專利名稱：鼓槌石斛提取物及其作為抗老化劑的化妝品用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的化妝品組合物，所述組合物包含來自鼓槌石斛蘭(orchid Dendrobium chrysotoxum)的至少一種提取物作為活性劑以及至少一種化妝品上可接受的輔劑(excipient)，所述組合物特別用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命。
背景技術(shù)：
皮膚老化表現(xiàn)為皮膚各種內(nèi)在的變化和可視跡象的不斷出現(xiàn)，這些內(nèi)在變化和可視跡象改變了皮膚的美觀和質(zhì)量。皮膚紋理更為粗糙，并出現(xiàn)許多皮膚缺陷(blemish)。在細胞水平，老化作用導(dǎo)致生物機制不斷劣化，例如結(jié)構(gòu)蛋白(膠原、彈性蛋白) 的合成放緩。細胞凋亡是一種程序性細胞死亡，是在基因控制(genetic control)下通過片段化(fragmentation)從體內(nèi)清除細胞的主動生物過程(active biological process)。該清除作用可以是自然的(組織中的細胞過剩)，或由各種應(yīng)激(stress)誘導(dǎo)。細胞凋亡的生物級聯(lián)是已知的，該生物級聯(lián)啟動許多效應(yīng)子(例如半胱天冬氨酸蛋白酶(caspase)家族的蛋白酶)。已知的細胞凋亡抑制劑(IAP)具有阻斷半胱天冬氨酸蛋白酶原的激活和抑制成熟的半胱天冬氨酸蛋白酶的活性的功能，從而使得細胞凋亡現(xiàn)象放慢(Deveraux等，Genes Dev. 13(1999)，pp. 239-252)。在IAP中，應(yīng)提及存活蛋白(survivin)，它是一種雙功能蛋白，能夠同時控制細胞的凋亡并調(diào)節(jié)細胞的細胞周期。對于可誘導(dǎo)這一細胞凋亡現(xiàn)象的應(yīng)激，存活蛋白是角化細胞在該應(yīng)激下得以存活以及對該應(yīng)激具有抗性的調(diào)節(jié)劑。存活蛋白也調(diào)節(jié)角化細胞在表皮的更新和再生方面的能力。因此，能夠減少表皮的細胞死亡(cellular capital)，并保持有效的細胞更新 (Dallaglio 等，Experimental Dermatology,18(5)464-72)。存活蛋白的產(chǎn)生嚴格受控于在細胞凋亡期間釋放的線粒體蛋白Smac/DIABLO(第二線粒體的半胱天冬氨酸蛋白酶激活劑或低等電點IAP直接結(jié)合蛋白)。Smac/DIABLO這種蛋白以^kDa前體的形式合成，通過具有線粒體定位信號的 N端域移位到線粒體中。然后，這一前體被切割，得到23kDa的成熟蛋白Ghang等，Acta Biochim. Biophys. Sin. 2007，39(2)，108-116)。已知UV輻射或自由基(如ROQ誘發(fā)皮膚中與皮膚老化有關(guān)的細胞應(yīng)激。在響應(yīng)刺激(如UV輻射或活性氧(ROS))時，成熟的線粒體蛋白Smac/DIABLO被釋放到細胞胞液中作為IAP的抑制劑。Smac/DIABLO以二聚體的形式與IAP結(jié)合，從而阻斷半胱天冬氨酸蛋白酶的失活(Kurita-Ochiai T.等，J. Dent. Res. 2010，89 (7)，689-694)。類似地，在響應(yīng)這些相同的刺激時，已證實減少了 Smac/DIABLO的產(chǎn)生，并伴隨有存活蛋白的過表達，使得細胞壽命增加(AzizMH.等，Photochem. Photobiol. 2005，81(1)，25-31)。因此，為了更有效地對抗皮膚老化，特別有意義的是能夠在化妝品中含有一種或多種其它活性劑，該活性劑能夠顯著地減少Smac/DIABLO這種蛋白在表皮細胞中的表達和 /或活性；并且能夠使得IAP以上述方式抑制半胱天冬氨酸蛋白酶，從而改善對應(yīng)激(由UV 輻射或自由基誘發(fā))的細胞反應(yīng)性，并延長細胞壽命。