專利名稱：用于代謝綜合癥控制的選自絨毛戴星草和莽吉柿的混合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的藥物或膳食添加劑，其中包括至少一個(gè)選自絨毛戴星草的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物和一種選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物，并選擇性地包括一種或多種藥用或膳用可接受的稀釋劑、介質(zhì)、載體、活性物或其混合物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及至少一種選自絨毛戴星草及其混合物的提取物、餾分、活性化合物、植物化學(xué)物或其混合物的化合物，優(yōu)選的與至少一種選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物一起組合，用于代謝綜合征或肥胖，和/或一種或多種與代謝綜合癥和代謝疾病有關(guān)系或有聯(lián)系的疾病。本發(fā)明還涉及使用絨毛戴星草衍生化合物或其混合物來對一個(gè)或多個(gè)生物標(biāo)志物蛋白或與代謝綜合征、肥胖或其他有關(guān)系或有聯(lián)系疾病的代謝過程的改善。發(fā)明背景絨毛戴星草屬菊科。它也被稱為麻臘干。它是一種高度分枝，強(qiáng)烈氣味，具有翼莖齒翅的一年生草本植物。葉呈倒卵狀，基部漸狹，邊緣有刺狀和尖齒?；ǔ蕪?fù)頭狀，球形。在印度的環(huán)境中，開花時(shí)間跨度從十一月到一月。有用的藥用部位是根，樹皮，葉，花和種子。絨毛戴星草植物的花和果實(shí)中含有的一個(gè)主要化合物是3a_羥基-5a，9_ 二甲基-3-甲基-3a，4,5, , 6，7，8，9b-八氫-3H-萘并[l，2_b]呋喃-2-酮(7-α-羥基-4， 11 (13)-雙烯酮-12，6-內(nèi)酯或7-羥基耳葉苔內(nèi)酯)。它具有強(qiáng)烈的抑制促炎性細(xì)胞因子作用。選自絨毛戴星草的其他化合物包括如主要成份的甲基胡椒酚，α-紫羅蘭酮， δ-杜松烯，ρ-甲氧基肉桂醛和作為少量精油的次要成份α-松油烯，檸檬醛香葉醇，香葉基醋酸，β-紫羅蘭酮，絨毛戴星草烯，印度烯和絨毛戴星草內(nèi)酯(濃縮香水，埃森特油的記錄，1959年，50，765 ；。化合文摘索引號1960，54，7980g) ；7 α -羥基桉葉醇-4烯-6，12-內(nèi)酯，它的β-異構(gòu)體，一種新的倍半萜烯酸，2-羥基木香酸，β-桉葉醇和香草酸(Jayant S. Sohoni et al, J. Chem. Soc, Perkin Tram. 1，1988，157-160)；桉葉內(nèi)酯如 11-α-13-二氫-3α，7α-二羥基-4，5_環(huán)氧_6β，7_桉烷醇甙，Ila，13_ 二氫-7α-乙酰氧基-β3_羥基-6β，7_ 桉葉醇和 3-酮基-β-桉葉油醇(Pujar PP et al, Fitoterapia. 2000Jun ； 71(3) 264-8)和一種倍半萜烯苷(Shekhani MS et al, 1990 ；Phytochemistry 29， 2573-2576)。一些關(guān)于絨毛戴星草的非專利文獻(xiàn)引述如下一份關(guān)于茜草，隆加姜黃，印度菝葜，印楝和絨毛戴星草對抗炎效果的研究報(bào)告中，發(fā)現(xiàn)絨毛戴星草在對丙酸桿菌的上清培養(yǎng)液的白細(xì)胞(PMNL)和單核細(xì)胞誘導(dǎo)致炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-8(IL-8)和腫瘤壞死因子 α (TNFa)的抑制作用更加有效[Jain A et. al. ；Phytomedicine. 2003Jan ； 10(1) :34- 。在老鼠實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)絨毛戴星草花頭的石油醚提取物對增加細(xì)胞吞噬活性，血凝抗體滴度和遲發(fā)型超敏反應(yīng)有效。石油醚提取物呈現(xiàn)出劑量-反應(yīng)關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，200mg/ kg的劑量是最佳劑量。絨毛戴星草相當(dāng)于免疫調(diào)節(jié)劑，通過刺激體液和細(xì)胞免疫以及細(xì)胞的吞噬功能。[Bafna AR et. al ;J Herb Pharmacother. 2007 ；7(1) :25-37]。在一項(xiàng)研究中，發(fā)現(xiàn)絨毛戴星草的水提取物(300mg/kg/天，i.p)對用地塞米松 (110mg/kg/天，s. c)誘導(dǎo)的大鼠血脂變化有效。絨毛戴星草顯示出降低血清總膽固醇，甘油三酯，低密度脂蛋白，極低密度脂蛋白，而對高密度脂蛋白膽固醇水平?jīng)]有明顯的變化。 使用絨毛戴星草治療后動脈粥樣硬化指數(shù)也明顯地降低了，絨毛戴星草具有潛在的降脂效果[Tenpe CR et al ；Biomed. Vol. 02(4), 2008 ；400-403]。最近，在另一項(xiàng)研究中，通過煙酰胺[120毫克/公斤，IP]和鏈脲佐菌素(STZ) [60 毫克/公斤，IP]誘導(dǎo)糖尿病的老鼠研究中，絨毛戴星草具有抗高血糖效果?？诜o藥絨毛戴星草15天，結(jié)果血糖水平明顯下降而肝糖原和血漿胰島素水平明顯提高。用絨毛戴星草酒精提取物處理空腹的正常大鼠，顯示在口服糖耐量試驗(yàn)中表現(xiàn)出了明顯提高。用格列本脲作為參考標(biāo)準(zhǔn)[Prabhu KS et al J Pharm Pharmacol. 2008 ；60 (7) :909-16]。上述文獻(xiàn)都沒有公開關(guān)于用絨毛戴星草改善代謝綜合征相關(guān)的生物標(biāo)志物或?qū)Υx綜合癥或與代謝綜合癥有關(guān)疾病的治療效果。丹貝CR等人的研究中使用了絨毛戴星草的水提取物，其不包括含量大的7-羥基耳葉苔內(nèi)酯，而本發(fā)明的親脂性化合物含有作為活性化合物的7-羥基耳葉苔內(nèi)酯。因此， 本發(fā)明的化合物不同于丹貝CR等人在研究中使用的化合物。同樣，普達(dá)帕布KS等人的研究中使用了根和匍匐莖的酒精提取物。然而，本發(fā)明的化合物是選自花頭，其含有大量的 7-羥基耳葉苔內(nèi)酯，因此，與普達(dá)帕布KS等人在研究中使用的化合物也不同。一些關(guān)于絨毛戴星草的專利文獻(xiàn)引述如下PCT公布號W007036900A2涉及到了一種新的草藥化合物，包括一種絨毛戴星草植物的花和果實(shí)頭的提取物，其含有3a-羥基-5a，9-二甲基-3-甲基_3a，4，5，fe，6，7，8， 9b-八氫-3H-萘并[l，2-b]呋喃-2-酮(7-α-羥基-4，11 (13)-雙烯酮-12，6-內(nèi)酯)作為一種生物活性標(biāo)志物。所述專利也涉及到了制備所述化合物的方法。日本專利公開號JP07138180A2涉及到抗體抑制劑，其含有一種包括至少一種印楝，香茅，咖喱樹，絨毛戴星草，圣羅勒，青牛膽和葉下珠的提取物以及一種用作能防止衰老和防止細(xì)小皺紋和皮膚干燥的化妝品。PCT公布號W006134609A2中公開了中草藥抗癌劑，其含有絨毛戴星草植物的提取物或選自絨毛戴星草植物的化合物。同時(shí)也公開了一種制藥化合物，其含有所述的制劑，化合物的制備方法，各種動物包括人類癌癥的治療方法，植物提取物的制備方法和獲得活性成份的方法。PCT公布號W0060162^A2涉及到一種化合物或一組化合物，選自于存在于絨毛戴星草植物中的活性物質(zhì)，可用作預(yù)防和/或治療腫瘤疾病的藥品制劑或食物添加劑的配制劑。所述專利進(jìn)一步涉及一種用于從絨毛戴星草植物中分離對癌癥預(yù)防和/或治療有效的活性物制的方法。美國專利號US7344738提供了用于配藥用或醫(yī)藥用的配制劑，由兩種草藥化合物的混合物組成，其中包括一種以下草藥的化合物辣木，黃細(xì)心，紫草，洋紫荊，絨毛戴星草， 沙漠柚木，吊蘭，聚果榕，和香頭草或一種從那些草藥中提取的活性成分或合成化學(xué)品的混合物。這些草藥制劑廣泛用于治療由削弱或惡化的免疫系統(tǒng)造成人體的生理和病理疾病是有效的。
莽吉柿是用在本發(fā)明中的新化合物，其屬于藤黃科。藤黃屬植物大約有300種雌雄異株喬木和灌木，分布在南美洲(它們也就是所知的瑞地亞木)，非洲，馬達(dá)加斯加和東南亞。本屬中的大部分多樣化物種集中在馬來西亞，在那里發(fā)現(xiàn)有超過三分之二的品種 [http://www. mobot. org/MOBOT/Research/mangosteen/]0倒捻子素是莽吉柿中的一個(gè)主要化合物。倒捻子素的結(jié)構(gòu)已由彼得耶茨等人證實(shí) [Peter Yates, George H. Stout J.Am. Chem. Soc ； 1958 ；80 (7) ；1691-1700]。已有倒捻子素的一些藥物學(xué)活性如抗炎劑[Gopalakrishnan C et al.，Indian J Exp Biol. 1980 Aug ； 18 (8) :843-6]，組胺和血清素受體阻斷劑[Chairungsrilerd N et al.，Planta Med. 1996 Oct ；62 (5) :471-2]，抗癌劑[Ee GC et al.，J Asian Nat Prod Res. 2008 May ；10 (5) :481-5]，抗菌劑[Sundaram B. Μ.，et al. ；Planta Med. 1983 ；48 59-60]等的報(bào)道，和大量探索新活性的研究。藤黃非專利文獻(xiàn)描述如下在一個(gè)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)分餾研究中，采用從親脂性到親水性的化合溶劑萃取，不同分餾法和離子交換樹脂XAD2吸附色譜法進(jìn)行了研究。莽吉柿果皮提取物對α -淀粉酶抑制活性進(jìn)行了測試，得出的結(jié)論是氧雜蒽酮不具有任何的抑制活性， 但報(bào)道親水成份的原花青素對α-淀粉酶的抑制活性大56倍[Eng Kiat Loo A,Huang D.； J Agric Food Chem. 2007 Nov28 ；55 (24) :9805-10]。知道上述研究結(jié)果[Eng Kiat Loo et al,2007]非常重要。α -淀粉酶的抑制活性是由于原花青素。進(jìn)一步的研究表明，氧雜蒽酮成份對α -淀粉酶抑制沒有任何活性。因此，這些現(xiàn)有文獻(xiàn)的提取物或餾分的活性物質(zhì)與本發(fā)明的活性物質(zhì)不同。