專(zhuān)利名稱(chēng)：用于改善的器官移植物保存和接受性的組合物及方法
用于改善的器官移植物保存和接受性的組合物及方法直量本發(fā)明涉及器官及組織的移植。更具體而言，其涉及移植物供者的預(yù)處理、將移植物從供者取得后的移植物保存、以及為使來(lái)自移植物的益處最大化而對(duì)移植物受者的處理。移植的含義是將器官或組織從某個(gè)身體取出并將其植入另一個(gè)身體內(nèi)，目的是為了代替嚴(yán)重?fù)p壞或缺失的器官或組織。對(duì)于主要器官移植物例如心臟、肺、腎臟、肝臟或胰臟的受者而言，考慮到潛在疾病或損害的嚴(yán)重性，移植通常是中期或長(zhǎng)期存活僅有的現(xiàn)實(shí)機(jī)會(huì)。目前，據(jù)估計(jì)每年進(jìn)行至少數(shù)萬(wàn)例的主要器官移植。最頻繁移植的器官是腎臟，僅在美國(guó)每年就進(jìn)行大約25，000例移植，其次是肝臟、心臟、肺和胰臟。在以往的數(shù)十年中這些延長(zhǎng)壽命的方法的成功率已經(jīng)顯著提升。例如，目前對(duì)于心臟移植受者的五年存活率約為男性73%及女性67%。對(duì)于腎臟，進(jìn)行移植的典型患者將比持續(xù)透析的患者壽命長(zhǎng)10至15年。對(duì)于肝臟移植，受者具有58%的機(jī)會(huì)可以存活15年。同時(shí)，仍然有大量的失敗的移植。移植失敗的原因通常與以下有關(guān)(a)供者預(yù)先存在的疾病或器官在移植前的損傷，(b)移植物取得后的損傷，例如在運(yùn)輸或儲(chǔ)存過(guò)程中的損傷，和/或(C)受者免疫系統(tǒng)的移植排斥。腦死亡被認(rèn)為是異體移植物移植前損傷的主要原因之一。根據(jù)損傷假說(shuō)，移植前損傷對(duì)移植的結(jié)果具有實(shí)質(zhì)性的影響。尤其是在腎臟移植中，從腦死亡供者取得的移植物實(shí)際上與那些從活體供者取得的相比顯示出降低的長(zhǎng)期存活率。在腦死亡供者中移植物的損傷可能是通過(guò)幾種途徑產(chǎn)生，其一是涉及血液動(dòng)力學(xué)事件，另一個(gè)是涉及器官(包括腎臟)的免疫應(yīng)答。`最近，已經(jīng)顯示在取得腎臟前用低劑量的多巴胺對(duì)供者進(jìn)行預(yù)處理可對(duì)移植物的功能具有有利的影響(Schnuelle P 等人，Effects of donor pre-treatment withdopamine on graft function after kidney transplantation:a randomized controlledtrial. JAM. 2009年9月9日;302 (10) : 1067-75)。但是，在腦死亡供者體內(nèi)改變的兒荼酚胺消除率使施用多巴胺變得困難，并且可以導(dǎo)致高血壓和心動(dòng)過(guò)速。此外，已經(jīng)建議使用化學(xué)修飾的多巴胺類(lèi)，特別是N-辛?；喟桶?NOD)，可以比多巴胺自身更好地適用于供者的預(yù)處理，并且還可以有利地應(yīng)用于器官保存溶液中(Losel RM 等人，N-octanoyl dopamine, a non-haemodynamic dopamine derivative, forcell protection during hypothermic organ preservation. PLoS One. 2010 年 3 月 16日；5(3):e9713;也參見(jiàn)W02009/015752A2)。這些衍生物的優(yōu)點(diǎn)是它們表現(xiàn)出強(qiáng)的還原能力，但同時(shí)它們?cè)诤艽蟪潭壬先狈ρ簞?dòng)力學(xué)活性，并且由于它們高于多巴胺的親脂性，其具有實(shí)質(zhì)上提聞的細(xì)胞攝取的潛能。然而，很難有效地遞送親脂性多巴胺衍生物。它們是化學(xué)不穩(wěn)定的，易于氧化，并且很難溶于水性介質(zhì)。作為混懸液，其不能注射或靜脈輸注，并且當(dāng)加入器官保存溶液中時(shí)，它們將沉淀并導(dǎo)致不可靠的效果。
雖然W02009/015752涉及使用增溶賦形劑或膠體系統(tǒng)來(lái)配制親脂性多巴胺衍生物的一般可能性，但其未公開(kāi)任何使用此類(lèi)賦形劑的多巴胺衍生物的具體組合物。其它提到NOD的文獻(xiàn)也未描述關(guān)于該化合物的可用的配制技術(shù)，例如Schnetze U等人，J.Cryobiol. vol. 53 (3), p. 375, 2006 和 Tsagogiorgas C 等人,Transplantation 卷 90 的增刊(2s), 2115, p. 37，2010。在運(yùn)輸和儲(chǔ)存過(guò)程中，器官和組織的保存通常是通過(guò)將其存放在保存溶液中并將其冷卻至僅高于凝固點(diǎn)來(lái)完成。普通的保存溶液是基于組氨酸-色氨酸-酮戊二酸(HTK)，目的是通過(guò)去除細(xì)胞外的鈉和鈣并且用組氨酸/組氨酸鹽酸化物進(jìn)行細(xì)胞外空間的充分緩沖，使得器官功能失活，從而延長(zhǎng)器官耐受含氧血中斷的時(shí)期?？蛇x擇的溶液是Euro-Collins(EC)溶液和威斯康辛大學(xué)(UW)溶液。后者模擬細(xì)胞內(nèi)液的特性，但還包含防止水腫的聚合物(羥乙基淀粉)，以及用于清除自由基的添加劑。如上文提到的，還建議向該器官灌注和保存混合物中加入多巴胺或親脂性多巴胺衍生物，以減少冷藏保存的損傷。移植排斥是移植失敗的另一個(gè)主要原因。通常，受者的免疫系統(tǒng)將移植物作為體內(nèi)的異物進(jìn)行攻擊并試圖破壞 它。通過(guò)仔細(xì)地對(duì)供者和受者進(jìn)行血清分型以確定最適合的配型，可以在某種程度上降低移植排斥的嚴(yán)重性和發(fā)生率。然而，一些排斥的偶發(fā)事件仍然發(fā)生在許多(如果不是大多數(shù))移植物受者身上，并且免疫應(yīng)答的嚴(yán)重性?xún)H能夠通過(guò)使用免疫抑制藥物來(lái)控制。