專(zhuān)利名稱：脂肽組合物和相關(guān)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于在液體稀釋劑中重建以形成用于腸胃外給藥的藥物組合物的改善的脂肽組合物，以及制備固體脂肽組合物的方法。優(yōu)選改善的脂肽組合物包括具有在含水液體中增加的重建速率和/或者增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的固體達(dá)托霉素制劑。
背景技術(shù)：
達(dá)托霉素為適用于治療復(fù)雜性皮膚和皮膚結(jié)構(gòu)感染以及菌血癥(包括具有可疑的或者被證實(shí)的感染性心內(nèi)膜炎的菌血癥)的環(huán)狀脂肽抗生素。用于注射的達(dá)托霉素可靜脈內(nèi)給藥以治療由多重革蘭氏陽(yáng)性微生物的易感菌株包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methici 11 in-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)引起的指定的感染。用于注射的達(dá)托霉素(CUB1CIN⑩，Cubist Pharmaceuticals, Inc. , Lexington, MA)作為凍干粉末來(lái)提供，將其重建且復(fù)合為用于腸胃外給藥的藥物組合物。所述重建的達(dá)托霉素組合物可復(fù)合為用于腸胃外給藥的藥物組合物，例如通過(guò)與醫(yī)藥上適當(dāng)量的藥物稀釋劑(例如0. 9%氯化鈉水溶液)組合。所述稀釋劑可相同或者不同。所述包含達(dá)托霉素的腸胃外藥物組合物可通過(guò)靜脈內(nèi)輸注來(lái)給藥。含有達(dá)托霉素的凍干粉末可能需要15-45分鐘來(lái)在藥物稀釋劑中重建，這取決于重建操作。達(dá)托霉素(圖I)可由微生物玫瑰孢鏈霉菌(Streptomyces roseosporus)與正癸酸的填料的發(fā)酵產(chǎn)物衍生得到。Baltz 在 Biotechnology of Antibiotics. 2nd Ed. , ed.ff. R. Strohl (New York:Marcel Dekker, Inc.), 1997, pp. 415-435 中開(kāi)始嘗試由發(fā)酵產(chǎn)物中的結(jié)構(gòu)相似的組分中分離達(dá)托霉素，這導(dǎo)致鑒別出其它結(jié)構(gòu)相似的化合物包括無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)、達(dá)托霉素的￠-異構(gòu)體(圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物(圖4)。無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)可在進(jìn)行由發(fā)酵產(chǎn)物中的結(jié)構(gòu)相似的組分中分離達(dá)托霉素的技術(shù)的過(guò)程中形成。無(wú)水-琥珀酰亞胺形式的再水化產(chǎn)生第二降解產(chǎn)物，其含有3-天冬氨?；抑付檫_(dá)托霉素的異構(gòu)體形式(圖 3)。Kirsch et al. (Pharmaceutical Research, 6:387-393，1989，“Kirsch”)披露了在純化達(dá)托霉素過(guò)程中產(chǎn)生的無(wú)水-達(dá)托霉素和達(dá)托霉素的3 _異構(gòu)體。Kirsch描述了通過(guò)控制pH條件和溫度條件而使無(wú)水-達(dá)托霉素和￠-異構(gòu)體的水平最小化的方法。然而，Kirsch不能使達(dá)托霉素穩(wěn)定且不能防止達(dá)托霉素向無(wú)水-達(dá)托霉素的轉(zhuǎn)化及其隨后向￠-異構(gòu)體的異構(gòu)化。Kirsch也不能防止達(dá)托霉素降解為與無(wú)水-達(dá)托霉素和￠-異構(gòu)體不相關(guān)的其它降解產(chǎn)物。美國(guó)專(zhuān)利6，696，412披露了存在于發(fā)酵產(chǎn)物中的若干額外的化合物，其中達(dá)托霉素由所述發(fā)酵產(chǎn)物衍生得到，且該專(zhuān)利提供了產(chǎn)生增加的純度的純化達(dá)托霉素的方法。所述額外的化合物包括具有圖4的化學(xué)結(jié)構(gòu)的達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物。所述達(dá)托霉素純化方法可包括形成達(dá)托霉素膠束、通過(guò)濾過(guò)除去低分子量污染物，然后將含有達(dá)托霉素的膠束濾液轉(zhuǎn)化為非膠束狀態(tài)，接著進(jìn)行陰離子交換和反滲透滲濾以獲得高純度達(dá)托霉素，然后將其凍干。在凍干達(dá)托霉素粉末中的達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性的一種測(cè)量為相比于結(jié)構(gòu)相似化合物包括無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)、達(dá)托霉素的￠-異構(gòu)體(圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物(圖4)的量而言的存在于重建達(dá)托霉素組合物中的達(dá)托霉素(圖I)的量。相比于這些結(jié)構(gòu)相似化合物的量而言的達(dá)托霉素的量可在含水稀釋劑中重建之后通過(guò)高效液相色譜(HPLC)來(lái)測(cè)量。達(dá)托霉素的純度和結(jié)構(gòu)相似化合物(例如圖2-4)的量可根據(jù)由HPLC(例如本申請(qǐng)實(shí)施例4)獲得的峰面積來(lái)確定以提供固體形式的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的測(cè)量。達(dá)托霉素純度和化學(xué)穩(wěn)定性也可隨時(shí)間的推移在液體重建達(dá)托霉素組合物中測(cè)量，如同液體形式的重建達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的測(cè)量。需要在藥物稀釋劑中快速重建(例如在小于約5分鐘的時(shí)間內(nèi))以形成可復(fù)合為藥物組合物的重建脂肽組合物的固體脂肽組合物。例如，為了重建500mg小瓶的凍干的用于注射的達(dá)托霉素(CUB1C1N ),將凍干粉末與IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液合并，靜置10分鐘(或者更長(zhǎng)時(shí)間)然后輕微旋轉(zhuǎn)或者渦旋“幾分鐘”以形成重建達(dá)托霉素組合物，之后成形以制備腸胃外達(dá)托霉素藥物組合物。還需要在固體和/或者重建形式中具有改善的化學(xué)穩(wěn)定性(即隨時(shí)間的推移，較高的總體達(dá)托霉素純度百分?jǐn)?shù))的固體達(dá)托霉素組合物，這提供了較長(zhǎng)的貯存期限、對(duì)更多不同的貯存條件(例如更高的溫度或者濕度)的增加的耐受性以及在重建為用于腸胃外給藥的液體制劑之后增加的化學(xué)穩(wěn)定性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及用于在含水稀釋劑中重建以形成藥物組合物的固體脂肽組合物。通過(guò) 將包含所述脂肽的藥用水溶液轉(zhuǎn)化為固體脂肽組合物(例如通過(guò)凍干、噴霧干燥等)來(lái)制備所述脂肽組合物。所述固體脂肽組合物可隨后在含水藥用稀釋劑中重建以形成用于腸胃外給藥的藥物產(chǎn)物。在第一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)增加脂肽水溶液的pH(優(yōu)選增加至約6. 5-7. 5的pH，最優(yōu)選地約7. 0)、之后凍干所述溶液以形成固體脂肽組合物可不預(yù)期地減少在含水稀釋劑中重建固體脂肽組合物的時(shí)間。例如，相比于其它可比較的在約4. 7的pH凍干的達(dá)托霉素制齊U，通過(guò)凍干PH為約7.0的液體達(dá)托霉素溶液(不含糖或者甘氨酸)制備的固體達(dá)托霉素組合物在0. 9%氯化鈉水溶液中更快地重建。通過(guò)將脂肽與甘氨酸或者糖(優(yōu)選非還原性糖)合并、之后將溶液轉(zhuǎn)化為固體脂肽也加速了某些固體脂肽組合物在含水稀釋劑中的重建速率。例如，由包含達(dá)托霉素和非還原性糖或者甘氨酸的PH為約7. 0的溶液形成的表6中的500mg的凍干藥物達(dá)托霉素組合物在0. 