專利名稱：一種遼東楤木葉片皂苷的超聲提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種遼東橡木葉片皂苷的提取方法。
背景技術(shù)：
遼東橡木[Aralia elata (Miq. ) kem.]，又稱龍牙(芽)橡木，俗稱刺龍牙、刺嫩芽、刺老鴉、東北野香椿等，是一種食藥兼用型的五加科(Araliaceae)橡木屬(Aralia)植物，為多年生落葉小喬木。其食用器官為嫩芽，是深受國內(nèi)外人們喜食的野生蔬菜；研究表明，遼東橡木植株根、莖、葉等器官均含有多種三萜皂苷，主要皂苷元為齊墩果酸，其具有增強(qiáng)體質(zhì)、抗除疲勞、抗炎保肝、降血糖血脂、抗癌、抗病毒等作用，藥用價值顯著，因此可以作為生產(chǎn)中藥制劑的原料。皂苷(saponin)別稱堿皂體、皂素、皂角苷或皂草苷，是能形成水溶液或膠體溶液并能形成肥皂狀泡沫的植物糖苷統(tǒng)稱，是一類結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜的苷類化合物，根據(jù)已知皂苷元的分子結(jié)構(gòu)，可以將皂苷分為兩大類，一類為留體皂苷，另一類為三萜皂苷。橡木三萜皂苷化合物中皂苷單體種類較多，化學(xué)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，人工合成較為困難，現(xiàn)在主要從植物中提取獲得。目前提取遼東橡木皂苷的方法主要有浸漬提取法、熱回流提取法，浸漬提取法每 Ig材料大約需80 120ml溶劑，多次提取，需時12 1 得到提取液，得到的提取液經(jīng)純化得到皂苷(純化過程得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干得到純化)； 熱回流提取法每Ig材料大約需60 120ml溶劑，三次以上提取，需時3 他得到提取液， 得到的提取液經(jīng)純化得到皂苷(純化過程得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取 —再蒸干得到純化)；上述的兩種方法采用大量的溶劑，造成提取液的量很大，會增加過濾和濃縮蒸干處理的時間和難度，且資源浪費嚴(yán)重，成本較高；因此現(xiàn)有提取遼東橡木皂苷的方存在耗時較長、溶劑消耗量較大、操作繁瑣的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決現(xiàn)有技術(shù)提取遼東橡木皂苷的方法存在耗時較長、溶劑消耗量較大、操作繁瑣的問題，而提供一種遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法。一種遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法，具體是按以下步驟完成將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40 % 90 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W 超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度40 90°C，提取時間15 90min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集，并在40 100°C下烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 (10 60)。本發(fā)明的優(yōu)點一、本發(fā)明一次提取就完成整個提取過程，操作簡便，提取時間至少縮短了 2h、皂苷的提取率提高了 0. 66% ；二、本發(fā)明利用超聲波產(chǎn)生強(qiáng)烈的震動、巨大的加速度、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)和攪拌作用加速溶劑滲入樣品中，促使皂苷快速溶解，以達(dá)到快速、高效提取的效果，減少了溶劑的浪費，能夠最大程度地利用資源及降低成本。


圖1是利用具體實施方式
一制備的純化皂苷配置的純化皂苷溶液和齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與香草醛-高氯酸反應(yīng)得到的化合物用紫外分光光度計進(jìn)行全波長掃描得到紫外-可見吸收光譜曲線；圖2是具體實施方式
五得到的乙醇溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系曲線；圖3是具體實施方式
六得到的稱取步驟一制備的樣品與加入乙醇溶液的質(zhì)量比與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系曲線；圖4是具體實施方式
七得到的提取溫度與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系曲線；圖5是具體實施方式
八得到的提取時間與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系曲線。
具體實施例方式具體實施方式
一本實施方式提供一種遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法，具體是按以下步驟完成將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40% 90%的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度40 90°C，提取時間15 90min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；本實施方式所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集，并在40 100°C下烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的。本實施方式所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 (10 60)。本實施方式一次提取就完成整個提取過程，操作簡便，提取時間至少縮短了池。本實施方式利用超聲波產(chǎn)生強(qiáng)烈的震動、巨大的加速度、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)和攪拌作用加速溶劑滲入樣品中，促使皂苷快速溶解，以達(dá)到快速、高效提取的效果，減少了溶劑的浪費，能夠最大程度地利用資源及降低成本。將本實施方式制備的純化皂苷用甲醇溶解并移至容量瓶中，定容、搖勻即得到純化的皂苷溶液，分別采用齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液和純化的皂苷溶液與香草醛-高氯酸反應(yīng)得到的化合物用紫外分光光度計進(jìn)行全波長掃描，得到紫外-可見吸收光譜，如圖1所示，通過圖1可知齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液與香草醛-高氯酸反應(yīng)得到的化合物和純化的皂苷溶液與香草醛-高氯酸反應(yīng)得到的化合物的吸收光譜一致，根據(jù)齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品的基本性質(zhì)是齊墩果酸與香草醛-高氯酸反應(yīng)得到的化合物在MOnm有最大吸收值，因為齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液與香草醛-高氯酸反應(yīng)得到的化合物和純化的皂苷溶液與香草醛-高氯酸反應(yīng)得到的化合物的吸收光譜一致，且在540nm有最大吸收值，證明本實施方式得到的純化皂苷是齊墩果酸類皂苷，并測得產(chǎn)物中皂苷含量為20 93mg · g—1。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一的不同點是所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集，并在50 80°C烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一或二之一不同點是所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集，并在55 65°C烘干至恒重，然后粉碎過 40目篩得到的。其它與具體實施方式