受者的免疫反應(yīng)可以劃分為超急性、急性和慢性排斥。超急性排斥是受者與預(yù)存在于供者的抗體的補(bǔ)體介導(dǎo)的應(yīng)答。此類(lèi)反應(yīng)可以在數(shù)分鐘內(nèi)發(fā)生，并且移植物必須馬上移除以防止嚴(yán)重的系統(tǒng)免疫應(yīng)答和血液的廣泛凝集。超急性排斥的風(fēng)險(xiǎn)尤其是與腎臟移植相關(guān)。急性排斥涉及移植物中的T細(xì)胞和其它免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)。所述T細(xì)胞通過(guò)多種機(jī)制，引發(fā)移植組織中的細(xì)胞裂解，或產(chǎn)生導(dǎo)致組織壞死的細(xì)胞因子。由于在此類(lèi)反應(yīng)發(fā)生前T細(xì)胞必須首先分化，因此急性排斥通常僅在移植后潛伏一周或數(shù)周后開(kāi)始出現(xiàn)。急性排斥的最高風(fēng)險(xiǎn)是在最初三個(gè)月。急性排斥的嚴(yán)重性不一定都是很?chē)?yán)重的；排斥從某種程度上是可以通過(guò)適當(dāng)?shù)拿庖咭种漂煼刂频?。急性排斥事件的?fù)發(fā)和難以控制可以最終導(dǎo)致慢性移植排斥的出現(xiàn)，其綜合了大多數(shù)形式的對(duì)抗移植組織的慢性炎癥和免疫應(yīng)答。相關(guān)的病癥是慢性異體移植物血管病變，其描述了與移植組織的脈管系統(tǒng)纖維化相關(guān)的器官功能的長(zhǎng)期喪失。慢性抑制排斥是不可逆的且不能被有效治療。有效控制急性排斥反應(yīng)的免疫抑制藥物包括皮質(zhì)類(lèi)固醇類(lèi)、鈣神經(jīng)素抑制劑、mTOR抑制劑、抗增殖藥物和抗T細(xì)胞或B細(xì)胞的抗體，其中部分是靶向于特定的表面蛋白質(zhì)(例如CD20、CD25)。在預(yù)防和控制移植排斥中特別重要的是作為鈣神經(jīng)素抑制劑起作用的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)免疫抑制劑，例如環(huán)孢素A和他克莫司，或者mTOR抑制劑，例如西羅莫司和依維莫司。實(shí)際上，第一批大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物的出現(xiàn)為移植物受者帶來(lái)了實(shí)質(zhì)性的治療益處，特別是環(huán)孢素，其次是他克莫司。隨后，具有相關(guān)結(jié)構(gòu)和活性的化合物包括吡美莫司、依維莫司、西羅莫司、Deforolimus、依維莫司、坦羅莫司(temsirolimus)和佐他莫司(zotarolimus)。大多數(shù)(如果不是全部)用于免疫抑制的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物都是具有有問(wèn)題的生物利用度的難以溶解的化合物。其使用與實(shí)質(zhì)的不良反應(yīng)相關(guān)聯(lián)。例如，環(huán)孢素A不僅表現(xiàn)出顯著的腎毒性和肝毒性，還可能導(dǎo)致牙齦增生、驚厥、消化性潰瘍、胰腺炎、發(fā)燒、嘔吐、腹瀉、意識(shí)錯(cuò)亂、高膽固醇血癥、呼吸困難、麻木和麻刺感(特別是嘴唇)、瘙癢、高血壓和增強(qiáng)的(與所有免疫抑制劑類(lèi)似的)對(duì)條件性真菌和病毒感染的易感性。他克莫司可以引發(fā)心肌損害、高血壓、視力模糊、肝和腎臟問(wèn)題發(fā)作、震顫、高鉀血癥、低鎂血癥、高血糖、糖尿病、瘙癢、失眠和神經(jīng)學(xué)問(wèn)題，例如隨后可逆的腦病綜合征意識(shí)混亂、食欲缺乏、虛弱、抑郁、抽筋和神經(jīng)病。此外，有證據(jù)證明免疫抑制劑例如環(huán)孢素、他克莫司等與移植物受者體內(nèi)的惡性腫瘤(例如非霍奇金淋巴瘤和黑素瘤)的風(fēng)險(xiǎn)提高有關(guān)。該風(fēng)險(xiǎn)顯示與給藥方案和治療持續(xù)時(shí)間有關(guān)。為了進(jìn)一步增強(qiáng)異體移植物的生理功能并降低移植失敗的風(fēng)險(xiǎn)，需要改善供體的預(yù)處理以減少冷藏的局部缺血損害。此外，為了進(jìn)一步降低冷藏保存損傷的風(fēng)險(xiǎn)，需要改善移植物的保存直至移植。最后，為了將來(lái)自移植物的益處最大化并將嚴(yán)重排斥反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)最小化，還需要移植物受者更加有效且更好耐受的藥物治療。本發(fā)明滿(mǎn)足了這些需要，其目的在于提供供體預(yù)處理、異體移植物保存和受者處理的改進(jìn)，這些改進(jìn)克服了現(xiàn)有技術(shù)方法和組合物的一種或多種缺點(diǎn)。其它的目的根據(jù)本說(shuō)明書(shū)和專(zhuān)利權(quán)利要求中所述也能夠得到理解。發(fā)明簡(jiǎn)沭本發(fā)明提供了包含有效量的N-辛酰基多巴胺、生理學(xué)上可接受的水性溶劑以及生理學(xué)可接受的兩親的賦形劑的藥物組合物。在所述組合物中，N-辛?；喟桶肥且苑肿踊蚰z體的分散狀態(tài)存在。在本發(fā)明的組合物中，N-辛?；喟桶肥且匀芙獾男问揭?。例如，其可以配制為膠束溶液、膠體脂質(zhì)體分散體系、或者微乳劑。在膠束溶液的情況下，優(yōu)選地通過(guò)非離子型表面活性劑例如聚山梨酯來(lái)溶解。同時(shí)，配制該組合物以保護(hù)N-辛?；喟桶贩乐菇到?。雖然所述化合物與許多增溶賦形劑很難相容，但發(fā)明者已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，實(shí)際上某些非離子型表面活性劑以及某些形成囊的兩親性脂類(lèi)可以用于將N-辛?；喟桶放渲频饺芙獾那曳€(wěn)定的水性制劑中。所述組合物優(yōu)選地適用于胃腸外給藥。其可以向移植物供者全身性或局部給藥進(jìn)行預(yù)處理并防止局部缺血損害。根據(jù)其它實(shí)施方案，其在體外使用以保存異體移植物，從而將冷藏保存損傷最小化。對(duì)于此目的，例如可以將其加入常規(guī)器官保存介質(zhì)中。在另一項(xiàng)實(shí)施方案中，將N-辛?；喟桶废虍愺w移植物受者施用，例如經(jīng)靜脈注射施用。通常情況下，所述受者是用至少一種免疫抑制藥物(例如鈣神經(jīng)素抑制劑，例如環(huán)孢素)聯(lián)合治療的患者。附圖簡(jiǎn)沭