9%氯化鈉水溶液中在小于2分鐘的時(shí)間內(nèi)重建，其中大部分組合物在小于I分鐘的時(shí)間內(nèi)重建。固體藥物脂肽制劑可為通過(guò)以下方法獲得的產(chǎn)物(a)形成pH高于脂肽等電點(diǎn)(例如高于達(dá)托霉素的約3. 8)的脂肽水溶液；(b)將甘氨酸或者糖(優(yōu)選非還原性糖)在含有脂肽的水溶液中溶解以形成液體脂肽制劑；(c)將液體脂肽制劑的pH調(diào)節(jié)為約6. 5至7.5;和(d)將液體脂肽制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物脂肽組合物(例如凍干)。例如，在0.9%氯化鈉水溶液稀釋劑中在小于約2分鐘的時(shí)間內(nèi)重建的凍干達(dá)托霉素藥物制劑可通過(guò)如下制備(a)形成pH為約4. 5-5. 0 (例如pH為約4. 7)的達(dá)托霉素水溶液；(b)將包含磷酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來(lái)酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入達(dá)托霉素水溶液中以形成緩沖的達(dá)托霉素制劑；(c)將一種或者多種糖在緩沖的達(dá)托霉素制劑中溶解以形成含有約2. 5%w/v至約 25%w/v (例如約 3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%或者24%)的糖的緩沖的達(dá)托霉素糖制劑，所述一種或者多種糖選自海藻糖、蔗糖、甘露醇和它們的組合；(d)調(diào)節(jié)緩沖的達(dá)托霉素糖制劑的pH至約6. 5至7. 5(例如7.0)的pH;和(e)凍干所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素組合物。優(yōu)選地，所述一種或者多種糖包括蔗糖、蔗糖和甘露醇，或者海藻糖。在第二個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了具有改善的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的達(dá)托霉素 組合物，如隨時(shí)間的推移較高的總體達(dá)托霉素純度百分?jǐn)?shù)所測(cè)量(如通過(guò)實(shí)施例4的方法的HPLC所確定)。令人驚訝的是，相比于在不含糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素固體制劑中的達(dá)托霉素而言，在含有某些優(yōu)選的組合物(例如達(dá)托霉素與蔗糖或者海藻糖合并)的固體制劑中包含的達(dá)托霉素在化學(xué)上更加穩(wěn)定。通過(guò)比較來(lái)自根據(jù)實(shí)施例4分別獲得的多個(gè)固體達(dá)托霉素制劑的總體達(dá)托霉素純度測(cè)量結(jié)果來(lái)測(cè)量固體形式的達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性。較高的化學(xué)穩(wěn)定性作為根據(jù)實(shí)施例4在兩個(gè)樣品之間較高的可比較的達(dá)托霉素總體純度測(cè)量結(jié)果來(lái)測(cè)量。例如，在0. 9%氯化鈉水溶液中重建之前的6個(gè)月貯存期內(nèi)，由含有一種或者多種非還原性糖諸如蔗糖的固體達(dá)托霉素組合物測(cè)量的達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性不預(yù)期地增加10%和大于90%之間的數(shù)值(相比于由不含任何糖的固體達(dá)托霉素組合物測(cè)量的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性而言)。同樣令人驚訝的是，相比于可比較的不含糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素制劑而言，在含有一種或者多種某些非還原性糖(例如蔗糖)的達(dá)托霉素制劑中，在各個(gè)溫度條件下在重建液體達(dá)托霉素溶液中觀察到持續(xù)多達(dá)14天的較高的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性。例如，對(duì)于含有達(dá)托霉素以及某些非還原性糖(例如蔗糖)的組合物而言，歷時(shí)14天的重建溶液中的達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性同樣不預(yù)期地增加。固體藥物達(dá)托霉素制劑的優(yōu)選實(shí)例包含約2. 5%至25. 0%的一種或者多種非還原性糖或者甘氨酸。固體藥物達(dá)托霉素制劑的其它優(yōu)選實(shí)例包含約2. 5%至25. 0%的選自蔗糖、甘露醇和海藻糖的糖。特別優(yōu)選的固體藥物達(dá)托霉素制劑基本上由達(dá)托霉素、蔗糖、磷酸鈉緩沖劑(例如磷酸氫二鈉，Na2HPO4)和多達(dá)約8%的其它物質(zhì)(例如根據(jù)實(shí)施例4在214nm經(jīng)HPLC峰面積所測(cè)量)組成。固體藥物達(dá)托霉素制劑可通過(guò)轉(zhuǎn)化包含達(dá)托霉素和非還原性糖(例如在溶液中15-20w/v%的蔗糖)的pH高于達(dá)托霉素的等電點(diǎn)(例如pH為約3. 7或者更高)的水溶液來(lái)獲得。優(yōu)選地，當(dāng)轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑(例如粉末劑)時(shí)，含有達(dá)托霉素和非還原性糖(例如蔗糖)的水溶液的PH為約4. 5-8. 0 (包括例如pH值為4. 5-7. 5,4. 7-7. 5、5. 0-7. 5、5. 5-7. 5、4. 7-7. 0、5. 0-7. 0、5. 5-7. 0、6. 0-7. 0 和 6. 5-7. 0 以及介于它們之間的值)。優(yōu)選地，具有約2分鐘或者更少的在含水稀釋劑中的重建時(shí)間的凍干達(dá)托霉素藥物制劑通過(guò)如下制備(a)形成pH為約4. 7-5. 0的達(dá)托霉素水溶液；(b)將包含磷酸鹽、枸櫞酸鹽、TRIS、馬來(lái)酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入至達(dá)托霉素水溶液中；(c)將糖(例如非還原性糖諸如蔗糖)在含有達(dá)托霉素的水溶液中溶解以形成緩沖的達(dá)托霉素糖制劑；(d)調(diào)節(jié)緩沖的達(dá)托霉素糖制劑的pH為約6. 5至8. 0(包括例如pH值為6. 5-7. 5,6. 5-7. 0,6. 5、
7.O、7. 5、8. O、7. 0-8. O、7. 0-7. 5以及介于它們之間的值)；和(e)凍干所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素制劑。本申請(qǐng)所使用的所有科技術(shù)語(yǔ)的含義與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員通常所理解的含義相同，除非另作限定。以下描述適宜的方法和物質(zhì)，但類(lèi)似于或者等同于本申請(qǐng)所述方法和物質(zhì)的方法和物質(zhì)也可用于本發(fā)明的實(shí)施或者測(cè)試。將本申請(qǐng)?zhí)峒暗乃泄_(kāi)出版物、專(zhuān)利申請(qǐng)、專(zhuān)利和其它參考文獻(xiàn)的全部?jī)?nèi)容通過(guò)引用的方式并入本申請(qǐng)。在出現(xiàn)矛盾的情況下，由本申請(qǐng)的說(shuō)明(包括定義)決定。另外，物質(zhì)、方法和實(shí)施例僅僅是示例性的而不是限制性的。通過(guò)說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求，本發(fā)明的其它特征和優(yōu)勢(shì)將是顯而易見(jiàn)的。