然而，迄今為止，對于用于化妝品應(yīng)用的這種藥劑尚無記載。因此，特別令人意外地證實了蘭花提取物、特別是鼓槌石斛蘭的花的提取物對蛋白Smac/DIABLO的表達顯示出上述抑制效果。在蘭花中，中醫(yī)上已知若干屬于石斛屬的種。然而，所使用的是莖或葉的提取物 (Gutierrez RMP, J.Med. Plant Res.，2010，4(8)，592-638)。具體而言，已經(jīng)從鼓槌石斛的莖的提取物中分離出了毛蘭素(erianin) (NG等， Life Science，2000，66 (8) ,709-23)，這種化合物的抗氧化活性已經(jīng)在大鼠中得到了證實。迄今為止，對于鼓槌石斛的花的提取物，尚未證實其特別的活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的在于提供新的化妝品組合物，旨在特別用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命；具體而言， 上述活性通過抑制線粒體蛋白Smac/DIABLO的表達和/或活性而得到。本發(fā)明的目的還在于提供使用該化妝品組合物的化妝護理方法。本發(fā)明的目的還在于提供一種新的植物來源提取物，該提取物降低皮膚中、特別是表皮中線粒體蛋白Smac/DIABLO的表達和/或活性。最后，本發(fā)明的目的在于特別是在化妝品工業(yè)中，通過工業(yè)規(guī)?？捎玫?、簡單而相對低成本的解決方案解決總體技術(shù)問題。本發(fā)明的發(fā)明人等目前已經(jīng)證實，用鼓槌石斛種的蘭花的至少一種提取物對正常的人角化細胞(NHK)進行處理，誘發(fā)線粒體蛋白Smac/DIABLO的表達和/或活性顯著降低。對所述蛋白的表達和/或活性的這種抑制效果使得IAP在限制細胞凋亡和調(diào)控細胞的細胞周期方面具有更強的活性。因此，根據(jù)第一方面，本發(fā)明涉及包含所述提取物的化妝品組合物；還涉及化妝護理方法或皮膚病學(xué)護理方法，該方法的特征在于包括將有效量的本發(fā)明所述的組合物施用到與之相關(guān)的、身體或面部的皮膚部位上。根據(jù)第二方面，本發(fā)明涉及蘭花提取物、特別是鼓槌石斛種的蘭花提取物(本發(fā)明的提取物)以及該提取物在化妝品組合物或皮膚病學(xué)組合物中作為活性劑的用途；該提取物用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命，特別是在于該提取物抑制線粒體蛋白Smac/DIABLO的表達和/或活性。
具體實施例方式本發(fā)明的第一個主題涉及一種化妝品組合物，該組合物包含鼓槌石斛蘭的花的至少一種提取物作為活性劑以及至少一種化妝品上可接受的輔劑。該化妝品組合物特別旨在預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命。本發(fā)明的提取物有利地抑制線粒體蛋白Smac/DIABLO的活性和/或表達。該植物材料優(yōu)選僅由鼓槌石斛蘭的花組成。然而，本發(fā)明還涉及本發(fā)明的提取物與下述物質(zhì)的組合鼓槌石斛蘭的其它部位的任何提取物，優(yōu)選在與本發(fā)明的提取物相同的條件下制備；或從這些提取物之一中分離出來的化合物。本發(fā)明的提取物可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的不同的提取方法來制備。優(yōu)選地，該提取物通過極性溶劑或極性溶劑混合物獲得。作為極性溶劑，溶劑或溶劑混合物優(yōu)選選自7jC ;C「C4醇，例如乙醇；C2_C6 二醇， 優(yōu)選選自乙二醇(glycerol)、丁二醇和丙二醇；或它們的任意混合物。根據(jù)優(yōu)選的實施方式，該C1-C4醇為乙醇。具體而言，該植物材料通過包含至少50% ν/ν乙醇直至100% ν/ν乙醇的溶劑提取；如果必要，余量由其它極性溶劑、特別是水組成。