專利名稱：新型二十二碳六烯酸(dha)脂肪乳制劑配方和制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，涉及一種脂肪乳制劑及其制備方法，具體涉及一種新型DHA 脂肪乳制劑和制備方法。
背景技術(shù)：
DHA, 二十二碳六烯酸，俗稱腦黃金，是一種對人體非常重要的多不飽和脂肪酸，屬于Omega-3不飽和脂肪酸家族中的重要成員。DHA為大腦必要的成份，約占人腦脂肪的10%，對腦神經(jīng)傳導(dǎo)和突觸的生長發(fā)育極為有利。認(rèn)知能力下降與DHA的不足相關(guān)(1)。嚴(yán)重抑郁癥患者的大腦皮質(zhì)幾乎沒有 DHA (2)。DHA能阻止膽固醇在血管壁上的沉積，從而預(yù)防或減輕動脈粥樣硬化和冠心病等發(fā)生。對踏入青春期的青少年來說，DHA可協(xié)助增進(jìn)智力、加強(qiáng)記憶和提高學(xué)習(xí)能力。最新研究表明DHA顯著改善老年人智力減退，增強(qiáng)記憶力。DHA對大腸和前列腺腫瘤有效(3，4， 5)。目前，市場上銷售的DHA均為口服軟膠囊制劑。我們經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有制劑存在穩(wěn)定性差，保質(zhì)期短，有效成分含量低，吸收差，生物利用度低等問題。另外，由于DHA在消化道中容易受到破壞，所以我們?yōu)榱私鉀Q上述問題，研究開發(fā)出了一種新型DHA脂肪乳制劑。本乳劑為靜脈注射，從而解決了 DHA在消化道中的不穩(wěn)定性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種穩(wěn)定性好，保質(zhì)期長，見效快的DHA脂肪乳制劑。本發(fā)明所述的制劑主要由DHA，油溶性稀釋劑，乳化劑，抗氧化劑，等滲調(diào)節(jié)劑，離子絡(luò)合劑和注射用水組成。本發(fā)明所述的制劑，其有效組分配方中最重要的指標(biāo)是控制精制植物油的用量和 DHA的用量之和占制劑比例為0. 1-50%以上(重量比)。本發(fā)明所述的DHA脂肪乳制劑，主要由以下單位為重量百分比的成分加工制成

DHA0.1-50%
油溶性稀釋劑0. 1-50%
乳化劑0. 1-10%
抗氧化劑0-1%
等滲調(diào)節(jié)劑0. 1-20%
離子絡(luò)合劑0-0. 2%其余為注射用水。優(yōu)選的，本發(fā)明所述的DHA脂肪乳制劑，主要由以下成分加工制成
DHA1--7%油溶性稀釋劑5--33%乳化劑1.25-10%抗氧化劑0.3-1%等滲調(diào)節(jié)劑2.2-15%離子絡(luò)合劑0--0. 2%其余為注射用水。優(yōu)選的，本發(fā)明所述的DHA脂肪乳制劑，主要由以下成分加工制成
DHA1%
油溶性稀釋劑25%
乳化劑1. 25%
抗氧化劑0. 3%
等滲調(diào)節(jié)劑2. 2%其余為注射用水。本發(fā)明所述的脂肪乳制劑還包括適量的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑為油酸或者油酸鈉。本發(fā)明所述的脂肪乳制劑中所述DHA為二十二碳六烯酸。所述油溶性稀釋劑為植物油；優(yōu)選為精制大豆油、精制玉米油、精制葵花子油、 精制花生油、精制芝麻油、精制菜子油或者其它任何天然、人工或者半人工制備的脂肪酸甘油脂或者其它油脂中的任一種或者幾種的混合物。所述乳化劑為磷脂，聚乙二醇衍生物中的一種或兩種；其中，所述磷脂選自蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、鞘磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂或人工合成卵磷脂；其中，所述聚乙二醇衍生物選自聚乙二醇磷脂衍生物、聚乙二醇膽固醇衍生物、聚乙二醇脂肪酸衍生物、聚乙二醇脂肪醇衍生物、聚乙二醇脂肪胺衍生物、聚乙二醇或其他脂溶性高分子的衍生物；所述抗氧化劑為維生素E。所述等滲調(diào)節(jié)劑為甘油或者糖化合物；糖化合物選自乳糖、棉子糖或者木糖醇中的一種或者幾種混合。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供脂肪乳制劑的制備方法。本發(fā)明脂肪乳制劑的制備方法，包括以下步驟(1)取處方量的DHA，油溶性稀釋劑，抗氧化劑和乳化劑加熱攪拌，使之完全溶解，(2)另取適量的注射用水，加入等滲調(diào)節(jié)劑，(3)將步驟1得到的DHA溶液緩慢的加入到步驟2的溶液中，攪拌，即得初乳溶液，(4)初乳溶液經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封，滅菌，即可?br> 本發(fā)明脂肪乳制劑的整個(gè)制備過程是在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行。優(yōu)選的，本發(fā)明脂肪乳制劑的制備方法，包括以下步驟(1)取DHA、植物油、油酸、維生素E、和磷脂加熱攪拌10-20min使之完全溶解；(2)另取適量的注射用水，加入甘油，得到甘油水溶液；(3)在氮?dú)獗Ｗo(hù)的條件下，將磷脂DHA植物油溶液緩慢的加入用剪切機(jī)高速攪拌的甘油水溶液中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)的條件下繼續(xù)攪拌30min，即得初乳溶液；(4)初乳溶液經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，壓力為lOOMPa，至粒徑范圍在180_300nm， 調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. O，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C滅菌30min,即可。