圖I為達(dá)托霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖2為無(wú)水-達(dá)托霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖3為達(dá)托霉素的P -異構(gòu)體的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖4為達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖5為表6，其列出優(yōu)選的達(dá)托霉素組合物的實(shí)例。這些組合物制備為液體溶液，然后凍干以提供在含水藥物稀釋劑中在小于2分鐘的時(shí)間內(nèi)重建的固體藥物達(dá)托霉素制劑(包括在小于I分鐘的時(shí)間內(nèi)重建的組合物)。在表6中，“重建時(shí)間”是指“制劑(固態(tài))”欄中所述的約500mg凍干達(dá)托霉素組合物在室溫(約25°C )在IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液中溶解所需的時(shí)間。圖6為表7，其列出其它達(dá)托霉素組合物的實(shí)例。這些組合物制備為液體溶液，然后凍干以提供在含水藥物稀釋劑中在2分鐘或者更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)重建的固體藥物脂肽制劑。在表7中，“重建時(shí)間”是指約500mg凍干達(dá)托霉素溶液在室溫(約25°C )在IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液中溶解所需的時(shí)間。圖7為表8，其列出含有糖的達(dá)托霉素組合物的實(shí)例。圖8為表9，其顯示根據(jù)實(shí)施例4各種達(dá)托霉素制劑所測(cè)量和計(jì)算的總體達(dá)托霉素純度的變化百分?jǐn)?shù)。
具體實(shí)施例方式具有加速重建的脂肽組合物在本發(fā)明的第一個(gè)實(shí)施方案中，提供了具有小于5分鐘的在含水藥物稀釋劑中的重建時(shí)間的固體藥物脂肽制劑。例如，通過(guò)凍干包含甘氨酸或者一種或者多種糖的達(dá)托霉素溶液而制備的500mg的固體達(dá)托霉素藥物脂肽制劑可在IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液中在室溫(約25°C)在4分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)溶解(包括4、3、2、1和小于1分鐘的溶解時(shí)間)。不預(yù)期地，相比于由較低pH(例如4. 7)的可比較的液體脂肽制劑獲得的其它相同的固體藥物脂肽制劑而言，由PH為約7. 0的液體脂肽制劑獲得的某些固體藥物脂肽制劑以較快的速率在含水藥物稀釋劑中重建。例如，PH值為4. 7和7. 0的具有相同組成(不含糖或者甘氨酸)的兩份達(dá)托霉素水溶液在凍干后分別形成在0. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中以5. 0分鐘(對(duì)于pH 4. 7的溶液)和I. 4分鐘(對(duì)于pH 7. 0的溶液)重建的粉末(參見(jiàn)表6和表7)。此外，將甘氨酸或者糖(優(yōu)選地，一種或者多種非還原性糖)加入至達(dá)托霉素制劑中同樣增加了所得的固體藥物脂肽制劑的重建速率。具有加快的重建速率的固體藥物脂肽制劑可由脂肽水溶液在適當(dāng)?shù)膒H(例如4. 7-7. 0)和溫度(例如2-10°C )獲得。一般而言，固體藥物脂肽制劑可由脂肽水溶液在高于脂肽的等電點(diǎn)的PH制備。優(yōu)選地，所述脂肽包括達(dá)托霉素(圖I)。制備固體藥物達(dá)托霉素制劑的優(yōu)選方法在實(shí)施例2a和2b中有述。固體藥物達(dá)托霉素制劑可由達(dá)托霉素水溶液在高于達(dá)托霉素的等電點(diǎn)的PH(例如高于約3. 7或者3. 8的pH，包括4. 5,4. 7的pH值以及其它本申請(qǐng)披露的較高的PH值)且在2-10°C的溫度制備。所述達(dá)托霉素可在冷凍的無(wú)菌注射用水(sWFI)溶液中以125-130mg/mL的濃度在pH 3. 0以及隨后調(diào)節(jié)為理想pH(通過(guò)加入氫氧化鈉(例如3. 0-10. 0N,包括3. ON和10. 0N))的pH在約2_10°C的溫度來(lái)獲得。所述PH可例如通過(guò)加入氫氧化鈉、鹽酸、磷酸和/或者乙酸來(lái)調(diào)節(jié)。
緩沖劑任選加入至pH高于約4. 7的脂肽水溶液中。緩沖劑可包括例如，包括磷酸根、枸櫞酸根、馬來(lái)酸根或者碳酸根部分或者它們的組合，以及藥用抗衡離子的試劑。緩沖劑的量可基于緩沖劑與達(dá)托霉素的摩爾比(例如表6所述)進(jìn)行選擇。緩沖劑可以無(wú)水或者含水形式加入。緩沖劑的具體實(shí)例為磷酸的鈉鹽或者鉀鹽、硼酸的鈉鹽或者鉀鹽、枸櫞酸的鈉鹽或者鉀鹽、碳酸的鈉鹽或者鉀鹽、磷酸鈉(例如磷酸氫二鈉)、TRIS (三(羥基甲基)氨基甲烷和馬來(lái)酸鹽。在一個(gè)方面，所述緩沖劑選自磷酸氫二鈉(Na2HPO4)、枸櫞酸鈉、碳酸氫鈉、組氨酸一鹽酸鹽TRIS和馬來(lái)酸鹽。對(duì)于達(dá)托霉素水溶液，所述緩沖劑優(yōu)選包括加入至pH為約4. 5-6. 0 (優(yōu)選地pH為約5. 0)的達(dá)托霉素水溶液的約50mM磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸氫二鈉)?？稍诩尤刖彌_劑之前，通過(guò)在冷凍條件(2-10° C)下加入3N氫氧化鈉提高酸性脂肽水溶液(例如PH為約3. 0)的pH。一種或者多種糖(例如非還原性糖)和/或者甘氨酸可加入至脂肽水溶液中，之后將溶液轉(zhuǎn)化為藥物脂肽制劑(例如通過(guò)凍干)。優(yōu)選地選擇甘氨酸或者一種或者多種糖與脂肽水溶液的組合的量和方式以提供液體脂肽溶液，其可隨后調(diào)節(jié)為約6. 5至7. 5的pH(例如通過(guò)在約2-10°C加入3N氫氧化鈉)。對(duì)于液體達(dá)托霉素制劑，優(yōu)選地通過(guò)在適當(dāng)溫度(例如2-10°C )攪拌來(lái)合并甘氨酸和/或者一種或者多種糖。所述一種或者多種糖優(yōu)選為非還原性糖，盡管達(dá)托霉素水溶液可由甘氨酸、海藻糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、果糖、右旋糖以及它們的組合在約5. 0或者更高的pH來(lái)制備?？蛇x擇脂肽與甘氨酸和/或者一種或者多種糖的總量的摩爾比以獲得具有在含水溶劑中更快的重建速率的固體組合物(例如表6中所述的組合物)。例如，液體達(dá)托霉素糖溶液優(yōu)選包含[I. 00:1. 12]至約[1.00:8. 98]的達(dá)托霉素蔗糖摩爾比的達(dá)托霉素和蔗糖。在合并脂肽、一種或者多種糖或者甘氨酸以及一種或者多種緩沖劑之后，但在將液體脂肽溶液轉(zhuǎn)化為固體藥物制劑之前，脂肽溶液的PH可調(diào)節(jié)為約6. 5-7. 5。優(yōu)選地，所述脂肽包含達(dá)托霉素，且在轉(zhuǎn)化為固體形式之前，但在加入一種或者多種緩沖劑和甘氨酸和/或者一種或者多種糖之后，所述液體達(dá)托霉素制劑調(diào)節(jié)為約6. 5-7. 0的pH且最優(yōu)選地調(diào)節(jié)為約7.0的pH。圖5(表6)描述了優(yōu)選的液體達(dá)托霉素組合物的實(shí)例，其凍干以提供在含水稀釋劑中快速重建(溶解)的固體藥物脂肽制劑。對(duì)于表6中含有甘氨酸和非還原性糖的每種組合物，500mg的固體達(dá)托霉素糖組合物在0. 9%氯化鈉水溶液中在小于I分鐘的時(shí)間內(nèi)溶解。相反地，相比于表6中的組合物，由pH為約4. 7的液體達(dá)托霉素組合物獲得的表7 (圖3)中所述的許多固體藥物制劑具有較長(zhǎng)的重建時(shí)間(例如表7中所述的500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物需要2分鐘或者更長(zhǎng)時(shí)間在IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中在25°C重建)。液體脂肽制劑可通過(guò)任何適當(dāng)方法包括凍干、噴霧干燥或者流化床干燥來(lái)轉(zhuǎn)化為固體藥物脂肽組合物。實(shí)施例3描述了在測(cè)量表6中同時(shí)提供的重建時(shí)間之前，用于將表6中的某些液體達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑的凍干方法。固體達(dá)托霉素組合物可為凍干、冷凍干燥、噴霧干燥、流化床干燥、噴霧凝結(jié)、沉淀或者結(jié)晶的粉末或者無(wú)定形固體。在一個(gè)方面，所述粉末為凍干或者噴霧干燥的粉末。在本發(fā)明的另一個(gè)方面，所述粉末為凍干的粉末。