專利名稱：Prg4及其治療調(diào)制的應(yīng)用和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蛋白質(zhì)PRG4(包括其蛋白多糖)和/或其治療調(diào)制的用途。特別是，本發(fā)明涉及組合物及其方法，包括手術(shù)潤滑、體育潤滑、治療口腔邊界潤滑缺陷伴隨的疾病，皮膚填充劑，藥物遞送方法，和用于授乳潤滑。背景蛋白多糖4(prg4)基因編碼稱為巨核細(xì)胞刺激因子(MSF)、Iubricin和淺表層蛋 白(SZP)的高度糖基化蛋白質(zhì)。Lubricin首先是從滑膜液中分離，在軟骨-玻璃界面證明類似于滑膜液的體外潤滑能力。Lubricin后來被鑒定為滑膜成纖維細(xì)胞的產(chǎn)物。在大型粘液素內(nèi)0-聯(lián)P (1-3)Gal-GalNAc低聚糖如940個(gè)氨基酸的區(qū)域，由外顯子6編碼，也已被描述。首先將SZP局限在淺表層外植軟骨的表面，從條件培養(yǎng)基分離。這些分子(及其0-聯(lián)蛋白多糖)在本文統(tǒng)稱為PRG4。已顯示PRG4存在于體內(nèi)在滑膜、肌腱和半月板表面，但尚無用PRG4作為潤滑劑用于本文所述目的的說明。發(fā)明概述在各種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于處理潤滑的組合物及其使用方法。在各種實(shí)施方案中，此類潤滑包括，非限制性實(shí)例是，用作手術(shù)潤滑劑，用于預(yù)防或減小術(shù)后粘連的治療，用于治療口腔潰瘍，用作體育潤滑貼劑，用作皮膚填充劑，用于治療口干，用于藥物遞送方法或組合物，和用于授乳潤滑。本文還提供用于治療上述任何病癥(或本文所述任何其它病癥)的PRG4蛋白(如純化或分離的PRG4蛋白)。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供此類組合物和方法用于治療性補(bǔ)充和強(qiáng)化口腔的邊界潤滑分子。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中描述觀察到PRG4mRNA表達(dá)于小鼠下頜下組織，提示PRG4蛋白是分泌入口腔內(nèi)。圖I說明在各種小鼠下頜下腺的PRG4mRNA表達(dá)。通過使用瓊脂糖凝膠電泳篩選擴(kuò)增樣品中PRG4產(chǎn)物的存在。垂直泳道11-16含有來自6只不同小鼠下頜下腺組織的擴(kuò)增、確認(rèn)的PRG4 mRNA。在本發(fā)明某些情況下描述觀察到PRG4蛋白保護(hù)口腔(包括咽喉)免受進(jìn)食、談話、吞咽、講話和/或其它口部功能產(chǎn)生的顯著剪切力。在本發(fā)明某些情況下還描述觀察到見于軟骨的邊界潤滑的分子機(jī)制，包括分泌組分在動(dòng)態(tài)負(fù)荷的存在下介導(dǎo)剪切應(yīng)力的能力，當(dāng)用于潤滑口腔時(shí)可能有用。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供適合局部應(yīng)用于患者口腔的口部護(hù)理組合物，制劑含有治療量的治療有效濃度的PRG4蛋白(包括例如糖基化的PRG4蛋白，如0-聯(lián)蛋白多糖)。在一些實(shí)施方案中，口部護(hù)理藥用組合物包含PRG4蛋白，所述蛋白懸浮于水滲透平衡鹽溶液、多相乳液、凝膠、液體、霜?jiǎng)?、軟膏、噴霧劑、粘性溶液或包裹在緩釋裝置內(nèi)，或在錠劑中。
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的口部護(hù)理組合物還包含各種油提取物、甜味劑、唾液腺刺激劑、防腐劑和調(diào)味劑。在某些實(shí)施方案中，口部護(hù)理組合物還包含治療有效量的透明質(zhì)酸鈉。在某些實(shí)施方案中，口部護(hù)理組合物將還包含局麻劑比如利多卡因、利諾卡因或丙胺卡因。本發(fā)明提供治療口腔干燥癥或其伴隨癥狀(包括Sjdgren氏綜合征、過敏、口面病癥、慢性炎癥、高摩爾滲透壓濃度、衰老、處方或OTC藥物、放療、化療、神經(jīng)損傷或其任何組合伴隨的口腔干燥癥癥狀)的方法，包含局部給予有需要的個(gè)體的口腔(或口腔內(nèi)的潰瘍)，有效量的本文所述任何口部護(hù)理組合物。在又一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療口腔潰瘍的方法，包含局部給予有需要的個(gè)體的口腔潰瘍，有效量的本發(fā)明口部護(hù)理組合物。本發(fā)明某些實(shí)施方案提供適合在醫(yī)療和手術(shù)操作中使用的潤滑組合物，所述操作的非限制性實(shí)例包括插入導(dǎo)管、內(nèi)鏡、手術(shù)器械、進(jìn)入身體開口(orifice)的手套，作為手術(shù)輔件和/或臨時(shí)植入物，作為水合植入物，和用于白內(nèi)障摘除術(shù)、激光角膜切削術(shù)、人工晶狀體(IOL)插入和取出、角膜手術(shù)、青光眼手術(shù)、外傷手術(shù)、后段手術(shù)、眼整形手術(shù)和肌肉手術(shù)，所述組合物包含PRG4在手術(shù)可接受的鹽溶液中。 在某些實(shí)施方案中，本文所述任何潤滑組合物還包含透明質(zhì)酸鈉。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的潤滑組合物還包含附加賦形劑和緩和劑，包括但不限于羧甲基纖維素鈉、羥乙基纖維素、羥丙甲纖維素、甲基纖維素、右旋糖酐70、明膠、甘油、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚山梨醇酯80、丙二醇、聚乙烯醇和聚維酮。在某些實(shí)施方案中，本文所述任何潤滑組合物還包含一種或多種選自利多卡因、利諾卡因和丙胺卡因的局麻劑。在某些實(shí)施方案中，本文所述任何潤滑組合物還包含一種或多種選自葡糖酸氯己定、苯扎氯銨、溴化十六烷基三甲基銨、西吡氯銨、芐索氯銨、酒精、氯化鈉和碳酸氫鈉的消毒劑。本發(fā)明某些實(shí)施方案提供用于手術(shù)或醫(yī)療操作的提供潤滑的方法，包含將本文所述任何潤滑組合物局部應(yīng)用于任何醫(yī)療器械或涉及操作的其它表面。在各種實(shí)施方案中，手術(shù)或醫(yī)療操作包括，非限制性實(shí)例是，插入導(dǎo)管、內(nèi)鏡、手術(shù)器械、進(jìn)入身體開口的手套、作為手術(shù)輔件和/或臨時(shí)植入物、作為水合植入物，和用于白內(nèi)障摘除術(shù)、激光角膜切削術(shù)、人工晶狀體(IOL)插入和取出、角膜手術(shù)、青光眼手術(shù)、外傷手術(shù)、后段手術(shù)、眼整形手術(shù)和肌肉手術(shù)。本發(fā)明一些實(shí)施方案提供預(yù)防或減小非臥床性運(yùn)動(dòng)過程中摩擦的方法，包含將本文所述任何合適的潤滑組合物(如含有PRG4的水凝膠、溶膠、溶液或膠粘貼劑)應(yīng)用于感興趣的區(qū)域。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，組合物(如膠粘貼劑)還包含透明質(zhì)酸。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，組合物(如膠粘貼劑)還包含停留時(shí)間增加聚合物、賦形劑或緩和劑。本發(fā)明某些實(shí)施方案提供適合用作可注射皮膚填充劑的皮膚病學(xué)組合物，包含與皮膚病學(xué)可接受的介質(zhì)或溶媒(如粘性溶液)組合(如懸浮于其中)的皮膚病學(xué)有效濃度的PRG4。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的皮膚病學(xué)組合物還包含皮膚病學(xué)有效量的透明質(zhì)酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，皮膚病學(xué)用途是減小疤痕組織的出現(xiàn)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的任何皮膚病學(xué)組合物還包含皮膚病學(xué)有效量的膠原、羧甲基纖維素、聚乙二醇和/或聚環(huán)氧乙烷。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的任何皮膚病學(xué)組合物還包含選自抗凝血酶原藥、抗炎藥、激素、趨化因子、鎮(zhèn)痛藥、生長因子、細(xì)胞因子、骨原性因子和麻醉劑的藥物。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的任何皮膚病學(xué)組合物還包含維甲酸和/或氘還原水。本發(fā)明一些實(shí)施方案提供恢復(fù)人的皮膚(如在臉或所選身體區(qū)域)組織體積、皮膚充盈、紋理和緊實(shí)的方法，包含將本發(fā)明的皮膚病學(xué)組合物注入真皮或真皮下的步驟。在各種實(shí)施方案中，治療和注射可發(fā)生在臉部一處或多處區(qū)域，或者人身體的所選區(qū)域，包括但不限于眶周區(qū)、嘴唇、顴骨區(qū)、鼻唇褶、唇-下頜骨褶、頸或手。本發(fā)明某些實(shí)施方案提供提供(如促進(jìn))藥物遞送的方法，所述方法包含將生物活性劑遞送至個(gè)體，將生物活性劑在組合物中遞送，所述組合物包含生物活性劑和包含PRG4的載體混合物。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，生物活性劑包含藥物、肽、蛋白質(zhì)、抗體或其片段、核酸或顯像劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，遞送載體還包含透明質(zhì)酸鈉。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，遞送載體還包含選自L-a-二棕櫚酰磷脂酰膽堿、磷酯酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和鞘磷脂的表面活性磷脂?；旌衔锏奈锢磉f送可通過局部給藥、注射或口服，或者通過任何其它合適的給藥技術(shù)完成。 本發(fā)明一些實(shí)施方案提供預(yù)防或減小授乳(哺乳)過程中摩擦的方法，其包含將含有PRG4的本文所述任何潤滑組合物(如水凝膠、溶膠、溶液或膠粘貼劑)應(yīng)用于有需要的表面(如乳頭、乳暈和/或乳房)。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，本文所述任何組合物(如膠粘貼劑)還包含透明質(zhì)酸、羊毛脂、甘油等。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，任何組合物(如膠粘貼劑)還包含停留時(shí)間增加聚合物、賦形劑或緩和劑。通過參考結(jié)合在本說明書中提到的所有出版物和專利申請通過引用結(jié)合到本文中用于引證的目的。附圖
