專利名稱：用于治療女性生殖道病毒感染的藥物及其緩釋制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域 ，涉及一種外用 藥物及其緩釋制劑的制備方法，尤其 涉及一種用于治療女性生殖道病毒感染的藥物及其緩釋制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
陰道炎和子宮頸炎是女性生殖道的一種持續(xù)性炎癥，通常發(fā)生于生殖期年齡女 性，是婦科最常見(jiàn)的疾病，常因其治療不徹底，或未針對(duì)病原體治療，使病情遷延所 致。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實(shí)，細(xì)菌、病毒感染是陰道炎、宮頸炎及宮頸糜爛的主要原因之一，常 見(jiàn)的病原體有葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌、厭氧菌、人乳頭狀瘤病毒(HPV)、沙眼 衣原體(CT)、單純皰疹病毒(HSV-n)等，其中HPV在眾多病因中占主導(dǎo)地位。并且 HPV與宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(CIN)及宮頸癌密切相關(guān)，由宮頸糜爛通過(guò)CIN，可發(fā)展為 宮頸癌。目前，宮頸糜爛的治療方法以局部治療為主，主要如下方法1、采用物理方法 治療，包括電熨、冷凍治療、激光治療、微波治療等方法，靠特種光的生物光熱效應(yīng)和 光生化效應(yīng)，使組織蛋白凝固、變性、壞死、脫落，網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬能力增強(qiáng)，生物 免疫能力提高，進(jìn)而促進(jìn)炎癥產(chǎn)物和細(xì)菌毒素的排除和組織的再生修復(fù)。但物理方法治 療也存在很多問(wèn)題如治療后，宮頸口狹窄甚閉鎖，有的患者出現(xiàn)體弱乏力、頭暈、甚 至心搏驟停等癥狀；此外陰道排液及出血時(shí)間長(zhǎng)，易造成感染，亦給患者帶來(lái)不便，此 外采用物理方法還要對(duì)儀器選擇適應(yīng)癥有了解并通過(guò)技術(shù)熟練專業(yè)人員來(lái)操作。2、采用 藥物治療a)傳統(tǒng)中藥有治糜靈栓、月宮栓、瓦松栓、復(fù)方沙棘籽油栓等，另有各種 方劑，但都存在治愈率均較低，但療效較慢的問(wèn)題。b)其他藥物10%-20%硝酸銀、 重絡(luò)酸鉀、奧平栓、普達(dá)非倫脂、5-氟尿嘧啶和爭(zhēng)光霉素等。這些藥物雖然有一定的治 療作用，但效果不明顯，對(duì)宮頸糜爛面的修復(fù)也不完全，而且用藥后還經(jīng)常復(fù)發(fā)，不能 根治。宮頸息肉也是婦女宮頸病變最常見(jiàn)的疾病之一，與陰道炎癥、慢性宮頸炎(宮 頸糜爛)，特別是長(zhǎng)期被HPV，HSV和EB病毒感染有關(guān)。目前宮頸息肉的治療以手術(shù) 摘除為主，藥物、物理療法療效不佳。當(dāng)息肉較大或合并嚴(yán)重的宮頸炎時(shí)，需行子宮全 切術(shù)。但在手術(shù)摘除息肉后，炎癥病灶并未根除，復(fù)發(fā)率比較高。宮頸癌是婦女最常見(jiàn)的惡性腫瘤，一旦發(fā)生，存活率低，致死速度快，殘酷威 脅患者的生命。經(jīng)國(guó)際醫(yī)學(xué)界研究證實(shí)，人乳頭瘤病毒(Humanpapillomavirs，HPV)的 感染是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的元兇。HPV感染是一種通過(guò)性生活傳播的傳染病，感染基數(shù) 大。據(jù)查，我國(guó)婦女患不同程度的子宮頸糜爛的比例高達(dá)90%，除了其它病因之外，其 與HPV感染相關(guān)。在高達(dá)84%的HPV感染婦女人群中，大約10-15處于持續(xù)感染的狀 態(tài)，具有宮頸癌發(fā)生的危險(xiǎn)。如果在癌變之前，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和撲滅病毒，就能有效的預(yù)防 宮頸癌的發(fā)生。
目前抗HPV和HSV等病毒主要采取干擾素治療，干擾素的作用機(jī)理不是直接阻 斷病毒的復(fù)制，而是通過(guò)與細(xì)胞受體結(jié)合，激活一系列基因，使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒物質(zhì)， 進(jìn)而發(fā)揮抗病毒作用。在治療中，會(huì)產(chǎn)生生理性的低反應(yīng)期，或產(chǎn)生暫時(shí)性白細(xì)胞、血 小板下降和輕度肝異常等副作用，不利于治療，效果并不很理想。

發(fā)明內(nèi)容