固體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素與糖的摩爾比優(yōu)選在約[1:1.12]至約 [1:21.32]的范圍內(nèi)。例如，固體藥物達(dá)托霉素制劑可包含具有以下達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比的蔗糖約[1:1.12]至約[1:8.98]，包括[1:4. 49]至[1:8.98]、[1:6. 73]至[1:8.98]、[1:1.12]、[1:1.344]、[1:1.792]、[1:2.24]、[1:2.688]、[1:3.136]、[1:3.584]、[1:4.032]、[1:4.49]、[1:4.928]、[1:5.376]、[1:5.824]、[1:6.272]、[1:6. 73]、[1:7. 168]、[1:7. 616]、[1:8. 064]、[1:8. 512]或者[1:8. 98]的達(dá)托霉素:蔗糖摩爾比。在一個(gè)方面，賦形劑為甘露醇且達(dá)托霉素與甘露醇的摩爾比為約[1:2. 52]至約[1:5.04]。在另一個(gè)方面，達(dá)托霉素與甘露醇的摩爾比為[1:2. 52]、[1:3. 36]、[1:4. 20]或者[1:5. 04]。在另一個(gè)方面，所述賦形劑為蔗糖且達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為約[1:1. 12]至約[1:8.98]。在另一個(gè)方面，所述達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為[1:4.49]至約[1:8.98]。在另一個(gè)方面，所述達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為約[1:6.73]至約[1:8.98]。在另一個(gè)方面，所述達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為[1:1.12]、[1:1.344]、[1:1.792]、[1:2.24]、[1:2.688]、[1:3.136]、[1:3.584]、[1:4.032]、[1:4.49]、[1:4.928]、[1:5.376]、[1:5.824]、[1:6.272]、[1:6.73]、[1:7.168]、[1:7.616]、[1:8.064]、[1:8.512]或者[1:8.98]。在另一個(gè)方面，所述賦形劑為海藻糖且達(dá)托霉素與海藻糖的摩爾比為[1:2.13]至約[1:21. 32]。在另一個(gè)方面，所述達(dá)托霉素與海藻糖的摩爾比為[1:2. 13]、[1:2. 556]、[1:3. 408], [1:4. 26] , [1:5. 112], [1:5. 964]、[1:6. 816], [1:7. 668]、[1:8. 53],[1:9. 372]、[1:10. 224]、[1:11.076]、[1:11.928]、[1:12. 78]、[1:13.632]、[1:14.484]、[1:14. 91], [1:15. 336]、[1:16. 188]、[1:17. 04], [1:17. 892]、[1:18. 744]、[1:19. 592]、[1:20. 448]或者[1:21. 32]。固體藥物脂肽組合物可重建且與一種或者多種藥用稀釋劑合并以獲得用于腸胃外給藥的藥物組合物。在重建液體組合物中達(dá)托霉素與稀釋劑的比值優(yōu)選在25mg/mL與200mg/mL之間。例如，包含達(dá)托霉素的凍干組合物可在小瓶中通過(guò)將0. 9%氯化鈉水溶液加入至凍干組合物中來(lái)重建。重建達(dá)托霉素溶液可與藥用稀釋劑合并且靜脈內(nèi)給藥。藥用稀釋劑包括無(wú)菌注射用水(sWFI)、0.9%無(wú)菌氯化鈉注射液(sSCl)、抑菌性注射用水(bWFI)和林格溶液。適當(dāng)稀釋劑的額外的實(shí)例可在Remington’ s PharmaceuticalSciences, 17thEd. , A. R Gennaro, Ed. , Mack Publishing Co. , Easton, PA 1985 中找到。所述稀釋劑可為無(wú)菌注射用水或者無(wú)菌氯化鈉注射液。優(yōu)選的稀釋劑為sWFI或者乳酸鹽林格注射液。優(yōu)選地，所述稀釋劑并未緩慢加入同時(shí)以45度角旋轉(zhuǎn)。同樣優(yōu)選地，在加入稀釋劑后，在振動(dòng)之前，含有達(dá)托霉素的小瓶并未平穩(wěn)靜置10分鐘。任選地，所述稀釋劑進(jìn)一步包括藥用防腐劑。在一個(gè)方面，所述防腐劑為苯甲醇、三氯叔丁醇、間甲酚、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、苯酚、苯氧乙醇、對(duì)羥苯甲酸丙酯、硫柳汞、乙酸苯基汞、硝酸苯基汞、苯扎氯銨、氯甲酚、苯基汞鹽和羥苯甲酯。一種重建方法包括將稀釋劑快速加入至含有表6的凍干達(dá)托霉素組合物的小瓶中，接著在需要時(shí)回蕩小瓶。所述稀釋劑優(yōu)選為sWFI或者sSCI。例如，所述稀釋劑可在
1-60秒的時(shí)間內(nèi)，更優(yōu)選地在1-30秒的時(shí)間內(nèi)加入，且最優(yōu)選地所述稀釋劑在小于20秒的時(shí)間內(nèi)加入。優(yōu)選地，組合物中達(dá)托霉素的重量與稀釋劑的體積比在25mg/mL與200mg/mL的范圍內(nèi)。包含達(dá)托霉素的腸胃外藥物組合物可根據(jù)認(rèn)可的適應(yīng)癥通過(guò)靜脈內(nèi)輸注來(lái)給藥。例如，針對(duì)治療復(fù)雜性皮膚和皮膚結(jié)構(gòu)感染，用于注射的達(dá)托霉素可在0. 9%氯化鈉中靜脈 內(nèi)給藥，每24小時(shí)給藥一次,給藥7-14天。具有增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的組合物不預(yù)期地，將達(dá)托霉素與一種或者多種非還原性糖(例如蔗糖、海藻糖、蔗糖和甘露醇)在固體藥物制劑中合并增強(qiáng)了達(dá)托霉素在固體和重建液體相中的化學(xué)穩(wěn)定性。通過(guò)比較來(lái)自貯存于已知時(shí)間段(例如至多12個(gè)月)已知條件(例如恒溫)下的多個(gè)固體樣品的總體達(dá)托霉素純度的測(cè)量結(jié)果來(lái)測(cè)量達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性。根據(jù)實(shí)施例4通過(guò)高效液相色譜(HPLC)(使用表3中的參數(shù))測(cè)量各個(gè)樣品的達(dá)托霉素總體純度。此外，相對(duì)于選自無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)、達(dá)托霉素的￠-異構(gòu)體(圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物(圖4)的物質(zhì)的量而言來(lái)測(cè)量達(dá)托霉素(圖I)在重建達(dá)托霉素溶液中的量。類(lèi)似地，為了確定達(dá)托霉素在重建達(dá)托霉素溶液中的化學(xué)穩(wěn)定性，在制備重建達(dá)托霉素溶液之后至多14天，根據(jù)實(shí)施例4在不同的時(shí)間間隔重復(fù)進(jìn)行達(dá)托霉素在重建達(dá)托霉素溶液中的純度的HPLC測(cè)量和計(jì)算。在一個(gè)方面，具有增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性的固體藥物達(dá)托霉素制劑可包含達(dá)托霉素和有效增加達(dá)托霉素在固體達(dá)托霉素制劑中的總體穩(wěn)定性的量的非還原性糖，如根據(jù)實(shí)施例4通過(guò)總體達(dá)托霉素純度所測(cè)量。在另一個(gè)方面，相比于不含甘氨酸或者糖的達(dá)托霉素制劑的穩(wěn)定性而言，具有增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性的固體藥物達(dá)托霉素制劑可包含達(dá)托霉素和非還原性糖，所述非還原性糖的量有效降低選自無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)、達(dá)托霉素的^ -異構(gòu)體(圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物(圖4)的物質(zhì)在作為固體和/或者液體重建形式的達(dá)托霉素制劑中的的量(如通過(guò)實(shí)施例4所測(cè)量)。