專利名稱：：一種調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥復(fù)方制劑的檢測(cè)方法，特別是一種調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
：調(diào)經(jīng)活血片收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)》(1991:150)的"WS3-B-0614-91調(diào)經(jīng)活血片"，處方組成為木香、川芎、延胡索(醋制)、當(dāng)歸、赤芍等，具有調(diào)經(jīng)活血，行氣止痛的功效，用于月經(jīng)不調(diào)，行經(jīng)腹痛等婦科疾病，臨床療效顯著，見效快，市場(chǎng)反應(yīng)良好?，F(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，鑒別項(xiàng)下除了顯微鑒別外，僅有延胡索藥材的薄層色譜鑒別，更沒有含量測(cè)定；對(duì)于由十五味中藥材組成的復(fù)方制劑，這樣的鑒別方法顯然難以控制、反映其真實(shí)的質(zhì)量。因此，有必要建立更多專屬性強(qiáng)的鑒別方法，另外尋找適宜的含量測(cè)定方法，從而更好地控制制劑的質(zhì)量，保證患者的用藥安全。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是本發(fā)明所述調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的原料藥組成如下木香10-80重量份川芎10-80重量份醋制延胡索10-80重量份當(dāng)歸30-240重量份熟地黃20-160重量份赤芍20-160重量份紅花15-120重量份烏藥15-120重量份白術(shù)15-120重量份丹參30-240重量份制香附30-240重量份雞血藤30-240重量份甘草水制吳茱萸5-40重量份澤蘭30-240重量份菟絲子40-320重量份本發(fā)明所述調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的原料藥組成優(yōu)選木香41.67重量份川芎41.67重量份醋制延胡索41.67重量份當(dāng)歸125重量份熟地黃83.34重量份赤芍83.34重量份紅花62.5重量份烏藥62.5重量份白術(shù)62.5重量份丹參125重量份制香附125重量份雞血藤125重量份甘草水制吳茱萸20.83重量份澤蘭125重量份菟絲子166.67重量份取上述原料藥，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制備成臨床上可以接受的任一種制劑，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑、緩釋制劑或控釋制劑。本發(fā)明所述中藥復(fù)方膠囊劑的制備工藝是(1)將全部重量份的木香、川芎、醋制延胡索和三分之二重量份的當(dāng)歸粉碎成細(xì)粉。(2)將剩余三分之一重量份的當(dāng)歸與全部重量份的熟地黃、赤芍、紅花、烏藥、白術(shù)、丹參、制香附、甘草水制吳茱萸、澤蘭、雞血藤、菟絲子加水煎煮兩次，第一次3小時(shí)，第二次2小時(shí)，合并水煎液，濾過(guò)，濾液濃縮成稠膏；其中優(yōu)選每次加入10倍量水煎煮，濾液減壓濃縮成6(TC相對(duì)密度為1.32-1.35的稠膏。(3)將步驟2制得的稠膏加入步驟1制得的細(xì)粉，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，每粒裝0.38g。所述中藥復(fù)方膠囊劑口服，一次4粒，一日3次，日服劑量折算成生藥量為15.501g。本發(fā)明中藥復(fù)方不同制劑的日服劑量是確定的，而且不同制劑的日服劑量折算成生藥量是相同的。故本發(fā)明檢測(cè)方法以日用劑量為單位來(lái)稱取檢測(cè)制劑的。本發(fā)明所述中藥復(fù)方制劑的檢測(cè)方法包括如下I、II、III、IV和V的鑒定方法1、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的5/6，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10ia，對(duì)照品溶液2iU，分別點(diǎn)于同一以1X氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為io:6:l的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；n、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的5/6，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材0.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:1的甲苯_甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；ni、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的5/12，研細(xì)，加30-6(TC石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:l的正己烷-乙酸乙酯為展開齊U，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；IV、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的1/4，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:0.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為1:1的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；V、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的5/6，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)ra值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。本發(fā)明所述中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法還包括如下的高效液相色譜法的含量色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5;對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50%甲醇溶液制成每lml含25iig的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述中藥復(fù)方制劑日用劑量的5/3，研細(xì)，稱取細(xì)粉約日用劑量的5/18，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20iU，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得；所述中藥復(fù)方制劑日用劑量的1/12含赤芍以芍藥苷C23H28Ou計(jì)，不得少于0.30mg。