本 發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于，針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在副作用較大、易復(fù)發(fā)或療效 不理想等缺陷，提供一種有效預(yù)防和清除女性生殖道致病病毒、療效確切、對(duì)皮膚黏膜 無(wú)刺激作用，無(wú)副作用、安全可靠的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物。本發(fā)明進(jìn)一步要解決的技術(shù)問(wèn)題在于，提供一種制備工藝簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便的用 于治療女性生殖道病毒感染的藥物及其緩釋制劑的制備方法。本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是一種用于治療女性生殖道病毒感 染的藥物，主要由以下重量份數(shù)的原料制成蘆薈提取物 0.05-15板藍(lán)根提取物 0.1-15仙人掌提取物 0.1-15抗病毒生物活性物質(zhì)0.1-10免疫活性及穩(wěn)定保護(hù)劑40-95高分子載體 0-10其中，所述抗病毒生物活性物質(zhì)為天然商陸抗病毒蛋白、重組商陸抗病毒蛋白 及其突變體蛋白、角叉聚糖、硫酸多糖、重組人干擾素中的至少一種；所述免疫活性物 質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑為植物多糖和甘露醇、PEG、乳糖、海藻糖、山梨醇、葡聚糖、糊精、 Vc中的至少一種組成的混合物；所述的高分子載體為羥丙甲基纖維素、卡波姆、卡拉 膠、藻朊酸鹽、果膠、木糖葡聚糖和聚卡波非中的一種或幾種。用于治療女性生殖道病毒感染的藥物中，植物多糖為蘆薈多糖、香姑多糖、靈 芝多糖、甘草多糖、黃芪多糖、黃原膠、瓜耳膠、阿拉伯膠、角叉菜中的至少一種。免 疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑通過(guò)與藥物之間通過(guò)分子間作用力，有效維持和穩(wěn)定藥物活性 結(jié)構(gòu)，使藥效穩(wěn)定持久，同時(shí)增加藥物貯藏穩(wěn)定性。免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑可以 用在本發(fā)明藥物中，也可用在其它藥物中，具有保護(hù)藥物活性結(jié)構(gòu)，增加藥物穩(wěn)定等功 能。用于治療女性生殖道病毒感染的藥物中，所述的硫酸多糖為卡拉膠多糖、卡拉 膠寡糖及其衍生物中的至少一種。用于治療女性生殖道病毒感染的藥物中，原料中還有重量份數(shù)為0.01-1的殺菌 抑菌劑。用于治療女性生殖道病毒感染的藥物中，原料中還有重量份數(shù)為0.01-10的硝基 咪唑類抗原蟲(chóng)抗厭氧菌藥物。用于治療女性生殖道病毒感染的藥物中，原料中還有重量份數(shù)為0.01-10的吡咯 類抗真菌藥物。用于治療女性生殖道病毒感染的藥物中，所述原料制成凍干粉劑、泡騰劑、散齊 、片劑、凝膠、洗液、膠囊、涂抹劑、栓劑、膏劑、沖劑、噴霧劑、噴劑、滴丸劑乳
液、溶液或懸浮液的緩釋制劑。用于治療女性生殖道病毒感染的藥物中，所述的凍干粉劑、泡騰劑、散劑、片 劑和膠囊的緩釋制劑與溶解液同時(shí)使用，二者分別獨(dú)立包裝，溶解液為水、生理鹽水、 緩沖液或殺菌抑菌劑溶液，使用前加入溶解液調(diào)制成凝膠或糊劑。制備用于治療女性生殖道病毒感染的藥物及其緩釋劑制備方法，所述的緩釋制劑采用以下重量份數(shù)的原料蘆薈提取物0.05-15板藍(lán)根提取物 0.1-15仙人掌提取物0.1-15抗病毒生物活性物質(zhì) 0.1-10免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑40-95殺菌抑菌劑0.01-1高分子載體0-10增稠劑0-2崩解劑5助流劑0.01。用于治療女性生殖道病毒感染的藥物緩釋制劑的制備方法中，，包括如下步 驟(1)制備蘆薈提取物固態(tài)物將蘆薈提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入免疫活性 物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(2)制備板藍(lán)根提取物固態(tài)物將板藍(lán)根提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入部分 免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(3)制備仙人掌提取物固態(tài)物將仙人掌提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入部分 免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(4)制備抗病毒生物活性物質(zhì)固態(tài)物將抗病毒生物活性物質(zhì)在溶劑介質(zhì)中溶 