簡述在所附權(quán)利要求中特別列出本發(fā)明的新特征。通過參考以下列出示例性實(shí)施方案的詳述將更好地理解本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)，其中利用本發(fā)明的原理，和附圖圖I說明小鼠PRG4 mRNA表達(dá)，如通過瓊脂糖電泳然后在下頜下腺組織中擴(kuò)增證明。mRNA是通過測序確認(rèn)。圖2說明PRG4的氨基酸序列以及用于PRG4 mRNA的PCR擴(kuò)增的核酸弓丨物序列。發(fā)明詳述雖然本文已顯示和描述本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，本領(lǐng)域技術(shù)人員將明白提供此類實(shí)施方案只是用于舉例。現(xiàn)在本領(lǐng)域技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的情況下將想到許多變更、改變和取代。應(yīng)理解對本文所述本發(fā)明實(shí)施方案的各種替代都可用于實(shí)施本發(fā)明。下列權(quán)利要求打算限定本發(fā)明的范圍，從而覆蓋這些權(quán)利要求及其等同方案范圍內(nèi)的方法和結(jié)構(gòu)。通過突變引起人的屈曲指-關(guān)節(jié)病-髖內(nèi)翻-心包炎(CACP)疾病綜合征顯示PRG4的功能重要性。CACP表現(xiàn)為屈曲指、非炎癥性關(guān)節(jié)病和肥厚性滑膜炎，具有髖內(nèi)翻畸形、心包炎和胸腔積液。而且，在PRG4-無效小鼠中，觀察到軟骨退化和后來的關(guān)節(jié)障礙。因此，PRG4表達(dá)是健康滑膜關(guān)節(jié)的必需組分。PRG4是粘液素家族成員，一般在上皮層豐富，提供許多功能，包括潤滑和保護(hù)免受侵襲性微生物的傷害。粘液素的功能特性一般是通過專門的糖基化方式及其通過分子間二硫鍵形成多聚體的能力確定，在慢性疾病(如囊性纖維化、哮喘)中兩者都是變化的。從滑膜液中分離的PRG4的生物化學(xué)特征顯示在O-糖基化的分子多相性，其似乎介導(dǎo)潤滑特性。來自?；ひ篜RG4的前期數(shù)據(jù)已揭示二硫鍵二聚體的存在，除了單體形式以外，從N-和C-端都有保守的半胱氨酸富集區(qū)和在C-端有不成對半胱氨酸預(yù)測。潤滑的物理化學(xué)模式已被分為流體膜或邊界模式。起作用的潤滑模式取決于對關(guān)節(jié)組織的正常和切向力、這些表面之間切向運(yùn)動(dòng)的相對速率以及負(fù)荷和運(yùn)動(dòng)的時(shí)間歷史。摩擦系數(shù)U，提供定量測量，限定為切向摩擦力與法向力的比率。一種流體介導(dǎo)的潤滑模式類型是流體靜力的。在負(fù)荷開始和通常持續(xù)延長的時(shí)間，間質(zhì)液變?yōu)槭軌?，因?yàn)榻M織的雙相性；還可將流體通過滲出機(jī)制壓入關(guān)節(jié)面之間的表面微凸體(asperities)內(nèi)。受壓的間質(zhì)液和截留的潤滑劑池因此可明顯促成支承正常負(fù)荷，對剪切力的抗性小，利于非常低的U。而且，在負(fù)荷開始和/或運(yùn)動(dòng)時(shí)，擠壓膜、流體動(dòng)力和彈性流體動(dòng)力類型的流體膜潤滑出現(xiàn)，加壓、運(yùn)動(dòng)和變形驅(qū)動(dòng)粘性潤滑劑從和/或通過相對運(yùn)動(dòng)的兩個(gè)表面之間的縫隙。在一些情況下，流體壓力/膜與邊界潤滑相比發(fā)生的相對程度取決于許多因素。當(dāng)潤滑膜可在貼合滑動(dòng)的表面之間流動(dòng)時(shí)，它可彈性變形，出現(xiàn)彈性流體動(dòng)力潤滑。壓力、 表面糙度和相對滑動(dòng)速度決定全面流體潤滑何時(shí)開始中止，潤滑進(jìn)入新的方案。隨著速度進(jìn)一步下降，粘附于關(guān)節(jié)面的潤滑膜開始起作用，出現(xiàn)混合潤滑方案。如果速度甚至進(jìn)一步下降和只剩下一層由少數(shù)分子組成的超薄潤滑層，則出現(xiàn)邊界潤滑。在某些情況下，邊界潤滑模式因此由穩(wěn)定滑動(dòng)過程中的摩擦系數(shù)(在相對運(yùn)動(dòng)的兩個(gè)接觸面之間測量的摩擦力與所加法向力的比率)指示，不變因素是流體膜的影響形成，比如相對滑動(dòng)速度和軸向負(fù)荷。對于身體某些組織，比如關(guān)節(jié)軟骨，已推斷出現(xiàn)邊界潤滑，由流體加壓及其它機(jī)制補(bǔ)充。但是，先前尚無將邊界潤滑劑用于本發(fā)明描述的目的和用途的研究，因?yàn)槔缫褜?yōu)勢潤滑模式假定為流體動(dòng)力和彈性流體動(dòng)力性。而且，制造用于本文治療提出的應(yīng)用的產(chǎn)物傳統(tǒng)上聚焦于用長鏈聚合物比如聚卡波非、聚乙二醇和甘油進(jìn)行粘性流體相潤滑或水合。流體膜法的實(shí)例包括，用于口腔干燥癥的Biotene、Orex> Salivart,用于口腔潰瘍的Blistex,用于手術(shù)應(yīng)用的Surgilube和Healon,和用于皮膚填充劑的Restylane和JuveDerm。對于本文要求的發(fā)明，最佳潤滑可涵蓋增強(qiáng)邊界模式或涉及增強(qiáng)邊界模式和流體膜潤滑的組合。在邊界潤滑中，負(fù)荷是通過面與面接觸支持，伴隨的摩擦特性是由潤滑劑表面分子決定。在某些情況下，這種模式可能重要，因?yàn)橄鄬Φ慕M織面接觸超過總面積的 10%，這可能是出現(xiàn)大部分摩擦的地方。而且，在一些情況下，隨著負(fù)荷時(shí)間的增加和流體靜力壓的消散，涂潤滑劑的表面支承與加壓流體相比越來越高比例的負(fù)荷，所以這種模式可變得越來越占優(yōu)勢。在某些情況下，邊界潤滑減輕粘滑，因此表現(xiàn)為對穩(wěn)定運(yùn)動(dòng)和突然出現(xiàn)的運(yùn)動(dòng)的抗性下降。在一些情況下，后一種狀態(tài)與延長壓迫負(fù)荷(如活體坐或站)后支承負(fù)荷的表面有關(guān)。關(guān)節(jié)面比如在軟骨中的典型支承方式也說明在一些情況下，邊界潤滑對于組織結(jié)構(gòu)的保護(hù)和維持是重要的。在一些情況下，口腔的負(fù)荷是經(jīng)受剪切力(如以其占優(yōu)勢)，咀嚼對表面細(xì)胞和牙釉質(zhì)都產(chǎn)生顯著應(yīng)力。而且，在口腔內(nèi)潤滑劑的產(chǎn)生下調(diào)或上皮細(xì)胞萎縮的疾病狀態(tài)下，常規(guī)剪切應(yīng)力還可具有強(qiáng)烈的降解和炎癥危險(xiǎn)。嚴(yán)重萎縮或因癌癥治療比如他莫昔芬、抗組胺劑、抗抑郁劑或高血壓藥物醫(yī)源性引起的干燥還可產(chǎn)生正常水平的剪切應(yīng)力疼痛。
在一些情況下，PRG4在關(guān)節(jié)面之間的流體中蓄積，以及它與組織基質(zhì)自發(fā)結(jié)合的傾向，促成PRG4的邊界潤滑能力。在本文所述某些實(shí)施方案中，我們公開蛋白多糖4(PRG4)沿著口腔壁發(fā)揮邊界潤滑劑的作用。在一些實(shí)施方案中，這種糖蛋白(PRG4)保護(hù)口面免受摩擦力、細(xì)胞粘附和/或蛋白質(zhì)沉積。在本文所述各種實(shí)施方案中，利用各種天然和重組Iubricin蛋白和亞型的任何一種或多種。例如，美國專利號(hào)5，326，558,6, 433，142,7, 030223和7，361，738公開人巨核細(xì)胞刺激因子家族(MSF)，其各自結(jié)合到本文中用于此類公開。美國專利號(hào)6，960，562和6，743，774還公開潤滑多肽、tribonectin，包含基本純的MSF片段，其各自結(jié)合到本文中用于此類公開?？诓孔o(hù)理在本文某些實(shí)施方案中提供在有需要的個(gè)體處理口腔潤滑缺乏、口腔干燥癥或其伴隨癥狀(包括Sjdgren氏綜合征、過敏、口面病癥、慢性炎癥、高摩爾滲透壓濃度、衰老、處方或OTC藥物、放療、化療、神經(jīng)損傷或其任何組合伴隨的口腔干燥癥癥狀)的方法，包含給 予個(gè)體的口腔PRG4蛋白(如以有效量)。在一些實(shí)施方案中，將PRG4蛋白在口部護(hù)理組合物(如藥學(xué)上可接受的口部護(hù)理組合物)中給藥。在某些實(shí)施方案中，給予的PRG4蛋白是外源性PRG4蛋白(即不是接受給藥的個(gè)體天然的PRG4)。在一些實(shí)施方案中，口部可接受的制劑(如本文所述口部護(hù)理產(chǎn)物)包含緩和劑、收斂劑、軟化劑、增甜劑、刺激劑或其組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述任何組合物還包含治療有效量的透明質(zhì)酸鈉。