一種具有抗癌作用的中藥組合物及其制備方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種具有抗癌作用的中藥組合物及其制備方法和用途。所述抗癌作用的中藥組合物的原料藥主要由五靈脂、蒲黃。所述制備方法包括按比例取原料藥，以水或與水相互溶的有機(jī)溶劑提?。换?，按比例取原料藥，采用水提醇沉法制備；其中所述醇沉濃度為50-90%。所述用途是該中藥組合物在制備治療癌癥藥物特別是治療宮頸癌藥物中的應(yīng)用。該中藥組合物由如下重量比的原料藥組成：五靈脂：蒲黃=1：0.2-4。本發(fā)明五靈脂和蒲黃配伍對(duì)Hela細(xì)胞具有協(xié)同抑制作用，具有很好的抗癌效果。
【專利說(shuō)明】一種具有抗癌作用的中藥組合物及其制備方法和用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種中藥組合物及其制備方法和用途，具體涉及一種具有抗癌作用的中藥組合物及其制備方法和用途，屬中醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]癌癥是危及人類健康的重大疾病，其致死率呈逐年上升的趨勢(shì)，它的發(fā)生和發(fā)展是多因素參與、多基因改變及多階段發(fā)展的復(fù)雜病變過(guò)程。目前對(duì)于癌癥的治療大多采用手術(shù)治療結(jié)合放、化療方法，但是該方法對(duì)病人的創(chuàng)傷大，危險(xiǎn)性高，且費(fèi)用昂貴，但療效卻并不理想。中藥作為我國(guó)傳統(tǒng)防病治病的武器，伴隨著近年來(lái)逐步深入的研究與探索，在癌癥治療中越來(lái)越受到重視。研究表明，在腫瘤防治過(guò)程中，中藥主要是從提高機(jī)體免疫功能、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移以及對(duì)化療的減毒增效等方面發(fā)揮作用的。
[0003]本發(fā)明所述中藥組合物配伍合理，既能調(diào)節(jié)氣血陰陽(yáng)和臟腑功能，保護(hù)骨髓造血功能，又能啟動(dòng)自身防御系統(tǒng)，提高機(jī)體免疫力，對(duì)于腫瘤的輔助治療很有益處。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種具有抗癌作用的中藥組合物。
[0005]本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供該組合物的制備方法。
[0006]本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供該組合物在制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明的第四個(gè)目的在于提供該組合物在制備治療宮頸癌藥物中的應(yīng)用。
[0008]本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0009]一種具有抗癌作用的中藥組合物，該中藥組合物由如下重量比的原料藥組成:
[0010]五靈脂:蒲黃=1:(0.2-4)。
[0011]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0012]五靈脂:蒲黃=1: (0.3-3.5)。
[0013]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0014]五靈脂:蒲黃=1:(0.4-3)。
[0015]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0016]五靈脂:蒲黃=1: (0.5-2.5)。
[0017]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0018]五靈脂:蒲黃=1:(0.5-2.2)。
[0019]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0020]五靈脂:蒲黃=1:(0.5-2)。
[0021]所述中藥組合物的原料藥進(jìn)一步優(yōu)選為:
[0022]五靈脂:蒲黃=1:0.5 ;
[0023]或，五靈脂:蒲黃=1:1 ;
[0024]或，五靈脂:蒲黃=1:2。
[0025]本發(fā)明中藥組合物可采用如下方法制備:
[0026]按比例取原料藥，以水或與水相互溶的有機(jī)溶劑提取；
[0027]進(jìn)一步的，所述與水相互溶的有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、丙酮中的一種或幾種；更進(jìn)一步優(yōu)選為50-90%的乙醇；更進(jìn)一步優(yōu)選為60-80%的乙醇；更進(jìn)一步優(yōu)選為70%的乙醇；
[0028]所用的提取方法包括煎煮提取、回流提取、浸泡提取、超聲提取或滲漉提取中的任意一種方式，或者不同提取方法的組合。
[0029]本發(fā)明中藥組合物還可采用:按比例取原料藥，采用水提醇沉法制備；其中所述醇沉濃度為50-90% ；
[0030]進(jìn)一步的，所述醇沉濃度為60-80% ;更進(jìn)一步的所述醇沉濃度為70%。
[0031]上述制備方法中原料藥經(jīng)提取后還可經(jīng)純化、精制，如過(guò)大孔樹(shù)脂柱；并進(jìn)一步按常規(guī)的制劑工藝制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，包括顆粒、片劑、膠囊、滴丸、口服液、混懸液、乳濁液、注射劑。
[0032]為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的輔料，例如:填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、 甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等；潤(rùn)滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括:淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括:甜味劑及各種香精；防腐劑包括:尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括:PEG6000，PEG4000，蟲(chóng)蠟等。為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)中藥藥劑學(xué)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的其它輔料(范碧亭《中藥藥劑學(xué)》，上海科學(xué)出版社1997年12月第I版中各劑型記載的輔料)。