解，加入部分免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，低溫真空干燥，制得含主藥的 固態(tài)物；(5)將步驟(1)、(2)、(3)和⑷制得的固態(tài)物，根據(jù)等量遞增原則，添加余量 免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑、殺菌抑菌劑、高分子載體、增稠劑、助流劑，混合均勻， 水分控制在0.2%-5%，制備成緩釋型凍干份劑、散劑或凝膠劑；(6)將步驟(1)、(2)、(3)和⑷制得的固態(tài)物，根據(jù)等量遞增原則，添加余量 免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑、殺菌抑菌劑、高分子載體、穩(wěn)定劑、增稠劑、崩解劑、助 流劑，混合均勻，水分控制在0.2%-5%，制備成緩釋型片劑或膠囊。所述蘆薈提取物為蘆薈葉割開(kāi)流出的黃色汁液去除雜質(zhì)后形成的蘆薈黃色汁液 提取物；或?qū)⑻J薈鮮葉除去凝膠部分后其余綠色葉皮部分勻漿、再加入溶劑溶解、過(guò)濾 并離心后取上清液濃縮制成的蘆薈全葉提取物。所述板藍(lán)根提取物的制備方法為取板藍(lán)根藥材粉碎后加以8倍體積水分別浸 提2次，減壓濃縮、干燥后制得板藍(lán)根提取物。
所述仙人掌提取物的制備方法為取仙人掌藥材粉碎后加以6倍體積水分別浸 提2次，減壓濃縮、干燥后制得仙人掌提取物。所述殺菌抑菌劑為葡萄糖洗必泰、醋酸洗必泰、新潔爾滅中的至少一種。所述的增稠劑 為卡拉膠或黃原膠；崩解劑為羥丙甲基纖維素或交聯(lián)羧甲纖維素 鈉；凝膠劑為卡波姆、卡拉膠、藻朊酸鹽、果膠、木糖葡聚糖或聚卡波非；助流劑為二
氧化硅。本發(fā)明采用蘆薈黃色液汁提取物、板藍(lán)根提取物、仙人掌提取物、抗病毒生物 活性物、免疫活性及穩(wěn)定保護(hù)劑、高分子載體為主要原料制成藥物，藥物中的活性成分 蘆薈黃色液汁提取物、板藍(lán)根提取物、仙人掌提取物、抗病毒生物活性物以及免疫活性 及穩(wěn)定保護(hù)劑可以直接阻斷病毒的復(fù)制、抑制病毒與細(xì)胞受體的結(jié)合，并激活機(jī)體免疫 力，有效預(yù)防和清除人乳頭瘤病毒(HPV)，單純皰疹病毒(HSV)、EB病毒和巨細(xì)胞病 毒(HCMV)對(duì)生殖道的感染，促進(jìn)生殖道受損組織修復(fù)。通過(guò)對(duì)小鼠TC-I細(xì)胞(含有 HPV16病毒)和Hela細(xì)胞(含有HPV18病毒)瘤的實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有明顯的抑瘤效果， 細(xì)胞瘤明顯萎縮，可有效防治子宮頸癌；治療病毒性陰道炎、宮頸炎、宮頸息肉，防止 宮頸息肉術(shù)后復(fù)發(fā)。另外，本發(fā)明主要選取天然原料制成的藥物，屬于天然藥物，療效 確切、對(duì)皮膚黏膜無(wú)刺激作用，無(wú)副作用安全可靠。所述的蘆薈黃色液汁提取物中含有的蘆薈大黃素甙、異蘆薈大黃素甙、蘆薈 大黃素等20多種活性物質(zhì)，是天然的殺菌抑菌劑，能殺菌、抑菌、分解毒素，并有效 消除炎癥和促進(jìn)傷口愈合。其中蘆薈大黃素甙(AloctinA)中的有絲分裂活性可使白細(xì) 胞增殖，從而促進(jìn)壞死細(xì)胞脫落，對(duì)創(chuàng)傷有促進(jìn)愈合作用(W.D.Winters在“Economic Botany” (35(1) 9，1981) 一文里報(bào)道)。經(jīng)藥理研究證實(shí)，所述的板藍(lán)根提取液對(duì)流感病毒、乙型肝炎病毒、單純皰疹 病毒、柯薩奇病毒、腎綜合征出血熱病毒、巨細(xì)胞病毒等均有顯著的抑制作用。經(jīng)藥理研究證實(shí)，所述的仙人掌提取液有抑菌作用，抗炎作用，免疫增強(qiáng)作 用，降血糖作用，抗胃潰瘍及抗癌等作用。對(duì)7型腺病毒、4型腺病毒、1型單純皰疹病 毒、副流感病毒、漢坦病毒有明顯抑制作用并無(wú)細(xì)胞毒性。所述的商陸抗病毒蛋白(包括天然商陸抗病毒蛋白、重組商陸抗病毒蛋白及其 突變體蛋白)具有RNA，N-糖苷酶的活性，能專一的從真核生物核糖體60S大亞基的 28sRNA特異位點(diǎn)A-4324切下腺嘌呤，原核生物50S大亞基的23S核糖體RNA的2660 去掉一腺嘌呤，使得其難與蛋白質(zhì)合成的延伸因子EF-2結(jié)合，阻礙了細(xì)胞質(zhì)中蛋白質(zhì)的 合成，直接起到抗病毒的作用。硫酸多糖中的卡拉膠多糖和卡拉膠寡糖是一種天然廣譜抗病毒物質(zhì)，它可通過(guò) 抑制病毒的吸附而發(fā)揮抗病毒作用，是人免疫缺陷病毒(HIV)、單純皰疹病毒(HSV)、 人巨噬細(xì)胞病毒、新培斯病毒等的有效抑制劑；在體內(nèi)，卡拉膠能誘導(dǎo)多形核嗜中性白 細(xì)胞滲入腹膜腔，抑制從腹膜腔到血漿的病毒傳播。