技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及從中藥白及中提取的有效部位，這種有效部位的制備方法，含有這種有效部位的藥物組合物，以及含有這種有效部位和其藥物組合物在預(yù)防和治療阿爾茨海默氏病(ad)和血管性癡呆(vd)的用途。

背景技術(shù)：
：

隨著社會(huì)的發(fā)展，人類壽命的延長，社會(huì)老齡化現(xiàn)象日益嚴(yán)重，老年性癡呆癥的患病率明顯升高，已成為導(dǎo)致死亡的第四位主要原因。老年性癡呆主要包括阿爾茨海默氏病(alzheimer’sdisease，ad)和血管性癡呆(vasculardementia，vd)。老年性癡呆是一種進(jìn)行性的神經(jīng)退行性疾病，主要表現(xiàn)為漸進(jìn)性記憶障礙、認(rèn)知功能障礙、人格改變及語言障礙等神經(jīng)精神癥狀，嚴(yán)重影響社交、職業(yè)與生活功能。臨床上主要表現(xiàn)為中樞認(rèn)知功能障礙、淀粉樣蛋白沉積及神經(jīng)元纖維纏結(jié)是其腦部主要的病理學(xué)特征。據(jù)統(tǒng)計(jì)我國現(xiàn)有310萬左右老年性癡呆患者，65歲以上人群患病率高達(dá)5.9％。臨床特征是進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙，至疾病后期，患者生活不能自理，不能說話甚至連自己的近親都不認(rèn)識(shí)。這不但給病人自身帶來很大的痛苦，同時(shí)也給病人家庭以及社會(huì)造成極大負(fù)擔(dān)，影響社會(huì)和經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

由于其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確，目前沒有特效方法逆轉(zhuǎn)和阻止病情進(jìn)展。但早期進(jìn)行對癥治療，包括藥物治療改善認(rèn)知功能、改善精神癥狀、心理社會(huì)治療和良好的護(hù)理，對延緩患者生活質(zhì)量減退十分重要。國內(nèi)外批準(zhǔn)用于阿爾茨海默病治療的藥物主要有(1)膽堿酯酶抑制劑：通過抑制膽堿酯酶而抑制乙酰膽堿降解并提高活性，改善神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞功能。常用藥物有多奈哌齊(donepezil)，重酒石酸卡巴拉汀(rivastigmine)，加蘭他敏(galantamine)等。(2)谷氨酸受體拮抗劑：鹽酸美金剛(memantine)是n-甲基-天冬氨酸(nmda)受體激動(dòng)劑。但上述藥物治療老年性癡呆作用單一，治療效果有限，具有一定的副作用。因此，研究與開發(fā)防治老年性癡呆的有效藥物成為當(dāng)今醫(yī)藥領(lǐng)域的重要研究課題。

白及為傳統(tǒng)中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有收斂止血，消腫生肌之功效。其藥用部位來源于蘭科植物白及bletillastriata(thunb.)reichb.f.的干燥塊莖。經(jīng)前期研究發(fā)現(xiàn)中藥白及經(jīng)提取、精制得到的有效部位具有預(yù)防和治療老年性癡呆活性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供白及有效部位及含有白及有效部位的藥物組合物在制備預(yù)防和/或治療阿爾茨海默氏病或血管性癡呆藥物中的應(yīng)用。

為解決本發(fā)明的技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明技術(shù)方案的第一方面白及有效部位在制備預(yù)防和/或治療阿爾茨海默氏病和血管性癡呆藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的白及有效部位的制備方法包括下面步驟：

將藥材原料白及粉碎，然后用溶劑滲漉、浸提或加熱回流提取，提取液常壓或減壓濃縮得濃縮液或浸膏，干燥，得白及有效部位；或者所述的濃縮液或浸膏還可經(jīng)精制、純化得到白及有效部位。