本發(fā)明所述膠囊劑的質(zhì)量檢測(cè)方法包括如下I、II、III、IV和V的鑒定方法1、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10iU，對(duì)照品溶液2ia，分別點(diǎn)于同一以ix氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為i0:6:i的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材0.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:1的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；ni、取所述膠囊劑內(nèi)容物2g，研細(xì)，加30-6(TC石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:1的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；IV、取所述膠囊劑內(nèi)容物1.2g，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ia，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:o.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為1:1的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；V、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)m值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。本發(fā)明所述膠囊劑的質(zhì)量檢測(cè)方法還包括如下的高效液相色譜法的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5;對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50%甲醇溶液制成每lml含25iig的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述膠囊劑內(nèi)容物7.6g，研細(xì)，稱取細(xì)粉約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20ia，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得；所述膠囊劑每粒含赤芍以芍藥苷C23H28Ou計(jì)，不得少于0.30mg。調(diào)經(jīng)活血片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)((WS3-B-0614_91)中，片劑中延胡索乙素以毒性大的苯為提取溶劑，本發(fā)明以甲醇為提取溶劑，超聲處理30分鐘，以此取代毒性大的苯，降低了毒性；實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，此前處理方法可行。另外，該標(biāo)準(zhǔn)中薄層色譜采用普通硅膠G薄層板，展開劑添加二乙胺以保持展開時(shí)的堿性環(huán)境，但該方法受環(huán)境的溫度、濕度影響大。本發(fā)明采用以l^氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板，以正己烷-氯仿-甲醇(10:6:l)為展開劑，不滴加二乙胺，展開后，置碘蒸氣中熏，置紫外燈(365nm)下檢視斑點(diǎn)圓整，分離效果好，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，色譜特征明顯；薄層展開受環(huán)境影響小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更穩(wěn)定。本發(fā)明所述延胡索薄層鑒別(鑒別方法I)中，甲醇提取液蒸干后得到的水溶液，只要加濃氨試液調(diào)至ra>7，即可實(shí)現(xiàn)延胡索乙素從水相轉(zhuǎn)移至有機(jī)溶劑的乙醚相，從而在薄層色譜中檢視出延胡索乙素的斑點(diǎn)。本發(fā)明所述薄層鑒別II、III、V無(wú)論采用市售的預(yù)制硅膠G薄層板，還是采用手工鋪制的薄層板，都可以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明所述的分離效果；薄層鑒別I、IV由于對(duì)粘合劑有特殊要求，則采用手工鋪制的薄層板。與現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)比，本發(fā)明增加了木香、川芎、當(dāng)歸、紅花對(duì)照藥材和丹參中原兒茶醛的鑒別，以及芍藥苷的含量測(cè)定，兼顧了以原粉入藥和水提浸膏入藥的兩部分藥材，從而使該質(zhì)量檢測(cè)方法更全面地控制所述中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量。下面通過(guò)實(shí)驗(yàn)說(shuō)明所述膠囊劑的制劑工藝條件的優(yōu)選，并以膠囊劑為例說(shuō)明本發(fā)明所述質(zhì)量檢測(cè)方法的建立。實(shí)驗(yàn)例1所述膠囊劑制劑工藝的優(yōu)選現(xiàn)有的調(diào)經(jīng)活血片的制備工藝中未對(duì)每次煎煮加水量進(jìn)行規(guī)定，而加水量的多少直接影響制劑的質(zhì)量。本發(fā)明采用調(diào)經(jīng)活血片處方單倍量，以干浸膏得率和芍藥苷的含量作為考察指標(biāo)，對(duì)加水量進(jìn)行考察。實(shí)驗(yàn)分組以及結(jié)果見表1。表1加水量考察表<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，煎煮加水量為8倍時(shí)干膏得率和芍藥苷含量均較低，加水量10倍和12倍時(shí)，干膏得率和芍藥苷含量相差不大，根據(jù)生產(chǎn)中節(jié)能降耗實(shí)際情況，確定加水量?jī)?yōu)選10倍。由于木香、當(dāng)歸、川芎含有較多活性揮發(fā)性成分，并以原粉入藥，因此水煎煮提取的藥液濃縮時(shí)，清膏的相對(duì)密度可以相對(duì)稠些，還易于濕法制粒，故濃縮稠膏的相對(duì)密度優(yōu)選1.32-1.35(60°C)。濕法制粒得到的顆粒干燥時(shí)，為了防止木香、當(dāng)歸、川芎所含活性揮發(fā)性成分散失，干燥溫度控制在60°C。實(shí)驗(yàn)例2延胡索薄層鑒別的專屬性試驗(yàn)取處方中不含延胡索的其它藥材按照說(shuō)明書記載的制備方法制成陰性樣品，取供試品3.8g，陰性樣品3.4g，延胡索乙素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110726-200208)按說(shuō)明書所述的方法配制成供試品溶液、陰性樣品溶液、對(duì)照品溶液。吸取供試品溶液10ia，對(duì)照品溶液2iU，分別點(diǎn)于同一以1X氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為io:6:i的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；陰性樣品色譜中與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上無(wú)相應(yīng)的斑點(diǎn)。說(shuō)明陰性無(wú)干擾。