圖1顯示了與未處理的和常規(guī)(多巴胺)處理的細(xì)胞相比的用實(shí)施例1的組合物影響下的8小時(shí)冷儲(chǔ)存后心肌細(xì)胞中ATP損失的減輕。圖2顯示了與未處理的和常規(guī)(多巴胺)處理的細(xì)胞相比的在實(shí)施例1的組合物存在下的8小時(shí)冷儲(chǔ)存后LDH釋放的抑制。發(fā)明詳沭
根據(jù)本發(fā)明，其提供了包含有效量的N-辛?；喟桶?、生理學(xué)可接受的水性溶劑和生理學(xué)可接受的兩親性賦形劑的藥物組合物。在該組合物中，N-辛?；喟桶肥且苑肿踊蚰z體的分散狀態(tài)存在。發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，該組合物中的N-辛?；喟桶肥且匀芙獾男问酱嬖?，提供了迄今為止已知的更加有效地使用該化合物的方式。令人吃驚地是，本發(fā)明的溶解的制劑不僅使得所述化合物可以通過(guò)多種胃腸外途徑(包括靜脈注射或輸注)施用，而且還增強(qiáng)了其保護(hù)活性。同時(shí)，所述組合物同時(shí)克服了源自N-辛?；喟桶诽匦缘奶魬?zhàn)，所述特性使得配制和施用該化合物變得困難，特別是其弱水溶性和其顯著的化學(xué)不穩(wěn)定性。N-辛?；喟桶?，也稱(chēng)為N-辛?；?4-(2-氨基乙基)苯_1，2_ 二醇或N-辛?；?4-2-(3，4-二羥基苯基)乙基胺，是兒茶酚胺神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺的親脂性?；苌?。如本文所用的術(shù)語(yǔ)N-辛?；喟桶愤€包括其任何鹽、異構(gòu)體和N-辛酰基多巴胺的溶劑化物。有效量的含義是適合實(shí)現(xiàn)預(yù)期用途的效果的量。N-辛?；喟桶返挠行Я靠梢岳缭谄鞴俦４嫒芤汉凸┱哳A(yù)處理注射液兩者之間不同。生理學(xué)可接受的水性溶劑是水或化合物特別是藥物賦形劑的水溶液，該賦形劑就其引入的量和預(yù)期用途方面而言被認(rèn)為是安全的。例如，該水性溶劑可以是無(wú)菌的等滲氯化鈉溶液，或無(wú)菌的緩沖溶液。類(lèi)似地，生理學(xué)可接受的兩親性賦形劑是兩親性化合物，特別是表面活性劑，其可以用作藥物賦形劑，條件是在考慮到給藥途徑和頻率時(shí)，其至少在引入的水平和預(yù)期用途方面是安全且良好耐受的。分子分散狀態(tài)是指真實(shí)的分子溶液。在液體溶液中，溶質(zhì)的分子以個(gè)體溶解并被溶劑分子包圍。相反，膠體分散狀態(tài)的含義是物質(zhì)(此處是N-辛?；喟桶?以膠體大小的結(jié)構(gòu)存在，即它們實(shí)質(zhì)上比各自的分子大，但小到肉眼看不見(jiàn)。膠體通常具有大約I至500 納米的直徑。(H. Strieker, Physikalische Pharmazie,第 3版，第 440 頁(yè))。因此,膠體結(jié)構(gòu)實(shí)際上在光學(xué)顯微鏡 下看不見(jiàn)，且不會(huì)導(dǎo)致該溶液渾濁，但會(huì)導(dǎo)致乳光。多種類(lèi)型的膠體結(jié)構(gòu)已知存在于不同的膠體液體類(lèi)型中。在各向同性的膠體溶液中，該溶液的特性不論檢測(cè)的方向如何都是相同的。換言之，在各向同性狀態(tài)中，所有方向都是互相沒(méi)有區(qū)別的。例如，膠束溶液可以是各向同性的。在各向異性膠體溶液中，分子的朝向和/或排列導(dǎo)致該溶液的物理特性在不同檢測(cè)方向上不同。該各向異性溶液被稱(chēng)作液晶或液態(tài)結(jié)晶相，或中間相。在一項(xiàng)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含以該膠體分散狀態(tài)的N-辛?；喟桶?。分散于水性溶劑中的膠體顆粒通常包含兩親性賦形劑和活性成分。如本文所用的，膠體分散體系還可以指作膠體溶液。根據(jù)其它優(yōu)選的實(shí)施方案，該組合物包含選自非離子型表面活性劑的兩親性賦形劑?？伤幱玫姆请x子型表面活性劑包括，例如泰洛沙泊，泊洛沙姆類(lèi)例如泊洛沙姆188、泊洛沙姆407，普流尼克F68LF或Lutrol F68、普流尼克F127、普流尼克L-G2LF和普流尼克L62D，聚山梨酯類(lèi)例如聚山梨酯20、聚山梨酯60和聚山梨酯80，聚氧乙烯蓖麻油衍生物、山梨坦酯、聚乙二醇硬脂酸酯及其兩種或多種的混合物。在特定的實(shí)施方案中，非離子型表面活性劑是聚山梨酯。在其它特定的實(shí)施方案中，該非離子型表面活性劑是聚山梨酯80。任選地，該組合物包含兩種或多種兩親性賦形劑或表面活性劑。在一項(xiàng)優(yōu)選的實(shí)施方案中，組合使用了兩種或多種非離子型表面活性劑。例如聚山梨酯，如聚山梨酯20或80，可以與克列莫佛EL或克列莫佛RH組合。兩親性賦形劑或表面活性劑，或表面活性劑的組合，可以以能夠形成溶解N-辛?；喟桶返哪z束的量引入。一般而言，膠束是溶劑中兩親性分子的膠體聚集物。其可以是球狀，也可以是非常不同的形狀。在水性系統(tǒng)中，通常的球型膠束包含表面活性劑分子，其親水性部分與周?chē)娜軇┙佑|，將疏水分子區(qū)域隔離于膠束中心。難溶于水的親脂性化合物可以溶于此類(lèi)膠束的核心區(qū)域。為了發(fā)生膠束形成，表面活性劑的濃度必須高于臨界膠束濃度(CMC)。因此，如果目標(biāo)是膠束溶液，組合物中表面活性劑的量應(yīng)當(dāng)選擇高于該濃度。