專利名稱：苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物制劑，尤其是一種經(jīng)口服給藥用于治療消化系腫瘤的苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其制備方法。本發(fā)明制備的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球是將pH敏感性和磁靶向性雙重釋藥機制集合而成的雙重釋藥響應(yīng)的水凝膠小球。
背景技術(shù)：
苦豆子{Sophora alopecuroidesL.)屬豆科槐屬植物，廣泛生長于我國西北地區(qū)，藥用資源豐富，有清熱解毒和止痛殺蟲等作用?？喽棺涌倝A是其干燥全草或種子提取而得的總生物堿，屬于喹諾里西啶類生物堿，其成分主要包括苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿、氧化槐定堿、槐果堿、氧化槐果堿、槐胺堿、萊曼堿、野啶堿和苦豆堿等約21種生物堿。現(xiàn)代藥理研究表明，苦豆子總堿具有以下藥理作用中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用強心、抗心·律失常和降壓作用，抗病毒、抗炎、抗菌及免疫調(diào)節(jié)作用，抗腫瘤作用。目前，以苦豆子總堿為原料研究的劑型主要有苦豆子殼聚糖口腔潰瘍貼，苦豆子栓劑，苦豆子總堿泡騰栓，苦豆子總堿的骨架片，苦豆子總堿微丸。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種經(jīng)口服給藥用于治療消化系腫瘤的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其制備方法，該制劑具有PH敏感性釋藥機制和磁靶向性釋藥機制，可使苦豆子總堿在不同PH環(huán)境的消化道部位，按pH梯度釋放藥物，并可在外加磁場的引導(dǎo)下，聚集在腫瘤部位，具有靶向定位的智能釋藥特征，從而可提高苦豆子總堿的生物利用度，增強臨床治療效果。本發(fā)明的一種苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的制備方法是，將殼聚糖
0.04g 0. 08g溶入體積比為1%的醋酸溶液20ml中，將0. 3g 0. 7g CaCl2加至前述殼聚糖溶液20ml中，將海藻酸鈉0. 15g 0. 25g，均勻撒入IOml純化水得到海藻酸鈉水溶液，將苦豆子總堿I. Og I. 5g、Fe304納米粒0. 04g 0. 07g,加至前述的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，量取前述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球。根據(jù)本發(fā)明所述的一種苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的制備方法可制得的苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球。本發(fā)明中的殼聚糖是一種天然線形高分子堿性多糖，含有自由的氨基基團。其來源豐富，價格低廉，具有很好的生物相容性和生物降解性，無毒、無刺激、無過敏性，黏附性、成膜性良好，環(huán)境友好，不污染環(huán)境，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、化工、食品等領(lǐng)域，是一極具發(fā)展前途的藥用輔料。
本發(fā)明中的海藻酸鈉是一種天然陰離子聚合物，具有較好的生物相容性和生物降解性，其結(jié)構(gòu)中的羧基可以與殼聚糖分子中的氨基陽離子發(fā)生離子反應(yīng)形成聚合電解質(zhì)復(fù)合物，該過程不涉及熱交聯(lián)過程中的高溫及化學(xué)交聯(lián)過程中的共價鍵形成，對包載物的性質(zhì)無影響，因此作為藥物、生物制品、疫苗及細胞的載體有著極大的優(yōu)越性。本發(fā)明中的Fe3O4納米粒作為磁性物質(zhì)，具有毒性低、易得、飽和磁化強度高等特點，有利于苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球在外加磁場誘導(dǎo)下，在消化道中的腫瘤部位靶向定位，當(dāng)藥物釋放完畢后，自身可隨糞便 排出體外，在體內(nèi)不會造成蓄積中毒或影響機體功能。本發(fā)明制備的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球具有pH敏感性釋藥機制和磁靶向性釋藥機制的雙重釋藥響應(yīng)特征。首先，利用其PH敏感性，使苦豆子總堿在胃、十二指腸，小腸，結(jié)腸等不同PH環(huán)境的消化道部位，按pH梯度釋放。此外，該水凝膠小球含有Fe3O4納米粒，具有良好的磁響應(yīng)性，可利用外加磁場的誘導(dǎo)性能，將水凝膠小球定向轉(zhuǎn)運至靶區(qū)，使苦豆子總堿定位釋放，從而實現(xiàn)對消化道腫瘤的雙重靶向定位給藥，增加苦豆子總堿在消化道腫瘤部位的藥物濃度，減少全身藥物濃度，可降低藥物毒副作用和不良反應(yīng)，提高藥物生物利用度，增強臨床治療效果，降低藥物服用次數(shù)和劑量，增加患者的依從性。本發(fā)明以天然藥物苦豆子中的活性成分苦豆子總堿為主要成分，以天然高分子材料殼聚糖和海藻酸鈉為主要藥用輔料，CaCl2為交聯(lián)劑，F(xiàn)e3O4納米粒為磁性物質(zhì)，溶劑是純化水，采用離子膠凝化法，通過相關(guān)藥學(xué)技術(shù)研究，制備成具有良好釋藥性能的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。本制劑具有pH敏感性和磁靶向性雙重敏感性，可使苦豆子總堿定位靶向釋放，從而可實現(xiàn)對消化道腫瘤的雙重靶位定向給藥，提高藥物生物利用度，增強藥物臨床治療效果，減少藥物不良反應(yīng)和毒副作用，減少給藥次數(shù)和劑量，改善患者的依從性。


