專利名稱：含膠原肽的皮膚美容用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有膠原肽混合物的皮膚美容用組合物，更具體地，涉及一種含 有膠原肽和選自由透明質(zhì)酸、彈性蛋白和維生素C所組成的組中的至少一種，且因此具有 卓越的改善皮膚狀況的作用的皮膚美容用組合物。
背景技術(shù)：
皮膚老化根據(jù)其起因可分為內(nèi)因性老化和外因性老化。內(nèi)因性老化是隨著人的年 齡增長，皮膚結(jié)構(gòu)和生理功能減退的過程，這與環(huán)境變化無關(guān)。外因性老化是由于持續(xù)暴露 于陽光等外部環(huán)境而引起的。尤其是，光線引起的皮膚老化被稱為光老化。紫外線是皮膚 老化的生理和形態(tài)學(xué)改變的主要因素。隨著內(nèi)因性皮膚老化的進(jìn)行，皮膚變得干燥，同時(shí)細(xì) 紋增加且變深。此外，由于表皮、真皮等的結(jié)構(gòu)和功能的改變，皮膚失去許多彈性且看起來 下垂。真皮變薄，而成人的膠原總量以每年的速度流失。同樣，留下的膠原纖維逐漸變 厚，同時(shí)其交聯(lián)增加，因此膠原的可溶性、彈性等降低。另外，彈性纖維變厚且其交聯(lián)也增 加。另外，在真皮內(nèi)的纖維母細(xì)胞(fibroblasts)的增殖活性降低，合成和分解膠原的能力 也降低。膠原是與皮膚老化有關(guān)的皮膚組織的主要成分。膠原蛋白占除脂肪之外的皮膚全 部干重的77%，占真皮纖維成分的90%。它負(fù)責(zé)維持皮膚強(qiáng)度、彈性和柔韌性。因此，膠原 合成的促進(jìn)和膠原分解的抑制成為針對皮膚美容和防止皮膚老化的主要問題，且需要開發(fā) 能夠抑制由紫外線引起的光老化，同時(shí)促進(jìn)膠原合成的美容食品。為此，對能夠口服的膠原產(chǎn)品進(jìn)行了不斷的研究。隨著技術(shù)的發(fā)展，開發(fā)了不 同來源的膠原產(chǎn)品以及經(jīng)過不同后處理過程的膠原材料。與此相關(guān)的，韓國專利公告號 第2001-0075842號Q001.08.ll)中公開了 一種含有膠原的功能食品，且韓國專利公 告號第2002-0085307 Q002. 11. 16)公開了一種含大量膠原的皮膚美容用口服食品組合 物。然而，由于膠原具有高分子量，膠原的消化和吸收、向靶器官如皮膚輸送膠原、向靶器 官輸送有效量的膠原、膠原的生物相容性等問題上存在多種問題。因此，需要對膠原類 (collagen-based)材料的實(shí)效(substantial effects)進(jìn)行額外的研究。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的發(fā)明人為了尋找顯示出皮膚美容改善效果的膠原類制劑而進(jìn)行了 廣泛的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)含有高濃度Gly-X-Y型三肽的膠原肽具有皮膚美容改善效果?；?此發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的發(fā)明人實(shí)施了關(guān)于在皮膚細(xì)胞中促進(jìn)原膠原生物合成的化合物的研究， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，若向膠原肽中添加最佳量的彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C，能夠使皮膚美容改 善效果最大化，由此完成了本發(fā)明。因此，本發(fā)明的目的在于提供一種沒有副作用的改善皮膚美容用組合物，該組合 物通過促進(jìn)原膠原的生物合成預(yù)防皮膚老化，同時(shí)抑制光老化，并通過增加皮膚彈性顯示 出卓越的皮膚狀況改善效果。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了改善皮膚美容用組合物，該組合物含有膠原肽和選自由彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C所組成的組中的至少一種。以膠原肽的總量為基準(zhǔn)，所述膠原肽優(yōu)選含有含量為15重量％或更多的膠原三 肽。根據(jù)本發(fā)明的改善皮膚美容用組合物能夠通過促進(jìn)膠原合成預(yù)防皮膚老化并 抑制光老化，同時(shí)也通過促進(jìn)傷口愈合和提高膠原肽的體內(nèi)保留率(invivo retention rate)而顯示出卓越的皮膚狀況改善效果。