進(jìn)一步優(yōu)選的，本發(fā)明的制備方法，包括以下步驟整個(gè)生產(chǎn)過程在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行。取處方量DHA、植物油、油酸、維生素E、和磷脂加熱攪拌10-20min左右使之完全溶解。另取適量的注射用水，加入甘油。在氮?dú)獗Ｗo(hù)的條件下，將磷脂DHA植物油溶液緩慢的加入用剪切機(jī)高速攪拌(3000r/min)的甘油水溶液中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)的條件下繼續(xù)攪拌 30min,即得初乳溶液。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，壓力為lOOMPa，至粒徑范圍在180-300nm， 調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C滅菌30min，最終產(chǎn)品應(yīng)該是均勻的乳狀溶液，沒有沉淀、分層和飄油現(xiàn)象。燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。本發(fā)明脂肪乳制劑具有如下有益效果，其中1)、利用磷脂作乳化劑，使DHA能有效和充分地溶解在油相并包裹在脂肪乳乳滴中。2、、提高乳化劑磷脂比例，在保持DHA與植物油的比例不變的前提下，提高磷脂的用量，可以提高DHA脂肪乳中的穩(wěn)定性。3)、在乳化劑配方中加入聚乙二醇磷脂衍生物或者其他兩性高分子聚合物。聚乙二醇磷脂衍生物既可以增強(qiáng)乳化效果，保證DHA能有效的包裹在脂肪乳油滴中。4)、采用二糖或者多糖作為制劑的等滲調(diào)節(jié)劑，提高DHA在脂肪乳中的包裹效率。本發(fā)明所述的新型DHA脂肪乳注射制劑用于靜脈注射，解決了 DHA在消化道中的不穩(wěn)定性，有非常重要的臨床意義。另外，本發(fā)明的脂肪乳注射制劑不僅有效的解決了現(xiàn)有 DHA制劑中存在的問題，還具有以下優(yōu)良表現(xiàn)良好的穩(wěn)定性，延長了保質(zhì)期，提高了生物利用度，增強(qiáng)了治療效果，安全無副作用。
具體實(shí)施例方式通過以下具體實(shí)施例對本發(fā)明的脂肪乳制劑，及其治療效果作進(jìn)一步的說明。(一)、稀釋油與DHA的比例范圍考察本發(fā)明對所列DHA與稀釋油的用量比例范圍進(jìn)行了驗(yàn)證考察。在本發(fā)明的工藝和條件下、保持其它輔料的比例不變，本發(fā)明權(quán)利要求所列DHA與稀釋油的用量比例范圍在 0. 03-0. 07 (重量比)。重量含量范圍內(nèi)的任一用量都保證可以制成穩(wěn)定的脂肪乳藥用植物油注射制劑。實(shí)施例1 :DHA與稀釋油的比例(DHA 大豆油的重量比為1 1)處方DHA
大豆油(注射用) 卵磷脂(注射用) 維生素E 甘油
注射用水
加至IOOOml
70. Og 70. Og 12. 5g 3. Og 22. Og取DHA 70.0g、維生素E3.0g、精制大豆油70.0g，加入12.5g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水700ml，加入甘油22. 0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA 磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓力為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25 °C以下貯藏。實(shí)施例2 =DHA與稀釋油的比例(DHA 大豆油的重量比為0. 03)處方取DHA10. 0g、維生素E3. 0g、精制大豆油330. Og,加入12. 5g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水700ml，加入甘油22. 0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA 磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓力為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。( 二)、稀釋油用量范圍考察在保證DHA與稀釋油的比例不發(fā)生變化的前提下，本發(fā)明對所列精制稀釋劑油的用量范圍進(jìn)行了驗(yàn)證。在本發(fā)明的基本工藝條件下所列精制稀釋劑油(以大豆油為例)的用量在5-33%重量含量范圍內(nèi)的任一用量都保證可以制成穩(wěn)定的DHA脂肪乳制劑。仍以 1% DHA為例實(shí)施例3 最低大豆油含量的DHA脂肪乳制劑(稀釋油含量5%，重量含量)處方
DHA
大豆油(注射用) 卵磷脂(注射用) 維生素E 甘油
注射用水
加至1000ml
10. Og 330. Og 12. 5g 3. Og 22. OgDHA
