專(zhuān)利名稱(chēng)：用于治療子宮感染的酪蛋白肽的制作方法
用于治療子宮感染的酪蛋白肽本發(fā)明的領(lǐng)域本發(fā)明涉及酪蛋白肽并且涉及其治療用途。本發(fā)明的背景根據(jù)它們的電泳遷移率，酪蛋白包括三個(gè)部分，α、β和Y。酪蛋白水解物是酪蛋白的水解形式，其中包括酪蛋白衍生的活性多肽。已經(jīng)確立的是，酪蛋白水解物在針對(duì)微生物和病毒性感染的免疫應(yīng)答中起作用。例如，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)3，764，670描述了酪蛋白片段(通過(guò)蛋白水解活性獲得)的抗細(xì)菌活性并且披露了具有針對(duì)微生物的抗微生物特性的蛋白水解酪蛋白消化物。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，506, 209,5, 538，952 和 5，707, 968(都授予穆可伊(Muker ji )等人)、以及授予安德森(Andersson)等人的5,968,901描述了呈液體腸內(nèi)配方的僅僅人β -酪蛋白、重組人酪蛋白、以及兩者的水解物的給藥，用于治療在嬰兒中的呼吸道合胞病毒感染、中耳炎、流感嗜血桿菌(H. influenza)和其他感染。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，330，975描述了用于中和細(xì)菌內(nèi)毒素(例如霍亂毒素)的結(jié)合唾液酸的K-酪蛋白和K-酪蛋白肽的用途。美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2009/0305947描述了用于管理家畜和農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物生殖周期的酪蛋白肽以及尤其是酪蛋白水解物的用途。美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2009/0069218描述了酪蛋白肽以及尤其是酪蛋白水解物作為用于縮短泌乳家畜動(dòng)物的干乳期的長(zhǎng)度、用于增加其產(chǎn)后產(chǎn)乳量和乳汁衛(wèi)生、以及用于改善家畜福利的一種方法的用途。·本發(fā)明概述根據(jù)其第一個(gè)方面，本披露提供了一種用于治療雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染的酪蛋白肽。這樣的治療尤其促進(jìn)了哺乳動(dòng)物的良好的產(chǎn)后管理。根據(jù)其第二個(gè)方面，本披露還提供了一種治療子宮感染的方法，該方法包括對(duì)需要治療子宮感染的雌性哺乳動(dòng)物給予一定量的至少一種酪蛋白肽，該量對(duì)于治療哺乳動(dòng)物中的子宮感染是有效的。根據(jù)其第三個(gè)方面，本披露還提供了至少一種酪蛋白肽用于制備用于治療需要治療子宮感染的雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染的一種藥物組合物的用途。另外，根據(jù)一個(gè)另外的方面，本披露還提供了一種用于治療子宮感染的藥物組合物，該組合物包含作為一種活性組分的一定量的至少一種酪蛋白肽，該量對(duì)于治療雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染是有效的。最后，根據(jù)一個(gè)另外的方面，本披露提供了一個(gè)藥盒，該藥盒包括至少一種酪蛋白肽以及使用該酪蛋白肽用于治療雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染的說(shuō)明書(shū)。本發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明是基于發(fā)現(xiàn)酪蛋白肽，并且尤其是酪蛋白肽水解物可以用于子宮感染的治療。特別發(fā)現(xiàn)的是，對(duì)產(chǎn)后奶牛給予酪蛋白水解物在臨床型子宮炎的治療中是有效的。哺乳動(dòng)物(比如?？苿?dòng)物)的子宮在產(chǎn)犢之前是無(wú)菌的。在懷孕期間，子宮頸提供了一個(gè)針對(duì)病原菌子宮內(nèi)入侵的屏障。在產(chǎn)犢時(shí)，范圍廣泛的細(xì)菌通過(guò)此時(shí)開(kāi)放的子宮頸進(jìn)入子宮，引起(offset)以子宮感染、炎癥、以及最終子宮清理而告終的級(jí)聯(lián)事件。然而，病原菌在一些奶牛中存留，通過(guò)防止生理性子宮復(fù)舊而引起子宮疾病，導(dǎo)致低生育力。由于繁殖性能對(duì)于可行的乳品生產(chǎn)以及哺乳動(dòng)物的繁殖是至關(guān)重要的，產(chǎn)后期的子宮衛(wèi)生需要廣泛的獸醫(yī)關(guān)注。分娩受孕間隔以及由此懷孕率是來(lái)自家 畜和農(nóng)場(chǎng)管理的經(jīng)濟(jì)觀(guān)點(diǎn)的關(guān)鍵因素。維持一個(gè)大約12至14個(gè)月的分娩-受孕間隔的最適宜周期的能力取決于許多因素，尤其是動(dòng)物的子宮的臨床狀態(tài)，所述臨床狀態(tài)應(yīng)當(dāng)完全沒(méi)有任何產(chǎn)后相關(guān)性感染。子宮炎、子宮內(nèi)膜炎和子宮積膿是常見(jiàn)的子宮炎性疾病，發(fā)生在家畜和農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物的產(chǎn)后期期間，主要是產(chǎn)后期早期，并且主要與生殖道(即，子宮)的污染有關(guān)。由于治療費(fèi)用、回奶、繁殖性能降低以及過(guò)早淘汰(premature culling)，子宮感染、以及延遲的子宮與宮頸復(fù)舊會(huì)引起經(jīng)濟(jì)損失。已經(jīng)報(bào)道了各種各樣的子宮內(nèi)膜炎的療法，包括以給予抗生素為主，通過(guò)前列腺素F2a (PGF2 a )或雌二醇的全身或局部給藥。本披露提供了一種用于子宮感染的替代治療。因此根據(jù)第一方面，本發(fā)明提供了一種用于治療雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染的酪蛋白肽。正如所理解的，雖然在下面的詳細(xì)說(shuō)明中關(guān)于用于治療雌性哺乳動(dòng)物(如一種授乳動(dòng)物)中的酪蛋白肽描述了本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)理解的是在本披露之內(nèi)還包括，對(duì)雌性哺乳動(dòng)物給予酪蛋白肽以及包含作為一種活性組分的一定量的至少一種酪蛋白肽的藥物組合物的治療方法(該量對(duì)于治療子宮感染是有效的)、以及一種酪蛋白肽用于制備治療所述動(dòng)物中的子宮感染的一種藥物組合物的用途。