相比于不含甘氨酸或者糖的達(dá)托霉素制劑而言，具有增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性的固體藥物達(dá)托霉素制劑可包含達(dá)托霉素和有效增加達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性的量的糖，如通過(guò)達(dá)托霉素在作為固體形式的達(dá)托霉素制劑中的總體純度的變化所測(cè)量，其中所述達(dá)托霉素純度根據(jù)實(shí)施例4測(cè)量。如在實(shí)施例5中所述，具有增加的脂肽化學(xué)穩(wěn)定性的固體脂肽組合物包含非還原性糖(例如諸如蔗糖或者海藻糖)；或者非還原性糖的組合(例如蔗糖和海藻糖)。在根據(jù)實(shí)施例4重建之后，測(cè)量在各個(gè)固體達(dá)托霉素藥物制劑中的達(dá)托霉素的純度(或者將重建溶液冷凍并在解凍所述重建溶液之后，根據(jù)實(shí)施例4確定達(dá)托霉素純度)。相比于選自無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)、達(dá)托霉素的P -異構(gòu)體(圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物(圖4)的物質(zhì)而言，在重建后包含非還原性糖的固體藥物達(dá)托霉素制劑可含有更多的達(dá)托霉素(圖I)。相比于不含非還原性糖的固體達(dá)托霉素制劑而言，在至少6個(gè)月的時(shí)間內(nèi)，含有非還原性糖的優(yōu)選的固體藥物達(dá)托霉素制劑具有增加的達(dá)托霉素純度(以及增加的貯存穩(wěn)定性(shelf stability))。如在實(shí)施例5中所述，固體達(dá)托霉素制劑在小瓶中在不同溫度范圍(例如2-8°C、25°C和40°C )貯存不同的時(shí)間段(例如I個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月和6個(gè)月)，接著重建固體制劑，然后檢測(cè)達(dá)托霉素和結(jié)構(gòu)上類(lèi)似于達(dá)托霉素的物質(zhì)在重建液體組合物中的量，如在實(shí)施例4中所述。如在實(shí)施例6中所述，相比于不含任何糖的重建達(dá)托霉素制劑而言，在含有一種或者多種非還原性糖的重建液體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素不預(yù)期地顯示改善的化學(xué)穩(wěn)定性。含有非還原性糖的重建達(dá)托霉素制劑的增加的化學(xué)穩(wěn)定性通過(guò)比較根據(jù)實(shí)施例4對(duì)貯存于5°C、25°C和40°C的溫度的樣品進(jìn)行多達(dá)14天的總體達(dá)托霉素純度的測(cè)量結(jié)果 的差異來(lái)進(jìn)行測(cè)量。例如，在多達(dá)14天的時(shí)間內(nèi)，在含有約15. 0-20.0%蔗糖的冷凍(例如2-10°C )的重建達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素的純度(根據(jù)實(shí)施例4測(cè)量并計(jì)算)不預(yù)期地大于不含任何糖的重建達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素的純度。重建達(dá)托霉素制劑可與一種或者多種藥用稀釋劑合并以獲得用于腸胃外給藥的藥物組合物(例如在用于靜脈內(nèi)給藥的容器諸如袋子或者注射器中形成或者貯存)。為了評(píng)估達(dá)托霉素在重建溶液中的化學(xué)穩(wěn)定性，在重建(或者如果是冷凍的話，解凍)后的多個(gè)時(shí)間間隔包括至多14天(3、7和14天)的時(shí)間段測(cè)量達(dá)托霉素的純度。達(dá)托霉素在重建液體組合物中的化學(xué)穩(wěn)定性在實(shí)施例6所述的不同時(shí)期后根據(jù)實(shí)施例4通過(guò)測(cè)量達(dá)托霉素純度來(lái)測(cè)量。相比于具有較低的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的組合物而言，具有增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的組合物具有較高的相對(duì)于圖2-4中的結(jié)構(gòu)上類(lèi)似于達(dá)托霉素的物質(zhì)的總體檢測(cè)量的達(dá)托霉素的檢測(cè)量(如通過(guò)實(shí)施例4的方法所測(cè)量)。具有改善的化學(xué)穩(wěn)定性的固體達(dá)托霉素制劑(作為固體和/或者重建液體形式)通過(guò)將達(dá)托霉素與非還原性糖包括蔗糖和海藻糖以及非還原性糖諸如蔗糖和甘露醇的組合合并來(lái)制備。在一些實(shí)施方案中，固體和液體達(dá)托霉素制劑包含至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%或者至少98%純的達(dá)托霉素，如經(jīng)實(shí)施例4所測(cè)量。優(yōu)選地，固體藥物達(dá)托霉素制劑的特征在于至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%或者至少98%的根據(jù)表3在214nm檢測(cè)的總體HPLC峰面積由重建形式的固體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素根據(jù)實(shí)施例4的方法獲得。在一些固體藥物達(dá)托霉素制劑中，至少92wt%、至少93wt%、至少94wt%、至少95wt%、至少96wt%、至少97wt%或者至少98wt%的制劑由達(dá)托霉素以及甘氨酸或者一種或者多種非還原性糖組成，其中所述藥物達(dá)托霉素制劑的特征在于約500mg的固體藥物達(dá)托霉素制劑在小于約2分鐘的時(shí)間內(nèi)溶解于約IOmL的含水稀釋劑(例如0. 9%氯化鈉水溶液)中。具有增加的重建和在粉末和重建形式中增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性的優(yōu)選的固體達(dá)托霉素制劑包括包含達(dá)托霉素、蔗糖和磷酸鹽緩沖劑的固體達(dá)托霉素制劑；其中a.所述固體達(dá)托霉素制劑包含至少92%純的達(dá)托霉素，其根據(jù)表3通過(guò)重建達(dá)托霉素溶液的高效液相色譜(HPLC)在214nm測(cè)量的達(dá)托霉素在214nm的吸光度(曲線下面積)除以總體曲線下面積的比值來(lái)計(jì)算；且b.所述固體達(dá)托霉素制劑通過(guò)如下獲得i.形成包含105mg/mL(10. 5%w/v)達(dá)托霉素、7. lmg/mL(50mM)磷酸氫二鈉緩沖劑和150mg/mL(15%w/v)鹿糖的pH為約7. 0的達(dá)托霉素水溶液；且i i.將含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體達(dá)托霉素制劑。優(yōu)選的固體達(dá)托霉素制劑由包含約2. 5-25. 0%w/v的一種或者多種非還原性糖(例如蔗糖、海藻糖和甘露醇)以及任選進(jìn)一步包含一種或者多種緩沖劑諸如磷酸氫二鈉的達(dá)托霉素溶液獲得。特別優(yōu)選的固體達(dá)托霉素制劑通過(guò)凍干或者噴霧干燥含有達(dá)托霉素和蔗糖(且任選進(jìn)一步含有約50mM磷酸氫二鈉)的pH為約4. 5至7. 0 (包括例如pH值為4. 7-7.0)的液體溶液來(lái)制備。本發(fā)明也提供了含有固體達(dá)托霉素制劑的制品(例如，具有用于將含水稀釋劑注射至小瓶的裝置諸如自動(dòng)包封的可刺穿的膜的封閉密封的小瓶)，以及含有配制用于腸胃外給藥且包含溶解于含水稀釋劑中的固體達(dá)托霉素制劑的達(dá)托霉素產(chǎn)物的產(chǎn)品(例如適用于靜脈內(nèi)給藥達(dá)托霉素產(chǎn)物的袋子或者注射器)。優(yōu)選地，500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物在25°C在I分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)溶解于IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液。達(dá)托霉素水溶液的pH可調(diào)節(jié)為至少4. 7的pH，之后將非還原性糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中。