飲食中適量的K-卡拉膠可加強(qiáng)先天 免疫力。本發(fā)明的原料中還可以增加吡咯類抗真菌藥物，如益康唑、咪康唑，起到進(jìn)一 步增強(qiáng)復(fù)合劑殺滅真菌的作用。本發(fā)明的原料中還可包括硝基咪唑類抗原蟲(chóng)抗厭氧菌藥物，如甲硝唑、替硝唑，進(jìn)一步增加藥物殺滅滴蟲(chóng)、厭氧菌的功效。本發(fā)明可以采用藥劑學(xué)上適用的所有外用劑型，來(lái)滿足不同病患、不同需求下 的使用。其中采用冷凍干燥技術(shù)與藥物結(jié)合制成的凍干粉劑型，更是具有能保證抗病毒 藥物生物活性穩(wěn)定性的優(yōu)勢(shì)，作為本發(fā)明的首選劑型。本發(fā)明采用緩釋制劑，緩釋制劑將活性物質(zhì)分散或包埋在高分子載體中，通過(guò) 調(diào)節(jié)高分子載體濃度、活性物質(zhì)濃度及兩者間的配比等來(lái)控制活性物質(zhì)的釋放。可使藥 物黏附作 用于患病部位，均衡緩釋，藥效持久、不傷黏膜，無(wú)毒副作用；使用時(shí)舒適滑 潤(rùn)、無(wú)任何灼燒感；徹底清除病毒感染，促進(jìn)組織再生和糜爛潰瘍面修復(fù)愈合。本發(fā)明還可用于有效治療口腔潰瘍、由燙傷、燒傷或其他方式致使皮膚受傷而 導(dǎo)致皮膚糜爛的情況。
具體實(shí)施例方式一、蘆薈黃色汁液提取物的制備本發(fā)明可以選用庫(kù)拉索蘆薈、中華蘆薈、好望角蘆薈、本立蘆薈。切割蘆薈葉片底部，使蘆薈中黃色汁液自然流出，收集后去除雜質(zhì)，制得蘆薈 提取液，將蘆薈提取液干燥后制得蘆薈黃色汁液提取物。二、蘆薈全葉提取物的制備將蘆薈鮮葉除去凝膠部分后將綠色葉皮部分勻漿，加入2倍體積的70%乙醇或 甲醇，放置于60°C水浴中加熱2小時(shí)，然后過(guò)濾，濾液再經(jīng)過(guò)離心機(jī)離心處理，取離心 后的上清液，在60°C下減壓濃縮，最后進(jìn)行冷凍干燥或噴霧干燥，得蘆薈全葉提取物。三、天然商陸抗病毒蛋白的制備取商陸葉子，研磨勻漿后離心，取上清液，采用硫酸胺分級(jí)沉淀和等電點(diǎn)沉淀 技術(shù)分離抗病毒粗蛋白，通過(guò)超濾，層析，分離純化抗病毒蛋白。四、仙人掌提取物的制備仙人掌粉碎后加2倍體積水，分別浸提2次，過(guò)濾除去植物殘?jiān)笫占庶S綠色 透明液體，減壓濃縮、干燥后制得仙人掌提取物。五、板藍(lán)根提取物的制備取板藍(lán)根藥材粉碎后加以6倍體積水分別浸提2次，減壓濃縮、干燥后制得板藍(lán) 根提取物。其余原料均可從市場(chǎng)購(gòu)得，或通過(guò)已知方法制備，在此不再贅述。六、以下通過(guò)實(shí)施例1 11來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明所選用的原料實(shí)施例1、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物10份、板藍(lán)根提取 物2份、仙人掌提取物2份、天然商陸抗病毒蛋白2份、角叉聚糖6份、靈芝多糖與甘露 醇的混合物20份、蘆薈多糖與PEG的混合物25份、海藻酸鈉3份。實(shí)施例2、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物2份、板藍(lán)根提取物 0.1份、仙人掌提取物0.5份、天然商陸抗病毒蛋白1份、天然商陸抗病毒蛋白的突變體蛋 白2份、香姑多糖與乳糖和海藻糖的混合物10份、靈芝多糖與PEG的混合物20份、甘 草多糖與山梨醇、葡聚糖、糊精的混合物20份、木糖葡聚糖3份、果膠6份、葡萄糖洗 必泰5份。
實(shí)施例3、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈全葉提取物15份、板藍(lán)根提取物7 份、仙人掌提取物0.1份、重組商陸抗病毒蛋白0.1份、黃芪多糖與甘露醇的混合物20 份、香姑多糖與Vc的混合物20份、甘草多糖與Vc的混合物20份、木糖葡聚糖5份、 醋酸洗必泰0.01份。實(shí)施例4、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈全葉提取物12份、板藍(lán)根提取物7 份、仙人掌提取物6份、角叉聚糖5份、卡拉膠寡糖5份、蘆薈多糖與山梨醇、葡聚糖、 糊精的混合物30份、靈芝多糖與Vc的混合物20份、黃芪多糖與甘露醇的混合物25份、 甘草多糖與Vc的混合物20份、新潔爾滅1份、替硝唑0.01份、果膠10份。實(shí)施例5、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物7份、蘆薈全葉提取 物8份、板藍(lán)根提取物10份、仙人掌提取物15份、重組人干擾素6份、黃原膠與甘露醇 的混合物28份、靈芝多糖與PEG的混合物26份、益康唑5份、海藻酸鈉10份、甲硝唑 10份。