此外，表面活性劑的量應(yīng)當(dāng)選擇足夠高以便溶解引入的N-辛酰基多巴胺的量。同時(shí)，表面活性劑的量必須足夠低以避免在移植物供者、移植物自身或移植物受者中的不期望的作用。在一項(xiàng)特定的實(shí)施方案中，兩親性賦形劑的量是至少約0. 05重量％。根據(jù)其它實(shí)施方案，所述量分別是從約0.1重量％至約30重量％,或從約0. 5重量％至約20重量％。例如，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在0. 5重量％的水平，聚山梨酯20和聚山梨酯80各自能夠溶解大量的N-辛酰基多巴胺，例如40 μ m ο 1/mL。但是，如果該組合物是用作濃縮物加至用于組織和器官保存的市售溶液中時(shí)，該濃縮物自身還可以包含相對(duì)高濃度的兩親性賦形劑，這是因?yàn)閷⑾♂屢蛩乜紤]在內(nèi)。在其它實(shí)施方案中，N-辛?；喟桶放c兩親性賦形劑的比率是在約5:1至約1:50范圍內(nèi)選擇。在其它優(yōu)選的實(shí)施方案中，該組合物是不含有機(jī)溶劑或共溶劑，例如乙醇、甘油、丙二醇或聚乙二醇。根據(jù)另一項(xiàng)優(yōu)選的實(shí)施方案，該組合物可以包含少量的此類(lèi)溶劑或共溶劑，例如最多約2重量％。在需要或合適的情況下，該組合物可以包含其它無(wú)活性的藥物成分。例如，其可以包含一種或多種用于調(diào)整制劑張度的賦形劑。優(yōu)選將該組合物調(diào)整至表現(xiàn)出大約310m0smol/kg的滲透壓,例如分別在約200至約450m0smol/kg的范圍，或者在約250至約400m0smol/kg的范圍，或者在約280至約350m0smol/kg的范圍。如果預(yù)期的用途是在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中保存異體移植物，應(yīng)當(dāng)保證，任選地在用常規(guī)器官保存溶液稀釋后，該組合物具有生理學(xué)滲透壓約300至330m0smOl/kg。用于調(diào)整滲透壓的適合的賦形劑包括，例如鹽類(lèi)、糖類(lèi)、糖醇類(lèi)和氨基酸類(lèi)。所述鹽類(lèi)中，緩沖鹽或氯化鈉是特別適合的。可用的糖類(lèi)和糖醇類(lèi)包括，例如葡萄糖、棉子糖、海藻糖、山梨醇和甘露醇，這里提到的僅代表其中幾種。此外，該組合物還可包含一種或多種用于調(diào)整pH值的賦形劑，該pH值優(yōu)選的選自約pH3至約pH8范圍內(nèi)。更加優(yōu)選地，該pH不高于大約7,例如從約pH4至約pH7. O,或從約pH4. 5至約pH6. 5。如果預(yù)期的用途是在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中保存異體移植物，應(yīng)當(dāng)保證，任選地在用常規(guī)器官保存溶液稀釋后，該組合物表現(xiàn)出大約7. O至7. 5的pH。用于調(diào)整pH的適合的賦形劑包括生理學(xué)可接受的有機(jī)或無(wú)機(jī)酸、堿和緩沖鹽。所述的鹽可以同時(shí)作為生理學(xué)電解質(zhì)來(lái)起作用，例如鈉、鉀、鎂和鈣鹽。該組合物可以進(jìn)一步包含一種或多種穩(wěn)定劑，例如絡(luò)合或螯合劑如EDTA，和/或抗氧化劑例如維生素E或維生素E衍生物、抗壞血酸、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、沒(méi)食子酸酯、丁羥茴醚、丁羥甲苯或乙酰半胱氨酸；增粘劑，例如水溶性聚合物；防腐劑(當(dāng)該組合物以多劑量容器包裝且用于胃腸外給藥時(shí))；乳糖酸、別嘌呤醇、谷胱甘肽、腺苷；氨基酸，例如組氨酸、色氨酸、谷氨酸、氨基谷氨酸或酮戊二酸。任選地，本發(fā)明可以通過(guò)配制粉末或液態(tài)濃縮物來(lái)進(jìn)行，其中如本文所述的組合物可以重構(gòu)。例如，為獲得延長(zhǎng)的儲(chǔ)存期，將該組合物的固體成分配制成無(wú)菌凍干粉末是有用的，其可以在使用前溶解于或分散于合適的水性載體或稀釋劑中?；蛘撸梢耘渲瞥梢后w濃縮物，經(jīng)用水性介質(zhì)稀釋?zhuān)@得最終的組合物用于移植物供者預(yù)處理、異體移植物保存或移植物受者處理。該液體濃縮物不僅具有使其易于制備、運(yùn)輸、存儲(chǔ)和處理的低重量和體積的優(yōu)點(diǎn)，而且還提供了在存儲(chǔ)過(guò)程中避免偏離例如PH或重量克分子滲透壓濃度的生理學(xué)參數(shù)的機(jī)會(huì)，例如考慮到延長(zhǎng)的存儲(chǔ)期。隨后通過(guò)將所述濃縮物適當(dāng)?shù)叵♂寔?lái)實(shí)現(xiàn)其應(yīng)用所需的生理學(xué)特性。在另一項(xiàng)實(shí)施方案中，該組合物是微乳劑的形式。如本文所用的，微乳劑是澄清的、熱力學(xué)穩(wěn)定的、光學(xué)各向同性的親 脂性成分、親水性成分和兩親性成分的混合物。通常情況下，當(dāng)將各成分組合并彼此混合時(shí)，微乳劑自發(fā)形成，不需要在正常情況下形成“普通”乳液所需要的高能量輸入。微乳劑可以具有分散在親水相中的膠體親脂相，或者以膠體狀分散在親脂相中的親水相。分散相的大小通常在約5nm至約400nm范圍內(nèi)，且最經(jīng)常是在約200nm以下。在本發(fā)明的一項(xiàng)優(yōu)選的實(shí)施方案中，顆粒尺寸是從約5nm至約lOOnm。由于其流變性質(zhì)，該微乳劑可以是液體或凝膠的形式，即以液體或半固體形式。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，該微乳劑是液體形式。如果使用微乳劑，親脂性成分優(yōu)選地選自其自身適用于胃腸外使用的賦形劑。例如，可以使用高度純化的甘油三酯油或半合成的中鏈甘油三酯。在其它實(shí)施方案中，兩親性賦形劑是形成囊泡的磷脂。在該情況下，所述組合物設(shè)計(jì)為脂質(zhì)體的膠體分散體系，其中脂質(zhì)體容納N-辛?