一種中藥復(fù)方提取物的制備方法及其制備的中藥復(fù)方提取物和用途
【專利摘要】本發(fā)明提供一種中藥提取物的制備方法及其制備的中藥提取物。所述中藥復(fù)方提取物的原料藥組成為：黃芪?30-60重量份、女貞子?9-15重量份、益母草?9-30重量份、烏梅?3-10重量份、黃連?2-9重量份、肉桂?1-5重量份、密蒙花?3-9重量份；所述制備方法包括：肉桂提取揮發(fā)油，揮發(fā)油用β-環(huán)糊精包合；肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅先用乙醇溶液I提取，再經(jīng)過大孔吸附樹脂精制，得干浸膏粉1；黃連和益母草先用乙醇溶液III提取，再經(jīng)過離子交換樹脂精制，得干浸膏粉2；干浸膏粉1和干浸膏粉2以及揮發(fā)油包合物，混合均勻，即得所述中藥復(fù)方提取物。本發(fā)明制備方法顯著提高了所述中藥復(fù)方提取物的活性物質(zhì)含量和藥理作用。
【專利說明】一種中藥復(fù)方提取物的制備方法及其制備的中藥復(fù)方提取物和用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種用于糖尿病視網(wǎng)膜病變的中藥復(fù)方提取物的制備方法及其制備的中藥復(fù)方提取物和用途。

【背景技術(shù)】
[0002]糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic Retinopathy,簡稱DR),是糖尿病嚴(yán)重而常見的眼部并發(fā)癥之一。隨著糖尿病病程的延長，DR的發(fā)生率亦隨之增高。病程8年以上者中，糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生率約為50%。該病早期癥狀不明顯，易被忽視，晚期又沒有特效的控制方法，疾病纏綿，頑固難治。本病失治，后果嚴(yán)重，是導(dǎo)致成人失明的主要原因，致盲率高達(dá)8-12%，對患病人群的生活質(zhì)量造成了嚴(yán)重不良影響。因此，DR的防治已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)領(lǐng)域急需解決的重大攻關(guān)課題，日益受到國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界和醫(yī)藥工作者的高度重視。但是，目前國內(nèi)外尚缺乏治療本病的有效藥物。為了滿足日益擴(kuò)大的市場需求，預(yù)防和延緩糖尿病患者視網(wǎng)膜病變的疾病進(jìn)程，提高廣大糖尿病患者的生活質(zhì)量，發(fā)揮中醫(yī)藥治療疑難疾病等優(yōu)勢病種的特長，開展治療DR的中藥新藥具有十分重要的社會意義和經(jīng)濟(jì)價值。
[0003]在 申請人:早前的一件名為“一種治療早期糖尿病視網(wǎng)膜病變的中藥制劑”專利中(專利號ZL200610087540.3，授權(quán)公告日2009年9月16日)，公開了一種治療早期糖尿病視網(wǎng)膜病變的中藥制劑，處方組成為:
[0004]黃苗30_60g、女貞子9_15g、益母草9_30g、烏梅3_10g、黃連2_9g、肉桂2_5g、密蒙花3_9g。
[0005]該專利文件還公開了上述中藥制劑的制備方法，即:(1)取相應(yīng)配比的各種藥組分七劑；(2)用清潔冷水浸泡30分鐘；(3)放入煎藥機(jī)中，加入2500毫升浸泡水，煎煮40分鐘，機(jī)械擠壓出藥汁；(4)分裝14個密封塑料袋中，每袋175毫升。
[0006]上述方法僅是中藥煎劑的簡單制備方法，并沒有考慮如何充分提取出藥物中的有效成分，使藥材資源浪費(fèi)嚴(yán)重，但是藥效作用不顯著；同時水煎劑帶來服用量大，口感差，不方便攜帶，不宜長期儲存的問題。
[0007]因此，有必要在充分考慮處方中各味藥物的活性成分在種類、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)上的差異的基礎(chǔ)上，對上述提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，以期在減少單次服用量的同時，顯著提高藥效，為患者提供更好的治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的藥物。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]針對上述問題，本發(fā)明的一個目的在于提供一種治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的中藥復(fù)方提取物的制備方法。與現(xiàn)有技術(shù)的水煎煮法比較，本發(fā)明所述制備方法引入大孔吸附樹脂和離子交換樹脂進(jìn)行精制，顯著降低口服劑量，單位制劑中活性物質(zhì)的含量更高、藥效更顯著。
[0009]為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用了如下的技術(shù)方案:
[0010]一種中藥復(fù)方提取物的制備方法，所述中藥復(fù)方提取物的原料藥組成為:
[0011]黃芪30-60重量份、女貞子9-15重量份、益母草9_30重量份、烏梅3_10重量份、黃連2-9重量份、肉桂1-5重量份、密蒙花3-9重量份；
[0012]所述制備方法包括如下步驟:
[0013](I)按照所述重量份準(zhǔn)備各原料藥；
[0014](2)肉桂提取揮發(fā)油，肉桂藥渣備用，揮發(fā)油用環(huán)糊精包合，得揮發(fā)油包合物；
[0015](3)步驟(2)得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，用體積百分比濃度為30% -80%的乙醇溶液I提取，醇提取液回收乙醇，濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I ;
[0016](4)步驟(3)得到的提取浸膏I上大孔吸附樹脂，用水洗脫，棄去水洗液，再用體積百分比濃度為30% -100%的乙醇溶液II洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，濃縮，干燥，得浸膏粉I ;
[0017](5)益母草、黃連加體積百分比濃度為30% -80%的乙醇溶液III提取，醇提取液回收乙醇，濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ;
[0018](6)步驟(5)得到的提取浸膏2上酸性陽離子交換樹脂，用水洗脫，棄去水洗液，再用洗脫劑洗脫至生物堿反應(yīng)呈陰性為止，收集洗脫液，濃縮，干燥，得浸膏粉2 ；