(見圖l)實(shí)驗(yàn)例3木香薄層鑒別的專屬性試驗(yàn)取處方中不含木香的其它藥材按照說(shuō)明書記載的制備方法制成陰性樣品，取供試品3.8g，陰性樣品3.4g，木香對(duì)照藥材(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120921-20405)0.3g按說(shuō)明書所述的方法配制成供試品溶液、陰性樣品溶液、對(duì)照藥材溶液。吸取上述溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:l的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性樣品色譜中與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上無(wú)相應(yīng)的斑點(diǎn)。說(shuō)明陰性無(wú)干擾。(見圖2)實(shí)驗(yàn)例4當(dāng)歸及川芎薄層鑒別的專屬性試驗(yàn)取處方中不含當(dāng)歸及川芎的其它藥材按照說(shuō)明書記載的制備方法制成陰性樣品，取供試品2g，陰性樣品1.5g，當(dāng)歸對(duì)照藥材(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120927-200310)、川芎對(duì)照藥材(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120918-200406)各O.5g按說(shuō)明書所述的方法配制成供試品溶液、陰性樣品溶液、對(duì)照藥材溶液。吸取上述溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:1的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；陰性樣品色譜中與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上無(wú)相應(yīng)的斑點(diǎn)。說(shuō)明陰性無(wú)干擾。(見圖3)實(shí)驗(yàn)例5紅花薄層鑒別的專屬性試驗(yàn)取處方中不含紅花的其它藥材按照說(shuō)明書記載的制備方法制成陰性樣品，取供試品1.2g，陰性樣品1.2g，紅花對(duì)照藥材(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120906-200308)0.3g按說(shuō)明書所述的方法配制成供試品溶液、陰性樣品溶液、對(duì)照藥材溶液。吸取上述溶液各5ia，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:0.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開齊U，展開，取出，晾干，噴以體積比為i:i的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在1051:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；陰性樣品色譜中與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上無(wú)相應(yīng)的斑點(diǎn)。說(shuō)明陰性無(wú)干擾。(見圖4)實(shí)驗(yàn)例6丹參薄層鑒別的專屬性試驗(yàn)取處方中不含丹參的其它藥材按照說(shuō)明書記載的制備方法制成陰性樣品，取供試品2g，陰性樣品2g，原兒茶醛對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110810-200205)按說(shuō)明書所述的方法配制成供試品溶液、陰性樣品溶液、對(duì)照品溶液。吸取上述溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的氯仿-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；陰性樣品色譜中與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上無(wú)相應(yīng)的斑點(diǎn)。說(shuō)明陰性無(wú)干擾。(見圖5)實(shí)驗(yàn)例7含量測(cè)定1)儀器與試藥島津LC-10ADVP溶劑輸送泵，SPD_10ADVP檢測(cè)器，CT0-10ADVP柱溫箱，PhenomenexC18色譜柱，StartoriusBS電子天平；色譜純甲醇，其它試劑均為分析純；芍藥苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110736-200220)。2)系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，流速0.5-1.Oml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，柱溫30-40°C。照此分析條件，芍藥苷與制劑中的其它組分均能達(dá)到基線分離(見圖6和7)，分離度大于1.5，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。3)波長(zhǎng)選擇取芍藥苷對(duì)照品溶液，置TU-1900UVWin4.0型紫外儀內(nèi)掃描，結(jié)果芍藥苷在230nm處有一吸收峰(見圖8)，故選擇230nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。4)流動(dòng)相的選擇現(xiàn)有技術(shù)中以體積比為40:65的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相；經(jīng)過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，可將芍藥苷與制劑中的其它組分分開(見圖6和7)。5)供試品溶液的制備在提取溶劑種類和體積一定的情況下，超聲處理時(shí)間對(duì)供試品中芍藥苷的浸出率有重要影響，故考察了不同超聲時(shí)間對(duì)供試品含量測(cè)定的影響，試驗(yàn)分組及結(jié)果見表2。表2超聲處理時(shí)間的確定<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由上表可見，超聲提取40分鐘，樣品中的芍藥苷便可充分提出，故確定超聲時(shí)間為40分鐘。6)空白試驗(yàn)取處方中不含赤芍的其它藥材按照說(shuō)明書記載的制備方法制成陰性樣品，再按照說(shuō)明書中記載的供試品溶液制備方法制成陰性樣品溶液，依說(shuō)明書記載的含量測(cè)定方法試驗(yàn)，結(jié)果陰性無(wú)干擾。(見圖9)7)線性關(guān)系考察精密稱取芍藥苷對(duì)照品15.Omg，置50ml容量瓶中，加50%甲醇溶液使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取適量，用50%甲醇溶液稀釋成不同濃度的對(duì)照品溶液6.2iig/ml、14.4iig/ml、18.6iig/ml、24.8iig/ml、31.Oiig/ml。分別精密吸取上不同濃度的對(duì)照品溶液各20iU，按照說(shuō)明書記載的色譜分析條件，測(cè)定峰面積，結(jié)果見表3。表3線性關(guān)系考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，芍藥苷的量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(見圖10)，計(jì)算得回歸方程Y=2489267X-35225,R=0.9996表明芍藥苷在O.124iig-0.620iig范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系。