圖1顯示了使用響應(yīng)最佳化工具(response optimization tool)得出的最佳條 件；圖2是顯示實(shí)施中心組合設(shè)計(jì)結(jié)果的等值線圖(contour diagram)；圖3是顯示比較例2和3以及實(shí)施例1的取樣于動(dòng)物的皮膚復(fù)制品(r印licas) 之間差別的一組圖片；圖4表明了實(shí)施免疫組化染色來檢測皮膚組織中的膠原表達(dá)的結(jié)果；圖5表明了比較例1和2以及實(shí)施例1的體內(nèi)保留率的分析結(jié)果。
具體實(shí)施例方式根據(jù)本發(fā)明的皮膚美容用組合物含有膠原肽和選自由彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生 素C所組成的組中的至少一種。當(dāng)分析上述成分的功能時(shí)，為了在給定的費(fèi)用、時(shí)間和預(yù)算內(nèi)最大限度地獲得信 息，需要綜合的實(shí)驗(yàn)方法和分析方法。為此，在本發(fā)明中使用了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(D0E，Design of Experiments)。DOE是系統(tǒng)設(shè)計(jì)、執(zhí)行并統(tǒng)計(jì)分析科學(xué)研究的方法論。尤其，通過DOE設(shè)計(jì) 一系列實(shí)驗(yàn)步驟并執(zhí)行，其中，可控制的輸入值水平逐漸的變化，以確定特定步驟中的輸出 值變化的原因。通過此，使得建立起用于確認(rèn)實(shí)驗(yàn)條件的實(shí)驗(yàn)策略成為可能，在所述實(shí)驗(yàn)條 件下，能夠有效地獲得最多的信息，從而滿足實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟@得充足的結(jié)果。所述DOE能夠校 正系統(tǒng)方法，且能夠定義及評價(jià)實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果值之間的關(guān)系。另外，DOE能夠知道少數(shù)極 重要的參數(shù)的變量(variance)，提供針對響應(yīng)參數(shù)的少數(shù)極重要的效果的測定值，相比單 次單因子(One-Factor-At-a-Time)標(biāo)定得到有效測量值和高品質(zhì)數(shù)據(jù)，允許不確定性的 測定，最少化檢查試驗(yàn)(test trials)，且允許控制干擾變量(nuisancevariables)。這種 DOE法包括部分因子析因設(shè)計(jì)(fractional factorial design)、全因子析因設(shè)計(jì)、響應(yīng)曲 面法(response surface methodology)、混料設(shè)計(jì)(mixture design)、田□設(shè)計(jì)等等。本發(fā)明中用作活性成分的膠原肽具有500-1000Da的分子量，且以膠原肽的總重 量為基準(zhǔn)，該膠原肽含有含量為15重量％或更多，如15-95%的Gly-X-Y型三肽，其中，每個(gè) X和Y可以是任何氨基酸。此外，X和Y可以是相同或不同的氨基酸，且也可以選自所有可 能的氨基酸組合。即，X和Y可以選自天然氨基酸，包括丙氨酸(Ala)、纈氨酸(Val)、亮氨酸 (Leu)、異亮氨酸(Ile)、脯氨酸(ftx))、羥脯氨酸(Hyp)、苯丙氨酸(Wie)、色氨酸(Trp)、蛋氨 酸(Met)、絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、谷酰胺(Gin)、甘氨酸(Gly)、天冬 酰胺(Asn)、酪氨酸(Tyr)、賴氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、組氨酸(His)、天冬氨酸(Asp)和谷 氨酸(Glu)。