在另一項(xiàng)研究中，研究者確定醛糖還原酶(ALR2)的抑制作用是由莽吉柿引起的。 發(fā)現(xiàn)α -倒捻子素對ALR2具有很大的作用力。得出的結(jié)論是α -倒捻子素可以用于預(yù)防糖尿病并發(fā)癥[Sri Fatmawatia et al.，Biology, Chemistry, Pharmacology and Clinical Studies of Asian Plants April 9-11，2007，Surabaya，Indonesia]。簡單的回顧一下現(xiàn)有文獻(xiàn)，還沒有有關(guān)使用含有絨毛戴星草和莽吉柿的化合物來治療代謝綜合征或改善代謝標(biāo)志物蛋白質(zhì)的報(bào)道。代謝綜合癥是一種疾病，又稱綜合征X，胰島素抵抗綜合征和代謝不良綜合癥，其中的一類疾病癥狀是增加動脈粥樣硬化，中風(fēng)和糖尿病。代謝綜合癥是由Reaven 于 1988 年首次描述[Reaven, (1988) Diabetes 37 ； 1595-1607]，作為一類相互關(guān)聯(lián)的臨床常見疾病，包括肥胖，胰島素抵抗，葡萄糖耐受不良， 高血壓和血脂異常。診斷代謝綜合癥的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)是由于2001年成立的國家膽固醇教育計(jì)劃成人治療小組-III (ATP III) [JAMA (2001),285 ；2486-2497]制定的。由小組確定的代謝綜合癥有五項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)，分別包括腹部肥胖，空腹血糖，高甘油三酯(TG)，低高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C) 濃度和血壓上升。如個(gè)一個(gè)人身上存在任何三個(gè)，則可診斷為代謝綜合癥。大量的研究正在進(jìn)行，已超過十年來開發(fā)用于控制代謝綜合癥的制劑。用于控制代謝綜合癥的代謝標(biāo)志物的應(yīng)用也已有嘗試。患有代謝綜合癥的人都對冠心病，其他與在動脈壁上集結(jié)斑塊相關(guān)的疾病(例如，中風(fēng)和周邊血管疾病)和2型糖尿病具有高風(fēng)險(xiǎn)。一些生物疾病也被認(rèn)為是代謝綜合癥，其中包括高尿酸血癥[Vuorinen-MarkkolaH et al J Clin Endocrinol Metab. 1994 ；78(1) :25-9.]；高甘油三酯血癥[Grundy SM.； Am J Cardiol. 1998 ；81(4A) :18B_25B]；低脂聯(lián)素血癥 Btern N et &\ ;J Cardiometab Syndr. 2007 ；2 (4) :288-94]；微量白蛋白尿[Brahimi M et al ；Arch MaI Coeur Vaiss. 2007 ； 100 (8) :673-6.]。下面引用一些涉及代謝綜合癥的診治和治療的專利。PCT公布號W008086403A1公開了對植物來源的色酮和新色酮化合物的識別與分離，其在提高脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素的產(chǎn)生和調(diào)節(jié)脂肪酸合成有關(guān)基因中有效。該發(fā)明也包括用于預(yù)防和治療各種疾病和病癥包括但不限于胰島素抵抗，葡萄糖不耐癥，高血糖，代謝綜合征，血脂異常，高甘油三酯血癥的方法。PCT公布號W008074935A2涉及到從植物中獲得的如提取物，餾分和/或分子的化合物和產(chǎn)品，其可用于預(yù)防或治療代謝疾病，肥胖和/或與其關(guān)的疾癥如X綜合征(代謝綜合癥)，2型糖尿病，或用于人類或動物的生產(chǎn)食品添加劑。PCT公布號W008093848A1公開了一種制藥產(chǎn)品，一種功能性食品和一種口服化合物，其含有選自大豆的卵磷脂，通過口服給藥或用于口腔施藥，可用于通過增加炎癥標(biāo)志物來預(yù)防或改善身體機(jī)能疾病，可降低代謝綜合癥的發(fā)生或疾病和代謝綜合癥的風(fēng)險(xiǎn)，并能保持或促進(jìn)健康狀態(tài)?；谏鲜龊推渌恍┪募系男畔?，本發(fā)明的發(fā)明人認(rèn)為需要一個(gè)可以有效的用于代謝綜合癥和其他一些有關(guān)及聯(lián)系疾病控制的天然化合物。據(jù)我們所知，還沒有現(xiàn)有文獻(xiàn)涉及到使用選自絨毛戴星草及其混合物的提取物、 餾分或活性化合物，植物化學(xué)物或其混合物的化合物，與選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物組合，用于與肥胖，代謝綜合癥和其他與代謝疾病有關(guān)或聯(lián)系疾病的改善，控制，預(yù)防或治療。發(fā)明概述本發(fā)明的一個(gè)主要方面提供了一種新的藥品/膳食添加劑/食品組合混合物， 其中包括至少一種選自絨毛戴星草的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物，和一種選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物，并選擇性地包括一種或多種藥用或膳用可接受的稀釋劑、介質(zhì)、載體、活性物或其混合物。本發(fā)明的另一主要方面提供了至少一種選自絨毛戴星草及其混合物的提取物、餾分、活性化合物、植物化學(xué)物或其混合物的化合物，優(yōu)選的與至少一種選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物一起組合，用于代謝綜合征或肥胖，和/或一種或多種與代謝綜合癥和代謝疾病有關(guān)系或有聯(lián)系疾病的藥品/膳食添加劑 /食品組合混合物。本發(fā)明的另一方面提供了絨毛戴星草衍生化合物，選自其提取物、餾分、活性化合物、植物化學(xué)物或其混合物或其組合物，優(yōu)選的與至少一種選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物一起組合，用于對一個(gè)或多個(gè)與代謝綜合癥， 肥胖和其它與代謝綜合癥有關(guān)的包括但不限于基質(zhì)金屬蛋白酶-1 (MMP-I)，基質(zhì)金屬蛋白酶-3 (MMP-3)，過氧化物酶體增殖物激活受體Y (PPAR y )，脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)，脂肪細(xì)胞CD36，巨噬細(xì)胞CD36，單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-I)，氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)Jg肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2/FABP4/A-FABP)，β-3腎上腺素受體(β 3AR)，周脂素，脂聯(lián)素和蛋白酪氨酸磷酸酶-IB(PTP-IB)疾病有關(guān)系或聯(lián)系的生物標(biāo)志蛋白的表達(dá)與產(chǎn)生。本發(fā)明的另一方面提供了絨毛戴星草衍生化合物，選自其提取物、餾分、活性化合物、植物化學(xué)物或其混合物或其組合物，優(yōu)選的與至少一種選自莽吉柿的提取物、餾分、 活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物一起組合，用于改善代謝過程如促進(jìn)脂肪分解，抑制脂肪形成，α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性。本發(fā)明的一個(gè)主要方面，藥品/膳食添加劑/食品組合物的提取物，餾分、純化合物或植物化學(xué)物或其混合物是選自絨毛戴星草或所述組合物含有所述的混合物，用于對代謝綜合征或肥胖，和/或一個(gè)或多個(gè)與代謝綜合癥有關(guān)或聯(lián)系的疾病的控制，預(yù)防和治療。本發(fā)明的另一主要方面，提取物或濃縮餾分或純化合物或其混合物選自絨毛戴星草，可單獨(dú)使用也可與一種或多種藥用或膳用可接受的介質(zhì)、載體或溶劑或其混合物一起使用，用于對代謝綜合征或肥胖，和/或一個(gè)或多個(gè)與其有關(guān)或關(guān)聯(lián)的疾病的控制，預(yù)防和治療。本發(fā)明的另一方面，用于代謝綜合癥或肥胖和其他有關(guān)或相關(guān)疾病的預(yù)防、控制和治療的活性絨毛戴星草的活性化合物包括但不限于7-羥基耳葉苔內(nèi)酯、Ila，13-二氫-3α，7α-二羥基-4，5_環(huán)氧_6β，7_桉烷內(nèi)酯、Ila，13-二氫_7 a -乙酰氧基-β 3_羥基-6 β，7-桉葉醇-4-內(nèi)酯、3-酮-β -桉葉醇、11 a，13- 二氫-3 a，7 a - 二羥基桉烷-4-烯 _6a，12-內(nèi)酯、Ila，13-二氫 _3a，7 a-二羥基耳葉苔內(nèi)酯、11 α，13-二氫 _7a， 13-二羥基耳葉苔內(nèi)酯、Ila，13-二氫-7 a，-羥基-13-甲氧基耳葉苔內(nèi)酯、2 a，7 a - 二羥基-4-烯-11，13- 二羥基桉葉醇-6，12-內(nèi)酯、2 a -羥基木香酸、3_酮_7 a -羥基桉葉醇-4-烯-6，12-內(nèi)酯(柳杉二醇)、4_表柳杉醇、絨毛戴星草內(nèi)酯苷、2 a -羥基絨毛戴星草內(nèi)酯、2 α-乙酰氧基絨毛戴星草內(nèi)酯、2 α，7 α-二羥基絨毛戴星草內(nèi)酯、2 α-乙酰氧基-7 a -羥基絨毛戴星草內(nèi)酯、2 a -乙酰氧基-5 a -羥基異絨毛戴星草內(nèi)酯等，優(yōu)選7_羥基耳葉苔內(nèi)酯或有關(guān)的化合物或其類似物或其混合物。在另一方面，本發(fā)明中使用的7-α-羥基-4，11 (13)雙烯酮_12，6_內(nèi)酯(7_羥基耳葉苔內(nèi)酯)來源可以是絨毛戴星草或任何植物或合成。本發(fā)明的另一方面，絨毛戴星草衍生化合物和其混合物可有效用于一種或多種包括但不限于代謝綜合癥，肥胖，動脈硬化，糖尿病，胰島素抵抗等疾病，調(diào)節(jié)能源消耗，預(yù)防冠狀動脈和腹主動脈中動脈粥樣硬化斑塊，增強(qiáng)胰島素敏感性，提高糖耐量，降低動物體內(nèi)的甘油三酯水平和平衡血糖水平。本發(fā)明的另一方面，提供包括至少一種選自絨毛戴星草的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物，和一種選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物的組合物，來制備對預(yù)防或控制或治療代謝綜合癥或與代謝綜合癥有關(guān)疾病有增效作用的產(chǎn)品，和改善與代謝綜合癥或與代謝綜合癥有關(guān)疾病的不同生物標(biāo)志物蛋白的產(chǎn)品。本發(fā)明的另一方面，提供用于代謝綜合癥，肥胖和其他與代謝綜合癥有關(guān)或相關(guān)的疾病，尤其是在動物體內(nèi)由胰島素抵抗引起的疾病和病癥的預(yù)防、治療和控制的方法，其中所述的方法包括給對象給予選自絨毛戴星草的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物并含有至少一種選自藥用和膳用可接受的稀釋劑、介質(zhì)、載體、活性物或其混合物的配藥或膳食添加劑所需有效劑量。本發(fā)明的另一方面，提供用于代謝綜合癥，肥胖和其他與代謝綜合癥有關(guān)或相關(guān)的疾病，尤其是在動物體內(nèi)由胰島素抵抗引起的疾病和病癥的預(yù)防、治療和控制的方法，其中所述的方法包括給對象給予選自絨毛戴星草的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物，優(yōu)選的與至少一種選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物一起組合，并含有至少一種選自藥用和膳用可接受的稀釋劑、介質(zhì)、載體、活性物或其混合物的配藥或膳食添加劑所需有效劑量。