口腔干燥癥是其中唾液腺不產(chǎn)生足量唾液的狀態(tài)。在某些情況下，口腔干燥癥引起不適，這有時(shí)可能相當(dāng)嚴(yán)重。沒有唾液，口可能有燒灼感，咽喉和舌可發(fā)生劇烈改變。牙齒可迅速腐爛，舌可變滑、開裂和容易感染。經(jīng)常有味覺喪失，因?yàn)橥僖汉兄匾南?，?jīng)常有消化的問題?？谑潜┞队谕獠凯h(huán)境最多的身體區(qū)域之一。正常來講，粘液在鼻、口和咽喉形成連續(xù)的保護(hù)層。患口腔干燥癥的患者不僅口中流體減小，而且可能具有不足量的粘蛋白和粘多糖以保持流體與細(xì)胞接觸和產(chǎn)生對刺激和感染的屏障。本文某些實(shí)施方案提供治療口腔干燥癥或其伴隨任何癥狀(具體包括上述癥狀)的方法，該方法包含口部給予有需要的個(gè)體PRG4蛋白(如包含有效量和/或濃度PRG4蛋白的口部護(hù)理組合物)。估計(jì)全國有幾百萬人患有該病。但是，患口腔干燥癥個(gè)體的實(shí)際數(shù)不詳，因?yàn)橹钡阶罱鼘υ搯栴}的普遍性或嚴(yán)重性的認(rèn)識(shí)很少?？谇桓稍锇Y的情況可能從輕度(只有體驗(yàn)輕微干燥)至重度(患者咀嚼、吞咽、消化、演講等都有嚴(yán)重問題)不同。如在授予Balslevet al.的美國專利號(hào)4，438，100指出，有多種口腔干燥癥的原因，包括生理性(如年齡、絕經(jīng)、術(shù)后狀態(tài)、脫水)以及心理性(神經(jīng)過敏)?？诟傻脑蜻€可以是藥理學(xué)性(如作為許多藥物包括利尿劑、抗關(guān)節(jié)炎劑和抗抑郁劑的常見副作用)或作為放療的結(jié)果?？谇桓稍锇Y最嚴(yán)重的情況是由頭頸部手術(shù)后放療和自身免疫性疾病比如狼瘡、Sjogrens綜合征和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎引起。見例如 P.C.Fox et al. , J. Am. Dental Assoc. 110 :519-525 (1985)。目前對于口腔干燥癥的治療具有顯著缺點(diǎn)。例如，通過消耗流體、硬糖和潤喉片可稍微減輕輕度口腔干燥癥的癥狀。但是，因?yàn)榭谇桓稍锇Y患者對牙齒腐蝕和牙齦疾病的易感性，所以真正擔(dān)心的是常規(guī)糖果和糖錠伴隨的糖攝入增加。此外，流體或糖果通常既對更嚴(yán)重的口腔干燥癥無效，對輕癥病例也不提供長效緩解。在市場上也有很多含有酒精、礦物油、甘油和聚乙二醇組合的人工唾液。在市場上也有很多羧甲基纖維素_基制劑，包括銷售商標(biāo)為Orex. RTM. (Young Dental)、Xero_Lube.RTM. (Scherer) > Moi-Stir. RTM. (Kingswood Laboratories)和 Salivart. RTM. (WestportPharmaceuticals)的那些制劑。但是，許多患者發(fā)現(xiàn)此類制劑有刺激性或味道差，且它們的潤滑作用持續(xù)相對短時(shí)間。口腔干燥癥及其伴隨癥狀可用任何合適的方法確定。在一些情況下，定性(如感覺低潤滑、不適、口干、口癢或燒灼感、疼痛感和講話困難)或定量(如通過機(jī)械、生物化學(xué)、電、光或其它定量測定方法測量)限定口部潤滑的缺乏及其伴隨癥狀。在優(yōu)選實(shí)施方案中，將組合物作為PRG4的水溶液(或混懸液)給藥。在某些實(shí)施方案中，所述組合物將還包含散塔草流浸膏、柑橘油、檸檬油、白檸檬油、橙花油、橙油、薄荷油、椒樣薄荷油、留蘭香薄荷油、茴香油、豆蘧油、肉桂油、丁香油、芫荽油、桉樹油、小茴香油、蕓香草油、肉豆蘧油、圣草流浸膏或甘草浸膏，范圍是0. 25wt. % -IOwt. %，更優(yōu)選0. 5wt. % -5. Owt. %，最優(yōu)選約1.25wt. %。在某些實(shí)施方案中，所述組合物將還包含一種或多種增甜劑，總計(jì)包含約I. Owt. % -30wt. %，更優(yōu)選10wt. % -20wt. %,最優(yōu)選約15wt. %增甜劑。 合適的增甜劑可以很容易選擇，加入本發(fā)明組合物內(nèi)的增甜劑量將通過味道決定。一般來講，增甜劑可以是引起甜味或加強(qiáng)甜味的任何一種或多種化合物。增甜劑可以為自然存在或合成來源，可具有營養(yǎng)或非營養(yǎng)價(jià)值。用于本文的合適增甜劑實(shí)例包括糖，如果糖、葡萄糖、甘油糖、蘇糖、赤鮮糖、甲基戊糖、半乳糖、木糖、核糖、右旋糖、麥芽糖和d-甘露糖；糖醇比如山梨醇、木糖醇和甘露醇；水溶性人工增甜劑比如可溶性糖精鹽，如糖精鈉或糖精鈣、環(huán)己烷氨基磺酸鹽、乙酰舒泛-K等；和二肽基增甜劑比如L-天冬氨?；?L-苯丙氨酸甲酯。合適增甜劑的其它實(shí)例列出于Encyclopedia of ChemicalTechnology,vol. 19, 2d Ed. , New York John Wiley & Sons，1969，在 593-607 頁。優(yōu)選增甜劑不致齲，特別優(yōu)選用于本文的增甜劑是木糖醇、山梨醇、甘露醇、糖精鈉及其組合。任選所述組合物還含有將刺激唾液腺分泌的“刺激劑”化合物。特別優(yōu)選用于該目的的化合物是檸檬酸，含量為約0. 25wt. % -約5. Owt. %，優(yōu)選約0. 5wt. %。將檸檬酸加入本發(fā)明組合物內(nèi)還提供令人愉快的柑橘味。任選所述組合物含有一種或多種防腐劑，通常是有效阻止流浸膏氧化和/或鈍化的量的抗氧化劑。與增甜劑相同，本領(lǐng)域技術(shù)人員將很容易選擇一種或多種防腐劑。合適防腐劑的實(shí)例包括抗壞血酸棕櫚酸酯、丁羥茴醚、丁羥甲苯、山梨酸鉀或山梨酸鈉、亞硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉、山梨酸、二氧化硫和苯甲酸鈉或苯甲酸鉀。特別優(yōu)選用于本文的防腐劑是苯甲酸鈉。如果需要，可加入本發(fā)明組合物內(nèi)的其它組分包括著色劑(可以是自然或合成的)、調(diào)味劑、香味保存劑、稀釋劑、乳化劑、賦形劑、PH緩沖劑等。合適的著色劑包括一般適合食品、藥物和化妝品應(yīng)用的染料，即稱為F.D.&C.染料的那些著色劑?？山邮艿娜玖蠎?yīng)當(dāng)為水溶性。示例性實(shí)例包括5，5-靛藍(lán)二磺酸的二鈉鹽("F.D.& C. Blue No. 2.")和4-[4_N_乙基-對磺基-芐基氨基)二苯基亞甲基]_[1-(N-乙基-N-對锍-芐基)-2，5_環(huán)己二烯亞胺的單鈉鹽("F.D.& C. GreenNo. I")。關(guān)于其它F. D. &C.著色劑和對應(yīng)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，可參考Kirk-Othmer Encyclopediaof Chemical Technology, 3rd Ed.,在第 6 卷。
調(diào)味劑是任選的，當(dāng)在不存在任何附加調(diào)味劑的情況下將檸檬酸和/或抗壞血酸加入組合物內(nèi)將提供令人愉快的柑橘味。附加調(diào)味劑可包括其它自然或人工調(diào)味劑，如薄荷油比如椒樣薄荷、冬青(水楊酸甲酯)、留蘭香薄荷、桉樹等，柑橘油比如檸檬油、橙油、白檸檬油、葡萄柚油，果香精比如蘋果香精、桃香精、紅莓香精等。當(dāng)選擇油基調(diào)味劑時(shí)，將一種或多種防腐劑包括在如上所述組合物中。還可將各種合成調(diào)味劑加入組合物內(nèi)。調(diào)味劑的含量將取決于選擇的個(gè)別調(diào)味劑，但如果存在的話，將通常占組合物約0. 5wt. % -約5. Owt. % o在某些實(shí)施方案中，所述口部護(hù)理組合物還包含見于唾液中的酶包括乳過氧化物酶、硫氰酸酯和葡萄糖氧化酶。剛才描述的組合物優(yōu)選作為水溶液、凝膠或糊劑給藥和經(jīng)過口腔噴霧劑、漱口劑、牙膏、沖洗劑或凝膠給藥。還可將所述組合物制備為樹膠或糖錠，具有與上述水溶液相同的優(yōu)選組分和優(yōu)選 相對重量組成。在各種實(shí)施方案中，用任何合適的常規(guī)方法制備樹膠組合物。例如，在一些實(shí)施方案中，將PRG4與可咀嚼膠基、一種或多種增甜劑和如上所述任選附加組分混合，以上述比例存在。在各種實(shí)施方案中，本文所述樹膠組合物包含如本文所述的調(diào)味添加劑、乳化劑和著色劑。“膠基”可以是多種組合物類型其中一種，典型地通過將各種成分如自然膠、合成樹脂、蠟、增塑劑等加熱和共混制備。見于口香糖膠基的成分的非限制性實(shí)例包括植物來源的咀嚼物比如糖膠樹膠、冠膠(crown gum)、nispero、山欖膠、節(jié)路頓膠、pendare、perillo、尼日爾杜仲膠、tunu等，合成來源的咀嚼物比如丁二烯-苯乙烯聚合物、異丁烯異戊二烯共聚物、石蠟、石油蠟、聚乙烯、聚異丁烯、聚乙酸乙烯酯等，增塑劑或柔軟劑比如羊毛脂、硬脂酸、硬脂酸鈉、硬脂酸鉀、三乙酸甘油酯、甘油等。還可將蠟，包括自然和合成蠟、石油蠟、石蠟和微晶蠟加入膠基中以獲得理想的質(zhì)地和粘度。本文所述糖錠任選成形為含有PRG4在糖果或甘油膠基中的固體。在一些實(shí)施方案中，例如,用描述于Remington' s Pharmaceutical Sciences的合適方法制備糖錠形式。在某些情況下，將PRG4與增甜劑及其它如上所述任選化合物混合，濃縮所得糖漿劑，在加熱的同時(shí)將混合物成形和/或壓縮為理想的形式。給予的PRG4量可變化，取決于受治療的受試者、口腔干燥癥嚴(yán)重度和開處方的衛(wèi)生保健專家的判斷。但是，有效的劑量方案將典型地是1-2茶匙(或l-20mL、2-15mL、3-10mL等)水性組合物(或采用膠或糖錠形式的等同物)，每天I次或2-6次口部給藥。關(guān)于水性組合物，優(yōu)選組合物保持與口粘膜接觸足夠時(shí)間以允許口的內(nèi)部涂上PRG4。優(yōu)選組合物保持在口中1-30、2-20、5-15或8-10秒。