8)精密度試驗(yàn)精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液(18.6iig/ml)20y1，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積(見表4)，RSD=0.59%，表明本法精密度良好。表4精密度試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>9)穩(wěn)定性試驗(yàn)取所述膠囊劑內(nèi)容物約lg，精密稱定，按照說(shuō)明書記載的方法制成供試品溶液，在說(shuō)明書記載的色譜條件下，精密吸取所述供試品溶液20ia，注入液相色譜儀，每隔2小時(shí)進(jìn)樣測(cè)定一次，在8小時(shí)內(nèi)，峰面積基本保持一致，RSD=1.02%。表明芍藥苷在50%甲醇溶液中8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定，結(jié)果見表5。表5穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>10)重復(fù)性試驗(yàn)分別取同一批所述膠囊劑內(nèi)容物5份，精密稱定，按照說(shuō)明書記載的方法制成供試品溶液，在說(shuō)明書記載的色譜條件下，測(cè)定芍藥苷的含量，RSD=0.37%，表明本法重復(fù)性良好，結(jié)果見表6。表6重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>11)加樣回收率試驗(yàn)取同一批已知含量的所述膠囊劑內(nèi)容物5份，每份約0.5g，精密稱定，分別加入芍藥苷對(duì)照品適量，按照說(shuō)明書記載的方法制成供試品溶液，在說(shuō)明書記載的色譜條件下，測(cè)定芍藥苷的含量，計(jì)算回收率，平均回收率為99.7%，RSD=1.57%，表明本法回收率良好，結(jié)果見表7。表7回收率試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>圖l延胡索薄層鑒別，其中l(wèi)為延胡索乙素對(duì)照品，2、3、4為三批樣品，5為陰性樣PIPR圖2是木香薄層鑒別，其中1為木香對(duì)照藥材，2、3、4為三批樣品，5為陰性樣品圖3是當(dāng)歸及川芎薄層鑒別，其中l(wèi)為川芎對(duì)照藥材，2為當(dāng)歸對(duì)照藥材，3、4、5為三批樣品，6為陰性樣品圖4是紅花薄層鑒別，其中1為紅花對(duì)照藥材，2、3、4為三批樣品，5為陰性樣品圖5是丹參薄層鑒別，其中1為原兒茶醛對(duì)照品，2、3、4為三批樣品，5為陰性樣品圖6是芍藥苷對(duì)照品溶液HPLC圖譜圖7是所述膠囊劑供試品溶液HPLC圖譜圖8是芍藥苷對(duì)照品溶液紫外掃描圖圖9是陰性樣品溶液HPLC圖譜圖10是芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線圖木香41.67g當(dāng)歸125g紅花62.5g丹參125g甘草水制吳茱萸20.83g醋制延胡索41.67g赤芍83.34g白術(shù)62.5g雞血藤125g菟絲子166.67g具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果，但本發(fā)明并不限于所述實(shí)施例。實(shí)施例l本發(fā)明膠囊劑川芎41.67g熟地黃83.34g烏藥62.5g制香附125g澤蘭125g以上十五味，將木香、川芎、延胡索及83.33g當(dāng)歸粉碎成細(xì)粉，將41.67g當(dāng)歸與熟地黃等十一味加9倍量水煎煮兩次，第一次3小時(shí)，第二次2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮成6(TC相對(duì)密度1.32-1.35的稠膏，加入上述細(xì)粉混勻，制成顆粒，6(TC干燥，裝入膠囊，制成1000粒，O.38g/粒。服用方法及日服用劑量口服，一次4粒，一天三次。實(shí)施例2本發(fā)明片劑木香20g川芎20g[ono]赤芍40g紅花30g醋制延胡索20g烏藥30g當(dāng)歸60g白術(shù)30g熟地黃40g丹參60g制香附60g雞血藤60g甘草水制吳茱萸10g澤蘭60g菟絲子80g以上十五味，將木香、川芎、延胡索及40g當(dāng)歸粉碎成細(xì)粉，將當(dāng)歸20g與熟地黃等十一味加9倍量水煎煮兩次，第一次3小時(shí)，第二次2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮成6(TC相對(duì)密度1.32-1.35的稠膏，加入上述細(xì)粉及輔料，混勻，制成顆粒，干燥，壓成600片，0.3g/片?？诜淮?片，一天三次。0133]0134]0135]0136]0137]0138]0139]0140]0141]0142]0143]0144]0145]0146]0147]0148]0149]0150]0151]0152]0153]0154]0155]服用方法及日服用劑』實(shí)施例3本發(fā)明顆粒劑木香15g川芎30g醋制延胡索30g當(dāng)歸80g熟地黃60g赤芍80g紅花30g烏藥30g白術(shù)60g丹參70g制香附60g雞血藤80g甘草水制吳茱萸5g澤蘭60g菟絲子120g以上十五味，按照常規(guī)工藝，加入適量輔料，制成顆粒劑，1.Og/袋。服用方法及日服用劑量開水沖服，一次一袋，一天三次。實(shí)施例4本發(fā)明水蜜丸劑木香10g川芎10g醋制延胡索15g當(dāng)歸40g熟地黃30g赤芍25g紅花20g烏藥15g白術(shù)20g丹參40g制香附40g雞血藤60g甘草水制吳茱萸5g澤蘭30g菟絲子40g以上十五味，按照常規(guī)工藝，加入適量輔料，制成水蜜丸劑，6.0g/袋。-次一袋，一天三次c醋制延胡索80g紅花100g制香附200g菟絲子300gt輔料，制成控釋劑。t控制方法當(dāng)歸200g烏藥95g雞血藤240g服用方法及日服劑量實(shí)施例5本發(fā)明控釋劑木香80g川芎80g熟地黃100g赤芍80g白術(shù)120g丹參240g甘草水制吳茱萸20g澤蘭180g以上十五味，按照常規(guī)工藝，加入適j服用方法口服，一天一至二次，。實(shí)施例6實(shí)施例1制備的膠囊劑質(zhì)』鑒別1、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次10ml，合并乙醚夜，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10iU，對(duì)照品溶夜2ia，分別點(diǎn)于同一以ix氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為i0:6:i的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。II、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材0.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:1的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。ni、取所述膠囊劑內(nèi)容物2g，研細(xì)，加30-6(TC石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:l的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。IV、取所述膠囊劑內(nèi)容物1.2g，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ia，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:o.