圖1 所示的是絨毛戴星草醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)對A2058人類黑色素瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MMP-I降低百分率柱狀圖。在LI/DD-II/054A/01不同濃度下處理M小時(shí)后用50nM的PMA誘導(dǎo)A2058細(xì)胞。用MMP-1的ELISA檢測試劑盒(R&D System, Minneapolis,麗，USA)對分泌在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的MMP-I濃度進(jìn)行測定。培養(yǎng)上清液中的MMP-I濃度用已知濃度的MMP-I標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算得到。在每種測試化合物濃度下的 MMP-I抑制百分率通過該公式計(jì)算得到{(PMA誘導(dǎo)孔中的MMP-I濃度-測試孔中的MMP-I 濃度)X 100} +PMA誘導(dǎo)孔中的MMP-I濃度。圖2 所示的是絨毛戴星草醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)對A549人肺腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MMP-3濃度降低百分率柱狀圖。在LI/DD-II/054A/01不同濃度下處理 24小時(shí)后用10ng/ml的人類IL-I β誘導(dǎo)Α549細(xì)胞。用ΜΜΡ-3的ELISA檢測試劑盒(R&D System, Minneapolis, MN, USA)對分泌在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的MMP-3濃度進(jìn)行測定。培養(yǎng)上清液中的MMP-3濃度用已知濃度的MMP-3標(biāo)準(zhǔn)曲線上估算得到。在每種測試化合物的濃度下的MMP-3抑制百分率通過該公式計(jì)算得到{(IL-1 β誘導(dǎo)孔中的MMP-3濃度-測試孔中的MMP-3濃度)X 100} + IL-I β誘導(dǎo)孔中的ΜΜΡ-3濃度。圖3 所示的是絨毛戴星草醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)和7_羥基耳葉苔內(nèi)酯(LI054A01)對3T3-L1脂肪細(xì)胞在脂肪生成和脂肪分解過程中的標(biāo)志蛋白的調(diào)控。 典型免疫印跡顯示各種標(biāo)志物蛋白如PPAR y (A)，ADRP (B)，CD36 (C)，aP2 (D)，β 3AR(E)和周脂素(F)具有反向調(diào)控作用。在LI/DD-II/054A/01或LI054A01不同濃度下處理分化 3T3-L1老鼠前脂肪細(xì)胞?？瞻讓φ张囵B(yǎng)只有相同濃度的DMS0。評估每個(gè)印跡的肌動蛋白表達(dá)作為內(nèi)部控制。通過光密度來測量每種蛋白的表達(dá)并用肌動蛋白表達(dá)來格式化。比較水平描繪成柱狀圖(側(cè)面)。圖4:所示的是絨毛戴星草醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)和7_羥基耳葉苔內(nèi)酯(LI054A01)對在巨噬細(xì)胞中高葡萄糖誘導(dǎo)⑶36表達(dá)的反向調(diào)控。在Li/ DD-II/054A/01不同濃度或1 μ g/ml的LI054A01處理J774老鼠巨噬細(xì)胞暴露在高葡萄糖 (600mg/dL)5天。空白對照培養(yǎng)是低葡萄糖(100mg/dL)。典型免疫印跡分析顯示CD36蛋白反向調(diào)控。肌動蛋白表達(dá)作為內(nèi)部控制。柱狀圖顯示的是用肌動蛋白格式化的CD36表達(dá)(低面)。圖5 典型免疫印跡顯示用莽吉柿甲醇提取物(AR93!3)處理的3T3-L1脂肪細(xì)胞在的PPAR γ (A)、ADRP(B)、aP2(C)、CD36(D)、周脂素(E)和β3Α_蛋白表達(dá)的調(diào)控。通過光密度來分析蛋白的表達(dá)并用肌動蛋白表達(dá)來格式化。每塊柱子的柱狀圖顯示的是任意單位的格式化蛋白表達(dá)。在柱狀圖中，柱狀表示的分別是空白對照(a)，2.5yg/ml的AR 933(b) 和S.Oyg/ml的AR933(c)處理細(xì)胞后的蛋白表達(dá)。圖6 典型免疫印跡顯示用絨毛戴星草醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)或莽吉柿甲醇提取物(AR93;3)或含有這兩種提取物的混合物IB處理的3T3-L1脂肪細(xì)胞在的 PPARy (A)、ADRP(B)、aP2 (C)、CD36 (D)、周脂素(E)和 β 3AR(F)蛋白表達(dá)的調(diào)控。通過光密度來分析蛋白的表達(dá)并用肌動蛋白表達(dá)來格式化。每塊柱子的柱狀圖顯示的是任意單位的格式化蛋白表達(dá)。在柱狀圖中，柱狀表示的分別是空白對照(a)，LI/DD-II/054A/01(b)， AR 933(c)和混合物IB(d)處理細(xì)胞后的蛋白表達(dá)。圖7 典型免疫印跡顯示用絨毛戴星草醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)或莽吉柿甲醇提取物(AR93;3)或混合物IB處理巨噬細(xì)胞后高葡萄糖誘導(dǎo)動脈粥樣硬化標(biāo)志物的反向調(diào)控。免疫印跡顯示⑶36(X)、MCP_I(B)和Ox-LDL(C)蛋白表達(dá)的反向調(diào)控。肌動蛋白作為附加控制。每塊柱子的柱狀圖顯示的是格式化蛋白表達(dá)。柱狀表示的是a、葡萄糖IOOmg/ dL ;b、葡萄糖 600mg/dL ;c、LI/DD-II/054A/01(5y g/ml) ；d、AR 933(5μ g/ml)；和 e、混合物IB (5 μ g/ml)的表達(dá)水平。圖8 典型免疫印跡顯示用5 μ g/ml的LI/DD-II/054A/01或AR 933或混合物IB 處理3T3-L1脂肪細(xì)胞的脂聯(lián)素蛋白的正向表達(dá)。通過光密度來分析蛋白的表達(dá)并用肌動蛋白表達(dá)來格式化。每塊柱子的柱狀圖顯示的是任意單位的格式化蛋白表達(dá)。在柱狀圖中，柱狀表示的分別是空白對照(a)、LI/DD-II/054A/01(b)、AR 933(c)和混合物IB (d)處理細(xì)胞后的蛋白表達(dá)。圖9 典型免疫印跡顯示用5 μ g/ml的LI/DD-II/054A/01或AR 933或混合物IB 處理3T3-L1脂肪細(xì)胞的PTP-IB蛋白的反向表達(dá)。通過光密度來分析蛋白的表達(dá)并用肌動蛋白表達(dá)來格式化。每塊柱子的柱狀圖顯示的是任意單位的格式化蛋白表達(dá)。在柱狀圖中，柱狀表示的分別是空白對照(a)、LI/DD-II/054A/01(b)、AR 933(c)和混合物IB (d)處理細(xì)胞后的蛋白表達(dá)。圖IOA 柱狀圖表示的是HFD誘導(dǎo)代謝綜合征模型中SD大鼠在不添加(1)和添加 (2)LI/DD-II/054A/01處理，從1周至8周后增加的平均體重g。每個(gè)柱狀表示士SD，*p < 0. 05。圖IOB 線形圖表示的是日常飲食誘導(dǎo)代謝綜合征模型中SD大鼠在添加( 和不添加(1)LI/DD-II/054A/01的身體增加的重量。每條線表示在8周的處理期內(nèi)的平均體重 g變化。圖11 柱狀圖表示的是在日常飲食誘導(dǎo)代謝綜合征模型中SD大鼠血清脂聯(lián)素濃度的增加。每個(gè)柱子表示空白(1)或LI/DD-II/054A/01(2)處理O天到56天后血清脂聯(lián)素濃度的平均士SD。N = 6，*表示統(tǒng)計(jì)意義(t-測試，8周與O周)。圖12 柱狀圖表示的是用LI/DD-II/054A/01添加到代謝綜合征模型的SD大鼠中的HOMA指數(shù)的降低。每個(gè)柱子表示空白(1)或250mg/kg的LI/DD-II/054A/01(2)處理O 天到56天后HOMA指數(shù)(任意單位)的平均士SD。N = 6，*表示統(tǒng)計(jì)意義(t-測試，8周時(shí)LI/DD-II/054A/01組與空白對照組)。圖13:柱狀圖表示的是在日常飲食誘導(dǎo)肥胖模型的SD大鼠的體重減少％。柱子 1-5 分別表示的是用 LI/DD-II/054A/03(100mg/kg)、LI/DD-II/054A/03 (250mg/kg)、AR 933(250mg/kg)、混合物lDQ50mg/kg)和西布曲明(7mg/kg)添加到處理組中體重減少％。發(fā)明詳細(xì)說明肥胖是針對特定年齡，性別和高度的體重過重，是能量攝入和能量消耗之間的不平衡的一種結(jié)果。肥胖的主要原因是由于暴飲暴食，缺乏運(yùn)動或飲食失調(diào)，某些遺傳性疾病，潛在性疾病(如甲狀腺功能減退)，服用某些藥物或久坐的生活方式。肥胖增加許多疾病和健康疾病如高血壓，血脂異常(例如，高總膽固醇或高甘油三酯水平)，2型糖尿病， 冠心病，中風(fēng)，膽囊疾病，骨關(guān)節(jié)炎，睡眠障礙，呼吸困難，腫瘤(子宮內(nèi)膜癌，乳腺癌和結(jié)腸癌)，動脈硬化和心臟衰竭的風(fēng)險(xiǎn)。