任選地，所述達(dá)托霉素制劑通過(guò)將緩沖劑加入至達(dá)托霉素水溶液，之后將非還原性糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中來(lái)制備。所述液體達(dá)托霉素制劑可具有約105mg/mL的達(dá)托霉素濃度。液體達(dá)托霉素制劑中的糖可選自海藻糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、果糖、右旋糖以及它們的組合。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)例中，500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物在25°C在I分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)溶解于IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液中，且所述固體藥物達(dá)托霉素制劑通過(guò)如下制備a.形成pH為約4. 7-5. 0的達(dá)托霉素水溶液；b.將包含磷酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來(lái)酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入至達(dá)托霉素水溶液中；c.將非還原性糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中以形成緩沖的達(dá)托霉素糖制劑；d.調(diào)節(jié)緩沖的達(dá)托霉素糖制劑的pH至約7. 0 ;且e.凍干所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素組合物。固體藥物達(dá)托霉素制劑的其它實(shí)例可通過(guò)如下制備a.形成pH為約4. 7-5. 0的達(dá)托霉素水溶液；
b.將包含磷酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來(lái)酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入至達(dá)托霉素水溶液中；c.將糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中以形成達(dá)托霉素糖制劑，所述糖選自海藻糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、果糖、右旋糖和它們的組合；d.調(diào)節(jié)達(dá)托霉素糖制劑的pH至約7. 0 ;且e.凍干所述達(dá)托霉素糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素組合物。制備具有在0. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中加快的重建時(shí)間的凍干達(dá)托霉素藥物制劑的方法可包括以下步驟a.形成pH為約4. 7-5. 0的達(dá)托霉素水溶液；b.將包含磷酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來(lái)酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入至達(dá)托霉素水溶液中；c.將糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中以形成含有約2. 5%至約25%的糖的緩沖的達(dá)托霉素糖制劑，所述糖選自海藻糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、果糖、右旋糖和它們的組合；d.調(diào)節(jié)緩沖的達(dá)托霉素糖制劑的pH至約6. 5至7. 5 ;且e.凍干所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素組合物。優(yōu)選地，500mg的凍干達(dá)托霉素組合物在25°C在I分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)溶解于IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液中。所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑優(yōu)選包含磷酸鹽和約2. 5%至約25%的糖。實(shí)施例下述實(shí)施例為示例性的且不限制本申請(qǐng)所述的本發(fā)明。
改善的達(dá)托霉素固體制劑通過(guò)以下獲得(a)如實(shí)施例2a和2b所述由含有達(dá)托霉素和一種或者多種糖或者甘氨酸的溶液形成固體藥物制劑，且(b)如實(shí)施例3所述，將達(dá)托霉素溶液轉(zhuǎn)化為固體藥物制劑(例如通過(guò)凍干或者噴霧干燥)。隨后可通過(guò)加入含水稀釋劑以在約4分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)溶解固體藥物制劑來(lái)重建固體藥物制劑。優(yōu)選地，所述固體藥物達(dá)托霉素制劑在25°C (任選輕微攪拌)在約I分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)在含水稀釋劑中溶解。根據(jù)銷(xiāo)售商品名為C丨!BIClN^ (即不含甘氨酸或者糖的達(dá)托霉素)的用于注射的達(dá)托霉素的包裝說(shuō)明書(shū)"CUBICIN 500mg小瓶的內(nèi)容物應(yīng)使用如下無(wú)菌操作來(lái)重建注意為了最小化起泡，在重建過(guò)程中或者在重建之后避免劇烈振搖或者振蕩小瓶。I.由CUBICIN小瓶移去聚丙烯翻轉(zhuǎn)蓋帽以暴露橡皮塞的中心部分。2.經(jīng)橡皮塞的中心部分將IOmL 0. 9%氯化鈉注射液緩慢轉(zhuǎn)移至CUBICIN小瓶?jī)?nèi)，將轉(zhuǎn)移針頭指向小瓶壁。3.保證通過(guò)輕微旋轉(zhuǎn)小瓶使整個(gè)CUBICIN產(chǎn)品濕潤(rùn)。4 使產(chǎn)品平穩(wěn)靜置10分鐘。5.需要時(shí)，輕微旋轉(zhuǎn)或者渦旋小瓶?jī)?nèi)容物幾分鐘以獲得完全重建溶液。相反地，相比于不含糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素，改善的達(dá)托霉素固體制劑在含水稀釋劑中更快地重建。特別優(yōu)選的固體制劑可在含水稀釋劑中在25°C在小于2分鐘的時(shí)間內(nèi)重建，更優(yōu)選地在25°C在小于約I分鐘的時(shí)間內(nèi)重建。表6(圖5)和表5(圖6)提供了對(duì)于各個(gè)固體達(dá)托霉素制劑的重建時(shí)間，其通過(guò)測(cè)量500mg的固體達(dá)托霉素制劑在IOmL
0.9%氯化鈉水溶液稀釋劑中在約25°C溶解所需的時(shí)間來(lái)獲得。此外，實(shí)施例描述了改善的達(dá)托霉素固體制劑，其提供了達(dá)托霉素在實(shí)施例5中所述的固體形式中以及在實(shí)施例6中所述的重建液體形式中的較好的化學(xué)穩(wěn)定性。相比于選自無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)、達(dá)托霉素的￠-異構(gòu)體(圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物(圖4)的物質(zhì)而言，所述改善的達(dá)托霉素制劑可包含更多的達(dá)托霉素，如經(jīng)實(shí)施例4的HPLC方法所測(cè)量。優(yōu)選地，所述固體達(dá)托霉素制劑通過(guò)如下獲得將液體達(dá)托霉素溶液轉(zhuǎn)化為固體形式，隨后根據(jù)實(shí)施例4重建固體形式，且根據(jù)表3中的HPLC參數(shù)在重建液體中測(cè)量在214nm的總體HPLC峰面積，其中至少92%得自重建溶液中的達(dá)托霉素。所述固體達(dá)托霉素制劑由達(dá)托霉素、一種或者多種選自蔗糖、海藻糖和甘露醇的糖、藥用鹽(例如氯化鈉)、一種或者多種緩沖劑諸如磷酸氫二鈉以及提供至多8%的214nm的總體HPLC峰面積的物質(zhì)(根據(jù)表3中的HPLC參數(shù)在實(shí)施例4中形成的重建液體中測(cè)量)組成。