；喟桶?。如本文所用的，脂質(zhì)體是從至少一個(gè)雙層結(jié)構(gòu)形成的囊泡，其中該雙層結(jié)構(gòu)由聚集的(或裝配的)兩親性脂類(lèi)構(gòu)成。該雙層結(jié)構(gòu)表現(xiàn)出與生物膜的某種類(lèi)似性，其中親水性朝向囊泡的內(nèi)側(cè)和外側(cè)，而親脂性區(qū)域夾在這些親水性區(qū)域的中間。較大的脂質(zhì)體通常具有兩個(gè)或多個(gè)同心雙層結(jié)構(gòu)。小的脂質(zhì)體傾向于為球型，但較大的囊泡可以以多種形狀存在。根據(jù)所選擇的制備方法和生產(chǎn)條件，所得的脂質(zhì)體可以描述為多層囊泡(MLV)、小單層囊泡(SUV)或大單層囊泡(LUV)。MLV與SUV和LUV的不同在于MLV具有兩個(gè)或多個(gè)脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)。因此，MLV表現(xiàn)為在裝載溶于或結(jié)合于囊泡膜的脂溶性區(qū)域的脂溶性藥物中特別有用。相反，SUV和LUV對(duì)于將親水性化合物包裹于脂質(zhì)體的水性隔室內(nèi)尤其有用。通常情況下，MLV的半徑是從約200nm直至數(shù)微米。SUV通常在約80nm至約200-300nm范圍，而LUV通常理解為平均大于約200-300nm。在本發(fā)明的內(nèi)容范圍內(nèi)，所述半徑應(yīng)當(dāng)理解為由激光衍射或光子相關(guān)光譜法檢測(cè)的z平均值。在本發(fā)明的內(nèi)容范圍內(nèi)，應(yīng)當(dāng)使用膠體脂質(zhì)體，且非常大的MLV不屬于此范疇。構(gòu)成脂質(zhì)體的兩親性脂類(lèi)通常包含至少一種磷脂。磷脂是包含磷酸基團(tuán)的兩親性脂類(lèi)，其帶有負(fù)電荷并因此基本上是親水的。磷脂可以劃分為甘油磷酸酯類(lèi)(或磷酸甘油酯，其特征在于存在甘油基部分)或鞘磷脂類(lèi)(或神經(jīng)酰胺類(lèi)，例如鞘磷脂)。脂質(zhì)體可以包含天然的、半合成的和/或合成的磷脂類(lèi)。通常情況下，脂質(zhì)體包含至少一種甘油磷酸酯(或磷酸甘油酯)。該甘油磷酸酯類(lèi)實(shí)際上是在脂質(zhì)體中最常使用的形成囊泡的脂類(lèi)。通常使用的甘油磷酸酯類(lèi)包括由天然卵磷脂(例如大豆或雞蛋卵磷脂)衍生的那些，或(部分)來(lái)自其水合產(chǎn)物。卵磷脂類(lèi)包含大量的磷脂酰膽堿類(lèi)，而且還包含少量的磷酸、膽堿、脂肪酸、甘油、糖脂類(lèi)、甘油三酯類(lèi)、磷脂酰乙醇胺類(lèi)和磷脂酰肌醇。與磷脂酰乙醇胺類(lèi)和磷脂酰甘油類(lèi)相反，磷脂酰膽堿類(lèi)是包含膽堿作為首基團(tuán)的甘油磷酯。在磷脂酰膽堿類(lèi)中，甘油部分的兩個(gè)羥基基團(tuán)經(jīng)酯鍵與酰基連接，所述酰基通常衍生自中鏈至長(zhǎng)鏈脂肪酸。用作脂質(zhì)體組分的磷脂酰膽堿類(lèi)(以及磷脂酰乙醇胺類(lèi)和磷脂酰甘油類(lèi))中常見(jiàn)的酰基基團(tuán)包括豆蘧?；⒆貦磅；⒂仓；陀王；?。由于磷酸基團(tuán)的負(fù)電荷和膽堿的正電荷，磷脂酰膽堿類(lèi)通常是兩性離子(有時(shí)也認(rèn)為是中性)。磷脂酰乙醇胺類(lèi)在大的pH范圍內(nèi)也是兩性離子，但在堿性環(huán)境下也可以以陰離子存在。磷脂酰甘油類(lèi)是陰離子。除了一種或多種甘油磷酸酯類(lèi)以外，脂質(zhì)體還可以包含一種或多種脂類(lèi)，其自身不能形成雙層結(jié)構(gòu)，但其修飾或穩(wěn)定該雙層結(jié)構(gòu)。此類(lèi)膜修飾脂類(lèi)的一個(gè)實(shí)例是膽固醇。脂質(zhì)體和脂質(zhì)體制劑的制備和鑒定方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。通常，當(dāng)兩親性脂類(lèi)與水結(jié)合后將自發(fā)地形成多層囊泡，然而小單層囊泡的形成通常需要包括大量能量輸入例如超聲或高壓勻漿的處理過(guò)程。制備和鑒定脂質(zhì)體的方法已經(jīng)例如在s. Vemuri等人[Preparation and characterization of liposomes as therapeutic deliverysystems:a review. Pharm Acta Helv. 1995, 70 (2) :95-111]中有描述。在已知的脂質(zhì)體中，可以按照本發(fā)明使用的那些基本上具有膠體尺寸，S卩，它們的平均顆粒尺寸低于大約500nm。還優(yōu)選直徑分別最多大約300nm,或不大于200nm。該平均顆粒尺寸通常要求經(jīng)過(guò)孔徑為0. 22 μ m的過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾除菌，當(dāng)所述組合物對(duì)于經(jīng)受加熱滅菌不夠穩(wěn)定時(shí)，這一點(diǎn)具有顯著優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明的組合物可以用作藥物或用作保存和存儲(chǔ)異體移植器官或組織的液體介質(zhì)。當(dāng)用于異體移植物保存時(shí)，其(任選地在重構(gòu)后或用常規(guī)器官儲(chǔ)存溶液稀釋后)可以在將器官移出供者前和/或剛剛移出后立即直接注射或輸注到器官的血管系統(tǒng)。因此，將該器官的血管系統(tǒng)用所述組合物沖洗，其隨后保留在血管系統(tǒng)中用于儲(chǔ)存和運(yùn)輸。在在受者體內(nèi)植入后和灌注前，該移植物應(yīng)當(dāng)使用生理學(xué)血漿容積膨脹劑或其它類(lèi)似物質(zhì)進(jìn)行沖洗，以除去所述保存和儲(chǔ)存溶液?；蛘撸梢詫⒃摻M合物進(jìn)行全身性注射或輸注(例如通過(guò)靜脈)到供者體內(nèi)。