代謝綜合征是一種包括機(jī)能失調(diào)的疾病，并提高了患患心臟病的風(fēng)險(xiǎn)。代謝綜合征的主要特征是超重，心血管參數(shù)(血壓高，血脂異常，甘油三酯水平高和血液中的高密度脂蛋白膽固醇水平低)，動脈粥樣硬化，糖尿病和胰島素抵抗。這些特征的主要痛苦即代謝綜合癥是極容易患上心臟病，每個(gè)特征都是一個(gè)危險(xiǎn)因素。脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在代謝綜合癥的發(fā)病機(jī)制和與之相關(guān)的疾病發(fā)揮重要的作用。他們都有著一個(gè)共同的特點(diǎn)，包括吞噬和殺滅微生物和分泌細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子 (TNF)和白細(xì)胞介素I(IL-I)的能力。在參與細(xì)胞因子，炎性分子，和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)表達(dá)中的脂肪細(xì)胞是關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，并且巨噬細(xì)胞也具有相似的生物學(xué)作用。例如，PPAR活性， 配體活化核配體超家族的轉(zhuǎn)錄因子，與兩種類型細(xì)胞的分化有關(guān)。PPAR在脂肪細(xì)胞中調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞的生長和糖代謝。PPAR在巨噬細(xì)胞中調(diào)節(jié)炎癥基因的表達(dá)和參與動脈粥樣硬化病變的發(fā)展。巨噬細(xì)胞在某些與代謝綜合癥有關(guān)的疾病狀態(tài)下對基質(zhì)金屬蛋白酶-I(MMP-I) 和基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP_3)的正向表達(dá)。同樣的，脂肪細(xì)胞除了在肥胖發(fā)展過程中積累油脂還能產(chǎn)生和分化多種對整個(gè)身體有強(qiáng)健作用的低分子量的生物活性蛋白分子，這些蛋白標(biāo)志物與不同的代謝綜合癥的特征有關(guān)。這些代謝標(biāo)志物的表達(dá)與產(chǎn)品，包括但不限于PPAR-Y，脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)，⑶36，脂肪細(xì)胞的脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2/FABP4/ A-FABP)，β -3腎上腺素受體(β 3-AR)，脂聯(lián)素和周脂素，在肥胖和代謝綜合征和其他與代謝綜合癥有關(guān)的疾病中變?yōu)楫惓！用}粥樣硬化，又稱冠狀動脈心臟病(冠心病)，是一種大血管并發(fā)癥和代謝綜合癥，對人體健康產(chǎn)生巨大的影響。這是一種慢性炎癥反應(yīng)來修改脂蛋白，主要是使低密度脂蛋白(OX LDL)被氧化。認(rèn)為動脈粥樣硬化是由血管壁巨噬細(xì)胞積累脂質(zhì)導(dǎo)致泡沫細(xì)胞的發(fā)展和細(xì)胞活素和細(xì)胞增活素的累積從而導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞增殖的發(fā)展而來的(Berliner， J. Α. ， Circulation,91 :2488-2496,1995, Boring, L. ， et.al. ， Nature, 394 :894-897, 1998)。已證實(shí)分化抗原簇36(CD36)蛋白在動脈粥樣硬化的過程中發(fā)揮了關(guān)鍵的作用。—些代謝生物標(biāo)志物分子，消化酶和涉及到的代謝綜合癥和有關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制和控制的代謝過程簡要說明概述如下1、基質(zhì)金屬蛋白酶基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是鋅依賴內(nèi)肽酶，是能夠破壞各種細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白質(zhì)， 如膠原蛋白，通常在組織中的細(xì)胞之間的空間中發(fā)現(xiàn)?；|(zhì)金屬蛋白酶主要分為三個(gè)主要群體，由膠原酶形成的成纖維細(xì)胞膠原酶-1 (MMP-I)，明膠酶包括白明膠酶A(MMP-2)和白明膠酶B (MMP-9)，和基質(zhì)裂解素包括基質(zhì)裂解素I(MMPj)和溶基質(zhì)蛋白素(MMP-7)。過量的金屬蛋白酶導(dǎo)致生物分子的降解如膠原蛋白，蛋白多糖和明膠，它對表皮有致命的后果和還可以生成軟骨，炎癥等疾病。認(rèn)為MMP是冠狀動脈疾病(CAD)的發(fā)病機(jī)制，尤其是急性冠脈綜合征(ACS)的發(fā)生。研究表明，MMP及其組織抑制劑(TIMPs)的表達(dá)和調(diào)控在早期的CAD中進(jìn)行評估。MMP-2， MMP-3和MMP-9，MMP-I和TIMP-2的血菜濃度/活性在80例患者09例ACS和31例穩(wěn)定的CAD)和40例對照的臨床研究中進(jìn)行了評估，其結(jié)論是MMP和TIMP在早期CAD的血漿水平與臨床表現(xiàn)有關(guān)而炎癥和代謝疾病的標(biāo)志物不是遺傳多態(tài)性。同樣，發(fā)現(xiàn)與巨噬細(xì)胞活性(單核細(xì)胞化學(xué)誘導(dǎo)蛋白-1，新蝶呤)，組織重塑(矩陣基質(zhì)金屬蛋白酶-9)和血栓(組織因子)有關(guān)的標(biāo)志物在急性冠脈綜合征(ACS)比穩(wěn)定型冠心病冠狀動脈疾病(CAD)始終更高。在肥胖和脂肪組織的發(fā)展中MMP的作用[正反兩方面的]已經(jīng)有一些調(diào)查研究。 其中幾個(gè)引述如下在一項(xiàng)研究中，研究者在兩個(gè)肥胖的遺傳模型(0Β/0Β和db/db小鼠)和飲食誘導(dǎo)的肥胖模型(AKR小鼠)中通過印跡法和實(shí)時(shí)PCR技術(shù)研究MMPs和TIMPs的差異表達(dá)。 他們的結(jié)論是，在mRNA水平，MMP-2，MMP-3, MMP-12, MMP-14, MMP-19和TIMP-I對肥胖的脂肪組織比對瘦肉組織具有強(qiáng)烈誘導(dǎo)作用[Chavey C et al.，J Biol Chem. 2003 ；278 (14) 11888-96]。在一個(gè)類似的研究中，在食物誘導(dǎo)肥胖小鼠上，發(fā)現(xiàn)MMP-3，-11，-12，-13，-14和 TIMP-I的mRNA的表達(dá)比標(biāo)準(zhǔn)飲食小鼠更高。還發(fā)現(xiàn)在體外研究中合成MMP抑制劑的存在可減少脂肪的生成[MaquoiE et al. , Diabetes. 2002 ；51 (4) :1093-101]。2、過氧化物酶體增生物激活受體(PPAR)-Y 過氧化物酶體增殖物激活受體Y (PPARy)是一種核受體，在肥胖和糖尿病中起著舉足輕重的作用。脂肪組織增加是通過脂肪生成過程來產(chǎn)生新的脂肪細(xì)胞和在每個(gè)細(xì)胞中增加細(xì)胞質(zhì)甘油三酯脂滴的數(shù)量的結(jié)果。在脂肪生成過程中，先脂肪細(xì)胞或肥胖細(xì)胞的增殖是這些細(xì)胞分化到顯型成熟脂肪細(xì)胞的過程。PPARy的表達(dá)主要在脂肪組織中，已知其在脂肪細(xì)胞分化和脂肪沉積中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。另一方面，PPAR γ的活性會導(dǎo)致胰島素的作用有所改善。PPAR Y是噻唑烷二酮類(TZD)類降糖藥如曲格列酮(瑞如林)，羅格列酮 (文迪雅)和吡格列酮(愛妥糖)的分子靶點(diǎn)。發(fā)現(xiàn)在小鼠指示的肥胖和糖尿病中，PPARY2 對脂肪組織的發(fā)育和胰島素的敏感性具有非常大的破壞作用。PPARy是脂肪酸攝取和脂肪生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，還對脂肪細(xì)胞分化，還對脂質(zhì)儲存和新陳代謝所需要酶的產(chǎn)生有景i口向(Zhang, J. , Proceedings of National Academy Sciences 2004 ；101 ； 10703-10708, 2004)。3、重組人脂肪組織分化相關(guān)蛋白(ADRP)ADRP是一種50kD蛋白，它的mRNA(ADRP mRNA)是1. 7kb大小，可在脂肪組織中高水平表達(dá)。在未分化的脂肪細(xì)胞中ADRP表達(dá)非常低，但在幾個(gè)小時(shí)后脂肪開始分化時(shí)ADRP 的mRNA可達(dá)到50至100倍。還在很多不同類型的積累或合成脂質(zhì)的細(xì)胞和組織中發(fā)現(xiàn) ADRP。因此，上述表明在脂肪細(xì)胞和其他細(xì)胞的質(zhì)滴形成與穩(wěn)定中ADRP可能發(fā)揮的作用。 ADRP能特別提高脂肪組織對長鏈脂肪酸的吸收。因此，ADRP是一種識別通過控制ADRP表達(dá)來控制肥胖和糖尿病的潛在化合物的重要靶子。4、脂肪細(xì)胞 CD36:⑶36是一種常見的由脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表達(dá)的蛋白標(biāo)志物。⑶36在脂肪細(xì)胞中作為脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)(FAT)功能表達(dá)是已知的。對脂肪細(xì)胞的研究表明，⑶36mRNA是脂肪細(xì)胞分化的標(biāo)志。在巨噬細(xì)胞中它是一個(gè)結(jié)合與內(nèi)化的氧化LDL(0X LDL)的清道夫受體。 CD36也可以作為一種長鏈脂肪酸(LCFA)轉(zhuǎn)運(yùn)，促進(jìn)脂肪細(xì)胞對LCFAs的攝取。在這兩類細(xì)胞的分化期間通過PPAR對CD36進(jìn)行正向調(diào)控。同時(shí)也表明，脂肪細(xì)胞可以吞噬和溶酶降解Ox LDL，主要是由CD36介導(dǎo)的。零CD36動物表明在結(jié)合和攝取氧化低密度脂蛋白方面明顯降低，以及在膽固醇、非酯化游離脂肪酸，甘油三酯的空腹水平方面明顯提高。5、巨噬細(xì)胞 CD36:⑶36是B類清道夫受體家族的原型成員。