其中，優(yōu)選的白及有效部位的制備方法如下：

1.提取方法：將原料藥材經(jīng)干燥后，適當(dāng)粉碎，然后用溶劑提取，提取的溶劑包括水、醇類或水與醇類的混合溶劑。其中醇類溶劑優(yōu)選：甲醇、乙醇、丙醇或丁醇中的一種或幾種的混合溶劑。水與醇的混合物溶液；提取方法包括：滲漉、浸漬或加熱回流提??；提取時(shí)溶劑用量為藥材重量的5-20倍，提取可以在動(dòng)態(tài)或靜態(tài)下進(jìn)行，為提高提取效率還可以選用超聲波提?。惶崛〉臏囟瓤梢詮氖覝氐饺軇┗亓鞯臏囟确秶鷥?nèi)；提取可以連續(xù)進(jìn)行或間歇進(jìn)行，提取次數(shù)1-4次。提取液可以選用常壓或減壓濃縮得浸膏或無醇的濃縮液。

2.精制方法：

(1)將上述濃縮液，過濾，稀釋后經(jīng)苯乙烯型大孔吸附樹脂(如d101，hpd-100，hp-20等)精制，用水和5-15％乙醇洗脫除去雜質(zhì)，用20-50％乙醇洗脫，減壓蒸干，得白及有效部位。

(2)將上述濃縮浸膏經(jīng)硅膠或硅藻土拌樣，正相硅膠層析精制，石油醚、氯仿、乙醚等低極性有機(jī)溶劑洗脫，再用氯仿-甲醇(5:1)洗脫，減壓蒸干，得白及有效 部位。

(3)將上述濃縮浸膏經(jīng)硅膠或硅藻土拌樣，反相硅膠層析精制，水、醇和水的混合溶液(如10％，20％乙醇)等極性溶劑洗脫，再用50％醇洗脫，減壓蒸干，得白及有效部位。

(4)將上述濃縮得浸膏或無醇的濃縮液，稀釋后，分別用石油醚、乙酸乙酯萃取，再用正丁醇萃取，減壓蒸干，得白及有效部位。

(5)將上述濃縮浸膏用水或醇溶解，葡聚糖凝膠層析精制(如sephadexlh-20)，水、醇和水的混合溶劑(如水，30％乙醇)等溶劑洗脫，減壓蒸干，得白及有效部位。

(6)從環(huán)境保護(hù)角度考慮，優(yōu)選對環(huán)境較友好的水和醇系統(tǒng)溶劑的精制方法(1)、(3)和(5)制備白及有效部位。

本發(fā)明技術(shù)方案的第二方面提供一種藥物組合物在制備預(yù)防和/或治療阿爾茨海默氏病和血管性癡呆藥物中的應(yīng)用，其中，所述的白及有效部位的制備方法與第一方面相同。

該藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備?？赏ㄟ^將白及有效部位與一種或多種藥學(xué)上可以接受的固體或液體賦型劑和/或輔料結(jié)合，制成適用于人使用的任何劑型。白及有效部位在其藥物組合物中的含量通常為1-95％(重量比)。

本發(fā)明的白及有效部位或組合物可以單獨(dú)服用，或與其它治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。

有益技術(shù)效果：

該有效部位經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)證實(shí)，能夠明顯改善東莨菪堿致小鼠膽堿能損傷擬癡呆動(dòng)物模型的學(xué)習(xí)記憶障礙；提高側(cè)腦室注射aβ25-35致阿爾茨海默氏病(ad)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力；改善永久性結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈致腦供血不足的擬血管性癡呆(vd)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙。該有效部位具有預(yù)防和治療阿爾茨海默氏病和血管性癡呆的用途。

附圖說明：

圖1白及有效部位(bj)對血管性癡呆(vd)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的作用(逃避潛伏期-時(shí)間曲線)。

圖2白及有效部位(bj)對血管性癡呆(vd)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的作用(水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)第一次穿越目標(biāo)區(qū)域的潛伏期)

圖3白及有效部位(bj)對血管性癡呆(vd)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的作用(水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)穿越次數(shù))

圖4白及有效部位提高側(cè)腦室注射aβ25-35致阿爾茨海默氏病(ad)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力(水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)第一次穿越目標(biāo)區(qū)域的潛伏期)。