按照該用途，用N-辛?；喟桶穼?duì)供者進(jìn)行預(yù)處理特別有用，特別是與僅在異體移植物移出后應(yīng)用相比，所述化合物的保護(hù)功能可以更早起作用。此外，在(例如從腦死亡供者)取出多個(gè)器官情況下，該方案能夠?qū)λ璧娜科鞴偻瑫r(shí)啟動(dòng)保護(hù)。在其它實(shí)施方案中，該組合物用作向移植物受者施用的藥物，特別是用于預(yù)防和治療移植排斥的目的。令人吃驚地是，發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)N-辛?；喟桶吩谥委熡杏玫臐舛认履軌蛞种芓細(xì)胞增殖。抑制出現(xiàn)在早期T細(xì)胞受體信號(hào)傳遞事件的下游，并且與NF K B (活化B細(xì)胞的核因子K輕鏈增強(qiáng)子)和AP-1 (活化蛋白I)的抑制相關(guān)聯(lián)。發(fā)現(xiàn)所述效果取決于氧化還原活性，即，N-辛?；喟桶吩谘趸髥适銽細(xì)胞抑制能力。

此外，還意外地發(fā)現(xiàn)N-辛酰基多巴胺和鈣神經(jīng)素抑制劑如環(huán)孢素A在抑制T細(xì)胞中發(fā)揮協(xié)同作用，因此在N-辛?；喟桶反嬖谙掠糜诨旧弦种芓細(xì)胞所需的鈣神經(jīng)素抑制劑的濃度遠(yuǎn)低于不含N-辛酰基多巴胺的情況。基于該發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明尤其指出接受鈣神經(jīng)素抑制劑如環(huán)孢素A治療的移植物受者可以有利地用N-辛酰基多巴胺進(jìn)行聯(lián)合治療。同時(shí)施用N-辛?；喟桶肥沟免}神經(jīng)素抑制劑的劑量顯著減少，其導(dǎo)致了劑量依賴(lài)性的鈣神經(jīng)素抑制劑不良反應(yīng)的發(fā)生率和嚴(yán)重性實(shí)質(zhì)上降低的優(yōu)點(diǎn)。例如，在環(huán)孢素A和他克莫司的情況下，本發(fā)明提供了降低特別是其腎毒性可能性的方法，腎毒性是其在移植物受者治療應(yīng)用中的一項(xiàng)主要缺陷。例如，當(dāng)患者接受鈣神經(jīng)素抑制劑環(huán)孢素A治療時(shí)，對(duì)于器官移植物受者口服環(huán)孢素A的通常最初每日劑量是約10-14mg/kg體重，而對(duì)于骨髓移植物受者或已經(jīng)存在移植物抗宿主反應(yīng)的受者是約12. 5-15mg/kg,該劑量隨后降至每日2_6mg/kg范圍的維持劑量。通常情況下，目標(biāo)是100_400ng/mL的波谷血液水平。然而在本發(fā)明情況下，其中環(huán)孢素A與N-辛?；喟桶方M合，環(huán)孢素A的初始劑量可以降至低于10mg/kg，例如從約2至低于10mg/kg,或從約4至約8mg/kg。維持劑量可以分別降至從約I至約4mg/kg,例如獲得波谷血衆(zhòng)水平不高于約200ng/mL,或者不高于約150ng/mL,或甚至低于100ng/mL。某些情況下，在N-辛?；喟桶反嬖谙率褂铆h(huán)孢素A，不高于約80ng/mL的波谷水平將證實(shí)能夠滿(mǎn)足移植排斥中的有效的維持治療。在使用其它鈣神經(jīng)素抑制劑例如他克莫司的情況中，劑量減少以類(lèi)似的方式實(shí)現(xiàn)。一般而言，推薦的標(biāo)準(zhǔn)每日劑量可以減少約20%或更多，或者減少約30%或更多，或者甚至減少50%或更多。在移植物受者的治療中，N-辛?；喟桶罚芜x地以如上文所述組合物的形式，可通過(guò)導(dǎo)致N-辛?；喟桶返娜硇岳没蛘咴谝浦参镏芯植坷玫娜魏瓮緩竭M(jìn)行施用。具體而言，N-辛?；喟桶坊虮景l(fā)明的組合物可以經(jīng)胃腸外或口服施用。如本文所用的，胃腸外施用是指任何經(jīng)注射或輸注給藥的侵入性給藥，包括靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、局部、管腔內(nèi)和真皮內(nèi)給藥。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述途徑選自靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、皮下和肌內(nèi)給藥。 對(duì)于口服給藥，N-辛?；喟桶房梢岳缡褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)藥物賦形劑配制成片劑、硬膠囊或軟凝膠。其它實(shí)施方案將根據(jù)以下實(shí)施例而變得顯而易見(jiàn)，實(shí)施例用于在某些其主要方面舉例說(shuō)明本發(fā)明，而不是限定其范圍。
實(shí)施例實(shí)施例1用聚山梨酯80 (吐溫80)作為兩親性賦形劑來(lái)制備N(xiāo)-辛?；喟桶返娜芙獾闹讫RU。簡(jiǎn)言之，將N-辛酰基多巴胺和聚山梨酯80加入等滲的(0.9重量％)氯化鈉溶液中，以獲得1. 116mg/mL(4ymo 1/mL)濃度的N-辛?；喟桶泛?mg/mL濃度的聚山梨酯。將pH調(diào)至pH6. 5。將該混合物裝入小瓶中，用橡皮塞和鋁蓋密封，并在121° C下高壓滅菌10分鐘，隨后在冷卻過(guò)程中振蕩。得到無(wú)色、澄清或輕微乳光的溶液。該溶液在室溫下至少4周保持物理和化學(xué)穩(wěn)定。實(shí)施例2
與實(shí)施例1類(lèi)似，用泊洛沙姆407 (普流尼克127)作為兩親性賦形劑配制溶解的N-辛?；喟桶分苿?。使用相同的量和方法。再次獲得穩(wěn)定且僅有輕微乳光的液體。實(shí)施例3重復(fù)實(shí)施例1，除了將N-辛酰基多巴胺和聚山梨酯的量升至10倍(分別升至