而且，組合物可以是，和可作為漱口劑給藥，其中只是用水溶液清洗口，或者如果希望的話，可吞下組合物。在各種實(shí)施方案中，本文所述任何口部護(hù)理組合物都適合利于或可用于治療患口內(nèi)潰瘍的患者，無論是普通“ 口瘡”或更嚴(yán)重的經(jīng)常作為癌癥療法副作用看到描述為口粘膜炎的潰瘍。所述方法和組合物涉及局部給予病損的藥物。在優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物提供口瘡伴隨的疼痛和不適的延長緩解。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于治療口腔潰瘍的組合物包含將在口部可接受的溶液中的PRG4局部給予有需要的口腔潰瘍。在另一個(gè)實(shí)施方案中，PRG4組合物還包含透明質(zhì)酸鈉。在又一個(gè)實(shí)施方案中，PRG4組合物還包含一種或多種選自利多卡因、利諾卡因和丙胺卡因的局麻劑。本發(fā)明進(jìn)一步提供用于治療口腔潰瘍的方法，包含局部給予有需要的口腔潰瘍有效量的在口部可接受的溶液(或在本文設(shè)想的任何其它組合物)中的PRG4，其中所述組合物采用凝膠、液體、霜?jiǎng)④浉?、噴霧劑或粘性溶液的形式。手術(shù)本發(fā)明某些實(shí)施方案提供適合潤滑器械和/或其它涉及手術(shù)或醫(yī)療操作的表面的組合物。在具體實(shí)施方案中，本文提供粘彈性溶液(或混懸液)，包含PRG4和/或透明質(zhì)酸鈉和任選附加賦形劑和緩和劑。在一些實(shí)施方案中，此類組合物是非常特別適合作為手術(shù)輔件和/或臨時(shí)植入物的生物相容性水溶液(或混懸液)。本發(fā)明某些實(shí)施方案進(jìn)一步涉及所述組合物(如溶液)作為手術(shù)/醫(yī)療潤滑劑的用途，用于插入導(dǎo)管、內(nèi)鏡、手術(shù)器械、 進(jìn)入身體開口的手套，作為手術(shù)輔件和/或臨時(shí)植入物，作為水合植入物，和用于白內(nèi)障摘除術(shù)、激光角膜切削術(shù)、人工晶狀體(IOL)插入和取出、角膜手術(shù)、青光眼手術(shù)、外傷手術(shù)、后段手術(shù)、眼整形手術(shù)和肌肉手術(shù)。一般來講，每種手術(shù)創(chuàng)傷都引起組織損傷。為了減輕或預(yù)防涉及的損傷或?qū)⑵浣抵磷钚?，尤其是在組織特別脆弱和/或不可代替的區(qū)域，可用粘彈性溶液作為手術(shù)輔件。此類溶液保護(hù)組織免受手術(shù)器械的損傷和幫助所述組織的操作。它們還用于維持距離或體積以預(yù)防組織融合和破壞這樣的距離或體積。這種類型的溶液非常特別用于眼部手術(shù)。參考白內(nèi)障手術(shù)，至今已提出下列商品Viscoat. RTM.,來自Alcon Surgical,Inc.，它含有透明質(zhì)酸鈉和硫酸軟骨素，這種產(chǎn)品目前在市場上是主導(dǎo)；Healon.RTM.和Healon GV. RTM.，目前由 A. M. 0.銷售，Amvisc. RTM.和 Amvisc Plus. RTM.，目前由 Bausch& Lomb 銷售，Vitrax. RTM.，目前由 A. M. 0.銷售，和 Viscorneal. RTM.和 Biocorneal. RTM.，由 Applicant 銷售，它含有透明質(zhì)酸鈉(NaHA) ; Orco I on. RTM.,來自 Optical RadiationCorporation,它含有聚丙烯酰胺,現(xiàn)在已購買不到；和Occucoat. RTM.,來自Storz,它含有羥丙基甲基纖維素(HPMC)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，手術(shù)潤滑劑/粘彈性流體包含PRG4在手術(shù)可接受的鹽溶液中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，手術(shù)潤滑劑/粘彈性流體還包含透明質(zhì)酸鈉。在又一個(gè)實(shí)施方案中，手術(shù)潤滑劑/粘彈性流體還包含附加賦形劑和緩和劑，包括但不限于羧甲基纖維素鈉、羥乙基纖維素、羥丙甲纖維素、甲基纖維素、右旋糖酐70、明膠、甘油、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚山梨醇酯80、丙二醇、聚乙烯醇和聚維酮。在又一個(gè)實(shí)施方案中，手術(shù)潤滑劑/粘彈性流體還包含一種或多種選自利諾卡因和丙胺卡因的局麻劑。在又一個(gè)實(shí)施方案中，手術(shù)潤滑劑/粘彈性流體還包含一種或多種選自葡萄糖酸氯己定、苯扎氯銨、溴化十六烷基三甲基銨、西吡氯銨、芐索氯銨、酒精、氯化鈉和碳酸氫鈉的消毒劑。本發(fā)明進(jìn)一步提供用于在手術(shù)或醫(yī)療操作中提供潤滑的方法，包含將有效量PRG4(如在手術(shù)可接受的溶液或在任何其它本文設(shè)想的組合物中)應(yīng)用于有需要的組織或醫(yī)療裝置。在具體實(shí)施方案中，此類方法是減小或預(yù)防手術(shù)或醫(yī)療操作伴隨的組織損傷的方法。此類手術(shù)或醫(yī)療操作包括插入導(dǎo)管、內(nèi)鏡、手術(shù)器械、進(jìn)入身體開口的手套、作為手術(shù)輔件和/或臨時(shí)植入物、作為水合植入物、白內(nèi)障摘除術(shù)、激光角膜切削術(shù)、人工晶狀體(IOL)插入和取出、角膜手術(shù)、青光眼手術(shù)、外傷手術(shù)、后段手術(shù)、眼整形手術(shù)和肌肉手術(shù)。體育潤滑本發(fā)明還提供，在某些實(shí)施方案中，減小非臥床性運(yùn)動(dòng)過程中摩擦的新組合物和方法，此類方法包含將任何組合物(如包含PRG4蛋白的任何組合物)給予有需要的表面(比如磨損面或?qū)δΣ梁?或磨損敏感的表面)。體育努力經(jīng)常包括皮膚與衣服、皮膚與皮膚和毛發(fā)與皮膚之間的顯著剪切應(yīng)力和摩擦。這經(jīng)常導(dǎo)致磨損、“古巴人擦(chub rub)”、皮膚撕裂、乳頭流血等。這種剪切誘發(fā)損傷類型在長距離競賽比如馬拉松或鐵人賽跑過程中常見。目前方法包括應(yīng)用聚合物和皮膚濕潤劑比如B0DYGLIDE。但是目前方法不能提供長效緩解，不提供減小邊界潤滑的任何機(jī)制。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，提供用于減小由非臥床性運(yùn)動(dòng)所致摩擦的包含PRG4的體育組合物。在具體實(shí)施方案中，將PRG4與或在緩釋聚合物中配制。在某些實(shí)施方案 中，緩釋聚合物包含下列羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚丙烯或其它常用賦形劑或緩和劑其中一種或多種。在某些實(shí)施方案中，體育組合物還包含透明質(zhì)酸鈉。在某些實(shí)施方案中，體育組合物還包含尿囊素(0.5%)。在某些實(shí)施方案中，體育組合物還包含蘆薈(巴巴多斯蘆薈)葉提取物、C18 36酸甘油三酯、羊蠟酸/羊脂酸硬脂酸甘油三酯、Tribehenin和或乙酸維生素E。在一個(gè)任選實(shí)施方案中，將膠粘貼劑涂上PRG4，置于摩擦區(qū)與摩擦起因之間。合適的膠粘貼劑實(shí)例包括創(chuàng)可貼或體育膠帶。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將透明質(zhì)酸和PRG4含在膠粘貼劑內(nèi)。本發(fā)明進(jìn)一步提供減小運(yùn)動(dòng)過程中摩擦的方法，包含將有效量PRG4在溶液、凝膠、溶膠(或在本文設(shè)想的任何其它組合物或裝置)中應(yīng)用于有需要的區(qū)域。皮膚填充劑一方面，本發(fā)明提供可注射的組合物，用于注入真皮或皮下組織(皮下組織)以恢復(fù)臉和所選身體區(qū)域比如頸和手的年齡相關(guān)性組織丟失。在一些情況下，將PRG4用于皮膚填充劑制劑中增加皮膚填充劑在吸收之前保持的時(shí)間量。臉部老化是幾種因素的結(jié)果，如皮膚內(nèi)固有改變、重力的作用、臉部肌肉作用于皮膚(動(dòng)態(tài)性皺紋(dynamic lines))、軟組織丟失或移位和骨骼丟失和組織彈性喪失。當(dāng)真皮開始變薄時(shí)皮膚老化，與真皮的結(jié)合變平。當(dāng)人老化時(shí)膠原減少，使皮膚有充盈感的膠原束變得更松弛和強(qiáng)度喪失。當(dāng)皮膚喪失彈性時(shí)，較不能夠耐受拉伸。與重力、肌肉牽拉和組織改變匹配，皮膚開始起皺紋。水分丟失和細(xì)胞間結(jié)合的斷裂還減小皮膚的屏障功能，可引起皮膚孔徑增大。隨著人老化，臉部失去體積、軟組織和脂肪。下頜垂肉和皺褶的出現(xiàn)通常是由臉部組織下垂和下方肌肉附著于皮膚的區(qū)域皺褶引起。作為軟組織減小的一部分，臉部變得更凹陷。更具體來講，在各種臉部區(qū)域，比如前額、眼、鼻、臉中部和臉下部，與老化有關(guān)的改變已得到很好證明。在前額區(qū)，前額和眉毛隨時(shí)間推移下垂，眉毛降低，引起上眼瞼皮膚聚在一起。當(dāng)人試圖保持眉毛和眼瞼向上以抵消這些改變時(shí)出現(xiàn)前額紋。眾所周知眼睛經(jīng)常是顯示老化征象的第一種臉部特征。眼周皮膚改變出現(xiàn)早于臉部其余部位，因?yàn)檠壑芷つw更薄。這里的皮膚含有較少腺體，經(jīng)受不斷地眨眼、斜視、摩擦和牽拉。當(dāng)臉頰開始下垂時(shí)臉中部老化，引起鼻唇褶。鼻唇褶是從鼻兩側(cè)至口角的細(xì)紋。這些皺褶已用臉部填充劑治療。在鼻區(qū)，隨著人老化，鼻伸長。伸長的常見原因是軟組織變薄和彈性丟失，引起“鼻尖下垂”和骨骼的暴露，產(chǎn)生新的隆起。在臉下部區(qū)域，隨著臉老化，臉部組織下降。這導(dǎo)致所謂“笑紋”。在該區(qū)域的皺褶和細(xì)紋已用臉部填充劑治療。在臉部進(jìn)一步向下，口角可下垂，下頜垂肉下降可產(chǎn)生經(jīng)常稱為“木偶(marionette)”紋的皺褶。而且，當(dāng)臉頰在臉部肌肉連接下頜骨的下頜固定點(diǎn)周圍下陷時(shí)形成下頜垂肉。臉部肌肉繼續(xù)向下進(jìn)入頸部成為所謂頸闊肌。該肌肉經(jīng)常在頸部中央豁成兩條帶。各種注射劑已被用于恢復(fù)臉部組織丟失。自從1980年代以來，可注射的膠原已被作為軟組織填充劑用于填充臉上的皺紋、細(xì)紋和疤痕。膠原是支持包括皮膚、肌腱和韌帶在內(nèi)的各種身體部分的自然存在的蛋白質(zhì)。多年來脂肪注射已被用于增加體積、填充皺紋、細(xì)紋和提升嘴唇。脂肪注射涉及將脂肪從患者身體的一部分(腹部、大腿或臀部)取出并將其再注入臉部皮膚下方。肉毒桿菌毒素已被用于頸痙攣、顱神經(jīng)病癥和眼痙攣。隨著最近FDA批準(zhǔn)Botox在美容方面用于眉間區(qū)域，該藥被用于使皺紋變光滑。當(dāng)注入臉部肌肉時(shí)，
