專利名稱：一種竹葉蘭中的呋喃黃酮類化合物、制備方法及應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于植物化學研究領域，更具體的說，本發(fā)明涉及一種竹葉蘭中分離得到的呋喃黃酮類新化合物，該化合物的制備方法以及其在抗癌藥物中的應用。
背景技術：
竹葉蘭屬于蘭科竹葉蘭屬植物，喜暖濕，耐瘠薄，喜光，不耐蔭。竹葉蘭最先被發(fā)現(xiàn)于尼泊爾，該屬的植物目前有8種，分布很廣泛，從尼泊爾、斯里蘭卡、泰國、老撾、越南、柬埔寨到中國、日本、馬來西亞都能夠看到它的蹤跡。在我國西雙版納，當?shù)氐拇鲎逋验_著美麗花朵的竹葉蘭叫做“農(nóng)尚嗨”，是一種盡人皆知的良藥。竹葉蘭具有清熱解毒，祛風除濕，散瘀止痛，消炎，利尿的作用，用于治療黃疸，熱淋，水腫，腳氣水腫，疝氣腹痛，風濕痹痛，胃痛，尿路感染，毒蛇咬傷，瘡癰腫毒，跌打損傷等；最新研究還表明竹葉蘭乙醇提取物 具有明顯的抗腫瘤活性。竹葉蘭中的主要活性成分有菲類化合物、聯(lián)芐類化合物、萜類化合物、黃酮類化合物、留醇等。黃酮類化合物泛指兩個具有酚羥基的苯環(huán)(A-與B-環(huán))通過中央三碳原子相互連結而成的一系列化合物，其基本母核為2-苯基色原酮。黃酮為人類飲食中含量最豐富的一類多酚化合物，廣泛存于水果、蔬菜、谷物、根莖、樹皮、花卉、茶葉和紅葡萄酒中。除突出的抗氧化特性以外，類黃酮還具有預防動脈粥樣硬化、抗炎、抗過敏、抗病毒特性、抗腫瘤等多種生物活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從竹葉蘭(Arundina graminifolia)中分離得到的新呋喃黃酮類化合物。本發(fā)明的另一個目的是提供一種從竹葉蘭中從竹葉蘭(Arundina graminifolia)中分離得到所述化合物的方法。本發(fā)明的進一步的目的是所述化合物的細胞毒活性及其在抗腫瘤藥物中的應用。本發(fā)明的目的通過下述技術方案予以實現(xiàn)。除非另有說明，本發(fā)明中所采用的百分數(shù)均為質量百分數(shù)。A.本發(fā)明所述化合物是從竹葉蘭(Arundina graminifolia)中分離得到,具有下
述結構式
H07^y" 6[^Y°Me
°tV0t^3'
OH 〇該化合物的命名為
5-hydroxy-8-(2-hydroxyethyl)-3_methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4H-furo[2,3_h]chromen-4-one。B.本發(fā)明所述的竹葉蘭中呋喃黃酮類化合物的制備方法采用以下步驟(I)竹葉蘭樣品粉碎，然后以95wt%的乙醇用超聲提取，合并提取液；(2)提取液減壓蒸干溶劑得到浸膏，浸膏用硅膠拌樣，用硅膠柱層析初分，然后采用制備高效液相色譜進一步分離，即得到所需的化合物。本發(fā)明制備所述竹葉蘭中呋喃黃酮類化合物的具體方案為①竹葉蘭全株粉碎到20 30目，取粉碎后的樣品用95wt%的乙醇用超聲提取4次，超聲提取時間為30 60min，合并每次的提取液，靜置濾除沉淀物；
②對提取液采用減壓方式將溶劑全部蒸干，得到浸膏；浸膏用甲醇溶解后，用80 100目的硅膠拌樣，然后用100 200目硅膠柱層析分離，采用氯仿-丙酮梯度洗脫，氯仿-丙酮梯度洗脫依次分別為純氯仿、20 1、9 1、8 2、3 2、1 1,20 I、純丙酮，其中氯仿-丙酮的8 2洗脫部分用高效液相制備色譜分離，分離所得到的粗品再次用凝膠柱層析純化，即得到所需的化合物純品。C.本發(fā)明化合物通過核磁共振氫譜、碳譜、二維譜，以及紅外光譜、紫外光譜、質譜等技術鑒定結構。D.本發(fā)明對所述的新化合物進行了細胞毒活性篩選，該化合物對人肝癌細胞(Bel-7402)有較好的活性，對人慢性粒細胞白血病細胞株(K562)細胞和胃癌細胞株(MKN-28)也有一定活性。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明化合物結構簡單，人工合成容易實現(xiàn)，產(chǎn)業(yè)化前景好，該化合物對Bel-7402細胞具有較好的細胞毒活性，對K562細胞和MKN-28細胞也有一定活性，可作為抗腫瘤藥物開發(fā)的先導性化合物。


圖I為本發(fā)明化合物的核磁共振氫譜(1H NMR)。圖2為本發(fā)明化合物的核磁共振碳譜(13C NMR)。圖3為本發(fā)明化合物的主要HMBC相關。
