一種類人膠原蛋白粘膜修復(fù)凝膠的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及類人膠原蛋白敷料，具體涉及包含類人膠原蛋白的粘膜修復(fù)凝膠，屬 于美容/醫(yī)療器械領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 類人膠原蛋白是由中國(guó)西北大學(xué)的范代娣教授發(fā)明的（參見中國(guó)專利申請(qǐng)公開說 明書CN1371919A)，因此又稱作范氏重組膠原蛋白或范氏類人膠原蛋白（Fan's Human-like CollagenJHLC)。類人膠原蛋白具有三鏈、三螺旋結(jié)構(gòu)，是一種高生物相容性的重組膠原蛋 白，目前廣泛應(yīng)用于醫(yī)療或美容領(lǐng)域。
[0003] 另一方面，膠原蛋白敷料產(chǎn)品用于例如鼻腔、肛腸、婦科部位粘膜的滋潤(rùn)及保護(hù)的 情況下，膠原蛋白敷料產(chǎn)品的使用往往需要在室內(nèi)進(jìn)行(例如醫(yī)院的耳鼻科、肛腸科及婦科 等），作為產(chǎn)品使用者希望能夠在短時(shí)間內(nèi)即完成使用(使用者可以接受的醫(yī)療的時(shí)間通常 為30分鐘左右），而作用時(shí)間的延長(zhǎng)使得醫(yī)療占用了產(chǎn)品使用者的大量時(shí)間，這減小了膠原 蛋白敷料產(chǎn)品的適用范圍及市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。從這個(gè)角度來講，亟需透皮吸收速度快的膠原蛋 白敷料產(chǎn)品。但遺憾的是，目前為止的研究都僅僅是關(guān)注膠原蛋白的透皮吸收率，而未關(guān)注 膠原蛋白的透皮吸收速度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 鑒于現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種能夠促進(jìn)類人膠原蛋 白快速透皮吸收的用于粘膜修復(fù)的凝膠。
[0005] 發(fā)明人等經(jīng)過深入研究，將著眼點(diǎn)放在此前從未被關(guān)注的膠原蛋白的透皮吸收速 度上，結(jié)果發(fā)現(xiàn):對(duì)于通過在類人膠原蛋白中配合特定種類、特定比例的輔料而形成的類人 膠原蛋白凝膠，能夠促進(jìn)類人膠原蛋白的快速透皮吸收，從而完成了本發(fā)明。
[0006] 即，本發(fā)明如下。
[0007] 1. -種類人膠原蛋白凝膠，其包括： 類人膠原蛋白 0.0丨~丨重量％ 卡波姆 0.03~3重量％ 甘油 5~20重量％
[0008] 透明質(zhì)酸鈉 0.001~0.丨重量％ 聚山梨醇酯80(吐溫80) 0.01~1重量％ 水 余量。
[0009] 2.根據(jù)項(xiàng)1所述的類人膠原蛋白凝膠，其用于粘膜修復(fù)。
[0010] 3.根據(jù)項(xiàng)2所述的類人膠原蛋白凝膠，其中，所述粘膜是鼻粘膜、肛腸粘膜或婦科 部位粘膜。
[0011] 4.項(xiàng)1所述的類人膠原蛋白凝膠在制備用于粘膜修復(fù)的醫(yī)療或美容用敷料中的用 途。
[0012] 5.根據(jù)項(xiàng)4所述的用途，其中，所述粘膜是鼻粘膜、肛腸粘膜或婦科部位粘膜。
[0013] 6.-種制備項(xiàng)1~5中任一項(xiàng)所述的類人膠原蛋白凝膠的方法，該方法包括：
[0014] 步驟A:準(zhǔn)備A相，所述A相由0.03~3重量％的卡波姆、5~20重量％的甘油、0.001 ~0.1重量％的透明質(zhì)酸鈉以及余量的水組成；
[0015] 步驟B:準(zhǔn)備B相，所述B相是類人膠原蛋白液，其包含使得所述的類人膠原蛋白凝 膠中類人膠原蛋白的含量為0.01~1重量％的類人膠原蛋白，介質(zhì)為水，且所述類人膠原蛋 白與所述水的重量比為1:1~20;
[0016] 步驟C:準(zhǔn)備C相，所述C相是0.01~1重量％的聚山梨醇酯80;以及 [0017] 步驟D:將所述B相加入到所述A相中，并加熱至80~85°C，保溫20~60分鐘，然后降 溫至50~60°C，加入所述C相，攪拌均勻后，冷卻至室溫；以所述類人膠原蛋白凝膠的總重量 作為100重量％。
[0018] 7.根據(jù)項(xiàng)6所述的方法，其中，所述A相是通過用甘油將卡波姆和透明質(zhì)酸分散后 加入水中，并攪拌至完全溶解而制備的。
