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      川芎或其提取物在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用的制作方法

      文檔序號(hào):1154886閱讀:323來(lái)源:國(guó)知局
      專利名稱:川芎或其提取物在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及川芎或其提取物延緩衰老的新用途,特別涉及川芎或其提取物在制備 延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      隨著人口老齡化形勢(shì)日趨嚴(yán)峻,衰老機(jī)制、延緩衰老藥物研究已經(jīng)成為生命科學(xué) 的熱點(diǎn)和重點(diǎn)問(wèn)題。衰老的機(jī)制復(fù)雜、學(xué)說(shuō)繁多,迄今為止,解釋衰老機(jī)理的理論或?qū)W說(shuō) 多達(dá)200余種,其中包括遺傳控制說(shuō)、細(xì)胞端粒說(shuō)、自由基損傷說(shuō)、體細(xì)胞突變說(shuō)、免疫紊 舌L說(shuō)、線粒體損傷學(xué)說(shuō)等(Fossel M. Cell Senescence in HmanAging and Disease. In Harman D. (Ed. ) Increasing healthy lifespan, conventionalmeasures and slowing the innate aging process. ANN N Y ACAD SCI,2002,959 :14 23)。其中較為公認(rèn)的延緩 衰老的途徑主要有兩條,一是胰島素信號(hào)傳導(dǎo)途徑(AntebiA. Inside insulin signaling, communication is key to long life[J]. SciAgingKnowledge environ,2004, (23) pe25) ;二是熱量限制途徑(Koen Houthoofd, JacquesR. Vanfleteren. The longevity effect of dietary restriction in Caenorhabditis elegans[J]. Experimental Gerontology,2006(41) : 1026-1031)。川彎(Ligusticum chuanxiong Hort.)為常用傳統(tǒng)中藥,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,性 溫味辛,歷代醫(yī)家多用于活血行氣、祛風(fēng)止痛。2005年版《中國(guó)藥典》I部收載的564種成 方制劑和單味制劑中,使用川芎的有85種,約占藥典收載中成藥的15%,川芎在臨床的廣 泛應(yīng)用促進(jìn)了對(duì)其新的藥效功能的開發(fā)及相關(guān)機(jī)制研究。盡管川芎在老年性疾病的治療中 廣泛應(yīng)用并取得較好的療效,但對(duì)其延緩衰老作用的研究未見報(bào)道。秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans,簡(jiǎn)稱線蟲)是一種相對(duì)簡(jiǎn)單 的多細(xì)胞生物,雌雄同體,是研究衰老的卓越的模式生物(H. Gershon, D. Gershon. Caenorhabditiselegans-a paradigm for aging research :advantages and limitations. Mechanisms of Ageing and De_elopment 123 (2002) 261-274),與其它物種相 比具有以下難以比擬的優(yōu)勢(shì)1)壽命周期短(平均為18 21天),子代數(shù)目多;2)容易培 養(yǎng),觀察及操作方便;3)細(xì)胞高度分化且細(xì)胞譜系清楚;4)是第一個(gè)完成全基因組測(cè)序的 動(dòng)物,其遺傳背景清楚,衰老機(jī)制研究相對(duì)明確。5)與人類同源性較好,編碼的基因中至少 40%在人類基因組中有明顯的同源物?;诰€蟲這一模式生物開發(fā)延緩衰老的傳統(tǒng)中藥不但能進(jìn)一步挖掘中藥的價(jià)值, 而且還能對(duì)延長(zhǎng)人類的壽命作出貢獻(xiàn)。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明的目的是提供)I丨芎或其提取物的新用途。本發(fā)明所提供的川芎或其提取物的新用途有如下四個(gè)1)川芎或川芎提取物在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用;