提取可在加熱回流下進行，或可在室溫進行。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的變型，通過在如前所述的極性溶劑或極性溶劑混合物中，將植物材料在室溫下浸漬若干小時實現(xiàn)提取。根據(jù)一種變型，所述提取物是可能成為溶液的干提取物。在提取步驟本身之前，可將植物材料進行干燥和/或研磨和/或去脂 (delipidated)。提取物的去脂作用可通過非極性溶劑(例如C6-C7烷烴)實現(xiàn)，或者還可通過超臨界狀態(tài)的(X)2實現(xiàn)，并且可能加入極性共溶劑(例如乙醇、甲醇或辛酸/癸酸甘油三酯 (Mygliol 812 , Huls AG))。該提取還可任選包括至少一個對本發(fā)明的提取物進行脫色或純化的補充步驟。例如，提取物的脫色可為用非極性溶劑處理所述提取物，該非極性溶劑為用來將提取物去脂的非極性溶劑的類型。該提取可通過將提取溶劑部分去除或全部去除的步驟完成。在第一種情況中，通常將提取物進行濃縮，直至得到不含大量有機溶劑的水性濃縮物；在第二種情況中，得到干燥殘余物?；蛘?，可將提取步驟的產(chǎn)物凍干(lyophilized)或粉碎(atomized)成粉末形式。作為本發(fā)明所述的化妝品組合物中的活性劑，該提取物以干燥狀態(tài)使用，或以處于化妝品上可接受的溶劑混合物或溶劑(可與用于提取的溶劑相同或不同)中的溶液或懸浮液進行使用。該化妝品組合物包含有效量的提取物，該提取物用于獲得所希望的效果、特別是對線粒體蛋白Smac/DIABLO的活性和/或表達的抑制作用。因此，相對于組合物的總重量，該組合物優(yōu)選包含0. OOOlwt % -Iwt %、更優(yōu)選 0. 00 Iwt % -0. 0 Iwt % 的干提取物。在本發(fā)明的提取物與化妝品上可接受的其它活性劑組合使用的化妝品組合物中， 也可得到或改善本發(fā)明的提取物的性質(zhì)；所述其它活性劑為經(jīng)純化的物質(zhì)和/或提取物、 特別是植物提取物的形式，顯示出與本發(fā)明所述的提取物相似和/或互補的化妝效果。因此，該組合物可包含一種或多種其它植物提取物，優(yōu)選包含鼓槌石斛蘭的其它部位的至少一種提取物；或其它蘭花的至少一種提取物；或由前述提取物純化得到的物質(zhì)。所述化妝品組合物還可優(yōu)選包含一種或多種刺激存活蛋白表達的其它活性劑，例如毛喉素；或含有這些活性劑的提取物，特別是毛喉鞘蕊花(Coleus forskolii) 的提取物；或由選自普通念珠藻(Nostoc commune)、甄叔迦樹(Buteafrondosa)、新綠藻 (Neochloris oleabundans)、二形柵藻(Scenedesmus dimorphus)、姜黃(Curcuma longa)、 番紅iS (Crocus sativus)、奧氏西(Daniellia oliveri) >Lepechinia caulescens> Limnophila conferta的植物種獲得的植物提取物；以及它們的任意混合物。最后，該化妝品組合物可包含化妝品上可接受的其它活性劑，該活性劑選自如下物質(zhì)組成的組具有抗老化活性的物質(zhì)；對皮膚具有脫色、美白或清潔活性的物質(zhì)；具有減肥活性的物質(zhì)；具有保濕(hydrating)活性的物質(zhì)；具有鎮(zhèn)定(calming)、舒緩(soothing) 或放松(relaxing)活性的物質(zhì)；具有刺激皮膚微循環(huán)以改善特別是面部膚色光澤的活性的物質(zhì)；用于對油性皮膚進行護理、具有皮脂調(diào)節(jié)活性的物質(zhì)；用于清洗或凈化皮膚的物質(zhì)；具有抗自由基活性的物質(zhì)；以及它們的任意混合物。