圖I.實施例I所得的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的外觀形態(tài)圖，圖中a.為濕苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球數(shù)碼照片；b為干燥苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球數(shù)碼照片；c為.放大65倍數(shù)的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的掃描電鏡照片；d為.放大400倍數(shù)的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的掃描電鏡照片。圖2為實施例I所得的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球紅外光譜圖，圖中A為殼聚糖；B為海藻酸鈉；C為空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球；D為苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球；E為苦豆子總堿。圖3.實施例I所得的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的X射線衍射譜圖，圖中a為殼聚糖；b為海操酸納；c為Fe3O4納米粒；d為古ii子總喊；e為空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球；f為苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球。圖4.實施例I所得的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁滯曲線圖，圖中A為苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球；B為Fe3O4納米粒。圖5.實施例I所得的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的溶脹度圖。圖6.為實施例I所得的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的藥物累積釋放曲線圖。
具體實施例方式下面是本發(fā)明的實施例，但本發(fā)明不僅限于實施例。實施例I :
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。 3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g、Fe304納米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例2
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 15g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為I. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g,Fe3O4納米粒0. 04g，加至上述I. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例3
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。
3)稱取海藻酸鈉0. 20g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 0%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g,Fe3O4納米粒0. 04g，加至上述2. 0%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3 O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例4
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g、Fe304納米粒0. 05g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例5
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g、Fe304納米粒0. 07g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例6
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g、Fe304納米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。 實施例I
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 7g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為3. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g,Fe3O4納米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例8
I)稱取0. 06g殼聚糖，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 3%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 3%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g,Fe3O4納米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例9
I)稱取殼聚糖0. 08g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 4%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 4%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 25g、Fe304納米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶 液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到上述20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例10
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 0g、Fe3O4納米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例11
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%，備用。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦豆子總堿I. 5g、Fe3O4納米粒0. 04g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。
5)量取上述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到上述20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的外觀形態(tài)觀察