大豆油(注射用) 卵磷脂(注射用) 維生素E 甘油
注射用水
10. Og 50. Og 12. 5g 3. Og 22. Og 加至IOOOml 取DHA10. 0g、維生素E3. 0g、精制大豆油300. Og,加入12. 5g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水600ml，加入甘油22. Ogo在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓力為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。
實(shí)施例4 最高大豆油含量的DHA脂肪乳制劑(稀釋油含量33 %，重量含量) 處方
DHA
大豆油(注射用) 卵磷脂(注射用) 維生素E 甘油
注射用水
10. Og 330. Og 12. 5g 3. Og 22. Og 加至IOOOml 取DHA10. 0g、維生素E3. 0g、精制大豆油200. Og,加入12. 5g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. 0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA 磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓力為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)猓芊狻?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。
(三)、使用不同稀釋油的適用性考察
實(shí)施例5 大豆油DHA脂肪乳制劑(25%，重量含量)
處方
DHA
大豆油(注射用) 卵磷脂(注射用) 維生素E 甘油
注射用水
10. Og 250. Og 12. 5g 3. Og 22. Og 加至1000ml 取DHA10. 0g、維生素E3. 0g、精制大豆油250. Og,加入12. 5g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. 0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA 磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓力為lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。實(shí)施例6 棕桐油新型DHA脂肪乳制劑(25%，重量含量)處方
DHA10. Og
棕桐油250. Og
卵磷脂(注射用)12. 5g
維生素E3. Og
甘油22. Og
注射用水加至IOOOml取DHA10. 0g、維生素E3. 0g、精制棕桐油250. Og,加入12. 5g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. 0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA 磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓カ為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。(四)、使用不同磷脂的適用性考察實(shí)施例7 采用大豆卵磷脂的DHA脂肪乳制劑(25%，重量含量)處方
DHA10. Og
大豆油(注射用)200. Og
大豆卵磷脂(注射用)12. 5g
維生素E3. Og
甘油22. Og
注射用水加至1000ml取DHA10. 0g、維生素E3. 0g、精制大豆油200. Og,加入12. 5g大豆卵磷脂，加熱攪 拌約10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. 0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將 DHA磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì) 壓カ為lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)猓芊狻?115°C滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。實(shí)施例8 采用人工合成卵磷脂的DHA脂肪乳制劑(25%，重量含量)處方DHA
大豆油
人工合成卵磷脂(DPPC) 維生素E 甘油
注射用水
10. Og 200. Og 12. 5g 3. Og 22. Og 加至IOOOml 取DHA 10.0g、維生素E3.0g、精制大豆油200.0g，加入12.5g人工合成卵磷脂 (DPPC)，加熱攪拌約10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. Ogo在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì) 7-8次，均質(zhì)壓力為lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)猓芊狻?15°C滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。

實(shí)施例9 采用混合磷脂的DHA脂肪乳制劑(25%，重量含量) 處方
