專利名稱：一種延緩衰老的復(fù)方石斛提取物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老的組合物，具體說是以中藥材鐵皮石斛、西洋參、枸杞子為原料制備的提取物，可以制成顆粒劑、膠囊劑、散劑、丸劑等劑型，屬中藥制劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
鐵皮石斛、西洋參、枸杞子在中醫(yī)臨床上廣泛使用的補(bǔ)益類名貴藥材，其中鐵皮石 斛功效益胃生津，滋陰清熱。臨床上用于熱病津傷，口干煩渴，胃陰不足，食少于嘔，病后虛熱不退，陰虛火旺，骨蒸勞熱，目暗不明，筋骨痿軟等癥。西洋參功效補(bǔ)氣養(yǎng)陰，清熱生津。臨床上用于氣虛陰虧，虛熱煩倦，咳喘痰血，內(nèi)熱消渴，口燥咽干等功效。枸杞子功效滋補(bǔ)肝腎，益精明目。臨床上用于虛勞精虧，腰膝酸痛，眩暈耳鳴，陽萎遺精，內(nèi)熱消渴，血虛萎黃，目昏不明等癥。本方中應(yīng)用鐵皮石斛和枸杞子滋陰補(bǔ)腎，用西洋參補(bǔ)后天元?dú)?，以增?qiáng)人體氣血津液，改善氣虛、陰虧等癥狀。隨著現(xiàn)代社會的快速發(fā)展，人們生活水平逐漸提高，生活節(jié)奏也逐漸加快，工作壓力以及各方面的壓力也越來越大，新陳代謝疾病和內(nèi)分泌失調(diào)癥等綜合性疾病越來越威脅這人類健康，亞健康、慢性疲勞人群逐漸增多，而這些問題許多藥物特別是西藥無法解決，或者只能維持某種狀態(tài)，還具有療效單一及副作用大的缺點。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供以鐵皮石斛、西洋參、枸杞子為原料制備的具有免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老保健功能的提取物，可以制成顆粒劑、膠囊劑、散劑、丸劑等劑型。鐵皮石斛的主要活性成分為石斛類多糖及生物堿等，藥理作用廣泛，主要為具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力及抗衰老作用，抗腫瘤作用，抗氧化作用，降血糖作用，對消化系統(tǒng)的作用。現(xiàn)代臨床和藥理研究證明，鐵皮石斛具有滋陰潤肺、養(yǎng)胃生津、清熱明目、補(bǔ)五臟虛勞的功效。在惡性腫瘤的輔助治療、慢性胃炎、糖尿病、慢性咽炎、久病體虛免疫功能低下、眼科保健等方面都有廣泛的應(yīng)用。西洋參提取物的主要活性成分為人參總皂苷，近幾年來，人參皂苷的藥效學(xué)作用及其作用機(jī)制被廣泛研究和證實，藥理研究表明抗腫瘤作用，抗老年癡呆作用，對腦缺血保護(hù)作用，對骨保護(hù)作用，免疫調(diào)節(jié)作用，及抗疲勞降血糖作用?，F(xiàn)代藥理研究表明實驗枸杞多糖具有免疫促進(jìn)及免疫調(diào)節(jié)作用，具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤作用，具有降血糖、降血脂作用，以及具有保護(hù)生殖系統(tǒng)的作用。本發(fā)明提出的復(fù)方石斛提取物，按重量百分比組分有鐵皮石斛提取物41%_45%、西洋參提取物20%-25%、枸杞子提取物31%-35%組成。本發(fā)明提出的復(fù)方石斛提取物的生產(chǎn)制備方法是分別以鐵皮石斛、西洋參、枸杞子做原料，藥材經(jīng)揀選、清洗、干燥、粉碎成粗顆粒，用純化水或食用酒精回流提取，用大孔吸附樹脂法、超濾法進(jìn)行精制，所得的活性成分純度高，雜質(zhì)去除率高。本發(fā)明提供的組分配方合理，使人體對其中的保健和營養(yǎng)成分能更好地吸收。其特征在于制備步驟如下。(I)鐵皮石斛提取物的制備將鐵皮石斛揀選、粉碎成粗顆粒，用純化水進(jìn)行回流提取兩次，溶劑用量為20-15倍藥材量，每次3小時，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 20±0. 05，加6倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗滌后溶于5倍藥材量的純水中，過濾，濾液流經(jīng)苯乙烯型非極性或弱極性大孔吸附樹脂，用2-5倍量水洗滌樹脂，收集水洗脫液，再用2-5倍柱體積量的10%-50%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，兩種洗脫液分別過濾，濾液減壓濃縮至相對密度1:1. 20±0. 05，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用鐵皮石斛提取物。(2)西洋參提取物的制備將西洋參揀選、洗凈、烘干、粉碎成粗顆粒，用50%_90%的食用酒精進(jìn)行回流提取三次，溶劑用量為12-8倍藥材量，每次1. 5小時，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 15±0. 05，加水稀釋至5倍藥材量，濾過，濾液流經(jīng)苯乙烯型非極性 或弱極性大孔吸附樹脂，用2-5倍柱體量水洗滌樹脂，再用2-5倍柱體積量的50%-90%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，，加入1%活性炭，回流加熱0. 5小時，冷卻至室溫后，超濾，濾液減壓濃縮至相對密度1:1. 20±0. 05，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用西洋參提取物。