在細(xì)胞表面上的內(nèi)源性(如巨噬細(xì)胞，脂肪細(xì)胞，血小板，微血管內(nèi)皮細(xì)胞和專門的上皮細(xì)胞)和變異性(例如，黑色素瘤細(xì)胞和成纖維細(xì)胞)的多配體受體的表達(dá)賦予噬菌細(xì)胞對凋亡細(xì)胞的吞噬活性。⑶36廣泛表達(dá)，可能與多個(gè)外配體，包括血小板反應(yīng)蛋白1 (TSP-I)，長鏈游離脂肪酸(FFA的)，改良 (氧化)低密度脂蛋白(OX-LDL)，晚期糖化端(年齡)產(chǎn)品，膠原蛋白I和IV型膠原有關(guān) [PLoS Medicine，2 :152-161，2005]。⑶36在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面表達(dá)并介導(dǎo)對氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)的攝取[Nozaki，S.，J.Clin. Invest. 96 1859-1865，1995]，以及在不同的細(xì)胞過程，包括泡沫細(xì)胞的形成，脂肪酸運(yùn)輸，吞噬和清除衰老細(xì)胞，抑制血管生成， 細(xì)胞-基質(zhì)配合中發(fā)揮著作用。已知的CD36依賴攝取Ox-LDL，對膽固醇的積累和隨后的泡沫細(xì)胞形成起著關(guān)鍵作用；在動脈粥樣硬化的小鼠模型中觀察到CD36有可能參與活動 [Michael E et al,J. Exp. Med. ,203 :2613-25, 2006] CD36 可能啟動動脈粥樣硬化的傷害并是心血管疾病的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素。在缺乏⑶36受體的老鼠中，泡沫細(xì)胞形成和血管病變發(fā)展存在著中停現(xiàn)象[Febbraio M.，et.al.，J Clin Invest 105 1049-1056，2000]。通過糖尿病人動脈粥樣硬化病變中的巨噬細(xì)胞和泡沫細(xì)胞形成過程中，在巨噬細(xì)胞中高血糖誘導(dǎo)CD36的合成與增加Ox-LDL的攝取有關(guān)[PLoS Medicine, 2 152-161，2005]。增加的過氧化物酶體增殖子激活受體-、(PPAR- y )可獲得高血糖水平，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞⑶36的表達(dá)增加，并有助于加速動脈粥樣硬化。因此，上述數(shù)據(jù)表明，增加⑶36的表達(dá)與動脈粥樣硬化性血管病變的高血糖之間有一定的關(guān)系，從而用CD36作為一個(gè)潛在的動脈粥樣硬化分子標(biāo)志物提供潛在的機(jī)會和有利條件。6、瘦蛋白瘦蛋白在調(diào)節(jié)食物攝入量，能量消耗過程中起著重要作用。瘦蛋白在脂肪組織， 進(jìn)一步還包括低和中分子量的蛋白質(zhì)如脂聯(lián)素，腫瘤壞死因子-α (TNF-α)，白細(xì)胞介素-6 (IL-6)，抵抗素，纖溶酶原激性抑制劑-I (PAI-I)和血管緊張素中是一個(gè)重要的脂肪細(xì)胞因子。這些細(xì)胞因子在脂肪組織的生理機(jī)制發(fā)揮著重要作用，并認(rèn)為是肥胖，胰島素抵抗和內(nèi)皮功能障礙之間的聯(lián)系。在皮下脂肪組織中的瘦蛋白、脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)酶((FAT/⑶36)、PPAR-Y2，解偶聯(lián)蛋白 (UCP)-2，UCP-3和TNF-α的體內(nèi)基因表達(dá)受獨(dú)立于胰島素的循環(huán)脂質(zhì)的調(diào)控。因此，長期高脂血癥，有助于提高脂肪代謝和儲存，其結(jié)果是增加這些蛋白質(zhì)的表達(dá)[Nisoli E etal. ；Diabetes. 2000 Mar ；49 (3) :319-24]。7、氧化低密度脂蛋白已知當(dāng)被氧化時(shí)，LDL膽固醇是壞膽固醇并變得更加危險(xiǎn)。在向各個(gè)器官和組織供應(yīng)血液的動脈中氧化LDL可產(chǎn)生炎癥。這會導(dǎo)致動脈粥樣硬化，增加心臟病發(fā)作或中風(fēng)的風(fēng)險(xiǎn)。Holvoet等人首次發(fā)現(xiàn)代謝綜合征與高數(shù)量的氧化LDL并因此具有高水平的循環(huán)氧化LDL有關(guān)。在這些研究中，氧化LDL用一種單克隆抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)來測量。他們證實(shí)，代謝綜合征以及腹部肥胖，高血糖，高甘油三酯血癥的發(fā)病率升高與氧化LDL濃度的增加有關(guān)[Holvoet P et al.，JAMA. 2008 May21 ；299 (19) :2287-93.]。一項(xiàng)關(guān)于患有多囊卵巢綜合癥(PCOS)婦女的研究指出，氧化低密度脂蛋白和載脂蛋白E(載脂蛋白)和非酯化脂肪酸的增加與胰島素抵抗的有直接關(guān)系，可能會增加這些婦女早期動脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn)。8、單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-I)單核細(xì)胞趨化蛋白1 (MCP-I)，一個(gè)小誘導(dǎo)基因(SIG)的家族，在損傷與感染位置補(bǔ)充單核細(xì)胞中起關(guān)一定的作用。MCP-I也被稱為小誘導(dǎo)細(xì)胞因子A2 (SC YA2)和單核細(xì)胞趨化和活化因子(MCAF)。MCP-I是在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)中發(fā)現(xiàn)的，其主要起著在關(guān)節(jié)中補(bǔ)充巨噬細(xì)胞和持續(xù)發(fā)炎的作用。MCP-I也發(fā)現(xiàn)在作為腎發(fā)炎警告標(biāo)志物的狼瘡患者的尿液中[http:// www. medterms. com/script/main/art. asp ？ articlekey = 33740]。最近，報(bào)道稱MCP-I作為一個(gè)新的脂肪細(xì)胞因子參與肥胖相關(guān)的胰島素抵抗和動脈粥樣硬化的發(fā)展[Kawada T, et. al.，Asia Pac J Clin Nutr. 2008 ；17(1) :126-30]。MCP-I 與其他脂肪因子，包括瘦素，脂聯(lián)素，腫瘤壞死因子α等一樣與炎癥及炎癥反應(yīng)有關(guān)。肥胖具有慢性輕微發(fā)炎癥狀的特點(diǎn)，具有突出的炎癥標(biāo)志物和表達(dá)的循環(huán)水平。這些高濃度的炎癥相關(guān)的脂肪因子產(chǎn)物越來越多地被認(rèn)為在肥胖，尤其是II型糖尿病和代謝綜合征有關(guān)疾病的發(fā)展中起著重要作用[Trayhurn P. and Wood I. S.，Biochem Soc Trans. 2005 ；33(Pt5) 1078-81]。9、脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2/FABP4)FABPs是代謝和炎癥路徑的分子伴侶。FABP基因家族不同成員呈現(xiàn)出非統(tǒng)一性的組織表達(dá)與分布，并且在組織中的代謝活性表達(dá)非常豐富。FABI^s具有許多功能。例如， 做為脂質(zhì)伴侶，F(xiàn)ABPs可積極促進(jìn)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞特定隔層，如脂滴存儲；內(nèi)質(zhì)組織發(fā)信號，轉(zhuǎn)運(yùn)和薄膜合成；線粒體或過氧化物酶氧化[Masato，F(xiàn) et al, Nature Reviews/Drug Discovery, Vol. 7 :489_503，2008]。A-FABP是在成熟的脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中重要表達(dá)的脂肪酸膠粘蛋白。即眾所周知的FABP-4和aP2。然而，當(dāng)其脂肪細(xì)胞前體和單核細(xì)胞分別分化時(shí)，脂肪細(xì)胞的A-FABP表達(dá)水平比巨噬細(xì)胞高出(約10000倍)。A-FABP在人血清中大量存在，通過其在脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中獨(dú)特的活性，和其對代謝和炎癥反應(yīng)的整合，它可能在代謝綜合征，如肥胖、2型糖尿病和心血管疾病的主要組成因素的發(fā)展中發(fā)揮了核心作用[Masato, F et al, Nature Reviews/Drug Discovery, Vol. 7 :489-503,2008]。AP2是對脂肪細(xì)胞調(diào)節(jié)系統(tǒng)葡萄糖和脂質(zhì)代謝的表達(dá)。阻止AP2功能是一種新用來治療肥胖癥，跟蹤心臟病，代謝綜合癥和其他代謝綜合癥因素的治療策略。
10、β 3-腎上腺素能受體(β 3AR)人體的腎上腺素能系統(tǒng)是調(diào)節(jié)能量消耗和脂肪分解中的一個(gè)重要組成部分。在這個(gè)過程中茶酚胺通過刺激脂肪細(xì)胞脂解和棕色脂肪組織和骨骼肌產(chǎn)熱來調(diào)動能源豐富的脂類分解。β 3AR是分布在人類胸部和腹部大血管中茶酚胺刺激棕色脂肪組織產(chǎn)熱的主要。 β 3AR 調(diào)停茶酚胺刺激幾個(gè)物種包括人類的白色脂肪細(xì)胞脂解過程中起主要作用。棕色脂肪組織與白色脂肪組織不同，其具有大量的線粒體包括一種所謂的解偶聯(lián)蛋白，其可以促進(jìn)氧化磷酸化，從而提高代謝率。棕色脂肪組織的作用是氧化脂質(zhì)來產(chǎn)生熱量和消除體內(nèi)多余的脂肪。白色脂肪組織包括皮下和內(nèi)臟脂肪組織，更是豐富。它用來存貯可脂解來產(chǎn)生游離脂肪酸供其他組織使用的脂肪。β 3ARs選擇性激活劑在治療肥胖中有潛在的作用，因?yàn)樗麄兛稍谠谝恍│?1-或β 2-腎上腺素中提高能量的清耗。一些β 3-腎上腺素激活劑已有開發(fā)和測試實(shí)驗(yàn)。因此，選擇性β 3-激活劑可顯著地增加能量消耗，降低肥胖。11、周脂素周脂素是一種在稱為脂肪的脂肪組織的脂肪存貯結(jié)胞中的脂滴周圍形成一個(gè)涂層的蛋白質(zhì)。周脂素的作用是作為保護(hù)涂層來抗人體的天然脂肪酶，如激素敏感脂肪酶，把甘油三酸脂分解成甘油和游離脂肪酸，并這一過程稱為脂解。在一項(xiàng)研究中，認(rèn)為周脂素 [PLIN]，脂肪分化相關(guān)蛋白和ΤΙΡ47蛋白的家族蛋白在肥胖中起著關(guān)鍵作用。