[0019](7)將所述浸膏粉1、浸膏粉2和揮發(fā)油包合物混合均勻，即得所述中藥復(fù)方提取物。
[0020]上述原料藥的單位處方組成優(yōu)選為:
[0021]黃芪30g、女貞子15g、益母草15g、烏梅9g、黃連6g、肉桂lg、密蒙花6g。
[0022]優(yōu)選的，所述步驟(2)中，肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量為藥材重量的6-16倍，提取時間為3-7小時。
[0023]更優(yōu)選的，所述步驟(2)中，肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量為藥材重量的8倍，提取時間5小時。
[0024]還優(yōu)選的，所述步驟(2)中，揮發(fā)油先用無水乙醇溶解，再與環(huán)糊精水溶液進(jìn)行包合。
[0025]更優(yōu)選的，所述步驟(2)中，所述無水乙醇的體積為揮發(fā)油體積的1-3倍，更優(yōu)選為揮發(fā)油體積的2倍。
[0026]更優(yōu)選的，所述步驟(2)中，環(huán)糊精的重量是揮發(fā)油體積的6-20倍，進(jìn)一步優(yōu)選為揮發(fā)油體積的10倍。
[0027]更優(yōu)選的，所述步驟(2)中，所述環(huán)糊精水溶液，水重量為環(huán)糊精重量的15-40倍；進(jìn)一步優(yōu)選的，水的重量為β -環(huán)糊精重量的25倍。
[0028]所述步驟(2)優(yōu)選的技術(shù)方案為:
[0029]肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量是肉桂重量的6-16倍，提取時間為3-7小時；蒸餾后的水溶液另器收集，肉桂藥渣備用；揮發(fā)油加1-3倍體積的無水乙醇溶解，得到揮發(fā)油乙醇液；稱取重量為揮發(fā)油體積6-20倍的β-環(huán)糊精，加入β-環(huán)糊精重量15-40倍的水，混合均勻，得到β -環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β-環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45 V下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物。
[0030]所述步驟(2)更優(yōu)選的技術(shù)方案為:
[0031]肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量是肉桂重量的10倍，提取時間為5小時；蒸餾后的水溶液另器收集，肉桂藥渣備用；揮發(fā)油加2倍體積的無水乙醇溶解，得到揮發(fā)油乙醇液；稱取重量為揮發(fā)油體積10倍的β-環(huán)糊精，加入環(huán)糊精重量25倍的水，混合均勻，得到環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β-環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物。
[0032]優(yōu)選的，所述步驟(3)中，乙醇溶液I的體積百分比濃度為40% -70%，更優(yōu)選為50%。
[0033]還優(yōu)選的，所述步驟(3)中，乙醇溶液I的體積為所述藥材總重量的6-14倍；更優(yōu)選的，乙醇溶液I的體積為所述藥材總重量的10倍。
[0034]還優(yōu)選的，所述步驟(3)中，提取2-3次，每次0.5-2小時；更優(yōu)選的，提取2次，每次1.5小時。
[0035]優(yōu)選的，所述步驟(4)中，所述大孔吸附樹脂選自非極性或弱極性大孔吸附樹脂中的一種；更優(yōu)選自AB-8、D101、HP-20和HPD400中的一種。
[0036]還優(yōu)選的，所述步驟(4)中，水的用量為柱體積的4-8倍；更優(yōu)選的，水的用量為柱體積的5倍。
[0037]還優(yōu)選的，所述步驟(4)中，所述乙醇溶液II的體積百分比濃度為40% -80%;更優(yōu)選為70%。
[0038]還優(yōu)選的，所述步驟(4)中，所述乙醇溶液II的用量為柱體積的3-8倍；更優(yōu)選為柱體積的5倍。
[0039]優(yōu)選的，所述步驟(5)中，乙醇溶液III的體積百分比濃度為40% _70%，更優(yōu)選為 60%。
[0040]還優(yōu)選的，所述步驟(5)中，乙醇溶液III的體積為所述藥材總重量的6-14倍；更優(yōu)選的，乙醇溶液III的體積為所述藥材總重量的10倍。
[0041]還優(yōu)選的，所述步驟(5)中，提取2-3次，每次0.5-2小時；更優(yōu)選的，提取3次，每次1.5小時。
[0042]優(yōu)選的，所述步驟￠)中，離子交換樹脂選自強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂。
[0043]還優(yōu)選的，所述步驟(6)中，提取浸膏2先調(diào)pH值1-3，再上離子交換樹脂；更優(yōu)選的，提取浸膏2先調(diào)pH值2。
[0044]還優(yōu)選的，所述步驟(6)中，水的用量為柱體積的8-14倍；更優(yōu)選的，水的用量為柱體積的10倍。
[0045]還優(yōu)選的，所述步驟(6)中，所述洗脫劑選自5% -12%的氨水溶液、含氨的10% -70%的乙醇溶液、2% -10%的鹽酸溶液和l-3mol/L氯化鈉溶液中的一種；更優(yōu)選的，所述洗脫劑為含5%氨水的50%乙醇溶液。
[0046]還優(yōu)選的，所述洗脫劑的用量為柱體積的3-12倍；更優(yōu)選的，所述洗脫劑的用量為柱體積的8倍。
[0047]作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式，所述制備方法的具體操作步驟如下:
[0048](I)按照所述重量份準(zhǔn)備原料藥；
[0049](2)肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量是肉桂重量的6-16倍，提取時間為3-7小時；蒸餾后的水溶液另器收集，肉桂藥渣備用；揮發(fā)油加1-3倍體積的無水乙醇溶解，得到揮發(fā)油乙醇液；稱取重量為揮發(fā)油體積6-20倍的β-環(huán)糊精，加入β-環(huán)糊精重量15-40倍的水，混合均勻，得到β -環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β-環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物；