      2)川芎或川芎提取物在制備調(diào)節(jié)熱量限制通路基因表達(dá)產(chǎn)品中的應(yīng)用;3)川芎或川芎提取物在制備調(diào)節(jié)胰島素信號(hào)通路基因表達(dá)產(chǎn)品中的應(yīng)用;4)川芎或川芎提取物在制備線蟲壽命延長(zhǎng)劑中的應(yīng)用。上述川芎提取物可為川芎水提取物。其中,川芎水提取物可從商業(yè)途徑得到。川 芎水提取物也可按照常規(guī)方法進(jìn)行制備,如可用下述方法得到選取藥材川芎(傘形科植 物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根莖)碎塊,加入5 10倍純水,加熱,煮沸 后保持微沸狀態(tài)繼續(xù)加熱0. 5 1小時(shí),然后過(guò)濾收集濾液1 ;接著在濾渣中再加入5 10 倍純水,加熱,煮沸后保持微沸狀態(tài)繼續(xù)加熱0. 5 1小時(shí),然后過(guò)濾收集濾液2 ;將濾液1 與濾液2混勻,干燥得到川芎水提取物。上述1)、2)和3)的三種產(chǎn)品均可為藥物、保健品或食品添加劑等。所述調(diào)節(jié)熱量限制通路基因表達(dá)可通過(guò)上調(diào)skn-1基因的表達(dá)實(shí)現(xiàn);所述調(diào)節(jié)胰 島素信號(hào)通路基因表達(dá)可通過(guò)上調(diào)hsp-70基因的表達(dá),下調(diào)akt-2和/或tub-1基因的表 達(dá)實(shí)現(xiàn)。其中所述線蟲具體可為秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)。需要的時(shí)候,在上述產(chǎn)品中還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。所述載 體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面 活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等。用川芎提取物制備的延緩衰老藥物、保健品可以制成注射液、片劑、粉劑、顆粒劑、 膠囊、口服液、膏劑、霜?jiǎng)┑榷喾N形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方 法制備。本發(fā)明采用線蟲這一模式生物,以整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)作為檢測(cè)手段,觀察CXE對(duì)線蟲 壽命的影響,發(fā)現(xiàn)多個(gè)濃度CXE對(duì)線蟲均有延壽作用或延壽趨勢(shì),其中25mg/L的延壽效果 最佳,平均壽命和最大壽命均延長(zhǎng)約15%。利用已知的線蟲衰老相關(guān)基因,采用qRT-PCR方 法進(jìn)行延壽的分子機(jī)制研究,表明CXE通過(guò)干預(yù)Insulin/IGF-1通路和限食通路而延長(zhǎng)壽 命,為該藥的分子機(jī)制研究提供了新的內(nèi)容和方向,也為中藥延緩衰老研究提供了新的思 路和手段。


      圖1為實(shí)施例1中的線蟲生存曲線圖。圖2為實(shí)施例2中川芎提取物對(duì)線蟲衰老相關(guān)基因表達(dá)的影響,與act-1比較, P < 0. 05,2)P < 0. 01。圖3為川芎提取物影響線蟲衰老相關(guān)基因表達(dá)的示意圖。
      具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法,如無(wú)特殊說(shuō)明,均為常規(guī)方法;所述試劑和生物材 料,如無(wú)特殊說(shuō)明,均可從商業(yè)途徑獲得。實(shí)施例1、川芎提取物對(duì)秀麗隱桿線蟲壽命的影響試驗(yàn)1 材料1. 1菌株、線蟲
      菌株E. coli 0P50、野生型秀麗隱桿線蟲Bristol (N2)均購(gòu)自線蟲遺傳中心(CGC)。1. 2藥物和試劑川芎提取物按照下述方法進(jìn)行制備選取藥材川芎(傘形科植物川芎 Ligusticumchuanxiong Hort.的干燥根莖)碎塊,加入6倍純水,加熱,煮沸后保持微沸狀 態(tài)繼續(xù)加熱40分鐘,然后過(guò)濾收集濾液1 ;接著在濾渣中再加入6倍純水,加熱,煮沸后保 持微沸狀態(tài)繼續(xù)加熱40分鐘,然后過(guò)濾收集濾液2 ;將濾液1與濾液2混勻,干燥得到的粉 末,即為川芎水提取物。按照該方法,20克生藥制備得到1克川芎水提取物。