一種中藥提取物的制備方法及其制備的中藥提取物和用途
【專利摘要】本發(fā)明提供一種中藥提取物的制備方法，所述中藥提取物的原料藥組成為：黃芪30-60重量份、女貞子9-15重量份、益母草9-30重量份、烏梅3-10重量份、黃連2-9重量份、肉桂1-5重量份、密蒙花3-9重量份；所述制備方法包括：各味藥材用藥材重量6-16倍的體積百分濃度為30％-100％乙醇加熱回流提取，回收乙醇，減壓濃縮至80℃時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1；藥渣用水加熱回流提取，水提取液濃縮至80℃時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2；合并提取浸膏1和2，干燥，即得。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制備方法制備得到的中藥提取物活性物質(zhì)含量和藥理作用得到了顯著的提升。
【專利說(shuō)明】一種中藥提取物的制備方法及其制備的中藥提取物和用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種用于糖尿病視網(wǎng)膜病變的中藥提取物的制備方法及其制備的中藥提取物和用途。
【背景技術(shù)】
[0002]糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic Retinopathy,簡(jiǎn)稱DR),是糖尿病嚴(yán)重而常見(jiàn)的眼部并發(fā)癥之一。隨著糖尿病病程的延長(zhǎng)，DR的發(fā)生率亦隨之增高。病程8年以上者中，糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生率約為50%。該病早期癥狀不明顯，易被忽視，晚期又沒(méi)有特效的控制方法，疾病纏綿，頑固難治。本病失治，后果嚴(yán)重，是導(dǎo)致成人失明的主要原因，致盲率高達(dá)8-12%，對(duì)患病人群的生活質(zhì)量造成了嚴(yán)重不良影響。因此，DR的防治已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)領(lǐng)域急需解決的重大攻關(guān)課題，日益受到國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界和醫(yī)藥工作者的高度重視。但是，目前國(guó)內(nèi)外尚缺乏治療本病的有效藥物。為了滿足日益擴(kuò)大的市場(chǎng)需求，預(yù)防和延緩糖尿病患者視網(wǎng)膜病變的疾病進(jìn)程，提高廣大糖尿病患者的生活質(zhì)量，發(fā)揮中醫(yī)藥治療疑難疾病等優(yōu)勢(shì)病種的特長(zhǎng)，開(kāi)展治療DR的中藥新藥具有十分重要的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
[0003]在 申請(qǐng)人:早前的一件名為“一種治療早期糖尿病視網(wǎng)膜病變的中藥制劑”專利中(專利號(hào)ZL200610087540.3，授權(quán)公告日2009年9月16日)，公開(kāi)了一種治療早期糖尿病視網(wǎng)膜病變的中藥制劑，處方組成為:
[0004]黃苗30_60g、女貞子9_15g、益母草9_30g、烏梅3_10g、黃連2_9g、肉桂2_5g、密蒙花 3-9g。
[0005]該專利文件還公開(kāi)了上述中藥制劑的制備方法，即:(1)取相應(yīng)配比的各種藥組分七劑；(2)用清潔冷水浸泡30分鐘；(3)放入煎藥機(jī)中，加入2500毫升浸泡水，煎煮40分鐘，機(jī)械擠壓出藥汁；(4)分裝14個(gè)密封塑料袋中，每袋175毫升。
[0006]上述方法僅是中藥煎劑的簡(jiǎn)單制備方法，并沒(méi)有考慮如何充分提取出藥物中的有效成分，造成有效成分提取不完全，藥材資源浪費(fèi)嚴(yán)重，藥效作用不顯著。而且水煎劑存在口感差，不方便攜帶，不宜長(zhǎng)期儲(chǔ)存的問(wèn)題。
[0007]因此，有必要在充分考慮處方中各味藥物的活性成分在種類、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)上的差異的基礎(chǔ)上，對(duì)上述提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，以期提高藥效，為患者提供更好的治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的藥物。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008]針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的中藥提取物的制備方法。與現(xiàn)有技術(shù)的水煎煮法比較，本發(fā)明所述制備方法制備得到的中藥提取物，活性物質(zhì)的含量更高、藥效更顯著。
[0009]為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用了如下的技術(shù)方案:
[0010]一種中藥提取物的制備方法，所述中藥提取物的原料藥組成為:
[0011]黃芪30-60重量份、女貞子9-15重量份、益母草9_30重量份、烏梅3_10重量份、黃連2-9重量份、肉桂1-5重量份、密蒙花3-9重量份；
[0012]所述制備方法包括如下步驟:
[0013](I)按照所述重量份準(zhǔn)備各原料藥；
[0014](2)以上各味藥材，加體積百分比濃度為30% -100%的乙醇溶液提取，乙醇提取液回收乙醇，濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用；
[0015](3)步驟⑵中得到的藥渣加水提取，水提取液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為
1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0016](4)將提取浸膏I和2合并，得總提取浸膏；
[0017](5)步驟(4)得到的總浸膏干燥，得干浸膏粉，即得。