11.16mg/mL和50mg/mL)。再次獲得無(wú)色、澄清或輕微乳光且穩(wěn)定的溶液，令人驚訝的證明了小濃度的聚山梨酯能夠溶解治療相關(guān)量的N-辛酰基多巴胺。實(shí)施例4重復(fù)實(shí)施例1和3，除了使用O. 189mg/mL濃度的乙酰半胱氨酸作為另外的賦形劑。該混合物的PH是4. 5。所得液體是無(wú)色且僅有輕微乳光。在脅迫條件下，其比實(shí)施例1和3的制劑在更長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持無(wú)色。實(shí)施例5 將含有濃度為11. 16mg/mL的N-辛?；喟桶返膶?shí)施例4的制劑的兩個(gè)樣品分別與威斯康星大學(xué)溶液(Viaspan或UW)或組氨酸-色氨酸-酮戊二酸(HTK)溶液(Custodiol)以1:4(1部分的本發(fā)明組合物加4部分的常規(guī)溶液)的體積比混合。在4° C下117小時(shí)后，該混合物保持澄清，并未顯示出N-辛?；喟桶返难趸卣?，而該氧化通常在與UW或HTK混合后非常迅速發(fā)生，導(dǎo)致產(chǎn)生褐色-粉紅色。實(shí)施例6將N-辛酰基多巴胺(11. 16mg/mL)和大豆卵磷脂(Lipoid S75) (50mg/mL)加入葡萄糖水溶液(5重量％)。將pH調(diào)至pH6. 5。將該混合物超聲4分鐘，并隨后在121° C高壓滅菌10分鐘。冷卻后，得到幾乎澄清、僅有輕微乳光的液體。由于卵磷脂，其顏色輕微發(fā)黃。實(shí)施例7重復(fù)實(shí)施例6，此外使用O. 189mg/mL濃度的乙酰半胱氨酸作為另外的賦形劑。該混合物的pH是4. 5。所得液體在物理和化學(xué)上穩(wěn)定。實(shí)施例8將N-辛?；喟桶?223. 2mg)、聚山梨酯80(1，OOOmg)和乙醇(50mg)稱(chēng)重，混合并加熱至121° C持續(xù)10分鐘。隨后，將該混合物在振蕩下冷卻至室溫。將所得濃縮物用注射用水或滅菌的等滲氯化鈉溶液以多種比例稀釋?zhuān)极@得澄清且基本上無(wú)色的溶液。實(shí)施例9檢測(cè)按照實(shí)施例1所得的制劑是否能夠抑制TNF-α介導(dǎo)的炎癥。將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)在不存在或存在多種濃度的N-辛?；喟桶分苿┑那闆r下用TNF-α (腫瘤壞死因子α)刺激。進(jìn)行Affymetrix基因表達(dá)譜、定量PCR、蛋白質(zhì)印跡法和NF-K B活化來(lái)評(píng)價(jià)本發(fā)明組合物的抗炎能力。作為對(duì)比物，也檢測(cè)不含表面活性劑的N-辛?；喟桶返乃苑稚Ⅲw系(其不是本發(fā)明的實(shí)施方案)。結(jié)果，基因表達(dá)譜顯示在這些粘附分子和炎癥趨化因子中，許多促炎癥反應(yīng)基因被所述組合物下調(diào)。盡管HO-1 (血紅素氧化酶I)被N-辛酰基多巴胺強(qiáng)烈地上調(diào)，但是HO-1表達(dá)對(duì)抗炎效果不發(fā)揮作用。雖然HO-1已經(jīng)被Iy M的N-辛?；喟桶凤@著誘導(dǎo)，但抑制VCAM-1 (血管細(xì)胞粘附分子-1)表達(dá)需要50 μ M所述化合物。除了 HO-1外，屬于泛素蛋白酶體系統(tǒng)(UPS)例如去泛素化酶Ε3-連接酶類(lèi)和蛋白酶體亞單位的基因被所述組合物顯著地上調(diào)。其不抑制I K B α (B細(xì)胞抑制物中的K輕鏈多肽基因增強(qiáng)子的核因子，α)的降解，但能夠抑制持續(xù)的NFk B活化。作為對(duì)比物的制劑的效果更低，即，需要實(shí)質(zhì)上更高的濃度以實(shí)現(xiàn)相同的效果。可以從這些結(jié)果得出結(jié)論，本發(fā)明的組合物顯示出有效的抗炎作用。由于移植前損傷嚴(yán)重地影響移植結(jié)果，該組合物將對(duì)于供者預(yù)處理以減少腦死亡引發(fā)的炎癥和保持器官質(zhì)量(尤其是在長(zhǎng)期冷藏保存后)有用。實(shí)施例10檢測(cè)根據(jù)實(shí)施例3所得的制劑是否在體內(nèi)具有抗炎作用。將急性腎衰竭(ARF)的大鼠用所述組合物(相當(dāng)于O. 67mg的N-辛?；喟桶?靜脈推注進(jìn)行預(yù)處理。在I或5天后采集腎臟。檢測(cè)腎臟功能。經(jīng)免疫組織化學(xué)和EMSA(電泳遷移位移試驗(yàn))檢測(cè)腎臟炎癥。結(jié)果，本發(fā)明組合物相對(duì)于鹽水對(duì)照物顯著提高了腎臟功能。免疫組織化學(xué)顯示相對(duì)于對(duì)照物在處理的大鼠中單核細(xì)胞數(shù)量減少。此外，在用所述組合物處理的腎臟組織中NFk B下調(diào)。因此，其證明該組合物在體內(nèi)具有有效的抗炎作用。其施用不僅減緩腎臟功能的惡化，而且在缺血再灌注情況中減少腎臟炎癥。實(shí)施例11檢測(cè)根據(jù)實(shí)施例1所得的制劑是否能夠影響T細(xì)胞增殖。使用細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，其中新鮮分離的T細(xì)胞經(jīng)抗-CD3/抗-CD28小珠多克隆活化。將該細(xì)胞在存在或不存在本發(fā)明組合物的不同稀釋液的情況下增殖至少10天。在第3、5、7和10天通過(guò)3H-胸苷摻入來(lái)檢測(cè)T細(xì)胞增殖。在該模型中，T細(xì)胞增殖在第3天最高并在第10天逐漸下降。在所述組合物存在下，T細(xì)胞增殖有劑量依賴(lài)性的抑制，其根據(jù)所使用的濃度是可逆的。例如，25 μ M濃度的N-辛?；喟桶窙](méi)有作用，50 μ M在第3天抑制T細(xì)胞增殖(此后T細(xì)胞開(kāi)始增殖)，在100 μ M，T細(xì)胞增殖在第3、5天抑制并在第7天部分地抑制。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)抑制作用取決于氧化還原活性，因?yàn)橐种谱饔糜捎贜-辛酰基多巴胺的氧化而消除，并且在結(jié)構(gòu)相關(guān)的缺乏氧化還原活性的化合物中沒(méi)有觀察到抑制作用。重復(fù)該試驗(yàn)，此外將新鮮分離的T細(xì)胞用抗⑶3/抗-⑶28抗體在稀釋成50 μ M濃度的N-辛?