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為1:1的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。V、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)m值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5。對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50%甲醇溶液制成每lml含25iig的溶液，即得。供試品溶液的制備取所述膠囊劑內(nèi)容物7.6g，研細(xì)，稱取細(xì)粉約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20ia，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。所述膠囊劑每粒含赤芍以芍藥苷C23H28Ou計(jì)，不得少于0.30mg。實(shí)施例7實(shí)施例2制備的片劑的質(zhì)量控制方法1、取所述片劑3.75g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10iU，對(duì)照品溶液2yl，分別點(diǎn)于同一以l^氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為10:6:l的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。n、取所述片劑3.75g，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材O.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:1的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。ni、取所述片劑1.9g，研細(xì)，加30-6(TC石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:l的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。IV、取所述片劑1.lg，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:o.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為i:i的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。V、取所述片劑3.75g，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)Kl值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5。對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50%甲醇溶液制成每lml含25iig的溶液，即得。供試品溶液的制備取所述片劑IO片，研細(xì)，稱取細(xì)粉約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20ia，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。所述片劑每片含赤芍以芍藥苷C23H28Ou計(jì)，不得少于0.23mg。實(shí)施例8實(shí)施例3制備的顆粒劑的質(zhì)量控制方法鑒別1、取所述顆粒劑的日用劑量的5/6，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次lOrnl，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10iU，對(duì)照品溶液2iU，分別點(diǎn)于同一以1X氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為10:6:1的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。II、取所述顆粒劑的日用劑量的5/6，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材O.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:1的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。ni、取所述顆粒劑的日用劑量的5/12，研細(xì)，加30-6(TC石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥村、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:l的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。IV、取所述顆粒劑的日用劑量的1/4，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:o.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為1:1的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。V、取所述顆粒劑的日用劑量的5/6，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)ra值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5。對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50%甲醇溶液制成每lml含25iig的溶液，即得。供試品溶液的制備取所述顆粒劑日用計(jì)量的5/3，研細(xì)，稱取細(xì)粉約日用劑量的5/18，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20ia，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。所述顆粒劑日用劑量的1/12含赤芍以芍藥苷C23H28Ou計(jì)，不得少于0.30mg。實(shí)施例9實(shí)施例4制備的水蜜丸劑的質(zhì)量控制方法鑒別I、取所述水蜜丸劑的日用劑量的5/6，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10iU，對(duì)照品溶液2iU，分別點(diǎn)于同一以1X氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為10:6:1的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。II、取所述水蜜丸劑的日用劑量的5/6，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材O.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:1的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。ni、取所述水蜜丸劑的日用劑量的5/12，研細(xì)，加30-6(TC石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:l的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。