酪蛋白是非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的乳汁中的主要蛋白，也發(fā)現(xiàn)于人類(lèi)哺乳動(dòng)物的乳汁中，已知包括亞型a SI、a S2、β和K。酪蛋白是根據(jù)各亞型a SI、a S2、β和κ的氨基酸序列而定義的(Farrell, Jr. H. Μ. , Jimenez-Flores R. , BleckG. Τ. , Brown Ε. Μ. , ButlerJ. Ε. , Creamer L. K. , Hicks C. L. , Hollar C. Μ. , Ng-Kwai-Hang K. F. , Swaisgood H. Ε.牛奶中的蛋白質(zhì)的命名法_第六次修訂(Nomenclature of the Proteins of CowsiMilk-SixthRevision.)，《乳品科學(xué)期刊》(J. Dairy Sci. )，87:1641-1674(2004))。適合在本發(fā)明中使用的酪蛋白可以獲自多種來(lái)源中的任何一種，例如但不限于，包括人類(lèi)和非人類(lèi)動(dòng)物的任何哺乳動(dòng)物來(lái)源的奶的α SI、a S2和β -酪蛋白。在本披露的背景下，當(dāng)提及酪蛋白時(shí)，應(yīng)當(dāng)理解為也包括酸性酪蛋白、酪蛋白鹽、含磷酪蛋白以及酶凝酪蛋白。此外，應(yīng)當(dāng)理解包含植物酪蛋白類(lèi)似物。[例如，如描述在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)3，930, 058中；Kumar, Surinder和Ramachandran, Kolar S.修飾的植物蛋白模擬酪蛋白]。術(shù)語(yǔ)“酪蛋白肽”在其廣泛的意義上是指獲自或相應(yīng)于酪蛋白的一個(gè)或更多個(gè)部分的肽片段或擬肽物(peptido-mimetic product)。該肽可以包括但不限于一種酪蛋白分解產(chǎn)物(當(dāng)酪蛋白被酶或重裂解為肽片段時(shí)出現(xiàn)該分解產(chǎn)物(在該領(lǐng)域中也被已知為術(shù)語(yǔ)“酪蛋白水解物”))、或可以是指一種合成產(chǎn)生的產(chǎn)物，其中該酪蛋白肽在治療子宮感染中展示出至少一種治療有益的效果。該酪蛋白肽可以是單個(gè)肽或獨(dú)立地天然存在的肽、半合成肽、合成肽、磷酸肽(pho sphor-p ep t i de )基因改造的酪蛋白肽、以及酪蛋白肽的擬肽物的不同肽的混合物。當(dāng)最佳地比對(duì)兩個(gè)序列時(shí)，修飾的、合成的、半合成的酪蛋白肽、或天然存在的酪蛋白肽的其他類(lèi)型的類(lèi)似物的至少75%，有時(shí)85%、90%、95%并且甚至99% (在序列上)與天然發(fā)生的酪蛋白肽一致。此外，根據(jù)本發(fā)明，任何使用的非天然存在的酪蛋白肽應(yīng)當(dāng)保留天然存在的酪蛋白的至少一部分生物活性。根據(jù)本發(fā)明的一種酪蛋白肽的特征為在大約100至10，000道爾頓之間(例如，在2至100個(gè)氨基酸之間)并且優(yōu)選地在大約100至7，000道爾頓之間的分子量。 在本披露的背景下，一種酪蛋白肽還包括一種酪蛋白水解物。一種酪蛋白水解物被理解為酪蛋白(蛋白質(zhì))的水解形式，其中包括那些精通本領(lǐng)域的人員已知的活性β -酪蛋白衍生的肽。典型地在酶水解之后獲得天然存在的酪蛋白肽,該酶可以是任何哺乳動(dòng)物肽酶,例如但不限于纖溶酶、胰酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶、胃蛋白酶、羧肽酶、組織蛋白酶、以及植物肽酶(例如但不限于木瓜蛋白酶，菠蘿蛋白酶)、以及微生物來(lái)源的酶。例如，一種天然存在的酪蛋白肽可以是對(duì)酪蛋白亞基β_酪蛋白、α Si-和as2-酪蛋白、K -酪蛋白的纖溶酶活性的結(jié)果。在一些實(shí)施方案中，通過(guò)用胰蛋白酶裂解酪蛋白而獲得一種酪蛋白水解物。該酪蛋白肽也可以是一個(gè)合成的或半合成的肽?？梢酝ㄟ^(guò)肽合成領(lǐng)域已知的任何方法獲得一種合成肽，包括固相肽合成(R. B. Merrifield (1963))。“固相肽合成· I. 一種四肽的合成”。fn、.I- Am. Chem. Soc. 85 (14) :<}0{> 美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)期刊(J. Am. Chem. Soc.)85(14):2149 - 2154).可以通過(guò)酪蛋白的化學(xué)水解而獲得一種半合成的酪蛋白肽，例如通過(guò)在強(qiáng)酸(酸-HVP)或強(qiáng)堿中延長(zhǎng)的沸騰或使用一種化學(xué)試劑如溴化氰(CNBr)。還可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的分子技術(shù)中的分子工程獲得酪蛋白肽，例如使用重組DNA。酪蛋白肽還可以包括一種天然存在的肽的化學(xué)修飾，例如在一個(gè)或多個(gè)氨基酸被缺失、置換或修飾的地方，例如通過(guò)一個(gè)側(cè)基的移除、一個(gè)側(cè)基的置換或一個(gè)化學(xué)基團(tuán)的引入?；瘜W(xué)修飾可以包括但不限于下列非排他性實(shí)例乙?；?、?；?、酰胺化、ADP-核糖基化、糖基化、GPI錨點(diǎn)形成(GPI anchor formation)、脂質(zhì)或脂質(zhì)衍生物的共價(jià)連接、甲基化、十四烷基化、聚乙二醇化、異戊烯化、磷酸化、泛素化、或任何相似的過(guò)程。當(dāng)提及一個(gè)氨基酸序列被另一個(gè)置換時(shí)，優(yōu)選該置換是保守置換。例如，酪蛋白序列中的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基被具有相似極性或電荷的另一個(gè)氨基酸置換。例如，非極性(疏水性)氨基酸包括丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和甲硫氨酸。極性中性氨基酸包括甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺.帶正電荷的(堿性的)氨基酸包括精氨酸、賴(lài)氨酸和組氨酸。帶負(fù)電荷的(酸性的)氨基酸包括天冬氨酸和谷氨酸。雖然如此，只要不顯著改變產(chǎn)生的酪蛋白肽類(lèi)似物的所希望的(酪蛋白樣)生物活性，也可以發(fā)生非保守置換。酪蛋白肽也可以是一種擬肽類(lèi)肽，如類(lèi)肽或半類(lèi)肽，它們是肽衍生物，具有例如修飾,例如但不限于環(huán)化、N末端修飾、C末端修飾、肽鍵修飾，包括但不限于CH2-NH、CH2-S, CH2-S-O, 0-C-NH、CH2-O, CH2-CH2, S_C_NH、CH-CH 或 CF-CH、主鏈修飾和殘基修飾(制備擬肽化合物的方法可以在定量藥物設(shè)計(jì)(Quantitative Drug Design)中找到，