瓊脂粉(日本協(xié)和株式會(huì)社),5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu) (Sigma),蛋白 月東(peptone)>tryptone(0X0ID),SYBR Green Realtime PCR Master Mix(Toyobo),TRIzol reagent (Invitrogen),反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Promega),其余試劑均為國(guó)產(chǎn)。1. 3 儀器 MIR-553恒溫培養(yǎng)箱(日本SANYO公司),S6E體視顯微鏡(德國(guó)Leica公司), XTS30-D體視顯微鏡(北京泰克儀器有限公司),Rotergene 3000熒光定量PCR儀(澳 大利亞Corbett公司)梯度PCR儀(德國(guó)Eppendorf公司),臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(德國(guó) Eppendorf公司)、G:B0X全自動(dòng)凝膠成像儀(英國(guó)Syngene公司)、MLS-3780高壓滅菌鍋 (日本SANYO公司)等。2 方法2. 1試驗(yàn)分組設(shè)為對(duì)照組和4個(gè)CXE用藥組,將藥物溶于水,配成從低到高濃度依次為12. 5、 25、50和100mg/L的藥物溶液。2. 2線蟲的常規(guī)培養(yǎng)雌雄同體線蟲N2,接種于涂布E. Coli 0P50的標(biāo)準(zhǔn)線蟲培養(yǎng)基(nematode growthmedium,NGM),于20°C恒溫培養(yǎng)。每升培養(yǎng)基含3g氯化鈉、20g瓊脂粉、2. 5g蛋白胨、 lml 膽固醇乙醇溶液(濃度為 5mg/ml)、lml CaCl2 溶液(lmol/L) Uml MgS04 溶液(lmol/L) 和 25ml KP04 溶液(pH = 6)。2. 3壽命實(shí)驗(yàn)2. 3. 1同步化用M9緩沖溶液(每升M9溶液的溶質(zhì)為Na2HP04 5. 8g,KH2P043. 0g, NaCl 0. 5g, NH4C1 1. Og)將年輕成蟲洗至無(wú)菌EP管中,加適量裂解液(0. 5%次氯酸鈉, 0. mol/L氫氧化鈉)裂解線蟲,置低速離心機(jī)上離心(3000rpm,lmin),棄上清,再用M9緩沖 溶液沖洗線蟲2次,離心棄上清后用移液槍吸取EP管底部線蟲滴于NGM的無(wú)菌區(qū),約48小 時(shí)后裂解的線蟲體內(nèi)的受精卵基本發(fā)育成L4期幼蟲,完成同步化用于壽命實(shí)驗(yàn)。2. 3. 2培養(yǎng)基制備對(duì)照組培養(yǎng)基中含12. 5mg/L 5_Fu,藥物組培養(yǎng)基中含12. 5mg/ L 5-Fu和不同濃度的CXE。2. 3. 3壽命實(shí)驗(yàn)挑取同步化的L4線蟲到各組培養(yǎng)基中,每組平均80 110條,每 個(gè)板中約有15條。從轉(zhuǎn)移時(shí)刻起開始計(jì)算線蟲存活天數(shù),轉(zhuǎn)移當(dāng)天記為壽命實(shí)驗(yàn)第0天 (day 0)。每天檢查線蟲,記錄死亡線蟲數(shù),剔除意外死亡、逃逸和囊樣線蟲。線蟲死亡判斷 標(biāo)準(zhǔn)用鉬絲輕觸蟲體,無(wú)任何反應(yīng),即判斷為死亡。以上實(shí)驗(yàn)均重復(fù)兩次。2. 4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用AN0VA方差檢驗(yàn)分析壽命實(shí)驗(yàn)結(jié)果,定量資料以X士S表示;采用兩樣本t檢驗(yàn)方法比較分析目的基因差異表達(dá)。3 結(jié)果與對(duì)照組比較,第1次實(shí)驗(yàn)中,12. 5、25、50、100mg/L CXE均能顯著延長(zhǎng)線蟲的平 均壽命(分別為 15. 4%,29. 7%,23. 3%U7. 1%, P < 0. 01),25mg/L CXE 能顯著延長(zhǎng)線蟲 的最大壽命(9.4%,P < 0.01),50U00mg/L CXE也具有類似作用(1.8%,4.8% );第2次 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與第1次相似,見表1。綜合兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果,25、50、100mg/L CXE均能顯著延長(zhǎng)線蟲 的平均壽命(分別為15. 7%、9. 1%,6.2%,P<0.01)和最大壽命(分別為15. 0%、6. 8%、 6. 6%, P < 0. 01)。表1不同濃度川芎提取物對(duì)線蟲壽命的影響(X士S) 注最大壽命為群體最后生存15%的平均壽命;與對(duì)照組比較,DP < 0. 05,2)P < 0. 