[0050](3)步驟⑵得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，用體積為藥材重量6-14倍的體積百分濃度為30% -80%的乙醇溶液I加熱回流提取2-3次，每次0.5-2小時，濾過，合并各次乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，加入步驟(2)得到蒸餾后的水溶液，繼續(xù)減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I ;
[0051](4)步驟(3)得到的浸膏上大孔吸附樹脂，用4-8倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用3-8倍柱體積的體積百分濃度30% -100%的乙醇溶液II洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓濃縮，干燥，得浸膏粉I ;
[0052](5)益母草、黃連加藥材重量6-14倍的30% -80%乙醇溶液III提取2-3次，每次0.5-2小時，合并各次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時測定相對密度為
1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0053](6)步驟(5)得到的提取浸膏2調(diào)pH值1-3，上離子交換樹脂，用8-14倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用3-12倍柱體積所述洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得浸膏粉2 ；
[0054](7)合并所述浸膏粉1、浸膏粉2和揮發(fā)油包合物，混合均勻，即得所述中藥復(fù)方提取物。
[0055]作為本發(fā)明的一個更優(yōu)選的實(shí)施方式，所述制備方法的具體操作步驟如下:
[0056](I)按照所述重量份準(zhǔn)備原料藥；
[0057](2)肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量是肉桂重量的10倍，提取時間為5小時；蒸餾后的水溶液另器收集，肉桂藥渣備用；揮發(fā)油加2倍體積的無水乙醇溶解，得到揮發(fā)油乙醇液；稱取重量為揮發(fā)油體積10倍的環(huán)糊精，加入環(huán)糊精重量25倍的水，混合均勻，得到環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β-環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物；
[0058](3)步驟⑵得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，用體積為藥材重量10倍的體積百分濃度為50%的乙醇溶液加熱回流提取2次，每次1.5小時，濾過，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，加入步驟(2)得到蒸餾后的水溶液，繼續(xù)減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I ;
[0059](4)步驟(3)得到的浸膏上大孔吸附樹脂，用5倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用5倍柱體積的體積百分濃度70%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓濃縮，干燥，得浸膏粉I ;
[0060](5)益母草、黃連加藥材重量10倍的60%乙醇溶液提取3次，每次1.5小時，合并三次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0061](6)步驟(5)得到的提取浸膏2調(diào)pH值2，上離子交換樹脂，用10倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用8倍柱體積含5%氨水的50%乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得浸膏粉2;
[0062](7)合并所述浸膏粉1、浸膏粉2和揮發(fā)油包合物，混合均勻，即得所述中藥復(fù)方提取物。
[0063]本發(fā)明的另一個目的在于提供一種上述制備方法制備得到的中藥復(fù)方提取物。
[0064]本發(fā)明還有一個目的在于，提供上述中藥復(fù)方提取物在制備治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的藥物中的應(yīng)用。
[0065]上述應(yīng)用中，所述中藥復(fù)方提取物加入或者不加入所述藥學(xué)上可以接受的輔料，制備成臨床上可以接受的制劑。
[0066]本發(fā)明所述藥學(xué)上可以接受的輔料，可以包括但不限于:
[0067]稀釋劑:例如選自淀粉、糊精、預(yù)膠化淀粉、乳糖、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣、氧化鎂、碳酸鎂、氫氧化鋁凝膠、β -環(huán)糊精、甘露醇、山梨醇、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、羥甲基纖維素鈉中的一種或多種。
[0068]粘合劑:例如選自蒸餾水、乙醇、淀粉漿、羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、甲基纖維素和乙基纖維素、羥丙甲纖維素中的一種或多種。
[0069]潤滑劑:例如選自十二烷基硫酸鎂、聚乙二醇、微粉硅膠、硬脂酸鎂、滑石粉中的一種或多種。
[0070]矯味劑:例如選自糖精鈉、甜蜜素、阿斯巴甜、甜菊苷以及香精類中的一種或多種。
[0071]本發(fā)明的有益技術(shù)效果在于:(I)采用不同的溶劑對方中不同的藥味、不同的有效成分采取分類提取，盡可能將方中有效成分提取完全，從而提高療效、節(jié)約中藥資源。(2)本發(fā)明在提取和精制方面，充分考慮處方中各味藥物的活性成分，并引入大孔吸附樹脂和離子交換樹脂等分離手段對處方中有效成分進(jìn)行精制。本發(fā)明處方中黃芪、女貞子、烏梅、密蒙花主要含皂苷、黃酮類成分，采用大孔吸附樹脂法對其進(jìn)行精制。黃連和益母草中主要含生物堿類成分，采用離子交換樹脂法對其進(jìn)行精制，使得主要有效成分得到了富集。(3)精制后樣品，即保證了有效成分，又降低口服劑量，便于制成片劑、膠囊等現(xiàn)代劑型，能提高患者順應(yīng)性。(4)肉桂提取揮發(fā)油，并采用β_環(huán)糊精技術(shù)進(jìn)行包合，最大限度地保留了揮發(fā)油的含量，保存了其藥效物質(zhì)(有文獻(xiàn)報(bào)道，肉桂揮發(fā)油具有一定降低血糖作用，且呈現(xiàn)劑量依賴性)，從而保證了其藥效的充分發(fā)揮；而傳統(tǒng)水煎煮則幾乎沒有任何保留揮發(fā)油。
