一種具有抗腫瘤性能的苦參堿衍生物的制作方法
【專利說明】-種具有抗腫瘤性能的苦參堿衍生物 【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種衍生物，具體講涉及一種具有抗腫瘤性能的苦參堿衍生物及其治 療上可接受的鹽。 【【背景技術(shù)】】
[0002] 苦參堿廣泛存在于豆科植物苦參、苦豆子及廣豆根中，1958年首次被分離和確認(rèn)， 是中藥苦參的主要活性成分之一，研究表明，苦參堿具有解熱、降溫、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、保護(hù)必肌 缺血、減輕必肌損傷、抗必律失常、防止肝纖維化及抗己型肝炎病毒等多種藥理作用。目前， 苦參堿用于臨床的主要制劑有苦參堿注射液、苦參堿栓、苦參堿滴眼液、苦參堿腸溶片、苦 參堿膠丸等。近年來的研究顯示，苦參堿具有廣譜抗腫瘤作用，且對正常細(xì)胞不產(chǎn)生破壞作 用，甚至能升高白細(xì)胞數(shù)，提高機(jī)體免疫功能。雖然苦參堿具有廣譜的抗腫瘤作用，但是其 抗腫瘤活性不高，且自身沒有可W修飾的基團(tuán)，在臨床上的應(yīng)用受到限制。若選用具有協(xié)同 作用的抗癌基團(tuán)或藥物對苦參堿進(jìn)行修飾，有望獲得腫瘤活性強(qiáng)的衍生物。
[0003] 美法侖為左旋體苯丙氨酸氮芥，為多發(fā)性骨髓瘤的首選藥，對多種良性、惡性腫瘤 均具有較好療效，其化學(xué)名稱為4-(雙2-氯己基）氨基-k苯丙氨酸。苯達(dá)莫司汀兼具 有焼化劑和嘿嶺類似物（抗代謝藥）的雙重作用，臨床上可用于治療霍奇金病、非霍奇金 淋己瘤、多發(fā)性骨髓瘤和乳腺癌等多種惡性腫瘤，其結(jié)構(gòu)式為4-巧-[雙-(2-氯己基）氨 基]-1-甲基-2-苯并咪哇基}-了酸。環(huán)磯醜胺是臨床上常規(guī)使用的強(qiáng)效抗癌藥物，在體 外無抗腫瘤活性，通過在肝臟代謝并在癌細(xì)胞內(nèi)分解之后所產(chǎn)生的活性代謝產(chǎn)物為磯醜氮 芥二氯，磯醜氮芥二氯的結(jié)構(gòu)式為二（2-氯己基）氨基磯醜二氯。氮芥類藥物具有抗瘤譜 廣，對腫瘤細(xì)胞殺傷力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，作用祀點(diǎn)是DNA，但亦存在治療效率低、選擇性差、毒副作 用大等缺點(diǎn)，使其不能廣泛地應(yīng)用于臨床。甘草次酸具有較好的肝祀向潛能，其具有良好的 保肝解毒及一定的抗癌作用，并能促進(jìn)癌細(xì)胞調(diào)亡。肝細(xì)胞膜上存在大量甘草次酸的特異 性結(jié)合位點(diǎn)，因此甘草次酸具有較強(qiáng)的肝分布特征和肝細(xì)胞祀向性。W上幾種藥物本身都 具有的較強(qiáng)的抗腫瘤活性，而且含有駿基或磯醜基更方便聯(lián)結(jié)進(jìn)行修飾。 【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種高活性的，低毒性，具有良好抗腫瘤性能的苦參堿衍 生物及其藥學(xué)上可接受的鹽類。
[0005] -種苦參堿衍生物及其治療上可接受的鹽，其結(jié)構(gòu)是W下通式I:
[0006]
[0007]Rx為Rxi、把2、把3、把4、把5、Rxe或Rx?:
[0008]
[0009] 第二種苦參堿衍生物及其治療上可接受的鹽，其特征在于；其結(jié)構(gòu)用通式II所 示：
[0010]
[0011] Rx為Rxi、把2、把3、把4、Rxs、Rxe或Rx?:
[0012]