透明質(zhì)酸是一種最常用的美容皮膚填充劑，其增加體積以使皺紋和細(xì)紋最小化。透明質(zhì)酸是自然存在于所有活的生物體中的線性多糖，是身體組織細(xì)胞外間隙的通用組分。透明質(zhì)酸在所有物種和組織中的相同結(jié)構(gòu)使這種多糖成為用作保健和藥品的生物材料的理想物質(zhì)。透明質(zhì)酸存在于人體的許多位置。它賦予皮膚體積、眼睛形狀和關(guān)節(jié)彈性。最高濃度見于結(jié)締組織，大多數(shù)透明質(zhì)酸(約56% )見于皮膚。在市場上由許多制造商提供各種形式的透明質(zhì)酸。最常用的透明質(zhì)酸是透明凝膠形式的非動(dòng)物穩(wěn)定化透明質(zhì)酸(NASHA)，用鏈球菌通過細(xì)菌發(fā)酵生產(chǎn)。與動(dòng)物衍生的透明質(zhì)酸不同，非動(dòng)物衍生的透明質(zhì)酸不含動(dòng)物蛋白。這限制動(dòng)物基疾病傳播或發(fā)生對動(dòng)物蛋白過敏反應(yīng)的危險(xiǎn)。最有名的非動(dòng)物穩(wěn)定化透明質(zhì)酸由Qued, Seminariegatan, Uppsala制造，以商品名Restylane. RTM.市售獲得。自從它在1996年市售以來，估計(jì)在全世界已治療超過2，500, 000次。其它非動(dòng)物穩(wěn)定化透明質(zhì)酸產(chǎn)品包括來自Q-med的Perlane. RTM.，它具有大于 Restylane. RTM.的顆粒，和來自 Genzyme Corporation 的 Captique. TM.。另一種常用填充劑是由Genzyme Corporation制造的透明質(zhì)燒，以商品名Hylaform Plus市售獲得。Hylaform Plus是無菌、無熱原、粘彈性、澄清、無色、透明的凝膠植入物，由透明質(zhì)烷的交聯(lián)分子組成。雖然透明質(zhì)酸和衍生物是最常用的皮膚填充劑，但它們具有有限的活力。每4-12個(gè)月或甚至更短時(shí)間就需要再注射。這是HA皮膚填充劑的主要缺點(diǎn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，可注射的組合物包含PRG4在粘性溶液中。在又一個(gè)實(shí)施方案中，可注射的組合物包含與皮膚病學(xué)有效量的透明質(zhì)酸組合的PRG4。在又一個(gè)實(shí)施方案中，可注射的組合物包含與皮膚病學(xué)有效量的膠原、羧甲基纖維素、聚乙二醇和/或聚環(huán)氧乙烷組合的PRG4。在又一個(gè)實(shí)施方案中，可注射的組合物包含與選自抗凝血酶原藥、抗炎藥、激素、趨化因子、鎮(zhèn)痛藥、生長因子、細(xì)胞因子、骨原性因子和麻醉劑的藥物組合的PRG4。在又一個(gè)實(shí)施方案中，可注射的組合物包含與維甲酸和/或氘還原水組合的PRG4。
恢復(fù)臉部或所選人體區(qū)域的組織體積、皮膚充盈、紋理和緊實(shí)的治療方法包含以下的步驟將PRG4組合物(或本文設(shè)想的其它皮膚組合物)注入臉部或者所選人體區(qū)域一處或多處的真皮或真皮下。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療區(qū)域包括眶周區(qū)、嘴唇、顴骨區(qū)、鼻唇褶、唇-下頜骨褶、頸或手。藥物遞送在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供藥物遞送的方法，該方法包含與PRG4蛋白組合(如混合)的生物活性劑。在一些實(shí)施方案中，將生物活性劑遞送至受試者，在組合物中遞送，所述組合物包含與包含PRG4的載體混合的生物活性劑。用于藥物釋藥的載體材料是基于多種材料，比如有機(jī)或無機(jī)聚合物、金屬和陶瓷。盡管不受任何理論的約束，但據(jù)信用PRG4作為釋藥方法將導(dǎo)致靶化合物的停留時(shí)間增加和優(yōu)秀的定位。在一個(gè)實(shí)施方案中，生物活性劑包含藥物、肽、蛋白質(zhì)、抗體或其片段、核酸或顯像 齊U。在另一個(gè)實(shí)施方案中，遞送載體還包含透明質(zhì)酸鈉。在又一個(gè)實(shí)施方案中，遞送載體還包含選自L- a - 二棕櫚酰磷脂酰膽堿、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和鞘磷脂的表面活性磷脂?；旌衔锏奈锢磉f送可通過局部給藥、注射或口服完成。哺乳潤滑在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明為授乳母親提供潤滑的方法，所述方法包含將PRG4蛋白給予有需要的表面。在授乳過程中，不完全的銜乳可引起嬰兒口的選用區(qū)(palette)與母親乳頭之間明顯的剪切應(yīng)力。隨著時(shí)間推移，乳頭變得發(fā)炎和疼痛。現(xiàn)有方法，比如羊毛脂軟膏或凝膠貼劑，只可以使用有限的時(shí)間，對某些人而言可能弄臟或刺激乳頭，因?yàn)闄C(jī)制是流體膜潤滑。PRG4邊界潤滑，在單個(gè)單層中發(fā)揮作用，提供優(yōu)越的停留時(shí)間且沒有其它霜?jiǎng)┊a(chǎn)生的殘留物。在某些實(shí)施方案中，流體膜和邊界潤滑的組合可能有用。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，授乳潤滑劑由PRG4在水溶液、凝膠、溶膠或膠粘貼劑中組成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，潤滑劑還包含透明質(zhì)酸鈉。在又一個(gè)實(shí)施方案中，潤滑劑包含附加賦形劑和緩和劑。在本申請自始至終，參考各種出版物。所有這些出版物和在那些出版物中全部引用的那些參考文獻(xiàn)的公開內(nèi)容從而通過引用結(jié)合到本申請中，以便更全面地描述本發(fā)明所屬領(lǐng)域的狀態(tài)。還應(yīng)理解上文涉及本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，可在不脫離本發(fā)明范圍的情況下對其進(jìn)行多種改變。通過下列實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，無論如何不應(yīng)將其視為限制本發(fā)明的范圍。相反，應(yīng)清楚地理解在閱讀本文描述后，本領(lǐng)域技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的主題和/或附屬權(quán)利要求范圍的情況下，可將其訴諸各種其它實(shí)施方案、修飾及其等同物。如用于本文，術(shù)語“PRG4 ”、“PRG4蛋白”或“蛋白多糖4 ”蛋白，與術(shù)語“ Iubricin ”蛋白可互換使用。PRG4用于本文還包括術(shù)語巨核細(xì)胞刺激因子(MSF)，其已被UCL/HGNC/HUGO Human Gene Nomenclature 數(shù)據(jù)庫接受,和淺表層蛋白(SZP)。PRG4 或 Iubricin 蛋白(在本文與Iubricin蛋白多糖可互換使用)用于本文指任何分離或純化的天然或重組Iubricin蛋白、同系物、功能片段或基序、亞型和/或其突變體。在某些實(shí)施方案中，分離或純化的PRG4蛋白包含人天然或重組Iubricin蛋白的氨基酸序列。在其它實(shí)施方案中，分離或純化的PRG4蛋白包含由prg4基因外顯子編碼的氨基酸序列，該基因外顯子編碼全長PRG4蛋白或亞型的一級(jí)結(jié)構(gòu)。蛋白多糖4(prg4)基因含有12個(gè)外顯子。本文所用PRG4蛋白包含由prg4基因外顯子1-12、更優(yōu)選外顯子6-12、最優(yōu)選外顯子9-12編碼的氨基酸序列。如用于本文，PRG4蛋白包括現(xiàn)在已知或后來描述的任何PRG4蛋白。在某些實(shí)施方案中，優(yōu)選的PRG4蛋白氨基酸序列提供于SEQ ID N0:1。PRG4蛋白以至少60 %同源性、優(yōu)選75%同源性、更優(yōu)選85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更大同源性共享任何已知PRG4蛋白或亞型的一級(jí)氨基酸結(jié)構(gòu)。在某些實(shí)施方案中，優(yōu)選的PRG4蛋白具有50kDa-400kDa的平均摩爾質(zhì)量，包含PRG4蛋白的一種或多種生物活性部分，或功能片段，比如潤滑片段，或其同系物。如用于本文，PRG4蛋白包含蛋白質(zhì)的生物活性部分。如用于本文，PRG4蛋白的“生物活性部分”包括包含與蛋白質(zhì)的氨基酸序列十分類似或由其衍生的氨基酸序列的蛋白質(zhì)的功能片段，所述蛋白質(zhì)包括少于全長蛋白質(zhì)的氨基酸，表現(xiàn)全長蛋白質(zhì)的至少一種活性。通常生物活性部分包含具有蛋白質(zhì)至少一種活性的功能域或基序。