C.A. RamsdenGd. , Chapter 17. 2, F. Choplin Pergamon 出版社(1992),猶如在此充分陳述一樣通過(guò)引用進(jìn)行結(jié)合)。根據(jù)本發(fā)明的酪蛋白肽可以包含“L”以及“D”形式的殘基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該酪蛋白肽是單一的肽或磷酸肽混合物，S卩，含有單一含磷基團(tuán)或是一種富含磷的肽。在一個(gè)實(shí)施方案中，該酪蛋白肽是富含任何磷酸絲氨酸、磷酸酪氨酸、磷酸蘇氨酸和/或磷酸組氨酸的酪蛋白肽(酪蛋白磷酸肽，CPP)和一價(jià)陽(yáng)離子磷酸酪蛋白，如磷酸酪蛋白鈉、鉀、鈣或銨鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，富含磷基團(tuán)的酪蛋白肽是一種酪蛋白水解物。在一個(gè)實(shí)施方案中，該酪蛋白肽包含一個(gè)由氨基酸序列Ser-Ser-Ser-Glu-Glu(序列ID NO: I)定義的基序，其中一個(gè)或更多的Ser殘基是任選地被磷酸化的。包含磷酸化基序的酪蛋白肽的一個(gè)非限制性基團(tuán)由SEQ ID NOs:2-6提供。以下提供了 SEQ ID NO: 2-6,它們?cè)诶业鞍锥嚯闹械膩?lái)源和定位(殘基數(shù)量)SEQ ID NO: 2-RELEELNVPGEIVES (p) LS (p) S (p) S (p) EESITR (在 β -酪蛋白中的1-25 位)SEQ ID N0:3-QMEAESIS(p)S(p)S(p)EEIVPDSVEQK(在αSl-酪蛋白中的59-79位)SEQ ID NO: 4-KNTMEHVS (p) S (p) S (p) EESIISNETYK (在 a S2-酪蛋白中的 1-21 位)SEQ ID NO:5-KVNELSKNIGS(p)ES(p)TEDQ(在 a SI-酪蛋白中的 36-52 位)SEQ ID NO:6-PTLNREQLS(p)TS(p)EENSKKTVD(在 a S2-酪蛋白中的 12-140 位)·雖然在SEQ ID NOs: 1-6中提出的肽序列的氨基酸殘基都是〃L〃異構(gòu)形式，〃D〃異構(gòu)形式中的殘基可以置換任何L氨基酸殘基，只要產(chǎn)生的肽類(lèi)似物保留相應(yīng)的“L”同分異構(gòu)體的至少部分生物活性。設(shè)計(jì)包含至少一個(gè)D氨基酸的酪蛋白肽一個(gè)原因是增加肽對(duì)蛋白質(zhì)降解的穩(wěn)定性。如上面指出，酪蛋白肽用于治療子宮感染。術(shù)語(yǔ)〃子宮感染"在此是用來(lái)表示一種由病原體大量進(jìn)入(influx)哺乳動(dòng)物的子宮以及因此的子宮壁炎癥引起的一種病理狀態(tài)。在一個(gè)實(shí)施方案中，子宮感染是一種病原體誘導(dǎo)的炎癥，也稱(chēng)為術(shù)語(yǔ)非無(wú)菌性炎癥(non-sterile inflammation)。子宮炎，‘產(chǎn)后型’或‘臨床型’；子宮內(nèi)膜炎，臨床型或亞臨床型；以及子宮積膿是常見(jiàn)的子宮炎癥性感染性疾病，主要發(fā)生在家畜和農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物的產(chǎn)后期期間(主要在產(chǎn)后期的早期)，并且主要與生殖道(即，子宮)的污染相關(guān)。子宮炎是一種涉及子宮所有層(子宮內(nèi)膜粘膜和粘膜下層、肌層、以及漿膜)的炎癥反應(yīng)。具有子宮炎(或子宮外膜炎)的動(dòng)物有異常增大的子宮、可在陰道中檢測(cè)到的膿性子宮排出物(更為普遍地在產(chǎn)后21天之內(nèi))，通常沒(méi)有全身敗血癥，具有明顯的疾病征象(發(fā)熱、抑郁、虛弱、食欲不振)。產(chǎn)后子宮炎(也稱(chēng)為毒性產(chǎn)后子宮炎或毒性子宮炎)以異常增大的松弛的子宮和惡臭的水樣棕紅色陰道排出物為特征，與全身性敗血癥的急性疾病征象(主要是產(chǎn)乳量降低、遲鈍或毒血癥征象)相關(guān)并且通常在產(chǎn)后10天發(fā)熱>39. 4° C。子宮內(nèi)膜炎涉及子宮的臨床(急性)或亞臨床炎癥。臨床型子宮內(nèi)膜炎是僅僅子宮內(nèi)膜的炎癥，延伸不深于子宮海綿層，以膿性陰道排出物為特征(典型地一直到產(chǎn)后42天)，沒(méi)有全身性疾病征象。亞臨床型子宮內(nèi)膜炎可以通過(guò)產(chǎn)后21-33天收集的子宮細(xì)胞學(xué)樣品中多于18%的多形核白細(xì)胞的存在和/或通過(guò)子宮腔內(nèi)液體的超聲影像，或產(chǎn)后34-47天子宮細(xì)胞學(xué)樣品中多于10%的多形核白細(xì)胞的存在而被診斷[Sheldon IM, (2006) ibid.]。
子宮積膿是在持久黃體和宮頸閉合的情況下，在子宮腔中的大量液體的積聚。以上任何情況可以由許多種病原菌引起。在奶牛中，子宮炎和子宮內(nèi)膜炎的致病生物最經(jīng)常是單獨(dú)的化膿隱秘桿菌(放線(xiàn)菌)或與壞死梭桿菌或其他革蘭氏陰性厭氧生物聯(lián)合。在一些形式的子宮內(nèi)膜炎中，致病因子是豬葡萄球菌或大腸桿菌。在其他動(dòng)物中，如 母馬，子宮內(nèi)膜炎最常見(jiàn)的的致病因子是獸疫鏈球菌，但是可以涉及幾種其他生物，包括大腸桿菌、綠膿假單胞菌和肺炎克雷伯桿菌。此外，術(shù)語(yǔ)“子宮感染”包含子宮頸和陰道感染，例如但不限于宮頸炎(一種子宮頸的炎癥，可能由沙眼衣原體、細(xì)菌淋病奈瑟菌(也稱(chēng)為淋球菌)引起)；或陰道炎(陰道炎癥，可能由酵母白色念珠菌，加德納菌屬或寄生原生生物陰道毛滴蟲(chóng)引起)；以及外陰炎(外陰的炎癥，有時(shí)被稱(chēng)為外陰陰道炎(因?yàn)樵谟嘘幍姥装Y時(shí)，外陰也經(jīng)常發(fā)炎)。在一些奶牛群中，40%的產(chǎn)后動(dòng)物被診斷為子宮感染，因此需要獸醫(yī)治療(LewisG. S.,子宮衛(wèi)生和失調(diào)，《乳品科學(xué)期刊》(J. Dairy Sci. )，80:984-994(1997))。被診斷具有子宮感染，例如像，子宮炎或子宮內(nèi)膜炎以及延遲性子宮與子宮頸復(fù)舊的奶牛，具有顯著降低的受孕率、延長(zhǎng)的距離第一次受精的天數(shù)、以及增加的從產(chǎn)犢到育種的間隔，這已經(jīng)通過(guò)降低的懷孕數(shù)量例證。例如，子宮感染可以增加產(chǎn)犢到產(chǎn)犢之間的周期，該周期最佳地應(yīng)當(dāng)不超過(guò)大約12至14個(gè)月的最適宜周期，即，每頭奶牛每年大約產(chǎn)犢一次。