具體實(shí)施方式

有效部位的制備

實(shí)施例1提取方法

藥材100g，加水適當(dāng)浸泡后，滲漉提取，用量3升，合并滲漉液，經(jīng)減壓回收水，濃縮，過濾，得提取液1，干燥，得樣品1(a)。

藥材100g，加入15倍量75％乙醇浸泡后，浸漬法提取三次，每次1.0小時(shí)，合并提取液，提取液減壓回收乙醇至無醇味，濃縮，過濾，得提取液2，干燥，得樣品2(b)。

藥材100g，加入12倍量95％乙醇浸泡后，加熱回流提取三次，每次1.0小時(shí)。合并提取液，提取液減壓回收乙醇至無醇味，濃縮，過濾，得提取液3，干燥，得樣品3(c)。

實(shí)施例2精制方法1-反相硅膠層析

實(shí)施例1中提取液2，經(jīng)減壓回收溶劑并濃縮至流浸膏，將上述濃縮浸膏經(jīng)反相硅膠或硅藻土拌樣(樣品與反相硅膠比例為1：2.5)，反相硅膠層析(樣品與反相硅膠比例為1：80)精制，經(jīng)水、10％乙醇和30％乙醇溶劑洗脫，50％乙醇洗脫，減壓回收溶劑，過濾，干燥，得白及有效部位1(t-1)。

實(shí)施例3精制方法2-溶劑萃取法

實(shí)施例1中提取液2，經(jīng)減壓回收溶劑，過濾，濾液用乙酸乙酯(體積比1：1)萃取，再用正丁醇(體積比1：1)萃取5次，過濾，干燥，得白及有效部位2(t-2)。

實(shí)施例4精制方法3-正相硅膠層析

實(shí)施例1中提取液3，經(jīng)減壓回收乙醇并濃縮至流浸膏，經(jīng)硅膠或硅藻土拌樣(樣品與硅膠或硅藻土比例為1：2)，正相硅膠層析(樣品與硅膠比例為1：100)精制，氯仿-甲醇系統(tǒng)洗脫，氯仿，氯仿-甲醇(10:1)，氯仿-甲醇(5:1)梯度洗脫，收集氯仿-甲醇(5:1)洗脫部位減壓回收溶劑，過濾，干燥，得白及有效部位3(t-3)。

實(shí)施例5精制方法4-大孔樹脂層析

實(shí)施例1中提取液1，2和3，過濾，濾液分別通過hp20大孔吸附樹脂，先用水和15％乙醇依次洗脫后，再用50％乙醇洗脫，減壓回收50％乙醇洗脫液，過濾，干燥，分別得到白及有效部位4(t-4)、5(t-5)和6(t-6)。

實(shí)施例6精制方法5-葡聚糖凝膠層析

實(shí)施例5中白及有效部位4(t-4)和5(t-5)用水溶解后，微孔濾膜過濾，分別用葡聚糖凝膠sephadexlh-20柱層析分離，水洗脫。正相硅膠薄層檢測，展開劑為正丁醇：乙酸：水，體積比為4：1：5；10％硫酸-乙醇溶液加熱顯色，合并薄層中具有顯色斑點(diǎn)的洗脫部分，濃縮，過濾，干燥，分別得白及有效部位7(t-7)和8(t-8，也命名為bj)。

治療老年性癡呆藥理試驗(yàn)

實(shí)施例1白及有效部位提高東莨菪堿致膽堿能損傷擬癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力試驗(yàn)?zāi)康模豪夏晷园V呆是基底前腦膽堿能神經(jīng)元的退行性病變，出現(xiàn)膽堿能功能缺損，造成乙酰膽堿分泌不足。東莨菪堿是m膽堿受體阻斷劑，能抑制乙酰膽堿對m受體的激動(dòng)作用，因此可以模仿乙酰膽堿分泌不足所造成的癡呆結(jié)果。東莨菪堿致膽堿能損傷擬癡呆模型是研究老年性癡呆的經(jīng)典動(dòng)物模型。