DHA10. Og大豆油200. Og鞘磷脂6. Og卵磷脂6. 5g維生素E3. Og甘油22. Og注射用水加至1000ml取DHA 10. 0g、維生素E3. 0g、精制大豆油200. 0g，加入6g鞘磷脂和6. 5g卵磷脂，， 加熱攪拌約10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. Ogo在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次， 均質(zhì)壓力為lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)猓?密封。115°C滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。實(shí)施例10 異磷脂使用量增加50% DHA脂肪乳制劑處方
DHA
大豆油
卵磷脂(注射用) 維生素E 甘油
注射用水
10. Og 250. Og
18. 75g 3. Og 22. Og 加至1000ml 取DHA 10. 0g、維生素E3. 0g、精制棕櫚油250. 0g，加入18. 75g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. 0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓カ為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。實(shí)施例11 異磷脂使用量増加100% DHA脂肪乳制劑處方
DHA10. Og
大豆油250. Og
卵磷脂(注射用)25g
維生素E3. Og
甘油22. Og
注射用水加至IOOOml取DHA 10.0g、維生素E3.0g、精制棕櫚油250. 0g，加入25g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. 0g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA 磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓カ為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。實(shí)施例12 加入1 %聚乙ニ醇衍生物(以重量記)的DHA脂肪乳制劑處方
DHA10. Og
大豆油(注射用)200. Og
卵磷脂12. 5g
聚乙ニ醇衍生物10 g
維生素E3. Og
甘油22. Og
注射用水加至1000ml取DHA 10. 0g、維生素E3. 0g、精制大豆油200. 0g，加入12. 5g卵磷脂和IOg(聚乙 ニ醇衍生物)DSPE-PEG，加熱攪拌約10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. 0g。 在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高 壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓カ為lOOMPa，比常規(guī)的脂肪乳制劑，其粒徑有所減小，至粒徑 范圍在160nm-280nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C滅菌30min，燈檢 合格后，包裝。在25°C以下貯藏。實(shí)施例13 加入15%聚乙ニ醇衍生物(以重量記)的DHA脂肪乳制劑處方DHA
大豆油(注射用) 卵磷脂
聚乙二醇衍生物維生素E 甘油
注射用水
10. Og 200. Og 12. 5g 150 g 3. Og 22. Og 加至IOOOml 取DHA 10. 0g、維生素E3. 0g、精制大豆油200. 0g，加入12.如卵磷脂和150g(聚乙二醇衍生物)DSPE-PEG，加熱攪拌約10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入甘油22. Ogo 在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA磷脂油溶液加入甘油水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓力為lOOMPa，比常規(guī)的脂肪乳制劑，其粒徑有明顯減小，至粒徑范圍在130nm-250nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。實(shí)施例14 采用乳糖為代表的二糖為等滲劑的DHA脂肪乳制劑
處方
DHA10. Og大豆油200. Og卵磷脂12. 5g維生素E3. Og乳糖IOOg
注射用水
加至1000ml 取DHA 10.0g、維生素E3.0g、精制大豆油200.0g，加入12.5g卵磷脂，加熱攪拌約 10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入乳糖100g。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA磷脂油溶液加入乳糖水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓力為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝，在25 °C以下貯藏.