PLIN是一個(gè)人類肥胖風(fēng)險(xiǎn)中的候選基因，以及一個(gè)旨在降低體重和代謝綜合征風(fēng)險(xiǎn)的膳食響應(yīng)的治療調(diào)制器[Tai ES et al ；Curr Opin Lipidol. 2007 ； 18 (2) :152-6]。由于β -腎上腺素受體的活性，蛋白激酶A(PKA)的高度磷酸化周脂素在脂滴表面上的局限性。磷酸化的周脂素構(gòu)象變化并轉(zhuǎn)運(yùn)離出脂滴，向激素敏感脂肪酶調(diào)停的水解甘油三酯(脂肪分解)露出存儲的脂質(zhì)，來釋放非酯化脂肪酸(NEFA)。因此，周脂素是脂質(zhì)存貯，脂解和能量平衡的重要調(diào)節(jié)器。在肥胖動物或人中周脂素的表達(dá)增加。研究證明，在周脂素的表達(dá)與肥胖(Ρ<0.01，周脂素mRNA與身體脂肪％)之間存在一個(gè)明顯的正向關(guān)系。由于肥胖和胰島素抵抗的脂肪細(xì)胞脂解的潛在重要性，周脂素是開發(fā)抗肥胖藥物的一個(gè)主要目標(biāo)。周脂素的滅活或抑制劑可能是抗肥胖藥物的潛在應(yīng)用。12、脂聯(lián)素脂聯(lián)素是一個(gè)重要脂肪素，并證實(shí)脂聯(lián)素低水平與疾病狀態(tài)如肥胖，糖尿病和心血管疾病有關(guān)。在動物模型中證實(shí)控制脂聯(lián)素有利于糖尿病，肥胖癥和動脈粥樣硬化。在肥胖者血液中的脂聯(lián)素水平減少，并且認(rèn)為具有抗糖尿病和抗動脈粥樣硬化的作用，而在肥胖者血液中的脂聯(lián)素水平增加被認(rèn)為與食欲控制，能量消耗，脂肪和碳水化合物的代謝，細(xì)胞分化有關(guān)。在一項(xiàng)選自肥胖家庭的80例患者(43名女性和37位男性)進(jìn)行的研究中，對瘦素(ELISA)，脂聯(lián)素(ELISA)和血管性血友病因子(ELISA)的血清脂蛋白進(jìn)行空腹水平測試。發(fā)現(xiàn)與正常BMI的人相比，肥胖患者血液中的瘦素與脂聯(lián)素比(L印/ AdipoR)明顯的更高。相對工作特征(ROC)顯示相關(guān)的肥胖L印/AdipoR最大分差值。L印/ AdipoR可用于肥胖的并發(fā)癥，如胰島素抵抗和內(nèi)皮功能障礙評估的附加標(biāo)志。同時(shí)也證實(shí)，高血漿脂聯(lián)素濃度與男性心肌梗的低風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)[Pischon T et al.， JAMA. 2004Apr 14 ；291 (14) :1730-7]。因此，能增加脂聯(lián)素水平的植物化學(xué)提取物或餾分或化合物對肥胖，糖尿病，心血管系統(tǒng)和代謝綜合征和其他與代謝綜合癥有關(guān)的疾病因素有用。13、蛋白酪氨酸磷酸酶IB(PTP-IB)胰島素抵抗是2型糖尿病和肥胖的重要標(biāo)志。蛋白酪氨酸磷酸酶IB(PTP-IB)被認(rèn)為是一個(gè)對胰島素敏感細(xì)胞如如脂肪細(xì)胞，肌肉細(xì)胞和肝細(xì)胞中胰島素信號轉(zhuǎn)換的反向調(diào)控。在胰島素抵抗的糖尿病和肥胖中，PTB-IB是正表達(dá)，并且其酶活性就增加。過量的 PTPlB表達(dá)可降低胰島素受體和IRS-I磷酸化，從而產(chǎn)生生胰島素抵抗(Theodore 0. J.， et al. , Nature Reviews Drug Discovery,1 ；696-709, 2002 ；Carol L.V. ,et. al. , J. Biol. Chem. 275 :18318-18326,2000.)。因此，對處于危險(xiǎn)的肥胖和2型糖尿病患者，PTP-IB抑制劑可作為一種新的治療途徑。14、脂肪生成脂肪生成是指脂肪前體分化和增殖成為主要脂肪或脂肪細(xì)胞，并且是細(xì)胞分化的最深入研究的模型之一。在脂肪生成過程中，脂肪前體增殖或脂肪細(xì)胞前體通過這些細(xì)胞的分化，變成成熟的顯型脂肪細(xì)胞。核受體PPARy的表達(dá)主要在脂肪組織中，已知其在脂肪細(xì)胞分化和脂肪沉積中發(fā)揮關(guān)鍵作用。然而，市場上許多用于治療II型糖尿病，都圍繞 PPARy的表達(dá)和促進(jìn)脂肪生成上。脂肪細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)有些有益(瘦素，脂聯(lián)素)有些有害作用(血管緊張素)。這些分泌因子之間的平衡疾病，對巨噬細(xì)胞(細(xì)胞活素)分泌的產(chǎn)物有影響，從而導(dǎo)致代謝綜合征的發(fā)展。15、脂肪分解脂肪分解是指脂肪細(xì)胞中存貯的脂質(zhì)破裂。β 3-腎上腺素受體激活劑可刺激白色脂肪組織和產(chǎn)熱的棕色脂肪組織的脂肪分解。具有脂肪分解活性的植物化學(xué)劑可以用于肥胖，代謝綜合征和其他代謝疾病的治療。脂肪組織的脂肪分解代謝過程，導(dǎo)致存貯在脂肪細(xì)胞中的甘油三酯破裂并釋放出脂肪酸和甘油。在脂肪分解過程中所涉及的蛋白質(zhì)可成為用于肥胖和代謝綜合征治療的藥物靶點(diǎn)。16、α-淀粉酶(α-淀粉酶)α-淀粉酶是一種水解復(fù)合碳水化合物如將淀粉轉(zhuǎn)化為糖的酶。淀粉不能被吸收， 除非它們首選被消化酶淀粉酶和其他輔助酶分解。當(dāng)碳水化合物被消耗，在消化道中的酶將這些大的分子分解成較小的糖分子，并通過腸道吸收。最近，淀粉阻滯劑已被證明對治療控制肥胖有效。因此，淀粉酶抑制劑對胃腸道和代謝的影響，有助于糖尿病和肥胖的治療。植物也可用α-淀粉酶抑制劑作為防御策略。這些抑制劑在昆蟲腸道中阻礙 α-淀粉酶和蛋白酶的消化作用，因此，可作用為昆蟲拒食。從植物中分離出α-淀粉酶抑制劑可用作淀粉阻滯劑，來大大的降低選自日常飲食中的淀粉的葡萄糖的數(shù)量，并在重復(fù)給藥后降低食欲。17、α -葡萄糖苷酶(α -葡萄糖苷酶)α -葡萄糖苷酶是一種催化復(fù)合碳水化合物降解成葡萄糖的酶。其活性與α _淀粉酶相似。通過抑制這種酶，在腸道中，碳水化合物有效的分解和葡萄糖的吸收被延遲，其結(jié)果是在全天內(nèi)血糖上升較慢和較低，尤其是飯后。目前市場上的一些α-葡萄糖苷酶抑制劑，如阿卡波糖，米格列醇和伏格列波糖可作為口服抗糖尿病藥物，用于2型糖尿病的治療與控制。因此，具有α-葡萄糖苷酶抑制的植物提取物，餾分或純化合物可用于2型糖尿病更大的高血糖，尤其是餐后高血糖的血糖控制。代謝綜合癥是公認(rèn)的一種重要疾病，其可以是單獨(dú)或一系列疾病癥狀，如肥胖，糖尿病和動脈粥樣硬化，以及如果沒有及時(shí)治療將導(dǎo)致多種并發(fā)癥。即使在市場上有多個(gè)藥物可用于代謝綜合癥不同成分的治療，但它們很多具有一些相關(guān)的副作用，很少藥物可用效的用來治療代謝綜合癥和還沒有可以用于相關(guān)的全部疾病的治療。因此，發(fā)開用于代謝綜合癥，肥胖，糖尿病和動脈粥樣硬化的預(yù)防與治療，特別是使用安全和有效的天然化合物具有很大的藥用需求。在過去的幾十年中肥胖研究的關(guān)鍵發(fā)展之一就是已普遍認(rèn)識到，肥胖是一種慢性低水平炎癥。肥胖和炎癥之間的關(guān)系已從肥胖個(gè)體的一些炎癥標(biāo)志物物包括細(xì)胞因子 (TNF- α , IL-6)和急性時(shí)相蛋白如C-反應(yīng)蛋白(CRP)的血漿水平增加得到公認(rèn)(Stienstra R.，et.al. ,2007, article ID 95974)。因此，肥胖，糖尿病和動脈粥樣硬化以及其他成分的代謝綜合癥選擇性與炎癥有關(guān)系。近年來，也有人推測，慢性、低級組織的炎癥是導(dǎo)致胰島素抵抗，2 型糖尿病的主要病因(Science News, Science Daily, U. S. ,November 7，2007)。代謝疾病方面的研究活動已成為世界各地的許多科學(xué)家的一個(gè)高度優(yōu)先的對像， 相比之下的合成來源的商業(yè)藥物，來尋找替代解決方案，尤其是那些基于作為植物衍生產(chǎn)物被認(rèn)為是天然和自然的植物源性產(chǎn)品。記住這些并迫切需要用于代謝綜合癥，肥胖，糖尿病，動脈粥樣硬化和內(nèi)皮功能障礙和其他代謝疾病的預(yù)防，控制和治療的產(chǎn)品，本發(fā)明人進(jìn)行了廣泛的研究調(diào)查，涉及幾種植物提取物，餾分和純化合物的幾個(gè)體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，并意外地發(fā)現(xiàn)，在一項(xiàng)基于細(xì)胞治療效果的研究中，選自藥草絨毛戴星草的提取物，餾分和純化合物能有效改善代謝過程，包括抑制脂肪生成，和促進(jìn)脂肪水解(脂肪分解)。本發(fā)明者還意外的發(fā)現(xiàn)，在一項(xiàng)基于細(xì)胞治療效果的研究中，使用一種或多種選自藥草絨毛戴星草的提取物，餾分，活性化合物的混合物能有效改善某些標(biāo)志物分子或生物蛋白水平，改變包括代謝綜合癥，肥胖，糖尿病，動脈粥樣硬化，內(nèi)皮功能障礙和其他與代謝綜合癥有關(guān)的疾病病癥。對分化的脂肪細(xì)胞中脂質(zhì)積累的抑制是通過在3T3-L1小鼠前體脂肪細(xì)胞中用絨毛戴星草的花頭的醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)評估來表示。用處理細(xì)胞的脂肪積累抑制與模擬處理分化脂肪細(xì)胞相比較，并計(jì)算抑制百分率。意外的是，10 μ g/ml的絨毛戴星草醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)對脂肪生成顯示出明顯的抑制作用，脂質(zhì)積累的抑制率為65. 9%，概括如表1所示。同樣的，用3T3-L1前體脂肪細(xì)胞在分化/成熟脂肪細(xì)胞中對絨毛戴星草醋酸乙酯提取物(LI/DD-II/054A/01)對促脂解活性進(jìn)行了評估。通過用脂肪分解檢測試劑盒 (Chemicon International,USA)的每個(gè)步驟來測量分泌到培養(yǎng)基中的游離甘油，對成熟的脂肪細(xì)胞分解脂肪的活性進(jìn)行了評估。相比于對照含有已知濃度甘油，樣品溶液中的甘油濃度的增長百分率，相當(dāng)于絨毛戴星草提取物(LI/DD-II/054A/01)對脂肪分解的加速百分率。意外的是，25 48/!111的1^1/1)0-11/0544/01在脂肪分解中顯示出對脂肪水解/脂肪分解適度提高，為26. 7%增長，概括如表2所示。通過生物鑒定指導(dǎo)純化LI/DD-II/054A/01來識別活性化合物，并意外的發(fā)現(xiàn) 7-α-羥基-4，11 (13)-雙烯酮-12，6-內(nèi)酯，也就是所知的7-羥基耳葉苔內(nèi)酯((LI054A01 ； 1)，發(fā)現(xiàn)其起著活性作用。該活性化合物7- α -羥基-4，11 (13)-雙烯酮-12，6_內(nèi)酯也就是所知的7-羥基耳葉苔內(nèi)酯((LI054A01)顯示出較高的活性并顯示在0. 5 μ g/ml濃度時(shí)對脂質(zhì)積累(脂肪生成)的抑制率為68.7%和在5yg/ml濃度時(shí)提高47.8%的脂肪分解， 概括如表2所示。