[0018]所述原料藥單位處方的組成優(yōu)選為:
[0019]黃苗30g、女貞子15g、益母草15g、烏梅9g、黃連6g、肉桂lg、密蒙花6g。
[0020]優(yōu)選的，所述步驟(2)中，乙醇溶液的體積百分比濃度為30%-80%，更優(yōu)選為50%。
[0021]還優(yōu)選的，所述步驟(2)中，乙醇溶液的體積為所述藥材總重量的6-14倍；更優(yōu)選的，乙醇溶液的體積為所述藥材總重量的10倍。
[0022]還優(yōu)選的，所述步驟(2)中，提取2-3次，每次0.5-2小時(shí)；更優(yōu)選的，提取2次，每次1.5小時(shí)。
[0023]優(yōu)選的，所述步驟(3)中，水的重量為藥材重量的6-16倍；優(yōu)選的，水的重量為藥材重量的8倍。
[0024]還優(yōu)選的，所述步驟(3)中，水提取1-3次，每次1-3小時(shí)；更優(yōu)選的，水提取2次，每次2小時(shí)。
[0025]優(yōu)選的，所述步驟(5)中，干燥方法選自烘干、噴霧干燥或減壓干燥；更優(yōu)選為噴霧干燥。
[0026]作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，所述制備方法的具體操作步驟如下:
[0027](I)按照所述重量份準(zhǔn)備原料藥；
[0028](2)以上各味藥材，用藥材重量6-16倍的體積百分濃度為30%-100%乙醇加熱回流提取2-3次，每次0.5-2小時(shí)，濾過(guò)，合并各次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用；
[0029](3)步驟(2)中得到的藥渣，用藥材重量6-14倍的水加熱回流提取2-3次，每次
1-3小時(shí)，濾過(guò)，合并各次濾液，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0030](4)將提取浸膏I和2合并，得總提取浸膏；
[0031](5)步驟(4)得到的總提取浸膏烘干、減壓干燥或噴霧干燥，得干浸膏粉，即得。
[0032]作為本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方式，所述制備方法的具體操作步驟如下:
[0033](I)按照所述重量份準(zhǔn)備原料藥；
[0034](2)以上各味藥材，用藥材重量10倍的體積百分濃度為50%乙醇加熱回流提取2次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用；
[0035](3)步驟⑵中得到的藥渣，用藥材重量8倍的水加熱回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次濾液，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ；
[0036](4)將提取浸膏I和2合并，得總提取浸膏；
[0037](5)步驟(4)得到的總提取浸膏噴霧干燥，得干浸膏粉，即得。
[0038]本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種上述制備方法制備得到的中藥提取物。
[0039]本發(fā)明還有一個(gè)目的在于，提供上述中藥提取物在制備治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的藥物中的應(yīng)用。
[0040]上述應(yīng)用中，所述中藥提取物加入或者不加入所述藥學(xué)上可以接受的輔料，制備成臨床上可以接受的制劑。
[0041]本發(fā)明所述藥學(xué)上可以接受的輔料，可以包括但不限于:
[0042]稀釋劑:例如選自淀粉、糊精、預(yù)膠化淀粉、乳糖、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣、氧化鎂、碳酸鎂、氫氧化鋁凝膠、β -環(huán)糊精、甘露醇、山梨醇、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、羥甲基纖維素鈉中的一種或多種。
[0043]粘合劑:例如選自蒸餾水、乙醇、淀粉漿、羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、甲基纖維素和乙基纖維素、羥丙甲纖維素中的一種或多種。
[0044]潤(rùn)滑劑:例如選自十二烷基硫酸鎂、聚乙二醇、微粉硅膠、硬脂酸鎂、滑石粉中的一種或多種。
[0045]矯味劑:例如選自糖精鈉、甜蜜素、阿斯巴甜、甜菊苷以及香精類中的一種或多種。
[0046]本發(fā)明的有益技術(shù)效果在于:本發(fā)明充分考慮處方中各味藥物的活性成分，分別采用一定濃度的乙醇和水對(duì)有效成分進(jìn)行提取，脂溶性成分和水溶性成分均得到有效提??；現(xiàn)有技術(shù)的水煎劑僅考慮到水溶性成分的提取。因此，本發(fā)明有效成分提取更加完全，能夠更好地發(fā)揮藥效，同時(shí)可以節(jié)約中藥資源。
[0047]藥學(xué)研究證明，本發(fā)明提取方法與原制劑工藝(水煎煮)比較，其主要藥效物質(zhì)的含量明顯提高。藥理實(shí)驗(yàn)從改善糖尿病大鼠血液流變學(xué)、視網(wǎng)膜毛細(xì)血管形態(tài)學(xué)方面證明，本發(fā)明所述方法制備得到的中藥提取物改善糖尿病大鼠視網(wǎng)膜微血管病變的作用明顯強(qiáng)于現(xiàn)有技術(shù)中的水煎劑，說(shuō)明本發(fā)明制備的提取物較原制劑(水煎)具有更好的療效。
【專利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0048]以下，結(jié)合附圖來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方案，其中:
[0049]圖1的柱狀圖顯示的是試驗(yàn)例I中，本發(fā)明所述制備方法與現(xiàn)有技術(shù)在主要藥效成分提取率上的比較。
【具體實(shí)施方式】
[0050]以下參照具體的實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，其不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