實(shí)施例6、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物11份、板藍(lán)根提取 物12份、仙人掌提取物12份、重組商陸抗病毒蛋白的突變體蛋白1份、卡拉膠多糖衍生 物2.5份、香姑多糖與山梨醇、葡聚糖、糊精的混合物25份、瓜耳膠與PEG的混合物20 份、聚卡波非4份、咪康唑10份。實(shí)施例7、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物13份、板藍(lán)根提取 物4份、仙人掌提取物9份、天然商陸抗病毒蛋白2份、阿拉伯膠與山梨醇、葡聚糖、糊 精的混合物48份、咪康唑0.01份。實(shí)施例8、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物0.05份、板藍(lán)根提 取物15份、仙人掌提取物1份、天然商陸抗病毒蛋白1份、角叉菜與Vc的混合物30份、 靈芝多糖與PEG的混合物20份、甲硝唑6份。實(shí)施例9、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物9份、板藍(lán)根提取物 5份、仙人掌提取物3份、天然商陸抗病毒蛋白3份、角叉聚糖3份、靈芝多糖與乳糖和 海藻糖的混合物25份、蘆薈多糖與Vc的混合物32份、羥丙甲基纖維素5份、海藻酸鈉 3份。實(shí)施例10、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物12份、板藍(lán)根提取 物U份、仙人掌提取物9份、天然商陸抗病毒蛋白1.5份、角叉聚糖6份、靈芝多糖與 Vc的混合物27份、蘆薈多糖與山梨醇、葡聚糖、糊精的混合物38份、卡波姆9份、海 藻酸鈉1份。實(shí)施例11、選用以下重量份數(shù)的原料蘆薈黃色汁液提取物10份、板藍(lán)根提取 物7份、仙人掌提取物5份、卡拉膠寡糖8份、靈芝多糖與Vc的混合物60份、蘆薈多糖 與乳糖和海藻糖的混合物30份。制備用于治療女性生殖道病毒感染的藥物緩釋制劑的方法，采用以下重量份數(shù) 的原料蘆薈提取物0.05-15板藍(lán)根提取物0.1-15仙人掌提取物 0.1-15抗病毒生物活性物質(zhì) 0.1-10
免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑40-95殺菌抑菌劑0.01-1高分子載體0-10增稠劑 0-2崩解劑5助流劑0.01。制備用于治療女性生殖道病毒感染的藥物緩釋制劑的方法中，包括如下步驟(1)制備蘆薈提取物顆粒將蘆薈提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入部分免疫活 性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(2)制備板藍(lán)根提取物顆粒將板藍(lán)根提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入部分免 疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(3)制備仙人掌提取物顆粒將仙人掌提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入部分免 疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(4)制備抗病毒生物活性物質(zhì)顆粒將抗病毒生物活性物質(zhì)在溶劑介質(zhì)中溶 解，加入部分免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，低溫真空干燥，制得含主藥的 固態(tài)物；(5)將步驟(1)、(2)、(3)和(4)制得的顆粒，根據(jù)等量遞增原則，添加余量免 疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑、殺菌抑菌劑、高分子載體、增稠劑、助流劑，混合均勻，水 分控制在0.2%-5%，制備成緩釋型凍干份劑、散劑或凝膠劑；(6)將步驟(1)、(2)、(3)和(4)制得的顆粒，根據(jù)等量遞增原則，添加余量免 疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑、殺菌抑菌劑、高分子載體、穩(wěn)定劑、增稠劑、崩解劑、助流 劑，混合均勻，水分控制在0.2%-5%，制備成緩釋型片劑或膠囊。實(shí)施例12、采用實(shí)施例9中原料制成片劑按實(shí)施例9的原料數(shù)量各自加入部分靈芝多糖與乳糖和海藻糖的混合物、蘆薈 多糖與Vc的混合物，來(lái)制備蘆薈黃色汁液提取物顆粒、藍(lán)根提取物顆粒、仙人掌提取物 顆粒、天然商陸抗病毒蛋白和角叉聚糖顆粒，按照實(shí)施例9的原料數(shù)量加入海藻酸鈉、 羥丙甲基纖維素，再加入淀粉1份、微粉硅膠0.01份，所有原料混合均勻，過(guò)篩，制 粒，過(guò)篩，壓片，0.8g/片。使用方法和使用量陰道用藥，隔天兩片。實(shí)施例13、采用實(shí)施例10中原料制成凍干粉劑按實(shí)施例10的原料數(shù)量各自加入部分靈芝多糖與Vc的混合物、蘆薈多糖與山梨 醇、葡聚糖、糊精的混合物，來(lái)制備蘆薈黃色汁液提取物顆粒、藍(lán)根提取物顆粒、仙人 掌提取物顆粒、天然商陸抗病毒蛋白和角叉聚糖顆粒、按照實(shí)施例10的原料數(shù)量加入海 藻酸鈉、卡波姆混合，凍干、過(guò)篩，制成凍干粉，Ig/支；凍干粉與溶解液同時(shí)使用， 二者分別獨(dú)立包裝，本實(shí)施例的溶解液采用生理鹽水，還可以采用水、磷酸緩沖液或殺 菌抑菌劑溶液。使用方法和使用量陰道用藥，取1支凍干粉，臨用前加溶解液混合成凝膠，