[0013] 制備上述苦參堿衍生物及其治療上可接受的鹽所采用的原料包括槐果堿。
[0014] 第Η種苦參堿衍生物及其治療上可接受的鹽，其特征在于；其結(jié)構(gòu)用通式III表 示：
[0015]
[0016] Rx為Rxi、把2、把3、把4、Rxs、Rxe或Rx?:
[0017]
[0018] 優(yōu)選的，制備所述通式I，反應(yīng)生成的中間體1為13-(2-居基）己氧基苦參堿，由 槐果堿與鋼和己二醇反應(yīng)生成，所述中間體1的結(jié)構(gòu)式為：
[0019]
[0020] 再一優(yōu)選的，通式I的制備方法為，中間體1與美法侖、苯達(dá)莫司汀、二（2-氯己 基）氨基磯醜二氯、3-撰基-18α-甘草次酸、3-撰基-18目-甘草次酸、苯甲酸氮芥或苯了 酸氮芥反應(yīng)生成。
[0021] 該反應(yīng)適宜的溶劑包括水、甲苯、化巧、氯仿、二氯甲焼。
[0022] 洗脫劑包括石油離、己酸己醋、二氯甲焼、甲醇中的一種或幾種的混合液。
[0023] 優(yōu)選的，制備所述通式II的苦參堿衍生物，反應(yīng)生成的中間體為13-(2-氨基）己 氧基苦參堿，所述中間體的結(jié)構(gòu)式為：
[0024]
[00巧]再一優(yōu)選的，通式II的制備方法為，中間體2與美法侖、苯達(dá)莫司汀、二（2-氯己 基）氨基磯醜二氯、3-撰基-18α-甘草次酸、3-撰基-18目-甘草次酸、苯甲酸氮芥或苯了 酸氮芥反應(yīng)生成。
[0026] 該反應(yīng)適宜的溶劑包括水、四氨巧喃（THF)、甲苯、化巧、氯仿、二氯甲焼、Η氯甲 焼。
[0027] 洗脫劑為石油離、己酸己醋、二氯甲焼、甲醇中的一種或幾種的混合液。
[0028] 優(yōu)選的，制備所述通式III，反應(yīng)生成的中間體為苦參酸己醋，所述中間體的結(jié)構(gòu)式 為：
[0029]
〇
[0030] 再一優(yōu)選的，所述的中間體苦參酸己醋是由苦參堿先與化0Η的醇溶液生成苦參 酸，再與己醇反應(yīng)制得。
[0031] 另一優(yōu)選方案中通式III的制備方法為，中間體3與美法侖、苯達(dá)莫司汀、二（2-氯 己基）氨基磯醜二氯、3-撰基-18α-甘草次酸、3-撰基-18目-甘草次酸、苯甲酸氮芥或苯 了酸氮芥反應(yīng)生成。
[003引該反應(yīng)適宜的溶劑包括水、四氨巧喃燈HF)、甲苯、化巧、氯仿、二氯甲焼、Η氯甲 焼。
[0033] 洗脫劑為石油離、己酸己醋、二氯甲焼、甲醇、己醇或幾種的混合液。
[0034] 所述的苦參堿衍生物及其治療上可接受的鹽具有在制備抗腫瘤藥物中的用途。
[0035] 優(yōu)選的，所述的苦參堿衍生物及其治療上可接受的鹽具有在制備抗腫瘤藥物中的 用途，其中所述腫瘤為肝癌、乳腺癌和骨肉瘤。
[0036] 苦參堿衍生物治療上可接受的鹽是指鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氨鹽、氨漠酸鹽、草酸 鹽、巧樣酸鹽或甲礙酸鹽等。
[0037] W下為用本發(fā)明方法合成的化合物一覽表：
[0038]
[0039]
[0040]
[0041]
[0042] 本發(fā)明提供了一種苦參堿衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽，較苦參堿相比，抗腫瘤 活性有了明顯的提高，擴(kuò)大了抗腫瘤藥物的種類，給癌癥患者多了一種治療的選擇。 【【具體實(shí)施方式】】
[0043] 主要儀器與試劑
[0044] RY-1型顯微烙點(diǎn)儀（溫度計(jì)未效正）；BRUKERAC-P400核磁儀燈MS為電NMR的 內(nèi)標(biāo)）；VGZAB-服型質(zhì)譜儀；德國賀利氏公司Vanio-化型元素分析儀。