蛋白質(zhì)的生物活性部分 可以是長度為例如10、25、50、100、200或更多氨基酸的多肽。在一個(gè)實(shí)施方案中，PRG4蛋白的生物活性部分可以單獨(dú)作為治療劑或與其它治療劑組合用于治療不理想或下降的陰道邊界潤滑。在又一個(gè)實(shí)施方案中，將PRG4的功能片段、多聚體(如二聚體、三聚體、四聚體等)、同系物或直系同源物用于口部護(hù)理組合物中。PRG4的功能片段和同系物包括在中央粘液素樣KEPAPTT-重復(fù)域內(nèi)較少重復(fù)、蛋白質(zhì)的糖基化和非糖基化形式、剪接變體、重組形式等的那些功能片段和同系物。PRG4的潤滑片段表現(xiàn)人PRG4的至少20%、30%、40%、50 %、60 %、70 %、80 %、90 %或95 %潤滑作用，如定性、機(jī)械、光、電或通過生物化學(xué)測定測量。幾種天然和重組PRG4或Iubricin蛋白的核酸和氨基酸序列，和PRG4蛋白和各種亞型的表征公開于，例如授予Turner et al.的美國專利號(hào)5，326，558、6，433，142、7，030，223、7，361，738，和授予 Jay et al.的美國專利號(hào) 6，743，774 和 6，960，562。授予Flannery et al.的美國公開號(hào)20070191268還公開可用于本發(fā)明的重組PRG4或Iubricin分子。PRG4蛋白的分離、純化和重組表達(dá)方法在本領(lǐng)域眾所周知。在某些實(shí)施方案中，所述方法開始是用標(biāo)準(zhǔn)分子生物學(xué)技術(shù)比如PCR或RT-PCR克隆和分離編碼PRG4蛋白或亞型的mRNA和cDNA。然后將編碼PRG4蛋白或亞型的分離cDNA克隆入表達(dá)載體內(nèi)，進(jìn)一步轉(zhuǎn)化和表達(dá)于宿主細(xì)胞中用于制備重組PRG4蛋白。如用于本文，“重組”指體外合成或另外處理的多核苷酸(如“重組多核苷酸”)，指用重組多核苷酸在細(xì)胞或其它生物系統(tǒng)中制備基因產(chǎn)物的方法，或指由重組多核苷酸編碼的多肽(“重組蛋白”)?！爸亟M”還包括將具有各種編碼區(qū)或域或啟動(dòng)子序列的核酸從不同來源接合入表達(dá)盒或載體內(nèi)用于表達(dá)，例如融合蛋白的可誘導(dǎo)或組成型表達(dá)，包含PRG4基因的活性域和用本發(fā)明弓I物擴(kuò)增的核酸序列。在某些實(shí)施方案中，編碼PRG4蛋白的核酸可含有一種或多種突變、缺失或插入。在此類實(shí)施方案中，編碼PRG4蛋白的核酸與野生型編碼PRG4蛋白的核酸為至少60%同源性，優(yōu)選75%同源性，更優(yōu)選85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%，或更大同源性。如用于本文，術(shù)語“cDNA”包括與存在于細(xì)胞或生物體mRNA中的mRNA分子互補(bǔ)的DNA，所述mRNA可用酶比如逆轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)化為cDNA。在某些實(shí)施方案中，將編碼PRG4蛋白的cDNA用本領(lǐng)域熟知的RT-PCR法從表達(dá)于人角膜或結(jié)膜上皮細(xì)胞的PRG4 mRNA分離。如用于本文，術(shù)語“多核苷酸”、“核酸/核苷酸”和“寡核苷酸”可互換使用，包括任何長度核苷酸的聚合物形式，無論是脫氧核糖核苷酸或核糖核苷酸，或其類似物。多核苷酸可具有任何三維結(jié)構(gòu)，可發(fā)揮任何功能，已知或未知的。下列是多核苷酸的非限制性實(shí)例基因或基因片段、外顯子、內(nèi)含子、信使RNA (mRNA)、轉(zhuǎn)移RNA、核糖體RNA、核酶、DNA、cDNA、基因組DNA、重組多核苷酸、分支多核苷酸、質(zhì)粒、載體、任何序列的分離DNA、任何序列的分離RNA、核酸探針和引物。多核苷酸可以是自然存在、合成、重組或其任何組合。多核苷酸可包含修飾核苷酸，比如甲基化核苷酸和核苷酸類似物。如果存在，可在聚合物組裝之前或之后修飾核苷酸結(jié)構(gòu)。核苷酸序列可被非核苷酸組分間斷?？蓪⒍嗪塑账嵩诰酆虾筮M(jìn)一步修飾，比如通過與標(biāo)記組分綴合。該術(shù)語還包括雙鏈和單鏈分子。除非 另外指定或要求，本發(fā)明多核苷酸的任何實(shí)施方案包括雙鏈形式和已知或預(yù)測組成雙鏈形式的兩種互補(bǔ)單鏈形式中的每一種。如用于本文，術(shù)語“多核苷酸序列”是多核苷酸分子的字母順序表示。多核苷酸由4種核苷酸堿基的具體序列組成腺嘌呤(A);胞嘧啶(C);鳥嘌呤(G);胸腺嘧啶(T);當(dāng)多核苷酸是RNA而不是DNA時(shí)尿嘧啶(U)代替胸腺嘧啶?？蓪⑦@種字母順序表示輸入計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)庫內(nèi)，用于生物學(xué)信息應(yīng)用比如功能基因組學(xué)和同源性搜索。如用于本文，術(shù)語“分離的多核苷酸/cDNA”包括從存在于多核苷酸自然來源的其它多核苷酸分子分離的多核苷酸分子。例如，關(guān)于基因組DNA，術(shù)語“分離的”包括從其中基因組DNA自然關(guān)聯(lián)的染色體分離的多核苷酸分子。優(yōu)選“分離的”多核苷酸不含有在衍生多核苷酸的生物體基因組DNA中自然位于多核苷酸側(cè)面的序列(即位于感興趣的多核苷酸5’和3’端的序列)。例如，在各種實(shí)施方案中，編碼用于本發(fā)明的PRG4蛋白的分離多核苷酸分子可含有小于約5kb、4kb、3kb、2kb、lkb、0. 5kb或0. Ikb核苷酸序列，其在衍生多核苷酸的細(xì)胞基因組DNA中自然位于多核苷酸分子的側(cè)面。而且，“分離的”多核苷酸分子，比如cDNA分子，當(dāng)通過重組技術(shù)制備時(shí)可基本不含其它細(xì)胞物質(zhì)或培養(yǎng)基，或者當(dāng)化學(xué)合成時(shí)可基本不含化學(xué)前體或其它化學(xué)劑。如用于本文，“基因”包括含有至少一個(gè)在轉(zhuǎn)錄和翻譯后能夠編碼特定多肽或蛋白質(zhì)的開放讀碼框的多核苷酸。本文所述任何多核苷酸序列還可用于鑒定與其關(guān)聯(lián)的基因的更大片段或全長編碼序列。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知分離更大片段序列的方法。如用于本文，“天然或自然存在的”多核苷酸分子包括，例如，具有自然存在的核苷酸序列的RNA或DNA分子(如編碼自然蛋白質(zhì))。如用于本文，術(shù)語“多肽”或“蛋白質(zhì)”可互換使用，包括兩種或多種亞單位氨基酸、氨基酸類似物或擬肽的化合物。亞單位可通過肽鍵連接。在另一個(gè)實(shí)施方案中，亞單位可通過其它鍵如酯、醚等連接。如用于本文，術(shù)語“氨基酸”包括天然和/或非天然或合成的氨基酸，包括甘氨酸，D或L旋光異構(gòu)體，和氨基酸類似物和擬肽。三種或多種氨基酸的肽常稱為寡肽。大于三種或多種氨基酸的肽鏈稱為多肽或蛋白質(zhì)。在某些實(shí)施方案中，本文所用PRG4蛋白稱為PRG4蛋白或其各種同系物或亞型，自然或重組表達(dá)于人或其它宿主細(xì)胞中。如用于本文，“表達(dá)(express)”或“表達(dá)(expression) ”包括將多核苷酸轉(zhuǎn)錄為RNA和/或翻譯為多肽的過程。如果多核苷酸是用基因組DNA衍生，則表達(dá)可包括剪接RNA，如果選擇適當(dāng)?shù)恼婧思?xì)胞宿主。表達(dá)需要的調(diào)控元件包括啟動(dòng)子序列以結(jié)合RNA聚合酶和轉(zhuǎn)錄起始序列用于核糖體結(jié)合。例如，細(xì)菌表達(dá)載體包括啟動(dòng)子比如Iac啟動(dòng)子和用于轉(zhuǎn)錄起始Shine-Dalgarno序列和起始密碼子AUG。類似地，真核細(xì)胞表達(dá)載體包括RNA聚合酶II的異源性或同源性啟動(dòng)子、下游多聚腺苷酸信號(hào)、起始密碼子AUG和用于核糖體脫離的終止密碼子。此類載體可市售獲得或者通過描述于本領(lǐng)域熟知方法的序列組裝，例如下文描述用于構(gòu)建通用載體的方法。如用于本文，術(shù)語“載體”包括將插入的多核苷酸轉(zhuǎn)移至宿主細(xì)胞和/或在宿主細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移的自復(fù)制核酸分子。該術(shù)語打算包括主要功能是將核酸分子插入細(xì)胞內(nèi)的載體、主要功能是復(fù)制核酸的復(fù)制載體和功能是轉(zhuǎn)錄和/或翻譯DNA或RNA的表達(dá)載體。還打算包括提供不止一種上述功能的載體。如用于本文，“宿主細(xì)胞”打算包括任何個(gè)體細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)基，它們可以是，或已經(jīng)是，載體或摻入外源性多核苷酸和/或多肽的受體。還打算包括單細(xì)胞的子代。由于自然、偶然或故意的突變，所以子代可以不必與原始母細(xì)胞完全相同(在形態(tài)學(xué)或在基因組 或總DNA互補(bǔ)方面)。細(xì)胞可以是原核細(xì)胞或真核細(xì)胞的，包括但不限于細(xì)菌細(xì)胞、酵母細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞，包括但不限于小鼠、大鼠、猴或人細(xì)胞。如用于本文，“宿主細(xì)胞”還包括遺傳上修飾的細(xì)胞。術(shù)語“遺傳上修飾的細(xì)胞”包括細(xì)胞，其含有和/或表達(dá)外來或外源性基因或多核苷酸序列，其轉(zhuǎn)而修飾細(xì)胞或其子代的基因型或表型?！斑z傳上修飾的”還包括含有或表達(dá)已被引入細(xì)胞內(nèi)的基因或多核苷酸序列的細(xì)胞。