)過(guò)程已提出了不同的理論[9]。 更近期的研究表明，反復(fù)給予阿司匹林后，大鼠胃中環(huán)氧合酶-2表達(dá) 增加[IO]。這些發(fā)現(xiàn)提示，環(huán)氧合酶-2可能能夠補(bǔ)償有害試劑對(duì)內(nèi)在 前列腺素合成的抑制[10-11]。但是，我們對(duì)胃適應(yīng)所涉及的機(jī)制的理 解仍然是很粗略的。
結(jié)論
本發(fā)明涉及以植物化合物進(jìn)行預(yù)防和治療來(lái)處理胃潰瘍癥狀。本 發(fā)明提供了能夠預(yù)防和治療胃潰瘍癥狀的活性成分的口服劑量形式。 本發(fā)明能夠有效拮抗酸、乙醇和非類(lèi)固醇抗炎藥物(NSAID)引發(fā)胃潰瘍。本發(fā)明還提供了一種制劑，其可作為口服的藥物或增補(bǔ)劑用于治 療和預(yù)防胃潰瘍癥狀。
表I黃連素和固定量的延胡索乙素(20 mg/kg)對(duì)大鼠中吲哚美
辛誘發(fā)的潰瘍的影響處理劑量(mg/kg)數(shù)量潰瘍指數(shù)抑制率(%)*
對(duì)照.水952.6±14.3——
黃連素62.5637.0±6.7*29.7*
黃連素125936.4±16.6*30.8*
黃連素200912.0±13.0**了了 1承承
黃連素250925.3±12.2**51.9**
黃連素500929.4土13.6料斗斗1承承
數(shù)值代表平均數(shù)土S.D.與對(duì)照組比較，
照來(lái)確定的 * P<0.05; ** P<0.01.
表II黃連素和固定量(20 mg/kg)的延胡索乙素對(duì)大鼠中乙醇誘發(fā)
的潰瘍的影響處理劑量(mg/kg)數(shù)量潰瘍指數(shù)抑制率(％)
對(duì)照水1250.0±26.5——
黃連素62.5925.4±16.4*49.2*
黃連素125920.9±20.8*58.2*
黃連素20096.1±3.9**83.6**
黃連素25098.0±6,2**84.0**
黃連素500926.1±25.7*47.8*
所有百分比變化是相對(duì)用媒介(水)處理過(guò)的大鼠對(duì)照來(lái)確定的。
數(shù)值代表平均數(shù)士S.D. 與對(duì)照組比較，*P<0.05; **P<0.01.
表III中藥組合物(均含固定量的延胡索乙素20mg/kg;黃連素含 量如表中所示)對(duì)胃酸分泌的影響組動(dòng)物數(shù)胃液的量胃液的pH總酸度釋放的酸總量
(mL)(mEq/L)
對(duì)照87.81±0.751.23±0.04124.1±7.3193.3±14.2
200 mg/kg87.44±0.981.23±0.04118.9±9.7**102.6±34.7**
250 mg/kg84.26±0.88**1.32±0.05109.5±10.3**93.5±21.3**
數(shù)值代表平均數(shù)土 SEM (與對(duì)照組比較，**p < 0,01).
表IV 中藥組合物(均含固定量的延胡索乙素20mg/kg;黃連素 含量如表中所示)對(duì)胃蛋白酶活性和胃蛋白酶分泌量的影響
組動(dòng)物數(shù)量胃蛋白酶活性胃蛋白酶的分泌量
(單位/mL)(單位/h)
對(duì)照8146.1±019.7228,7±40.0
200 mg/kg8135.3±8.2**200.8±25.8**
250 mg/kg8134.7±23.7**113.5±24.9**
數(shù)值代表平均數(shù)士SEM(與對(duì)照組比較，**p<0.01).
15參考文獻(xiàn)
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權(quán)利要求
1.一種用于治療和/或預(yù)防個(gè)體胃潰瘍疾病或病癥的藥物組合物，其包含活性成分和藥學(xué)上可接受的載體，其中所述活性成分選自黃連中的黃連素和延胡索中的延胡索乙素，或者它們的藥學(xué)上可接受的鹽。
2. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，所述活性成分是黃連中的黃 連素和延胡索中的延胡索乙素。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物包 含治療有效量的黃連中的黃連素和延胡索中的延胡索乙素。
4. 如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其中所述黃連中的黃連素的 治療有效量是每一個(gè)體每公斤體重每天大約1到10,000 mg,優(yōu)選1 到1,000 mg，更優(yōu)選10到500mg,最優(yōu)選100到250 mg，以及所述 延胡索中的延胡索乙素的治療有效量是每一個(gè)體每公斤體重每天0.01 到l，OOOmg,優(yōu)選0.1到500 mg，更優(yōu)選1到100 mg,最優(yōu)選10到 20 mg。
5. 如權(quán)利要求l-4任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述藥物組合 物包含重量比為50: l到l: 1的黃連中的黃連素和延胡索中的延胡索 乙素。
6.選自黃連中的黃連素和呀戶(hù)上可接受的鹽的活性成分在制備預(yù)防和/或治療個(gè)體胃潰瘍疾病或病 癥的藥物中的用途。
7.如權(quán)利要求6所述的用途，其中所述藥物包含治療有效量的黃 連中的黃連素和延胡索中的延胡索乙素。
8. 如權(quán)利要求7所述的用途，其中所述黃連素的治療有效量是每 一個(gè)體每公斤體重每天1到10，000mg,優(yōu)選1到1，000mg，更優(yōu)選10 到500 mg,最優(yōu)選100到250 mg;所述延胡索乙素的治療有效量是每 一個(gè)體每/>斤體重每天0.01到l，OOO mg,優(yōu)選0.1到500 mg,更優(yōu) 選1到100 mg,最優(yōu)選10到20 mg。
9. 如權(quán)利要求6-8任一項(xiàng)所述的用途，其中所述藥物包含重量比 為約50: l到約l: 1的黃連中的黃連素和延胡索中的延胡索乙素。
10. 如權(quán)利要求6-9中的任一項(xiàng)所述的用途，其中所述藥物被制 備成用于口服或注射的劑型。
11. 如權(quán)利要求6-10中的任一項(xiàng)所述的用途，其中所述個(gè)體是包 含鳥(niǎo)類(lèi)、爬4亍動(dòng)物和哺乳動(dòng)物的動(dòng)物。
12. 如權(quán)利要求11所述的用途，其中所述動(dòng)物是哺乳動(dòng)物，包括 包含駱駝、驢、斑馬、牛、豬、馬、貓、狗、大鼠或小鼠的非靈長(zhǎng)類(lèi)， 和包含猴、黑猩猩或人的靈長(zhǎng)類(lèi)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于治療和/或預(yù)防個(gè)體胃潰瘍疾病或病癥的藥物組合物，其包含治療有效量的活性成分和藥學(xué)上可接受的載體，其中所述活性成分選自黃連中的黃連素和延胡索中的延胡索乙素，或者它們的藥學(xué)上可接受的鹽；以及該藥物組合物的用途。還公開(kāi)了一種治療和/或預(yù)防個(gè)體胃潰瘍疾病或病癥的方法，該方法包含將本文公開(kāi)的組合物給予個(gè)體的步驟。
文檔編號(hào)A61K31/4375GK101664406SQ200910158960
公開(kāi)日2010年3月10日 申請(qǐng)日期2009年7月9日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月9日
發(fā)明者何永成 申請(qǐng)人:香港中文大學(xué)