野馬追在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種野馬追在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明從野馬追中制備得到野馬追乙醇提取物、野馬追黃酮部位、野馬追倍半萜部位、野馬追70％乙醇水洗脫部位、鏈狀二萜化合物，對(duì)這四種提取物和鏈狀二萜化合物，進(jìn)行抗乙肝病毒HBV實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明其均具有顯著抑制乙肝表面抗原HBsAg和乙肝核心抗原HBeAg的作用，與治療乙肝的臨床藥物拉米呋啶(3TC)相比具有更好的藥物活性。本發(fā)明所述的野馬追可用于制備抗乙肝病毒的藥物。
【專利說明】野馬追在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種野馬追在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用，更具體的說，涉及野馬追的野馬追乙醇提取物、野馬追黃酮部位、野馬追倍半萜部位、野馬追70%乙醇水洗脫部位、鏈狀二萜化合物在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]乙肝病毒(HBV)感染是影響人類健康的主要疾病之一，全世界大約有3億人為慢性乙肝病毒攜帶者，中國(guó)是乙肝病毒攜帶者最多的國(guó)家，約有0.93億人。急性乙肝易轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿窝?，甚至惡化為肝硬化和肝癌。目前?guó)內(nèi)用于治療慢性病毒性肝炎的藥物，主要為
1、口服核苷(酸)類化學(xué)藥物，如拉米夫定、阿德福韋、恩替卡韋、替比夫定、替諾福韋等，但容易產(chǎn)生耐藥性；2、生物制劑，干擾素，如:常用的為干擾素α和聚乙二醇化干擾素α，但大多數(shù)病人在停藥后有反跳現(xiàn)象，并且干擾素價(jià)格較貴(每一療程約需2~4萬(wàn)元)，不能經(jīng)胃腸道用藥，使用不方便，長(zhǎng)期用藥易產(chǎn)生副作用，如:類似感冒癥狀的副作用和血小板減少等；3、傳統(tǒng)中藥，苦參素、齊墩果酸及其衍生物、植物多糖、五味子中化學(xué)成分等，臨床醫(yī)學(xué)實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)研究證明，中藥在防治肝炎疾病上可以在一定程度上抑制肝炎病毒復(fù)制，尤其在改善病人癥狀和肝臟功能，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，并且植物藥來源豐富，價(jià)廉易得，毒副作用小。(參見:李長(zhǎng)恭，渠桂榮.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2002, 14(6):81-87 ;徐聰，曾蘇.抗肝病毒藥物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展，中國(guó)藥學(xué)雜志，2012，47 (18):1430-1433)因此研究并開發(fā)出新的治療乙肝病毒的中藥具有及其重要的意義。
[0003]野馬追是菊科植物尖佩蘭Eupatorium lindleyanum DC.的全草,江蘇道地藥材。味苦、性平，歸肝、脾經(jīng)，具有化痰止咳、清熱解毒、利尿消腫、降壓的功能，用于感冒、咳嗽多痰、頭疼、扁桃體炎、菌痢和高血壓(參見:國(guó)家中醫(yī)藥管理局，中華本草，上海:上?？萍汲霭嫔?，1999:7,6876)。野馬追提取液具有對(duì)急性肺損傷大鼠保護(hù)作用，復(fù)方野馬追膠囊體外對(duì)流感病毒有一定抑制作用，野馬追糖漿濃縮液對(duì)革蘭陽(yáng)性和陰性菌及白色念珠球菌均具有一定的抗菌作用，野馬追總黃酮提取液具有降低血粘度作用(參見:江舟，楊輝，何海霞，等.野馬追對(duì)大鼠急性肺損傷保護(hù)作用研究。中國(guó)藥房，2007，18(27):2094;周遠(yuǎn)大，吳妍，等。野馬追抗菌、止咳、平喘作用.中國(guó)藥房，2001,12(12):716-718 ;彭蘊(yùn)茹，竇潔，黃芳，等.復(fù)方野馬追膠囊抗流感病毒實(shí)驗(yàn)研究.中成藥，2008，30 (5):650-654 ;王柯靜，秦劍，陳萬(wàn)一，等。野馬追改善高脂血癥大鼠血液流變性及抗氧化作用研究。中藥藥理與臨床，2009，25(2):80-82。)但野馬追是否具有抗乙肝病毒作用，未見報(bào)道，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)其具有抗乙肝病毒的活性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的是:提供一種野馬追在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案是:野馬追在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用。