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的組合物包含至少一種化妝品上可接受的輔劑，該輔劑可選自色素、著色劑、聚合物、表面活性劑、粘性劑(viscosity agents)、芳香劑(perfumes)、電解液、PH調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑、防腐劑以及它們的任意混合物。例如，所述化妝品組合物可為精華素(serum)、乳液(lotion)、霜(cream)、水凝膠(hydrogel)，優(yōu)選為面膜、水包油乳劑、無水組合物，或可為條狀物(stick)形式、貼劑 (patch)形式，或為唇膏、睫毛膏或粉底型化妝產(chǎn)品的形式。本發(fā)明所述的提取物和組合物顯示出特別希望的效果預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)；放慢或減弱皮膚老化跡象的影響；或延長細胞或組織的壽命。因此，本發(fā)明的第二個主題涉及鼓槌石斛蘭的花的至少一種提取物在化妝品組合物中作為活性劑的用途，該活性劑用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命。優(yōu)選地，該提取物或該組合物如上文或下文所定義。優(yōu)選地，包含所述提取物的組合物本身旨在預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命。本發(fā)明的第三個主題涉及一種化妝護理方法，特別是用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命，該方法的特征在于包括將有效量的如上定義的化妝品組合物施用到身體或面部皮膚的至少一個部位。優(yōu)選地，將所述化妝品組合物施用到顯示出下述跡象的、身體或面部的皮膚區(qū)域 可視的老化跡象，如存在皺紋或細小皺紋、或皮膚膚色失去光澤；其它跡象，如皮膚彈性和 /或柔性消失、皮膚厚度減小、和/或皮膚干燥度或粗糙度增加。本發(fā)明還涉及有效量的鼓槌石斛蘭的花的至少一種提取物在制備用于預(yù)防或延緩皮膚內(nèi)在和/或外在老化跡象的出現(xiàn)、或放慢皮膚老化跡象的影響的組合物方面的用途。該組合物尤其可通過局部施用到個體皮膚的至少一個顯示出下述跡象的區(qū)域進行施用可視的老化跡象，例如存在皺紋或細小皺紋、或皮膚膚色失去光澤；或其它跡象，例如皮膚彈性消失和/或柔性消失、皮膚厚度減小、和/或皮膚干燥度或粗糙度增加。該組合物尤其旨在用于施用到超過35歲、超過40歲、超過45歲、超過50歲、超過55歲乃至超過60 歲的個體的皮膚上。該組合物可優(yōu)選施用到成熟的皮膚上。特別地，該組合物旨在用于預(yù)防或延緩眼部和/或面部皮膚的老化跡象的出現(xiàn)。本發(fā)明的第四個主題涉及抑制線粒體蛋白Smac/DIABLO的表達和/或活性的蘭花提取物、特別是鼓槌石斛種的蘭花提取物。該提取物優(yōu)選為如上定義的鼓槌石斛的花的提取物。此外，該提取物優(yōu)選通過如上所述的極性溶劑或極性溶劑混合物獲得。優(yōu)選地，該提取物是可能成為溶液的干提取物。根據(jù)隨后關(guān)于提取物制備的實施例、證實提取物性質(zhì)的試驗以及使用該提取物的化妝品組合物的實施例所作出的解釋性的描述，本發(fā)明的其它目的、特征和優(yōu)點將會清楚地展現(xiàn)；上述實施例和試驗均以闡明本發(fā)明的方式給出，并不限定本發(fā)明的范圍。除非另外指明，在實施例中，所有百分比均以重量百分比給出，溫度為攝氏溫度， 壓力為大氣壓力。


圖1表示用在實施例1中制備的提取物(S-1到S-4)之一處理正常的人角化細胞(NHK)后，與溶劑對照(T-SO)和陽性對照(T+)相比，通過免疫酶法測定的線粒體蛋白 Smac/DIABLO的表達水平(用pg/μ g總蛋白表示)。所標(biāo)出的百分比對應(yīng)于相對于溶劑對照(T-SO)的抑制百分比。
