專利名稱：黃精水提物在制備治療由于體內雌性激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種黃精水提物在制備治療由于體內雌性激素分泌不足 而引起的婦女更年期綜合癥藥物中的應用。
背景技術：
黃精為為百合科植物滇黃精(Polygonatum kingianum Coll. et Hemsl.)、黃精 (Polygonatum sibiricum Red.)或多花黃精(Polygonatum cyrtonema Hua.)的干燥*艮蓮。 歷代名家對其均有論述和研究，認為其性甘、平，歸脾、肺、腎經(jīng)，具有補氣養(yǎng)陰，健脾，潤肺， 益腎功能。用于治療脾胃虛弱，體倦乏力，口干食少，肺虛燥咳，精血不足，內熱消渴等癥。現(xiàn) 代藥理及臨床研究表明黃精具有抗病原微生物，降低血糖，抗疲勞，抗氧化作用，延緩衰老， 止血，抗心肌缺血，抗病毒等作用。但黃精關于雌激素樣作用方面的研究尚未報道。

發(fā)明內容
針對上述情況，本發(fā)明之目的就是提供一種黃精水提物在制備治療由于體內雌性 激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥藥物中的應用，可有效解決制備治療由于體內雌 性激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥的用藥問題。本發(fā)明解決的技術方案是，將黃精每次用其10倍重量的水煎煮2次，每次2h，合并 2次水煎液，減壓濃縮干燥得到黃精浸膏狀水提物，該黃水提物有效用于制備治療由于體內 雌性激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥的藥物，即黃精水提物在制備治療由于體內 雌性激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥藥物中的應用。本發(fā)明水提物制備方法簡單，穩(wěn)定可靠，并經(jīng)多次(30余次)以上試驗，均取得了 相同或相近似的結果，方便，成本低，其水提物有效用于制備雌性激素藥物，開辟了黃精藥 用新用途，臨床意義巨大。
具體實施例方式以下結合實施例和有關試驗資料對本發(fā)明的具體實施方式
作詳細說明。首先將黃精(Polygonatumkingianum Coll. et Hemsl.) lOOg 每次用其 10 倍重量 的水1000g(即1000ml)煎煮2次，每次2h，合并兩次水煎液，減壓濃縮干燥得到黃精浸膏 狀水提物65. 46g，該水提物有效用于制備治療由于體內雌性激素分泌不足而引起的婦女更 年期綜合癥的藥物，即實現(xiàn)黃精水提物在制備治療由于體內雌性激素分泌不足而引起的婦 女更年期綜合癥藥物中的應用，并經(jīng)動物試驗得到了充分證明，其有關試驗資料如下首先通過MCF-7細胞增殖實驗(E-SCREEN)，證明黃精能夠促進MCF-7細胞增殖，說 明其在體外具有雌激素樣作用。通過小鼠子宮增重實驗，驗證黃精能夠增加性未成熟小鼠的子宮系數(shù)，說明其在 體內具有雌激素樣作用。
已通過實驗證明了本發(fā)明藥物在雌性激素藥物中的新用途一、實驗材料與方法1.藥物的制備黃精(Polygonatum kingianum Coll. et Hemsl.) lOOg 用 10 倍量的水煎煮 2 次， 每次2h，水煎液減壓濃縮干燥得到黃精水提物65. 46g(浸膏狀)。2.實驗動物與細胞株昆明種小鼠，雌性，出生21天(剛斷乳)。體重9 12g，購于河南省實驗動物中 心。人乳腺癌細胞(MCF-7)由中國軍事醫(yī)學科學院生物工程研究所提供。3.主要試劑RPMI1640 培養(yǎng)基、小牛血清(Newborn Calf Serum, NCS)購自 Gibcolnvitrogen 公 司；無酚紅 RPMI1640 培養(yǎng)基、17 3 -雌二醇(17 3 -estrogen, E2)、活性炭(Charcoal)均購 自Sigma公司；葡聚糖T-70(DeXtran-70)購自上海化學試劑公司；己烯雌酚片(合肥久聯(lián) 制藥)。