[0072]藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)(試驗(yàn)例2)從改善糖尿病大鼠血液流變學(xué)、視網(wǎng)膜毛細(xì)血管形態(tài)學(xué)方面證明，本發(fā)明所述方法在不同工藝條件下制備得到的提取物，改善糖尿病大鼠視網(wǎng)膜微血管病變的作用都強(qiáng)于現(xiàn)有技術(shù)中的水煎劑。說明本發(fā)明所述制備方法得到的提取物與原制劑(水煎劑)比較，具有更好的療效。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0073]以下，結(jié)合附圖來詳細(xì)說明本發(fā)明的實(shí)施方案，其中:
[0074]圖1的柱狀圖顯示的是試驗(yàn)例I中，本發(fā)明所述制備方法與現(xiàn)有技術(shù)對主要藥效成分提取率的比較。

【具體實(shí)施方式】
[0075]以下參照具體的實(shí)施例來說明本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，其不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
[0076]下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的藥材原料、試劑材料等，如無特殊說明，均為市售購買產(chǎn)品。
[0077]實(shí)施例1 一種中藥復(fù)方提取物的制備方法及其制備的中藥復(fù)方提取物
[0078]原料藥處方:
[0079]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花 1.2kg
[0080]所述制備方法的具體步驟如下:
[0081](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0082](2)肉桂加藥材重量10倍的水，用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣備用；揮發(fā)油加2倍體積的無水乙醇溶解；取重量10倍于揮發(fā)油體積的β-環(huán)糊精，加環(huán)糊精重量25倍的水制成的β-環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β -環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物。
[0083](3)步驟⑵得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，加體積為藥材重量10倍的體積百分濃度為60%的乙醇溶液回流提取2次，每次1.5小時，濾過，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，加入步驟(2)得到蒸餾后的水溶液，繼續(xù)減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I。
[0084](4)步驟(3)得到的提取浸膏I上AB-8大孔樹脂，用5倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用5倍柱體積的體積百分濃度為70%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓干燥，得浸膏粉I。
[0085](5)益母草、黃連加藥材重量10倍的60%乙醇溶液提取3次，每次1.5小時，濾過，合并三次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0086](6)提取浸膏2調(diào)節(jié)pH值2，上(732) 001 X 7陽離子交換樹脂，用10倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用8倍柱體積含5%氨水的50%乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，減壓濃縮，干燥，得浸膏粉2 ;
[0087](7)將上述浸膏粉1、浸膏粉2與步驟(2)得到的揮發(fā)油包合物混合均勻，即得中藥復(fù)方提取物790g。
[0088]實(shí)施例2 一種中藥復(fù)方提取物的制備方法及其制備的中藥復(fù)方提取物
[0089]原料藥處方:
[0090]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花 1.2kg
[0091]所述制備方法的具體步驟如下:
[0092](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0093](2)肉桂加藥材重量8倍的水，用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣備用；揮發(fā)油加I倍體積無水乙醇溶解，取重量6倍于揮發(fā)油體積的β-環(huán)糊精，加β_環(huán)糊精重量15倍的水制成的β_環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45 V下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物。
[0094](3)步驟⑵得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，加體積為藥材重量6倍的體積百分濃度為30%的乙醇溶液回流提取2次，每次0.5小時，濾過，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，加入步驟(2)得到蒸餾后的水溶液，繼續(xù)減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I。
[0095](4)步驟(3)得到的提取浸膏I上DlOl大孔樹脂，用4倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用8倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓干燥，得浸膏粉I。
[0096](5)益母草、黃連加藥材重量6倍的30%乙醇溶液提取2次，每次0.5小時，濾過，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0097](6)提取浸膏2調(diào)節(jié)pH值1，上(732) 001 X 7陽離子交換樹脂，用8倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用12倍柱體積10%氨水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，減壓濃縮，干燥，得浸膏粉2;