實施例實施例1 鼓槌石斛的花的提取物的制備本發(fā)明的提取物的制備根據(jù)本發(fā)明，制備四種提取物和作為對比的其它兩種提取物。提取物S-1、S-2、S_3和S_4的植物材料由鼓槌石斛蘭的花組成。提取物R和G由鼓槌石斛蘭的根或由皇后蘭種(GrammatophylIum sp.)蘭花的葉獲得。將干燥狀態(tài)且經(jīng)研磨的植物材料用含水酒精(90/10v/v乙醇/水)回流提取30 分鐘，以制備提取物s-l、R和G。然后去除提取溶劑，得到干提取物。改變提取溶劑和溫度條件，再進行上述提取以獲得提取物S-2、S-3和S-4。測試了兩個提取溫度環(huán)境溫度(AT) 16小時；或加熱(溶劑回流)至少30分鐘。下面總結(jié)了所制備的提取物和它們相關(guān)的提取產(chǎn)率，用干提取物相對于處于干燥狀態(tài)且經(jīng)磨碎的起始植物材料的百分比(wt/wt)表示。提取物代碼提取類型提取產(chǎn)率S-I乙醇/水 90/10 ν/ν—-回流23.1%S-2乙醇100%—回流17.0%S-3乙醇/水 70/30 ν/ν—-AT27.9%S-4乙醇/水 50/50 ν/ν—-AT28.4%R乙醇/水 90/10 ν/ν—-回流14.7%G乙醇/水 90/10 ν/ν—-回流14.1%對于如下實施例2的化妝活性試驗，為各提取物制備了原液(stocksolution)，其中干提取物以每HiL溶劑12. 5mg提取物的濃度溶解于DMSO中。實施例2 正常的人角化細胞(NHK)中蛋白Smac/DIABLO的表達水平的免疫酶分析2. 1陽性對照和提取物溶液的制備毛喉素是已知的、存活蛋白表達的激活劑(專利申請FM932086的比較實施例1)。對于下面的試驗，將最低包含98wt%毛喉素的毛喉鞘蕊花提取物用作陽性對照。 例如，SIGMA出售粉末形式的該提取物。將該提取物粉末溶解于DMSO中，以獲得約IO-6M的毛喉素(摩爾質(zhì)量=410. 5)濃度。將由此制備的陽性對照的溶液添加到培養(yǎng)基中，從而稀釋至千分之一，即毛喉素的濃度等于約10_%。同時，制備在培養(yǎng)基中稀釋到千分之一的溶劑對照(DMSO)。所測試的各提取物(S-1到S-4、R、G)的原液在角化細胞培養(yǎng)基中稀釋，以獲得 12. 5 μ g/mL的提取物終濃度。2. 2NHK 的處理在無血清的完全培養(yǎng)基(KSFMc，Gibco)中，將所培養(yǎng)的NHK以每孔50，000個細胞的量接種到48孔微孔板中。該培養(yǎng)的第一天對應(yīng)于DO。處理步驟開始于Dl，在孵育(37°C，5% CO2)NHK 24小時之后。去除培養(yǎng)基后，用新的KSFMc培養(yǎng)基進行替換，該培養(yǎng)基包含要測試的提取物或者陽性對照或溶劑對照(T-SO)。每種處理平行進行三次。處理16小時(對應(yīng)于細胞周期過程中存活蛋白的表達峰的時間段)后，將半塊板上的NHK裂解以進行分析(根據(jù)Smac/DIABLO蛋白分析試劑盒(參見下文)中記載的方案， 即時制備裂解緩沖液)。另外半塊板用PBS沖洗，然后儲存在-20°C，從而通過按BCA法(BC 分析試劑盒，Uptima Interchim)進行的比色試驗，采用570nm處的吸光度測定來分析其中的總蛋白。2. 3分析方法用Duoset Smac/DIABLO ELISA 試劑盒(R&D Systems)評價角化細胞產(chǎn)生的 Smac/ DIABLO的水平。添加與發(fā)色團(這里是HRP (辣根過氧化物酶))偶聯(lián)的鏈霉親和素，使得能夠在過氧化氫的存在下，通過添加HRP的底物(四甲基聯(lián)苯胺)評價HRP的酶活性。一旦用硫酸阻斷該酶促反應(yīng)，即通過比色反應(yīng)顯示出Smac/DIABLO的存在(與其濃度成比例)。吸光度在450nm的波長處測量。在對試劑盒提供的Smac/DIABLO標(biāo)準(zhǔn)原液進行稀釋的基礎(chǔ)上，生成標(biāo)準(zhǔn)范圍。2. 4NHK裂解物中Smac/DIABLO蛋白的分析結(jié)果結(jié)果如圖1所示。該結(jié)果以每μ g總蛋白中的Smac/DIABLO蛋白(pg)表示(pg/ yg總蛋白)。