表8(圖7)描述了各個(gè)達(dá)托霉素藥物組合物。在表8中，名稱“各個(gè)存在組分的摩爾比”是指達(dá)托霉素與按[B]、[C]和[D]所列組分(存在時(shí))的以該順序的摩爾比。例如，如果組合物包含達(dá)托霉素[A]和一種賦形劑[B]，則摩爾比將表示為[A]:[B]。如果組合物包含兩種賦形劑[B]和[C]，則摩爾比將表示為達(dá)托霉素[A]:賦形劑[B]:賦形劑[C]等。如果組合物包含達(dá)托霉素[A]以及賦形劑[B]和緩沖劑[D]，則摩爾比將表示為[A] : [B] : [D]。 表6(圖5)提供了在含水稀釋劑中在小于2分鐘的時(shí)間內(nèi)重建的達(dá)托霉素組合物的非限制性實(shí)例。表7(圖6)提供了在含水稀釋劑中在約2分鐘或者更長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)重建的其它達(dá)托霉素組合物的實(shí)例。表6和表7中的不含糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素組合物通過(guò)方法A(實(shí)施例Ia)或者方法B (實(shí)施例Ib)隨后通過(guò)實(shí)施例3的凍干來(lái)獲得。表6和表7中的含有糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素組合物通過(guò)方法A (實(shí)施例2a)或者方法B (實(shí)施例2b)隨后通過(guò)實(shí)施例3的凍干來(lái)獲得。表6和7中的摩爾比基于表I中的分子量來(lái)計(jì)算。表I :達(dá)托霉素和賦形劑的分子量
達(dá)托霉素1620. 67
磷酸鹽緩沖劑141.96
蔗糖342. 3~
乳糖342. 3~
麥芽糖342. 12
海藻糖180. 16
果糖180. 16
右旋糖180. 16
甘露醇182. 17
甘氨酸75707~將進(jìn)一步參照下述非限制性實(shí)施例來(lái)理解本發(fā)明。提供下述實(shí)施例僅用于示例說(shuō)明的目的且不應(yīng)理解為以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例IA 比較制備方法A (在pH4. 7凍干不含糖或者氨基酸的達(dá)托霉素)不含糖或者甘氨酸的比較達(dá)托霉素制劑的復(fù)合在冷凍(2-10° C)條件下進(jìn)行。達(dá)托霉素活性藥物成分(API)作為125-130mg/mL的濃度范圍的pH 3. 0的冷凍液體來(lái)提供。通過(guò)獲得液體達(dá)托霉素API (例如解凍以約3. 0的pH提供的冷凍的達(dá)托霉素API)，隨后使用3N NaOH將pH調(diào)節(jié)為約4. 7的目標(biāo)pH來(lái)開(kāi)始復(fù)合。將總體溶液(bulk solution)用sWFI進(jìn)一步稀釋為105mg/mL的目標(biāo)濃度且混合以保證溶液均勻(同樣在2-10° C)。將總體產(chǎn)物溶液0. 2 y m濾過(guò)并填充至IOmL小瓶中，隨后根據(jù)在實(shí)施例3中闡述的當(dāng)前凍干周期進(jìn)行凍干。將藥物產(chǎn)物制劑在氮?dú)庀路馊⒚芊?。?shí)施例IB 比較制備方法B (在pH 7.0凍干不含糖或者氨基酸的達(dá)托霉素)
總體制劑的復(fù)合在冷凍(2-10° C)條件下進(jìn)行。達(dá)托霉素API作為125_130mg/mL的濃度范圍的pH 3. 0的冷凍液體來(lái)提供。通過(guò)解凍API隨后在冷凍(2-10° C)條件下使用3N NaOH將pH調(diào)節(jié)為約7. 0的目標(biāo)pH，隨后用sWFI稀釋為105mg/mL的目標(biāo)濃度且混合以保證溶液均勻來(lái)復(fù)合所述總體制劑。將配制的藥物產(chǎn)物0. 2 y m濾過(guò)并填充至IOmL小瓶中，隨后根據(jù)在實(shí)施例3中闡述的修改的凍干周期進(jìn)行凍干。將藥物產(chǎn)物制劑在氮?dú)庀路馊⒚芊?。?shí)施例2A :制備方法A (在pH4. 7凍干)改善的達(dá)托霉素制劑的復(fù)合在冷凍(2-10° C)條件下進(jìn)行。達(dá)托霉素活性藥物成分(API)作為125-130mg/mL的濃度范圍的pH 3. 0的冷凍液體來(lái)提供。通過(guò)獲得液體達(dá)托霉素API (例如解凍以約3. 0的pH提供的冷凍的達(dá)托霉素API)，隨后使用3N NaOH將pH調(diào)節(jié)為約4. 7的目標(biāo)pH，接著加入一種或多種糖(例如蔗糖)來(lái)開(kāi)始復(fù)合。將總體溶液用sWFI進(jìn)一步稀釋為105mg/mL的目標(biāo)濃度且混合以保證溶液均勻(同樣在2-10° C)。將總體產(chǎn)物溶液0. 2 y m濾過(guò)并填充至IOmL小瓶中，隨后根據(jù)在實(shí)施例3中闡述的當(dāng)前凍干周期進(jìn)行凍干。將藥物產(chǎn)物制劑在氮?dú)庀路馊⒚芊?。所述糖作為粉末或者適當(dāng)溶液形式諸如sWFI來(lái)加入。實(shí)施例2B :制備方法B (在pH 7.0凍干)改善的達(dá)托霉素制劑的復(fù)合在冷凍(2-10° C)條件下進(jìn)行。達(dá)托霉素API作為125-130mg/mL的濃度范圍的pH 3. 0的冷凍液體來(lái)提供。通過(guò)解凍API，隨后在冷凍(2-10° C)條件下使用3N NaOH將pH調(diào)節(jié)為約4. 7的目標(biāo)pH，接著加入緩沖劑(磷酸鹽、枸櫞酸鹽等)，隨后加入甘氨酸或者一種或多種糖(蔗糖、海藻糖、甘露醇)來(lái)復(fù)合所述總體制劑。一旦賦形劑(糖、緩沖劑)完全溶解，所述溶液的pH用3N NaOH由4. 7調(diào)節(jié)為7. 0且用sWFI稀釋為105mg/mL的目標(biāo)濃度且混合以保證溶液均勻。將配制的藥物產(chǎn)物0. 2 y m濾過(guò)并填充至IOmL小瓶中，隨后根據(jù)在實(shí)施例3中闡述的修改的凍干周期進(jìn)行凍干。將藥物產(chǎn)物制劑在氮?dú)庀路馊⒚芊?。?shí)施例3 經(jīng)方法A和B制備的組合物的凍干將產(chǎn)物小瓶載入至5±4° C的冷凍干燥器中且隨機(jī)分散于各個(gè)架子上。將組合物冷凍干燥，用氮?dú)饣靥畈⒄婵辗馊Ｒ坏┩瓿煞馊?，使用濾過(guò)氮?dú)馐箖龈蓡卧祷刂链髿鈮?，并將產(chǎn)物小瓶移去以用鋁封口封蓋。對(duì)于各個(gè)制劑的周期參數(shù)匯總于表2中。表2:對(duì)于各個(gè)組合物的凍干周期參數(shù)的匯總
權(quán)利要求
1.固體達(dá)托霉素制劑，其相比于根據(jù)實(shí)施例Ia復(fù)合的達(dá)托霉素制劑而言具有改善的重建和在粉末和重建形式中增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性，所述固體達(dá)托霉素制劑包含達(dá)托霉素、蔗糖以及磷酸鹽緩沖劑；其中 a.所述固體達(dá)托霉素制劑包含至少92%純的達(dá)托霉素，其根據(jù)表3和實(shí)施例4通過(guò)重建達(dá)托霉素溶液的高效液相色譜(HPLC)在214nm測(cè)量的達(dá)托霉素的吸光度(曲線下面積)除以總體曲線下面積的比值來(lái)計(jì)算；且 b.所述達(dá)托霉素制劑通過(guò)如下獲得 1.形成包含105mg/mL(10.5%w/v)達(dá)托霉素、7. lmg/mL(50mM)磷酸氫二鈉緩沖劑和150mg/mL(15%w/v)鹿糖的pH為約7. O的達(dá)托霉素水溶液；且 ii 將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體達(dá)托霉素制劑。
2.固體達(dá)托霉素制劑，其包含達(dá)托霉素以及選自下述的物質(zhì)甘氨酸；一種或者多種糖；以及兩種或者更多種非還原性糖的組合；所述達(dá)托霉素制劑的特征在于500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物在4分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)在25°C溶解于IOmL 0. 9%氯化鈉水溶液中。
3.權(quán)利要求I的達(dá)托霉素制劑，其中所述糖為非還原性糖且所述達(dá)托霉素制劑進(jìn)一步包含緩沖劑。