實(shí)施例15 采用棉子糖為代表的寡糖為等滲劑的DHA脂肪乳制劑處方
DHA10. Og大豆油200. Og卵磷脂12. 5g維生素E3. Og棉子糖150g注射用水加至1000ml 取DHA 10.0g、維生素E3.0g、精制大豆油200.0g，加入12.5g卵磷脂，加熱攪拌約10-20min混勻。另取注射用水800ml，加入棉子糖150g (棉子糖命名為0-α -D-半乳糖吡喃基-(1 — 6) - α -D-葡糖吡喃基-β -D-果糖呋喃苷)。在氮?dú)獗Ｗo(hù)和攪拌條件下，將DHA磷脂油溶液加入棉子糖水溶液中，調(diào)節(jié)總量至1000ml。經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，均質(zhì)壓力為 lOOMPa，至粒徑范圍在180nm-300nm，調(diào)節(jié)pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封?15°C 滅菌30min，燈檢合格后，包裝。在25°C以下貯藏。實(shí)施例16、本發(fā)明DHA脂肪乳制劑對動物學(xué)習(xí)記憶的影響1.材料和方法1.1動物選擇和分組雌性SD小鼠30只，體重18 22g(由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供)。實(shí)驗(yàn)前小鼠用Morris水迷宮測試儀(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所，北京)行3次水迷宮測試，剔除有明顯運(yùn)動障礙的小鼠。小鼠隨機(jī)分為3組，對照組(C，n = 10)每天按體重尾靜脈注射生理鹽水(賂)；空白脂肪乳(T1A = 10)組每天按體重尾靜脈注射空白脂肪乳；DHA脂肪乳組(Τ2，η = 10)每天按體重尾靜脈注射實(shí)施例5樣品DHA含量100mg/kg，連續(xù)15d。1.2 儀器Morris水迷宮迷宮由圓形水池和自動錄相和記錄系統(tǒng)兩部分組成，水池直徑 60cm,水池深30cm，水深25cm，水溫^±1°C，水中加有墨汁，池壁上四個(gè)等距離點(diǎn)將水池劃分為四個(gè)象限，任選一象限在中央放置平臺，平臺為黑色，水池周圍四壁上貼上一些參照物，在實(shí)驗(yàn)過程中一直保持不變。錄像和記錄系統(tǒng)由錄像機(jī)、攝像機(jī)、電視機(jī)、電腦及數(shù)據(jù)處理軟件構(gòu)成。明暗回避條件反射箱實(shí)驗(yàn)裝置由底部鋪有銅柵的暗室、與暗室相連的室外平臺、 變壓器及計(jì)時(shí)器組成。暗室有一洞與室外平臺(5X8cm)相通，暗室上方有一只40W白熾光源，將暗室與平臺分為明暗兩區(qū)，暗室為13cmX5cmX Ilcm，暗室底部鋪以銅柵，間距0. 5cm 與電源相連，電壓強(qiáng)度由變壓器控制、暗室與計(jì)時(shí)器相連，自動記錄浸入暗室的潛伏期及錯誤次數(shù)。1.3檢測指標(biāo)Morris水迷宮行為測試通過Morris水迷宮測試，測定小鼠入水至找到平臺的時(shí)間(即潛伏期)和總游泳行程(即游泳距離)，于停藥后Id進(jìn)行測試，連續(xù)3d，每天各測試 4次，取平均值。避暗法測試把動物先放入暗室適應(yīng):3min。測試時(shí)將小鼠背向洞口放在平臺后立即啟動計(jì)時(shí)器，并接通電源，小鼠通過洞口進(jìn)入暗室即受到電擊，計(jì)時(shí)自動停止，取出小鼠，小鼠從放入平臺至進(jìn)入暗室遇36V電壓電擊時(shí)間即為潛伏期，24h后重作試驗(yàn)，記錄潛伏期變化及5min的錯誤次數(shù)(以小鼠兩個(gè)前肢每接觸銅棒為一次錯誤)，以此作為學(xué)習(xí)和記憶的指標(biāo)。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以表示，組間比較采用單因素方差分析，P < 0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.結(jié)果2. 1小鼠水迷宮行為測試結(jié)果3組小鼠第3天潛伏期及游泳距離均較第1天縮短(P < 0. 05) J1組3天潛伏期及游泳距離較C組沒有顯著差別(P > 0. 05) ;Τ2組潛伏期及游泳距離較C組顯著減少(P < 0. 05)，較T1組也顯著減少(P < 0. 05)(見表1)。表1各組小鼠水迷宮測試潛伏期和游泳距離的比較(i±^，n=10)
權(quán)利要求