相對于未經(jīng)處理的基準(zhǔn)水平(TSO)，計算產(chǎn)生該蛋白的抑制百分比。陽性對照為毛喉素(FSK)。結(jié)論在降低NHK中的線粒體蛋白Smac/DIABLO的表達方面，所測試的四種本發(fā)明的提取物中的每一種都顯示出顯著的活性(S-l :-39% ；S-2 :-54% ；S-3 -39% ；S-4 ~29%), 所具有的效力可高于陽性對照的效力。相反，鼓槌石斛的根提取物和皇后蘭種的葉提取物對Smac/DIABLO蛋白的表達不具有顯著的抑制作用。與DMSO指標(biāo)組(DMS0 indicator)的蛋白濃度相比，鼓槌石斛的根提取物的蛋白濃度差異不超過_9%，而皇后蘭種的葉提取物的蛋白濃度差異不超過_13%。將本發(fā)明的提取物(可通過使用極性溶劑的提取方法獲得)作為化妝品組合物中的抗老化活性劑進行配制，特別用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或延長細胞或組織的壽命。實施例3 用于面部的抗老化霜通過重現(xiàn)實施例1的方法，獲得在這一化妝品組合物中用作活性劑的、鼓槌石斛的花的提取物(提取物S-1)。將干提取物以2% w/w溶解于60/40v/v甘油/水的混合物中。這一提取物溶液被作為活性劑用于制備下述化妝品組合物(％，以相對于最終組合物的重量表示)A 相
鼓槌石斛提取物的2%溶液1
苯氧基乙醇0.5
黃原膠0.2
丙烯酸酯/C2Q.3Q烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物 0.2 EDTA 四鈉0.1
水qsqs 足以溶解A相的化合物的量B 相氫化聚異丁烯角鯊?fù)?br> 辛酸/癸酸甘油三酉
戊二醇
硬脂酸甘油酯 PEG-100硬脂酸酯
蜂蠟
碳酸二辛酯鯨蠟醇硬脂醇二甲硅油C 相氫氧化鈉0.04/Kqs 100qs 100 足以將最終組合物補至100%的量將A相的輔劑分散于水中，然后加熱到80°C，隨后將包括鼓槌石斛提取物的水-乙二醇溶液在內(nèi)的所有其它化合物溶解。將B相的化合物加熱到85°C形成均相。在B相中通過ktral混合器將A相乳化。最后，通過0.04% w/w的氫氧化鈉溶液(C相)將由此獲得的水包油乳液中和，然后冷卻。所獲得的組合物為用于施用到整個面部或部分面部上的抗老化霜。
433332.,51.,51.,511權(quán)利要求
1.一種化妝品組合物，所述組合物包含鼓槌石斛蘭的花的至少一種提取物作為活性劑以及至少一種化妝品上可接受的輔劑
2.如權(quán)利要求1所述的化妝品組合物，其特征在于，所述提取物抑制線粒體蛋白Smac/ DIABLO的表達和/或活性。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化妝品組合物，其特征在于，所述提取物通過極性溶劑或極性溶劑混合物獲得，所述極性溶劑優(yōu)選選自冰；c「c4醇，優(yōu)選乙醇；c2-c6 二醇，優(yōu)選選自乙二醇、丁二醇和丙二醇；或它們的任意混合物。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項所述的化妝品組合物，其特征在于，所述提取物通過包含至少50% ν/ν的乙醇直至100% ν/ν的乙醇的溶劑獲得；如果必要，余量由其它極性溶劑、 特別是水組成。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項所述的化妝品組合物，其特征在于，相對于所述組合物的總重量，所述化妝品組合物包含0. OOOlwt % -Iwt %的干提取物，優(yōu)選包含 0. 00 Iwt % -0. 0 Iwt % 的干提取物。
6.如權(quán)利要求1-5中任一項所述的化妝品組合物，其特征在于，所述化妝品組合物包含鼓槌石斛蘭的花的提取物與其它化妝品上可接受的活性劑的組合，所述化妝品上可接受的活性劑為經(jīng)純化的物質(zhì)和/或提取物、特別是植物提取物的形式。