例如，在該實(shí)施方案中，遺傳上修飾的細(xì)胞已具有引入基因，該基因?qū)?xì)胞也是內(nèi)源性的。術(shù)語“遺傳上修飾的”還包括對細(xì)胞內(nèi)源性核苷酸的任何添加、缺失或破壞。如用于本文，“宿主細(xì)胞”可以是表達(dá)人PRG4蛋白的任何細(xì)胞。如用于本文，“同系物”在本文被限定為分別具有類似、或基本一致的核酸或氨基酸序列的兩種核酸或肽。術(shù)語“同系物”還包括由于遺傳密碼簡并所以編碼相同氨基酸序列、區(qū)別在于一種核苷酸序列的核酸分子。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，同系物包括編碼PRG4蛋白(如SEQ ID NO :1，見如圖2)的核酸的等位變體、直系同源物、旁系同源物、激動(dòng)劑和拮抗劑。如用于本文，術(shù)語“直系同源物”指來自不同物種、但從共同的祖先基因通過物種形成進(jìn)化而來的兩種核酸。正常來講，直系同源物編碼具有相同或類似功能的肽。特別是，本發(fā)明的直系同源物將一般表現(xiàn)至少80-85 %，更優(yōu)選85-90 %或90-95 %，最優(yōu)選95 %、96%,97%,98%或甚至99%一致性，^ 100%序列一致性，與任何已知PRG4蛋白(如SEQID NO :1)、亞型或其類似物的所有或部分氨基酸序列相比，將表現(xiàn)類似于這些肽的功能。如還用于本文，術(shù)語“旁系同源物”指通過在基因組內(nèi)復(fù)制相關(guān)的兩種核酸。旁系同源物通常具有不同功能，但這些功能可能相關(guān)。為了確定兩種氨基酸序列的序列一致性百分?jǐn)?shù)，將序列對齊用于最佳比較的目的(如可將空格引入一種多肽的序列中用于與其它多肽或核酸最佳對齊)。然后比較對應(yīng)氨基酸位置的氨基酸殘基。當(dāng)一種序列中的位置被在其它序列對應(yīng)位置的相同氨基酸殘基占據(jù)時(shí)，則分子在該位置是一致的?？稍趦煞N核酸序列之間進(jìn)行相同類型的比較。兩種序列之間的序列一致性百分?jǐn)?shù)是序列共享一致位置數(shù)的函數(shù)(即序列一致性百分?jǐn)?shù)=一致位置數(shù)/總位置數(shù)X 100)。優(yōu)選本發(fā)明包括的分離氨基酸同系物與任何已知PRG4蛋白(如SEQ ID NO :1)的完整氨基酸序列相比，至少約50-60%，優(yōu)選至少約60-70%，更優(yōu)選至少約 70-75 %、75-80 %、80-85 %、85-90 % 或 90-95 %，最優(yōu)選至少約 96 %、97 %、98 %、99 % 或
更大一致性。在某些實(shí)施方案中，編碼PRG4蛋白的分離核酸同系物包含與編碼此類PRG4蛋白(如SEQ ID NO 1)的氨基酸序列的核苷酸序列相比，至少約40-60%，優(yōu)選至少約60-70%，更優(yōu)選至少約70-75 75-8080-8585-90 %或90-95 %，甚至更優(yōu)選至少約95 %、96 %、97 %、98 %、99%或更大一致性的核苷酸序列。在本領(lǐng)域眾所周知兩種核酸或肽序列之間序列一致性百分?jǐn)?shù)的確定。例如，可用Vector NTI 6. 0 (PC)軟件包(InforMax, Bethesda,MD)確定兩種核酸或肽序列之間的序列一致性百分?jǐn)?shù)。在該方法中，空格開放罰分15和空格擴(kuò)展罰分6. 66用于確定兩種核酸的一致性百分?jǐn)?shù)?？崭耖_放罰分10和空格擴(kuò)展罰分0. I用于確定兩種多肽的一致性百分?jǐn)?shù)。 所有其它參數(shù)都設(shè)為缺省設(shè)置。用于多重對齊的目的(Clustal W算法)，空格開放罰分是10，空格擴(kuò)展罰分是0. 05,blosum62矩陣。應(yīng)理解用于確定序列一致性的目的，當(dāng)比較DNA序列與RNA序列時(shí)，胸腺嘧啶核苷酸等同于尿嘧啶核苷酸。而且，本文所用PRG4蛋白包括在嚴(yán)格條件下由與編碼PRG4蛋白的多核苷酸雜交的多核苷酸編碼的PRG4蛋白。如用于本文，“雜交”包括其中一種或多種多核苷酸反應(yīng)以形成通過核苷酸殘基堿基之間的氫鍵穩(wěn)定化的復(fù)合物的反應(yīng)。氫鍵可通過Watson-Crick堿基配對、Hoogstein結(jié)合或任何其它序列特異性方式出現(xiàn)。復(fù)合物可包含兩股形成雙鏈結(jié)構(gòu)、三股或多股形成多股復(fù)合物、單一的自雜交股，或這些的任何組合。雜交反應(yīng)可構(gòu)成更廣泛過程的一步，比如啟動(dòng)PCR反應(yīng)，或者核酶對多核苷酸的酶裂解。雜交反應(yīng)可在不同的嚴(yán)格條件下進(jìn)行。本發(fā)明包括能夠在低嚴(yán)格條件、更優(yōu)選嚴(yán)格條件且最優(yōu)選高嚴(yán)格條件下與編碼本文所述PRG4蛋白的多核苷酸雜交的多核苷酸。如用于本文，術(shù)語“嚴(yán)格條件”指在10XDenharf s溶液、6XSSC、0. 5 % SDS和IOOmg/ml變性鮭精DNA中在60°C雜交過夜。將印跡在62°C按順序在3XSSC/0. 1% SDS、接著在1XSSC/0. 1% SDS、最后在0. 1XSSC/0. 1% SDS中沖洗，每次30分鐘。如還用于本文，在某些實(shí)施方案中，短語“嚴(yán)格條件”指在65 °C在6 X SSC溶液中雜交。在其它實(shí)施方案中，“高嚴(yán)格條件”指在10XDenhartJ s溶液、6XSSC、0. 5% SDS和100mg/ml變性鮭精DNA中在65°C雜交過夜。將印跡在65°C按順序在3XSSC/0. 1% SDS、接著在I X SSC/0. 1% SDS、最后在0. 1XSSC/0. 1% SDS中沖洗，每次30分鐘。在本領(lǐng)域眾所周知核酸雜交的方法。因此，編碼本文所用PRG4蛋白的核酸包括與編碼人PRG4蛋白(如SEQ ID NO 1)或其特異性亞型或同系物的多核苷酸序列相比，具有至少60%同源性，優(yōu)選75%同源性，更優(yōu)選85%，更優(yōu)選90%，最優(yōu)選95%、96%、97%、98%、99%同源性的核酸。而且，本文所用PRG4蛋白還可以是嵌合蛋白或融合蛋白。如用于本文，“嵌合蛋白”或“融合蛋白”包含與第二多肽有效連接的第一多肽。嵌合蛋白可任選包含與第一或第二多肽有效連接的第三、第四或第五或其它多肽。嵌合蛋白可包含兩種或多種不同的多肽。嵌合蛋白可包含多次復(fù)制的同一種多肽。嵌合蛋白還可包含一種或多種多肽中的一種或多種突變。在本領(lǐng)域眾所周知制備嵌合蛋白的方法。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，嵌合蛋白是PRG4蛋白與其它PRG4蛋白亞型的嵌合體。如用于本文，“分離的”或“純化的”蛋白質(zhì)、多核苷酸或分子指離開它們自然存在的環(huán)境，或者基本不含細(xì)胞物質(zhì)，比如來自衍生蛋白質(zhì)、多核苷酸或分子的細(xì)胞或組織來源的其它污染蛋白質(zhì)，或者基本不含化學(xué)合成時(shí)的化學(xué)前體或其它化學(xué)劑。措辭“基本不含細(xì)胞物質(zhì)”包括與從中分離或重組制備或合成的細(xì)胞的細(xì)胞組分分離的制劑。在某些實(shí)施方案中，措辭“基本不含細(xì)胞物質(zhì)”包括具有小于約30% (干重)其它蛋白質(zhì)(本文也稱為“污染蛋白”)、更優(yōu)選小于約20%、還更優(yōu)選小于約10%、最優(yōu)選小于約5%其它蛋白質(zhì)的PRG4蛋白制劑。當(dāng)重組制備蛋白質(zhì)或多核苷酸時(shí)，還優(yōu)選基本不含培養(yǎng)基，即培養(yǎng)基代表小于約20%、更優(yōu)選小于約10%、最優(yōu)選小于約5%感興趣的蛋白質(zhì)制劑的體積。
從以下優(yōu)選實(shí)施方案的描述和從權(quán)利要求中將清楚本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)。本領(lǐng)域技術(shù)人員在瀏覽說明書和實(shí)施例后將清楚本發(fā)明的這些和許多其它變更和實(shí)施方案。
實(shí)施例實(shí)施例I體內(nèi)治療口腔邊界潤滑缺陷口腔干燥癥適合用作口部潤滑劑的含漱液組合物具有下列組成
PRG4含漱溶液:
PRG4100 pg/mL
山梨醇(Sorbital)2%
1 %
苯曱酸0.02 %
FD&C Green No. 3 染料
椒樣薄荷油調(diào)味劑適量
無菌水適量制備以上配方含漱液是通過將上文列出的成分混合一起以制備適合用于潤滑口腔的成品來制備。給藥將20ml以上配方含漱液每4小時(shí)或按需給予患口腔干燥癥的患者。患者用含漱液漱口 2-5分鐘并完全吐出漱口液。適合將PRG4遞送至口腔的口香糖具有下列組成
權(quán)利要求
1.一種用于改善口腔邊界潤滑的ロ部護(hù)理組合物，其包含配制在水性滲透平衡鹽溶液、多相乳液、凝膠、液體、霜?jiǎng)④浉鄤?、噴霧劑、糊劑、粘性溶液、緩釋裝置或者在糖錠或樹膠中的有效量和濃度的分離或純化PRG4 ;其中有效量和濃度的分離或純化PRG4足以改善口腔邊界潤滑。
2.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其中所述組合物包含濃度為10-10，OOOμ g/mL的PRG4。
3.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其中PRG4具有50kDa-400kDa的平均摩爾質(zhì)量。
4.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其中PRG4包含潤滑片段、多聚體或其同系物。