權(quán)利要求
1.一種藥物/膳食添加劑/食品組合混合物，其特征在于至少含有的一種成分選自絨毛戴星草的提取物，餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物，還至少含有的一種成分選自莽吉柿的提取物，餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物，并選擇性的包括一種或多種選自植物、動物和微生物的生物活性化合物，藥用或膳用可接受的活性原料、維生素、礦物質(zhì)、介質(zhì)、載體和稀釋劑或其混合物。
2.一種藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于至少含有的一種成分選自絨毛戴星草的提取物，餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物，用來控制，預(yù)防和治療肥胖癥，過度減肥癥，糖尿病，動脈硬化，心血管疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾病，阿爾茨海默氏癥，認(rèn)知障礙，氧化應(yīng)激，皮膚疾病，皮膚老化，紫外線照射損害，高血壓，高膽固醇血癥(低密度脂蛋白，高密度脂蛋白，極低密度脂蛋白)，高脂血癥(甘油三酯)，免疫缺陷，癌癥，代謝綜合征和其他代謝疾病中的一種或多種。
3.藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于至少含有的一種成分選自絨毛戴星草的提取物，餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物，它與一種或多種選自植物、動物和微生物的生物活性化合物，藥用或膳用可接受的活性原料、維生素、礦物質(zhì)、介質(zhì)、載體和稀釋劑或其混合物組合，用來控制，預(yù)防和治療肥胖癥，過度減肥癥，糖尿病，動脈硬化， 心血管疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾病，阿爾茨海默氏癥，認(rèn)知障礙，氧化應(yīng)激，皮膚疾病，皮膚老化，紫外線照射損害，高血壓，高膽固醇血癥(低密度脂蛋白，高密度脂蛋白，極低密度脂蛋白)， 高脂血癥(甘油三酯)，免疫缺陷，癌癥，代謝綜合征和其他代謝疾病中的一種或多種。
4.如權(quán)利要求1所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于其用來控制， 預(yù)防和治療肥胖癥，過度減肥癥，糖尿病，動脈硬化，心血管疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾病，阿爾茨海默氏癥，認(rèn)知障礙，氧化應(yīng)激，皮膚疾病，皮膚老化，紫外線照射損害，高血壓，高膽固醇血癥 (低密度脂蛋白，高密度脂蛋白，極低密度脂蛋白)，高脂血癥(甘油三酯)，免疫缺陷，癌癥， 代謝綜合征和其他代謝疾病中的一種或多種。
5.如權(quán)利要求1所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于其用來改善至少一種生物標(biāo)志物蛋白的表達(dá)或者產(chǎn)量，所述的生物標(biāo)志物蛋白非限制性地選自基質(zhì)金屬蛋白酶-1 (MMP-I)，基質(zhì)金屬蛋白酶-3 (MMP-3)，C-反應(yīng)蛋白(CRP)，PPAR- γ，脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)，脂肪細(xì)胞CD36，巨噬細(xì)胞CD36，單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-I)，氧化低密度脂蛋白，脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2/FABP4/A-FABP)，β 3-腎上腺素受體(β 3-AR)，脂聯(lián)素，周脂素和蛋白酪氨酸磷酸酶IB(PTP IB)。
6.如權(quán)利要求2所述的含有選自絨毛戴星草成分的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合物， 或如權(quán)利要求3所述的混合物，其特征在于其用來改善至少一種生物標(biāo)志物蛋白的表達(dá)或者突變，所述的生物標(biāo)志物蛋白非限制性地選自基質(zhì)金屬蛋白酶-I(MMP-I)，基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)，C-反應(yīng)蛋白(CRP)，PPAR-γ，脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)，脂肪細(xì)胞CD36， 巨噬細(xì)胞CD36，單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-I)，氧化低密度脂蛋白，脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白 (aP2/FABP4/A-FABP), β 3-腎上腺素受體(β 3-AR)，脂聯(lián)素，周脂素和蛋白酪氨酸磷酸酶 IB(PTP IB)。
7.如上述任一權(quán)利要求所述的選自絨毛戴星草提取物、餾分、活性化合物或植物化學(xué)物或其混合物的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合物或含有所述選自絨毛戴星草的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其用來控制一種或多種代謝過程，所述的代謝過程非限制性地包括加速脂肪分解、抑制脂肪生成、抑制α-淀粉酶和抑制α-葡萄糖苷酶、增加胰島素敏感性。
8.如權(quán)利要求1或4中任意一個(gè)所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于所述的混合物至少含有的一種成分選自絨毛戴星草的提取物，餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物，它與至少一種選自莽吉柿的提取物，餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的成分相組合。
9.如權(quán)利要求1，4或8中任意一個(gè)所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于該混合物中選自絨毛戴星草成分的質(zhì)量百分含量為0.01% _99.9%，選自莽吉柿成分的質(zhì)量百分含量為99. 9% -0. 01%。
10.如上述任一權(quán)利要求所述的選自絨毛戴星草提取物、餾分、活性化合物或植物化學(xué)物或其混合物或含有所述選自絨毛戴星草的混合物，其特征在于至少含有一種耳葉苔內(nèi)酯或桉葉內(nèi)酯倍半萜類化合物，該耳葉苔內(nèi)酯或桉葉內(nèi)酯倍半萜化合物非限制性地選自耳葉苔內(nèi)酯，7-羥基耳葉苔內(nèi)酯；Ila，13-二氫-3 α，7 α-二羥基_4，5_環(huán)氧_6 β，7-桉烷內(nèi)酯；Ila，13_ 二氫-7α-乙酰氧基-β3_羥基_6β，7_桉葉醇-4-內(nèi)酯；3-酮-β-桉葉醇； Ila，13-二氫 _3α，7 a - 二羥基桉烷-4-烯 _6 a ,12-內(nèi)酯；11 α，13-二氫 _3 α，7a-二羥基耳葉苔內(nèi)酯；Ila，13-二氫-7 a，13-二羥基耳葉苔內(nèi)酯；11 a，13-二氫_7 a，-羥基-13-甲氧基耳葉苔內(nèi)酯；2 a，7 a - 二羥基_4_烯-11，13- 二羥基桉葉醇_6，12-內(nèi)酯； 2 α-羥基木香酸；3-酮-7 α-羥基桉葉醇-4-烯-6，12-內(nèi)酯(柳杉二醇)；4_表柳杉醇；絨毛戴星草內(nèi)酯苷；2 a -羥基絨毛戴星草內(nèi)酯；2 a -乙酰氧基絨毛戴星草內(nèi)酯；2 a，7 a - 二羥基絨毛戴星草內(nèi)酯；2 α -乙酰氧基-7 a -羥基絨毛戴星草內(nèi)酯；2 a -乙酰氧基_5 a -羥基異絨毛戴星草內(nèi)酯或其混合物，優(yōu)選7- a -羥基-4，11 (13)雙烯酮-12，6_內(nèi)酯也就是所知道的7-羥基耳葉苔內(nèi)酯或有關(guān)的化合物或選自絨毛戴星草的類似物。
11.如權(quán)利要求10所述的選自絨毛戴星草的成分及其混合物，其特征在于在絨毛戴星草的提取物和餾分中，活性化合物7-羥基耳葉苔內(nèi)酯或其它耳葉苔內(nèi)酯或桉葉內(nèi)酯倍半萜/其它植物化學(xué)物的質(zhì)量濃度為0. 001% -100%。
12.如權(quán)利要求11所述的選自絨毛戴星草的成分及其混合物，其特征在于在所述的混合物中，活性化合物7-羥基耳葉苔內(nèi)酯或其它耳葉苔內(nèi)酯或桉葉內(nèi)酯倍半萜/其它植物化學(xué)物的質(zhì)量濃度為0.001% -99%，優(yōu)選0.01% -95%。
13.如權(quán)利要求1，4或8所述的混合物，其特征在于莽吉柿中的活性化合物用來控制， 預(yù)防和治療肥胖癥，代謝綜合征和其他代謝疾病，非限制性地包括α-倒捻子素和Y-倒捻子素。
14.如權(quán)利要求13所述的混合物，其特征在于在莽吉柿的的提取物和餾分中，活性成分a -倒捻子素和γ -倒捻子素的單獨(dú)或組合質(zhì)量濃度為0. 001 % -99. 9%。
15.如權(quán)利要求1，4或8所述的混合物，其特征在于在所述的混合物中，活性成分 α-倒捻子素和Y-倒捻子素的單獨(dú)或組合質(zhì)量濃度為0.001% -99%，優(yōu)選0.01-95%。