保持這樣一個(gè)最適宜周期的能力取決于許多因素，尤其是動(dòng)物的子宮的臨床狀態(tài)，所述臨床狀態(tài)應(yīng)當(dāng)完全沒(méi)有任何產(chǎn)后相關(guān)性感染。因此，子宮感染引起經(jīng)濟(jì)損失，例如獸群健康相關(guān)的成本增加，經(jīng)常飼料消耗降低，引起很大的奶產(chǎn)量降低，并且迫使飼養(yǎng)員和奶供應(yīng)商淘汰家畜動(dòng)物(如奶牛)，否則這些家畜動(dòng)物是多產(chǎn)的并留在獸群中。子宮內(nèi)膜炎和子宮炎可以自愈，通常對(duì)于繁殖性能或任何其他生產(chǎn)力量度沒(méi)有很大的影響。應(yīng)當(dāng)理解的是，當(dāng)子宮變得被感染時(shí)，它可能顯著影響奶產(chǎn)量。本發(fā)明可以適用于許多種雌性哺乳動(dòng)物，可以在授乳期之前(例如小母牛)，也可以是授乳動(dòng)物。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，該雌性哺乳動(dòng)物是非人類(lèi)的哺乳動(dòng)物。在本發(fā)明的背景下，可能的非人類(lèi)的哺乳動(dòng)物可以選自下列非限制性組，該組由以下各項(xiàng)組成狗、綿羊、山羊、母豬、奶牛、瘤牛、斑馬、貓、驢子(donkey)、驢(ass)、水牛、牛(oxen)、母馬(包括小雌馬)、馴鹿、牦牛、駱駝、美洲駝(lama)、羊駝、大象、豬、野豬和疣豬。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明適用于授乳動(dòng)物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及家畜授乳動(dòng)物，包括但不限于奶牛、水牛、山羊、綿羊、母馬、瘤牛、母豬和牛。一個(gè)特別感興趣的授乳動(dòng)物是奶牛。該哺乳動(dòng)物可以是任何未經(jīng)產(chǎn)的、初產(chǎn)的或多產(chǎn)的授乳動(dòng)物。“未經(jīng)產(chǎn)的”(未生育者“nullipara”或“para”)應(yīng)當(dāng)被理解為是指一個(gè)從未完成一個(gè)妊娠周期的動(dòng)物；“初產(chǎn)的”(初產(chǎn)者“primipara”或“primip”)應(yīng)當(dāng)被理解為是指一個(gè)已經(jīng)生產(chǎn)了至少一個(gè)后代的動(dòng)物(單次分娩)；以及“多產(chǎn)的”(“多產(chǎn)者” “multip”)應(yīng)當(dāng)被理解為是指一個(gè)已經(jīng)經(jīng)歷了兩次或更多次分娩的動(dòng)物。仍然在一個(gè)另外的實(shí)施方案中，該子宮感染是一種產(chǎn)后感染。在本發(fā)明的背景下，術(shù)語(yǔ)產(chǎn)后感染是指發(fā)生在分娩后任何時(shí)間的感染，例如在兩次連續(xù)分娩的時(shí)間間隔中，以及在一些實(shí)施方案中是在分娩之后直到發(fā)情期開(kāi)始的時(shí)間。在一些實(shí)施方案中，產(chǎn)后期被看作是在分娩之后前7周期間。該酪蛋白肽被用來(lái)治療任何上述子宮感染?！爸委煛?"treatment")或“治療”("treating)等術(shù)語(yǔ)在此用來(lái)是指對(duì)具有或傾向產(chǎn)生子宮感染(例如在產(chǎn)后期)的雌性哺乳動(dòng)物獲得所希望的藥理和生理作用。這樣，在一個(gè)傾向于產(chǎn)生子宮感染的授乳動(dòng)物中，在“預(yù)防”或部分預(yù)防感染、癥狀或其病癥方面，該作用可以是預(yù)防性的，和/或在部分或完全治愈已經(jīng)存在的感染、病癥、癥狀或歸因于感染的副作用方面，該作用是是治療性的。因此，在此使用的術(shù)語(yǔ)“治療”覆蓋了任何以下內(nèi)容(a)在可能易受感染的(例如產(chǎn)犢之前和之后)但是尚未被診斷為感染(例如感染的臨床癥狀還沒(méi)有發(fā)展到一個(gè)可檢測(cè)水平)的雌性哺乳動(dòng)物中預(yù)防感染發(fā)生；(b)抑制感染，即，阻止或減少感染的發(fā)生或其臨床癥狀(如炎癥和/或發(fā)熱)；或(C)減輕感染，即，引起感染和/或其癥狀或病癥的消退。在一些實(shí)施方案中，治療包括所述至少一種酪蛋白肽的腸胃外給藥(例如注射，輸注，等等)和/或局部給藥。給藥可以是子宮內(nèi)的和/或陰道給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，給藥是經(jīng)子宮頸子宮內(nèi)給藥。取決于給藥途徑，該至少一種酪蛋白肽可以與一種適合的可接受的載體配制形成一種藥物組合物。一種可接受的載體是一種藥學(xué)上和生理學(xué)上可接受的載體，被理解為一種通常安全的、無(wú)毒性的以及在生物學(xué)上或其他領(lǐng)域都沒(méi)有所不希望的作用的載體或賦形劑。如在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求中所使用的藥學(xué)上可接受的載體包括一種或一種以上這樣的載體。載體可以是那些任何常規(guī)使用的載體，并僅僅受限于化學(xué)物理考慮因素(如溶解度以及與至少一種酪蛋白肽的反應(yīng)性的缺乏)以及給藥途徑。如精通本領(lǐng)域的人員所理解的，治療也可以包括與其他藥物聯(lián)合給藥，例如抗生素。該藥物組合物也可以包括其他添加劑，以產(chǎn)生與該組合物相容的形式或增加穩(wěn)定性、無(wú)菌性和等滲性或增強(qiáng)該酪蛋白肽的跨膜攝取。例如，添加劑可以包括一種PH調(diào)節(jié)劑，例如用來(lái)維持該組合物的pH在6至8的范圍內(nèi)，或有時(shí)甚至在6. 7至6. 9的范圍內(nèi)，這是發(fā)現(xiàn)用于酪蛋白肽的局部或腸胃外給藥的最適合pH。在一個(gè)實(shí)施方案中，實(shí)現(xiàn)有效治療子宮感染的至少一種酪蛋白肽的量是每次給藥劑量在10ng/ml至500mg/ml之間，有時(shí)，每次給藥劑量在10ng/ml至200mg/ml之間，甚至有時(shí)每次給藥劑量在10ng/ml至100mg/ml之間。在一些實(shí)施方案中，該酪蛋白肽是一種包含酪蛋白肽混合物的酪蛋白水解物，至少它的一部分用來(lái)治療子宮感染是治療有效的。有時(shí)，該酪蛋白肽可以以一種非溶液形式給予(例如乳膏)，在這種情況下，每次給藥劑量的量將在大約10ng/kg體重至200mg/kg體重之間，有時(shí),每次給藥劑量在大約10ng/kg體重至100mg/kg體重之間。一個(gè)給藥劑量是指單次給藥事件，即，一個(gè)動(dòng)物可以每天或在兩天或更多天期間接受單個(gè)給藥劑量或幾個(gè)給藥劑量。