01綜合兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果,對(duì)線蟲全程存活情況做生存曲線(見圖1)顯示,25、50、 100mg/L CXE均能使線蟲的生存曲線右移,以25mg/L尤為顯著。實(shí)施例2、川芎提取物延長(zhǎng)秀麗隱桿線蟲壽命的分子機(jī)制1材料、儀器同實(shí)施例1。2實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)實(shí)驗(yàn)分組設(shè)為對(duì)照組和用藥組(壽命實(shí)驗(yàn)中延壽 作用最強(qiáng)組,濃度為25mg/L的CXE溶液)。3延壽的分子機(jī)制研究3. 1線蟲總RNA的提取和cDNA合成對(duì)照組和用藥組各挑取約1000條L4期線蟲到培養(yǎng)基中,飼養(yǎng)10天后,分別收集 各組線蟲,用TRIZ0L法抽提總RNA,RNase free DNase酶切,TRIZ0L法純化后瓊脂糖凝膠 電泳鑒定RNA沒有明顯降解,于-80°C凍存。取2 y g總RNA,用MML-V逆轉(zhuǎn)錄酶按說(shuō)明書進(jìn) 行反轉(zhuǎn)錄。3. 2引物合成對(duì)已知線蟲中與衰老相關(guān)的基因,根據(jù)wormbase公布的序列設(shè)計(jì)合 成PCR引物(北京奧科生物技術(shù)有限責(zé)任公司),序列如下akt_2上游引物 5 ‘ -ATTCAGCGAAGCACGAAC-3 ‘,下游引物5 ‘ -CACAACCCAAAGTCAGTG-3 ‘ ;hsp-70 上游引物5 ‘ -GGGTACTACGTACTCATG-3 ‘,下游引物5 ‘ -ATCACCAACGAGTCTCTC-3 ‘ ;skn-1 上 游引物5 ‘ -AGTGACTGCAACAGCTAC-3 ‘,下游引物5 ‘ -AGAAACGAGACTCGTGAG-3 ‘ ; tub-1 上游引物5 ‘ -TCCAATTGCTCAACCACG-3 ‘,下游引物5 ‘ -AGGGAGTACTTCACTTGG-3 ‘, 并以act-1作為內(nèi)部參照物,其上游引物5 ‘ -AAGACCACGTCATCAAGG-3 ‘,下游引物 5' -TTCTCCATATCATCCCAGTT-3‘。3. 3實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)對(duì)照組和用藥組目的基因表達(dá)差異采用嵌合熒光法檢測(cè)目的基因表達(dá)差異。采用20 u L反應(yīng)體系(SYBR GREENMaster Mix 101^,上游引物、下游引物(101111101)各11^,模板00嫩2iig,以去離子水補(bǔ)足 20 ii L體系)。PCR反應(yīng)條件94 °C預(yù)變性5min,94 °C變性30s,58 °C退火30s,72 °C延伸 30s,共40個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣品均做3次生物學(xué)重復(fù)。采用2_AAGt方法(參見文獻(xiàn)Livak, K.J. ;Schmittgen, T.D.Analysis of relative gene expressiondata using real-time quantitative PCR and the 2 (-AA Ct)method. Methods, 2001, 25 402-408)
      進(jìn)行分析。4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用AN0VA方差檢驗(yàn)分析壽命實(shí)驗(yàn)結(jié)果,定量資料以X士S表示;采用兩樣本t檢 驗(yàn)方法比較分析目的基因差異表達(dá)。5、川芎提取物對(duì)衰老相關(guān)基因表達(dá)的影響25mg/L CXE干預(yù)10天后,線蟲體內(nèi)衰老相關(guān)基因表達(dá)發(fā)生變化,見表2、圖2。與 看家基因act-1相比,用藥后hsp-70、skn-1基因表達(dá)明顯上調(diào),而akt_2、tub_l基因表達(dá) 顯著下調(diào)。表2對(duì)照組和用藥組各目的基因Ct和-AA Ct值
      注Ct值指每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。 表中數(shù)值為3次重復(fù)中的其中1次結(jié)果。
      在衰老的機(jī)制研究中,胰島素和胰島素樣生長(zhǎng)因子-Klnsulin/IGF-l)信號(hào)通路