[0033]本發(fā)明所述中藥組合物除了以五靈脂、蒲黃原藥材投料的形式外，還可以采用以五靈脂、蒲黃提取物(有效部位)投料的形式，因此本發(fā)明進(jìn)一步公開(kāi)了一種具有抗癌作用的中藥組合物:
[0034]一種具有抗癌作用的中藥組合物，該中藥組合物由如下重量比的原料組成:
[0035]五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.2-4)。
[0036]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0037]五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.3-3.5)。
[0038]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0039]五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.4-3)。
[0040]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0041]五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.5-2.5)。
[0042]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0043]五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.5-2.2)。
[0044]所述中藥組合物的原料藥優(yōu)選為:
[0045]五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.5-2)。
[0046]所述中藥組合物的原料藥進(jìn)一步優(yōu)選為:
[0047]五靈脂提取物:蒲黃提取物=1:0.5 ；
[0048]或，五靈脂提取物:蒲黃提取物=1:1;
[0049]或，五靈脂提取物:蒲黃提取物=1:2。
[0050]本發(fā)明所述五靈脂提取物和蒲黃提取物分別為五靈脂、蒲黃的水提取物或與水相互溶的有機(jī)溶劑提取物；或，分別為五靈脂、蒲黃經(jīng)水提醇沉處理后得到的提取物。
[0051]進(jìn)一步的，所述與水相互溶的有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、丙酮中的一種或幾種；更進(jìn)一步優(yōu)選為50-90%的乙醇；更進(jìn)一步優(yōu)選為60-80%的乙醇；更進(jìn)一步優(yōu)選為70%的乙醇；
[0052]所用的提取方法包括煎煮提取、回流提取、浸泡提取、超聲提取或滲漉提取中的任意一種方式，或者不同提取方法的組合。
[0053]進(jìn)一步的，所述醇沉濃度為50-90% ;進(jìn)一步優(yōu)選醇沉濃度為60-80% ;更進(jìn)一步的所述醇沉濃度為70%。
[0054]本發(fā)明所述水提醇沉法系指在中藥水提濃縮液中，加入乙醇使達(dá)到規(guī)定的含醇量(即醇沉濃度)，某些成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀，濾過(guò)，取乙醇溶液，回收乙醇得提取物，使水提液得以精制的方法。
[0055]實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， 五靈脂單用時(shí)可抑制Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)，抑制率最高為39.63%。蒲黃單用時(shí)，對(duì)Hela細(xì)胞的增殖無(wú)明顯的抑制作用。五靈脂和蒲黃配伍作用于人宮頸癌Hela細(xì)胞時(shí)，則表現(xiàn)為顯著的增殖抑制作用，尤其是五靈脂與蒲黃按1:1比例配伍時(shí)抑制作用最為明顯，五靈脂與蒲黃的濃度分別為62.5~500μ g/mL時(shí)，抑制率>30%，最高可達(dá)到69.41%。
[0056]效果實(shí)驗(yàn)例
[0057]實(shí)驗(yàn)例I五靈脂藥對(duì)的研究
[0058]I 材料
[0059]人宮頸癌Hela細(xì)胞由天津市腫瘤研究所中心實(shí)驗(yàn)室惠贈(zèng)；RPMI_1640培養(yǎng)基，美國(guó)GIBCO公司產(chǎn)品；
[0060]五靈脂、蒲黃單藥及五靈脂、蒲黃按不同比例配伍的組合物(即為“藥對(duì)”)均采用如下方法制備:取原料藥，加水浸泡30min，加入8倍量水煎煮三次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，離心、干燥，粉碎成粉。按實(shí)驗(yàn)需要將干燥粉用DMEM高糖培養(yǎng)基配成相應(yīng)濃度的試藥并過(guò)濾除菌。
[0061]2實(shí)驗(yàn)方法
[0062]取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Hela細(xì)胞，胰酶消化并吹打?yàn)榧?xì)胞懸液。離心收集細(xì)胞，計(jì)數(shù)后調(diào)整懸液的細(xì)胞濃度為5000/mL，接種于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔lmL。將24孔板移入37°C，5%C02的孵箱中培養(yǎng)24h后，換液加藥，設(shè)五靈脂、蒲黃單用組，五靈脂與蒲黃按1:1、2:1、1:2比例配伍合用組，以及陰性對(duì)照組。以下式換算五靈脂與蒲黃中劑量組體外培養(yǎng)加藥物濃度:C(y g/mL)=ro(mg/Kg/d) ；C為體外實(shí)驗(yàn)所需濃度，D為臨床用藥濃度。以此濃度為中間濃度，分別向上、向下2倍遞增遞減，連續(xù)設(shè)置6個(gè)濃度梯度。孵箱中培養(yǎng)96h，光經(jīng)鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)變化，后收集細(xì)胞，行臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)。