[0051]下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的藥材原料、試劑材料等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為市售購(gòu)買產(chǎn)品。
[0052]實(shí)施例1 一種中藥提取物的制備方法及其制備的中藥提取物
[0053]原料藥處方:
[0054]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花1.2kg
[0055]所述制備方法的具體步驟如下:
[0056](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0057](2)以上各味藥材，用藥材重量10倍的體積百分濃度為50%乙醇加熱回流提取2次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用；
[0058](3)步驟(2)中藥渣用藥材重量8倍的水加熱回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次濾液，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2;
[0059](4)將提取浸膏I和提取浸膏2合并，得總提取浸膏；
[0060](5)步驟4得到的所述總浸膏，噴霧干燥，所得干浸膏粉4.53kg，即為所述中藥提取物。
[0061]實(shí)施例2 —種中藥提取物的制備方法及其制備的中藥提取物
[0062]原料藥處方:
[0063]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花1.2kg
[0064]所述制備方法的具體步驟如下:
[0065](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0066](2)以上各味藥材，用藥材重量6倍的體積百分濃度為30%乙醇加熱回流提取2次，每次0.5小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用；
[0067](3)步驟⑵中藥渣用藥材重量6倍的水加熱回流提取I次，提取時(shí)間為I小時(shí)，濾過(guò)，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ;
[0068](4)將提取浸膏I和提取浸膏2合并，得總提取浸膏；
[0069](5)步驟4得到的所述總浸膏，80°C烘干，得干浸膏粉4.45kg，即為所述中藥提取物。
[0070]實(shí)施例3 一種中藥提取物的制備方法及其制備的中藥提取物
[0071]原料藥處方:
[0072]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花1.2kg
[0073]所述制備方法的具體步驟如下:
[0074](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0075](2)以上各味藥材，用藥材重量14倍的體積百分濃度為100%乙醇加熱回流提取3次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并三次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用；
[0076](3)步驟⑵中藥渣用藥材重量16倍的水加熱回流提取3次，每次3小時(shí)，濾過(guò)，合并三次濾液，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ;
[0077](4)將提取浸膏I和提取浸膏2合并，得總提取浸膏；
[0078](5)步驟4得到的所述總浸膏，60°C減壓真空干燥，得干浸膏粉4.24kg，即為所述中藥提取物。
[0079]實(shí)施例4 一種中藥提取物的制備方法及其制備的中藥提取物
[0080]原料藥處方“
[0081]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花1.2kg
[0082]所述制備方法的具體步驟為“
[0083](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0084](2)以上各味藥材，用藥材重量8倍的體積百分濃度為80%乙醇加熱回流提取2次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用；
[0085](3)步驟⑵中藥渣用藥材重量12倍的水加熱回流提取2次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次濾液，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ;
[0086](4)將提取浸膏I和提取浸膏2合并，得總提取浸膏；
[0087](5)步驟4得到的所述總浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉4.40kg，即為所述中藥提取物。
[0088]對(duì)比例I 一種中藥組合物的制備方法及其制備的中藥煎劑
[0089]原料藥處方:
[0090]黃芪6kg、女貞子3kg、益母草3kg、烏梅1.8kg、黃連1.2kg、肉桂0.2kg、密蒙花1.2kg
[0091]所述中藥組合物的制備方法，具體步驟為:
[0092](I)按照處方準(zhǔn)備各味藥材。
[0093](2)取各味藥材，用清潔冷水浸泡30分鐘，放入煎藥機(jī)中，加入71.43升浸泡水，煎煮40分鐘，機(jī)械擠壓出藥汁，減壓濃縮至18.74升，即得所述中藥煎劑；然后噴霧干燥，得到干浸膏粉4.14kg。
[0094]試驗(yàn)例I本發(fā)明所述中藥提取物與現(xiàn)有技術(shù)的比較
[0095]測(cè)試樣品:
[0096]I)本發(fā)明實(shí)施例1-4制備的中藥提取物
[0097]2)對(duì)比例制備的中藥煎劑干浸膏粉
[0098]試驗(yàn)方法:
[0099]I)黃芪甲苷的含量測(cè)定