      是一個(gè)高度保守(包括線蟲、果蠅、小鼠乃至靈長(zhǎng)類動(dòng)物)、研究最為詳盡的壽命調(diào)控環(huán)節(jié) 正常條件下線蟲體內(nèi)釋放多種Insulin/IGF樣肽,這些肽與細(xì)胞表面的受體結(jié)合而在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生一系列的信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng),最終通過(guò)磷酸化DAF-16而抑制其進(jìn)入細(xì)胞核;在外界環(huán)境 發(fā)生變化時(shí)(如饑餓,蟲口過(guò)密)Insulin/IGF-1信號(hào)通路被抑制,導(dǎo)致DAF-16未被磷酸化 而入核,在細(xì)胞核內(nèi)DAF-16發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子的作用而促進(jìn)許多抗逆性基因的表達(dá)而發(fā)揮延 長(zhǎng)壽命的作用,因此與該信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)改變能直接或間接地影響衰老進(jìn)程,調(diào) 控壽命長(zhǎng)短。akt-2編碼的蛋白是絲氨酸/蘇氨酸激酶Akt/PKB的同源物,它位于DAF-16 上游,能磷酸化DAF-16,抑制其進(jìn)入細(xì)胞核,因此,akt-2基因表達(dá)下調(diào)可延長(zhǎng)線蟲壽命。 hsp-70編碼的熱休克蛋白是一種分子伴侶,幫助蛋白正確折疊為天然構(gòu)象,對(duì)壽命發(fā)揮正 調(diào)節(jié)作用。在線蟲體內(nèi),tub-1位于daf-16上游,其低表達(dá)具有延壽作用且該作用依賴于 DAF-16。skn-1基因編碼的蛋白是Nrf2的同源物,它位于Insulin/IGF-1信號(hào)通路下游,該 信號(hào)通路激酶AKT-1,AKT-2等能磷酸化SKN-1而直接抑制其表達(dá);SKN-1能提高機(jī)體抗應(yīng) 激能力,延長(zhǎng)線蟲壽命,且其延壽作用獨(dú)立于DAF-16。限食(即熱量限制)在許多物種中可 引起長(zhǎng)壽,并且可以降低和衰老相關(guān)的疾病發(fā)病率。限食可以促進(jìn)skn-1表達(dá),提高線蟲的 呼吸作用而延長(zhǎng)線蟲壽命。上述基因?qū)€蟲壽命影響的示意圖如圖3所示。本發(fā)明中,CXE通過(guò)上調(diào)Insulin/IGF-1信號(hào)通路中對(duì)延壽具有正調(diào)控作用的 基因,如hsp-70 ;下調(diào)該通路中部分負(fù)調(diào)控壽命的基因,如akt-2、tub-1而發(fā)揮延壽作用; 此外,限食(熱量限制)是一個(gè)公認(rèn)的極好的延壽方法,我們的實(shí)驗(yàn)表明CXE通過(guò)上調(diào)限食 重要調(diào)控基因skn-1而引起長(zhǎng)壽。同時(shí),CXE對(duì)壽命的多種調(diào)控機(jī)制也反映了中藥對(duì)衰老 的影響具有多靶點(diǎn)、多效應(yīng)的特點(diǎn)。 序列表 <160>10 <210>1 <211>18 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223> <400>1
      attcagcgaa gcacgaac18
      <210>2 <211>18 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223> <400>2
      cacaacccaa agtcagtg18
      <210>3
      <211>18
      <212>DNA<213>人工序列 <220> <223> <400>3
      gggtactacg tactcatg
      <210>4
      <211>18
      <212>DNA
      <213>人工序列
      <220>
      <223>
      <400>4
      atcaccaacg agtctctc
      <210>5
      <211>18
      <212>DNA
      <213>人工序列
      <220>
      <223>
      <400>5
      agtgactgca acagctac <210>6 <211>18 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223> <400>6
      agaaacgaga ctcgtgag
      <210>7
      <211>18
      <212>DNA
      <213>人工序列
      <220>
      <223>
      <400>7
      tccaattgct caaccacg
      <210>8