[0019] 本發(fā)明取得了以下技術(shù)效果:在將本發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠施用于皮膚時(shí)，使 得類人膠原蛋白的透皮吸收速度加快，類人膠原蛋白30分鐘透皮吸收率顯著提高。從而，本 發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠能夠提供更好的滋養(yǎng)，刺激粘膜細(xì)胞再生，促進(jìn)受損粘膜的修復(fù)。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說明。
[0021 ]本發(fā)明提供一種類人膠原蛋白凝膠，其包括： 類人膠原蛋白 a:oi~i重量％，猶選0.03~oj重量％ 卡波姆 0.03~3:重量％，優(yōu)選0.1~1.1重量％ 甘油 5~20重量％，優(yōu)選7~15重量％
[0022] 透明質(zhì)酸鈉 0.001~0.1重量％，優(yōu)選0.005~0.05重量％ 聚山梨醇醋 .80. 0..01~1重量％，優(yōu)選0.06~0.3.重量％. 水 余量。
[0023]在本說明書中，類人膠原蛋白是指中國(guó)專利申請(qǐng)公開CN1371919A的權(quán)利要求1所 述的重組膠原蛋白，其具有三鏈、三螺旋結(jié)構(gòu)，其可以采用例如該中國(guó)專利申請(qǐng)公開 CN1371919A中公開的基因工程表達(dá)方法來制備。類人膠原蛋白是由中國(guó)西北大學(xué)的范代娣 教授發(fā)明的，因此又稱作范氏重組膠原蛋白或范氏類人膠原蛋白（Fan's Human-like Collagen，F(xiàn)HLC)〇
[0024] 卡波姆是合成的丙烯酸與烯丙基蔗糖或烯丙基季戊四醇醚的高分子聚合物。對(duì)于 所述卡波姆沒有特殊限制，可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員通常在化妝品或醫(yī)用敷料中使用的那 些卡波姆，例如可以使用廣州康喬漢普藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的卡波姆，CAS Νο:9003-01-4。
[0025] 對(duì)于所述甘油沒有特殊限制，可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員通常在化妝品或醫(yī)用敷料 中使用的那些甘油，例如可以使用湖南爾康制藥股份有限公司生產(chǎn)的甘油，CAS Νο:56-81-5〇
[0026] 對(duì)于所述透明質(zhì)酸鈉沒有特殊限制，可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員通常在化妝品或醫(yī) 用敷料中使用的那些透明質(zhì)酸鈉，例如可以使用華熙福瑞達(dá)生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的透明 質(zhì)酸鈉，產(chǎn)品代碼:HA-T。
[0027] 對(duì)于所述聚山梨醇酯80沒有特殊限制，可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員通常在化妝品或 醫(yī)用敷料中使用的那些聚山梨醇酯80,例如可以使用湖南爾康制藥股份有限公司生產(chǎn)的聚 山梨醇酯80,CAS No:9005-65-6。
[0028] 在將本發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠施用于皮膚時(shí)，使得類人膠原蛋白的透皮吸收速 度加快，類人膠原蛋白30分鐘透皮吸收率顯著提高，其原因可能是由于構(gòu)成了適宜的微環(huán) 境。
[0029] 因此，本發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠特別適合在醫(yī)療/美容領(lǐng)域用于粘膜修復(fù)，所述 粘膜可以是鼻粘膜、肛腸粘膜或婦科部位(陰道)粘膜。在用于醫(yī)療/美容領(lǐng)域的粘膜修復(fù)用 途時(shí)，本發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠本身可以作為敷料使用，也可以再與其他載體或輔料組 合制成其他類型的敷料。
[0030] 對(duì)于本發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠的制備方法沒有特殊限制，通常的制備方法可以 包括：