5.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其中PRG4是重組PRG4蛋白或其功能片段。
6.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其中PRG4是純化的自然存在的PRG4蛋白。
7.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其還包含透明質(zhì)酸鈉。
8.權(quán)利要求7的ロ部護(hù)理組合物，其中所述組合物包含濃度為10-100，000μ g/mL的透明質(zhì)酸鈉或透明質(zhì)酸。
9.權(quán)利要求7的ロ部組合物，其中所述組合物包含濃度為500-5，000μ g/mL的透明質(zhì)酸鈉或透明質(zhì)酸。
10.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其還包含約O.25wt. % -IOwt. %圣草流浸膏。
11.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其還包含約I.Owt. % -30wt. %增甜劑或調(diào)味劑。
12.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其還包含有效刺激唾液腺分泌的量的刺激劑化合物，所述刺激劑化合物選自檸檬酸、抗壞血酸及其混合物。
13.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其還包含ー種或多種選自利多卡因、利諾卡因和丙胺卡因的局麻劑。
14.權(quán)利要求I的ロ部護(hù)理組合物，其還包含一種或多種見于唾液的酶，包括乳過氧化物酶、硫氰酸酯和葡萄糖氧化酶。
15.一種用于改善口腔邊界潤滑的ロ香糖組合物，其包含 (a)約O.25wt. % -IOwt. %圣草流浸膏、柑橘油、檸檬油、白檸檬油、橙花油、橙油、薄荷油、椒樣薄荷油、留蘭香薄荷油、茴香油、豆蘧油、肉桂油、丁香油、芫荽油、桉樹油、小茴香油、蕓香草油、肉豆蘧油、圣草流浸膏、甘草浸膏； (b)約I.Owt. % -30wt. %增甜劑或調(diào)味劑； (c)有效刺激唾液腺分泌的量的刺激劑化合物，其選自檸檬酸、抗壞血酸及其混合物； (d)膠基； (e)治療有效量的PRG4;和 (f)治療有效量的透明質(zhì)酸鈉。
16.一種用于改善口腔邊界潤滑的糖錠組合物，其包含下列的成形固體 (a)約O. 25wt. % -IOwt. %圣草流浸膏；(b)約I. Owt. % -30wt. %增甜劑； (C)有效刺激唾液腺分泌的量的刺激劑化合物，其選自檸檬酸、抗壞血酸及其混合物；和 (d)膠基， (e)治療有效量的PRG4，(f)治療有效量的透明質(zhì)酸鈉。
17.一種治療口腔邊界潤滑下降或改善口腔邊界潤滑的方法，所述方法包含將治療有效量的分離或純化PRG4局部給予有需要的受試者的口腔表面。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述分離或純化PRG4存在于權(quán)利要求1-16中任ー項(xiàng)的ロ部護(hù)理組合物中。
19.一種治療具有口腔邊界潤滑下降伴隨癥狀的疾病的方法，所述疾病包括例如ロ腔干燥癥、Sjdgren氏綜合征、過敏、ロ面病癥、慢性炎癥、高摩爾滲透壓濃度、衰老、處方或OTC藥物、放療、化療、神經(jīng)損傷或其任何組合，所述方法包含將治療有效量的PRG4局部給予有需要的受試者的口腔表面。
20.一種治療口腔潰瘍的方法，所述方法包含將治療有效量的PRG4局部給予有需要的個(gè)體的口腔表面。
21.一種適合用作手術(shù)潤滑劑的組合物，所述組合物包含在手術(shù)可接受的載體中的有效量的PRG4。
22.權(quán)利要求21的組合物，其還包含一種或多種手術(shù)可接受的潤滑劑，其選自透明質(zhì)酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羥こ基纖維素、羥丙甲纖維素、甲基纖維素、右旋糖酐70、明膠、甘油、聚こニ醇300、聚こニ醇400、聚山梨醇酯80、丙ニ醇、聚こ烯醇、聚維酮。
23.權(quán)利要求21的組合物，其還包含ー種或多種選自利多卡因、利諾卡因和丙胺卡因的局麻劑。
24.權(quán)利要求21的組合物，其還包含ー種或多種消毒劑，其選自葡萄糖酸氯己定、苯扎氯銨、溴化十六烷基三甲基銨、西吡氯銨、芐索氯銨、酒精、氯化鈉和碳酸氫鈉。
25.ー種在手術(shù)或醫(yī)療操作過程中提供潤滑的方法，所述方法包含將PRG4應(yīng)用于有需要的組織或醫(yī)療裝置。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述手術(shù)或醫(yī)療操作包括插入導(dǎo)管、內(nèi)鏡、手術(shù)器械、進(jìn)入身體開ロ的手套、作為手術(shù)輔件和/或臨時(shí)植入物、作為水合植入物，和用于白內(nèi)障摘除術(shù)、激光角膜切削術(shù)、人工晶狀體(IOL)插入和取出、角膜手術(shù)、青光眼手術(shù)、外傷手術(shù)、后段手術(shù)、眼整形手術(shù)和肌肉手木。
27.一種用于減小運(yùn)動(dòng)所致摩擦的組合物，所述組合物包含配制在溶液、凝膠、溶膠和緩釋聚合物中的PRG4。
28.權(quán)利要求27的組合物，其中所述緩釋聚合物包含ー種或多種下列組分羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚丙烯或其它常用賦形劑或緩和劑。
29.權(quán)利要求27的組合物，其還包含透明質(zhì)酸鈉。
30.權(quán)利要求27的組合物，其還包含尿囊素(O.5% )。
31.權(quán)利要求27的組合物，其還包含蘆薈(巴巴多斯蘆薈)葉提取物、C1836酸甘油三酷、羊蠟酸/羊脂酸硬脂酸甘油三酷、Tribehenin和或こ酸維生素E。
32.一種用于減小運(yùn)動(dòng)所致摩擦的膠粘貼劑，所述膠粘貼劑包含膠粘表面和非膠粘表面，其還包含在非膠粘表面上的PRG4。
33.權(quán)利要求32的膠粘貼劑，其還包含透明質(zhì)酸鈉。
34.ー種防止運(yùn)動(dòng)過程中摩擦的方法，所述方法包含局部應(yīng)用有效量的PRG4。
35.權(quán)利要求34的方法，其還包含應(yīng)用權(quán)利要求27-31中任一項(xiàng)的組合物。
36.權(quán)利要求34的方法，其中將含有PRG4的膠粘貼劑應(yīng)用于感興趣的區(qū)域。
37.一種用作皮膚填充劑的藥學(xué)上可接受的組合物，其包含在皮膚病學(xué)可接受的粘性溶液中的PRG4。
38.權(quán)利要求37的組合物，其還包含皮膚病學(xué)有效量的透明質(zhì)酸。
39.權(quán)利要求37的組合物，其還包含皮膚病學(xué)有效量的膠原。
40.權(quán)利要求37的組合物，其還包含皮膚病學(xué)有效量的羧甲基纖維素、聚こニ醇和/或聚環(huán)氧こ烷。
41.權(quán)利要求37的組合物，其還包含皮膚病學(xué)有效量的藥物，所述藥物選自抗凝血酶原藥、抗炎藥、激素、趨化因子、鎮(zhèn)痛藥、生長因子、細(xì)胞因子、骨原性因子和麻酔剤。
42.權(quán)利要求37的組合物，其還包含皮膚病學(xué)有效量的維甲酸。
43.權(quán)利要求37的組合物，其還包含皮膚病學(xué)有效量的氘還原水。
44.一種恢復(fù)人的臉部或所選身體區(qū)域的組織體積、皮膚充盈、紋理和緊實(shí)的治療方法，所述方法包含以下的步驟將權(quán)利要求37-43中任一項(xiàng)的組合物在人的臉部或所選身體區(qū)域的ー個(gè)或多個(gè)區(qū)域注入真皮或真皮下。
45.權(quán)利要求44的治療方法，其中所述ー個(gè)或多個(gè)區(qū)域是眶周區(qū)、嘴唇、顴骨區(qū)、鼻唇褶、唇-下頜骨褶、頸或手。
46.ー種促進(jìn)將生物活性劑遞送至有需要的個(gè)體的方法，所述方法包含將生物活性劑與PRG4蛋白混合給予個(gè)體。
47.權(quán)利要求46的方法，其中所述生物活性劑包含藥物、肽、蛋白質(zhì)、抗體或其片段、核酸或顯像劑。
48.權(quán)利要求46的方法，其中所述遞送載體還包含透明質(zhì)酸鈉。
49.權(quán)利要求46的方法，其中所述遞送載體還包含表面活性磷脂，其選自L-a-ニ棕櫚酰磷脂酰膽堿、磷酯酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和鞘磷脂。
50.權(quán)利要求46的方法，其中所述混合物是通過局部給予、注射或ロ部給藥。
51.一種減小授乳所致摩擦的方法，所述方法包含將配制在溶液、凝膠、溶膠或膠粘貼劑中有效量的PRG4給予有需要的乳頭、乳房或乳暈。
52.權(quán)利要求51的方法，其中所述溶液、凝膠、溶膠或膠粘貼劑含有ー種或多種下列組分羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚丙烯、其它常用賦形劑或緩和劑，或透明質(zhì)酸鈉。
全文摘要
本發(fā)明涉及蛋白質(zhì)PRG4及其治療調(diào)制的用途。特別是，本發(fā)明涉及利用PRG4及其治療調(diào)制的組合物和方法，包括用作手術(shù)潤滑劑，用于預(yù)防或減小術(shù)后粘連的治療，用于口腔潰瘍的治療，用作體育潤滑貼劑，用作皮膚填充劑，用于口干的治療，用于藥物遞送方法或組合物，和用于授乳潤滑。
文檔編號(hào)A61K38/16GK102711796SQ201080033795
公開日2012年10月3日 申請日期2010年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月22日
發(fā)明者B·薩利文, D·薩利文, E·R·特勒伊特, N·B·J·特勒伊特, T·施米德特 申請人:盧布里斯有限責(zé)任公司, 謝彭斯眼科研究所有限公司