分別稱取實施例I所得濕和干燥后的苦豆子總堿PH/磁雙 重敏感性水凝膠小球適量噴金處理，控制加速電壓為30kV，放大倍數(shù)為65及400倍。于室溫條件下用肉眼和掃描電子顯微鏡(SEM)觀察苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的表面形態(tài)及微觀結(jié)構(gòu)。從圖I可以看出苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球干燥前呈較圓整的球形，形狀較規(guī)貝1J，黑褐色，表面光滑，平均直徑為3mm(a);室溫放置自然干燥后，仍保持其球形形態(tài)，但體積縮小，直徑約為lmm(b)。由SEM圖片(c，d)可以看出，該水凝膠小球呈較圓整的球形，形狀較規(guī)則，但由于凝膠小球網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)脫水而使表面粗糙，且具有孔溝和褶皺，結(jié)果見圖I?？喽棺涌倝ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜分析
分別稱取殼聚糖、海藻酸鈉、空白PH/磁雙重敏感性水凝膠小球、實施例I所得苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球和苦豆子總堿適量，研碎后與KBr細粉以I :100的比例混合，在瑪瑙乳缽中研磨至均勻，裝入壓片模具，均勻鋪布后，邊抽氣邊加壓，至壓強約20MPa時維持壓力5min，得到厚約Imm的透明KBr樣品片，置于紅外光譜儀的樣品光路中，錄制紅外光譜圖。比較殼聚糖、海藻酸鈉、空白PH/磁雙重敏感性水凝膠小球、苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球和苦豆子總堿的紅外光譜圖可以看出，殼聚糖的特征吸收峰位于1095、1033、1598、1655，2877和3444 cnT1處。海藻酸鈉的特征吸收峰位于1029,1427和1626cm—1處。海藻酸鈉和殼聚糖形成聚電解質(zhì)復(fù)合物之后，分別在1609、1416、1094和1032CHT1處出現(xiàn)了殼聚糖和海藻酸鈉的特征吸收峰，說明所得的空白和苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球中同時含有二者的成分。苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球和空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球中可見,Fe3O4納米粒的特征吸收峰出現(xiàn)在561cm 1處。苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜圖中，出現(xiàn)了苦豆子總堿的特征吸收峰2928CHT1，說明苦豆子總堿被成功載入該水凝膠小球網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中。結(jié)果見圖2?？喽棺涌倝ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的X-衍射分析
分別稱取殼聚糖、海藻酸鈉、Fe3O4納米粒、苦豆子總堿、空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球和實施例I所得苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球適量，置瑪瑙乳缽中研磨粉碎，均勻鋪布后上機檢測，選擇掃描角度2 0的范圍為10°、0°。比較殼聚糖、海藻酸鈉、Fe3O4納米粒、苦豆子總堿、空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球和苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的晶形可見，殼聚糖的衍射角為20°，海藻酸鈉的衍射角為19°、28°、29.5°、32.5°、34.5°。而兩者形成水凝膠后殼聚糖和海藻酸鈉的衍射角均消失，這是因為分子間作用破壞了兩種物質(zhì)間的氫鍵。并且，F(xiàn)e3O4納米粒的衍射角為35. 9°和43. 45°，在水凝膠小球中可見其衍射角，說明Fe3O4納米粒未發(fā)生晶體構(gòu)型轉(zhuǎn)變，穩(wěn)定地存在于該水凝膠小球中?？喽棺涌倝A的主要特征結(jié)晶衍射角為11°、15°和18. 5°。而苦豆子總堿的PH/磁雙重敏感性水凝膠小球中未見到苦豆子總堿的特征晶體衍射峰，說明苦豆子總堿在水凝膠小球內(nèi)不是以晶體形式而是以分子形式被載入。結(jié)果見圖3。苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁性能測定分別稱取Fe3O4納米粒及實施例I所得苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球粉末適量，于室溫條件下用振動樣品磁強計(VSM)測定Fe3O4納米粒和苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁滯曲線，考察該水凝膠小球的磁響應(yīng)特征。結(jié)果顯示Fe3O4磁性納米粒具有較高的飽和磁化強度，可達到58. 57emu/g ;剩余磁化強度和矯頑力都為零，表現(xiàn)出典型的超順磁性，在體內(nèi)應(yīng)用時不會產(chǎn)生聚集?？喽棺涌倝APH/磁雙重敏感性水凝膠小球的飽和磁化強度約為5. 02emu/g，且矯頑力為零，該性質(zhì)可使水凝膠小球在體內(nèi)不會產(chǎn)生聚集，在磁場消失后又可以快速的重新分散。結(jié)果見圖4?？喽棺涌倝ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的溶脹性試驗
精密稱取實施例I所得苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球各30mg，分別置于pHl. 5的模擬胃液鹽酸溶液和不同pH值的磷酸鹽緩沖溶液液pH5. O、pH6. 8、pH7. 4、pH8. 0中，溫度為37±0.5 °C，在預(yù)定時間定點取出，用濾紙吸干表面水分后稱重，考察苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球在模擬胃液pHl. 5及不同pH值的磷酸鹽緩沖液中的溶脹性能。按以下公式計算溶脹度SR= (W - W0)/W0 ;其中W為苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球溶脹后的總質(zhì)量(g)，Wtl為干燥苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球溶脹前的質(zhì)量(g)。結(jié)果表明該水凝膠小球在不同PH值環(huán)境中溶脹度有明顯的差異。在pH1.5的·酸性環(huán)境中，該水凝膠小球的溶脹度很小，約為1.0 ;而隨著溶液pH值的增加，溶脹度明顯增大，在PH6. 8的磷酸鹽緩沖溶液中，該水凝膠小球的溶脹度可高達28左右。以上結(jié)果表明苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球在人工胃液pH值條件下具有較低的溶脹性，而在小腸、結(jié)腸位置PH值條件下具有很好的溶脹性，因此該水凝膠小球可作為抗消化道腫瘤靶向定位給藥的藥物制劑，具有明顯的PH敏感性，即環(huán)境pH越低，溶脹度越小，藥物釋放較少；環(huán)境PH越高，溶脹度越大，有利于藥物釋放。結(jié)果見圖5?？喽棺涌倝ApH/磁雙重敏感性水凝膠小球的釋放行為試驗