1. 一種DHA脂肪乳制劑，主要由以下單位為重量百分比的成分加工制成DHA0.1--50%油溶性稀釋劑0.1--50%乳化劑0.1--10%抗氧化劑0--1%等滲調(diào)節(jié)劑0.1--20%離子絡(luò)合劑0--0.2%其余為注射用水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于，主要由以下單位為重量百分比的成分加工制成DHA1--7%油溶性稀釋劑5--33%乳化劑1.25-10%抗氧化劑0.3-1%等滲調(diào)節(jié)劑2.2-15%離子絡(luò)合劑0--0. 2%其余為注射用水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于，主要由以下單位為重量百分比的成分加工制成DHA1%油溶性稀釋劑25%乳化劑1. 25%抗氧化劑0. 3%等滲調(diào)節(jié)劑2. 2%其余為注射用水。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的任意一種制劑，其特征在于，還包括適量的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑為油酸或者油酸鈉。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的任意一種制劑，其特征在于，所述DHA為二十二碳六烯酸； 所述油溶性稀釋劑為植物油；所述乳化劑為磷脂，聚乙二醇衍生物中的一種或兩種；所述抗氧化劑為維生素E ；所述等滲調(diào)節(jié)劑為甘油或者糖化合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的任意一種制劑，其特征在于，所述DHA為二十二碳六烯酸； 所述油溶性稀釋劑選自精制大豆油、精制玉米油、精制葵花子油、精制花生油、精制芝麻油、精制菜子油或者其它任何天然、人工或者半人工制備的脂肪酸甘油脂或者其它油脂中的任一種或者幾種的混合物；所述磷脂選自蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、鞘磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂或人工合成卵磷脂；所述聚乙二醇衍生物選自聚乙二醇磷脂衍生物、聚乙二醇膽固醇衍生物、聚乙二醇脂肪酸衍生物、聚乙二醇脂肪醇衍生物、聚乙二醇脂肪胺衍生物、聚乙二醇或其他脂溶性高分子的衍生物；所述抗氧化劑為維生素E ；所述等滲調(diào)節(jié)劑選自甘油、乳糖、棉子糖或者木糖醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的任意一種制劑，其特征在于，所述磷脂在制劑中所占的重量比為0. 1_10%，所述聚乙二醇衍生物在制劑中所占的重量比為0-1. 5%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的任意一種制劑的制備方法，包括以下步驟(1)取DHA，油溶性稀釋劑，穩(wěn)定劑，抗氧化劑和乳化劑加熱攪拌，使之完全溶解，(2)另取適量的注射用水，加入等滲調(diào)節(jié)劑，(3)將步驟1得到的DHA溶液緩慢的加入到步驟2的溶液中，攪拌，即得初乳溶液，(4)在經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)，調(diào)節(jié)pH，過濾，分裝，通入氮?dú)?，密封，滅菌，即可?br> 9.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的任意一種制劑的制備方法，包括以下步驟(1)取DHA、植物油、油酸、維生素E、和磷脂加熱攪拌10-20min使之完全溶解；(2)另取適量的注射用水，加入甘油，得到甘油水溶液；(3)在氮?dú)獗Ｗo(hù)的條件下，將磷脂DHA植物油溶液緩慢的加入用剪切機(jī)高速攪拌的甘油水溶液中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)的條件下繼續(xù)攪拌30min，即得初乳溶液；(4)初乳溶液經(jīng)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)7-8次，壓力為lOOMPa，至粒徑范圍在180-300nm，調(diào)節(jié) pH 7. 0-8. 0，過濾，分裝，通入氮?dú)猓芊猓?15°C滅菌30min,即可。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，所述制備過程在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種新型DHA脂肪乳制劑的配方和制備方法。該新制劑包含的主要組分有DHA、乳化劑、作為油溶性稀釋劑的精制大豆油或其它精制油、作為輔助乳化作用的油酸或者油酸鹽、作為抗氧化作用的維生素E或者維生素E衍生物、離子絡(luò)合劑、作為等滲調(diào)節(jié)劑的甘油或者小分子糖。通過采取多種方法的單獨(dú)使用，或者聯(lián)合使用來制備DHA脂肪乳制劑。
文檔編號A61P25/00GK102512367SQ20111044795
公開日2012年6月27日 申請日期2011年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月26日
發(fā)明者余維平, 王汝濤, 陳濤 申請人:西安力邦制藥有限公司