隔天一支。實(shí)施例14、采用實(shí)施例1中原料制成栓劑
按實(shí)施例1的原料數(shù)量各自加入部分靈芝多糖與甘露醇的混合物、蘆薈多糖與 PEG的混合物，來(lái)制備蘆薈黃色汁液提取物顆粒、藍(lán)根提取物顆粒、仙人掌提取物顆 粒、天然商陸抗病毒蛋白和角叉聚糖顆粒、按照實(shí)施例1的原料數(shù)量加入海藻酸鈉，再 加入聚乙二醇1份、聚氧乙烯(40)硬脂酸酯1份、采用熱熔法制備水溶性栓劑。使用方法和使用量陰道用藥，隔天一支。七、本發(fā)明藥物安全性實(shí)驗(yàn)本發(fā)明的藥物經(jīng)海南省疾病預(yù)防控制中心安全性檢測(cè)，具體檢測(cè)方法及結(jié)果如 下(一)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1、多次陰道黏膜刺激試驗(yàn)動(dòng)物新西蘭兔給予受試物后，實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)食與活動(dòng)正常、反應(yīng)敏捷，解剖后 肉眼觀察見(jiàn)陰道黏膜光滑、無(wú)充血和水腫。受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)兔陰道黏膜的刺激指數(shù)為0.1， 其刺激強(qiáng)度分級(jí)屬無(wú)刺激性。2、皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)試驗(yàn)動(dòng)物白化豚鼠給予受試物后，試驗(yàn)組豚鼠進(jìn)食與活動(dòng)正常，皮膚未見(jiàn)紅斑 和水腫，致敏率為0%，未見(jiàn)皮膚變態(tài)反應(yīng)。3、致突變用細(xì)胞遺傳學(xué)方法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變率，以評(píng)價(jià)藥物的致突變 性。成年小鼠用經(jīng)口灌胃方式，共染毒兩次，間隔24h。于第二次染毒后6h處死動(dòng)物。 取骨髓細(xì)胞進(jìn)行染色體畸變分析，結(jié)果表明染色體正常，沒(méi)有誘變性。4、生殖毒性分別對(duì)成年大鼠在妊娠前初期、器官形成期、圍產(chǎn)期、授乳期和按在家兔器官 形成期，通過(guò)灌胃法給藥，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明藥物對(duì)生殖能力、妊娠、分娩、哺乳、新生兒 未見(jiàn)影響。對(duì)幼年雄性大鼠通過(guò)灌胃法給藥，對(duì)生殖能力，精子狀態(tài)無(wú)影響。(二)本發(fā)明藥物的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)本發(fā)明的藥物經(jīng)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所進(jìn)行藥物體內(nèi)、體外 抗HSV、HPV病毒藥效試驗(yàn)1、體外抑制單純皰疹病毒藥效試驗(yàn)本發(fā)明藥物采用病毒細(xì)胞CPE法和MTT染色法，在VERO細(xì)胞培養(yǎng)，測(cè)試其體 外抑制單純皰疹病毒藥效，結(jié)果表明本發(fā)明藥物具有抑制單純皰疹病毒I型和單純皰疹 病毒II型作用。2、抑制小鼠陰道感染單純皰疹I(lǐng)I型病毒的試驗(yàn)方法Balb/c雌性小鼠陰道感染HSV-II型24小時(shí)后，進(jìn)行本發(fā)明凝膠藥物治療六天， 以平均生活日數(shù)，保護(hù)率和延長(zhǎng)生命率，判斷藥物抑制效果。結(jié)果本發(fā)明的藥物體內(nèi)抑制單純皰疹病毒效果略高于陽(yáng)性對(duì)照阿昔洛韋。本發(fā)明的 藥物對(duì)陰道感染HSV-II型小鼠模型的保護(hù)率達(dá)93.34%，轉(zhuǎn)陰率達(dá)76.6%，具有明顯抗病毒效果，并且陰道組織恢復(fù)較好。3.對(duì)小鼠陰道感染單純皰疹I(lǐng)I型病毒治療效果試驗(yàn)方法藥物治療前Balb/c雌性小鼠陰道感染HSV-II型病毒第3天，出現(xiàn)病毒性陰道 炎癥狀如陰道分泌物增多、局部紅腫等。