一或二相同。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
一至三之一不同點是所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集，并在60°C烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的。其它與具體實施方式
一或三相同。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同點是采用單因素實驗證明乙醇溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系，乙醇溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)的分別取40%、 50^^60^^70^^80%和90%，所述的產(chǎn)物為純化的皂苷。其它與具體實施方式
一或四相同。本實施方式通過單因素實驗得到的乙醇溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系曲線，如圖2所示，通過圖2可知乙醇溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在60 % 80 %之間，得到的產(chǎn)物中皂
苷含量最大。
具體實施方式
六本實施方式與具體實施方式
一至五之一不同點是采用單因素實驗證明稱取步驟一制備的樣品與加入乙醇溶液的質(zhì)量比與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系，稱取步驟一制備的樣品與加入乙醇溶液的質(zhì)量比分別為1 10、1 20,1 30,1 40,1 50 和1 60，所述的產(chǎn)物為純化的皂苷。其它與具體實施方式
一或五相同。本實施方式通過單因素實驗得到稱取步驟一制備的樣品與加入乙醇溶液的質(zhì)量比與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系曲線，如圖3所示，通過圖3可知稱取步驟一制備的樣品與加入乙醇溶液的質(zhì)量比1 30 1 60之間產(chǎn)物中皂苷含量變化很少。
具體實施方式
七本實施方式與具體實施方式
一至六之一不同點是采用單因素實驗證明提取溫度與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系，提取溫度分別為40V、500C、60°C、70°C、80°C 和90°C，所述的產(chǎn)物為純化的皂苷。其它與具體實施方式
一或六相同。本實施方式通過單因素實驗得到提取溫度與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系曲線，如圖4 所示，通過圖4可知提取溫度為在50°C 80°C之間產(chǎn)物中皂苷含量差別不大，當(dāng)提取溫度為90°C時產(chǎn)物中皂苷含量減少。
具體實施方式
八本實施方式與具體實施方式
一至七之一不同點是采用單因素實驗證明提取時間與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系，提取時間分別為15min、30min、45min、 60min,75min和90min，所述的產(chǎn)物為純化的皂苷。其它與具體實施方式
一或七相同。本實施方式通過單因素實驗得到提取時間與產(chǎn)物中皂苷含量的關(guān)系曲線，如圖5 所示，通過圖5可知在提取時間45min 75min之間產(chǎn)物中皂苷含量最大。
具體實施方式
九本實施方式與具體實施方式
一至八之一不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60% 80%的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為 250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度50 70°C，提取時間45 75min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集，并在60°C烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 (30 50)。其它與具體實施方式
一或八相同。
具體實施方式
十本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度50°C，提取時間45min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 30。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 70. 42mg · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為7. 04%。
具體實施方式
十一本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度60°C，提取時間60min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 40。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 78. 53mg · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為7. 85%。
具體實施方式
十二 本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度70°C，提取時間75min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 50。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 80. 96mg · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為8. 10%。
具體實施方式
十三本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度60°C，提取時間75min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 30。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 82. 58mg · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為8.沈％。
具體實施方式
十四本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度70°C，提取時間45min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 40。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 92. 7Img · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為9. 27%。
具體實施方式
十五本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度50°C，提取時間60min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 50。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 84. 20mg · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為8. 42%。