[0100]色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(35:65)為流動(dòng)相；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。
[0101]對(duì)照品溶液的制備:取黃芪甲苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含
0.3mg的溶液，即得。
[0102]供試品溶液的制備:取測(cè)試樣品3g，精密稱定，精密加甲醇100ml，稱定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足重量，搖勻，過(guò)濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液50ml，蒸干，加水25ml使溶解，用水飽和正丁醇振搖提取4次，每次25ml，合并正丁醇，用氨試液充分洗滌3次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
[0103]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國(guó)藥典》283頁(yè)黃芪藥材【含量測(cè)定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。
[0104]測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液10μ 1、30μ 1，供試品溶液20 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得。
[0105]提取率=黃芪甲苷總量/投入藥材中含黃芪甲苷總量X 100%
[0106]2)蒙花苷的含量測(cè)定
[0107]色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水-醋酸(45:54.5:0.5)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為326nm。
[0108]對(duì)照品溶液的制備:取蒙花苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0.3mg的溶液，即得。
[0109]供試品溶液的制備:取測(cè)試樣品lg，精密稱定，精密加50%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0110]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國(guó)藥典》308頁(yè)密蒙花藥材【含量測(cè)定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。
[0111]測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0112]提取率=蒙花苷總量/投入藥材中含蒙花苷總量X 100%
[0113]3)小檗堿的含量測(cè)定
[0114]色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀(50:50)(每10ml加入十二烷基硫酸鈉0.4g，再以磷酸調(diào)節(jié)pH值為4.0)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為345nm
[0115]對(duì)照品溶液的制備:取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含
0.1mg的溶液，即得。
[0116]供試品溶液的制備:取測(cè)試樣品0.3g，精密稱定，精密加甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0117]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國(guó)藥典》285頁(yè)黃連藥材【含量測(cè)定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。
[0118]測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0119]提取率=提取物中含小檗堿總量/投入藥材中含小檗堿總量X 100%
[0120]4)益母草堿的含量測(cè)定
[0121]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.4%辛烷磺酸鈉的0.1 %磷酸溶液(24:76)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為277nm。
[0122]對(duì)照品溶液的制備:取益母草堿對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含
0.03mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
[0123]供試品溶液的制備:取測(cè)試樣品2g，精密稱定，精密加75%甲醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0124]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國(guó)藥典》272頁(yè)益母草藥材【含量測(cè)定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0125]提取率=益母草堿總量/投入藥材中含益母草堿總量X 100%
[0126]5)桂皮醛的含量測(cè)定
[0127]色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(35:75)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為290nm。
[0128]對(duì)照品溶液的制備:取桂皮醛對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含10μ g的溶液，即得。