(3)枸杞子提取物的制備將枸杞子揀選、洗凈、烘干，用純化水回流提取兩三次，溶劑用量為12-8倍藥材量，每次I小時，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 10±0. 05，加2倍量乙醇沉淀，取上清液濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 20±0. 05，加10倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗滌后，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用枸杞子提取物。(4)復(fù)方石斛提取物的制備將鐵皮石斛提取物、西洋參提取物、枸杞子提取物按比例稱量配料，混合均勻，制成提取物，每IOOg提取物含總皂苷> 3. 24g、粗多糖> 20. 33g?？筛鶕?jù)需要制成顆粒劑、膠囊劑、散劑、丸劑等劑型。本發(fā)明采用D-半乳糖制作亞急性衰老小鼠模型，通過對衰老模型小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性的測定，比較了鐵皮石斛提取物、西洋參提取物、枸杞子提取物、復(fù)方石斛提取物的抗衰老作用。結(jié)果顯示，本發(fā)明復(fù)方石斛提取物具有明顯的抗衰老作用，其療效優(yōu)于單獨(dú)使用鐵皮石斛提取物、西洋參提取物或枸杞子提取物，表明本發(fā)明復(fù)方石斛提取物具有較強(qiáng)的協(xié)同作用。
具體實施例方式實施例1 :組合物制備方法。(I)鐵皮石斛提取物的制備取經(jīng)揀選、粉碎成粗顆粒鐵皮石斛120kg，用純化水進(jìn)行回流提取兩次，溶劑用量依次為2400L，2200L,每次3小時，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 212，加6倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗滌后加水至600L，過濾，濾液流經(jīng)苯乙烯型非極性或弱極性大孔吸附樹脂，用4倍柱體積量的水洗脫樹脂，收集后3倍量的水洗脫液，再用3倍柱體積量的30%乙醇洗脫，收集后2倍量的乙醇洗脫液，兩種洗脫液分別過濾，濾液減壓濃縮至相對密度1:1. 224，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用鐵皮石斛提取物(石斛總多糖)。(2)西洋參提取物的制備取經(jīng)揀選、洗凈、烘干、粉碎成粗顆粒的西洋參250kg，用70%的食用酒精進(jìn)行回流提取三次，每次1. 5小時，溶劑用量依次為2500L，2000L，2000L,過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 112，加水稀釋至1250L，濾過，濾液流經(jīng)苯乙烯型非極性或弱極性大孔吸附樹脂，用2倍柱體量水洗滌樹脂，再用5倍柱體積量的70%乙醇洗脫，收集后4倍量乙醇洗脫液，加入1%活性炭，回流加熱0. 5小時，冷卻至室溫后，超濾，濾液減壓濃縮至相對密度1:1. 236，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用西洋參提取物(人參總皂苷)。(3)枸杞子提取物的制備取經(jīng)揀選、洗凈、烘干的枸杞子250kg，用純化水回流提取兩三次，每次I小時，溶劑用量依次為2500L，2000L，2000L，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 110，加2倍量乙醇沉淀，取上清液濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 212，加10倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗滌后，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用枸杞子提取物(枸杞多糖)。(4)復(fù)方石斛提取物的制備將鐵皮石斛提取物42kg、西洋參提取物24kg、枸杞子提取物34kg，混合均勻，制成提取物，每IOOg提取物含總皂苷> 3. 24g、粗多糖> 20. 33g。 實施例2 :實施例1所得組合物對D-半乳糖所致衰老小鼠的影響的藥效試驗。實驗材料
1、昆明種小鼠，雌雄兼用，體重為(20±2)g，合格證號SCXK(滬)2003-0003，由上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供；
2、藥品與試劑
受試藥鐵皮石斛提取物(按實施例1步驟I方法制備所得)、西洋參提取物(按實施例I步驟2方法制備所得)、枸杞子提取物(按實施例1步驟3方法制備所得)、復(fù)方石斛提取物(實施例1制備所得)；
試劑=SOD (超氧化物歧化酶)、GSH-Px (谷胱甘肽過氧化物酶)測試盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品，D-半乳糖為國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品。實驗方法和結(jié)果 分組及給藥