[0063]運(yùn)用中效原理判斷聯(lián)合藥效:中效濃度(Dm)，即半數(shù)抑制濃度(IC5tl)的計(jì)算，根據(jù)臺(tái)盼藍(lán)拒染活細(xì)胞數(shù)計(jì)算藥物組細(xì)胞fu(生存率fract1n ofunaffeeted cells)及fa(抑制率 fraet1n of affected cells)
[0064]fu=試驗(yàn)組平均活細(xì)胞數(shù)/對(duì)照組平均活細(xì)胞數(shù)
[0065]fa=l-fu
[0066]3統(tǒng)計(jì)方法
[0067]應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)分析軟件包，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差()表示，在檢驗(yàn)數(shù)據(jù)正態(tài)分布及方差齊性的條件下，多組間數(shù)據(jù)比較采用方差分析，各組組間差異的比較用LSD — t檢驗(yàn)。以P < 0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0068]4 結(jié)果
[0069]臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)法檢測(cè)不同實(shí)驗(yàn)組:五靈脂單用時(shí)可抑制Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)，當(dāng)五靈脂的濃度為125~500 μ g/mL時(shí)，抑制率>20%，最高為39.63%。隨五靈脂濃度的降低其抑制率有降低的趨勢(shì)。蒲黃單用時(shí)，對(duì)Hela細(xì)胞的增殖無(wú)明顯的抑制作用，當(dāng)蒲黃濃度< 250 μ g/mL時(shí)表現(xiàn)為對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的輕微促進(jìn)作用。五靈脂和蒲黃分別按1:1，1:2和2:1比例合用作用于人宮頸癌Hela細(xì)胞時(shí)，則表現(xiàn)為顯著的增殖抑制作用，尤其是五靈脂與蒲黃按1:1比例配伍時(shí)抑制作用最為明顯，抑制率最高可達(dá)到69.41%。詳見(jiàn)表1-表2。
[0070]表1不同濃度五靈脂及蒲黃單用對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制的效應(yīng)Fa

【權(quán)利要求】
1.一種具有抗癌作用的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物的原料藥主要由五靈脂、蒲黃。
2.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物由如下重量比的原料藥組成: 五靈脂:蒲黃=1: (0.2-4)； 或，五靈脂:蒲黃=1: (0.3-3.5)； 或，五靈脂:蒲黃=1: (0.4-3)； 或，五靈脂:蒲黃=1: (0.5-2.5)； 或，五靈脂:蒲黃=1: (0.5-2.2)。
3.如權(quán)利要求2所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物由如下重量比的原料藥組成: 五靈脂:蒲黃=1:0.5 ； 或，五靈脂:蒲黃=1:1 ； 或，五靈脂:蒲黃 =1:2。
4.如權(quán)利要求1-3任一所述中藥組合物的制備方法，其特征在于，該方法包括: 按比例取原料藥，以水或與水相互溶的有機(jī)溶劑提取； 或，按比例取原料藥，采用水提醇沉法制備；其中所述醇沉濃度為50-90%。
5.如權(quán)利要求4所述中藥組合物的制備方法，其特征在于所述與水相互溶的有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、丙酮中的一種或幾種；所述提取方法包括煎煮提取、回流提取、浸泡提取、超聲提取或滲漉提取中的任意一種方式，或者不同提取方法的組合。
6.一種具有抗癌作用的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物由如下重量比的原料組成: 五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.2-4)。
7.如權(quán)利要求6所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物由如下重量比的原料組成: 五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.3-3.5)； 或，五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.4-3)； 或，五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.5-2.5)； 或，五靈脂提取物:蒲黃提取物=1: (0.5-2.2)。
8.如權(quán)利要求7所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物由如下重量比的原料組成: 五靈脂提取物:蒲黃提取物=1:0.5 ； 或，五靈脂提取物:蒲黃提取物=1:1; 或，五靈脂提取物:蒲黃提取物=1:2。
9.如權(quán)利要求1-3、6-8任一所述的中藥組合物在制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求1-3、6-8任一所述的中藥組合物在制備治療宮頸癌藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK104069273SQ201310100486
【公開(kāi)日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2013年3月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年3月26日
【發(fā)明者】姚華, 王軍, 杜軍, 郭潔, 李芳
申請(qǐng)人:成都地奧集團(tuán)天府藥業(yè)股份有限公司