[0129]供試品溶液的制備:取測(cè)試樣品0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理(功率350W，頻率35kHz) 10分鐘，放置過(guò)夜，同法超聲處理一次，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，即得。
[0130]藥材供試品溶液的制備:按2010年版《中國(guó)藥典》127頁(yè)肉桂藥材【含量測(cè)定】項(xiàng)下“供試品溶液的制備”方法制備。
[0131]測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0132]提取率=桂皮醛總量/投入藥材中含桂皮醛總量X 100%
[0133]試驗(yàn)結(jié)果:見(jiàn)表1和圖1。
[0134]I)表1顯示，本發(fā)明所述制備方法，不同工藝參數(shù)下制備的提取物，檢測(cè)的各個(gè)成分的提取率均高于相同原料藥處方的對(duì)比例的組合物。
[0135]2)實(shí)施例1對(duì)黃芪甲苷、蒙花苷和小檗堿的提取率明顯高于其它實(shí)施例。
[0136]表1對(duì)比例與實(shí)施例藥效成分對(duì)比表
[0137]
【權(quán)利要求】
1.一種中藥提取物的制備方法，所述中藥提取物的原料藥組成為: 黃芪30-60重量份、女貞子9-15重量份、益母草9-30重量份、烏梅3_10重量份、黃連2-9重量份、肉桂1-5重量份、密蒙花3-9重量份； 其特征在于，所述制備方法包括如下步驟: (1)按照所述重量份準(zhǔn)備各原料藥； (2)以上各味藥材，加體積百分比濃度為30%-100%的乙醇溶液提取，乙醇提取液回收乙醇，濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用； (3)步驟⑵中得到的藥渣加水提取，水提取液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ； (4)將提取浸膏I和2合并，得總提取浸膏； (5)步驟⑷得到的總浸膏干燥，得干浸膏粉，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述原料藥單位處方的組成優(yōu)選為: 黃芪30g、女貞子15g、益母草15g、烏梅9g、黃連6g、肉桂lg、密蒙花6g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，乙醇溶液的體積百分比濃度為30% -80%，更優(yōu)選為50% ； 優(yōu)選的，所述步驟(2)中，乙醇溶液的體積為所述藥材總重量的6-14倍；更優(yōu)選的，乙醇溶液的體積為所述藥材總重量的10倍； 還優(yōu)選的，所述步驟(2)中，提取2-3次，每次0.5-2小時(shí)；更優(yōu)選的，提取2次，每次1.5小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中，水的重量為藥材重量的6-16倍；優(yōu)選的，水的重量為藥材重量的8倍； 還優(yōu)選的，所述步驟(3)中，水提取1-3次，每次1-3小時(shí)；更優(yōu)選的，水提取2次，每次2小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中，干燥方法選自烘干、噴霧干燥或減壓干燥；更優(yōu)選為噴霧干燥。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法的具體操作步驟如下: (1)按照所述重量份準(zhǔn)備原料藥； (2)以上各味藥材，用藥材重量6-16倍的體積百分濃度為30% -100 %乙醇加熱回流提取2-3次，每次0.5-2小時(shí)，濾過(guò)，合并各次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用； (3)步驟(2)中得到的藥渣，用藥材重量6-14倍的水加熱回流提取2-3次，每次1-3小時(shí)，濾過(guò)，合并各次濾液，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ; (4)將提取浸膏I和2合并，得總提取浸膏； (5)步驟(4)得到的總提取浸膏烘干、減壓干燥或噴霧干燥，得干浸膏粉，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法的具體操作步驟如下: (1)按照所述重量份準(zhǔn)備原料藥； (2)以上各味藥材，用藥材重量10倍的體積百分濃度為50%乙醇加熱回流提取2次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次乙醇提取液，回收乙醇，減壓濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏1，藥渣備用； (3)步驟(2)中得到的藥渣，用藥材重量8倍的水加熱回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并兩次濾液，靜置，濾過(guò)，濾液濃縮至80°C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.20-1.30的浸膏，得提取浸膏2 ; (4)將提取浸膏I和2合并，得總提取浸膏； (5)步驟(4)得到的總提取浸膏噴霧干燥，得干浸膏粉，即得。
8.權(quán)利要求1至7所述的制備方法制備得到的中藥提取物。
9.權(quán)利要求8所述的中藥提取物在制備治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的藥物中的應(yīng)用；優(yōu)選的，所述中藥提取物加入或者不加入所述藥學(xué)上可以接受的輔料，制備成臨床上可以接受的制劑。
【文檔編號(hào)】A61P3/10GK104173506SQ201410360249
【公開(kāi)日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2014年7月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月25日
【發(fā)明者】林德良 申請(qǐng)人:北京漢典制藥有限公司