[0031] 步驟A:準(zhǔn)備A相，所述A相由0.03~3重量％的卡波姆、5~20重量％的甘油、0.001 ~0.1重量％的透明質(zhì)酸鈉以及余量的水組成；
[0032] 步驟B:準(zhǔn)備B相，所述B相是類人膠原蛋白液，其包含使得所述的類人膠原蛋白凝 膠中類人膠原蛋白的含量為〇.〇1~1重量％的類人膠原蛋白，介質(zhì)為水，且所述類人膠原蛋 白與所述水的重量比為1:1~20;
[0033] 步驟C:準(zhǔn)備C相，所述C相是0.01~1重量％的聚山梨醇酯80;以及
[0034] 步驟D:將所述B相加入到所述A相中，并加熱至80~85°C，保溫20~60分鐘，然后降 溫至50~60°C，加入所述C相，攪拌均勻后，冷卻至室溫；
[0035] 以所述類人膠原蛋白凝膠的總重量作為100重量％。
[0036] 這里，類人膠原蛋白液包括類人膠原蛋白的水溶液和類人膠原蛋白的水分散液。
[0037] 這里，對(duì)所述步驟A、B、C的順序沒有特殊限制，可以以任意順序先后進(jìn)行或同時(shí)進(jìn) 行。
[0038] 優(yōu)選地，所述A相是通過用甘油將卡波姆和透明質(zhì)酸分散后加入水中，并攪拌至完 全溶解而制備的。
[0039] 這里，對(duì)于攪拌的方式?jīng)]有特殊限制，只要能夠攪拌均勻即可。
[0040] 本發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠可以置于包裝容器中。對(duì)構(gòu)成包裝容器的材料沒有特 殊限制，其包括但不限于陶瓷、玻璃、金屬、塑料等。包裝容器可以密閉也可以不密閉，但優(yōu) 選密閉。
[0041 ] 實(shí)施例
[0042]以下，通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更具體的說明，但本發(fā)明不受這些實(shí)施例的限制。 [0043]下述實(shí)施例和對(duì)比例中使用的類人膠原蛋白是按中國(guó)專利申請(qǐng)公開CN1371919A 所述方法制備的范氏類人膠原蛋白（由SEQ ID N0:1所示的氨基酸序列組成），確認(rèn)其分子 量為90kDa。
[0044]為了能夠觀察類人膠原蛋白的透皮吸收行為，采用常規(guī)方法用FITC(fluorescein isothiocyanate，異硫氰酸焚光素)對(duì)其進(jìn)行了焚光標(biāo)記。
[0045]如無特別說明，下述內(nèi)容中的"％"是指"重量％"。
[0046] 實(shí)施例1.本發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠的制備
[0047] 成分:卡波姆0.3%，甘油10%，透明質(zhì)酸鈉0.01 %，類人膠原蛋白0.5%，聚山梨醇 酯800.1%，水89.09%。
[0048] 工藝操作：
[0049] ①先將卡波姆和透明質(zhì)酸鈉加入水中，然后緩慢加入甘油后不斷攪拌至完全分散 開。隨后加入類人膠原蛋白水溶液（10重量％)，邊加邊攪拌至完全溶解，加熱至80_85°C，保 溫30min;
[0050] ②將上述混合液降溫至50-60°C，加入聚山梨醇酯80,攪拌均勻后，冷卻至室溫。 [0051] 對(duì)比例1.其他類人膠原蛋白凝膠的制備
[0052] 成分:卡波姆3.5 %，甘油22 %，透明質(zhì)酸鈉0.2 %，類人膠原蛋白0.5 %，聚山梨醇 酯801.5%，水72.3%。
[0053] 工藝操作：
[0054] ①先將卡波姆和透明質(zhì)酸鈉加入水中，然后緩慢加入甘油后不斷攪拌至完全分散 開。隨后加入類人膠原蛋白水溶液（10重量％)，邊加邊攪拌至完全溶解，加熱至80_85°C，保 溫30min;
[0055] ②將上述混合液降溫至50-60°C，加入聚山梨醇酯80,攪拌均勻后，冷卻至室溫。 [0056] 膠原蛋白30分鐘透皮吸收率的測(cè)定
[0057]將已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)飼養(yǎng)環(huán)境的小鼠提前一天用脫毛劑脫毛備皮。實(shí)驗(yàn)前使用沐 浴露或洗面奶對(duì)備皮處進(jìn)行皮膚清潔并用毛巾擦干，將上述實(shí)施例和對(duì)比例的類人膠原蛋 白凝膠，分別用醫(yī)用棉簽以相同量涂抹在相同面積的備皮處，涂抹完成以后正常飼養(yǎng)，于 〇. 5h時(shí)將各組小鼠5只用清水將備皮處皮膚清洗干凈，采用熒光酶標(biāo)儀對(duì)清洗液中的膠原 蛋白進(jìn)行定量分析，其就是未能透皮的膠原蛋白。
