知母化學成分群提取物及其制備工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術領域】，公開了知母三種化學成分群提取物及其制備工藝。本發(fā)明三種提取物綜合利用了知母藥材資源，節(jié)約藥材，全面利用了藥材中水溶性和脂溶性成分。三種提取物分別為知母總皂苷提取物，知母總皂苷元提取物及知母多糖提取物，其總皂苷及總皂苷元重量均含量大于50%，總多糖重量含量在50~95%之間。該制備方法工藝簡單，含量穩(wěn)定。
【專利說明】知母化學成分群提取物及其制備工藝
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術領域】，涉及知母三種化學成分群提取物及其制備工藝，根據該制備工藝所得的三種提取物，其化學成分總含量可達到50%以上。
【背景技術】
[0002]知母的主要化學成分為甾體皂苷及多糖，甾體皂苷在根莖中的量約為6%，此兩種化學成分群及皂苷水解后的皂苷元均具有明確的藥理作用。知母多糖具有調節(jié)免疫功能、抗疲勞、保肝、抗氧化、抗衰老及抗腫瘤的作用；知母總皂苷提取物具有防治老年癡呆、改善記憶力、抑制血小板聚集、抗氧化和降血糖等藥理作用；知母皂苷元對老年癡呆低下的膽堿能系統(tǒng)功能有一定的改善和治療作用，能促進體外培養(yǎng)的成骨細胞的增殖與分化成熟。
[0003]目前，知母中成藥或提取物生產廠家在生產時多數只提取一種有效部位，提取后剩余的藥材沒有充分利用提取其多糖，造成資源的浪費，另外目前所銷售的知母提取物均為比例提取物，提取工藝粗糙，有效成分含量低。中國專利03115509.X公開了一種知母提取物及其制備方法，但其公開的是知母提取物中芒果苷和新芒果苷的含量總和大于50%的知母提取物。中國專利200510024312.7公開了知母總皂苷提取物的新用途，但該總皂苷提取物的主要成分為知母皂苷B-1I化合物，含量范圍是30%~70%。中國專利200510054633.1公開了一種知母總皂苷及其制備方法，該知母總皂苷的制備方法為采用常溫超聲提取。以上專利都只提取了知母總皂苷，且主成分不同、含量不同，而采用提取方法亦不同；同時提取制備知母中的三種化學成分群，即知母總皂苷、知母總皂苷元、知母多糖的方法還未見報道。
【發(fā)明內容】
[0004]本發(fā)明針對以上生產中得不足及技術上的差異，提供一種知母三種化學成分群的整體制備工藝，以及依據該工藝制備而得到的三種提取物及其相關劑型。
[0005]本發(fā)明是通過如下技術方法完成的:
知母三種化學成分群的整體制備工藝，主要步驟如下:
(1)將知母洗凈、加適量蒸餾水悶潤6~12h，切厚片；
(2)將知母片用75、5%乙醇加熱回流提取2次，過濾，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮，得醇提濃縮液；
(3)醇提濃縮液，用大孔吸附樹脂富集，分別以水及75、5%乙醇洗脫，水洗脫液棄去，合并乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得知母總皂苷提取物，其總皂苷重量含量大于50% ；
(4)知母總皂苷提取物加蒸餾水溶解，加入稀酸，加熱水解生成苷元，水解液用堿中和至中性，然后用氯仿或乙酸乙酯提取苷元，回收溶劑，減壓干燥，得知母總皂苷元提取物，其總皂苷元重量含量大于80% ；
(5)將醇提后藥渣干燥，用蒸餾水加熱回流提取2~3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮，得水提濃縮液；
(6)向水提濃縮液加入95%乙醇，使含醇量為75~85%，充分攪拌，靜置過夜；
(7)過濾，收集沉淀，離心或抽濾，將沉淀減壓真空干燥，得無定形粉末，為知母多糖提取物，其多糖重量含量大于50% ；
依據以上制備工藝而得到的三種提取物可以與藥學上可接受的賦形劑或藥物載體利用制劑技術制成臨床上可接受的藥物劑型。所訴的劑型可為固體制劑、固體緩釋劑或注射劑。
[0006]本制備工藝具有以下優(yōu)點:
(I)避免了因只提取一種化學成分而導致的藥材資源浪費。
[0007](2)本制備工藝不涉及有毒有害溶劑，無污染物排放，環(huán)境友好。
[0008](3)制備中設計到工藝路線均為工業(yè)化大生產常用方法，簡便易行，適用于工業(yè)生產。
【具體實施方式】
[0009]實施例1:
知母三種化學成分群的整體制備工藝:
(1)取知母1kg，洗凈、加10%藥材重`量蒸餾水悶潤6h，水份完全浸潤，切厚片；
(2)將知母片用8倍重量75%乙醇加熱回流提取2次，過濾，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮，得醇提濃縮液4L ；