按《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄釋放度測定法中第一法規(guī)定進行累積釋放度測定。稱取實施例I所得苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球5份，每份2. Og,精密稱定，分別以pHl. 5、pH5. O、pH6. 8、pH7. 4、pH8. 0的不同pH值的磷酸鹽緩沖溶液500ml為溶出介質(zhì)，在轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，溫度為37.0±0. 5°C條件下依法測定，分別于規(guī)定時間定點取樣，每次精密量取釋放介質(zhì)1ml，并同時補加相同溫度、相同體積的空白釋放介質(zhì)lml，用0. 22 ii m微孔濾膜過濾，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液5 U 1，注入高效液相色譜儀(Agilent 1200型，美國)，測定苦參堿在220nm波長處的峰面積，并代入標準曲線方程計算累積釋放度，根據(jù)測定結(jié)果繪制釋放曲線。色譜條件為色譜柱為美國安捷倫公司ZORBAXEclipse XDB-C18 (250mmX4. 6mm，5 y m);流動相為甲醇0. 1% 磷酸(三乙胺調(diào) pH 為 6. 8)=55:45 ;柱溫為30°C ;流速為I. Oml mirT1 ;檢測波長為220nm ;進樣量為5yl。理論塔板數(shù)按苦參堿峰計不低于2000。藥物累積釋放度(%) = [Rt/L] X 100，其中，Rt表示t時間內(nèi)藥物的累計釋放量，L表示最初載入的藥物總量。結(jié)果顯示，苦參堿在不同pH值磷酸鹽緩沖溶液中的釋放行為有明顯差異。由苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的藥物累積釋放曲線圖可見，在pHl. 5的酸性溶液中釋藥量較低，2小時釋放49. 17%，且該時間點后藥物釋放較慢；而在PH6. 8的弱堿性溶液中釋藥量較大，2小時釋放87. 43%，且釋藥較快。以上結(jié)果表明苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球具有明顯的pH敏感性，這也與溶脹實驗結(jié)果一致，即環(huán)境PH越低，水凝膠小球不易溶脹破裂，藥物釋放越少；環(huán)境pH越高，水凝膠小球易于溶脹破裂，藥物釋放越多。結(jié)果見圖6。苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球釋放動力學(xué)
采用p印pas方程對實施例I所得苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的釋放機制進行探討。peppas方程為Mt/M = ktn ;Mt/M 表示藥物在某一時刻的累積釋放分數(shù)(以％表示);t為釋放時間；k為速率常數(shù)；n為釋放參數(shù)，是表征peppas方程中釋放機制的特征參數(shù)，當(dāng)0. 43〈n〈0. 85時，藥物的釋放機制為非Fick擴散，由藥物擴散和骨架溶蝕共同作用；當(dāng)n〈0. 43時，為Fick擴散；當(dāng)n>0. 85時，為骨架溶蝕機制。結(jié)果見表I。表I實施例I所得苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環(huán)境中的
權(quán)利要求
1.一種苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的制備方法，其特征在于將殼聚糖O.04g O. 08g溶入體積比為1%的醋酸溶液20ml中，將O. 3g O. 7g CaCl2加至前述殼聚糖溶液20ml中，將海藻酸鈉O. 15g O. 25g，均勻撒入IOml純化水得到海藻酸鈉水溶液，將苦豆子總堿I. Og I. 5g、Fe304納米粒O. 04g O. 07g,加至前述的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，量取前述含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)20分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然干燥，得到苦豆子總堿PH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
2.權(quán)利要求I所述的一種苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的制備方法制備的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種經(jīng)口服給藥用于治療消化系腫瘤的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其制備方法。本發(fā)明的苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的制備方法是，將適量殼聚糖溶入醋酸溶液中，再適量CaCl2加至前述殼聚糖溶液中，將適量海藻酸鈉，均勻撒入純化水得到海藻酸鈉水溶液，將適量苦豆子總堿和Fe3O4納米粒加至前述的海藻酸鈉溶液中，得到含苦豆子總堿、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，再將混懸液滴加到殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯(lián)反應(yīng)結(jié)束后過濾，用適量純化水洗滌、干燥，得到苦豆子總堿pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
文檔編號A61K47/02GK102727572SQ201210242850
公開日2012年10月17日 申請日期2012年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月14日
發(fā)明者劉濤, 李平, 李曉強, 李玉民, 焦海勝, 黃緩梅 申請人:蘭州大學(xué)第二醫(yī)院