取昆明種小鼠60只，隨機(jī)分為正常組、模型組、鐵皮石斛提取物組(200mg/kg)、西洋參提取物組(200mg/kg)、枸杞子提取物組(200mg/kg)、復(fù)方石斛提取物組(200mg/kg),每組各為10只。除正常組，每日各組小鼠腹腔注射D-半乳糖(200mg/kg)—次，正常組腹腔注射等量生理鹽水。各組小鼠每日分別灌胃相應(yīng)藥物，正常對照組及模型組每日灌服蒸餾水。8周后稱取小鼠體重，眼眶取血，脫頸椎處死，剖取脾臟、胸腺，稱其質(zhì)量，根據(jù)體重計算脾臟及胸腺指數(shù)。小鼠血清中SOD、GSH-Px活性的測定
按照測試盒操作法測定小鼠血清S0D、GSH-Px活性。結(jié)果
上述實驗結(jié)果以均值土標(biāo)準(zhǔn)偏差(x土s)表示，統(tǒng)計學(xué)檢驗采用組間比較t檢驗，結(jié)果見表I和表2。表I各組小鼠胸腺及脾臟指數(shù)變化Cr ±s) (n=10) _
組另1J_脾臟指數(shù)(mg/g) 胸腺指數(shù)(mg/g)
正常組一 5.96 ±1.48**99 ±0.48*
模型組|4.09 ± 0. 80|2. 33 ± 0.8權(quán)利要求
1.一種中藥組合物，其特征在于，所述組合物由按重量百分比組分有鐵皮石斛提取物41%-45%、西洋參提取物20%-25%、枸杞子提取物31%_35%組成，其中各提取物的制備方法如下 (1)鐵皮石斛提取物的制備將鐵皮石斛揀選、粉碎成粗顆粒，用純化水進(jìn)行回流提取兩次，溶劑用量為20-15倍藥材量，每次3小時，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 20±0. 05，加6倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗滌后溶于5倍藥材量的純水中，過濾，濾液流經(jīng)苯乙烯型非極性或弱極性大孔吸附樹脂，用2-5倍量水洗滌樹脂，收集水洗脫液，再用2-5倍柱體積量的10%-50%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，兩種洗脫液分別過濾，濾液減壓濃縮至相對密度1:1. 20±0. 05，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用鐵皮石斛提取物； (2)西洋參提取物的制備將西洋參揀選、洗凈、烘干、粉碎成粗顆粒，用50%-90%的食用酒精進(jìn)行回流提取三次，溶劑用量為12-8倍藥材量，每次1. 5小時，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 15±0. 05，加水稀釋至5倍藥材量，濾過，濾液流經(jīng)苯乙烯型非極性或弱極性大孔吸附樹脂,用2-5倍柱體量水洗滌樹脂，再用2-5倍柱體積量的50%-90%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，，加入1%活性炭，回流加熱O. 5小時，冷卻至室溫后，超濾，濾液減壓濃縮至相對密度1:1. 20±0. 05，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用西洋參提取物； (3)枸杞子提取物的制備將枸杞子揀選、洗凈、烘干，用純化水回流提取兩三次，溶劑用量為12-8倍藥材量，每次I小時，過濾，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 10±0. 05，加2倍量乙醇沉淀，取上清液濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1:1. 20±0. 05，加10倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗滌后，真空干燥，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，即得所用枸杞子提取物； (4)復(fù)方石斛提取物的制備將鐵皮石斛提取物、西洋參提取物、枸杞子提取物按比例稱量配料，混合均勻，制成提取物組合物。
2.按權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，每IOOg提取物含總皂苷>3. 24g、粗多糖^ 20. 33g0
3.權(quán)利要求1或2所述的組合物和藥學(xué)上可接受的任何載體制成的顆粒劑。
4.權(quán)利要求1或2所述的組合物和藥學(xué)上可接受的任何載體制成的膠囊劑。
5.權(quán)利要求1或2所述的組合物和藥學(xué)上可接受的任何載體制成的散劑。
6.權(quán)利要求1或2所述的組合物和藥學(xué)上可接受的任何載體制成的丸劑。
7.權(quán)利要求1-6所述之一的中藥組合物在制備延緩衰老的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種中藥提取物組合物，按重量百分比組分有鐵皮石斛提取物41%-45%、西洋參提取物20%-25%、枸杞子提取物31%-35%組成。分別以鐵皮石斛、西洋參、枸杞子做原料，藥材經(jīng)揀選、清洗、干燥、粉碎成粗顆粒，用純化水或食用酒精回流提取，用大孔吸附樹脂法、超濾法進(jìn)行精制，減壓濃縮、干燥粉碎即得。本發(fā)明的中藥組合物具有延緩衰老的作用，且組合物中各提取物成分的配伍達(dá)到了協(xié)同增效的效果。
文檔編號A61P37/02GK103007052SQ20121053990
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月14日
發(fā)明者王征, 陶俊, 唐昌娟, 孫仁弟 申請人:上海綠谷制藥有限公司, 上海綠谷生命園醫(yī)藥有限公司, 綠谷(集團(tuán))有限公司