[0045] 槐果堿購于鹽池縣都順生物化工有限公司，美法侖購于蘇州市立德化學(xué)有限公 司，苯達(dá)莫司汀購于海格生物科技科技（上海）有限公司；二氯甲焼與Η氯甲焼使用前均用CaHz重蒸過，并加入4Α°分子篩保存；化巧使用前用ΚΟΗ重蒸過，并加入4Α°分子篩保存； 其他試劑均為市售分析純，使用前未經(jīng)處理。實(shí)施例中所述1%的化0Η是指IgNaOH溶于 lOOmL去離子水。
[0046] 實(shí)施例1
[0047] 制備通式I所示的苦參堿衍生物的方法：
[0048] 13-(2-居基）己氧基苦參堿（化合物1)的制備
[0049]
[0050] 向干燥的100血的Η口燒瓶中加入30血干燥己二醇，的氣氛保護(hù)下投入0.lOg 鋼絲，升溫至5(TC，攬拌反應(yīng)。待鋼絲完全消失，停止加熱，冷卻至室溫。取2.OOg槐果堿 溶于10血己二醇，緩慢滴入上述反應(yīng)瓶中，逐漸升溫至60。TLC跟蹤反應(yīng)進(jìn)程，2化后， 向反應(yīng)液中加入lOmL水終止反應(yīng)，用15mL氯仿萃取Η次，合并萃取液，無水化2SO4干燥 過夜，過濾，減壓濃縮得黃色油狀物粗品。用己酸己醋和己醇體積比為80 ;1的混合液進(jìn) 行洗脫，柱色譜分離得淡黃色固體1.72g，產(chǎn)率68.8%，烙點(diǎn)m.p.為57°C。古NMR(CDCl3， 400MHz)，δH;4. 32 (1H，dd，J= 12. 9,4. 4Hz，17-He)，3. 94 (1H，td，J= 10. 0, 5.細(xì)Z，11-H)， 3. 80 (IH，dd，J= 5. 5, 2.OHz，17-Ha)，3. 68-3. 65 (2H，m，19-田，3. 57-3. 48 (2H，m，18-H)， 3. 05 (IH，m，13-H)，2. 79 (2H，dd，J= 16. 4,13. 4Hz，2、10-He)，2. 59-2. 41 (3H，m，2、10-Ha, 14-He)，2. 26-2. 19 (IH，m，6-H)，2. 07 (IH，s，OH)，1. 98-1. 37 (14H，m，14-Ha，CH，邸2)。元 素分析，。品8成〇3,實(shí)測值（計(jì)算值），％ ;C66. 15 化6. 20) ;H9. 03 巧.巧）；015. 61 (15. 56); N9. 21(9. 08)0MS(ESI)m/z：309. 33(M+H)"〇
[0051] 1-1 13-{2-[4-(雙2-氯己基）氨基-心苯丙氨酸醋基]己氧基}苦參堿化SJ-1) 的制備
[0052]
[005引向50血的單口圓底燒瓶中加入30血甲苯，取0. 50血濃H2SO4緩慢滴加到甲苯 中。充分混勻后，加入0.40g化合物1，攬拌溶解。攬拌下分多次加入0. lOg美法侖，繼續(xù) 攬拌至澄清。于燒瓶頂部安置分水器及冷凝管，升溫至125~13(TC回流反應(yīng)5.化，分水器 除去反應(yīng)產(chǎn)生的水。后處理時(shí)，減壓蒸除反應(yīng)液中的甲苯，得蹤色油狀物，加入lOmL蒸傭 水，用1%的化0H溶液調(diào)節(jié)至抑=7~8,用15血氯仿萃取Η次，合并萃取液，無水Na2S04 干燥過夜，過濾，減壓濃縮得黃色油狀物粗品。用石油離和己酸己醋體積比為1;1的混 合液進(jìn)行洗脫，色譜柱分離得目標(biāo)化合物為黃色油狀物0. 12g，產(chǎn)率61%。古NMR(CDCl3， 400Hz)，5h;7. 10(2H，d，J= 7. 9Hz，ArH)，6. 63(2H，d，J= 7.細(xì)Z，ArH)，5. 64(2H，d，J= 34.