在一個(gè)實(shí)施方案中，該至少一種酪蛋白肽被給予一次(單次劑量給藥)。在另一些實(shí)施方案中，典型地以2個(gè)至6個(gè)之間的劑量執(zhí)行所述至少一種酪蛋白肽的兩次或更多次給藥。當(dāng)該至少一種酪蛋白肽以一次以上的劑量被給予時(shí)，典型地(即使不限于此)在兩次連續(xù)給藥之間使用從2小時(shí)至14天的時(shí)間間隔。雖然給藥的數(shù)量如此，根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，單次或首次給藥是在產(chǎn)犢之后，典型地一直到產(chǎn)犢后120天，更具體地，一直到產(chǎn)犢后70天，另外有時(shí)一直到產(chǎn)犢后30天，并且有時(shí)在產(chǎn)犢后即刻(B卩，產(chǎn)犢之后幾分鐘或幾小時(shí))，以及一直到產(chǎn)犢后26天。如在此使用的，除非上下文中另有明確指示，形式“一個(gè)/ 一種”(〃a〃，〃an〃)和“該”("the")包括單數(shù)和復(fù)數(shù)指代。例如，術(shù)語(yǔ)“一種酪蛋白肽”包括一種或更多種這樣的肽，例如有效治療子宮感染的肽的混合物。此外，如在此使用的，術(shù)語(yǔ)“包含”旨在表示該組合物包含所述的一種或更種肽，即，該至少一種酪蛋白肽(可以單獨(dú)地涉及一種包含這些肽的混合物的制劑)，但是不排除
其他要素，如生理學(xué)可接受的載體和賦形劑以及其他活性劑。術(shù)語(yǔ)“主要由......組成”用
來(lái)定義包含所述要素但是排除可能對(duì)于治療子宮感染具有重要意義其他要素的組合物。因
此“由......組成”應(yīng)當(dāng)表示排除超過(guò)微量要素的其他要素。由每一個(gè)這些過(guò)渡術(shù)語(yǔ)定義
的實(shí)施方案在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。此外，所有數(shù)值(例如當(dāng)提及構(gòu)成包含至少一種酪蛋白肽作為一種活性成分的組合物的要素的量或范圍時(shí))是近似值，為在規(guī)定值的20% (有時(shí)達(dá)到10%) (+)或㈠變化的近似值。應(yīng)當(dāng)理解的是，即使不總是明確地規(guī)定，所有數(shù)值標(biāo)識(shí)的前面是術(shù)語(yǔ)“大約”。現(xiàn)在將在以下的根據(jù)本發(fā)明進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)的描述中例證本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)理解的是這些實(shí)例在性質(zhì)上旨在是說(shuō)明性的而不是限制性的。顯然，這些實(shí)例的許多修改和變化可能考慮到以上教導(dǎo)。因此，應(yīng)當(dāng)理解的是，在所附的權(quán)利要求書(shū)的范圍之內(nèi)，本發(fā)明可以按照大量的可能的方式實(shí)施，而不是如在下文中特別說(shuō)明的。提出以下實(shí)施例是為了更充分地說(shuō)明本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。然而，它們絕不是以任何方式被解釋為限制本發(fā)明的廣泛范圍，因?yàn)槠渲械暮芏嘈薷暮透淖儗?duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員將是顯而易見(jiàn)的。一些非限制性實(shí)例的說(shuō)明材料碘化丙啶(熒光溶液，CAS 25535-16-4，西格瑪奧德里奇目錄號(hào)70335，西格瑪奧德里奇公司，3300南二街，圣路易斯，MO 63118)。重組人IL-8 (rhIL-8) (ProSpec-Tany TechnoGene 有限公司，雷霍沃特科技園，郵政信箱398，雷霍沃特76103，以色列)。等滲Percoll (基礎(chǔ)PcrcoI沖'西格瑪奧德里奇目錄號(hào)P4937，西格瑪奧德里奇公司，3300南二街，圣路易斯，MO 63118)。滅活的獸疫鏈球菌懸浮液(Omnisorbin, Calbiochem,巴德索登，德國(guó))。脫水土霉素(Oxytetracyclinedehydrate) 200mg/mL( Aiiimycini1'·1, NorbrookLaboratory有限公司，英國(guó))。灌洗水(治愈醫(yī)學(xué)(Cure Medical)，Teva醫(yī)學(xué)，以色列)。在下文，奶牛也是以色列的荷斯坦-弗里生奶牛。十四酰佛波乙酸酯(PMA，西格瑪奧德里奇目錄號(hào)P8139，西格瑪奧德里奇公司，3300南二街，圣路易斯，MO 63118)。非熒光染料二氫羅丹明123 (DHR 123, Morbitec,哥廷根，德國(guó))。實(shí)例I-酪蛋白水解物的制備
儲(chǔ)存液的制備25mMTris HCl ρΗ=8· O (20 升)和 25mM Tris HCl ρΗ=7· O (5 升)。稱(chēng)量Tris堿(Applichem GmBH，達(dá)姆施塔特，德國(guó))(75. 687gr)溶解于包含24升灌洗水(WFI，治愈醫(yī)學(xué)，由Teva醫(yī)學(xué)制造，以色列)的裝備有磁性攪拌棒的玻璃瓶中，直至溶液完全澄清，最終PH約11.5。對(duì)于19升溶液，使用ION HCl(西格瑪奧德里奇，以色列)調(diào)整pH至大約7. 5-8. 5(優(yōu)選地大約為8)，并且通過(guò)加入WFI將體積定至20升。對(duì)于4. 75升溶液，調(diào)整pH至大約6. 75-7. 25之間，(優(yōu)選地為7. O),并且通過(guò)加入WFI將體積定至5升。在室溫下儲(chǔ)存這些溶液直到進(jìn)一步使用。酪蛋白衍生肽的制備根據(jù)以下內(nèi)容，通過(guò)以色列生物工業(yè)公司(Biological Industries Israel)(Beit Haemek Ltd.,以色列)制備酪蛋白水解物:玻璃瓶中加入Tris HCl 25mM, pH=8. O (20升)，并且將溫度調(diào)整至大約40° C至48° C之間，優(yōu)選45° C?？偣?，OOOgr酪蛋白酸鈉(DMV國(guó)際菲仕蘭坎皮納總公司，阿默斯福特，荷蘭)加ATris HCl溶液中，獲得20%(w/v)的溶液。輕輕攪拌該混合物達(dá)到充分溶解。保持溶液的pH在大約8.0，溫度在大約45° C。溶液中加入4g豬胰蛋白酶粉末(西格瑪奧德里奇，以色列)。在磁力攪拌器或反絮凝(優(yōu)選)攪拌器上在大約45° C的輕微攪動(dòng)下，輕輕攪拌該混合物。允許水解進(jìn)行持續(xù)總共大約I小時(shí)。