IV、取所述水蜜丸劑的日用劑量的1/4，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:o.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為1:1的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。V、取所述水蜜丸劑的日用劑量的5/6，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)ra值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn),權(quán)利要求一種原料藥組成如下的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，木香10-80重量份，川芎10-80重量份，醋制延胡索10-80重量份，當(dāng)歸30-240重量份，熟地黃20-160重量份，赤芍20-160重量份，紅花15-120重量份，烏藥15-120重量份，白術(shù)15-120重量份，丹參30-240重量份，制香附30-240重量份，雞血藤30-240重量份，甘草水制吳茱萸5-40重量份，澤蘭30-240重量份，菟絲子40-320重量份；所述中藥復(fù)方制劑是指取上述原料藥，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制備成臨床上可以接受的任一種制劑；其特征在于所述質(zhì)量檢測(cè)方法包括如下I、II、III、IV和V的鑒定方法I、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的5/6，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以1％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為10∶6∶1的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的5/6，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材0.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27∶1的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；III、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的5/12，研細(xì)，加30-60℃石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9∶1的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；IV、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的1/4，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7∶2∶3∶0.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為1∶1的20％亞硝酸鈉溶液-30％鉬酸鈉溶液混合液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；V、取所述中藥復(fù)方制劑的日用劑量的5/6，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)PH值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60∶5∶2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述的檢測(cè)方法還包括如下的高效液相色譜法的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22∶78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5；對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50％甲醇溶液制成每1ml含25μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述中藥復(fù)方制劑日用劑量的5/3，研細(xì)，稱取細(xì)粉約日用劑量的5/18，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50％甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得；所述中藥復(fù)方制劑日用劑量的1/12含赤芍以芍藥苷C23H28O11計(jì)，不得少于0.30mg。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述的檢測(cè)方法還包括如下的高效液相色譜法的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5;對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50X甲醇溶液制成每lml含25i！g的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述中藥復(fù)方制劑日用劑量的5/3，研細(xì)，稱取細(xì)粉約日用劑量的5/18，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20iU，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得；所述中藥復(fù)方制劑日用劑量的1/12含赤芍以芍藥苷C23H28On計(jì)，不得少于0.30mg。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述的中藥復(fù)方制劑是通過(guò)如下方法制備的膠囊劑(1)將全部重量份的木香、川芎、醋制延胡索和三分之二重量份的當(dāng)歸粉碎成細(xì)粉；(2)將剩余三分之一重量份的當(dāng)歸與全部重量份的熟地黃、赤芍、紅花、烏藥、白術(shù)、丹參、制香附、甘草水制吳茱萸、澤蘭、雞血藤、菟絲子加水煎煮兩次，第一次3小時(shí)，第二次2小時(shí)，合并水煎液，濾過(guò)，濾液濃縮成稠膏；(3)將步驟2制得的稠膏加入步驟1制得的細(xì)粉，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，每粒裝O.38g。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述膠囊劑制備步驟2中，加入10倍量水煎煮兩次；所述濾液減壓濃縮成6(TC相對(duì)密度為1.32-1.35的稠膏；所述顆粒干燥溫度為60°C。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述膠囊劑的檢測(cè)方法包括如下I、II、III、IV和V的鑒定方法I、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10iU，對(duì)照品溶液2yl，分別點(diǎn)于同一以l^氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為10:6:l的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；n、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材0.