采用棉簽進(jìn)行陰道局部標(biāo)本采集，置于0.5ml 生理鹽水內(nèi)，在VERO細(xì)胞上，進(jìn)行病毒分離。藥物治療過(guò)程中對(duì)死亡小鼠取陰道局部組織并制成10%的懸液樣本，在 VERO細(xì)胞上進(jìn)行病毒分離。藥物治療后停藥1天，對(duì)存活小鼠取陰道局部組織并制成10%的懸液樣本， 在VERO細(xì)胞上進(jìn)行病毒分離。以用藥前、后采集小鼠陰道樣本，分別進(jìn)行病毒分離，測(cè)定病毒TIC50，與病毒 對(duì)照組比較，判斷藥物治療效果。結(jié)果顯示本發(fā)明藥物濃度0.53g/kg以上，對(duì)小鼠病毒性(HSV-II)陰道炎具有 抑制的效果。藥物濃度1.12g/kg以上，對(duì)小鼠病毒性(HSV-II)陰道炎具有治療效果。 與陽(yáng)性對(duì)照藥物阿昔洛韋治療效果一致。兩種藥物經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理無(wú)顯著性差異，P值均 < 0.01。4、對(duì)小鼠體內(nèi)治療HPV病毒的藥效試驗(yàn)(I)TC-I細(xì)胞(含有HPV16病毒)動(dòng)物抑瘤實(shí)驗(yàn)將TC-I細(xì)胞(含有HPV16病毒)注射SCID小鼠右側(cè)腋下肋部，2周后肉眼可 見(jiàn)腫瘤塊，隨機(jī)分組，在腫瘤部位，注射不同濃度的本發(fā)明藥物；陽(yáng)性對(duì)照藥物為無(wú)環(huán) 鳥(niǎo)苷注射液，同時(shí)設(shè)病毒和注射生理鹽水對(duì)照組。每周注射2次，4周后處死小鼠，測(cè)量 瘤體面積及重量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的新型天然藥物對(duì)小鼠TC-I細(xì)胞(含有HPV16 病毒)瘤有明顯的抑瘤效果，細(xì)胞瘤明顯萎縮。(2) Hela細(xì)胞(含有HPV18病毒)動(dòng)物抑瘤實(shí)驗(yàn)將Hela細(xì)胞(含有HPV18病毒)注射SCID小鼠右側(cè)腋下肋部，2周后肉眼可 見(jiàn)腫瘤塊，隨機(jī)分組，在腫瘤部位，注射不同濃度的本發(fā)明的新型天然藥物；陽(yáng)性對(duì)照 藥物為無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷注射液，同時(shí)設(shè)病毒和注射生理鹽水對(duì)照組。每周注射2次，4周后處 死小鼠，測(cè)量瘤體面積及重量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的新型天然藥物對(duì)小鼠Hela細(xì)胞 (含有HPV18病毒)瘤有明顯的抑瘤效果，細(xì)胞瘤明顯萎縮。(三)本發(fā)明藥物臨床療效試驗(yàn)1、使用方法本發(fā)明藥物凝膠劑型，3ml/支。陰道炎隔天一次，療程20天，1個(gè)療程。宮頸糜爛隔天一次，療程20天，2個(gè)療程。宮頸息肉隔天一次，療程20天，3個(gè)療程。宮頸炎隔天一次，療程20天，2-3個(gè)療程。HPV陽(yáng)性隔天一次，療程20天，3個(gè)療程。2、結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種用于治療女性生殖道病毒感染的藥物，其特征在于，主要由以下重量份數(shù)的 原料制成蘆薈提取物0.05-15板藍(lán)根提取物 0.1-15 仙人掌提取物 0.1-15 抗病毒生物活性物質(zhì) 0.1-10 免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑45-95 高分子載體0-10其中所述抗病毒生物活性物質(zhì)包括天然商陸抗病毒蛋白、重組商陸抗病毒蛋白及其 突變體蛋白、重組人干擾素、角叉聚糖、硫酸多糖中的一種或幾種；所述免疫活性物質(zhì) 及穩(wěn)定保護(hù)劑為植物多糖與甘露醇、PEG、乳糖、海藻糖、山梨醇、葡聚糖、糊精、Vc 中的至少一種組成的混合物；所述高分子載體為羥丙甲基纖維素、卡波姆、卡拉膠、藻 朊酸鹽、果膠、木糖葡聚糖和聚卡波非的一種或幾種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物，其特征在于，所述的 植物多糖為蘆薈多糖、香姑多糖、靈芝多糖、甘草多糖、黃芪多糖、黃原膠、瓜耳膠、 阿拉伯膠、角叉菜中的至少一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物，其特征在于，所述的 硫酸多糖為卡拉膠多糖、卡拉膠寡糖及其衍生物中的至少一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物，其特征在于，原料中 還有重量份數(shù)為0.01-1的殺菌抑菌劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物，其特征在于，原料中 