使用ION NaOH(JT Baker, AvantorPerformanceMaterials,菲利普斯堡，新澤西州，美國(guó))調(diào)整pH至大約8. O,并且將溫度保持在大約45° C。通過(guò)將溫度升高至90 ° C-95 ° C持續(xù)一小時(shí)將粗制水解物中的胰蛋白酶滅活。通過(guò)使用冰在外部浴中將上清液冷卻至室溫。使用ION HCl調(diào)整pH至4. 7。在15-30分鐘之后，通過(guò)在2° C-8° C在4500rpm離心20分鐘去除不溶物。將上清液轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的無(wú)菌玻璃瓶中，使用ION NaOH調(diào)整pH至7. O。通過(guò)加入pH 7. O的25mM Tris HCl溶液調(diào)整溶液體積至20升。最終體積按順序通過(guò)I. 2 μ m/0. 65 μ m預(yù)濾器以及通過(guò)兩個(gè)O. 45/0. 22 μ m無(wú)菌CA囊式膜過(guò)濾器而被過(guò)濾。在無(wú)菌工作臺(tái)中，通過(guò)無(wú)菌灌裝將過(guò)濾的溶液轉(zhuǎn)移至一個(gè)玻璃血清瓶(分別是IOOml和200ml)中。將樣品儲(chǔ)存在-20° C (冷凍)直至進(jìn)一步使用。產(chǎn)品(原料)包含20%酪蛋白酸鈉、25mM Tris-HCl和O. 02%胰蛋白酶.實(shí)例2:臨床研究I -酪蛋白水解物在急性牛產(chǎn)后臨床型子宮炎中的作用的低劑量研究研究了牛酪蛋白水解物相比于抗生素藥物在患有急性產(chǎn)后子宮炎的奶牛中的作用(Sheldon 等人,ibid2006)?？偟难芯啃畔⒈狙芯考{入的奶牛是授乳的荷斯坦弗里生奶牛，位于以色列的大奶牛群中(經(jīng)度34° 40’E-35° 30; E ;緯度30° 30’N_33° 01’N)。奶牛每天擠奶三次。所用的獸群在沒(méi)有畜欄的畜棚中，規(guī)模范圍從300至350頭產(chǎn)奶牛。在奶牛場(chǎng)中，由臨床研究組織(CRO)(Hachaklait-Israeli CattleBreedersAssociation,撒利亞工業(yè)園區(qū)，以色列)選擇并任命一個(gè)管理獸醫(yī)師，以便進(jìn)行研究職能，確切地說(shuō)該管理獸醫(yī)師負(fù)責(zé)治療管理、臨床評(píng)定、親自訓(xùn)練奶牛群、適當(dāng)儲(chǔ)存、針對(duì)不良事件進(jìn)行必要的臨床觀(guān)察并填寫(xiě)報(bào)表。以擦不掉的黑/藍(lán)墨水字跡清楚地填寫(xiě)所有研究文件。將原始數(shù)據(jù)發(fā)送給主辦方。身體觀(guān)察所有奶牛在產(chǎn)后的前5至10天進(jìn)行常規(guī)檢查，并且使用以下量度評(píng)定它們的身體狀況(i)通過(guò)經(jīng)直腸觸診的子宮的情況；(ii)用于近似重量確定的胸圍測(cè)量值；(iii)根據(jù)Edmonson A. J.,等人，基于奶牛的身高和身體各個(gè)部分的脂肪組成，由獸醫(yī)師提供的身體狀況評(píng)分。[Edmonson A. J.，Lean I. J. , WeaverL.D. ,Farver T. , Webster G.,荷斯坦奶牛的身體狀況評(píng)分表，《乳品科學(xué)期刊》(J.DairySci.)，(1989);72:68 - 78]。奶牛被納入本研究，條件是它們的身體狀況符合以下入選標(biāo)準(zhǔn)患有臨床型產(chǎn)后子宮炎的奶牛，非雙胎分娩的奶牛，在過(guò)去的4周期間沒(méi)有子宮內(nèi)或全身性生殖激素療法的奶牛。沒(méi)有診斷為患病的奶牛，這些疾病可能影響研究者對(duì)治療結(jié)果的判斷。在檢查用于本試驗(yàn)的奶牛之前，獸群管理者同意不給予任何子宮內(nèi)或生殖激素療法。另外，奶牛被納入本臨床研究的條件是它們沒(méi)有任何以下特征(在此的“排除標(biāo)準(zhǔn)”):具有異常的內(nèi)生殖器官(包括粘連)的奶牛納入時(shí)，在當(dāng)前產(chǎn)犢后期間具有嚴(yán)重的陰道炎、跛行、乳腺炎-酮癥、消化不良、或需要全身治療的任何其他臨床疾病的診斷和/或治療的奶牛，在產(chǎn)犢之后經(jīng)鑒定被淘汰(將不授精)的奶牛在進(jìn)入研究前的3周之內(nèi)被給予免疫療法的奶牛，在進(jìn)入研究前2周，全身性地或通過(guò)飼喂給予抗炎藥和/或合成代謝療法的奶牛。在當(dāng)前產(chǎn)犢之時(shí)，疑似或診斷為胎膜滯留的奶牛。疑似或臨床確證為具有全身影響的急性產(chǎn)后子宮炎的奶牛。因當(dāng)前位置的農(nóng)場(chǎng)的任何原因?qū)⒁蕹哪膛！１辉\斷為確認(rèn)的臨床型子宮炎的具有適合的身體狀況(如上文在入選標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)中所定義的)的奶牛被納入本臨床研究，正如通過(guò)以下臨床標(biāo)準(zhǔn)的任何之一所確定的I)奶牛必須是發(fā)熱的(B卩，早晨直腸溫度高于39. 4° C)和/或2)奶牛必須具有位于腹腔中的松弛的、非伸縮自如的子宮，子宮頸直徑>7. 5cm，以及水樣的、粘液膿性的、或惡臭的陰道排出物。研究細(xì)節(jié)在日期"O"(本研究的第一天)，由研究者使用預(yù)先準(zhǔn)備的表格，將來(lái)自同一獸群并且處于相同哺乳期和年齡的乳用小母?；虺醍a(chǎn)的或多產(chǎn)的奶牛進(jìn)行隨機(jī)分組，以便接受一種治療或其他治療。在每個(gè)表格之內(nèi)，成對(duì)地將奶牛分配于治療，每組一頭奶牛。
治療病例研究組("組I")-以150ml的溶液給予450mg牛酪蛋白水解物(批號(hào)B100)，
直至完成該組的樣本大小。對(duì)照組(〃組2〃)- 25ml 脫水土霉素(總共 5，OOOmg, 200mg/ml) (NorbrookLaboratory ,英國(guó))。對(duì)測(cè)試奶牛不提供其他的子宮內(nèi)治療(包括但不限于子宮內(nèi)抗微生物劑、內(nèi)部或外部治療全身性抗微生物劑)。治療在日期"O"處開(kāi)始，通過(guò)使用無(wú)菌子宮導(dǎo)管經(jīng)子宮頸子宮內(nèi)輸注而對(duì)奶牛給予治療。所有實(shí)驗(yàn)是盲法病例(blind case)-對(duì)照研究，因?yàn)樗形幢鎰e的有待給予的產(chǎn)品被標(biāo)記在牛酪蛋白水解物小瓶上，并且總是以與治療相同的途徑向奶牛給予陰性對(duì)照，因此研究者或牧人(herdsperson)或獸醫(yī)師不能辨別出研究病例或?qū)φ?。研究終點(diǎn)本研究的終點(diǎn)是安全和有效的，如以下詳細(xì)說(shuō)明安全性確定與具有當(dāng)前劑量的牛酪蛋白水解物很可能相關(guān)的任何毒性的最大嚴(yán)重度。確定與具有當(dāng)前劑量的牛酪蛋白水解物很可能相關(guān)的任何毒性的最大嚴(yán)重度。安全性是通過(guò)監(jiān)測(cè)在治療后0.3、1、2、3、7和14天的不良事件(在下面詳細(xì)介紹)或任何毒性征象的出現(xiàn)而確定的。另外，根據(jù)表I的說(shuō)明，對(duì)每頭奶牛的總的整體印象進(jìn)行評(píng)定和分級(jí)。表I-奶牛整體印象分級(jí)