4.權(quán)利要求2-3中任一項(xiàng)的達(dá)托霉素制劑，其中 a.至少92%純的達(dá)托霉素，其根據(jù)表3和實(shí)施例4通過(guò)重建達(dá)托霉素溶液的高效液相色譜(HPLC)在214nm測(cè)量的達(dá)托霉素的吸光度(曲線下面積)除以總體曲線下面積的比值來(lái)計(jì)算；且 b.所述達(dá)托霉素制劑的特征在于500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物在I分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)在25°C在4. 7和7. 0之間的pH溶解于IOmLO. 9%氯化鈉水溶液中。
5.權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)的達(dá)托霉素制劑，其中所述糖選自蔗糖、海藻糖和甘露醇。
6.權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)的達(dá)托霉素制劑，其中所述糖包含蔗糖，且所述達(dá)托霉素制劑通過(guò)如下獲得 a.形成包含達(dá)托霉素和約15.0%-約20%w/v蔗糖的pH為約4. 7-7. 0的達(dá)托霉素水溶液，且 b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑。
7.權(quán)利要求6的達(dá)托霉素制劑，其中所述達(dá)托霉素水溶液的pH為約7.O。
8.權(quán)利要求6-7的達(dá)托霉素制劑，其中所述達(dá)托霉素制劑通過(guò)如下獲得 a.形成包含達(dá)托霉素、磷酸氫二鈉緩沖劑和約15.0%w/v蔗糖的pH為約7. 0的達(dá)托霉素水溶液，且 b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑。
9.固體藥物達(dá)托霉素制劑，通過(guò)如下獲得 a.形成包含達(dá)托霉素、50mM含有磷酸鹽的緩沖劑和約15.0%蔗糖的pH為約7. 0的達(dá)托霉素水溶液，且 b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑， 其中所述固體藥物達(dá)托霉素制劑的特征在于500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物在2分鐘或者更少的時(shí)間內(nèi)在25°C溶解于IOmL 0.9%氯化鈉水溶液中。
10.權(quán)利要求9的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其中包含至少92%純的達(dá)托霉素，其根據(jù)表3和實(shí)施例4通過(guò)重建達(dá)托霉素溶液的高效液相色譜(HPLC)在214nm測(cè)量的達(dá)托霉素的吸光度(曲線下面積)除以總體曲線下面積的比值來(lái)計(jì)算。
11.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其進(jìn)一步的特征在于相比于通過(guò)將達(dá)托霉素和達(dá)托霉素-相關(guān)化合物在0. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中凍干而獲得的固體藥物達(dá)托霉素制劑而言，所述達(dá)托霉素制劑在40°C在氮?dú)庀聝?chǔ)存I個(gè)月后具有較低量的一種或者多種選自下述的物質(zhì)無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)、達(dá)托霉素的￠-異構(gòu)體(圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物(圖4)，其中所述物質(zhì)的量根據(jù)實(shí)施例4的方法通過(guò)HPLC在214nm進(jìn)行檢測(cè)。
12.液體藥物達(dá)托霉素制劑，其具有增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性，且通過(guò)如下獲得 a.形成包含達(dá)托霉素、50mM含有磷酸鹽的緩沖劑和約15.0%蔗糖的pH為約7. 0的達(dá)托霉素水溶液， b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑，然后 c.將所述固體藥物達(dá)托霉素制劑在含水稀釋劑中重建以形成液體藥物達(dá)托霉素制劑。
13.權(quán)利要求12的液體藥物達(dá)托霉素制劑，其中所述液體藥物達(dá)托霉素制劑針對(duì)靜脈內(nèi)給藥來(lái)配制。
14.制品，包含權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的藥物達(dá)托霉素制劑。
15.制備固體藥物達(dá)托霉素制劑的方法，所述固體藥物達(dá)托霉素制劑具有增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性，所述增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性通過(guò)在含水稀釋劑中重建后3-14天在固體達(dá)托霉素制劑中的結(jié)構(gòu)上類(lèi)似于達(dá)托霉素的物質(zhì)的形成速率降低所測(cè)量，其中所述結(jié)構(gòu)上類(lèi)似于達(dá)托霉素的物質(zhì)選自無(wú)水-達(dá)托霉素(圖2)、達(dá)托霉素的￠-異構(gòu)體(圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物(圖4);所述結(jié)構(gòu)上類(lèi)似于達(dá)托霉素的物質(zhì)的形成速率根據(jù)實(shí)施例4來(lái)測(cè)量；且所述方法包括 a.形成包含達(dá)托霉素和約5.0 - 20. 0%w/v蔗糖的pH為約4. 5至7. 5的達(dá)托霉素水溶液，且 b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述達(dá)托霉素水溶液具有約7.0的pH且包含達(dá)托霉素、15%w/v蔗糖和50nM磷酸鈉緩沖劑；且所述達(dá)托霉素水溶液通過(guò)凍干轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑。
17.權(quán)利要求15-16中任一項(xiàng)的方法,其特征在于相對(duì)于在40°C保持6個(gè)月后通過(guò)實(shí)施例4的方法測(cè)量的不含蔗糖的固體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素的純度百分?jǐn)?shù)而言，通過(guò)實(shí)施例4的方法測(cè)量的固體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素的純度百分?jǐn)?shù)增加至少10%。
18.權(quán)利要求17的方法，其中通過(guò)實(shí)施例5計(jì)算的40°C的達(dá)托霉素穩(wěn)定性比率小于I. 000。
19.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其中通過(guò)實(shí)施例5計(jì)算的40°C的達(dá)托霉素穩(wěn)定性比率小于I. 000。
20.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其中通過(guò)實(shí)施例5計(jì)算的40°C的達(dá)托霉素穩(wěn)定性比率小于0. 500。
21.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其中通過(guò)實(shí)施例5計(jì)算的40°C的達(dá)托霉素穩(wěn)定性比率小于0. 300。
全文摘要
本發(fā)明提供新的粉末達(dá)托霉素制劑，其在固態(tài)時(shí)具有改善的化學(xué)穩(wěn)定性和較快的重建時(shí)間。該組合物的一些實(shí)例包含達(dá)托霉素和蔗糖。
文檔編號(hào)A61P31/04GK102712677SQ201080062122
公開(kāi)日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2010年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月23日
發(fā)明者G.納伊克, S.奧康納, S.孫 申請(qǐng)人:丘比斯特藥物股份有限公司