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:1的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；III、取所述膠囊劑內(nèi)容物2g，研細(xì)，加30-6(TC石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:l的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；IV、取所述膠囊劑內(nèi)容物1.2g，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:o.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為1:1的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；V、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)ffl值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述膠囊劑的檢測(cè)方法還包括如下的照高效液相色譜法的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5;對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50X甲醇溶液制成每lml含25i！g的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述膠囊內(nèi)容物7.6g，研細(xì)，稱取細(xì)粉約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20iU，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得；所述膠囊劑每粒含赤芍以芍藥苷C23H28On計(jì)，不得少于0.30mg。7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述膠囊劑的檢測(cè)方法包括如下I、II、III、IV和V的鑒定方法I、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加濃氨試液調(diào)至堿性，用乙醚振搖提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10iU，對(duì)照品溶液2yi，分別點(diǎn)于同一以i^氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以體積比為i0:6:i的正己烷-三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏約3分鐘，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，研細(xì)，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對(duì)照藥材0.3g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為27:1的甲苯-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；III、取所述膠囊劑內(nèi)容物2g，研細(xì)，加30-6(TC石油醚10ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材各0.5g，同法分別制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5ii1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:l的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；IV、取所述膠囊劑內(nèi)容物1.2g，研細(xì)，加正丁醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材0.3g，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml，加水飽和的正丁醇20ml，振搖提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為7:2:3:o.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積比為1:1的20%亞硝酸鈉溶液-30%鉬酸鈉溶液混合液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；V、取所述膠囊劑內(nèi)容物3.8g，加水20ml，研磨10分鐘，離心，取上清液加鹽酸調(diào)ffl值至2，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為60:5:2的三氯甲烷-丙酮-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的調(diào)經(jīng)活血中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述膠囊劑的檢測(cè)方法還包括如下的照高效液相色譜法的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為22:78的甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，芍藥苷峰與相鄰峰的分離度大于1.5;對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加50X甲醇溶液制成每lml含25i！g的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述膠囊內(nèi)容物7.6g，研細(xì)，稱取細(xì)粉約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再次稱定重量，用50%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20iU，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得；所述膠囊劑每粒含赤芍以芍藥苷C23H280n計(jì)，不得少于0.30mg。全文摘要本發(fā)明公開了一種木香、川芎、醋制延胡索、當(dāng)歸、熟地黃、赤芍、紅花、烏藥、白術(shù)、丹參、制香附、菟絲子、甘草水制吳茱萸、澤蘭和雞血藤等十五味原料藥組成的具有調(diào)經(jīng)活血作用的中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法。該方法包括延胡索、木香、川芎、當(dāng)歸、紅花、丹參的薄層鑒別和赤芍的含量測(cè)定，從而能夠更好地控制所述中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量。文檔編號(hào)A61K36/8905GK101716270SQ20091018682公開日2010年6月2日申請(qǐng)日期2009年12月28日優(yōu)先權(quán)日2009年12月28日發(fā)明者劉曉鵬,劉紅英,陳云輝申請(qǐng)人:江西新贛江藥業(yè)有限公司