具體實施例方式實施例I——化合物的分離制備竹葉蘭樣品取全株粉碎到20 30目，取粉碎后的樣品3. 5kg，以95被％的乙醇用超聲提取4次；每次加入提取液5L，超聲時間30 60min。靜置濾除沉淀物的提取液減壓蒸干溶劑濃縮成浸膏，得浸膏136g。浸膏用甲醇溶解后，用80 100目的硅膠200g拌樣，然后用100 200目硅膠柱I. 5kg裝柱進行層析分離，采用氯仿-丙酮梯度洗脫，氯仿丙酮梯度洗脫依次分別為純氯仿、20 1、9 1、8 2、3 2、1 1,20 I、純丙酮。其中氯仿-丙酮(8 2)洗脫部分11. 5g用制備高效液相色譜進一步分離，以38%的甲醇為流動相，C18制備色譜柱(20 X 250mm, 5 ii m)半制備柱為固定相,紫外檢測器檢測,檢測波長為254nm，每次進樣200 y L，收集23. 5min的色譜峰，多次累加后蒸干。所得粗品再次用純甲醇溶解，再以甲醇為流動相，用Sephadex LH-20凝膠柱層析進一步純化，即可得該新化合物。
實施例2——化合物的結構鑒定所述的化合物為黃色膠狀物；紫外光譜(溶劑為甲醇)，Aniax(log ￡)370(2. 90),257 (3. 22)，210 (3. 87) nm ；紅外光譜(溴化鉀壓片)vmax3415, 2920，1665，1559，1451，1357，1223，1158，1006，766，683CHT1 ；HRESIMS 顯示其準分子離子峰 m/z 405. 0958[M+Na] + (計算值405. 0950)，結合NMR譜確定其分子式為C21H18O7,不飽和度為13。化合物的1H和13C NMR譜(附圖-I和附圖-2，數(shù)據(jù)歸屬見表-I)顯示本化合物為呋喃黃酮結構。通過主要HMBC相關(附圖-3)可確定一個2-羥基乙基取代在呋喃環(huán)的2"位，兩個甲氧基分別取代在苯環(huán)的3和4'位，一個酚羥基取代在苯環(huán)的5位；化合物的結構最終得到確認。通過SCIFINDER數(shù)據(jù)庫檢索和文獻查詢證實該化合物為新化合物。表I本發(fā)明化合物的1Hj3C NMR數(shù)據(jù)
權利要求
1.一種竹葉蘭中的呋喃黃酮類化合物,其特征是從竹葉蘭(Arundina graminifolia)中分離得到，結構式為
2.—種權利要求I所述的竹葉蘭中的呋喃黃酮類化合物的制備方法，其特征是工藝步驟如下 (1)竹葉蘭樣品粉碎，然后以95wt%的乙醇用超聲提取，合并提取液； (2)提取液減壓蒸干溶劑得到浸膏，浸膏用硅膠拌樣，用硅膠柱層析初分，然后采用制備高效液相色譜進一步分離，即得到所需的化合物。
3.按權利要求2所述的竹葉蘭中的呋喃黃酮類化合物的制備方法，其特征是具體工藝步驟如下 ①竹葉蘭全株粉碎到20 30目，取粉碎后的樣品用95wt%的乙醇用超聲提取4次，超聲提取時間為30 60min，合并每次的提取液，靜置濾除沉淀物； ②對提取液采用減壓方式將溶劑全部蒸干，得到浸膏；浸膏用甲醇溶解后，用80 100目的硅膠拌樣，然后用100 200目硅膠柱層析分離，采用氯仿-丙酮梯度洗脫，氯仿-丙酮梯度洗脫依次分別為純氯仿、20 1、9 1、8 2、3 2、1 1,20 I、純丙酮，其中氯仿-丙酮的8 2洗脫部分用高效液相制備色譜分離，分離所得到的粗品再次用凝膠柱層析純化，即得到所需的化合物純品。
4.一種權利要求I所述的竹葉蘭中的呋喃黃酮類化合物在抗胃癌、人慢性粒細胞白血病和人肝癌藥物中的應用。
全文摘要
一種竹葉蘭中的呋喃黃酮類化合物、制備方法及應用。本發(fā)明屬于植物化學研究領域，具體涉及一種竹葉蘭中分離得到的呋喃黃酮類新化合物，該化合物的制備方法以及其在抗癌藥物中的應用。本發(fā)明化合物制備方法是將竹葉蘭樣品粉碎，然后以95wt％的乙醇用超聲提取，合并提取液；提取液減壓蒸干溶劑得到浸膏，浸膏用硅膠拌樣，用硅膠柱層析初分，然后采用制備高效液相色譜進一步分離，即得到所需的化合物。該化合物對人肝癌細胞(Bel-7402)有較好的活性，對人慢性粒細胞白血病細胞株(K562)細胞和胃癌細胞株(MKN-28)也有一定活性，可作為抗腫瘤藥物開發(fā)的先導性化合物。
文檔編號A61P1/00GK102675330SQ20121013101
公開日2012年9月19日 申請日期2012年4月30日 優(yōu)先權日2012年4月30日
發(fā)明者其他發(fā)明人請求不公開姓名, 李銀科, 楊麗英, 沈艷瓊, 胡秋芬, 蘇麗丹 申請人:云南民族大學