[0058]其中，透皮率這樣計(jì)算：透皮率=(涂抹的膠原蛋白總量一未能透皮的膠原蛋白 量)/涂抹的膠原蛋白總量。
[0059]對(duì)于實(shí)施例和對(duì)比例的類人膠原蛋白凝膠，上述透皮率測(cè)試結(jié)果的平均值分別為 42 % 和 23 %。
[0060]還需要說明的是，在可實(shí)施且不明顯違背本發(fā)明的主旨的前提下，在本說明書中 作為某一技術(shù)方案的構(gòu)成部分所描述的任一技術(shù)特征或技術(shù)特征的組合同樣也可以適用 于其它技術(shù)方案;并且，在可實(shí)施且不明顯違背本發(fā)明的主旨的前提下，作為不同技術(shù)方案 的構(gòu)成部分所描述的技術(shù)特征之間也可以以任意方式進(jìn)行組合，來構(gòu)成其它技術(shù)方案。本 發(fā)明也包含在上述情況下通過組合而得到的技術(shù)方案，并且這些技術(shù)方案相當(dāng)于記載在本 說明書中。
[0061]以上通過【具體實(shí)施方式】和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了說明，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理 解的是，這些并非意圖對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行限定，本發(fā)明的范圍應(yīng)由權(quán)利要求書確定。 [0062] 工業(yè)實(shí)用性
[0063]本發(fā)明的類人膠原蛋白凝膠能夠顯著提高類人膠原蛋白的透皮吸收速度。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種類人膠原蛋白凝膠，其包括： 類人膠原蛋白 0.01~丨重量％ 卡波姆 0.03~3重量％ 甘油 5~20重量％ 透明質(zhì)酸鈉 0.00卜0.1重量％ 聚山梨醇酯80 0.01~1重量％ 水 余量。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的類人膠原蛋白凝膠，其用于粘膜修復(fù)。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的類人膠原蛋白凝膠，其中，所述粘膜是鼻粘膜、肛腸粘膜或婦 科部位粘膜。4. 權(quán)利要求1所述的類人膠原蛋白凝膠在制備用于粘膜修復(fù)的醫(yī)療或美容用敷料中的 用途。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其中，所述粘膜是鼻粘膜、肛腸粘膜或婦科部位粘膜。6. -種制備權(quán)利要求1~5中任一項(xiàng)所述的類人膠原蛋白凝膠的方法，該方法包括： 步驟A:準(zhǔn)備A相，所述A相由0.03~3重量％的卡波姆、5~20重量％的甘油、0.001~0.1 重量％的透明質(zhì)酸鈉以及余量的水組成； 步驟B:準(zhǔn)備B相，所述B相是類人膠原蛋白液，其包含使得所述的類人膠原蛋白凝膠中 類人膠原蛋白的含量為0.01~1重量％的類人膠原蛋白，介質(zhì)為水，且所述類人膠原蛋白與 所述水的重量比為1:1~20; 步驟C:準(zhǔn)備C相，所述C相是0.01~1重量％的聚山梨醇酯80;以及 步驟D:將所述B相加入到所述A相中，并加熱至80~85°C，保溫20~60分鐘，然后降溫至 50~60°C，加入所述C相，攪拌均勻后，冷卻至室溫； 以所述類人膠原蛋白凝膠的總重量作為100重量％。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述A相是通過用甘油將卡波姆和透明質(zhì)酸分散 后加入水中，并攪拌至完全溶解而制備的。
【專利摘要】本發(fā)明涉及醫(yī)療/美容器械領(lǐng)域，具體涉及一種類人膠原蛋白粘膜修復(fù)凝膠，其能夠促進(jìn)類人膠原蛋白快速透皮吸收。本發(fā)明的類人膠原蛋白粘膜修復(fù)凝膠可在醫(yī)療/美容領(lǐng)域用于粘膜修復(fù)。本發(fā)明的類人膠原蛋白粘膜修復(fù)凝膠包含類人膠原蛋白、卡波姆、甘油、透明質(zhì)酸鈉、聚山梨醇酯80和水。
【IPC分類】A61L26/00
【公開號(hào)】CN105709267
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510883490
【發(fā)明人】范代娣, 馬曉軒, 嚴(yán)建亞, 王淑英, 常海燕, 王小軍, 楊嬋媛
【申請(qǐng)人】陜西巨子生物技術(shù)有限公司