尤其，本發(fā)明中使用的三肽可以選自，但不限于由Gly-Pro-Hyp，Gly-Pro-Ala，Aly-Ala-Hyp, Gly-Leu-Hyp, Gly-Glu-Lys, Gly-Pro-Lys, Gly-Glu-Hyp, Gly-Phe-Hyp, Gly-Ser-Hyp, Gly-Gln-Hyp, Gly-Glu-ArgjP Gly-Pro-Arg 所組成的組。具體地，本發(fā)明所用的膠原肽可以通過下述方法制備。當(dāng)利用酶，例如半胱氨酸蛋 白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶或膠原酶，降解膠原或明膠成分時(shí)，可制備出含有5重量％或更 多的三肽和二肽的膠原肽。為了增加由此制備的肽混合物的三肽含量，將含Gly-X-Y型三 肽的肽混合物與堿性陰離子交換樹脂接觸，三肽Gly-X-Y被吸附在離子交換樹脂上，然后 從吸附了三肽的離子交換樹脂上將三肽洗脫下來，從而制備具有高三肽含量的純化肽。選 擇性地，可通過將含有三肽Gly-X-Y的肽混合物與非極性吸附劑接觸，使肽混合物中含有 的疏水性肽部分吸附到非極性吸附劑上，然后將沒有吸附到非極性吸附劑上的親水性三肽 部分回收，從而制備具有更高親水性三肽含量的純化肽。在本發(fā)明中，膠原肽的含量占組合物總重量的1-80重量％。如果組合物中的膠原 肽的含量少于1重量％，將難以獲得理想效果；而如果含量大于80重量％，組合物將難以劑 型化。同樣，本發(fā)明使用的彈性蛋白是通過水解正鰹(Euthynus pelamis)的主動(dòng)脈球 (aortic bulb)而獲得，且特征在于含有彈性蛋白特有的交聯(lián)氨基酸，鎖鏈賴氨素和異鎖鏈
賴氨素。本發(fā)明所使用的透明質(zhì)酸是通過鏈球菌發(fā)酵大量生產(chǎn)的，以使透明質(zhì)酸的含量為 90-100%。這在化妝品和醫(yī)藥領(lǐng)域廣泛使用，近來還在保健食品等多種領(lǐng)域得到應(yīng)用?；诮M合物的總重量，本發(fā)明組合物中的膠原肽、彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C 的含量分別為1-80重量％，1-20重量％，1-10重量％和1-20重量％。根據(jù)本發(fā)明的組合物能夠促進(jìn)皮膚的膠原合成，抑制皮膚光老化，增加皮膚濕潤 度，促進(jìn)傷口愈合且增加膠原肽的體內(nèi)保留率，從而改善皮膚狀況。同樣，膠原肽彈性蛋白維生素C 透明質(zhì)酸的含量比優(yōu)選為1 0.0001-150 0.0001-20 0.0001-50000。本發(fā)明的改善皮膚美容用組合物可以制備成各種不同劑型，包括丸劑、茶包、速溶 茶、飲料、顆粒劑、片劑和膠囊劑，能夠應(yīng)用于包括保健食品和醫(yī)療藥物等多種領(lǐng)域。下面，將參考附圖、實(shí)施例以及試驗(yàn)實(shí)施例進(jìn)一步對本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的描述。這 些實(shí)施例和試驗(yàn)實(shí)施例僅用于促進(jìn)對本發(fā)明的理解，本發(fā)明的范圍并不由此限定。本領(lǐng)域 技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是在不脫離隨附的本發(fā)明權(quán)利要求的思想和范圍的條件下，可以進(jìn)行 各種常規(guī)的眾所周知的變形，替代和插入。實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1 生成膠原能力的測定1型原膠原的生成能力通過成纖維細(xì)胞測定，如下表1所示。[表 1]
組別處理對照組在正常組中，細(xì)胞用生理鹽水處理比較例1細(xì)胞用溶解有普通膠原材料的生理鹽水處理比較例2 細(xì)胞用溶解有膠原肽(購自Jellice公司)的生理鹽水處理為了比較各組之間的產(chǎn)原膠原能力，將成纖維細(xì)胞以5X IO4細(xì)胞/孔的密度加入 到48孔板中并使其附著在每個(gè)孔上。在此狀態(tài)下，比較例1和2的膠原各自以最終濃度為 0. lppm、lppm和IOppm加入到細(xì)胞中。制備了沒有用任何膠原樣品處理的組作為對照組。 將細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)之后，培養(yǎng)液上清液中的1型原膠原的產(chǎn)量利用ELISA試劑盒(Takara MK101)來測定。將對照組的結(jié)果作為100%，測定結(jié)果表達(dá)為與對照組的相對值，如下表2 所示。[表 2]原膠原的產(chǎn)量