[0098](7)將上述浸膏粉1、浸膏粉2與步驟(2)得到的揮發(fā)油包合物混合均勻，即得中藥復(fù)方提取物730g。
[0099]實(shí)施例3 一種中藥復(fù)方提取物的制備方法及其制備的中藥復(fù)方提取物
[0100]原料藥處方:
[0101]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花1.2kg
[0102]所述制備方法的具體步驟如下:
[0103](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0104](2)肉桂加藥材重量12倍的水，用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣備用；揮發(fā)油加3倍體積無水乙醇溶解，取重量20倍于揮發(fā)油體積的β-環(huán)糊精，加環(huán)糊精重量40倍的水制成的β-環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物。
[0105](3)步驟⑵得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，加體積為藥材重量14倍的體積百分濃度為80%的乙醇溶液回流提取3次，每次2小時，濾過，合并三次乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，加入步驟(2)得到蒸餾后的水溶液，繼續(xù)減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I。
[0106](4)步驟(3)得到的提取浸膏I上HP-20大孔樹脂，用8倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用3倍柱體積的體積百分濃度為100%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓干燥，得浸膏粉I。
[0107](5)益母草、黃連加藥材重量14倍的80%乙醇溶液提取3次，每次2小時，濾過，合并三次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0108](6)提取浸膏2調(diào)節(jié)pH值3，上(732)001X7陽離子交換樹脂，用14倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用3倍柱體積的3mol/L氯化鈉溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，得浸膏粉2;
[0109](7)將上述浸膏粉1、浸膏粉2與步驟(2)得到的揮發(fā)油包合物混合均勻，即得中藥復(fù)方提取物750g。
[0110]實(shí)施例4 一種中藥復(fù)方提取物的制備方法及其制備的中藥復(fù)方提取物
[0111]原料藥處方“
[0112]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花 1.2kg
[0113]所述制備方法的具體步驟為:
[0114](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0115](2)肉桂加藥材重量8倍的水，用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣備用；揮發(fā)油加2倍體積的無水乙醇溶解；取重量20倍于揮發(fā)油體積的β-環(huán)糊精，加環(huán)糊精重量30倍的水制成的環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物。
[0116](3)步驟⑵得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，加體積為藥材重量10倍的體積百分濃度為40%的乙醇溶回流提取2次，每次1.5小時，濾過，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，加入步驟(2)得到蒸餾后的水溶液，繼續(xù)減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I。
[0117](4)步驟(3)得到的提取浸膏I上AB-8大孔樹脂，用5倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用5倍柱體積的體積百分濃度為50%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓干燥，得浸膏粉I。
[0118](5)益母草、黃連加藥材重量10倍的40%乙醇溶液提取3次，每次1.5小時，濾過，合并三次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0119](6)提取浸膏2調(diào)節(jié)pH值2，上(732) 001 X 7陽離子交換樹脂，用10倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用10倍柱體積的8%鹽酸溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，減壓濃縮，干燥，得浸膏粉2;
[0120](7)將上述浸膏粉1、浸膏粉2與步驟(2)得到的揮發(fā)油包合物混合均勻，即得中藥復(fù)方提取物770g。
[0121]對比例I 一種中藥煎劑的制備方法及其制備的中藥煎劑
[0122]原料藥處方:
[0123]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花 1.2kg
[0124]所述中藥組合物的制備方法，具體步驟為:
[0125](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0126](2)取各味藥材，用清潔冷水浸泡30分鐘，放入煎藥機(jī)中，加入71.43升浸泡水，煎煮40分鐘，機(jī)械擠壓出藥汁，減壓濃縮至18.74升，即得所述中藥煎劑。
[0127](3)噴霧干燥，得到浸膏4.15kg。
[0128]試驗(yàn)例I本發(fā)明所述中藥復(fù)方提取物與現(xiàn)有技術(shù)的比較
[0129]測試樣品:
[0130]I)本發(fā)明實(shí)施例1-4制備的中藥復(fù)方提取物
[0131]2)對比例制備的中藥煎劑的干浸膏