甜z，NH2)，4. ：M(1H，dd，J= 12. 8,3.細(xì)z，21-H)，4. 29-4. 07(2H，m，19-H)，3. 99(1H，dd， J= 14. 8,9. 8Hz，17-He)，3. 84(1H，m，22-H)，3. 74-3. 61(10H，m，2XCH2Cl，2XNCH2，18-H), 3. 20-2. 91(2H，m，ll-H，17-Ha)，2. 79(3H，m，6、13、22-H)，2. 53(2H，dd，J = 54. 4，17. OHz, 2、10-He)，2. 30-2. 16(2H，m，2、10-Ha)，2. 10(IH，m，14-He)，1. 75-1. 21(13H，m，14-Ha，CH, 邸2)。元素分析，CsoHaaCIzNaO"實(shí)測值（計(jì)算值），％;C61. 03化0. 50)巧7. 47 (7.侶）； 010.77(10.75)；N9. 27(9. 41)；C111. 45 (11. 90)0MS(ESI)m/z：595. 3(M+H)\
[0054] 1-2 13-巧-(4-15-[雙-(2-氯己基）氨基]-1-甲基-2-苯并咪哇基}-了酸醋 基）己氧基]苦參堿化SJ-2)的制備
[00巧]
[005引 向50血的單口圓底燒瓶中加入30血甲苯，取0. 50血濃H2SO4緩慢滴加到甲苯 中。充分混勻后，加入0. 40g化合物1，攬拌溶解。攬拌下分多次加入0.lOg苯達(dá)莫司汀， 繼續(xù)攬拌至澄清。于燒瓶頂部安置分水器及冷凝管，升溫至125~13(TC回流反應(yīng)5.化， 分水器除去反應(yīng)產(chǎn)生的水。后處理時(shí)，減壓蒸除反應(yīng)液中的甲苯，得蹤色油狀物，加入lOmL 蒸傭水，用1 %的化OH溶液調(diào)節(jié)至抑=7~8,用15mL氯仿萃取Η次，合并萃取液，無水 Na2S04干燥過夜，過濾，減壓濃縮得黃色油狀物粗品。用石油離和己酸己醋體積比為8;1 混合液進(jìn)行洗脫，色譜柱分離得目標(biāo)化合物為淡黃色油狀物，產(chǎn)率53%。古NMR(CDCl3， 400Hz)，5h:7.23-7. 17 (lH，m，ArH)，7. 13-7. 04 (lH，m，ArH)，6.80 (lH，d，J= 10. 7Hz，ArH), 4. 38 (IH，dd，J = 12.8,4. IHz，17-He)，4. 02-3. 65 (13H，m，2 X CH2CI，N-CH3, 2 X NCH2,19-H)， 3. 10 (IH，t，J= 12. 7Hz，17-Ha)，2. 87 (4H，dt，J= 25. 5,9. 9Hz，18-H，23-H)，2. 61-2. 47 (4H， m，11-H，2、10-He，13-H)，2. 19(4H，dt，J= 24.6, 7. 7Hz，21-H，2、10-Ha)，2. 04(3H，m，14-He， 22-H)，1. 78-1. 39 (14H，m，14-化，CH，邸2)。元素分析，C33H47CI2N日O4,實(shí)測值（計(jì)算值），％: 061.46(61.10)巧7. 34(7. 30) ;09.68巧.87) ;N10. 87(10. 80) ;C110. 65(10. 93)。MS(ESI)m/ z:648. 5 (M+H)"ο
[0057] 1-3 13-{2-[P-[二（2-氯己基）氨基]-P-居基-磯醜醋基]-己氧基}苦參堿 (KSJ-3)的制備
[0058]
[0059] 1-3-1二（2-氯己基）胺鹽酸鹽的制備
[0060]
[0061] 取干燥的250mLΗ口圓底燒瓶，裝置上機(jī)械攬拌和頂部帶有干燥管及毒氣處理裝 置的冷凝管，加入22.OOg經(jīng)過鋼