試驗(yàn)方法：跳臺(tái)法，小鼠隨機(jī)分組，每組10只或15只，分別為正常對照組，東莨菪堿模型組，陽性對照藥多奈哌齊組(5mg/kg)，多個(gè)白及提取物組。訓(xùn)練前，給藥組小鼠分別灌胃給予受試物，陽性對照組小鼠灌胃給予陽性藥多奈哌齊，正常對照組和模型組小鼠灌胃給予等量的生理鹽水。30min后，給藥組、多奈哌齊組及模型組小鼠腹腔注射東莨菪堿(1mg/kg)，正常對照組小鼠腹腔注射等量的生理鹽水。30min后將小鼠放入反應(yīng)箱中適應(yīng)環(huán)境3min，然后通以36v交流電，其正常反應(yīng)是跳上平臺(tái)以躲避傷害性刺激。如此訓(xùn)練5min。24h后將小鼠置于平臺(tái)上，記錄5min內(nèi)小鼠第一次跳下平臺(tái)的潛伏期和跳下次數(shù)。

試驗(yàn)結(jié)果：

表1白及提取物a、b和c對東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響(小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果)

平均值(mean)±標(biāo)準(zhǔn)誤(se)；^***p<0.001，與對照組比較；^#p<0.05，^##p<0.01，與模型組比較。

表1結(jié)果表明，腹腔注射東莨菪堿造成小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙，以跳臺(tái)法檢測其學(xué)習(xí)記憶能力。對照組小鼠跳下潛伏期為300秒，模型組小鼠跳下潛伏期為(142±45)秒(p<0.001)，潛伏期縮短率為53％，表明小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力下降。灌胃給予3個(gè)白及提取物(5mg/kg)均可延長小鼠跳臺(tái)潛伏期，其中白及提取物a、b、c的改善率分別為47％、39％和30％，雖與模型組相比無顯著性差異，但可延長潛伏期。在本試驗(yàn)條件下，多奈哌齊組(5mg/kg)小鼠潛伏期延長至(257±19)秒，改善率達(dá)到73％(p<0.05)。正常對照組小鼠錯(cuò)誤次數(shù)為0，模型組小鼠錯(cuò)誤次數(shù)為1.1±0.3，與對照組比較小鼠錯(cuò)誤次數(shù)顯著增加。除c外，各受試物組錯(cuò)誤次數(shù)顯著下降，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。對照組小鼠跳下動(dòng)物數(shù)為0，模型組小鼠跳下動(dòng)物數(shù)為7，錯(cuò)誤率為70％，經(jīng)chi檢驗(yàn)p<0.001。各受試物組跳下動(dòng)物數(shù)均減少，說明白及提取物具有潛在的改善東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的能力。

表2白及提取物t1-t8對東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響(小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果)

平均值(mean)±標(biāo)準(zhǔn)誤(se)；^***p<0.001，與對照組比較；^#p<0.05，^##p<0.01，^###p<0.001，與模型組比較。

表2結(jié)果表明，模型組小鼠潛伏期縮短，與對照組相比較有顯著性差異，模型建立成功。在此基礎(chǔ)上，陽性藥多奈哌齊逆轉(zhuǎn)潛伏期縮短的現(xiàn)象，與模型組相比潛伏期有明顯增加的趨勢，改善率達(dá)到49％。樣品t-5，t-7，t-8在劑量為5mg/kg時(shí)對東莨菪堿引起的小鼠記憶障礙有顯著的改善作用，改善率分別為70％、66％和77％，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。樣品t-1，t-2，t-3，t-4，t-6在劑量為5mg/kg時(shí)有延長潛伏期的趨勢，但是沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與對照組相比，模型組小鼠跳下次數(shù)明顯增多。而灌胃給予樣品之后，除了樣品t-2沒有能夠減少小鼠跳下次數(shù)外，其余樣品在相應(yīng)劑量下對小鼠跳下安全島的次數(shù)明顯減少，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

在本次實(shí)驗(yàn)中，樣品t-5，t-7，t-8不僅可以明顯縮短小鼠跳下安全島的潛伏期，還能夠有效的減少小鼠跳下安全島的次數(shù)。樣品t-2不能夠縮短潛伏期，也不能夠有效減少小鼠跳下次數(shù)。樣品t-1，t-3，t-4，t-6雖然不能夠明顯縮短潛伏期，但能夠有效減少小鼠跳下次數(shù)。因此樣品t-1，t-3，t-4，t-6在本模型中不能夠有效改善小鼠學(xué)習(xí)記憶能力，但是具有改善學(xué)習(xí)記憶的能力。而樣品t-5，t-7，t-8在此模型中改善學(xué)習(xí)記憶能力突出。