[0132]試驗(yàn)方法:
[0133]I)黃芪甲苷的含量測定
[0134]色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(35:65)為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測。
[0135]對照品溶液的制備:取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含
0.3mg的溶液，即得。
[0136]供試品溶液的制備:取測試樣品3g，精密稱定，精密加甲醇100ml，稱定重量，加熱回流I小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足重量，搖勻，過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液50ml，蒸干，加水25ml使溶解，用水飽和正丁醇振搖提取4次，每次25ml，合并正丁醇，用氨試液充分洗滌3次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
[0137]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國藥典》283頁黃芪藥材【含量測定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。
[0138]測定法:分別精密吸取對照品溶液10μ 1、30μ 1，供試品溶液20μ 1，注入液相色譜儀，測定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，即得。
[0139]提取率=黃芪甲苷總量/投入藥材中含黃芪甲苷總量X 100%
[0140]2)蒙花苷的含量測定
[0141]色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水-醋酸(45:54.5:0.5)為流動相，檢測波長為326nm。
[0142]對照品溶液的制備:取蒙花苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0.3mg的溶液，即得。
[0143]供試品溶液的制備:取測試樣品lg，精密稱定，精密加50%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0144]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國藥典》308頁密蒙花藥材【含量測定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。測定法:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0145]提取率=蒙花苷總量/投入藥材中含蒙花苷總量X 100%
[0146]3)小檗堿的含量測定
[0147]色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀(50:50)(每10ml加入十二烷基硫酸鈉0.4g，再以磷酸調(diào)節(jié)pH值為4.0)為流動相，檢測波長為345nm
[0148]對照品溶液的制備:取鹽酸小檗堿對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含
0.1mg的溶液，即得。
[0149]供試品溶液的制備:取測試樣品0.3g，精密稱定，精密加甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0150]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國藥典》285頁黃連藥材【含量測定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。
[0151]測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0152]提取率=小檗堿總量/投入藥材中含小檗堿總量X 100%
[0153]4)益母草堿的含量測定
[0154]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.4%辛烷磺酸鈉的0.1 %磷酸溶液(24:76)為流動相，檢測波長為277nm。
[0155]對照品溶液的制備:取益母草堿對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含
0.03mg的溶液，作為對照品溶液。
[0156]供試品溶液的制備:取測試樣品2g，精密稱定，精密加75%甲醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用75 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0157]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國藥典》272頁益母草藥材【含量測定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。
[0158]測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0159]提取率=益母草堿總量/投入藥材中含益母草堿總量X 100%
[0160]5)桂皮醛的含量測定
[0161]色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(35:75)為流動相；檢測波長為290nm。
[0162]對照品溶液的制備:取桂皮醛對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含10μ g的溶液，即得。
[0163]供試品溶液的制備:取測試樣品0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理(功率350W，頻率35kHz) 10分鐘，放置過夜，同法超聲處理一次，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，即得。
[0164]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國藥典》127頁肉桂藥材【含量測定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。
[0165]測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0166]提取率=桂皮醛總量/投入藥材中含桂皮醛總量X 100%