評(píng)分說(shuō)明O正常I輕微抑郁2抑郁(獨(dú)處，頭傾斜向下)本項(xiàng)目的管理者/監(jiān)督者/主辦者負(fù)責(zé)即時(shí)通知不良事件(AEs)的任何可能征象。適當(dāng)?shù)男袆?dòng)可以涉及定位并打破盲法編碼，以便能夠給予適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)治療，將不良事件記錄在本研究文件中，并向主辦者報(bào)告不良事件。根據(jù)獸醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)，如果遇到不良事件(包括在第一次治療后隨訪(fǎng)的推移時(shí)間內(nèi))或在治療后7天觀(guān)察到臨床產(chǎn)后子宮炎的顯著體征和癥狀，對(duì)奶牛給予與在第O天提供的相同的治療。記錄所有嚴(yán)重的和/或意外的不良事件。療效通過(guò)以下兩個(gè)參數(shù)的平均減少來(lái)度量治療成功與在第O天期間測(cè)量的平均溫度相比，如果動(dòng)物組在治療后14天具有平均直腸溫度降低，和/或
如果在治療后14天，該動(dòng)物組具有排出物參數(shù)的平均降低。通過(guò)在治療之前、在治療后6-8小時(shí)而且在治療后第1、2、3、7和14天在早晨觀(guān)察和擠奶之后的初訪(fǎng)時(shí)測(cè)量直腸溫度、生殖系統(tǒng)形態(tài)和生殖器分泌物而評(píng)定療效。總之，在治療后總共14天之后評(píng)定治療成功。
基于提供在表2中的說(shuō)明，管理獸醫(yī)師檢查所有奶牛并且負(fù)責(zé)對(duì)生殖器分泌物進(jìn)行分級(jí)(從I至4)。表2-生殖系統(tǒng)分泌物的分級(jí)
權(quán)利要求
1.一種用于治療雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染的酪蛋白肽。
2.如權(quán)利要求I所述的酪蛋白肽，包括酪蛋白、αSI-酪蛋白、a S2_酪蛋白、k_酪蛋白的一個(gè)或多個(gè)片段。
3.如權(quán)利要求I或權(quán)利要求2所述的酪蛋白肽，其中該酪蛋白肽是一種酪蛋白水解物。
4.如權(quán)利要求I至3中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽，是一種磷酸肽。
5.如權(quán)利要求4所述的酪蛋白肽包括選自下組的一種氨基酸序列，該組由以下各項(xiàng)組成SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO:4、SEQ IDN0:5 和 SEQ ID NO:6。
6.如權(quán)利要求I所述的酪蛋白肽，用于治療選自下組的子宮感染，該組由以下各項(xiàng)組成產(chǎn)后毒血性子宮炎、臨床型子宮炎、子宮外膜炎、臨床型子宮內(nèi)膜炎、亞臨床型子宮內(nèi)膜炎、子宮積膿、宮頸炎、陰道炎和外陰炎。
7.如權(quán)利要求6所述的酪蛋白肽，用于治療選自下組的子宮感染，該組由以下各項(xiàng)組成產(chǎn)后毒血性子宮炎、臨床型子宮炎、臨床型子宮內(nèi)膜炎和亞臨床型子宮內(nèi)膜炎。
8.如權(quán)利要求I至7中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽，用于治療產(chǎn)后感染。
9.如權(quán)利要求I所述的酪蛋白肽，用于一種雌性哺乳類(lèi)授乳動(dòng)物的治療。
10.如權(quán)利要求9所述的酪蛋白肽，用于選自下組的雌性哺乳動(dòng)物的治療，該組由以下各項(xiàng)組成未經(jīng)產(chǎn)的、初產(chǎn)的或多產(chǎn)的授乳動(dòng)物。
11.如權(quán)利要求I至10中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽，用于雌性哺乳動(dòng)物為奶牛的治療。
12.如權(quán)利要求I至11中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽，用于與一種藥物載體結(jié)合而用于腸胃外給藥或用于局部給藥。
13.如權(quán)利要求12所述的酪蛋白肽，用于以子宮內(nèi)給藥或陰道給藥的形式使用。
14.如權(quán)利要求13所述的酪蛋白肽，用于經(jīng)子宮頸子宮內(nèi)使用。
15.如權(quán)利要求12至14中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽，用于通過(guò)經(jīng)由注射或輸注的腸胃外給藥使用。
16.如權(quán)利要求I至15中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽，用于在產(chǎn)犢之間的一個(gè)時(shí)期使用。
17.如權(quán)利要求16所述的酪蛋白肽，其中該時(shí)期包括一直到產(chǎn)犢之后120天。
18.如權(quán)利要求16所述的酪蛋白肽，其中該時(shí)期包括一直到產(chǎn)犢之后70天。
19.如權(quán)利要求16所述的酪蛋白肽，其中時(shí)期是從產(chǎn)犢日一直到產(chǎn)犢之后33天。
20.如權(quán)利要求I至19中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽，用于以單劑量給藥使用。
21.如權(quán)利要求I至20中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽，用于以?xún)纱位蚋啻谓o藥使用，該兩次或更多次給藥包含從I小時(shí)到14天的一個(gè)時(shí)間間隔。
22.如權(quán)利要求21所述的酪蛋白肽，用于在包括酪蛋白肽的兩次至六次給藥的治療方案中使用。
23.如權(quán)利要求I至22中任一項(xiàng)所述的酪蛋白肽,用于以10ng/ml至500mg/ml之間的量使用。
24.一種用于治療子宮感染的方法，該方法包括對(duì)需要治療子宮感染的雌性哺乳動(dòng)物給予一定量的至少一種酪蛋白肽，該量對(duì)于治療哺乳動(dòng)物中的子宮感染是有效的。
25.如權(quán)利要求24所述的方法，其中該至少一種酪蛋白肽包括酪蛋白、αSI-酪蛋白、aS2_酪蛋白、K -酪蛋白的一個(gè)或多個(gè)肽片段。