      <211>18
      18
      18
      18<212>DNA <213>人工序列 <220> <223> <400>8
      agggagtact tcacttgg18
      <210>9
      <211>18
      <212>DNA
      <213>人工序列
      <220>
      <223>
      <400>9
      aagaccacgt catcaagg18
      <210>10 <211>20 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223> <400>10
      ttctccatat catcccagtt20
      權(quán)利要求
      川芎或川芎提取物在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于所述產(chǎn)品為藥物、保健品或食品添加劑。
      3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用,其特征在于所述川芎提取物為川芎水提取物。
      4.川芎或川芎提取物在制備調(diào)節(jié)熱量限制通路基因表達(dá)或調(diào)節(jié)胰島素信號(hào)通路基因 表達(dá)的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于所述產(chǎn)品為藥物、保健品或食品添加劑。
      6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的應(yīng)用,其特征在于所述調(diào)節(jié)熱量限制通路基因表達(dá)通 過(guò)上調(diào)skn-1基因的表達(dá)實(shí)現(xiàn);所述調(diào)節(jié)胰島素信號(hào)通路基因表達(dá)通過(guò)上調(diào)hsp-70基因的 表達(dá),下調(diào)akt-2和/或tub-1基因的表達(dá)實(shí)現(xiàn)。
      7.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任一所述的應(yīng)用,其特征在于所述川芎提取物為川芎水提 取物。
      8.川芎或川芎提取物在制備線蟲壽命延長(zhǎng)劑中的應(yīng)用。
      9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于所述線蟲為秀麗隱桿線蟲。
      10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用,其特征在于所述川芎提取物為川芎水提取物。
      全文摘要
      本發(fā)明公開了川芎或其提取物的新用途。川芎或其提取物的新用途有如下四個(gè)1)在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用;2)在制備調(diào)節(jié)熱量限制通路基因表達(dá)產(chǎn)品中的應(yīng)用;3)在制備調(diào)節(jié)胰島素信號(hào)通路基因表達(dá)產(chǎn)品中的應(yīng)用;4)在制備線蟲壽命延長(zhǎng)劑中的應(yīng)用。本發(fā)明采用線蟲這一模式生物,以整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)作為檢測(cè)手段,觀察CXE對(duì)線蟲壽命的影響,發(fā)現(xiàn)多個(gè)濃度CXE對(duì)線蟲均有延壽作用或延壽趨勢(shì),其中25mg/L的延壽效果最佳,平均壽命和最大壽命均延長(zhǎng)約15%。利用已知的線蟲衰老相關(guān)基因,采用qRT-PCR方法進(jìn)行延壽的分子機(jī)制研究,表明CXE通過(guò)干預(yù)Insulin/IGF-1通路和限食(熱量限制)通路而延長(zhǎng)壽命,為該藥的分子機(jī)制研究提供了新的內(nèi)容和方向,也為中藥延緩衰老研究提供了新的思路和手段。
      文檔編號(hào)A61P39/06GK101874819SQ200910243699
      公開日2010年11月3日 申請(qǐng)日期2009年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月23日
      發(fā)明者于友華, 喻曉春, 李連達(dá), 汪曉燕, 王丹巧, 王香明 申請(qǐng)人:中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心
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