[0167]試驗(yàn)結(jié)果:見表I和圖1。
[0168]I)表I顯示，本發(fā)明所述制備方法，不同工藝參數(shù)下制備的提取物，檢測的各個成分的提取率均高于相同原料藥處方的對比例的煎劑；尤其是桂皮醛，在對比例的煎劑中未測出。
[0169]2)實(shí)施例1的中藥復(fù)方提取物，其黃芪甲苷、蒙花苷和小檗堿的量及提取率高于其它實(shí)施例，其次是實(shí)施例4的中藥復(fù)方提取物。
[0170]表I對比例與實(shí)施例藥效成分對比表
[0171]

【權(quán)利要求】
1.一種中藥復(fù)方提取物的制備方法，所述中藥復(fù)方提取物的原料藥組成為: 黃芪30-60重量份、女貞子9-15重量份、益母草9-30重量份、烏梅3_10重量份、黃連2-9重量份、肉桂1-5重量份、密蒙花3-9重量份； 其特征在于，所述制備方法包括如下步驟: (1)按照所述重量份準(zhǔn)備各原料藥； (2)肉桂提取揮發(fā)油，肉桂藥渣備用，揮發(fā)油用β環(huán)糊精包合，得揮發(fā)油包合物； (3)步驟⑵得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，用體積百分比濃度為30% -80%的乙醇溶液I提取，醇提取液回收乙醇，濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I ; (4)步驟(3)得到的提取浸膏I上大孔吸附樹脂，用水洗脫，棄去水洗液，再用體積百分比濃度為30 % -100%的乙醇溶液II洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，濃縮，干燥，得浸膏粉I ; (5)益母草、黃連加體積百分比濃度為30%-80%的乙醇溶液III提取，醇提取液回收乙醇，濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ； (6)步驟(5)得到的提取浸膏2上酸性陽離子交換樹脂，用水洗脫，棄去水洗液，再用洗脫劑洗脫至生物堿反應(yīng)呈陰性為止，收集洗脫液，濃縮，干燥，得浸膏粉2 ; (7)將所述浸膏粉1、浸膏粉2和揮發(fā)油包合物混合均勻，即得所述中藥復(fù)方提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述原料藥的單位處方組成為: 黃芪30g、女貞子15g、益母草15g、烏梅9g、黃連6g、肉桂lg、密蒙花6g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量為藥材重量的6-16倍，提取時間為3-7小時；優(yōu)選的，水的重量為藥材重量的8倍,提取時間5小時； 優(yōu)選的，所述步驟(2)中，揮發(fā)油先用無水乙醇溶解，再與環(huán)糊精水溶液進(jìn)行包合； 更優(yōu)選的，所述步驟(2)中，所述無水乙醇的體積為揮發(fā)油體積的1-3倍，進(jìn)一步優(yōu)選為揮發(fā)油體積的2倍； 更優(yōu)選的，所述步驟(2)中，環(huán)糊精的重量是揮發(fā)油體積的6-20倍，進(jìn)一步優(yōu)選為揮發(fā)油體積的10倍； 更優(yōu)選的，所述步驟(2)中，所述環(huán)糊精水溶液，水重量為環(huán)糊精重量的15-40倍；進(jìn)一步優(yōu)選的，水的重量為β_環(huán)糊精重量的25倍； 所述步驟(2)優(yōu)選的技術(shù)方案為: 肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量是肉桂重量的6-16倍，提取時間為3-7小時；蒸餾后的水溶液另器收集，肉桂藥渣備用；揮發(fā)油加1-3倍體積的無水乙醇溶解，得到揮發(fā)油乙醇液；稱取重量為揮發(fā)油體積6-20倍的β-環(huán)糊精，加入β-環(huán)糊精重量15-40倍的水，混合均勻，得到環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β-環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物； 所述步驟(2)更優(yōu)選的技術(shù)方案為: 肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量是肉桂重量的6-16倍，提取時間為3-7小時；蒸餾后的水溶液另器收集，肉桂藥渣備用；揮發(fā)油加2倍體積的無水乙醇溶解，得到揮發(fā)油乙醇液；稱取重量為揮發(fā)油體積10倍的β-環(huán)糊精，加入環(huán)糊精重量25倍的水，混合均勻，得到環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β-環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中，乙醇溶液I的體積百分比濃度為40% -70%，更優(yōu)選為50% ； 優(yōu)選的，所述步驟(3)中，乙醇溶液I的體積為所述藥材總重量的6-14倍；更優(yōu)選的，乙醇溶液I的體積為所述藥材總重量的10倍； 優(yōu)選的，所述步驟(3)中，提取2-3次，每次0.5-2小時；更優(yōu)選的，提取2次，每次1.5小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中，所述大孔吸附樹脂選自非極性或弱極性中的一種；更優(yōu)選自AB-8、DlOU HP-20和HPD400中的一種； 優(yōu)選的，所述步驟(4)中，水的用量為柱體積的4-8倍；更優(yōu)選的，水的用量為柱體積的5倍； 優(yōu)選的，所述步驟(4)中，所述乙醇溶液II的體積百分比濃度為40% -80%;更優(yōu)選為70% ； 優(yōu)選的，所述步驟(4)中，所述乙醇溶液II的用量為柱體積的3-8倍；更優(yōu)選為柱體積的5倍。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中，乙醇溶液III的體積百分比濃度為40% -70%，更優(yōu)選為60% ； 還優(yōu)選的，所述步驟(5)中，乙醇溶液III的體積為所述藥材總重量的6-14倍；更優(yōu)選的，乙醇溶液III的體積為所述藥材總重量的10倍； 還優(yōu)選的，所述步驟(5)中，提取2-3次，每次0.5-2小時；更優(yōu)選的，提取3次，每次1.5小時。