26.如權(quán)利要求24或25所述的方法，其中該至少一種酪蛋白肽是一種酪蛋白水解物。
27.如權(quán)利要求24至26中任一項(xiàng)所述方法，其中是至少一種酪蛋白肽包含一種磷酸肽。
28.如權(quán)利要求24至27中任一項(xiàng)所述方法，其中該至少一種酪蛋白肽包含選自下組的一種氨基酸序列，該組由以下各項(xiàng)組成SEQ IDN0:2、SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:4,SEQ IDNO:5 和 SEQ ID NO:6。
29.如權(quán)利要求24至28中任一項(xiàng)所述的方法，其中子宮感染選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成產(chǎn)后毒血性子宮炎、臨床型子宮炎、子宮外膜炎、臨床型子宮內(nèi)膜炎、亞臨床型子宮內(nèi)膜炎、子宮積膿、宮頸炎、陰道炎和外陰炎。
30.如權(quán)利要求29的方法，其中子宮感染選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成產(chǎn)后毒血性子宮炎、臨床型子宮炎、臨床型子宮內(nèi)膜炎和亞臨床型子宮內(nèi)膜炎。
31.如權(quán)利要求24至30中任一項(xiàng)所述的方法，其中子宮感染是一種產(chǎn)后感染。
32.如權(quán)利要求24至31中任一項(xiàng)所述的方法，其中該雌性哺乳動(dòng)物是一種授乳動(dòng)物。
33.如權(quán)利要求32所述的方法，其中該雌性哺乳動(dòng)物選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成未經(jīng)產(chǎn)的、初產(chǎn)的或多產(chǎn)的授乳動(dòng)物。
34.如權(quán)利要求24至33中任一項(xiàng)所述的方法，其中該雌性哺乳動(dòng)物是奶牛。
35.如權(quán)利要求24至34中任一項(xiàng)所述的方法，其中該至少一種酪蛋白肽用于與一種藥物載體結(jié)合而用于腸胃外給藥或用于局部給藥。
36.如權(quán)利要求35所述的方法，其中給藥包括子宮內(nèi)給藥或陰道給藥。
37.如權(quán)利要求36所述的方法，其中給藥是通過(guò)經(jīng)子宮頸子宮內(nèi)。
38.如權(quán)利要求35至37中任一項(xiàng)所述的方法，其中腸胃外給藥是通過(guò)注射或輸注。
39.如權(quán)利要求24至38中任一項(xiàng)所述的方法，其中該至少一種酪蛋白肽在產(chǎn)犢之間的一個(gè)時(shí)期被給予。
40.如權(quán)利要求39所述的方法，其中該時(shí)期包括一直到產(chǎn)犢之后120天。
41.如權(quán)利要求40所述的方法，其中該時(shí)期包括一直到產(chǎn)犢之后70天。
42.如權(quán)利要求40所述的方法，其中該時(shí)期是從產(chǎn)犢日一直到產(chǎn)犢之后33天。
43.如權(quán)利要求24至42中任一項(xiàng)所述的方法，其中給藥包括一種單劑量給藥。
44.如權(quán)利要求24至43中任一項(xiàng)所述的方法，其中給藥包括該至少一種酪蛋白肽的兩次或更多次給藥，該兩次或更多次給藥包括從I小時(shí)到14天的一個(gè)時(shí)間間隔。
45.如權(quán)利要求44所述的方法，其中給藥包括酪蛋白肽的兩次至六次給藥。
46.如權(quán)利要求24至45中任一項(xiàng)所述的方法，其中有效治療所述子宮感染的所述至少一種酪蛋白肽的量是在10ng/ml至500mg/ml之間。
47.如權(quán)利要求I至23中任一項(xiàng)所定義的至少一種酪蛋白肽用于一種藥物組合物的制備的用途，該藥物組合物用于治療需要治療子宮感染的雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染。
48.一種用于治療子宮感染的藥物組合物，該組合物包含如權(quán)利要求I至23中任一項(xiàng)所定義的作為一種活性組分的一定量的至少一種酪蛋白肽，該量對(duì)于治療雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染是有效的。
49.如權(quán)利要求48所述的藥物組合物,包含10ng/ml至500mg/ml之間的至少一種酪蛋白肽。
50.如權(quán)利要求48或49所述的藥物組合物，包含一種藥學(xué)上可接受的載體。
51.如權(quán)利要求48至50中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，包含在溶液中的至少一種酪蛋白肽，該溶液包含大約7. 5至8. 5之間范圍內(nèi)的pH。
52.如權(quán)利要求48至51中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，該藥物組合物呈一種適合于腸胃外給藥或局部給藥的劑型。
53.如權(quán)利要求48至52中任一項(xiàng)所述 的藥物組合物，該藥物組合物呈適合于注射或輸注的劑型。
54.如權(quán)利要求48至50中任一項(xiàng)所述的藥物組合物,包含10ng/kg體重至200mg/kg體重之間的一定量的酪蛋白肽。
55.—種藥盒，包含如權(quán)利要求I至23中任一項(xiàng)所定義的至少一種酪蛋白肽以及使用酪蛋白肽治療需要治療子宮感染的雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染的說(shuō)明書(shū)。
56.如權(quán)利要求55所述的藥盒，其中該至少一種酪蛋白肽是在如權(quán)利要求48至55中任一項(xiàng)所定義的藥物組合物中。
全文摘要
本披露涉及用于治療雌性哺乳動(dòng)物中的子宮感染的一種酪蛋白肽，涉及向雌性哺乳動(dòng)物給予至少一種酪蛋白肽治療此類(lèi)感染的方法，涉及酪蛋白肽用于制備治療子宮感染的藥物組合物的用途，并且涉及用于所述治療的藥盒。該酪蛋白肽優(yōu)選地是一種酪蛋白水解物，例如通過(guò)酪蛋白的胰蛋白酶水解作用獲得。根據(jù)一些實(shí)施例，該雌性哺乳動(dòng)物是一種授乳動(dòng)物，該感染是一種產(chǎn)后感染。
文檔編號(hào)A61P43/00GK102933223SQ201180028083
公開(kāi)日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2011年4月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月21日
發(fā)明者喬斯·馬里奧·伊斯柯維奇 申請(qǐng)人:米勒尤迪斯公司