還有重量份數(shù)為0.01-10的硝基咪唑類抗原蟲(chóng)抗厭氧菌藥物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物，其特征在于，原料中 還有重量份數(shù)為0.01-10的吡咯類抗真菌藥物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1 6任意一項(xiàng)所述的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物，其特征 在于，所述原料制成凍干粉劑、泡騰劑、散劑、片劑、凝膠、洗液、膠囊、涂抹劑、栓 劑、膏劑、沖劑、噴霧劑、噴劑、滴丸劑乳液、溶液或懸浮液的緩釋制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物，其特征在于，所述的 凍干粉劑、泡騰劑、散劑、片劑和膠囊的緩釋制劑與溶解液同時(shí)使用，二者分別獨(dú)立包 裝，溶解液為水、生理鹽水、緩沖液或殺菌抑菌劑溶液，使用前加入溶解液調(diào)制成凝膠 或糊劑。
9.制備用于治療女性生殖道病毒感染的藥物緩釋制劑的方法，其特征在于，采用以 下重量份數(shù)的原料蘆薈提取物0.05-15板藍(lán)根提取物 0.1-15 仙人掌提取物 0.1-15 抗病毒生物活性物質(zhì) 0.1-10 免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑40-95 殺菌抑菌劑0.01-1高分子載體0-10增稠劑0-2崩解劑5助流劑0.01。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備用于治療女性生殖道病毒感染的藥物緩釋制劑的方 法，其特征在于，包括如下步驟(1)制備蘆薈提取物固態(tài)物將蘆薈提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入部分免疫活性 物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(2)制備板藍(lán)根提取物固態(tài)物將板藍(lán)根提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入部分免疫 活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(3)制備仙人掌提取物固態(tài)物將仙人掌提取物在溶劑介質(zhì)中溶解，加入部分免疫 活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，真空干燥，制得含主藥的固態(tài)物；(4)制備抗病毒生物活性物質(zhì)固態(tài)物將抗病毒生物活性物質(zhì)在溶劑介質(zhì)中溶解， 加入部分免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑，均勻攪拌后，低溫真空干燥，制得含主藥的固態(tài) 物；(5)將步驟(1)、(2)、(3)和⑷制得的固態(tài)物，根據(jù)等量遞增原則，添加余量的免 疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑、殺菌抑菌劑、高分子載體、增稠劑、助流劑，混合均勻，水 分控制在0.2%-5%，制備成緩釋型凍干份劑、散劑或凝膠劑；(6)將步驟(1)、(2)、(3)和⑷制得的固態(tài)物，根據(jù)等量遞增原則，添加殺菌抑菌 劑、高分子載體、余量的免疫活性物質(zhì)及穩(wěn)定保護(hù)劑、增稠劑、崩解劑、助流劑，混合 均勻，水分控制在0.2%-5%，制備成緩釋型片劑或膠囊。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于治療女性生殖道病毒感染的藥物及其緩釋制劑的制備方法，藥物主要由以下原料制成蘆薈提取物、板藍(lán)根提取物、仙人掌提取物、抗病毒生物活性物質(zhì)、免疫活性及穩(wěn)定保護(hù)劑、高分子載體。制備方法為先分別將蘆薈提取物、板藍(lán)根提取物、仙人掌提取物、抗病毒生物活性物質(zhì)制成固態(tài)物，再與其他輔劑制成各種緩釋制劑。本發(fā)明提供一種有效預(yù)防和清除女性生殖道致病病毒、療效確切、對(duì)皮膚黏膜無(wú)刺激作用，無(wú)副作用、安全可靠的用于治療女性生殖道病毒感染的藥物及其緩釋制劑的制備方法。
文檔編號(hào)A61P15/00GK102008628SQ200910190118
公開(kāi)日2011年4月13日 申請(qǐng)日期2009年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月8日
發(fā)明者張春發(fā), 張耀之, 楊衛(wèi)帆, 王桂玉, 鄧柳紅 申請(qǐng)人:深圳市隆陽(yáng)生物科技有限公司