(3)醇提濃縮液，用500ml大孔吸附樹脂富集，分別以水及75%乙醇洗脫，水洗脫液IL棄去，收集乙醇洗脫液2L，減壓回收乙醇，濃縮至稠膏，減壓干燥，得知母總皂苷提取物20g，其總皂苷重量含量為55% ；
(4)知母總皂苷提取物IOg加蒸餾水100ml溶解，加入稀酸，加熱水解生成苷元，即molish反應為陰性，水解液用堿中和至中性，然后用氯仿提取苷元，回收溶劑，減壓干燥，得知母總皂苷元提取物4g，其總皂苷元重量含量為82% ；
(5)將醇提后殘渣干燥，用10倍量蒸餾水加熱回流提取2次，過濾，合并濾液，減壓濃縮，得水提濃縮液500ml ；
(6)向水提濃縮液加入95%乙醇2L，使含醇量為75%，充分攪拌，靜置過夜；
(7)過濾，收集沉淀，離心或抽濾，將沉淀減壓真空干燥，得無定形粉末50g，為知母多糖提取物，其多糖重量含量為52% ；
實施例2:
知母三種化學成分群的整體制備工藝:
(1)取知母1kg，洗凈、加10%藥材重量蒸餾水悶潤12h，水份完全浸潤，切厚片；
(2)將知母片用8倍重量95%乙醇加熱回流提取2次，過濾，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮，得醇提濃縮液3.5L；
(3)醇提濃縮液，用500ml大孔吸附樹脂富集，分別以水及75%乙醇洗脫，水洗脫液棄去，收集乙醇洗脫液2L，減壓回收乙醇，濃縮至稠膏，減壓干燥，得知母總皂苷提取物18g，其總皂苷重量含量為60% ；
(4)知母總皂苷提取物IOg加蒸餾水100ml溶解，加入稀酸，加熱水解生成苷元，即molish反應為陰性，水解液用堿中和至中性，然后用乙酸乙酯提取苷元，回收溶劑，減壓干燥，得知母總皂苷元提取物4.2g，其總皂苷元重量含量大于90% ；
(5)將醇提后殘渣干燥，用10倍量蒸餾水加熱回流提取3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮，得水提濃縮液500ml ；
(6)向水提濃縮液加入95%乙醇3L，使含醇量為85%，充分攪拌，靜置過夜；
(7)過濾，收集沉淀，離心或抽濾，將沉淀減壓真空干燥，得無定形粉末55g，為知母多糖提取物，其多糖重量含量為55% ；
實施例3:
取含量為50%知母多糖20g，加30倍量蒸餾水攪拌溶解，用截留分子量為5kDa的超濾膜包超濾除去小分子單糖及寡糖，超濾設備采用密理博Labscale小型切向流超濾系統(tǒng)，進口壓力30psi,循環(huán)壓力15psi,當截留液剩余為50ml時,加等體積蒸懼水透析3次,收集截留液50ml，加95%乙醇500ml，使含醇量達85 %，靜置過夜，離心，取沉淀減壓干燥得精制知母多糖，多糖總量含量為95%。
【權利要求】
1.知母化學成分群提取物的制備方法，其特征在于:該方法包括以下幾個步驟: (1)將知母洗凈、加適量蒸餾水悶潤6~12h，切厚片； (2)將知母片用75、5%乙醇加熱回流提取2次，過濾，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮，得醇提濃縮液； (3)醇提濃縮液，用大孔吸附樹脂富集，分別以水及75、5%乙醇洗脫，水洗脫液棄去，合并乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得知母總皂苷提取物，其總皂苷重量含量大于50% ； (4)知母總皂苷提取物加蒸餾水溶解，加入稀酸，加熱，水解生成苷元，水解液用堿中和至中性，然后用氯仿或乙酸乙酯提取苷元，回收溶劑，減壓干燥，得知母總皂苷元提取物，其總皂苷元重量含量大于80% ； (5)將醇提后殘渣干燥，用蒸餾水加熱回流提取2~3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮，得水提濃縮液； (6)向水提濃縮液加入95%乙醇，使含醇量為75~85%，充分攪拌，靜置過夜； (7)過濾，收集沉淀，離心或抽濾，將沉淀減壓真空干燥，得無定形粉末，為知母多糖提取物，其多糖重量含量大于50%。
2.根據權利要求1所述的知母化學成分群提取物的制備方法，其特征在于:將所述步驟(7)中得到的多糖提取物進一步以大孔吸附樹脂脫色、超濾過濾除去單糖、寡糖等小分子雜質，得到知母多糖含量50- 95 %以上的提取物。
【文檔編號】A61K36/8964GK103479856SQ201310430996
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月22日 優(yōu)先權日:2013年9月22日
【發(fā)明者】馬河, 郭琪, 程艷玲 申請人:山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所