7.如權(quán)利要求1-6中任一項所述的化妝品組合物，其特征在于，所述化妝品組合物包含鼓槌石斛蘭的其它部分的至少一種提取物；或其它蘭花的至少一種提取物；或由這些提取物純化得到的物質(zhì)。
8.如權(quán)利要求1-7中任一項所述的化妝品組合物，其特征在于，所述化妝品組合物包含一種或多種刺激存活蛋白的表達和/或活性的其它活性劑，例如毛喉素；或包含這些活性劑的提取物，特別是毛喉鞘蕊花的提取物；或由選自普通念珠藻、甄叔迦樹、新綠藻、二形柵藻、姜黃、番紅花、奧氏西非蘇木、L印echinia caulescens、Limnophila conferta的植物種獲得的植物提取物；以及它們的任意混合物。
9 如權(quán)利要求1-7中任一項所述的化妝品組合物，其特征在于，所述可接受的化妝品輔劑選自色素；著色劑；聚合物；表面活性劑；流變劑；芳香劑；電解質(zhì)；PH調(diào)節(jié)劑；抗氧化劑；防腐劑；以及它們的混合物中的任一種。
10.鼓槌石斛蘭的花的至少一種提取物在化妝品組合物中作為活性劑的用途，所述活性劑用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命。
11.如權(quán)利要求10所述的用途，其特征在于，所述組合物本身用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命。
12.如權(quán)利要求10或11所述的用途，其特征在于，所述提取物或所述組合物如權(quán)利要求2-8中的任一項所定義。
13.一種化妝護理方法，所述方法特別用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命；所述方法包括將有效量的、權(quán)利要求 1-9中任一項所述的化妝品組合物施用到身體或面部皮膚的至少一個部位。
14.如權(quán)利要求13所述的化妝品護理方法，其特征在于，將所述化妝品組合物施用至顯示出下述跡象的身體或面部的皮膚區(qū)域可視的老化跡象，例如存在皺紋或細小皺紋，或皮膚膚色失去光澤；其它跡象，例如皮膚彈性消失和/或柔性消失、皮膚厚度減小、和/或皮膚干燥度或粗糙度增加。
15.有效量的、鼓槌石斛蘭的花的至少一種提取物在制備用于預(yù)防或延緩皮膚內(nèi)在和 /或外在老化跡象的出現(xiàn)、或減慢皮膚老化跡象的影響的組合物方面的用途，特別是通過局部施用到個體皮膚的至少一個顯示出下述跡象的區(qū)域可視的老化跡象，例如存在皺紋或細小皺紋、或皮膚膚色失去光澤；或其它跡象，例如皮膚的彈性消失和/或柔性消失、皮膚厚度減小、和/或皮膚干燥度或粗糙度增加。
16.如權(quán)利要求15所述的用途，其中，所述個體超過35歲。
17.蘭花的花的提取物、特別是鼓槌石斛種的蘭花的花的提取物，所述提取物抑制線粒體蛋白Smac/DIABLO的表達和/或活性。
18.如權(quán)利要求17所述的蘭花的花的提取物，其特征在于，所述提取物通過極性溶劑或極性溶劑混合物獲得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種化妝品組合物，該組合物包含來自鼓槌石斛蘭的至少一種提取物作為活性劑以及至少一種化妝品上可接受的輔劑。本發(fā)明涉及來自鼓槌石斛蘭的提取物在化妝品組合物中作為活性劑的用途，該活性劑用于預(yù)防或延緩皮膚老化跡象的出現(xiàn)、放慢或減弱皮膚老化跡象的影響、或是延長細胞或組織的壽命。本發(fā)明特別涉及抑制線粒體蛋白Smac/DIABLO的活性和/或表達的蘭花提取物。
文檔編號A61K8/97GK102397184SQ20111027095
公開日2012年4月4日 申請日期2011年9月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月14日
發(fā)明者帕特里斯·安德烈, 維爾日尼·佩謝, 維爾日尼·勒普郎夸 申請人:Lvmh研究公司