4.所用主要儀器電子讀數(shù)分析天平(日本Shimadzu公司)；普通手術器械；二氧化碳培養(yǎng)箱(日 本SANYO公司)；倒置顯微鏡(日本Olympus) ；KDC-160HR高速低溫冷凍離心機(科大創(chuàng)新 股份有限公司)；酶標儀(BI0-RAD 680)。5.實驗方法(1)小鼠子宮增重實驗將小鼠按體重均衡和隨機的原則分組。給藥持續(xù)7天?？瞻讓φ战M每日蒸餾水 0. 2ml. lOg-1灌胃；陽性對照組每日己烯雌酚懸濁液(0. 035mg kg-1 cf1)灌胃；黃精按臨 床用藥的20倍量X提取率計算，配成相應濃度的混懸液，每日按0. 02ml/10g灌胃灌胃。 最后一次給藥24h后，脫頸處死小鼠，立即摘取子宮稱重，計算子宮系數(shù)(子宮濕重 (體 重r^ioo^)。實驗平行重復三次。結果與空白組相比，計算P值考察有無統(tǒng)計學意義。(2)MCF_7細胞增殖實驗MCF-7細胞經(jīng)無酚紅1640培養(yǎng)2周后，選取對數(shù)生長期細胞，PBS洗兩次，用 0. 25%胰蛋白酶消化后，加入無血清1640吹打均勻，以2X 103個/孔的濃度接種于96孔 板內，每孔培養(yǎng)總體積為200 yl。培養(yǎng)24小時待細胞貼壁后，換為含藥培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。 37°C>5% C02培養(yǎng)3天后，每孔加入MTT溶液(5mg/ml) 20 yl，37°C繼續(xù)培養(yǎng)4小時，小心吸 凈培養(yǎng)液，每孔加入150 u 1DMS0,震蕩5 10分鐘，使結晶物完全溶解。以DMS0調零，用 酶標儀在490nm下測定各孔吸光度值(A)，計算平均A值和增殖率(Proliferation Rate, RP)。實驗平行重復三次。RP =(實驗組A值/空白組A值)-1X100%6.統(tǒng)計處理實驗數(shù)據(jù)以S ±s表示，SPSS 13. 0進行單因素方差分析(One-Way AN0VA)統(tǒng)計處理。二、實驗結果1.黃精對MCF-7細胞增殖的影響黃精在0. lmg/ml時對MCF-7細胞與空白組比有極顯著地促增殖作用(P < 0. 01)。見表1。說明黃精在體外具有雌激素樣作用。表1 黃精對MCF-7細胞增殖的影響([士s,n=9)
權利要求
一種黃精水提物在制備治療由于體內雌性激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥藥物中的應用，所說的水提物為黃精每次用其10倍重量的水煎煮2次，每次2h，合并2次水煎液，減壓濃縮干燥得到黃精浸膏狀水提物。
全文摘要
本發(fā)明涉及黃精水提物在制備治療由于體內雌性激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥藥物中的應用，可有效解決制備治療由于體內雌性激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥的用藥問題，其解決的技術方案是，將黃精每次用其10倍重量的水煎煮2次，每次2h，合并2次水煎液，減壓濃縮干燥得到黃精浸膏狀水提物，該黃水提物有效用于制備治療由于體內雌性激素分泌不足而引起的婦女更年期綜合癥的藥物，本發(fā)明水提物制備方法簡單，穩(wěn)定可靠，并經(jīng)多次以上試驗，均取得了相同或相近似的結果，方便，成本低，其水提物有效用于制備雌性激素藥物，開辟了黃精藥用新用途，臨床意義巨大。
文檔編號A61P15/12GK101972400SQ20101029905
公開日2011年2月16日 申請日期2010年10月8日 優(yōu)先權日2010年10月8日
發(fā)明者馮衛(wèi)生, 李冬梅, 王小蘭, 蔣云, 鄭曉珂 申請人:河南中醫(yī)學院