權(quán)利要求
1.一種皮膚美容用組合物，其特征在于，該組合物含有膠原肽和選自由彈性蛋白、透明 質(zhì)酸和維生素C所組成的組中的至少一種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，以所述膠原肽的總量為基準(zhǔn)，所述膠原肽含有 含量為15-95重量％或更多的膠原三肽。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中，所述膠原肽是Gly-X-Y型，且X和Y選自相同 或不同的氨基酸。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，以所述組合物的總量為基準(zhǔn)，所述膠原肽的含 量為1-80重量％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，以所述組合物的總量為基準(zhǔn)，所述組合物中的 彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C的含量分別為1-20重量％、1-10重量％和1-20重量％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述膠原肽彈性蛋白維生素C透明質(zhì)酸 的含量比為 1 0. 0001-150 0. 0001-20 0.0001-50000。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中，所述組合物的劑型為丸劑、茶 包、速溶茶、飲料、顆粒、片劑或膠囊。
8.一種促進(jìn)皮膚膠原生成的組合物，其特征在于，該組合物含有權(quán)利要求1-6中任意 一項(xiàng)所述的組合物。
9.一種抗老化組合物，其特征在于，該組合物含有權(quán)利要求1-6中任意一項(xiàng)所述的組 合物。
10.一種增加皮膚濕潤度的組合物，其特征在于，該組合物含有權(quán)利要求1-6中任意一 項(xiàng)所述的組合物。
11.一種含有膠原肽和選自由彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C所組成的組中的至少一 種的組合物用于皮膚美容的應(yīng)用。
12.—種含有膠原肽和選自由彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C所組成的組中的至少一 種的組合物用于促進(jìn)皮膚膠原生成的應(yīng)用。
13.一種含有膠原肽和選自由彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C所組成的組中的至少一 種的組合物用于抗皮膚老化的應(yīng)用。
14.一種含有膠原肽和選自由彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C所組成的組中的至少一 種的組合物用于增加皮膚濕潤度的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種皮膚美容用口服組合物，該組合物具有減少皮膚皺紋和抑制皺紋形成的作用。該組合物含有膠原肽和選自由彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C所組成的組中的至少一種。特別是，所述組合物含有最佳比例的膠原肽、彈性蛋白、透明質(zhì)酸和維生素C，當(dāng)被人體攝入后，不會(huì)引起副作用，能夠最大化皮膚真皮層的膠原生物合成，表現(xiàn)出優(yōu)異的體內(nèi)保留率，具有抑制皮膚皺紋形成，保持或增加皮膚彈性和保濕皮膚的作用。因此，所述組合物可用作用于皮膚美容和預(yù)防皮膚老化的健康功能食品。
文檔編號A61K8/64GK102131492SQ200980133627
公開日2011年7月20日 申請日期2009年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月27日
發(fā)明者李智恩, 李知海, 梁美淑, 金完起, 金正基 申請人:株式會(huì)社太平洋