[0006]所述野馬追為野馬追乙醇提取物，所述乙醇提取物采取下述方法得到:取野馬追干燥全草，切段2~3cm，加8~15倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60%~95%乙醇水溶液，回流提取I~3小時(shí)，重復(fù)I~3次，40°C~60°C減壓回收溶劑，得野馬追乙醇提取物。
[0007]所述野馬追為含有棕矢車菊素和澤蘭葉黃素的野馬追黃酮部位，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式分別為:
[0008]

【權(quán)利要求】
1.一種野馬追在制備抗乙肝病毒藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述野馬追為野馬追乙醇提取物，所述乙醇提取物采用下述方法得到:取野馬追干燥全草，切段2~3cm，加8~15倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60%~95%乙醇水溶液，回流提取I~3小時(shí)，重復(fù)I~3次，40°C~60°C減壓回收溶劑，得野馬追乙醇提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述野馬追為含有棕矢車菊素和澤蘭葉黃素的野馬追黃酮部位，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下:
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述野馬追為含有野馬追內(nèi)酯F、野馬追內(nèi)酯G、野馬追內(nèi)酯H、野馬追內(nèi)酯I和野馬追內(nèi)酯K的野馬追倍半萜部位，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下:
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述野馬追為野馬追70%乙醇水洗脫部位，其采取下述方法制備得到:取野馬追干燥全草，切段2~3cm，加8~15倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60%~95%乙醇水溶液，回流提取I~3小時(shí)，重復(fù)I~3次，40°C~60°C減壓回收溶劑，得野馬追乙醇提取物；將該提取物溶于水中，制備成濃度為0.5~lg/ml的溶液，經(jīng)弱極性大孔吸附樹脂吸附，先以水洗脫除去大分子化合物，然后用體積分?jǐn)?shù)為90%~95%乙醇水溶液洗脫，40°C~60°C減壓回收溶劑得大孔樹脂部位；所得大孔樹脂部位經(jīng)ODS反相硅膠色譜柱吸附，先以體積分?jǐn)?shù)為50%甲醇水溶液洗脫，然后用70%~75%甲醇水溶液洗脫，40°C~60°C減壓回收溶劑后，再經(jīng)30~60目聚酰胺色譜柱吸附，以體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇水溶液洗脫，得野馬追70%乙醇水洗脫部位。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述弱極性大孔吸附樹脂為AB-8、DlOUHPD-100、HPD-200A、HPD-200B、HPD-300、HPD-700 或 HPD-722 大孔吸附樹脂；所述 ODS 反相硅膠色譜柱為DAISOGEL ODS反相硅膠填料粒徑50~70um、Cosmsil ODS反相硅膠填料粒徑50~70um或YMCODS-A反相硅膠填料粒徑50~70um ;所述水與弱極性大孔吸附樹脂體積比為8~15:1 ;所述90%~95%乙醇水溶液與大孔吸附樹脂體積比為8~15:1 ;所述ODS反相硅膠色譜柱柱體積與所得大孔樹脂部位質(zhì)量比為20~30:1 ;所述50%甲醇水溶液和70%~75%甲醇水溶液與ODS反相硅膠色譜柱的體積比均為5~8:1 ;所述聚酰胺色譜柱柱體積與吸附樣品的質(zhì)量比為20~30:1 ;所述70%乙醇水溶液與聚酰胺色譜柱體積比為4~10:1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述野馬追為野馬追中鏈狀二萜化合物，選自(I)3-(hydroxymethyl)-1,14,15-trihydroxy-7,11,15_trimethyl-2,6，10-hexadecatrien-13-acetat 和(2)3_(hydroxymethyl)-1,13,15-trihydroxy-7,II,15-trimethyl_2,6,10-hexadecatrien-14_acetate,其化學(xué)結(jié)構(gòu)式分別為:
【文檔編號(hào)】A61K31/352GK104069145SQ201410244607
【公開日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2014年6月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月4日
【發(fā)明者】張健, 陳道峰, 任慧玲, 褚純雋, 李顯倫, 嚴(yán)彪, 吳雙慶 申請(qǐng)人:蘇州大學(xué)