表3白及有效部位bj對東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響(小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果)

平均值(mean)±標(biāo)準(zhǔn)誤(se)；^***p<0.001，與對照組比較；^#p<0.05，^##p<0.01，^###p<0.001，與模型組比較。

表3結(jié)果表明，模型組小鼠跳臺(tái)潛伏期明顯縮短，與對照組相比有顯著性差異。陽性藥多奈哌齊可以延長模型小鼠跳下平臺(tái)的潛伏期，與模型組相比有顯著性差異(p<0.001)，改善率達(dá)到63％。白及有效部位bj在5，10和20mg/kg劑量 下均可以延長小鼠跳下平臺(tái)的潛伏期，改善率分別達(dá)到47％、97％和71％；在劑量為10和20mg/kg時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001，p<0.01)。

模型組與對照組相比較，小鼠跳下平臺(tái)的次數(shù)明顯增多(p<0.001)。白及有效部位bj在5、10和20mg/kg劑量下能夠明顯減少小鼠跳下平臺(tái)的次數(shù)，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明白及有效部位bj具有改善東莨菪堿引起的小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的作用。

實(shí)施例2白及有效部位提高永久性雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎致血管癡呆大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力

試驗(yàn)?zāi)康模河捎诂F(xiàn)代研究認(rèn)為，老年性癡呆的形成與慢性腦缺血有一定的關(guān)系，因此，慢性腦缺血致癡呆模型是進(jìn)行癡呆藥物有效性篩選和評價(jià)重要?jiǎng)游锬Ｐ汀?/p>

試驗(yàn)方法：大鼠按體重均勻分成5組，即假手術(shù)組，2vo模型組，2vo+陽性藥鹽酸美金剛(memantine)組,2vo+白及有效部位bj兩個(gè)劑量組。將白及有效部位bj(實(shí)施例6中有效部位t-8)及鹽酸美金剛片用生理鹽水配制成，每日灌胃給藥一次，假手術(shù)組與模型組每日灌胃給予生理鹽水，連續(xù)給藥60天后進(jìn)行morris水迷宮試驗(yàn)。

水迷宮實(shí)驗(yàn)裝置上方裝有攝像系統(tǒng)軟件的直徑120cm的圓形水池，周圍分布幾個(gè)顯著的迷宮外標(biāo)志物，并在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中保持原位置不變。將平臺(tái)沒于水面下1.5cm，放置于第一象限中間位置。實(shí)驗(yàn)前穩(wěn)定水溫在23±1℃。實(shí)驗(yàn)分為定位航行實(shí)驗(yàn)與空間探索實(shí)驗(yàn)。定位航行實(shí)驗(yàn)中，給藥后1h，將大鼠頭面向池壁輕輕放入水中，所有大鼠每天保持同一個(gè)實(shí)驗(yàn)順序。每只大鼠分別從兩個(gè)相隔90°的位置入水，訓(xùn)練時(shí)間最長持續(xù)60s，在平臺(tái)上停留10s，記錄每次訓(xùn)練時(shí)大鼠發(fā)現(xiàn)平臺(tái)的潛伏期。每天訓(xùn)練2次，連續(xù)訓(xùn)練4天?？臻g探索實(shí)驗(yàn)于定位航行實(shí)驗(yàn)24h后開始，第5天將水面下平臺(tái)拿出。將大鼠面壁于距離原平臺(tái)位置最遠(yuǎn)處輕輕放入水中。記錄其第一次穿過目標(biāo)區(qū)域的時(shí)間及其穿越次數(shù)。

大鼠morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、定位航行實(shí)驗(yàn)

表4白及有效部位(bj)對血管癡呆大鼠morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)的影響

平均值(mean)±標(biāo)準(zhǔn)誤(se)；^***p<0.001與假手術(shù)組比較；^#p<0.05，^##p<0.01，^###p<0.001與模型組比較