具體實施方式
十六本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度70°C，提取時間60min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 30。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 74. 47mg · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為7. 45%。
具體實施方式
十七本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度50°C，提取時間75min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 40。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 78. 93mg · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為7. 89%。
具體實施方式
十八本實施方式與具體實施方式
九的不同點是將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度60°C，提取時間45min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 50。其它與具體實施方式
九相同。通過紫外可見分光光度計測定得到本實施方式的產(chǎn)物中皂苷的含量為 78. 53mg · g—1，即遼東橡木皂苷的提取效率為7. 85%。
具體實施方式
十至具體實施方式
十八以乙醇溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，提取的溫度，提取的時間和稱取步驟一制備的樣品與加入乙醇溶液的質(zhì)量比為因素水平的L9(34)正交試驗檢測，通過正交試驗分析得到最佳的組合為乙醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%，稱取步驟一制備的葉片樣品與加入乙醇溶液的質(zhì)量比為1 50，提取的溫度為70°C，提取的時間為75min。
具體實施方式
十九本實施方式提供一種遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法，具體是按以下步驟完成將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70 %的乙醇溶液，在頻率為 40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度70°C，提取時間75min，得到提取液， 將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；本實施方式所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集，并在60°C 烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的；本實施方式所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 50。將本實施方式制備的純化皂苷用甲醇溶解并移至容量瓶中，定容、搖勻即得到純化的皂苷溶液，通過紫外可見分光光度計測得到產(chǎn)物中皂苷的含量為92. 77mg · g-1,即遼東橡木皂苷的提取效率為9.觀％，與現(xiàn)有方法提取遼東橡木葉片的最大提取率為8. 62%相比提高了 0. 66%。
權(quán)利要求
1.一種遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法，其特征在于遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法具體是按以下步驟完成將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40% 90 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度40 90°C，提取時間15 90min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取 —再蒸干即得到純化的皂苷；所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集， 并在40 100°C下烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 (10 60)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法，其特征在于所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集，并在60°C烘干至恒重，然后粉碎過40 目篩得到的。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法，其特征在于遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法具體是按以下步驟完成將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60% 80%的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度50 70°C，提取時間45 75min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取一再蒸干即得到純化的皂苷；所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1 日 8月20日收集，并片在60°C烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為1 (30 50)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法，其特征在于遼東橡木葉片皂苷的超聲提取方法具體是按以下步驟完成將遼東橡木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70 %的乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度70°C，提取時間75min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾一濃縮蒸干一脫脂一萃取 —再蒸干即得到純化的皂苷；所述的遼東橡木葉片是在每年的8月1日 8月20日收集， 并在60°C烘干至恒重，然后粉碎過40目篩得到的；所述遼東橡木葉片與乙醇溶液的質(zhì)量比為 1 50。
全文摘要
一種遼東楤木葉片皂苷的超聲提取方法，它涉及一種遼東楤木葉片皂苷的提取方法。本發(fā)明要解決現(xiàn)有技術(shù)提取遼東楤木皂苷的方法存在耗時較長、溶劑消耗量較大、操作繁瑣的問題。本發(fā)明的操作步驟如下將遼東楤木葉片放入容器中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40％～90％乙醇溶液，在頻率為40kHz、功率為250W超聲波作用下進(jìn)行提取，提取溫度40～90℃，提取時間15～90min，得到提取液，將得到的提取液經(jīng)過濾→濃縮蒸干→脫脂→萃取→再蒸干即得到純化的皂苷。本發(fā)明主要用于從遼東楤木葉片中提取皂苷。
文檔編號A61P35/00GK102283873SQ20111020717
公開日2011年12月21日 申請日期2011年7月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月22日
發(fā)明者徐正莉, 班文杰, 趙恒田, 鄧中樞, 黃福山 申請人:中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所