；喟桶泛投喾N濃度的環(huán)孢素A或他克莫司存在下刺激。將類(lèi)似濃度的環(huán)孢素A或他克莫司在該組合物不存在的情況下也進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果，環(huán)孢素A和他克莫司均為劑量依賴(lài)性抑制T細(xì)胞增殖，在10 μ M的環(huán)孢素A和1μ M的他克莫司下為最大抑制率。當(dāng)存在50 μ M的Ν_辛酰基多巴胺時(shí)，T細(xì)胞增殖在IOnM的環(huán)孢素A和InM的他克莫司下仍然被完全抑制?？紤]到事實(shí)上50 μ M的N-辛?；喟桶穯为?dú)存在時(shí)僅在第3天部分地抑制T細(xì)胞增殖并在隨后不抑制，這意味著N-辛?；喟桶泛外}神經(jīng)素抑制劑協(xié)同作用抑制T細(xì)胞。事實(shí)上，50 μ M的N-辛酰基多巴胺可以減少用于完全抑制T細(xì)胞所需的鈣神經(jīng)素抑制劑的量至少1000倍。這證明了鈣神經(jīng)素抑制劑的需要量可以被N-辛酰基多巴胺減少，而且不影響免疫抑制。由于鈣神經(jīng)素抑制劑的腎毒性與其劑量直接相關(guān)，與N-辛?；喟桶方M合的低劑量的環(huán)孢素A或他克莫司能夠保持有效， 但降低了腎毒性的發(fā)生率。實(shí)施例12將心肌細(xì)胞從新出生的大鼠中新鮮分離并培養(yǎng)3天。隨后，將其在4° C下在不存在或存在按照實(shí)施例1配制的多種濃度的多巴胺或N-辛?；喟桶返那闆r下儲(chǔ)存8小時(shí)。8小時(shí)冷卻保存后，檢測(cè)ATP水平和LDH釋放，并在此后將心肌細(xì)胞重新加溫，測(cè)定每孔的收縮速率和ATP再生。結(jié)果，8小時(shí)冷卻保存后的ATP水平檢測(cè)表明，所有處理過(guò)的心肌細(xì)胞與未處理的細(xì)胞相比顯示出劑量依賴(lài)性的ATP損失的減輕(圖1)。本發(fā)明組合物的作用與多巴胺組合物相比在更低得多的劑量下觀察到。并且，重新加溫后的ATP再生在處理過(guò)的細(xì)胞中相對(duì)于未處理的細(xì)胞更快。8小時(shí)冷卻保存后的LDH釋放在處理過(guò)的細(xì)胞中被抑制，但是N-辛酰基多巴胺制劑在低濃度時(shí)更加有效(圖2)。重新加溫心肌細(xì)胞后，在處理過(guò)的細(xì)胞中收縮速率表現(xiàn)出顯著改善的速率。該結(jié)果證明，根據(jù)本發(fā)明配制的N-辛酰基多巴胺可以防止心肌細(xì)胞的冷卻保存損傷，并在非常低的劑量下仍具有保護(hù)作用，這與常規(guī)的多巴胺處理不同。由于冷卻保存和再灌注損傷對(duì)于心臟移植結(jié)果是不利的預(yù)測(cè)因素，這說(shuō)明本發(fā)明的組合物對(duì)于供者預(yù)處理 有用。
權(quán)利要求
1.藥物組合物，其包含 (a)有效量的N-辛酰基多巴胺； (b)生理學(xué)可接受的水性溶劑；和 (C)生理學(xué)可接受的兩親性賦形劑； 其中N-辛酰基多巴胺是以分子或膠體的分散狀態(tài)存在。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其是膠束溶液或微乳劑形式。
3.如權(quán)利要求2所述的組合物，其中兩親性賦形劑是非離子型表面活性劑。
4.如權(quán)利要求3所述的組合物，其中非離子型表面活性劑是聚山梨酯。
5.如權(quán)利要求1所述的組合物，其是脂質(zhì)體分散體系形式。
6.如權(quán)利要求5所述的組合物，其中兩親性賦形劑是形成囊泡的磷脂。
7.如任何上述權(quán)利要求所述的組合物，其具有不高于約7的pH。
8.如任何上述權(quán)利要求所述的組合物，其還包含酸和/或抗氧化劑。
9.如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的組合物，其用作藥物或用作器官或組織保存的制劑。
10.用于權(quán)利要求9所述用途的如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的組合物，其中該組合物是向器官或組織供者施用。
11.用于權(quán)利要求9所述用途的如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的組合物，其中該組合物是向器官或組織移植物受者施用。
12.用于權(quán)利要求11所述用途的如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的組合物，其中該組合物是經(jīng)胃腸外施用。
13.非水性的藥物組合物，其包含有效量的N-辛?；喟桶泛蜕韺W(xué)可接受的兩親性賦形劑，其適合于與生理學(xué)可接受的水性溶劑混合后獲得如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的組合物。
14.N-辛酰基多巴胺，用于與鈣神經(jīng)素抑制劑聯(lián)合處理來(lái)預(yù)防在移植物受者中的器官或組織的移植排斥。
15.用于如權(quán)利要求14所述用途的N-辛?；喟桶罚渲锈}神經(jīng)素抑制劑的劑量低于在不存在N-辛?；喟桶仿?lián)合處理的情況下的其有效劑量。
全文摘要
本發(fā)明提供了新的用于儲(chǔ)存和保存移植物例如器官或組織異體移植物的水性組合物。該組合物包含以溶解形式的化合物N-辛酰基多巴胺。該組合物還可以作為移植物供者的預(yù)處理施用。此外，其可以用于移植物受者，任選地與免疫抑制劑組合。
文檔編號(hào)A61P37/06GK103068370SQ201180039733
公開(kāi)日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2011年8月16日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月17日
發(fā)明者B·泰辛格, S·泰辛格, B·京特 申請(qǐng)人:諾瓦利克有限責(zé)任公司