16.如權(quán)利要求8所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于所改善的至少一種代謝生物標(biāo)志物蛋白非限制性地選自基質(zhì)金屬蛋白酶-I(MMP-I)，基質(zhì)金屬蛋白酶-3 (MMP-3)，PPAR- γ，脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)，脂肪細(xì)胞⑶36，巨噬細(xì)胞⑶36，單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-I)，氧化低密度脂蛋白，脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2/FABP4/A-FABP)，β 3-腎上腺素受體(β 3-AR)，脂聯(lián)素，周脂素和蛋白酪氨酸磷酸酶IB(PTP IB)。
17.如權(quán)利要求2或3所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于為了獲得如權(quán)利要求所述的健康效果而改善代謝過程中的應(yīng)答非限制性地選自脂肪分解和脂肪生成，脂肪降解，脂肪細(xì)胞再生或者是其它任何與之相關(guān)的機(jī)制。
18.如權(quán)利要求10所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于所述的耳葉苔內(nèi)酯或桉葉內(nèi)酯及相關(guān)的化合物，優(yōu)選7-羥基耳葉苔內(nèi)酯或其類似物或含有所述的化合物及至少一種選自植物、動物和微生物的生物活性化合物，藥用或膳用可接受的活性原料、維生素、礦物質(zhì)、介質(zhì)、載體和稀釋劑或其混合物的混合物，用來控制，預(yù)防和治療肥胖癥，過度減肥癥，糖尿病，動脈硬化，代謝綜合征和其他代謝疾病中的一種或多種。
19.如權(quán)利要求18所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成及其混合物，其特征在于其用來改善至少一種代謝生物標(biāo)志物蛋白的表達(dá)或者產(chǎn)量，所述的生物標(biāo)志物蛋白非限制性地選自基質(zhì)金屬蛋白酶-1 (MMP-I)，基質(zhì)金屬蛋白酶-3 (MMP-3)，C-反應(yīng)蛋白(CRP)，PPAR- γ， 脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)，脂肪細(xì)胞CD36，巨噬細(xì)胞CD36，單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-I)， 氧化低密度脂蛋白，脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2/FABP4/A-FABP)，β 3-腎上腺素受體 (β 3-AR)，脂聯(lián)素，周脂素和蛋白酪氨酸磷酸酶IB (PTP IB)。
20.如權(quán)利要求1或4所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于所述莽吉柿的提取物，餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物顯示具有抑制碳水化合物水解酶的作用，所述的碳水化合物水解酶非限制性地包括α-淀粉酶和α-葡萄糖苷，因此可以用來抑制脂肪細(xì)胞分化。
21.如權(quán)利要求1或3所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于所述的生物活性成分選自植物，動物和微生物的提取物或餾分或純化合物或植物化學(xué)物或粉末， 具有任意健康效果，如抗糖尿病活性，降血糖活性，降血脂活動，抗肥胖活性，抗高血壓活性，抗血小板聚集活動，抗感染活性，抗動脈粥樣硬化的活性和消炎活性，抗氧化劑和生物增強(qiáng)活性。
22.如上述任一權(quán)利要求所述的選自絨毛戴星草的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于所述的提取物、活性餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物選自至少一個(gè)植物部分，包括但不限于葉、花頭，莖，樹皮，根，全株或其混合物，優(yōu)選花頭。
23.如上述任一權(quán)利要求所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于所述的莽吉柿產(chǎn)生的提取物或活性餾分或活性化合物或植物化學(xué)物或其混合物是選自整個(gè)水果或水果皮或藤黃植物，并優(yōu)選莽吉柿。
24.如權(quán)利要求22或23所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成及其混合物，其特征在于所術(shù)述的提取物或活性餾分或活性化合物或植物化學(xué)物或其混合物是使用溶劑提取的，所述的溶劑選自有機(jī)溶劑、醇、水醇、水或其混合物中的一種或多種。
25.如上述任一權(quán)利要求所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組合混合物，其特征在于所述的固體載體或稀釋劑或賦形劑非限制性地包括葡萄糖，果糖，蔗糖，麥芽糖，糊精黃，白糊精，噴霧，微晶纖維素，硬脂酸鈣，硬脂酸鎂，山梨糖醇，甜菊糖甙，玉米糖漿，乳糖，檸檬酸， 酒石酸，蘋果酸，琥珀酸，乳酸，L-抗壞血酸，DL-α-生育酚，甘油，丙二醇，甘油脂肪酸酯， 聚甘油脂肪酸酯，蔗糖脂肪酸酯，失水山梨醇脂肪酸酯，丙二醇脂肪酸酯，洋槐，卡拉膠，酪蛋白，明膠，果膠，瓊脂，B族維生素，煙酰胺，泛酸鈣，氨基酸，鈣鹽，色素，香精和防腐劑和液體或稀釋劑或賦形劑，所述的液體或稀釋劑或賦形劑非限制性地包括蒸餾水，生理鹽水，葡萄糖水溶液，酒精(如乙醇)，丙二醇和聚乙二醇；油性載體，如各種動植物油，白色軟石蠟， 石蠟及蠟。
26.如上述任一權(quán)利要求所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成或其混合物，其特征在于所述的組合物或混合物是口服、局部或腸外給藥，或?qū)Σ溉閯游锘驕匮獎(jiǎng)游锔鶕?jù)需要采用吸入體內(nèi)給藥。
27.如上述任一權(quán)利要求所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成或其混合物，其特征在于所述的組合物或混合物是口服制劑，如片劑，軟膠囊，硬膠囊，藥丸，顆粒，粉末，乳液，懸浮液，糖漿，小團(tuán)丸，食品，飲料等等；腸外制劑如注射液、滴液、栓劑等等；經(jīng)皮給藥制劑如貼片、局部乳膏和凝膠、和食品原料或飲料。
28.一種控制或預(yù)防或治療一種疾病狀況的方法，所述的疾病非限制性地選自肥胖，代謝綜合征和其他代謝疾病，其特征在于該方法包括根據(jù)需要向一個(gè)對象給藥，所給的至少是一種如權(quán)利要求1、2、3或8所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成或混合物的一個(gè)有效治療量，所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成或混合物選自絨毛戴星草的提取物，餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物。
29.一種促進(jìn)脂解或抑制脂肪細(xì)胞分化的方法，其特征在于包括根據(jù)需要向一個(gè)對象或動物或溫血?jiǎng)游锝o藥，所給的至少是一種如權(quán)利要求1、2、3或8所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成或其混合物的一個(gè)有效治療量，所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成或其混合物選自絨毛戴星草。
30.一種抑制脂肪細(xì)胞分化或抑制消化酶的方法，所述的消化酶非限制性地包括 α -淀粉酶和α -葡萄糖苷，其特征在于該方法包括根據(jù)需要向一個(gè)對象或動物或溫血?jiǎng)游锝o藥，所給的至少是一種如權(quán)利要求1、4或8所述的組成或其混合物的一個(gè)有效治療量， 所述的組成選自莽吉柿的提取物，餾分、活性化合物、植物化學(xué)物或其混合物，所述的混合物包括選自莽吉柿的成分。
31.改善生物標(biāo)志物的表達(dá)或者產(chǎn)量的方法，所述的生物標(biāo)志物非限制性地選自基質(zhì)金屬蛋白酶-1 (MMP-I)，基質(zhì)金屬蛋白酶-3 (ΜΜΡ-3)，C-反應(yīng)蛋白(CRP)，PPAR- γ，脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)，脂肪細(xì)胞CD36，巨噬細(xì)胞CD36，單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-I)，氧化低密度脂蛋白，脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2/FABP4/A-FABP)，β -腎上腺素受體(3 3-AR)，脂聯(lián)素，周脂素和蛋白酪氨酸磷酸酶IB(PTP IB)，其特征在于該方法包括根據(jù)需要向一個(gè)對象或動物或溫血?jiǎng)游锝o藥，所給的至少是一種如權(quán)利要求1、2、3或8所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成或其混合物的一個(gè)有效治療量，所述的藥物/膳食補(bǔ)充劑/食品組成選自絨毛戴星草的提取物，餾分、活性化合物、植物化學(xué)物或其混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及選自絨毛戴星草及其混合物的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物，優(yōu)選的與至少一個(gè)選自莽吉柿的提取物、餾分、活性化合物和植物化學(xué)物或其混合物的化合物一起組合的藥品/膳食添加劑/食品組合物。該組合物與混合物可用于肥胖，代謝綜合征，糖尿病和其他代謝疾病的控制，預(yù)防和治療，也用于調(diào)節(jié)能量消耗，預(yù)防冠狀動脈和腹主動脈的動脈粥樣硬化，增加胰島素敏感性，改善糖耐量，降低甘油三酯水平，和平衡哺乳動物的血糖水平。
文檔編號A61K36/00GK102292093SQ201080004917
公開日2011年12月21日 申請日期2010年2月1日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月2日
發(fā)明者克里斯南·森古普塔, 岡加·拉吉·古卡拉吉, 吉蘭·布帕蒂拉吉, 崔姆爾土盧·古蘭扣堤, 拉瑪·拉吉·古卡拉吉, 文卡塔·克里斯南·拉吉·阿汝李, 文卡塔·肯納卡·蘭加·拉吉·古卡拉吉 申請人:萊拉營養(yǎng)食品有限公司