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(6)中，離子交換樹脂選自強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂； 還優(yōu)選的，所述步驟(6)中，提取浸膏2先調(diào)pH值1-3，再上離子交換樹脂；更優(yōu)選的，提取浸膏2先調(diào)pH值2 ; 還優(yōu)選的，所述步驟￠)中，水的用量為柱體積的8-14倍；更優(yōu)選的，水的用量為柱體積的10倍； 還優(yōu)選的，所述步驟(6)中，所述洗脫劑選自5% -12%的氨水溶液、含氨的10% -70%的乙醇溶液、2% -10%的鹽酸溶液和l_3mol/L氯化鈉溶液中的一種；更優(yōu)選的，所述洗脫劑為含5%氨水的50%乙醇溶液； 還優(yōu)選的，所述洗脫劑的用量為柱體積的3-12倍；更優(yōu)選的，所述洗脫劑的用量為柱體積的8倍。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法的具體操作步驟如下: (I)按照所述重量份準(zhǔn)備原料藥； (2)肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，水的重量是肉桂重量的6-16倍，提取時間為3-7小時；蒸餾后的水溶液另器收集，肉桂藥渣備用；揮發(fā)油加1-3倍體積的無水乙醇溶解，得到揮發(fā)油乙醇液；稱取重量為揮發(fā)油體積6-20倍的β-環(huán)糊精，加入β-環(huán)糊精重量15-40倍的水，混合均勻，得到環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β-環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物； (3)步驟(2)得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，用體積為藥材重量6-14倍的體積百分濃度為30% -80%的乙醇溶液I加熱回流提取2-3次，每次0.5-2小時，濾過，合并各次乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，加入步驟(2)得到蒸餾后的水溶液，繼續(xù)減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I ; (4)步驟(3)得到的浸膏上大孔吸附樹脂，用4-8倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用3-8倍柱體積的體積百分濃度30% -100%的乙醇溶液II洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓濃縮，干燥，得浸膏粉I ; (5)益母草、黃連加藥材重量6-14倍的30%-80%乙醇溶液III提取2_3次，每次0.5-2小時，合并各次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80 V時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2 ； (6)步驟(5)得到的提取浸膏2調(diào)pH值1-3，上離子交換樹脂，用8-14倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用3-12倍柱體積所述洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得浸膏粉2 ； (7)合并所述浸膏粉1、浸膏粉2和揮發(fā)油包合物，混合均勻，即得所述中藥復(fù)方提取物； 所述制備方法更優(yōu)選的具體操作步驟如下: (1)按照所述重量份準(zhǔn)備原料藥； (2)肉桂用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，肉桂藥渣備用；揮發(fā)油加2倍體積的無水乙醇溶解，得到揮發(fā)油乙醇液；稱取重量為揮發(fā)油體積10倍的β -環(huán)糊精，加入環(huán)糊精重量25倍的水，混合均勻，得到β-環(huán)糊精水溶液；在轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分鐘下，緩慢向所述β -環(huán)糊精水溶液加入揮發(fā)油乙醇液，加入完畢后，繼續(xù)攪拌1.5小時，冷藏12小時，過濾，將濾得物在45°C下低溫烘干，得白色疏松的揮發(fā)油包合物； (3)步驟(2)得到的肉桂藥渣與黃芪、女貞子、密蒙花、烏梅合并，用體積為藥材重量10倍的體積百分濃度為50%的乙醇溶液加熱回流提取2次，每次1.5小時，濾過，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，加入步驟(2)得到蒸餾后的水溶液，繼續(xù)減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏I ; (4)步驟(3)得到的浸膏上大孔吸附樹脂，用5倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用5倍柱體積的體積百分濃度70%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓濃縮，干燥，得浸膏粉I ; (5)益母草、黃連加藥材重量10倍的60%乙醇溶液提取3次，每次1.5小時，合并三次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時測定相對密度為1.10-1.20的浸膏，得提取浸膏2； (6)步驟(5)得到的提取浸膏2調(diào)pH值2，上離子交換樹脂，用10倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液,再用8倍柱體積含5%氨水的50%乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮，干燥，得浸膏粉2 ; (7)合并所述浸膏粉1、浸膏粉2和揮發(fā)油包合物，混合均勻，即得所述中藥復(fù)方提取物。
9.權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到的中藥復(fù)方提取物。
10.權(quán)利要求9所述的中藥復(fù)方提取物在制備治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的藥物中的應(yīng)用；優(yōu)選的，所述中藥復(fù)方提取物加入或者不加入所述藥學(xué)上可以接受的輔料，制備成臨床上可以接受的制劑。
【文檔編號】A61P3/10GK104173505SQ201410360230
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年7月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月25日
【發(fā)明者】林德良 申請人:北京漢典制藥有限公司