水迷宮實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，每組大鼠在第一天訓(xùn)練時(shí)表現(xiàn)相似，隨著訓(xùn)練天數(shù)的增加，每組大鼠找到平臺(tái)的潛伏期均逐漸縮短。自訓(xùn)練第三天開始，與假手術(shù)組大鼠相比，模型組大鼠找到平臺(tái)的潛伏期明顯延長，說明永久性雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎后60天可以造成大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙。陽性藥美金剛在3mg/kg劑量下有明顯逆轉(zhuǎn)慢性腦缺血造成的空間學(xué)習(xí)記憶障礙的作用(p<0.01)。樣品bj在5和10mg/kg劑量下對血管性癡呆引起的空間學(xué)習(xí)記憶障礙均具有顯著地改善作用。

訓(xùn)練天數(shù)與大鼠找到平臺(tái)的潛伏期形成的曲線下面積(auc)可以間接反映出樣品bj對血管性癡呆大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的作用(見圖1)。與假手術(shù)大鼠相比，血管性癡呆大鼠auc增加68％，說明血管性癡呆大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力明顯降低；陽性藥、bj(5和10mg/kg)組曲線下面積明顯減小，改變率分別達(dá)到67％、45％和49％。提示樣品bj對血管性癡呆大鼠空間記憶能力有改善作用。

2探索實(shí)驗(yàn)：

表5白及有效部位bj對血管性癡呆大鼠morris水迷宮探索實(shí)驗(yàn)的影響

mean±se，^*p<0.05與假手術(shù)組比較；^#p<0.05，^##p<0.01，^###p<0.001與模型組比較

與假手術(shù)相比較，血管性癡呆大鼠在探索實(shí)驗(yàn)中找到目標(biāo)區(qū)域的時(shí)間明顯延長了150％(見圖2)。而灌胃給予陽性藥、bj5和10mg/kg可以有效逆轉(zhuǎn)這種現(xiàn)象，有效縮短大鼠找到目標(biāo)區(qū)域的時(shí)間，改善率分別為83％、67％和83％。在穿越目標(biāo)區(qū)域次數(shù)方面，與假手術(shù)大鼠相比，血管性癡呆大鼠穿越目標(biāo)區(qū)域的次數(shù)減少了50％(p<0.01)；而灌胃給予陽性藥、bj5和10mg/kg能夠有效增加血管性癡呆大鼠穿越目標(biāo)區(qū)域次數(shù)，改善率分別達(dá)到139％、42％和74％(見圖3)。提示白及有效部位bj對血管性癡呆大鼠空間記憶能力有改善作用。

實(shí)施例3白及有效部位bj提高側(cè)腦室注射aβ25-35致阿爾茨海默氏病大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力

試驗(yàn)?zāi)康模耗X內(nèi)特定區(qū)域的老年斑是阿爾茨海默氏病的重要病理學(xué)改變之一，β-淀粉樣蛋白(aβ)是老年斑的主要成分，而aβ腦內(nèi)沉積在阿爾茨海默氏病的發(fā)病中起著重要的作用。因此，腦室內(nèi)注射聚集態(tài)的aβ是模擬阿爾茨海默氏病的常用方法。

試驗(yàn)方法：大鼠隨機(jī)分成4組，即假手術(shù)組，aβ25-35模型組，模型+陽性藥多奈哌齊10mg/kg/d)組,模型+白及有效部位bj[實(shí)施例6中有效部位t-8(20mg/kg/d)]組。將白及有效部位bj、多奈哌齊以生理鹽水配制，每日灌胃給藥二次，間隔12h，假手術(shù)組與aβ25-35模型組每日灌胃給予等量生理鹽水，連續(xù)給藥9天后進(jìn)行morris水迷宮試驗(yàn)。

大鼠morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果

與假手術(shù)組相比較，aβ25-35模型組大鼠在探索實(shí)驗(yàn)中找到目標(biāo)區(qū)域的時(shí)間明顯延長了136％。而灌胃給予陽性藥多奈哌齊、受試物白及有效部位bj(20mg/kg/d)可以有效逆轉(zhuǎn)這種現(xiàn)象，有效縮短大鼠找到目標(biāo)區(qū)域的時(shí)間，改善率均為93％(見圖4)。提示白及有效部位bj對側(cè)腦室注射aβ25-35致阿爾茨海默氏病大鼠的空間記憶能力有改善作用。